具有肿瘤诱导分化作用的类维甲酸衍生物及其药物组合物与用途的制作方法

专利名称：：具有肿瘤诱导分化作用的类维甲酸衍生物及其药物组合物与用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种新的类维甲酸衍生物及其药学上可接受的盐，本发明还涉及所述维甲酸衍生物及其药学上可接受的盐的制备方法和用途，以及由其制成的药物组合物，属于化学和医药领域。
背景技术：
：癌症严重威胁着人类的生命。据世界卫生组织统计，全世界每年死于癌症的患者约500万，因此癌症的预防与治疗任务十分艰巨。药物治疗是癌症治疗的三大疗法之一。传统化学药物治疗恶性肿瘤主要以直接或间接杀伤肿瘤细胞为目的，对正常细胞也有一定程度的杀伤力，毒副作用明显，加之肿瘤细胞耐药性的存在，大大限制了该类细胞毒药物的疗效和应用。自从1971年Friend等发现小鼠红白血病细胞可以贝二甲亚砜诱导分化合成血红蛋白以来，人们开始逐渐认识到恶性细胞可以应用分化诱导剂使之"逆转"，向正常细胞回归，引起学者们的兴趣和重视。随着肿瘤发病学的深入研究，诱导分化疗法成为肿瘤治疗学的新突破。诱导分化(inductionofdifferentiation)是指恶性肿瘤细胞在体内外分化诱导剂作用下，向正常或接近正常细胞方向分化逆转的现象。其着重点不在于直接杀灭肿瘤而是将肿瘤细胞"改邪归正"，最终治愈肿瘤。有效的分化诱导剂的发现将改变以往杀伤肿瘤细胞为主的治疗模式，而形成以控制、调整其生物学行为为主的新疗法，最终实现肿瘤的治愈。尤其是近20多年来，随着肿瘤分子生物学及其技术的长足发展，科学家在诱导恶性肿瘤细胞分化的药物研究领域取得了丰硕的成果，目前已发现具有分化作用的化合物达百种以上，其中相当一部分已进入I期、II期临床试验，少数如维甲酸已作为分化诱导剂用于临床肿瘤治疗和预防，显示出一定疗效，因此分化诱导剂的研究和应用为肿瘤药物及其药理学研究开辟了一条广阔的途径。维甲酸及其类似物(retinoids)是一类维生素A衍生物,包括维甲酸、维胺酸、维胺酯和天然维生素A等,约有4000多种。维甲酸类化合物广泛应用于治疗多种皮肤病如角化性皮肤病、光老化皮肤病等,但其最引人注目的作用是预防及治疗一些恶性肿瘤,包括乳腺癌、皮肤癌、宫颈癌、白血病等。科研人员对该类化合物中的全反式维甲酸和9-顺式维甲酸进行了广泛、深入的研究。它们他们通过参与调节细胞的增殖和分化，具有抗角化、抗增生、促进表皮细胞正常分化的作用，并能通过抑制鸟氨酸脱氢酶的活性干扰肿瘤的发生，可直接抑制皮脂合成和皮脂腺细胞的增殖，以减少皮脂分泌。由蕾，严煌林，维甲酸类化合物及其受体与银屑病研究进展；医学综述2007，13(06)，466—467。自1988年，上海维甲酸协作组首先使用全反式维甲酸(all-tmnsretinoicacid，ATRA)诱导分化治疗人急性早幼粒细胞白血病，获得显著疗效，五年临床总结显示完全缓解率为86%。目前,全反式维甲酸已经用于急性早幼粒细胞白血病、口腔白斑等恶性肿瘤的治疗，已成为治疗白血病的首选药物之一E雨sTR，KayeSB.BrJCancer，1999,80(l-2):l隱9。9-顺式维甲酸的疗效和全反式维甲酸相当而副作用更小,很有希望成为临床药物.常见的维甲酸类化合物结构式分别如下<image>imageseeoriginaldocumentpage9</image>Femretinide芬维A胺但是维甲酸随着其应用日益广泛,ATRA引起的不良反应时有发生,主要不良反应如下l皮肤、粘膜损害；2消化系统的不良反应如恶心、呕吐、纳差、上腹饱胀等消化道反应发生率较高；3神经系统的不良反应，在ATRA治疗过程中,患者常出现头痛、视神经乳头水肿、脑脊液压力升高；4骨骼、关节、肌肉不良反应，ATRA引起的骨骼、关节、肌肉疼痛较为常见；5白细胞计数增多，国外报道，ATRA治疗APL过程中白细胞增多症发生率高达30%左右；6维甲酸综合征(RA-RS)，RA-RS是ATRA治疗APL的主要危险,主要表现为发热及呼吸困难,其它症状和体征包括体重增加、肢体远端水肿、胸水或心包积液以及发作性低血压，胸片见肺间质浸润，此外，ATRA还可引起腕管综合征、严重的心脏损害、高血脂和高血胺血症等不良反应赵环宇；全反式维甲酸的不良反应；中国药学杂志199833(7):440-441，大大限制了药物的应用，同时快速发展的耐药与高复发率仍是影响长期疗效的两大障碍，随着临床进一步应用，发现其可形成耐药性并使复发患者难以再次获得缓解。因此需要改进药物的疗效和拓宽药物的临床应用范围，同时降低药物的不良反应。因此国内外对维甲酸类的药物的结构展开大量的结构修饰工作。徐世平等为改善维甲类化合物的性能设计合成了一系列维甲酸衍生物(药学学报(1981)，16(9),678-86)，其中维胺酯(RI)和维胺酸(RII)在抗致癌等方面效果良好，而且毒性较低，适合癌化学预防，治疗癌前病变。杜从之等比较了维胺酯(RI)和维胺酸(RII)及维甲酸，抗癣灵和保肤灵等维甲酸类化合物的毒性，发现维胺酯(RI)和维胺酸(RII)毒性较低，表明其适合于治疗癌前病变的应用(药学学报17:333—337(1982))。申请号为97116602.1的发明专利公开了一种维甲酰香豆素类化合物及其制备方法和含该化合物的药物组合物。国外也有大量有关维甲类研究方面的报道，如异维甲酸，阿维A酸作为皮肤用药已经上市。对维甲酸的末端极性基团结构改造主要集中在末端羧基的氧酰化，氮酰化。如KyokoNakagawa-Goto等将维甲酸同紫杉烷縮合产物用于增强药物疗效(KyokoNakagawa-Goto，KojiYamada,etal，Antitumoragents.258.Synthesesandevaluationofdietaryantioxidant~taxoidconjugatesasnovelcytotoxicagents,Bioorganic&MedicinalChemistryLetters17(2007)5204~5209).GholamH.Hakimelahi等利用能和肿瘤细胞表面抗原特异性结合的单克隆抗体作为载体,将(3—内酰胺酶转运到肿瘤细胞后,服用维甲酸前药(将全反式维甲酸连接到头孢菌素的C-3位上获得的化合物)，使其在肿瘤细胞被(3-内酰胺酶催化,释放C-3位的药效基团,从而达到选择性杀灭肿瘤细胞的作用。体外试验发现,化合物(5)和P-内酰胺酶合用,抑制乳腺癌肿瘤细胞MCF7增殖能力明显强于化合物(5)(HakimelahiGH，LyTW,YuSF,etal.Designandsynthesisofacephalosporin-retinoicacidprodrugactivatedbyamonoclonalantibody-(3-lactamaseconjugate[J].BioorgMedChem,2001,9(8):2139-2147)。StefanoManfredini等将维甲酸与Ara-A,Ara-C，3(2H)-Furanone，共价縮合，其中部分化合物具有很强的细胞生长抑制作用(StefanoManfredini,DanieleSimoni,RobertoFerroni,etal，RetinoicAcidConjugatesasPotentialAntitumorAgents:SynthesisandBiologicalActivityofConjugateswithAra-A,Ara-C,3(2H)-Fura謹e，andAnilineMustardMoieties,J.Med.Chem.1997，40,3851-38)，但是这些结构改造均是同相关的药物进行拼合，同时发挥药物作用，由于是两种药物拼合，存在在分子量大，稳定性，以及与药物作用靶点不明确等缺陷，其作为药物应用可能不大。因此应选用小分子化合物作为末端羧基酰化的底物。美国专利US4190594公开了系列维甲酸的酯化和酰胺化，用于防治紫外线照射引起的损伤，其中的化合物芬维A胺(Fenretiiiide，4-HPR)，被用于多种皮肤病的治疗，同时目前正在作为用于预防和治疗多个肿瘤的药物进行评价(Soo-JongUM,aYoun-JaKWON，etal，SynthesisandBiologicalActivityofNovelRetinamideandRetinoateDerivatives,Chem.Pharm.Bull.52(5)501-506(2004)。芬维A胺(Fenretinide,4-HPR)是RAR-卩，RAR-Y的选择性激动剂，近年研究发现芬维A胺与传统的维甲酸类化合物不同，其诱导分化作用较弱，而促进肿瘤细胞凋亡较强，且毒性远较其它维甲酸类化合物低，可长期使用，且耐药性发生率低，并可单独或合用其它化疗药物抗肿瘤。近年来国外的一11些研究显示芬维A胺对多种实体瘤均有直接的抑制作用，并已进入了临床试验，但其抗肿瘤作用机制尚未完全明了。目前研究认为芬维A胺可能机制包括:抑制肿瘤细胞增殖、促进分化、引发凋亡，并影响其他信号传导途径，芬维A胺诱导凋亡的生化途径十分复杂，已报道同时有维甲酸RA受体依赖型和维甲酸RA受体非依赖型，后者包括促进活性氧簇(ROS)及神经酞胺的产生等。此外，还有抑制血管生成、抑制HIV、抗风湿、治疗银屑病等作用。因此芬维A胺成为目前研究的热点之一。但是4-HPR在临床应用时，其主要的缺点生物利用度低，研究表明，当病人服用剂量为200mg/日的时，其血浆血药浓度低于lpM，而体内需要产生细胞调亡的有效浓度需要lOlpM，因此需要加大给药剂量或者合成具有更好临床效果的衍生物。在最近合成的一些衍生物中包括对苯胺结构进行羟基化，羧基化，或者甲氧基取代等等，但是这些衍生物中，部分化合物显示出较好的生物活性。(CliffordJ.L.,SabichiA.L.,ZouC.,YangX.,SteeleV.E.,KelloffG.J.，LotanR.,LippmanS.M.，CancerEpidemiol.BiomarkersPrev.，10,391—395(2001);SunS.Y.,YueP.,KelloffG.J.，SteeleV.E.，LippmanS.M.，HongW.K.,LotanR.，CancerEpidemiol.BiomarkersPrev.,10，595~601(2001).Soo-JongUM等对4-HPR的结构进行了修饰,得到的一系列化合物均具有较高的细胞毒性和更好的水溶性。主要方法是将具有抗癌活性的丁酸钠通过对氨基酚连接到维甲酸上，生成维甲酸氨基苯酚丁酸酯(4-BPRE)。分子药理实验结果表明，该化合物兼具丁酸钠和维甲酸双重抗肿瘤活性(UmSJ,KwonYJ,HanHS,etal.Synthesisandbiologicalactivityofnovelretinamideandretinoatederivatives[J].ChemPharmBull,2004,52(5):501-506;UmSJ,HanHS,KwonYJ，etal.Invitroantitumorpotentialof4-BPRE,abutyrylaminophenylesterofretinoicacid:roleofthebutyrylgroup[J].OncolRep，2004，11(3):719-726)。
发明内容本发明的目的在于提供一种结构新颖的类维甲酸衍生物。本发明技术方案如下本发明所述化合物，具有下式(I)所示的类维甲酸衍生物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>(I)或者式(I)所示的类维甲酸衍生物的异构体、对映体、消旋体、非对映体混合物、外消旋混合物、溶剂化物、多晶型物或药学上可接受的盐；其中，Ri代表式(n)或者式(in)所示的结构，R2代表式(iv)所示的结构；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage13</formula>表示连接位置；其中R3R7相互间相同或者不同，各自独立地选自氢、硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级烷氨基、取代或未取代的低级垸巯基、取代或未取代的低级垸磺基、取代或未取代的低级烷酰胺基、取代或未取代的低级脂烯氧基、取代或未取代的低级脂炔氧基、取代或未取代的脂环垸基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的杂芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的杂芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的杂芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的杂芳氨基、取代或未取代的芳巯基、取代或未取代的杂芳巯基；IVRu'相互间相同或者不同，各自独立地选自氢、硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级垸氨基、取代或未取代的低级烷巯基、取代或未取代的低级烷磺基、取代或未取代的低级烷酰胺基、取代或未取代的低级脂烯氧基、取代或未取代的低级脂炔氧基、取代或未取代的脂环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的杂芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的杂芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的杂芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的杂芳氨基、取代或未取代的芳巯基、取代或未取代的杂芳巯基；R9R13相互间相同或者不同，各自独立地选自卤代烷基、卤代烷氧基、氢、硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级烷氨基、取代或未取代的低级烷巯基、取代或未取代的低级垸磺基、取代或未取代的低级烷酰胺基、取代或未取代的低级脂烯氧基、取代或未取代的低级脂炔氧基、取代或未取代的脂环垸基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的杂芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的杂芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的杂芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的杂芳氨基、取代或未取代的芳巯基、取代或未取代的杂芳巯基；Z为O、S或者NR14，其中R14选自氢、取代或者未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的脂环垸基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基；条件是R9R13中至少之一为卤代垸基或者卤代烷氧基。作为优选，上述所述的类维甲酸衍生物，其中，R3和R7相同或者不同，分别是取代或未取代的低级烷基，R4和R6相同或者不同，分别选自氢、取代或未取代的低级垸基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级脂烯氧基、硝基、氨基、低级烷基取代氨基、取代或未取代的氮杂环基，R5为取代或未取代的低级烷氧基，所述的低级是指含15个碳原子，取代时取代基选自硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。最优选地，上述所述的类维甲酸衍生物，其中，R3，R7，R4是甲基时，R5是甲氧基，R6是氢。作为优选，上述所述的类维甲酸衍生物，其中，R/和R/相同或者不同，分别是取代或未取代的低级垸基，R/R,。'相同或者不同，分别选自氢、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级垸氧基、取代或未取代的低级脂烯氧基、硝基、氨基、低级烷基取代氨基、取代或未取代的氮杂环基，R8'为氢、取代或未取代的低级垸基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级垸氧基，所述的低级是指含15个碳原子，取代时取代基选自硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。其中，最优选上述所述的类维甲酸衍生物，其中R/、R/均是甲基，R5'R,。'均是氢，Ru'为甲基。作为优选，上述所述的类维甲酸衍生物，其中，R9、RIO、Rll、R12、R13相同或者不同，分别独立地选自三氟甲基、三氟甲氧基、氢、卤素、羟基、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级脂烯氧基、羧酸、羧酸酯、酰胺、腈基、硝基、氨基、取代或未取代的低级烷基取代氨基、氮杂环基，条件是R9、RIO、Rll、R12、R13中之一为三氟甲基或者三氟甲氧基。其中，所述术语"卤素"，包括氟、氯、溴和碘。其中，所述的"低级"，是指含18个碳原子，优选含15个碳原子。其中，所述的基团可以含取代基，也可以不含取代基。取代时，取代基没有特别限制，可以包含l个或者更多个取代基，优选取代基选自硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基等。本领域的技术人员将会理解，式(I)化合物可能含有手性中心。当式(I)化合物中含有手性中心时，它可以存在对映异构体形式。式(I)所示结构的纯旋光异构体、对映体混合物、非对映体混合物、外消旋混合物及其上述化合物药学上可接受的盐、溶剂合物等，都属于本发明的范围。本发明化合物还可以存在各种多晶型，例如无定形形式和结晶性型。本发明化合物的所有晶型都包括在本发明的范围内。作为优选地，本发明涉及如下所述的类维甲酸衍生物，其为(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2，4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6，6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羟基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羟基-2-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羟基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；或者(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羟基-2-三氟甲基苯基)-酰胺。本发明所述的式(I)类维甲酸衍生物，可以以维甲酸或依曲替酸(Etretin)为原料，通过下列步骤制备A、维甲酸或依曲替酸与三氯化磷反应后，然后与相应的芳香胺衍生物或苯酚衍生物反应制得；B、维甲酸或阿维A酸与相应的芳香胺衍生物或苯酚衍生物，在N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)，4-二甲氨基吡啶(DMAP)条件下反应制得相应衍生物；C、维甲酸或阿维A酸与相应的芳香胺衍生物或苯酚衍生物，在N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)，4-二甲氨基吡啶(DMAP)对甲苯磺酸盐条件下反应制得相应衍生物。上述制备方法可用下列反应图简单表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>200810110794.1说明书第12/42页ch3ch3o^^"^^^^^、。hDCC/DMAP-或DCC/DMAP.PTSAH3C、,CH3Rl=ch3h3c.h3c<formula>formulaseeoriginaldocumentpage19</formula>7b本发明的类维甲酸衍生物是未见报道的新化合物，其类似物的合成方法报道很多，主要是酰氯法，DCC，DCC/DMAP等方法，这些方法均可以合成本发明中的新化合物。进一步地，本发明合成制得如下化合物，其都为本发明具体实施化合物:分子式C28H33F302分子量458.56C28H30F3NO2Mol.Wt.:469.54C28H31F304Mol.Wt.:488.54C28H34F3NOMol.Wt.:457.57C28H31F3N20Mol.Wt.:468.55H3CCH39H39H39C28H32F3NO3Mo.Wt.:487.55C28H33F3O3Mol.Wt.:474.56C28H3lF305Mol.Wt.:504.54C28H34F3NO2Mol.Wt.:473.57C28H3lF3N202Mol.Wt.:484.55C28H32F3N04Mol.Wt.:503.55<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>C29H3lF303Mol.Wt.:484.55C29H28F3N03Mol.Wt.:495.53C29H29F3O5Mol.Wt.:514.53C29H32F3N02Mol.Wt.:483.57C29H29F3N202Mol.Wt.:494.55C29H30F3NO4Mol.Wt.:513.55C29H33F304Mol.Wt.:502.57CH3H3OC29H29F306Mol.Wt.:530.53C29H32F3NO3Mol.Wt.:499.56C29H29F3N203Mol.Wt.:510.55C29H30F3NO5Mol.Wt.:529.55C28H3()F3N03Mol.Wt:485.54C28H30F3NO3Mol.Wt.:485.54H7N、C28H30F3NO3Mol.Wt.:485.54C28H30F3NO3Mol.Wt.:485.54上述所述的新的类维甲酸衍生物，可以是它们的中性形式，当其具有碱性时，也可以和无机酸或有机酸加成形成相应的盐使用，对药物中所能用的酸包括有盐酸，溴化氢，萘二磺酸(1，5),磷酸，硝酸，硫酸，草酸，酒石酸，乳酸，水杨酸，苯甲酸，甲酸，乙酸，丙酸，戊酸，二乙基乙酸，丙二酸，琥珀酸，富马酸，丁二酸，庚二酸，己二酸，马来酸，苹果酸，氨基磺酸，苯丙酸，葡糖酸，抗坏血酸，异烟酸，甲磺酸，对甲苯磺酸，柠檬酸，以及氨基酸。所述的化合物可和多摩尔的酸加成形成盐，这些多摩尔的酸可以是单一的也可以是组合的，这主要根据需要相应的溶剂或稀释的情况来决定，这些加成的盐可以通过阴离子交换等方法而转为中性形式。作为本发明另一发明目的，提供一种药物组合物，其包含治疗有效量的上述所述的类维甲酸衍生物或其异构体、对映体、消旋体、非对映体混合物、外消旋混合物、溶剂化物、多晶型物或药学上可接受的盐作为有效成分，以25及药学上可接受的辅料。所述的药学上可接受的辅料，包括相应的医药上准许应用的赋形剂，粘合剂，缓释剂，稳定剂，香料，调味剂，色素；所述的剂型是片剂或胶囊，或者针剂、冻干粉针剂。本发明另一发明目的是提供所述化合物的应用。所述的类维甲酸衍生物或其异构体、对映体、消旋体、非对映体混合物、外消旋混合物、溶剂化物、多晶型物或药学上可接受的盐在制备药物的应用，其中所述的药物具有能够:预防或治疗血液系统肿瘤，如急性白血病，慢性白血病，多发性骨髓瘤，淋巴瘤等；预防和治疗实体肿瘤，如肝癌，直肠癌，乳腺癌，食道癌等；预防和治疗皮肤病，如银屑病，痤疮等皮肤病。图l:A549细胞形态学变化A:CONTROLC:乙醇E:芬维A胺(乙醇)G:3a-01(DMSO)I:3a-02(DMSO)K:4a-02(DMSO)药10ug/ml三天)B:DMSOD:芬维A胺(DMSO)F:6a-02(DMSO)H:6a-01(DMSO)J:2a-03(乙醇)图2:HepG2细胞形态学变化(加药10ug/ml三天)A:CONTROLB:DMSOC:乙醇D:芬维A胺(DMSO)E:芬维A胺(乙醇)F:6a-02(DMSO)G:3a-01(DMSO)H:6a-01(DMSO)I:3a-02(DMSO)J:2a-03(乙醇)K:4a-02(DMSO)图3:维甲酸衍生物处理NB4细胞72h形态学变化A,B:空白对照组NB4细胞C:6a-025(ug/ml)D:4a-025(yg/ml)E:4a-015(>g/ml)F:2a-035(ug/ml)H:芬维A胺5(>g/ml)G:3a-025(>g/ml)图4:维甲酸衍生物处理K562细胞72h形态学变化A:空白对照组K562细胞B:6a-025(ug/ml)C:6a-015(>g/ml)D:4a-025(iig/ml)E:5a-025(yg/ml)F:4a-015(ug/ml)G:2a-035(ug/ml)I:芬维A胺5(>g/ml)H:3a-0250g/ml)J:2a-015(>g/ml)图5:各组NB4细胞表面CD1lb表达的流式检测结果柱形图具体实施例方式以下包括的具体的实施例用于说明制备方法，并不对本公开内容作任何限制。所用试剂及中间体或者可由商业提供，或者可由有机合成领域那些技术娴熟人员根据标准文献方法容易地制备。本领域那些技术熟练人员可知还有其他制备本发明化合物的方法。实施例1(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯(2a隱01)室温条件下，加入维甲酸0.5g，二氯甲垸10ml搅拌，加入4一三氟甲基苯酚0.4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g，然后滴加入N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g和二氯甲烷的溶液，加毕后，为黄色透明液体，室温搅拌20小时，反应完成，用饱和氯化铵溶液中止反应，二氯甲垸萃取，水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩后，柱层析(流动相石油醚60—90)，用乙醇重结晶得0.23g黄色固体。mpll8.5-120.4。C'丽MR(CDCl3),S(ppm):L04(s,6H);1.72(s,3H);.00(s,3H);2.41(s,3H);1.47十1.62(t,4H);2.02(m,2H);5.98(s，lH);6.15-6.39(m，4H);7.11(m，lH);7,66(d,lH);7.24(s,lH)13CNMR(CDC13)，5(ppm):13.06;14.26;19.29;21.83;29.05;33.22;34.36;39.71;116.45;129.37;129.50;130.41;132.59;134.55;137.20;137.76;140.94;156.71;164.85;122.35;127.59;153.51;127.59-128.71(q);122.11-123.52(q)高分辨MS:m/z:444.2271(理论值444.2276)分子式C27H3,F302实施例2(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6，6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯(2a-02)操作方法同实施例2，将对三氟甲基苯酚换为间三氟甲基苯酚，柱层析(流动相石油醚60—90'C)，得黄色油状物0.21g'HNMR(CDCl3)，5(ppm):1.04(s,6H);1.72(s,3H);2.00(s,3H);2.41(s，3H);1.47+1.62(t,4H);2,02(m,2H);5.98(s,lH);6.15-6.39(m,4H);7.08(m，lH);7.50(m，lH);7.41(s,lH);7.25(m,lH)13CNMR(CDC13)，S(ppm):13.04;14.24;19.29;21.82;29.04;33.22;34.36;39.70;116.45;129.38;129.46;130.18;132.56;134.57;137.22;137.75;140.89;156.65;164.97;119.18;122.28;125.51;130.18;131.74;137.39;151.03高分辨MS:m/z:444.2278(理论值444.2276)分子式C27H31F302实施例3(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6，6-三甲基环己烯)-2,4，6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯(2a-03)操作方法同实施例2，将对三氟甲基苯酚换为邻三氟甲基苯酚，柱层析(流动相石油醚60—90。C)，用乙醇重结晶得0.18g黄色固体，mp93.8-95。C!HNMR(CDCl3),5(ppm):1.04(s,6H);1.73(s,3H);2.03(s,3H);2.40(s，3H);1.47+1.62(t，4H);2.05(m，2H);6.02(s,lH);6.15-6.41(m,4H);7.10(m，lH);7.68(d,lH);7.57(t,lH);7.26-7.34(m,lH)13CNMR(CDC13)，5(ppm):13.06;14.24;19.31;21.84;29.06;33.23;34.37;39.72;116.28;129.40;129.44;130.37;132.54;134.66;137.26;137.77;140.82;156.75;164.78;148.52;133.06;130.22;126.88;125.57;124.43高分辨MS:m/z:444.2275(理论值444.2276)分子式C27H31F30228实施例4(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2，4,6，8-壬四烯酸(4-三氟甲基苯基)-酰胺(3a-01)反应瓶中，加入维甲酸0.5g,甲苯5ml，然后滴加入三氯化磷O.llml，然后于室温条件下搅拌3小时，将该溶液滴加入冷却条件下对三氟甲基苯胺0.18ml和5ml吡啶的溶液中，加毕后于冷却条件下搅拌反应5小时，再于室温搅拌过夜，然后将反应液倾入碎冰中，用浓盐酸调节PH=1，用乙酸乙酯萃取三次，有机层用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮至干，用乙醇重结晶，得亮黄色产物0.3g，mpl86.1-187.6。C'HNMR(CDCl,),5(ppm):1.03(s,6H);1.72(s,3H);2.01(s,3H);2.43(s,3H);1.46+1.63(t,4H);2.02(m,2H);5.79(s,lH);6.12-6.30(m，4H);7.03(m,lH);7.55(d，lH);7.68(d,lH)13CNMR(CDC13)，5(ppm):13.01;13.90;19.31;21.82;29.04;33.21;34.36;39.71;120.48;128.98;129.45;130.18;131.23;134.98;137.27;137.80;139.95;152.13;165.34;119.26;126.33;141.50高分辨MS:m/z:443.2444(理论值443.2436)分子式C27H32F3NO实施例5(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(3-三氟甲基苯基)-酰胺(3a-02)反应瓶中，加入维甲酸0.5g，间三氟甲基苯胺0.32g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)对甲本磺酸盐0.56g，二氯甲烷5ml，冰浴条件下搅拌，有白色不溶物，滴加入DCC0.4g，二氯甲烷溶液，反应液溶液变为橙红色，加毕后于室温条件下搅拌过夜，用饱和氯化铵溶液中止反应，用二氯甲烷萃取，用水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后，柱层析(石油醚60-9(TC)收集流分后，浓縮，用甲醇重结晶，得黄色固体200mg，mp89.7-92.5'C'HNMR(CDCl3),5(ppm):L03(s,6H);1.72(s,3H);2.01(s，3H);2.44(s,3H);1.47+1.62(t,4H);2.02(m,2H);5.78(s,lH);6.15-6.30(m,4H);7.03(m,lH);7.72(d,lH);7.22(s,lH);7.33,7.45(m，lH);N-H7.88(s,lH)I3CNMR(CDC13)，S(ppm):13.00;13.88;19.31;21.82;29.04;33.21;34.36;39.71;116.47;129.49;129.53;130.15;131.11;135.06;137.29;137.81;139.84;151.92;165.39;138.95;128.90;125.33;122.63(d);120.50;131.29(q)高分辨MS:m/z:443,2437(理论值443.2436)分子式C27H32F3NO实施例6(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯(4a-01)室温条件下，加入维甲酸0.18g,4-氨基-3-三氟甲基苯酚0.1g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.09g,二氯甲烷10ml搅拌，然后滴加入N，N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.15g和二氯甲烷的溶液，为黄色透明液体，室温搅拌20小时，反应完成，用饱和氯化铵溶液中止反应，二氯甲垸萃取，水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓縮后，柱层析(流动相石油醚60—卯。C:乙酸乙酯40:1),收集流分后，浓縮，用甲醇重结晶得0.09g黄色固体。mpll9.7-121.2°C'HNMR(CDCl3),5(ppm):0.96(s，6H);1.65(s,3H);1.95(s,3H);2.32(s,3H);1.40+1.56(t,4H);1.97(m，2H);5.88(s,lH);6.07-6.30(m,4H);7.00(m，lH);7.12(d，)；7.01(s,);6.65(d,);4.03(s,2H)NH2高分辨MS:m/z:459.2379(理论值459.2385)分子式C27H32F3N02实施例7(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯(4a-02)室温条件下，加入维甲酸0.5g，4-氨基-2-三氟甲基苯酚0.32g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g,二氯甲垸10ml搅拌，然后滴加入N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g和二氯甲烷的溶液，为黄色透明液体，搅拌过夜，反应完成，用饱和氯化铵溶液中止反应，二氯甲烷萃取，水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓縮后，柱层析(流动相石油醚60—9(TC:乙酸乙酯2:1)，收集流分后，浓縮，用石油醚(60—9(TC)重结晶得0.21g黄色固体。mp89.7-91.3。C'HNMR(CDCl3),5(ppm):1.04(s，6H);1.72(s，3H);2.02(s,3H);2.39(s,3H);1.46+1.63(t，4H);2.03(m,2H);5.99(s,lH);6.14-6.39(m,4H);7.08(m，H);7.02(m,);6.91(d，lH);6.82(t,lH)nCNMR(CDCl3)，S(ppm):13.03;14.16;19.30;21.83;29.05;33.21;34.36;39.71;118.63;129.21;129.48;130.29;130.20;134.81;137.28;137.76;140.52;156.02;165.55;112.54;112.58;116.69;125.45;139.81;144.12;123.34高分辨MS:m/z:459.2378(理论值459.2385)分子式C27H32F3N02实施例8(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯(5a-01)室温条件下，加入维甲酸0.5g,对三氟甲氧基苯酚0，4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g,二氯甲烷10ml搅拌，然后滴加入N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g和二氯甲烷的溶液，为黄色透明液体，室温搅拌20小时，反应完成，用饱和氯化铵溶液中止反应，二氯甲烷萃取，水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓縮后，柱层析(流动相石油醚60—9(TC)，收集流分后，浓縮，用乙醇重结晶得0.11g黄色固体。mp88.3-90.6。C'HNMR(CDCl3)，S(ppm):1.04(s,6H);1.72(s,3H);2.03(s，3H);2.41(s,3H);1.47+1.62(t，4H);2.02(m,2H);5.98(s，lH);6.15-6.39(m,4H);7.06(m,lH);7.24(d,lH);7.14(d,lH)UCNMR(CDC13)，5(ppm):13.04;14.21;19.29;21.82;29,04;33.21;34.35;39.70;116.65;129.40;129.40;130.37;132.42;134.62;137.22;137.75;140.79;156.36;165.19;149.18;146.38;123.17;122.06;122.90(q)高分辨MS:m/z:460,2219(理论值:460.2225)分子式C27H31F303实施例9(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯(5a-02)操作同实施例9，柱层析(流动相石油醚60—90)，得黄色油状物'HNMR(CDCl3),5(ppm):1.04(s,6H);1.72(s，3H);2.03(s,3H);2.41(s,3H);1.47+1.62(t,4H);2.02(m,2H);5.59(s，lH);6.15-6.39(m,4H);7，04(m,lH);7.41(t,lH);7.04-7.lO(m，lH)13CNMR(CDC13)，S(卯m):13.06;14.25;19.30;21.83;29.05;33.23;34.37;39.71;116.55;129.40;130.44;130.39;132.50;134.61;137.22;137.77;140.85;156.55;164.90;151.66;149.66;130.20;120.45;117.83;115.19;U6.89(q)高分辨MS:m/z:460.2221(理论值460.2225)分子式C27H3,F303实施例lO(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6a-01)反应瓶中，加入维甲酸0.5g，对三氟甲氧基苯胺0.35g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)对甲苯磺酸盐0.56g，二氯甲烷5ml，冰浴条件下搅拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g，二氯甲垸溶液，反应液溶液变为橙红色，加毕后于室温条件下搅拌过夜，用饱和氯化铵溶液中止反应，用二氯甲烷萃取，用水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓縮后，柱层析(石油醚60-9(TC)收集流分后，浓縮，用甲醇重结晶，得黄色固体0.05g，mpl72.5-174.5'C'HNMR(CDCl3),S(ppm):0.96(s,6H);1.64(s,3H);1.94(s，3H);2.35(s，3H);1.40+1.55(t，4H);1.95(m,2H);5.70(s,lH);6.05-6.23(m,4H);6.95(m,lH);7.51(d,lH);7.11(d,lH);N-H7,09(s,lH),3CNMR(CDC13)，5(ppm):13.01;13.86;19.32;21.83;29.05;33.21;34.37;39.72;121.83;128.86;129.50;130.13;130.97;135.11;137.32;137.82;139.74;151.59;165.14;120.64;120.86;137.04高分辨MS:m/z:459.2379(理论值459.2385)分子式C27H32F3N02实施例ll(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6a-02)操作同实施例11，柱层析(石油醚60—9(TC)，用甲醇重结晶，得黄色固体0.09g,mpl39.2-14(TC'HNMR(CDCl3),5(ppm):0.96(s,6H);1.65(s,3H);1.94(s,3H);2.36(s，3H);1.40+1.56(t,4H);1.95(m，2H);5.70(s,lH);6.05-6.23(m,4H);6.95(m，lH);7.22-7.29(m,lH);6.86-6.88(m,lH);N-H7.10(s，lH)I3CNMR(CDC13)，5(ppm):13.02;13.88;19.32;21.83;29.05;33,22;34,37;39.72;120.53;128.89;129.50;130.14;130.09;135.07;137.31;137.82;139.83;151.89;165.15;112.51;116.13;117.64;119.08;121.06;130.02;149.7232高分辨MS:m/z:459.2377(理论值459.2385)分子式C27H32F3N02实施例12(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(4-羟基-3-三氟甲基苯基)-酰胺(7a-01)反应瓶中，加入维甲酸0.5g,甲苯5ml，然后滴加入三氯化磷O.llml，然后于室温条件下搅拌3小时，将该溶液滴加入冷却条件下的4-羟基-3-三氟甲基苯胺0.17g和5ml吡啶的溶液中，加毕后于冷却条件下搅拌反应5小时，再于室温搅拌过夜，然后将反应液倾入碎冰中，用浓盐酸调节PH=1，用乙酸乙酯萃取三次，有机层用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮至干，柱层析(硅胶柱100-200目)，流动相(石油醚60-90。C:乙酸乙酯=10:1)，收率流分，浓縮后，得黄色产物0.08g实施例13(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2，4,6,8-壬四烯酸(4-羟基-2-三氟甲基苯基)-酰胺(7a-02)操作同实施例13，柱层析(硅胶柱100-200目)，流动相(石油醚60-9(TC:乙酸乙酯=10:1)，收率流分，浓缩后，得黄色产物0.12g实施例14(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯(2b-01)反应瓶中，加入依曲替酸0.53g，间三氟甲基苯酚0.4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.4g，二氯甲烷5ml,冰浴条件下搅拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g，二氯甲烷溶液，搅拌反应4h，，用饱和氯化铵溶液中止反应，用二氯甲垸萃取，用饱和氯化钠水容易洗涤，无水硫酸钠干燥，浓縮后，用乙醇重结晶，得黄色固体0.62g，mpl21.5-123.rC'HNMR(CDCl3),8(ppm):7.48(cUH);7.4他1H);732(mJH);7.14(d41H);6.76(dJH);6.71(sJH);6.42(cUH);6.29(dJH);622(sJH);6.00(sJH);3.82(s^3H);243(s3H);23(s3H);2.24(讽；2.15(s3H);2.13(s3H)'3CNMR(CDC13)，S(ppm):164.72;156.48;156.37;151.02;140.47;138.07;136.02;135.11;134.02;132.31;132.09;131.76;130.18;129.90;129.80;129.28;125.50;122.90;122.35;119.18;116.78;110.10;55.60;21.49;17.54;14.26;13.11;11.92高分辨MS:m/z:470.2076(理论值470.2069)分子式C28H29F303实施例15(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯(2b-02)操作同实施例15，用乙醇重结晶二次，得黄色固体0.25g，mpll7.7-121.2。C'HNMR(CDCl3)，8(ppm):7.70(cUH);7.68(UH);7.36(dJH);7.32(1UH);7.14(q^lH);6.T7(cUH);6.73felH);6.46(cUH);6.31(dJH);624^1H);6.05(sJH);3.84(s3H);2.44(s3H);2.33(s3H);226(s3H);215(s3H);2.11(s3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):164.72;156.57;156.36;148.49;140.38;138.11;136.03;135.18;134.03;132.88;132.29;130.23;129.83;129.20;126.92;126.88;125.59;124.70;124.49;;123.36;123.05;122.88;121.78;116.60;110.10;55.61;21.50;17.54;14.23;13.11;11.92高分辨MS:m/z:470.2073(理论值470.2069)分子式C28H29F303实施例16(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4,6，8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯(2b-03)操作同实施例15，用乙酸乙酯重结晶，得黄色固体570mg，mpl62.5-164.7。C'HNMR(CDCl3),6(ppm):7.68(d^2H);728(UH);726(sJH);7.16(q^lH);6.78(dJH);6.63(sJH);6.45(dJH);628(OH);6.,H);3.84(s3H);2.45(讽；233(讽；227(s3H);2.16(s3H);2.06(s3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):164.78;156.53;156.37;153.49;140.50;138.05;136.00;135.07;134.01;132.34;130.16;129.78;129.31;126.73;122.89;122.33;116.77;110.09;55.58;21,48;17.53;14.25;13.10;11.91高分辨MS:m/z:470.2065(理论值:470.2069)分子式C28H29F303实施例17(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6，8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺(3b-01)反应瓶中，加入依曲替酸0.5g,甲苯lOml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室温条件下搅拌2小时，将该溶液滴加入冷却条件下的间三氟甲基苯胺0.25g和6ml吡啶的溶液中，加毕后室温搅拌反应5小时，然后将反应液倾入碎冰中，，用二氯甲烷萃取三次，有机层用饱和碳酸氢钠洗涤，水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮至干，柱层析(硅胶柱100-200目)，流动相(石油醚60-卯。C:乙酸乙酯二15:1)，收率流分，浓缩后，得用甲醇重结晶，得黄色产物0.1g，mpl88.6-l卯.7。C'HNMR(CDCl3),6(ppm):7.88(sJH);7.74(dJH);7.43ftlH);7.35(cUH);725(sJH);7.06(4IH);6.72(cUH);6.6CKMH);6.33(dJH);622(q^2H);5.79(sJH);3.82(s3H);2.45(s3H);2.30(s3H);22《s3H);2.15(s3H);2.10(s3H)13CNMR(CDC13)，5(ppm):165.22;164.69;156.31;151.83;149.87;139.44;138.90;138.41;138.17;135.60;132.13;131.33;130.91;130.31;129.93;129.55;128.73;128.43;122.87;120.76;118.90;116.47;110.14;55.63;21.49;17.54;13.89;13.07;11.91高分辨MS:m/z:469.2234(理论值:469.2229)分子式C28H3。F3N02实施例18(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4，6，8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺(3b-02)反应瓶中，加入依曲替酸0.5g,甲苯10ml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室温条件下搅拌2小时，将该溶液滴加入冷却条件下的邻三氟甲基苯胺0.25g和6ml吡啶的溶液中，加毕后室温搅拌反应5小时，然后将反应液倾入碎冰中，用二氯甲烷萃取三次，有机层用饱和碳酸氢钠洗涤，水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮至干，柱层析(硅胶柱100-200目)，流动相(石油醚60-901::乙酸乙酯=20:1)，收率流分，浓缩后，得用甲醇重结晶，得黄色产物0.18g,mpl65.5-166.5t:'HNMR(CDCl3)，5(ppm):8.26(d,lH)，7.54(d，lH);7.48(t,lH);7.36(s,lH);7.13(t，lH);6.98(q,lH);6.65(d，lH);6.53(s,lH);6.29(d,lH);6.15(q,2H);5.22(s,lH);3.75(s,3H);2.37(s,3H);2.23(s，3H);2.21(s,3H);2.08(s，3H);2.05(s,3H)I3CNMR(CDC13)，5(ppm):165.08;156.31;151.85;139.39;138.22;135.65;134.01;132.85;130.90;130.36;129.95;128.70;126.10;124.10;122.86;120.92;110.09;55.63;21.50;17.55;13.90;13.07;11.93高分辨MS:m/z:469.2236(理论值469.2229)分子式C28H3。F3N02实施例19(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯(4b-01)反应瓶中，加入依曲替酸0.53g，4-氨基-3-三氟甲基苯酚0.28g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g，二氯甲烷5ml,冰浴条件下搅拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g，二氯甲烷溶液，搅拌反应4h,，用饱和氯化铵溶液中止反应，用二氯甲烷萃取，用饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓縮后，柱层析(石油醚60—9(TC:乙酸乙酯20:1)用乙醇重结晶，得黄色固体60mg，mpl66.7-168.6。C!HNMR(CDCl3)，S(ppm):7.22(d，lH);7.12(m,lH);7.09(d,lH);6.79(d,lH);6.72(s，lH);6.62(d，lH);6.43(d，lH);6.30(s，lH);6.26(d，lH);5.98(s,lH);3.84(s，3H);2.43(s,3H);2.32(s，3H);2.26(s,3H);2.14(s,3H);2.11(s,3H)'3CNMR(CDC13)，S(ppm):165.59;156.35;155.84;148.49;140.21;138.10;136.03;135.36;134.94;134.02;132.01;130.23;129.83;129.12;126.68;122.88;120.00;118.77;117.13;110.10;55.61;21.49;17.53;14.20;13.10;11.92高分辨MS:m/z:485.2176(理论值485.2178)分子式C2SH3。F3N03实施例20(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯(4b-02)反应瓶中，加入依曲替酸0.53g，4-氨基-2-三氟甲基苯酚0.28g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.23g，二氯甲烷5ml,冰浴条件下搅拌，有白色不溶物，滴加入N，N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g，二氯甲烷溶液，搅拌反应4h,，用饱和氯化铵溶液中止反应，用二氯甲烷萃取，用饱和氯化钠水容易洗涤，无水硫酸钠干燥，浓縮后，柱层析(石油醚60—90:乙酸乙酯20:1)用乙醇重结晶，得黄色固体60mg，mpll8.7-123.8"C'HNMR(CDCl3),5(ppm):7.39(d,lH);7.26(m,lH);7.12(m,lH);6.75(d，lH);6.61(d，lH);6.43(d,lH);6.30(s,lH);6.26(d，lH);6.01(s,lH);3.82(s,3H);2.42(s,3H);2.31(s,3H);2.25(s,3H);2.14(s,3H);2.09(s，3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):165.62;156.35;155.93;144.11;140.15;139.81;138.14;136.03;135.33;134.03;132.02;130.28;129.88;129.06;125.43;122.88;121.07;118.67;116.98;112.05;110.10;55.63;21.49;17.54;14.19;13.09;11.92高分辨MS:m/z:485.2177(理论值485.2178)分子式C28H3。F3N03实施例21(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯(5b-01)反应瓶中，加入依曲替酸0.53g，对三氟甲氧基苯酚0.4g，4-二甲氨基吡啶(DMAP)0.4g，二氯甲烷5ml,冰浴条件下搅拌，有白色不溶物，滴加入N,N-二环己基碳二亚胺(DCC)0.4g，二氯甲垸溶液，搅拌反应4h,，用饱和氯化铵溶液中止反应，用二氯甲烷萃取，用饱和氯化钠水容易洗涤，无水硫酸钠干燥，浓縮后，用乙醇重结晶，得黄色固体0.67g，mpl45.0-147.9。C'HNMR(CDCl3)，S(ppm):7.26(s,lH);7.24(s,lH);7.19-7.11(m,3H);6.77(d,lH);6.63(s,lH);6.40(d,lH);6.27(t,2H);6.01(s,lH);3,84(s,3H);2.44(s,3H);2.33(s,3H);2.26(s,3H);2.17(s，3H);2.15(s,3H)13CNMR(CDC13)，S(ppm):165.14;156.37;156.17;149.17;146.40;140.36;138.07;136.01;135.15;134.01;132.17;130.19;129.80;129.23;123.16;122.89;122.06;116.97;110.10:55.59;21,48;17.53;14.21;13.09;11.91高分辨MS:m/z:486.2015(理论值:486.2018)分子式C2SH29F304实施例22(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯(5b-02)操作同实施例22,然后柱层析(石油醚60-9(TC:乙酸乙酯100:1)，用乙醇/乙酸乙酯重结晶，得黄色固体330mg，mpl25.6-126.7。C37'丽MR(CDCl3),5(ppm):7.43(t，lH);7.24(s,lH);7.10-7.06(m,3H);6.78(d，lH);6.63(s,lH);6.44(d,lH);6.31(t，2H);6.00(s,lH);3.84(s，3H);2.45(s,3H);2.33(s,3H);2.26(s,3H);2.17(s,3H);2.15(s，3H)I3CNMR(CDC13)，S(ppm):164.84:156.37;151.65;149.66;140.42;138.09;136.03;135.14;134.03;132.25;130.19;129.82;129.25;122.91;120.44;117.85;116.88;115.19;110,11;55.62;21.50;17.55;14.26;13.12;11.93高分辨MS:m/z:486,2014(理论值:486.2018)分子式C28H29F304实施例23(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6b-01)反应瓶中，加入依曲替酸0.5g，甲苯10ml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室温条件下搅拌2小时，将该溶液滴加入冷却条件下的间三氟甲氧基苯胺0.27g和6ml吡啶的溶液中，加毕后室温搅拌反应5小时，然后将反应液倾入碎冰中，，用二氯甲烷萃取三次，有机层用饱和碳酸氢钠洗涤，水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮至干，柱层析(硅胶柱100-200目)，流动相(石油醚60-90。C:乙酸乙酯二20:1)，收率流分，浓缩后，得用甲醇重结晶，得黄色产物0.20g.'HNMR(CDCl3),S(ppm):7.64(s,lH);7.38(d,lH);7.31(t,lH);7.21(s,lH);7.06(q,lH);6.97(d，lH);6.73(d,lH);6.62(s,lH);6.34(d,lH);6.23(q,2H);5.80(s,lH);3.83(s,3H);2.46(s，3H);2.32(s,3H);2.25(s,3H);2.17(s,3H);2.13(s,3H)实施例24(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6b-02)操作同实施例23.实施例25(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺(6b-03)操作同实施例23.实施例26(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4,6,8-壬四烯酸(4-羟基-3-三氟甲基苯基)-酰胺(7b-01)反应瓶中，加入依曲替酸0.5g,甲苯10ml，然后滴加入三氯化磷0.19ml，然后于室温条件下搅拌2小时，将该溶液滴加入冷却条件下的4-羟基-3-三氟甲基苯基胺0.27g和6ml吡啶的溶液中，加毕后室温搅拌反应5小时，然后将反应液倾入碎冰中，，用二氯甲垸萃取三次，有机层用饱和碳酸氢钠洗涤，水洗涤至中性，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮至干，柱层析(硅胶柱100-200目)，流动相(石油醚60-9(TC:乙酸乙酯二5:1)，收率流分，浓縮后，得用甲醇重结晶，得黄色产物0.20g.实施例27(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6，8-壬四烯酸(4-羟基-2—三氟甲基苯基)-酰胺(7b_02)操作同实施例26.实施例28类维甲酸衍生物对肺癌细胞A549，HepG2生物活性测定1材料与方法1.1试剂维甲酸衍生物12种由安徽医科大学药学院合成，用二甲基亚砜(DMSO)与无水乙醇配制成终浓度为lug/ml，10ug/ml，分装后于-20。C保存。使用时避光，DMSO的终浓度<0.1%。MTT购自Sigma公司。CoulterDNA检测试剂盒由安徽省立医院中心实验室馈赠。AFP、Y-GT由解放军105医院检验科提供。细胞凋亡-Hoechst染色试剂盒购自Beyotime公司。1.2细胞培养人肝癌A549，HepG2细胞由本实验室保存，细胞生长条件DMEM(GIBICO公司)培养液加入10%小牛血清(血清购杭州四季青生物公司)培养于37'C、5%C02、饱和湿度的细胞培养箱中。1.3细胞生长和增殖实验采用MTT法。取对数生长期细胞以5xlOVL细胞浓度种于96孔培养板，200pl/孔，待贴壁，次日弃去原液加入培养液，按其浓度分lug/ml、、5ug/ml、10ug/ml及空白对照组、细胞对照组、溶剂对照组(1%。的DMSO及无水乙醇)共17组，孵育3d后加入20)^1/孔MTT(5g39/L)37'C温育4h，小心弃去原液，控干，加入200nl/孔DMSO溶解结晶物，振荡10min，于570nm测定OD值。每浓度设5个复孔，每组取3次实验的平均值，根据各组中各孔吸光度平均值(OD)，按照如下公式计算细胞生长的抑制率抑制率％=(对照孔OD57。-试验孔OD训)/对照孔OD57。x100%。重复三次。第二次实验取最高浓度1(Vmol/L分别以1，2，3，7天培养，重复三次。1.4流式细胞术检测细胞周期和凋亡收集处于对数生长期的A549细胞，调整细胞密度为8xl07/L，接种于六孔板中，37'C、5%C02培养箱培养，待细胞贴壁后弃去培养液，加入含有相应浓度药物的培养液，分10吗/ml加药组，10吗/ml芬维A胺组及细胞对照组、溶剂对照组(196。的DMSO及无水乙醇)共ll组，3d后常规消化收集各组细胞并吹打成单细胞悬液，冷PBS洗2次后，用10(V1PBS重悬，按CoulterDNA检测试剂盒加入固定破膜剂和PI染液，室温避光反应30min后上机检测，每个标本检测10000个细胞，重复计数3次，资料由Analysis软件分析G。-G,、S、G2-M期比例和凋亡细胞比例。1.5A549,H印G2细胞形态学观察10吗/ml芬维A胺衍生物作用细胞瓶中细胞三天，三天后光镜下观察细胞形态变化并摄片，并设10吗/ml芬维A胺对照组及细胞对照组、溶剂对照组。1.6分化指标的检测将培养的A549细胞随机分为6种10吗/ml加药组和细胞对照组、溶剂对照组(DMSO,乙醇)以及10pg/ml芬维A胺对照组(共1组)。对照组和加药组均培养三天，收集加药组和对照组细胞培养液各3管，培养液经4000r/min离心5min后，取上清，采用酶动力学法和CEA测定试剂盒测CEA含量。2结果2.1lug/ml、、5ug/ml、10ug/ml对A549增殖的影响见表l。表l对A549增殖的影响会HSOD值("±s)抑制率6a-02(D)3a-01(D)1.614士0.1460.1351.580±0.0960.1541.498±0.280.1971.517±0.1000.1871.357±0.1590.273ggulOug/ml1.296±0.1920.3056a-01(D)1ug/ml1.637士0.1460.1235ug/ml1.613±0.1200.1361Oug/ml1.362士0.0770.2703a-02(D)lug/ml1.551±0.0830.1695ug/ml1.510±0.1930.1911Oug/ml0.939±0.0400.4972a-02(D)lug/ml1.735±0.0480.0705ug/ml1.621±0.0700.1311Oug/ml1.580±0.2070.1445a-02(D)lug/ml1.843±0.1790.0125ug/ml1.817±0.1420.0271Oug/ml1.689±0.1540.0952a-01(乙醇)1ug/ml1.878±0.158-0.0065ug/ml1,487±0.1750.2031Oug/ml1.458土0.0660.2192a-03(乙醇)lug/ml1.639±0.1150.1225ug/ml1.555±0.1620.1671Oug/ml1.382±0.1330.2605a-01(乙醇)lug/ml1.962±0.225-0.0515ug/ml1.754±0.1380.060Oug/ml1.732±0.3170.0724a-02(D)lug/ml1.644土0.2720.1195ug/ml1.618±0.0870.1331Oug/ml1.026±0.0.0690.4504a-01(D)lug/ml2.020±0.317-0.0835ug/ml1.979±0.138-0.0601Oug/ml1.808±0.1430.031对照组1.866±0.073DMSO1.830±0.0990.019乙醇1.805±0.0860.033芬维A胺(DMSO)1.724±0.0800.076芬维A胺(乙醇)1.710士0.0560.083由上表可以看出每种衍生物对肺癌细胞均有不同程度的抑制作用。随后选取了六种作用比较明显的又按时间梯度重复了三次MTT，浓度为10ug/ml，结果见表2。表2对A549增殖的影响组别时间OD值(x±.O抑制率6a-02(l)Id0.774±0.0300.156(1Oug/ml)2d1.065±0.0450.2723d0.408±0.0280.5617d0.666±0.0490.6793a-01(2)Id0.680±0.0550.258(1Oug/ml)2d1.042±0.0460.2883d0.623±0.0060.3287d1.325±0.0280.3616a-01(3)Id0.646±0.0190.296(10ug/ml)2d0.卯9±0.0650.3783d0.567±0.0570.3897d1.243±0.0240.4013a-02(4)Id0.617±0.0720.327(lOug/ml)2d0.703±0.0250.5193d0.229±0細0.7537d0.106±0.0350.9492a-03(8)Id0.902±0.0550.016(lOug/ml)2d1.066±0.0150.2713d0.635±0.0330.3157d1.393±0.0430.3284a-02(ll)Id0.815±0.045O.川(lOug/ml)2d1.176±0.0210.1963d0.720±0.0250.2237d1.144±0.1500.448CEIXId0.917±0駕0.0002d1.463±0馬O扁3d0.927±0.045O扁7d2.074±0.053O細DMSOId0.913±0.0390.0042d1.289±0扁0.1193d0.832±0.0490.1027d1.821±0.1440.122乙醇Id0.902±0.0370.0172d1.442±0.0300,0143d0.916±0.0270.0127d2.041±0.1150.016芬维A胺(DMSO)Id0.883±0.0620.0372d1.360±0.0520.0703d0.845±0.0340.0897d1.835±0.0300.115芬维A胺(乙醇)Id0.887±0.0570.0332d1.333±0.0460.0893d0.836±0.0340.0997d1.851±0.0300.108可以看出六种药物对于肺癌细胞的抑制作用均较好。2.2lug/ml、、5ug/ml、lOug/ml对HepG2增殖的影响见表3。表3对HepG2增殖的影响组别浓度OD值(i:±■、')抑制率6a-02lml1.38±0.620.185/ml1.16±0.380.3110/ml0.84±0.310.503a-01lug/ml1.13±0.160.335ug/mlU3±0,450.33lOug/ml0.86±0.130.496a-01lug/ml0.97±0.290.425ug/ml0.89±0.140.47421Oug/ml0.89±0.300.473a-02lug/ml1.19±0.500.305ug/ml0.92±0.270.451Oug/ml0.94±0.410.452a-02(乙醇)1ug/ml1.19±0.520.295ug/ml1.13土0.460.331Oug/ml0.94±0.490.455a-02(乙醇)菱1.27±0.440.255ug/ml1.13土0.470.331Oug/ml1.11±0.610.352a-01(乙醇)1ug/ml1.38±0.560.185ug/ml1.31±0.570.231Oug/ml1.30±0.550.242a-031ug/ml1.32±0.500.225ug/ml1.32±0.560.231Oug/ml0.98±0.190.425a-01(乙醇)lug/ml1.57±0.390.075ug/ml1.51±0.300.111Oug/ml1.49±0.230,124a-021ug/ml1.50±0.240.115ug/ml1.32±0.500.221Oug/ml0.86±0.130.494a-01lug/ml1.72±0.44-0.0095ug/ml1.63±0.360.041Oug/ml1.57±0,300.07对照组1.70±0.51DMSO1.45±0.420.14乙醇1.56±0.400.08芬维A胺(DMSO)1.27±0.250.25芬维A胺(乙醇)1.28±0.210.24由上表可以看出每种衍生物对肝癌细胞均有不同程度的抑制作用。随后选取了六种作用比较明显的又按时间梯度重复了三次MTT，浓度为1Oug/ml，结果见表4。表4对HepG2增殖的影响组别时间OD值(.s.±.、')抑制率6a-02(l)*Id1.60±0.190.07(1Oug/ml)2d.14±0.090.323d0.81土0.120.347d0.49±0.320.633a-01(2)Id1.52±0.130.12(1Oug/ml)2d0.71±0.020.423d0.77±0.030.547d0.30土0.080.776a-01(3)Id1,28±0.070,06(1Oug/ml)2d1.55±0.110.103d1.24±0.180.267d0.62±0.130.5043±0.070.17(10ug/ml)2d0.81±0.120,523d0.55±0.030.557d0.32±0.120.762a-03(8)Id1.6U0.140.07(lOug/ml)2d1.55±0.090.083d.24±0.090.097d0.79±0.080.364a-02(ll)*Id1.53±0.270.1(lOug/ml)2d1.36±0.130,203d0.74±0.080.467d0.70±0.050.48CEIXId1.78±0.07/2d1.70±0.12/3d1.24±0.13/7d1.37±0.07/DMSOId1.70±0.120.042d1.68土0.070.013d1.09±0.070.27d1.25±0.〗90.08乙醇Id1.68士0.070.052d1,67±0.050.013d1.19±0.070.037d1.31±0.090.04芬维A胺(DMSO)Id1.61士0.160.092d1.37±0.070.193d1.07±0.200.137dU7土0.060.14芬维A胺(乙醇)Id1.67±0.050.052d1.3I±0.090.223d1.06±0.090.14最后我们又选取了3天作为后续实验的作用时间，MTT重复两次结果见表5。表5对HepG2增殖的影响组别浓度OD值(x±.n')抑制率*表示与细胞对照组比较有统计学意义2.167±0.2050細1.849±0.0720.1461.938±0.1230.1051.469±0扁0.322*1.422±0.1230.343*1.125±0.1460.480*0.978±0.0720.548*1.163±0.1020.463*1.33U0.0670.385*1.847±0.0910.468*1,409±0細0,349*对照组DMSO乙醇芬维A胺(DMSO)芬维A胺(乙醇)6a-02(DMSO)3a-01(DMSO)6a-01(DMSO)3a-02(DMSO)2a-03(DMSO)4a-02(乙醇)Oug/mlmmmmmuooooo可以看出六种药物对于肝癌细胞的抑制作用均较好。2.3对A549细胞CEA分泌量的影响结果如表6所示，选取六种ATRA衍生物(同前)进行实验，10ug/ml药物浓度作用三天，然后取上清进行检测，六种药物对于CEA分泌量均有影响。表6对A549细胞CEA分泌量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>2.4对HepG2细胞Y-GT比活性及AFP分泌量的影响如表7所示，ATRA衍生物中3a-01，6a-01，4a-02对于肝癌细胞HepG2的AFP分泌量影响均具有统计学意义，六种药物对于r-GT分泌量均有影响。表7对HepG2细胞y-GT比活性及AFP分泌量的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>与对照组比较'尸<0.052.5对于A549细胞细胞周期及凋亡的影响见表8从表8可以看出，六种药物中3a-02对于A549细胞凋亡的影响最大。表8对于A549细胞细胞周期及凋亡的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>溶剂对照(DMSO)66.325.72.665.83溶剂对照(乙醇)67.922.92.926.47芬维A胺(DMSO)47.222.22.0929.3芬维A胺(乙醇)59.324.52.6314.0l(6a-02)70.019.01.719.792(3a-01)55,624.92.4117.63(6a-01)40.127.92.3430.54(3a-02)35.123.61.6240.98(2a-03)45.725.81.0128.9144.129.41,9023.92.6对于HepG2细胞细胞周期及凋亡的影响见表9。从表9可以看出，六种药物中4a-02对于HepG2细胞凋亡的影响最大。表9对于HepG2细胞细胞周期及凋亡的影响组别G0-G1(%)S(%)G2-M(%)凋亡率(％)细胞对照68.817,85.907.68溶剂对照(DMSO)69.719.82.808.00溶剂对照(乙醇)67.722.54.665.38芬维A胺(DMSO)67.319.87.645.71芬维A胺(乙醇)60.024.15.6910.6l(6a-02)57.525.42.6115.7*2(3a-01)56.324.84.1416.5*3(6a-01)57.426.75.3011.14(3a-02)40.327.92.7130.2*8(2a-03)57.325.53.4016.3*ll(4a-02)30.928.53.2038.1*与正常组比较'P'<0.0052.7A549细胞形态学变化(加药10ug/ml三天)见图l。2.8HepG2细胞凋亡Hoechst33258染色结果见图2。实施例29、类维甲酸衍生物对白血病细胞株K562，NB4生物活性测定材料1.细胞株K562细胞株，购于中科院上海细胞库。NB4细胞株，为安徽医科大学第一附属医院血液内科实验室馈赠。2.试剂芬维A胺，维甲酸衍生物:由本实验室自己合成。胎牛血清:杭州四季青生物工程材料有限公司RPM11640培养粉Gibco公司。46瑞式染色液弘慈医学化验所。碘化丙啶(propidiumIodide,PI):Sigma公司。RNaseA:Sigma公司。荧光标记单抗:包括抗人CDllb/PE,抗体，及相应同型对照抗体(IgGl/PE,均购自Coulter—Immunotech(Paris,France)3.仪器(302培养箱SHELLAB超净台苏州净化SW-CJ-1F型单人双面净化台离心机Sigma3-16K流式细胞仪EPICSXL-MCL油镜COICXSZ-H实验方法1.制剂维甲酸衍生物和芬维A胺用无水乙醇配制成浓度为10mg/mL,储存液，-20°C避光保存。2.细胞培养NB4细胞、K562细胞以2X10Vml的起始浓度接种于含10。/。胎牛血清(FBS):100u/ml青霉素，100Lg/ml链霉素禾B2mmol/L谷胺酸氨的RPMI1640培养液中悬浮培养(37'C,5。/。C02)。每2—3天换液。3.细胞形态学观察上述细胞经维甲酸衍生物和芬维A胺(5mg/ml)作用72h后收集，离心后细胞涂片，自然干燥，用瑞士蓝染色。油镜下观察细胞形态4.细胞周期分析上述细胞经维甲酸衍生物和芬维A胺(5mg/Ml)作用72h后，收集约106细胞，PBS清洗两次，经70%冷乙醇固定24小时以上后，再用PBS清洗两次，随后，加入碘化丙啶5ug/ml染色，经流式细胞仪检测后，所得资料再经muti-cycle软件分析处理。5.流式细胞仪检测细胞分化抗原NB4细胞在维甲酸衍生物和芬维A胺(5mg/Ml)作用72h后，取1x106细胞，PBS清洗两次.加入荧光标记的抗人CDllb/PE抗体和相应的同型对照抗体，于室温反应30分钟.PBS清洗一次。用流式细胞仪检测。6.结果6.1.维甲酸衍生物对白血病细胞诱导分化的形态学变化油镜下观察显示，加入维甲酸衍生物处理后NB4细胞的形态均有不同程度的改变，表现为胞体变小，核/浆比例减小，胞浆内颗粒增多，核变小且明显凹陷扭曲，细胞形态似中、晚幼粒细胞(图3，图4)6.2.维甲酸衍生物对白血病细胞株细胞周期的影响FCM分析显示，维甲酸衍生物作用后Gl期分布高于空白对照组，而S期分布低于空白对照组。(表9，表IO)表9维甲酸衍生物对NB4细胞周期的影响GroupGl%S%G2%空白对照47.0151.461.536a-0275.4719.015.526a-0138.2459.062.704a-0252.5939.737.685a-0260.0635.034.914a-0159.1533.787.072a-0365.7228.745.543a-0245.8351.302.875a-0159.2835.744.98芬维A胺63.2533.724.03表10维甲酸衍生物对K562细胞周期的影响GroupGl%S%G2%空白对照32.460.86.86a-0232,256.810.96a-0134.256.49.44a-0233.155.411.55a-0238.254.27.74a-0139.153.96.92a-0345.147.37.63a-0239.754,26.05a-0132.655.012.52a-0235.454.69.9芬维A胺33.557.59.02a-0136.151.412.56.3.维甲酸衍生物对NB4细胞表面分化抗原CDllb的影响不同的维甲酸衍生物处理72h，NB4细胞CDllb表达与对照组相比明显增高。随着CDllb表达量的增加，说明NB4细胞向成熟粒细胞方向分化(图5)。已经根据优选实施例对本发明作了描述。应当理解的是前面的描述和实施例仅仅为了举例说明本发明而已。在不偏离本发明的精神和范围的前提下，本领域技术人员可以设计出本发明的多种替换方案和改进方案，其均应被理解为在本发明的保护范围之内。权利要求1.具有下式(I)所示的类维甲酸衍生物或者式(I)所示的类维甲酸衍生物的异构体、对映体、消旋体、非对映体混合物、外消旋混合物、溶剂化物、多晶型物或药学上可接受的盐；其中，R1代表式(II)或者式(III)所示的结构，R2代表式(IV)所示的结构；id="icf0003"file="A2008101107940002C3.tif"wi="11"he="2"top="158"left="31"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>表示连接位置；其中R3～R7相互间相同或者不同，各自独立地选自氢、硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级烷氨基、取代或未取代的低级烷巯基、取代或未取代的低级烷磺基、取代或未取代的低级烷酰胺基、取代或未取代的低级脂烯氧基、取代或未取代的低级脂炔氧基、取代或未取代的脂环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的杂芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的杂芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的杂芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的杂芳氨基、取代或未取代的芳巯基、取代或未取代的杂芳巯基；R3’～R11’相互间相同或者不同，各自独立地选自氢、硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级烷氨基、取代或未取代的低级烷巯基、取代或未取代的低级烷磺基、取代或未取代的低级烷酰胺基、取代或未取代的低级脂烯氧基、取代或未取代的低级脂炔氧基、取代或未取代的脂环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的杂芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的杂芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的杂芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的杂芳氨基、取代或未取代的芳巯基、取代或未取代的杂芳巯基；R9～R13相互间相同或者不同，各自独立地选自卤代烷基、卤代烷氧基、氢、硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基、氰基、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级烷氨基、取代或未取代的低级烷巯基、取代或未取代的低级烷磺基、取代或未取代的低级烷酰胺基、取代或未取代的低级脂烯氧基、取代或未取代的低级脂炔氧基、取代或未取代的脂环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的芳氧基、取代或未取代的杂芳氧基、取代或未取代的芳基羰基、取代或未取代的杂芳基羰基、取代或未取代的芳氧基羰基、取代或未取代的杂芳氧基羰基、取代或未取代的芳氨基、取代或未取代的杂芳氨基、取代或未取代的芳巯基、取代或未取代的杂芳巯基；Z为O、S或者NR14，其中R14选自氢、取代或者未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级炔基、取代或未取代的脂环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基；条件是R9～R13中至少之一为卤代烷基或者卤代烷氧基。2、如权利要求l所述的类维甲酸衍生物，其中，R3和R7相同或者不同，分别是取代或未取代的低级烷基，R4和R6相同或者不同，分别选自氢、取代或未取代的低级垸基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级脂烯氧基、硝基、氨基、低级垸基取代氨基、取代或未取代的氮杂环基，R5为取代或未取代的低级垸氧基，所述的低级是指含15个碳原子，取代时取代基选自硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。3、如权利要求2所述的类维甲酸衍生物，其中，R3，R7，R4是甲基时，R5是甲氧基，R6是氢。4、如权利要求1—3所述的类维甲酸衍生物，其中，IV和IV相同或者不同，分别是取代或未取代的低级烷基，IVR,。'相同或者不同，分别选自氢、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级脂烯氧基、硝基、氨基、低级烷基取代氨基、取代或未取代的氮杂环基，R,r为氢、取代或未取代的低级烷基、取代或未取代的低级烯基、取代或未取代的低级烷氧基，所述的低级是指含15个碳原子，取代时取代基选自硝基、卤素、氨基、酰基、磺胺基、羧基、羧酸酯基、酰胺基、腈基、羟基、氨基甲酰基、硫脲基、氨基甲基或氰基。5、如权利要求4所述的类维甲酸衍生物，其中IV、R/均是甲基，IVR,。'均是氢，R,，'为甲基。6、如权利要求l一5所述的类维甲酸衍生物，其中，R9、RIO、Rll、R12、R13相同或者不同，分别独立地选自三氟甲基、三氟甲氧基、氢、卤素、羟基、取代或未取代的低级垸基、取代或未取代的低级烷氧基、取代或未取代的低级脂烯氧基、羧酸、羧酸酯、酰胺、腈基、硝基、氨基、取代或未取代的低级垸基取代氨基、氮杂环基，条件是R9、RIO、Rll、R12、R13中之一为三氟甲基或者三氟甲氧基。7、如上述权利要求任一项所述的类维甲酸衍生物，其为盐的形式，所述的盐包括但不限于盐酸盐，氢溴酸盐，萘二磺酸盐,磷酸盐，硝酸盐，硫酸盐，草酸盐，酒石酸盐，乳酸盐，水杨酸盐，苯甲酸盐，甲酸盐，乙酸盐，丙酸盐，戊酸盐，二乙基乙酸盐，丙二酸盐，琥珀酸盐，富马酸盐，丁二酸盐，庚二酸盐，己二酸盐，马来酸盐，苹果酸盐，氨基磺酸盐，苯丙酸盐，葡糖酸盐，抗坏血酸盐，异烟酸盐，甲磺酸盐，对甲苯磺酸盐，柠檬酸盐，或者氨基酸盐。8、如权利要求l所述的类维甲酸衍生物，其为(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4，6,8-壬四烯酸胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4，6，8-壬四烯酸胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2，4,6,8-壬四烯酸酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6,8-壬四烯酸酯；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基环己烯)-2,4，6,8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6，6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸酰胺；(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸酰胺；4-三氟甲基苯酯；3-三氟甲基苯酯；2-三氟甲基苯酯；(4-三氟甲基苯基)-酰(3-三氟甲基苯基)-酰4-氨基-3-三氟甲基苯4-氨基-2-三氟甲基苯4-三氟甲氧基苯酯；3-三氟甲氧基苯酯；(4-三氟甲氧基苯基)-(3-三氟甲氧基苯基)-(全-反式)-3,7-二甲基-9-(2,6,6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(4-羟基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-3，7-二甲基-9-(2，6,6-三甲基环己烯)-2,4,6，8-壬四烯酸(4-羟基-2-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4，6,8-壬四烯酸3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2，4，6,8-壬四烯酸2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸4-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3，6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2，4,6，8-壬四烯酸4-氨基-3-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3，6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸4-氨基-2-三氟甲基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6，8-壬四烯酸4-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸3-三氟甲氧基苯酯；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(3-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(2-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-三氟甲氧基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2，3,6-三甲苯基)-3,7-二甲基-2,4，6,8-壬四烯酸(4-羟基-3-三氟甲基苯基)-酰胺；(全-反式)-9-(4-甲氧基-2,3,6-三甲苯基)-3，7-二甲基-2,4,6,8-壬四烯酸(4-羟基-2-三氟甲基苯基)-酰胺。9、一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1一8任一项所述的类维甲酸衍生物或其异构体、对映体、消旋体、非对映体混合物、外消旋混合物、溶剂化物、多晶型物或药学上可接受的盐作为有效成分，以及药学上可接受的辅料。10、权利要求1一8任一项所述的类维甲酸衍生物或其异构体、对映体、消旋体、非对映体混合物、外消旋混合物、溶剂化物、多晶型物或药学上可接受的盐在制备药物的应用，其中所述的药物具有能够预防或治疗血液系统肿瘤，如急性白血病，慢性白血病，多发性骨髓瘤，淋巴瘤等；预防和治疗实体肿瘤，如肝癌，直肠癌，乳腺癌，食道癌等；预防和治疗皮肤病，如银屑病，痤疫等皮肤病。全文摘要本发明涉及一类具有肿瘤诱导分化作用的类维甲酸衍生物及其药物组合物与用途。本发明化合物能够预防或治疗血液系统肿瘤，如急性白血病，慢性白血病，多发性骨髓瘤，淋巴瘤等；预防和治疗实体肿瘤，如肝癌，直肠癌，乳腺癌，食道癌等；预防和治疗皮肤病，如银屑病，痤疮等皮肤病。文档编号C07C403/20GK101591280SQ20081011079公开日2009年12月2日申请日期2008年5月30日优先权日2008年5月30日发明者吴繁荣,俊李,渊汪,娟沈,石静波,阮晶晶,陈飞虎申请人:安徽医科大学;安徽省新星药物开发有限责任公司