专利名称：5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍生物的制备及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及吡唑并吡嗪酮衍生物及其应用，尤其涉及5-取代基-6-取代苯基-2-二茂 铁基吡唑并[1， 5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍生物及其在制备抗人肺癌细胞增殖药物中的应用。
背景技术：
吡嗪酮类化合物是有效的蛋白酶抑制剂，吡嗪酮类化合物的衍生物具有良好的抗炎 镇痛、抗过敏、抗哮喘、抗凝血剂、还可用于治疗某些血管疾病与神经损伤疼痛、癫痫 等疾病。多年来一直受到人们的广泛关注，成为化学家们深入研究的重点课题之一。例 如专利W01995002602、 US5753657、 US5807859、 US5902803中吡嗪酮衍生物是有效的 a-氨基羟甲基噁唑丙酸(AMPA)与N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA)受体拮抗剂，可 以用作治疗神经损伤疼痛、癫痫等疾病的药物。专利US6204263、 US6514978、 US7030110、 W09964446、 EP1589029中吡嗪酮衍生物是有效的蛋白酶抑制剂，尤其是类胰岛素丝氨酸 蛋白酶，例如胰凝乳蛋白酶，胰岛素，凝血酶，纤溶酶和Xa因子。专利US5866873、 US6011038、 US6147078、 US6387911中描述的吡嗪酮类衍生物具有抑制凝血酶和联通血 栓闭塞作用；专利US6908919中吡嗪酮衍生物作为抗凝血剂，治疗和预防各种血栓形成， 包括冠型动脉和脑血管疾病；专利W02007135131中吡嗪酮衍生物具有预防或治疗中枢 神经系统疾病、情绪紊乱、由于压力产生的抑郁症和焦虑、认知障碍、精神分裂症、帕 金森氏病、慢性疼痛等病症；专利DE4329970中吡嗪酮化合物的衍生物被描述为兴奋性 氨基酸的受体的桔抗剂；专利US4514568、 US4556711中5_苯基_2 (1H)吡嗪酮衍生物 是合成肌肉收缩化合物的有用中间体；专利US4632924中5- (4-取代)-苯基-2 (1H) 吡嗪酮衍生物具有积极的影响肌肉收縮和血管扩张的活性；专利US4870176中1-取代芳 基-1, 2-二氢-2-吡嗪酮衍生物具有防止血小板凝聚，血管扩张和抗脂肪固定等药性； 专利96103169.7、 US572346中吡啶并吡嗪酮具有抗哮喘和抗过敏的效果；专利 00805307. 3中咪唑吡啶并吡嗪酮作为活性组分用于治疗心衰、肺动脉高血压和低灌注 有关的血管疾病；专利CA2560796中描述吡嗪酮类化合物无论是单一，还是与一个或多 个其它具有治疗活性的化合物结合在配药学上都是可行的。对于急性疼痛，慢性疼痛，
内脏疼痛，发炎疼痛，神经性疼痛，尿失禁，发痒，过敏性皮炎，癫痫，肠易激综合症， 抑郁，焦虑，多发性硬化症有一定疗效。
在结构修饰方面通过药效基团的合理搭配往往可以得到更好的生物活性。因此在具 有消炎、止痛、退热、抑菌、杀菌、抗高血糖、抗癌、抗凝血剂等药理活性的吡唑类化 合物中引入吡嗪酮化学结构，以进一步探索吡嗪酮衍生物潜在药理活性和新用途有重要 的意义。同时，将二茂铁基团引入药物分子，实现对药物分子的进一步修饰，有利于改 善药物的理化性质及药效。
发明内容
本发明的目的在于提供一种吡唑并吡嗪酮衍生物特别是5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[l,5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍生物及其在制备抑制人肺癌细胞增殖药物中 的应用。
本发明所述的5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[l, 5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍 生物用下述通式(I)表示
(I)
其中
R'代表氢、d 4垸基、烷氧基、卤素或硝基； RM戈表氢、d 4烷基、芳垸基或芳氧垸基。 上述的化合物，优选方式是
R'代表氢、2-甲基、2-乙基、2-丙基、2-异丙基、2-丁基、2-异丁基、2-叔丁基、
2- 仲丁基、4-甲基、4-乙基、4-丙基、4-异丙基、4-丁基、4-异丁基、4-叔丁基、4-仲丁 基、2-甲氧基、2-乙氧基、4-甲氧基、4-乙氧基、2-氯、2-溴、4-氯或4-溴；
RM戈表氢、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、苄基、2-甲 基节基、2-乙基苄基、2-丙基节基、2-异丙基节基、2-丁基苄基、2-异丁基节基、2-叔 丁基苄基、2-仲丁基苄基、4-甲基苄基、4-乙基苄基、4-丙基苄基、4-异丙基苄基、4-丁基节基、4-异丁基节基、4-叔丁基节基、4-仲丁基苄基、2-甲氧基节基、2-乙氧基苄 基、4-甲氧基苄基、4-乙氧基苄基、2-氯苄基、2-溴苄基、4-氯苄基、4-溴苄基、2-硝 基苄基、4-硝基苄基、苯乙基、2-甲基苯乙基、2-乙基苯乙基、2-丙基苯乙基、2-异丙 基苯乙基、2-丁基苯乙基、2-异丁基苯乙基、2-叔丁基苯乙基、2-仲丁基苯乙基、4-甲 基苯乙基、4-乙基苯乙基、4-丙基苯乙基、4-异丙基苯乙基、4-丁基苯乙基、4-异丁基 苯乙基、4-叔丁基苯乙基、4-仲丁基苯乙基、2-甲氧基苯乙基、2-乙氧基苯乙基、3-甲 氧基苯乙基、4-甲氧基苯乙基、4-乙氧基苯乙基、2-氯苯乙基、2-溴苯乙基、4-氯苯乙 基、4-溴苯乙基、2-硝基苯乙基、4-硝基苯乙基、3， 4-二甲基苯乙基、3， 4-二甲氧基 苯乙基、3， 4-二乙氧基苯乙基、3， 4-二氯苯乙基、3， 4-二溴苯乙基、3， 4-二硝基苯 乙基、3-(6-甲基吡啶)甲基、3-(6-乙基吡啶)甲基、3-(6-丙基吡啶)甲基、3-(6-异丙 基吡啶)甲基、3-(6-丁基吡啶)甲基、3-(6-异丁基吡P定)甲基、3-(6-仲丁基吡啶)甲基、
3- (6-叔丁基吡啶)甲基、3-(6-甲氧吡啶)甲基、3-(6-乙氧吡啶)甲基、3-(6-氯吡啶)甲 基、3-(6-溴吡啶)甲基、3-(6-硝基吡啶)甲基或2-甲氧基苯氧乙基。
进一步优选方式是
R'代表H、 2-甲氧基、4-甲氧基、2-乙氧基、4-乙氧基、2-氯、4-氯、2-溴或4-溴；
R2代表苯乙基、2-甲基苯乙基、2-乙基苯乙基、2-丙基苯乙基、2-异丙基苯乙基、 2-丁基苯乙基、2-异丁基苯乙基、2-叔丁基苯乙基、2-仲丁基苯乙基、4-甲基苯乙基、4-乙基苯乙基、4-丙基苯乙基、4-异丙基苯乙基、4-丁基苯乙基、4-异丁基苯乙基、4-叔丁基苯乙基、4-仲丁基苯乙基、2-甲氧基苯乙基、2-乙氧基苯乙基、3-甲氧基苯乙基、 4-甲氧基苯乙基、4-乙氧基苯乙基、2-氯苯乙基、2-溴苯乙基、4-氯苯乙基、4-溴苯乙 基、3， 4-二甲基苯乙基、3, 4-二甲氧基苯乙基、3， 4-二乙氧基苯乙基、3， 4-二氯苯 乙基或2-甲氧基苯氧乙基。 最优选方式是
R'代表H、 4-甲氧基或4-氯； R2代表3-甲氧基苯乙基、 3， 4-二甲氧基苯乙基或2-甲氧基苯氧乙基。
本发明所述的通式(I)表示化合物的制备方法，包括下述步骤
将a -溴代苯乙酮或a -溴代取代苯乙酮与3-二茂铁基-l-氢-吡唑-5-羧酸乙脂以摩尔 数比为1 5: 1的比例加入到极性溶剂中，以1 10摩尔比加入缚酸剂，在回流温度下， 反应1 5小时；减压浓縮，去除溶剂。加入乙酸乙酯，过滤，滤液浓縮。浓縮物用硅 胶柱层析分离，所用展开剂为石油醚/乙酸乙酯，其体积比是2: 1，得到1- (2-氧代-2-苯乙基或取代苯乙基)-3-二茂铁基-1氢-吡唑-5-羧酸乙酯的衍生物；
将得到的1- (2-氧代-2-苯乙基或取代苯乙基)-3-二茂铁基-1氢-吡唑-5-羧酸乙 酯衍生物与烷基伯胺以其摩尔数比为1 : 2 15的比例加入到甲苯溶剂中；封管或高压 釜150-200摄氏度加热反应3-17小时；静置冷却，减压浓缩，去除溶剂。浓縮物用硅 胶柱层析分离，所用展开剂为石油醚/乙酸乙酯。最后得高纯度的5-取代基-6-取代苯基 -2-二茂铁基吡唑并[1， 5-a]吡嗪-4 (5H)-酮衍生物。
在上述化合物的制备方法中所述的a -溴代苯乙酮或a -溴代取代苯乙酮与3-二茂 铁基-l/H!比唑-5-羧酸乙酯摩尔数之比优选为3:1;所述的所述的缚酸剂与3-二茂铁 基-l/Hi比唑-5-羧酸乙酯摩尔数之比优选为3 : 1; 1- (2-氧代-2-苯乙基或取代苯乙基) -3-二茂铁基-1氢-吡唑-5-羧酸乙酯衍生物与垸基伯胺的摩尔数之比优选为1 : 10。
在上述化合物的制备方法中所述的极性溶剂是甲醇，乙腈，乙醇之一。 在上述化合物的制备方法中所述的缚酸剂是三乙胺，二异丙基乙基胺，碳酸钾之
其中缚酸剂优选碳酸钾。
上述通式(I)所示化合物的制备反应式如下:<formula>formula see original document page 6</formula>
本发明所述的化合物5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[1，5-a]吡嗪 -4(5H)-酮衍生物在制备抑制人肺癌细胞增殖药物中的应用，其中所述人肺癌细胞优选 是人肺癌A549细胞。
经药理实验评价证实本发明所述5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[1, 5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍生物在抑制人肺癌A549细胞增殖中有明显的效果，预示在临床肺癌治
疗中极具开发和应用前景。
图l:实施例3制备的化合物3 (5- (3-甲氧基苯乙基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁 基吡唑[l,5-a]批嗪-4 (5氢)-酮)对肺癌A549细胞生长抑制活性。
图2:实施例6制备的化合物6 (5- (3-甲氧基苯乙基)-6-苯基-2-二茂铁基吡唑吡嗪-4 (5氢)-酮)对肺癌A549细胞生长抑制活性。
具体实施例方式
实施例1: 5- (2- (2-甲氧基苯氧)乙基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁基吡唑[l,5-a] 吡嗪-4 (5氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-lf吡唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代-4-甲氧基苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置 回流冷凝器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应 终点。抽滤，减压浓縮，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(K/Z二l/2)作洗脱剂硅胶柱色 谱分离(100 200目硅胶)，得到卜(2- (4-甲氧基)苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基 -1〃-吡唑-5-羧酸乙酯，产率为70%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2- (4-甲氧基)苯乙基-2-氧代乙 基)-3-二茂铁基-1#-吡唑-5-羧酸乙酯(0.001摩尔)，邻甲氧基苯氧乙胺(0.010摩尔) 以及IO毫升的甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应10小时，反应至原料完全消耗，用TLC 检测反应终点。减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓縮，用乙酸乙酯-石油醚(Z/「 =3/1)作洗脱剂硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5- (2- (2-甲氧基苯 氧)乙基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁基吡唑[l，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为25%。 结构式如下
分子式C32H29FeN304 分子量575.44
性状黄色固体
熔点185-187 °C
核磁共振数据如下
1H NMR: 7.49 (d， J = 8.7 Hz， 2H, C6H4)， 7.30 (s, 1H, CH), 7.08 (s, 1H， PyzH), 6.95 (d, J = 8.7 Hz, 2H, C6H4)， 6.92-6.80 (m, 4H, C6H4), 4.79 (s, 2H, C5H4), 4.34 (s, 2H, C5H4)， 4.29-4.26 (m, 4H, CH2CH2), 4.09 (s, 5H, C5H5), 3.87 (s, 3H, CH3), 3.81 (s， 3H, CH3); 13C NMR: 160.5，155.9, 153.2, 149.3， 147.8, 133.2, 131.8, 130.7, 124.1, 121.5， 120.8, 114.1, 113.2， 111.7, 110.6， 101.9, 77.2, 69.7， 69.2， 67.0, 65.4, 55.7， 55.4, 43.6.
红外光谱数据如下
IR (KBr) k: 1668 (C=0) cm: 质谱数据如下-
ESI-MS: m/z 576.1575 (M+H+)。
实施例2: 5- (3， 4-二甲氧基苯乙基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁基吡唑[1,5-a]吡嗪 -4 (5氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-1F吡唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代-4-甲氧基苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置 回流冷凝器，上部接氮气球。加热回流3. 5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应 终点。抽滤，减压浓缩，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(WK-l/2)作洗脱剂硅胶柱色 谱分离(100 200目硅胶)，得到1- (2- (4-甲氧基)苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基
吡唑-5-羧酸乙酯，产率为70%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2- (4-甲氧基)苯乙基-2-氧代乙 基)-3-二茂铁基-1#-吡唑-5-羧酸乙酯(O.OOl摩尔)，3, 4-二甲氧基苯乙胺(0.010 摩尔)以及10毫升的甲苯，搅拌加热至150-200'C反应3小时，反应至原料完全消耗， 用TLC检测反应终点。减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓縮，用乙酸乙酯-石油 醚(「/^=3/1)作洗脱剂硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5- (3， 4-二 甲氧基苯乙基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁基吡唑[l，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为45%。 结构式如下
分子式C33H3lFeN304 分子量589.46
性状黄色固体
熔点202-204°C
核磁共振数据如下
<formula>formula see original document page 8</formula>!H雨R: 7.26 (d, J = 8.3 Hz, 2H, C6H4), 7.23 (s, 1H， CH), 7.10 (s， 1H, PyzH), 6.99 (d， J = 8.3 Hz, 2H， C6H4)， 6.69 (d, J = 8,1Hz, 1H, C6H3)， 6.45 (d， J = 8.1 Hz, 1H, C6H3), 6.31 (s, 1H, C6H3), 4.80 (s, 2H, C5H4), 4.35 (s， 2H, C5H4)， 4.09(s, 5H, C5H5)， 4.06 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2):3.88 (s, 3H， CH3), 3.83 (s, 3H, CH3), 3.71 (s, 3H, CH3), 2.79 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2); "C 丽R: 160.4, 155.6, 153.3, 148.9, 147.7, 133.4, 131.4, 130.5， 130.1, 124.4, 120.8， 114.0， 111.7,111.2,110.5,101.9, 77.2， 69.7, 69.1, 67.0， 55.9, 55.6, 55.4, 46.0, 34.4.
红外光谱数据如下
IR (KBr)1667 (C=0) era—
质谱数据如下
ESI-MS: m/z 590.1728 (M+H+)。
实施例3: 5- (3-甲氧基苯乙基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁基吡唑[1,5-a]吡嗪-4 (5 氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-1/Hi比唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代-4-甲氧基苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置 回流冷凝器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应 终点。抽滤，减压浓縮，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(K/f^l/2)作洗脱剂硅胶柱色 谱分离(100 200目硅胶)，得到1- (2- (4-甲氧基)苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基
吡唑-5-羧酸乙酯，产率为70%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2- (4-甲氧基)苯乙基-2-氧代乙 基)-3-二茂铁基-1//-吡唑-5-羧酸乙酯(0.001摩尔)，3-甲氧基苯乙胺(0.010摩尔) 以及IO毫升的甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应17小时，反应至原料完全消耗，用TLC 检测反应终点。减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓縮，用乙酸乙酯-石油醚(K/K =3/1)作洗脱剂硅胶柱色谱分离(100~200目硅胶)，得到高纯度的5- (3-甲氧基苯乙 基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁基吡唑[1，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为27%。 结构式如下
<formula>formula see original document page 9</formula>
分子式C32H29FeN303 分子量559.44
性状黄色固体
熔点169-17rC
核磁共振数据如下
& NMR: 7.27 (s, 1H, CH), 7.24 (d， J = 8.6 Hz, 2H， C6H4), 7.11 (t, J = 7.9 Hz， 1H, C6H4)， 7,10 (s, 1H, PyzH), 6.98 (d, J = 8.6 Hz, 2H, C6H4), 6.72 (dd， J = 2.0, 8.1 Hz, 1H, C6H4), 6.50(d， J = 7.5 Hz， 1H, C6H4), 6.39 (br s， 1H, C6H4)， 4.80 (s， 2H, C5H4), 4.35 (s, 2H, C5H4), 4.10 (s， 5H, C5H5), 4.07 (t， J = 8.0 Hz, 2H, CH2)， 3.88 (s, 3H, CH3), 3.69 (s, 3H, CH3)， 2.83 (t, J = 8.0 Hz, 2H， CH2); 13C NMR: 160.5, 159.7， 155.6, 153.3, 139.5, 133.4, 131.3， 130.2, 129.5, 124.3, 121.1， 114.1, 113.9， 112.5, 110,5， 101.9， 77.2, 69.7, 69.2， 67.0, 55.4， 55.1, 45.8， 34.8.
红外光谱数据如下
IR (KBr) k: 1670 (C=0) cm—1.
质谱数据如下
ESI-MS: m/z 560.1618 (M+H十)。
实施例4: 5- (2- (2-甲氧基苯氧)乙基)-6-苯基-2-二茂铁基吡唑[l，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-lf吡唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置回流冷凝 器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。抽 滤，减压浓縮，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(^/^=1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离 (100 200目硅胶)，得到l- (2-苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基-1〃-吡唑-5-羧酸乙 酯，产率为68%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2-苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁 基-1〃-吡唑-5-羧酸乙酯(0.001摩尔)，间甲氧基苯乙胺(0.010摩尔)以及10毫升的 甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应12小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。 减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓縮，用乙酸乙酯-石油醚(「/(^=3/1)作洗脱剂 硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5- (2- (2-甲氧基苯氧)乙基)-6-苯基-2-二茂铁基吡唑[1，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为31%。
结构式如下
分子式C31H27FeN303 分子量545.41
性状黄色固体
熔点206-208°C
核磁共振数据如下
NMR: 7.50-7,43 (m, 5H, C6H5), 7.32 (s， 1H, CH), 7.10 (s, 1H, PyzH), 6,91-6.80 (m, 4H，C6H4), 4.80 (s, 2H, C5H4), 4.36 (s, 2H， C5H4), 4.30-4.26 (m， 4H, CH2CH2)， 4.10 (s, 5H, C5H5): 3.81 (s, 3H, CH3); 13C NMR: 155.9, 153.4, 149.3, 147,8, 133.3, 132.1, 130.9, 130.5, 129.6, 128.7, 121.5, 120.9, 113.2, 111.7, 110.6, 102.0, 77.2， 69.8, 69.2， 67.1, 65.4， 55.6, 43.8.
红外光谱数据如下-
IR (KBr) k: 1669 (C=0) cm—1.
质谱数据如下-
ESI-MS: m/z 546.1466 (M+H+)。
实施例5: 5- (3, 4-二甲氧基苯乙基)-6-苯基-2-二茂铁基吡唑[1,5-a]吡嗪-4 (5 氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-1/Hl比唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置回流冷凝 器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。抽 滤，减压浓縮，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(^/「=1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离 (100 200目硅胶)，得到卜(2-苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基-吡唑-5-羧酸乙 酯，产率为68%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2-苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁 基-1#-吡唑-5-羧酸乙酯(O.OOl摩尔)，3， 4-二甲氧基苯乙胺(0.010摩尔)以及10 毫升的甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应10小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反 应终点。减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(K/K二3/1) 作洗脱剂硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5-(3， 4-二甲氧基苯乙基) -6-苯基-2-二茂铁基吡唑[1,5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为27%。
结构式如下
Fe
分子式C32H29FeN303 分子量559.44
性状黄色固体
熔点218-220 °C
核磁共振数据如下
丽R: 7.52-7.32 (m, 5H， C6H5)， 7.31 (s, 1H, CH), 7.11 (s, 1H, PyzH), 6.68 (d, J = 8.1 Hz, IH, C6H3),6.39 (d, J = 8.1 Hz, 1H， C6H3), 6.29 (s, 1H, C6H3), 4.82 (s， 2H, C5H4)， 4.21 (s, 2H,C5H4),4.13 (s， 5H, C5H5), 4.06 (t, J = 7.7 Hz， 2H, CH2), 3.83 (s, 3H, CH3), 3.71 (s, 3H, CH3)， 2.79 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2); 13C顧R: 155.6, 153.5, 148.9, 147.8, 133.4, 132.3, 130.4, 130.3, 130.0, 129.5, 128.7, 120.7, 111.8, 111.2, 110,5, 102.0, 76.9, 69.2, 68.7, 67.0, 55.9, 55.7: 46.2, 34.4.
红外光谱数据如下
IR (KBr)1671 (C=0) cm—1. 质谱数据如下
ESI-MS: m/z 560.1624 (M+H+)。
实施例6: 5- (3-甲氧基苯乙基)-6-苯基-2-二茂铁基吡唑[l,5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-If批唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置回流冷凝 器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。抽 滤，减压浓縮，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(「/「=1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离 (100 200目硅胶)，得到l- (2-苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基-1〃-B比唑-5-羧酸乙 酯，产率为68%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2-苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁 基-1〃-吡唑-5-羧酸乙酯(O.OOl摩尔)，3-甲氧基苯乙胺(O.OIO摩尔)以及10毫升的 甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应17小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。 减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓縮，用乙酸乙酯-石油醚(r/r二3/l)作洗脱剂 硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5- (3-甲氧基苯乙基)-6-苯基-2-二茂铁基吡唑[l，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为35%。
结构式如下.-
分子式C31H27FeN302 分子量529.41
性状黄色固体
烙点150-152 °C
核磁共振数据如下
'H NMR: 7.53-7.32 (m, 5H, C6H5)， 7.30 (s, 1H, CH), 7.11 (s, 1H, PyzH), 7.09 (t, J = 7.8 Hz:m, C6H4), 6.71 (dd, J = 2.0, 8.1 Hz, 1H， C6H4), 6.45 (d， J = 7.4Hz, 1H， C6H4), 6.37 (br s, 1H, C6H4), 4.80 (s， 2H, C5H4), 4.35 (s, 2H， C5H4)， 4.10 (s, 5H, C5H5)， 4.07 (t, J = 8.0 Hz, 2H, CH2V3.68 (s, 3H， CH3), 2.79 (t, J = 8.0 Hz, 2H, CH2); 13C NMR: 13C NMR: 159.7, 155.6， 153.4, 139.4, 133.4， 132.1, 130.4, 129.9， 129.6, 129.5, 128.7, 121.1, 113.9, 112.4， 110.5， 102.0， 77.2， 69.7， 69.2, 67.0, 55.1, 45.9, 34,8.
红外光谱数据如下
IR (KBr)1670 (C=0) cm—'.
质谱数据如下
ESI-MS: m/z 530.1510 (M+H+)。
实施例7: 5- (2- (2-甲氧基苯氧)乙基)-6-对氯苯基-2-二茂铁基吡唑[l,5-a]吡嗪 -4 (5氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-lf吡唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代-4-氯苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置回流 冷凝器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。 抽滤，减压浓缩，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(「/「=1/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离 (100 200目硅胶)，得到l- (2- (4-氯)苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基-1〃-吡唑 -5-羧酸乙酯，产率为72%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2- (4-氯)苯乙基-2-氧代乙基) -3-二茂铁基-1#-吡唑-5-羧酸乙酯(0.001摩尔)，邻甲氧基苯氧乙胺(0.010摩尔)以 及10毫升的甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应12时，反应至原料完全消耗，用TLC检 测反应终点。减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓缩，用乙酸乙酯-石油醚(r/F二 3/1)作洗脱剂硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5-(2-(2-甲氧基苯氧) 乙基)-6-对氯苯基-2-二茂铁基吡唑[l，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为37%。 结构式如下<formula>formula see original document page 13</formula>分子式C31H26CIFeN303 分子量579.85
性状黄色固体
熔点200-201 °C
核磁共振数据如下'H函R: 7.57 (d， J = 8.4 Hz， 2H, C6H4), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 2H, C6H4), 7.30 (s, 1H， CH)， 7.09 (s, 1H, PyzH), 6.92-6.76 (m, 4H, C6H4), 4.78 (s, 2H， C5H4), 4.35 (s, 2H， C5H4), 4.29-4.25 (m， 4H, CH2CH2), 4.08 (s, 5H， C5H5)， 3.80 (s, 3H， CH3); 13C NMR: 155.8， 153.6, 149.3， 147.7, 135.9, 133.3, 132.0, 130.5， 130.0, 129.0, 121.7， 120.9, 113.3， 111.7, 110.6, 102.2， 77.2, 70.1, 69.6, 67.3, 65.6, 55.6, 44.2.
红外光谱数据如下
IR (KBr) v: 1669 (C=0) cm—1.
质谱数据如下
ESI-MS: m/z 580.1081 (M)+。
实施例8: 5- (3， 4-二甲氧基苯乙基)-6-对氯苯基-2-二茂铁基吡唑[l，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-lf吡唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代-4-氯苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置回流 冷凝器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TLC检测反应终点。 抽滤，减压浓缩，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(K/r二l/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离 (100 200目硅胶)，得到1- (2- (4-氯)苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基-1//-吡唑 -5-羧酸乙酯，产率为72%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2- (4-氯)苯乙基-2-氧代乙基) -3-二茂铁基-1#-吡唑-5-羧酸乙酯(0.001摩尔)，3， 4-二甲氧基苯乙胺(0.010摩尔) 以及10毫升的甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应10小时，反应至原料完全消耗，用TLC 检测反应终点。减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓縮，用乙酸乙酯-石油醚(K/K =3/1)作洗脱剂硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5- (3， 4-二甲氧基 苯乙基)-6-对氯苯基-2-二茂铁基吡唑[1，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为20%。 结构式如下
分子式C32H28ClFeN303 分子量593.88
性状黄色固体
熔点213-215 °C
核磁共振数据如下'H鹿R: 7.46 (d, J = 7.7 Hz, 2H， C6H4), 7.26 (s, 1H, CH), 7.20 (d, J = 7.7 Hz, 2H, C6H4), 7.12 (s， 1H, PyzH), 6.70 (d, J = 8.0 Hz, IH, C6H4), 6.42 (d, J = 8.0 Hz, IH, C6H3), 6.27 (s, IH C6H3), 4.80 (s, 2H, C5H4), 4.36 (s, 2H, C5H4), 4.09 (s， 5H, C5H5), 4.05 (t, J = 7.4 Hz， 2H, CH2), 3.84 (s， 3H， CH3), 3.71 (s, 3H, CH3)， 2.80 (t, J = 7.4 Hz, 2H, CH2); 13C NMR: 155.5, 153.7, 150.0, 147.8， 135.8, 133.4, 131.3， 130.7, 130.2， 129.2, 129.0, 120.8， 111.6, 111.2, 110.6, 102.2， 77.2, 69.7, 69.2， 67.0, 55.9, 55.6， 46.2， 34.3.
红外光谱数据如下
IR (KBr)1670 (C=0) cm—1.
质谱数据如下
ESI-MS: m/z 594,1238 (M+H+)。
实施例9: 5- (3-甲氧基苯乙基)-6-对氯苯基-2-二茂铁基吡唑[1, 5-a]吡嗪-4 (5氢) -酮的制备
1) 在100毫升的圆底烧瓶中加入碳酸钾(0.0075摩尔)，3-二茂铁基-lf吡唑-5-羧 酸乙酯(0.0025摩尔)，a-溴代-4-氯苯乙酮(0.0075摩尔)以及乙腈(20毫升)，装置回流 冷凝器，上部接氮气球。加热回流3.5小时，反应至原料完全消耗，用TIX检测反应终点。 抽滤，减压浓縮，去除溶剂，用乙酸乙酯-石油醚(r/K二l/2)作洗脱剂硅胶柱色谱分离 (100 200目硅胶)，得到l- (2- (4-氯)苯乙基-2-氧代乙基)-3-二茂铁基-1//-吡唑 -5-羧酸乙酯，产率为72%;
2) 在200毫升的玻璃封管或高压釜中加入1- (2- (4-氯)苯乙基-2-氧代乙基) -3-二茂铁基-1〃-吡唑-5-羧酸乙酯(0.001摩尔)，3-甲氧基苯乙胺(O.OIO摩尔)以及 IO毫升的甲苯，搅拌加热至150-20(TC反应10小时，反应至原料完全消耗，用TLC检 测反应终点。减压抽滤，用乙酸乙脂淋洗，母液减压浓縮，用乙酸乙酯-石油醚(K/^^ 3/1)作洗脱剂硅胶柱色谱分离(100 200目硅胶)，得到高纯度的5- (3-甲氧基苯乙基) -6-对氯苯基-2-二茂铁基吡唑[1,5-3]吡嗪-4 (5氢)-酮产率为32%。 结构式如下
分子式C31H26ClFeN302 分子量563.86
性状黄色固体
熔点167-169 °C核磁共振数据如下
!H NMR: 7.44 (d, J = 8.3 Hz， 2H, C6H4)， 7.25 (s, 1H， CH), 7.19 (d, J = 8.3 Hz, 2H, C6H4),
7.12 (t， J = 7.9 Hz, 2H， C6H4 and PyzH), 6.74 (dd, J = 2.2, 8.1 Hz, IH, C6H4), 6.48 (d, J = 7.4
Hz, IH, C6H4), 6.36 (br s, IH, C6H4), 4.80 (s, 2H, C5H4), 4.36 (s， 2H， C5H4), 4.10 (s, 5H,
C5H5)， 4.07 (t, J = 7.6 Hz, 2H， CH2), 3.69 (s, 3H， CH3), 2.84 (t, J = 7.6 Hz, 2H, CH2); 13C
NMR: 159.8, 155.5， 153.7, 139.2, 135.9， 133.4, 131.2, 130.6, 129.6, 129.2， 129.0, 121.1，
113.8, 112.7, 110.6， 102.2, 77.2, 69.9, 69.4, 67.2， 55.1, 45.9, 34.7.
红外光谱数据如下.-
IR (KBr)1671 (00) cm—1.
质谱数据如下-
ESI-MS: m/z 564.1128 (M+H+)。
实施例10:本发明所述化合物抑制人肺癌细胞增殖试验
以常规方式将人肺癌A549细胞置培养液RPMI 1640中在37。C并含5。/。 C0z空气条件下培 养，然后以密度为6250±50个/ml的细胞量植入96孔培养板，培养条件下用本发明实 施例所述方法制备的化合物1 9分别以5幽，10幽，20幽和40刚的药物浓度量处理培 养板中人肺癌A549细胞48 h，用MTT法测定，评价化合物1 9对人肺癌A549细胞生长抑 制活性。
结果显示实施例3和实施例6所述方法制备的化合物3 (5- (3-甲氧基苯乙基)-6-对甲氧苯基-2-二茂铁基吡唑[l，5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮)和化合物6 (5- (3-甲氧基苯 乙基)-6-苯基-2-二茂铁基吡唑[l,5-a]吡嗪-4 (5氢)-酮)有明显抑制肺癌A549细胞 生长活性(结果见图1和图2)。
结论本发明所述5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[l，5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍生物在抑制人肺癌细胞增殖中效果明显，预示在临床肺癌治疗中极具开发和应用前
景
权利要求
1.下述通式(I)的化合物，其中R1代表氢、C1～4烷基、烷氧基、卤素或硝基；R2代表氢、C1～4烷基、芳烷基或芳氧烷基。
2. 按照权利要求1所述的化合物，其特征是-R'代表氢、2-甲基、2-乙基、2-丙基、2-异丙基、2-丁基、2-异丁基、2-叔丁基、2- 仲丁基、4-甲基、4-乙基、4-丙基、4-异丙基、4-丁基、4-异丁基、4-叔丁基、4-仲丁 基、2-甲氧基、2-乙氧基、4-甲氧基、4-乙氧基、2-氯、2-溴、4-氯或4-溴；R2代表氢、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、苄基、2-甲 基苄基、2-乙基苄基、2-丙基苄基、2-异丙基苄基、2-丁基苄基、2-异丁基苄基、2-叔 丁基苄基、2-仲丁基苄基、4-甲基苄基、4-乙基苄基、4-丙基苄基、4-异丙基苄基、4-丁基节基、4-异丁基卡基、4-叔丁基节基、4-仲丁基苄基、2-甲氧基苄基、2-乙氧基苄 基、4-甲氧基苄基、4-乙氧基苄基、2-氯苄基、2-溴苄基、4-氯苄基、4-溴苄基、2-硝 基节基、4-硝基节基、苯乙基、2-甲基苯乙基、2-乙基苯乙基、2-丙基苯乙基、2-异丙 基苯乙基、2-丁基苯乙基、2-异丁基苯乙基、2-叔丁基苯乙基、2-仲丁基苯乙基、4-甲 基苯乙基、4-乙基苯乙基、4-丙基苯乙基、4-异丙基苯乙基、4-丁基苯乙基、4-异丁基 苯乙基、4-叔丁基苯乙基、4-仲丁基苯乙基、2-甲氧基苯乙基、2-乙氧基苯乙基、3-甲 氧基苯乙基、4-甲氧基苯乙基、4-乙氧基苯乙基、2-氯苯乙基、2-溴苯乙基、4-氯苯乙 基、4-溴苯乙基、2-硝基苯乙基、4-硝基苯乙基、3， 4-二甲基苯乙基、3， 4-二甲氧基 苯乙基、3， 4-二乙氧基苯乙基、3， 4-二氯苯乙基、3， 4-二溴苯乙基、3， 4-二硝基苯 乙基、3-(6-甲基吡啶)甲基、3-(6-乙基吡啶)甲基、3-(6-丙基吡啶)甲基、3-(6-异丙 基吡啶)甲基、3-(6-丁基吡啶)甲基、3-(6-异丁基吡啶)甲基、3-(6-仲丁基吡啶)甲基、3- (6-叔丁基吡啶)甲基、3-(6-甲氧吡P定)甲基、3-(6-乙氧吡啶)甲基、3-(6-氯吡啶)甲 基、3-(6-溴吡啶)甲基、3-(6-硝基吡啶)甲基或2-甲氧基苯氧乙基。
3. 按照权利要求2所述的化合物，其特征是R'代表H、 2-甲氧基、4-甲氧基、2-乙氧基、4-乙氧基、2-氯、4-氯、2-溴或4-溴； R2代表苯乙基、2-甲基苯乙基、2-乙基苯乙基、2-丙基苯乙基、2-异丙基苯乙基、 2-丁基苯乙基、2-异丁基苯乙基、2-叔丁基苯乙基、2-仲丁基苯乙基、4-甲基苯乙基、4- 乙基苯乙基、4-丙基苯乙基、4-异丙基苯乙基、4-丁基苯乙棊、4-异丁基苯乙基、4-叔丁基苯乙基、4-仲丁基苯乙基、2-甲氧基苯乙基、2-乙氧基苯乙基、3-甲氧基苯乙基、4-甲氧基苯乙基、4-乙氧基苯乙基、2-氯苯乙基、2-溴苯乙基、4-氯苯乙基、4-溴苯乙 基、3， 4-二甲基苯乙基、3, 4-二甲氧基苯乙基、3， 4-二乙氧基苯乙基、3， 4-二氯苯 乙基或2-甲氧基苯氧乙基。
4. 按照权利要求3所述的化合物，其特征是R'代表H、 4-甲氧基或4-氯；R2代表3-甲氧基苯乙基、3， 4-二甲氧基苯乙基或2-甲氧基苯氧乙基。
5. 权利要求1 4中任意一项所述的化合物在制备抑制人肺癌细胞增殖药物中的应用。
6. 按照权利要求5所述的应用，其特征是所述人肺癌细胞是人肺癌A549细胞。
全文摘要
本发明公开了一种5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[1，5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍生物及其制备与应用，其中所述化合物的合成方法是将α-溴代苯乙酮或α-溴代取代苯乙酮与3-二茂铁基-1-氢-吡唑-5-羧酸乙脂在碳酸钾做缚酸剂的条件下，在乙腈中回流反应制得1-(2-氧代-2-苯乙基或取代苯乙基)-3-二茂铁基-1氢-吡唑-5-羧酸乙酯的衍生物，然后将得到的衍生物在甲苯溶液中与胺反应得到5-取代基-6-取代苯基-2-二茂铁基吡唑并[1，5-a]吡嗪-4(5H)-酮衍生物。本发明的化合物通过药理实验评价具有抑制人肺癌细胞增殖的明显效果，在临床肺癌治疗中极具开发和应用前景。
文档编号C07F17/00GK101633675SQ20091001733
公开日2010年1月27日 申请日期2009年7月27日 优先权日2009年7月27日
发明者张尚立, 苗俊英, 谢永生, 赵宝祥 申请人:山东大学