用于制备软海绵素b的中间体的制作方法

专利名称：用于制备软海绵素b的中间体的制作方法
技术领域：
本发明涉及在合成药用活性大环内酯化合物中，用作中间体的化合物。
背景技术：
本发明涉及药用活性大环内酯，其合成以及其合成所用的中间体。软海绵素 B(Halichondrin B)是一种有效的抗癌剂，最初从海洋海绵黑色软海绵(Halichondria okadai))中分离出来，随后在小轴海绵属(Axinella sp. )、Phakellia carteri和扁矛海绵 属(Lissonderndryx sp.)中发现。1992年公布了软海绵素B的全合成(Aicher，T.D.等， J.Am. Chem. Soc. 114 =3162-3164)。已证明软海绵素B在体外抑制微管蛋白聚合、微管装配、 β s_微管蛋白交联、GTP及长春花碱与微管蛋白结合以及依赖于微管蛋白的GTP水解，其在 体外及体内均已显示出抗癌特性。因此，需要对制备用作抗癌剂的软海绵素B类似物的合 成方法进行开发。

发明内容
如本文所述，本发明提供制备具有如抗癌活性或抗有丝分裂(阻断有丝分裂)活 性等药用活性的软海绵素B类似物的方法。这些化合物包括式B-1939的化合物 这些化合物用于治疗癌症和其它增生性疾病，包括但不限于黑素瘤、纤维肉瘤、白 血病、结肠癌、卵巢癌、乳腺癌、骨肉瘤、前列腺癌、肺癌和ras转化的成纤维细胞。本发明还 提供用于制备所述软海绵素B类似物的合成中间体。
具体实施例方式本发明的方法和中间体用于制备在诸如美国专利6，365，759和美国专利 6，469，182 (引入本文作为参考)中所描述的各种软海绵素B类似物。如以下方案I所示， 总体上通过对三个片段F-l、F-2和F-3的组装来制备软海绵素B类似物。方案I 1、片段 F-I根据一种实施方式，本发明提供化合物F-I 其中..PG1和PG2各自独立为氢或合适的羟基保护基·，R1 为 R或OR;R2 为 CHO 或-CH = CH2 ；以及每个R独立为氢、C1^4卤代脂族基、苄基或Ch脂族基，条件是当R1为OMe时，PG1 和PG2不形成丙酮化合物基团。某些实施方式中，R1为OR。其它实施方式中，R1为0R，其中R为氢、甲基或苄基。某些实施方式中，PG1和PG2为氢。其它实施方式中，PG1和PG2中的一个为氢。合适的羟基保护基为本领域所熟知，包括在“有机合成中的保护基团(protecting Groups in organic synthesis)，，(Τ. W. Greene禾口P. G. Μ. Wuts,第 3版,John Wiley & Sons, 1999，其全文引入本文作为参考)中详述的那些基团。某些实施方式中，PG1和PG2各自连同 与之结合的氧原子一起独立选自酯、醚、甲硅烷基醚、烷基醚、芳基烷基醚和烷氧基烷基醚。 这种酯的例子包括甲酸脂、乙酸酯、碳酸酯和磺酸酯。具体的例子包括甲酸酯、苯甲酰甲酸 酯、氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、3-苯 基丙酸酯、4-氧代戊酸酯、4，4-(亚乙基二硫代)戊酸酯、新戊酸酯(三甲基乙酰基)、巴豆 酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸酯、对苄基苯甲酸酯、2，4，6_三甲基苯甲酸酯；或者碳酸 酯，例如甲基、9-芴基甲基、乙基、2，2，2-三氯乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-(苯磺酰)乙基、乙烯基、烯丙基和对硝基苄基碳酸酯。这种甲硅烷基醚的例子包括三甲基甲硅烷 基醚、三乙基甲硅烷基醚、叔丁基二甲基甲硅烷基醚、叔丁基二苯基甲硅烷基醚、三异丙基 甲硅烷基醚及其它的三烷基甲硅烷基醚。烷基醚包括甲基醚、苄基醚、对甲氧基苄基醚、3， 4- 二甲氧基苄基醚、三苯甲基醚、叔丁基醚、烯丙基醚以及烯丙氧羰基醚或衍生物。烷氧基 烷基醚包括缩醛，例如甲氧基甲基醚、甲硫基甲基醚、(2-甲氧基乙氧基)甲基醚、苄氧基甲 基醚、β-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基醚和四氢吡喃基醚。芳基烷基醚的例子包括苄基 醚、对甲氧基苄基醚(MPM)、3，4- 二甲氧基苄基醚、0-硝基苄基醚、对硝基苄基醚、对商代苄 基醚、2，6-二氯苄基醚、对氰基苄基醚、2-和4-吡啶甲基醚。某些实施方式中，F-I的PG1和PG2部分中的一个或两个为甲硅烷基醚或芳基烷基 醚。其它的实施方式中，F-I的PG1和PG2部分中的一个或两个为叔丁基二甲基甲硅烷基 (t-butyldimethylsilyl)或苯甲酰基。另外的实施方式中，F-I的PG1和PG2部分均为叔丁
基二甲基甲硅烷基。根据另一种实施方式，PG1和PG2连同与它们结合的氧原子一起形成二醇保护 基，例如环缩醛或缩酮，此类基团包括亚甲基、亚乙基、亚苄基、异亚丙基、亚环己基和亚环 戊基；亚甲硅基衍生物，例如二叔丁基亚甲硅基和1，1，3，3_四异丙基二亚硅氧烷基衍生 物；环碳酸酯及环硼酸酯。加入和脱除此类羟基保护基及其它保护基的方法为本领域所 熟知，且可得自诸如“保护基(protecting Groups) ” (P. J. Kocienski, Thieme, 1994)和 “有机合成中的保护基团(protective Groups in organic synthesis)，，(Τ· W. Greene 禾口 P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley & Sons，1999)。根据另一种实施方式，PG1和PG2共同形 成丙酮化合物基。根据一种实施方式，R2为CH0。根据另一种实施方式，R2为-CH = CH2。某些实施方式中，本发明提供式F-I的化合物，具有化合物F-Γ所示的立体化学 其中每个变量同上文定义以及上文及此处的分类及亚类描述。某些实施方式中，提供以下化合物F-Ia和F_lb 其中，“TBS”指叔丁基二甲基甲硅烷基
F-Ia和F_lb的详细合成在下面的实施例中进行阐述。2、片段 F-2根据另一种实施方式，本发明提供化合物F-2 其中每个独立为单键或双键，条件是两个=^s基不同时为双键；LG1为合适的离去基团；X 为卤素或-OSO2 (Ry)；Ry为CV6脂族基或者饱和的、部分不饱和的或完全不饱和的5-7元环，其中Ry任选 地被至多3个选自卤素、R、N02、CN、OR、SR或N(R)2的基团取代；每个R独立为氢、C1^6卤代脂族基或Cy脂族基；以及PG3为合适的羟基保护基。本文所用的合适的离去基团是容易被需要引入的化学基团取代的化学基团。合 适的离去基团为本领域所熟知，例如参见“高等有机化学(Advanced Organic Chemistry) (Jerry March，第 4 版，pp. 351-357，John Wiley and Sons, N. Y. (1992))。此类离去基团 包括但不限于商素、烷氧基、磺酰氧基、任选取代的烷基磺酰氧基、任选取代的烯基磺酰氧 基、任选取代的芳基磺酰氧基和重氮基。合适的离去基团的例子包括氯、碘、溴、氟、甲磺酰 基、甲苯磺酰基(mesyl)、三氟甲磺酸根(triflate)、硝基苯磺酰基(nosyl)和溴苯磺酰基 (brosyl)。某些实施方式中，F-2的LG1部分(moiety)为磺酰氧基、任选取代的烷基磺酰氧 基、任选取代的烯基磺酰氧基或任选取代的芳基磺酰氧基。另外的实施方式中，F-2的LG1 部分为任选取代的烷基磺酰氧基。其它的实施方式中，F-2的LG1部分为甲磺酰基或甲苯磺 酰基。某些实施方式中，F-2的X部分为卤素。另外的实施方式中，F-2的X部分为磺酰 氧基、任选取代的烷基磺酰基、任选取代的烯基磺酰基或任选取代的芳基磺酰基。其它实施 方式中，F-2的X部分为三氟甲磺酸根。某些实施方式中，F-2的PG3部分连同与之结合的氧原子一起为甲硅烷基醚。其它 实施方式中，F-2的PG3部分连同与之结合的氧原子一起为酯基。根据本发明的一个方面， F-2的PG3部分连同与之结合的氧原子一起为叔丁基二甲基甲硅烷基。根据本发明的另一 个方面，F-2的PG3部分连同与之结合的氧原子一起为新戊酰基或苯甲酰基。某些实施方式中，本发明提供式F-2的化合物，具有化合物F-2’所示的立体化学
其中每个变量同上文定义以及上文及此处的分类及亚类描述t 某些实施方式中，提供化合物F-2a或F-2b
其中“MsO”指甲磺酸根，“TfO”指三氟磺酸根，“Ορν”指新戊酸根(pivaloate)， “ OBz ”指苯甲酸根以及“ TsO，，指甲苯磺酸根。另外的实施方式中，本发明提供式F_2b的化合物，其中所述化合物为结晶。根据 另一种实施方式，提供式F-2b的化合物，其中所述化合物从链烷溶剂中结晶。某些实施方 式中，提供F-2b结晶，其中所述化合物从戊烷或庚烷中结晶。其它实施方式中，提供F-2b 结晶，其中所述化合物在约O V结晶。如以下方案A所示，式F-2的化合物一般由中间体F_2d和F_2e制备。方案A 因此，本发明的另一个方面是提供式F_2d的化合物 其中R，为-CH= CH2 或-C(0)H ；AlK为直链或支链的CV4脂族基；以及PG5为合适的羟基保护基。
合适的羟基保护基PG5同上文对化合物F-2的PG3部分的描述和定义。某些实施 方式中，PG5连同与之结合的氧原子一起为甲硅烷基醚。另外的实施方式中，PG5为叔丁基
二甲基甲硅烷基。根据一种实施方式，化合物F_2d的AlK部分为甲基。某些实施方式中，提供式F_2d’的化合物 本发明的另一个方面提供式F_2e的化合物 其中R”为 OH、OPG3 或 LG4 ；LG4为合适的离去基团；以及每个PG3独立为合适的羟基保护基，条件是，当PG3为叔丁基二苯基甲硅烷基时，R” 不是OMs。本领域的普通技术人员能认识到化合物F_2e的R”部分可由OH变换成保护的羟 基、OPG3或直接变换成LG4。这种变换为本领域熟练人员所知，尤其包括这里描述的那些。 某些实施方式中R”为OH或LG4。式F-2e的离去基团LG4同上文对化合物F-2的LG1部分 的描述和定义。某些实施方式中，LG4为甲苯磺酰基或甲磺酰基。化合物F_2e的PG3部分同上文对化合物F_2的PG3部分的定义和描述。某些实施 方式中，PG3连同与之结合的氧原子一起构成甲硅烷基醚。另外的实施方式中，PG3为叔丁
基二苯基甲硅烷基。本发明的又一个方面提供式F_2f的化合物 其中A1K、PG3和PG5同一般性定义以及上文和此处的分类及亚类描述。通过本文 所述的方法及本领域已知的那些方法，用式F-2f的化合物制备式F-2的化合物。F-2a的详细合成在下面的实施例中进行阐述。或者，如以下方案II所示，由D-奎尼酸制备式F-2的化合物。式F_2的化合物的 详细制备在下面的实施例中进行阐述。
以上方案III表示通过Eschenmoser-Tanabe碎裂反应由中间体12制备中间体17 的另一种方法，其中每个Rx独立为OPGx或CN，其中PGx为本文所述的合适的羟基保护基。 然后根据以上方案II，用中间体17制备式F-2的化合物。从D-奎尼酸制备式F-2的化合物的又一种方法提供了由中间体9转换成中间体 17的又一条路线(如以下方案IV所示)。方案IV
ER-817664。如以上方案V所述，PG5和PG6各自独立为合适的羟基保护基。某些实施方式 中，PG5和PG6共同形成环二醇保护基。其它实施方式中，PG5和PG6共同形成亚环己基保护 基。如以上方案V所述，LG5为合适的离去基团。这种合适的离去基团为本领域所熟知，包 括本文所述的那些基团。某些实施方式中，LG5为甲磺酰基或甲苯磺酰基。根据另一种实施方式，本发明提供式A的化合物 其中=U表示单键或双键；η为 1、2或3;PG5和PG6各自独立为合适的羟基保护基；W 为 CH-A 或 C (0)；A为氧代或CV6脂族基，其中A任选地被一个或更多个Q1基团取代；每个Q1独立选自氰基、卤素、叠氮基、氧代、OR、SR、SO2R, OSO2R, N(R)2, NR(CO)R, NR(CO) (CO) R、NR(CO)N(R)2、NR(CO) OR、(CO) OR、0(CO) R、(CO)N(R)2、O(CO)N(R)2 或 0PG1，其 中PG1为合适的羟基保护基，其中A上的两个Q1任选地结合在一起以形成具有0-4个独立选自氮、氧或硫的杂原子 的3-8元的饱和环、部分不饱和环或芳香环；以及每个R独立选自氢或任选取代的选自Cp6脂族基；5-10元的饱和碳环、部分不饱和 碳环或芳香碳环；或者具有0-4个独立选自氮、氧或硫的杂原子的4-10元的饱和环、部分不 饱或环或芳香环的基团，其中同一氮原子上的两个R基任选地与所述氮原子结合在一起，以形成具有1-4个独 立选自氮、氧或硫的杂原子的3-8元的饱和环、部分不饱和环或芳香环。某些实施方式中，本发明提供式A的化合物，具有式A’所示的立体化学 其中每个变量同上文定义以及上文及此处的分类及亚类描述。某些实施方式中，本发明提供式A’的化合物，其中A为C(O)且所述化合物具有 A’ -1结构式 其中每个变量同上文定义以及上文及此处的分类及亚类描述。如上文所一般性定义的，式A和A’的A基为Cp6脂族基，其中A任选地被Q1取代。 某些实施方式中，式A和A’的A基为C2_5脂族基，其中A被一个或更多个Q1基团取代。如上文所一般性定义的，式A和A’的每个Q1基独立选自氰基、卤素、叠氮基、氧代、 OR、SR、SO2R, OSO2R, N (R) 2、NR (CO) R、NR (CO) (CO) R、NR (CO) N (R) 2、NR (CO) OR、(CO) OR、0 (CO) R、 (⑶川㈨^⑶丨则队或。 ^其中PG1为合适的羟基保护基。某些实施方式中，式A和A’ 的每个Q1基独立选自氰基、卤素、叠氮基、氧代、N (R) 2、OR、SR、SO2R或0S02R。另外的实施方 式中，式A和A’的每个Q1基独立选自氰基、卤素、叠氮基、氧代、OR、SR、SO2R, OSO2R^N(R)2, NR(CO) OR、NR(CO) R和0 (CO) N(R)20其它的实施方式中，示例性Q1基包括NH(CO) (CO)-(杂 环基或杂芳基)、OSO2-(芳基或取代芳基)、O(CO) NH-(芳基或取代芳基)、氨基烷基、羟基 烷基、NH(CO) (CO)-(芳基或取代芳基)、NH(CO)-(烷基)(杂芳基或杂环基)、0(取代的或 未取代的烷基)(取代的或未取代的芳基)以及NH(CO)(烷基)(芳基或取代芳基)。某些实施方式中，式A和A’的A基具有以下特征之一(I)A具有至少一个选自羟基、氨基、叠氮基、卤素和氧代的取代基；(2) A为CV6烷基，具有至少一个选自羟基、氨基和叠氮基的取代基；(3) A具有至少两个独立选自羟基、氨基和叠氮基的取代基；(4) A具有至少两个独立选自羟基和氨基的取代基；(5) A具有至少一个羟基取代基和至少一个氨基取代基；(6) A具有至少两个羟基取代基；(7)A为取代的C2_4脂族基；(8)A为取代的(3脂族基；(9)A具有在相对于将A连接至含G环的碳原子的α位上的(S)-羟基或(R)-羟 基；以及(IO)A为CV6饱和脂族基，具有至少一个选自羟基和氰基的取代基。术语“(S)-羟基”指具有羟基的碳原子的构型为(S)。本发明的实施方式还包括 化合物，其中A在相对于与A相连的碳原子的(1) α和Υ、(2) β和γ或(3) α和β位的 各个碳原子上至少被取代一次。每个α、β和Y碳原子独立具有(R)或(S)构型。某些 实施方式中，本发明提供所述化合物，其中A在相对于与A相连的碳原子的α和β位的各 个碳原子上至少被取代一次。式A及Α’的示例性A基包括2，3-二羟丙基、2-羟乙基、3-羟基-4-全氟丁基、2，4， 5_三羟戊基、3-氨基-2-羟丙基、1，2-二羟乙基、2，3-二羟基-4-全氟丁基、3-氰基-2-羟 丙基、2-氨基-1-羟乙基、3-叠氮基-2-羟丙基、3，3- 二氟-2，4- 二羟丁基、2，4_ 二羟丁 基、2-羟基-2-对氟苯基-乙基、-CH2 (CO)(取代的或未取代的芳基)、-CH2 (CO)(烷基或取 代烷基，如卤代烷基或羟烷基)和3，3- 二氟-2-羟基戊-4-烯基。
某些实施方式中，A和A’之一的A基为3-氨基-2-羟丙基。根据一个方面，本发明提供一种式A和A’之一的化合物，其中Q1为0PG1，其中PG1 为合适的羟基保护基。合适的羟基保护基为本领域所熟知，包括在“有机合成中的保护基 团” (T.W.Greene 和 P. G.M. Wuts，第 3 版，John Wiley & Sons，1999，将其全文引入本文作为 参考)中详述的那些基团。某些实施方式中，式A和A’之一的PG1部分连同与之结合的氧 原子一起选自酯、醚、甲硅烷基醚、烷基醚、芳基烷基醚和烷氧基烷基醚。这种酯的例子包括 甲酸酯、乙酸酯、碳酸酯和磺酸酯。具体的例子包括甲酸酯、苯甲酰甲酸酯、氯乙酸酯、三氟 乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、对氯苯氧基乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧代 戊酸酯、4，4-(亚乙基二硫代)戊酸酯、新戊酸酯(三甲基乙酰基)、巴豆酸酯、4-甲氧基巴 豆酸酯、苯甲酸酯、对苄基苯甲酸酯、2，4，6_三甲基苯甲酸酯，或者碳酸酯，例如甲基、9-芴 基甲基、乙基、2，2，2-三氯乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-(苯磺酰)乙基、乙烯基、烯 丙基和对硝基苄基碳酸酯。这种甲硅烷基醚的例子包括三甲基甲硅烷基醚、三乙基甲硅烷 基醚、叔丁基二甲基甲硅烷基醚、叔丁基二苯基甲硅烷基醚、三异丙基甲硅烷基醚及其它的 三烷基甲硅烷基醚。烷基醚包括甲基醚、苄基醚、对甲氧基苄基醚、3，4_ 二甲氧基苄基醚、三 苯甲基醚、叔丁基醚、烯丙基醚以及烯丙氧羰基醚或衍生物。烷氧基烷基醚包括缩醛，例如 甲氧基甲基醚、甲硫基甲基醚、(2-甲氧基乙氧基)甲基醚、苄氧基甲基醚、(三甲基甲 硅烷基)乙氧基甲基醚和四氢吡喃基醚。芳基烷基醚的例子包括苄基醚、对甲氧基苄基醚 (MPM)、3，4- 二甲氧基苄基醚、0-硝基苄基醚、对硝基苄基醚、对卤代苄基醚、2，6- 二氯苄基 醚、对氰基苄基醚、2-和4-吡啶甲基醚。某些实施方式中，式A和Α’之一的PG1部分连同与之结合的氧原子为甲硅烷基醚 或芳基烷基醚。其它的实施方式中，式A和Α’之一的PG1部分为叔丁基二甲基硅烷基或苯甲 酰基。另外的实施方式中，式A和Α’之一的PG1部分为叔丁基二甲基甲硅烷基(“TBS”)。如上文所一般性定义的，A上的两个Q1任选地结合在一起以形成具有0-4个独立 选自氮、氧或硫的杂原子的3-8元的饱和环、部分不饱和环或芳香环。某些实施方式中，A上 的两个Q1共同形成环氧化环。某些实施方式中，式A和Α’的PG5和PG6基团独立选自上文对式A和Α’的PG1基 团所描述的那些合适的保护基。其它实施方式中，式A和Α’的PG5和PG6基团结合在一起 以形成环二醇保护基。这类二醇保护基为本领域所熟知，包括Greene所描沭的那㈣基团, 且包括亚环己基和亚苄基二醇保护基。某些实施方式中，本发明根据以下方案V-a、V_b和V-c，提供一种制备式F_2的化 合物的方法。方案V_a 方案V-C 以ER-817664作为结晶中间体，方案VI-a表示用该化合物制备用于制备式F-2的 化合物的中间体的一种通用方法。 如以下方案VI-b所示，在另一种制备用于制备式F-2的化合物的中间体的方法 中，使用以上方案VI-a所述的三醇中间体。方案VI-b 在如上所示的方案VI-b中，用高碘酸盐处理三醇中间体以生成醛。使该化合物 与甲基维悌希试剂同系化(homologated)，将所得的烯烃还原成酯类化合物。用N-碘代丁 二酰亚胺处理剩余的游离羟基以生成碘代中间体，用硼氢化钠还原酯以生成上述羟基化合 物。本领域普通技术人员将认识到所得的碘代化合物与以上方案II所述的化合物21相符， 其中化合物21在羟基位置上具有保护基。最后经过锌处理得到上述内酯。本领域普通技 术人员将认识到所得的内酯化合物与以上方案II所述的化合物22相符，其中化合物22在 羟基位置上具有保护基。如以下方案VII所示，在用于从D-奎尼酸制备式F-2的化合物的中间体的另一种 制备方法中，提供了起始于方案II所述的中间体2的又一条路线。方案VII 在以上方案VII中，用中间体2(得自方案II)制备立体选择形式的ER-812829。 优选地，其它保护基团可用于保护二醇ER-812829。这类基团为本领域普通技术人员所已 知，包括亚环己基和亚苄基二醇保护基。首先，步骤(a)中，用2-溴氯乙酸处理ER-811510的羟基以生成ER-812771。用与Murphy等描述的方法(Tettrahedron Letters,40, (1991)3455-3456)基本相似的方法，以三苯膦处理该溴代中间体以就地(in situ)生成维 悌希试剂。然后该维悌希试剂形成内酯ER-812772。步骤(b)中，对双键进行立体选择加氢 得到 ER-812829。如以下方案Vll-a所示，本发明还提供一种用于从D-奎尼酸制备式F_2的化合物 的中间体的制备方法，该方法起始于以上方案VII所示的中间体ER-812829。 3、片段 F-3根据另一种实施方式，本发明提供化合物F-3 其中，每个PG4独立选自合适的羟基保护基；R3 为 CHO 或 C (O)OR4 ；R4为合适的羧基保护基；以及LG2为合适的离去基团。合适的羧酸酯保护基为本领域所熟知，在“有机合成中的保护基团”(T.W.Greene 和P.G.M.Wuts，第3版，John Wiley & Sons, 1999)中得到详细描述。某些实施方式中，F-3的R4基为任选取代的Cp6脂族基或任选取代的芳基。合适的R4基的例子包括甲基、乙基、 丙基、异丙基、丁基、异丁基、苄基和苯基，其中每个基团任选被取代。如上文所述，合适的离去基团为本领域所熟知，例如参见“高等有机化学 (Advanced organic Chemistry) (Jerry March，第4片反，pp. 351-357，John Wiley and Sons， N. Y. (1992))。此类离去基团包括但不限于卤素、烷氧基、磺酰氧基、任选取代的烷基磺酰 氧基、任选取代的烯基磺酰氧基、任选取代的芳基磺酰氧基、甲硅烷基和重氮基(diazonium moieties)。合适的离去基团的例子包括氯、碘、溴、氟、甲磺酰基(mesyl)、甲苯磺酰基、三氟 甲磺酸根(triflate)、硝基苯磺酰基(nosyl)和溴苯磺酰基(brosyl)。某些实施方式中， F-3的LG2部分为碘。根据另一种实施方式，合适的离去基团可在反应介质中就地生成。例如，式F-3的 化合物中的LG2可由该式F-3的化合物的前体就地生成，其中所述前体含有容易被LG2就地 取代的基团。这种取代的一个具体例子中，所述式F-3的化合物的前体含有被例如碘等LG2 就地取代的基团(例如，三甲基甲硅烷基)。碘的来源可以为诸如N-碘代丁二酰亚胺等。 合适离去基团的这类就地生成已为本领域所熟知，例如参见Id。如上文所述，合适的羟基保护基为本领域所熟知，包括在“有机合成中的保护基 团”(T.W.Greene 和 P. G.M. Wuts，第 3 版，John Wiley & Sons，1999，将其全文引入本文作 为参考)中详述的那些基团。某些实施方式中，每个PG4连同与之结合的氧原子独立选自 酯、醚、甲硅烷基醚、烷基醚、芳基烷基醚和烷氧基烷基醚。这类酯的例子包括甲酸酯、乙酸 酯、碳酸酯和磺酸酯。具体的例子包括甲酸酯、苯甲酰甲酸酯、氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧 基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、对氯苯氧乙酸酯、3-苯基丙酸酯、4-氧代戊酸酯、4，4-(亚 乙基二硫代)戊酸酯、新戊酸酯(三甲基乙酰基)、巴豆酸酯、4-甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸 酯、对苄基苯甲酸酯、2，4，6_三甲基苯甲酸酯，或者碳酸酯，例如甲基、9-芴基甲基、乙基、 2，2，2-三氯乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基、2-(苯磺酰)乙基、乙烯基、烯丙基和对硝基 苄基碳酸酯。此类甲硅烷基醚包括三甲基甲硅烷基醚、三乙基甲硅烷基醚、叔丁基二甲基甲 硅烷基醚、叔丁基二苯基甲硅烷基醚、三异丙基甲硅烷基醚及其它的三烷基甲硅烷基醚。烷 基醚包括甲基醚、苄基醚、对甲氧基苄基醚、3，4_ 二甲氧基苄基醚、三苯甲基醚、叔丁基醚、 烯丙基醚以及烯丙氧羰基醚或衍生物。烷氧基烷基醚包括缩醛，例如甲氧基甲基醚、甲硫基 甲基醚、(2-甲氧基乙氧基)甲基醚、苄氧基甲基醚、(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基醚 和四氢吡喃基醚。芳基烷基醚的例子包括苄基醚、对甲氧基苄基醚(MPM)、3，4_ 二甲氧基苄 基醚、0-硝基苄基醚、对硝基苄基醚、对商代苄基醚、2，6-二氯苄基醚、对氰基苄基醚、2-和 4-吡啶甲基醚。某些实施方式中，F-3的PG4部分中的一个、两个或三个连同与它们结合的氧原子 一起为甲硅烷基醚或芳基烷基醚。其它实施方式中，F-3的PG4部分中的一个、两个或三个 为叔丁基二甲基甲硅烷基或苄基。另外的实施方式中，F-3中的所有三个PG4部分均为叔丁
基二甲基甲硅烷基。根据另一种实施方式，提供式F-3的化合物，其中所述化合物具有式F-3’所示的 立体化学 其中每个变量同上文定义以及上文及此处的分类及亚类描述。某些实施方式中，提供化合物F_3a 其中“TBS”指叔丁基二甲基甲硅烷基。F-3a的详细合成在下面的实施例中进行阐述。4、对F-l、F-2和F_3进行组装以制备化合物I总体上，如以下方案VIII所示，对片段F-I和F-2进行偶合。方案VIII 以上方案VIII表示一种由片段F-I和F-2制备中间体F_5a的通用方法。首先，用与Kishi等描述的方法(Org Lett, 4 :25,p 4431(2002))基本相似的方法，对片段F-I和 F-2进行偶合以得到中间体F-4。该偶合在手性-恶唑(ER-807363)存在下进行，抑或在不存 在ER-807363条件下进行。但是，ER-807363存在下所进行的F-I与F-2的偶合反应具有 更高的选择性。用六甲基二硅基胺基钾(potassium hexamethyldisilazide)处理F-4，形 成F-4的分子内威廉逊醚(Williamson ether)，然后提供立体异构体混合物形式的四氢吡 喃F-5。然后对该立体异构体进行分离，得到F-5a。这三个步骤的详细内容在下面的实施 例中进行描述。根据另一种实施方式，本发明提供化合物F-4 其中PG^PG2JdG1和R1同一般性定义以及上文和此处的亚类定义。某些实施方式中，本发明提供式F-4的化合物，其中所述化合物具有式F-4’所示 的立体化学 其中PG1JG^PdG1和R1同一般性定义以及上文和此处的亚类定义。本发明还提供化合物F_4a


学。
其中“MsO”指甲磺酸根，“TBS”指叔丁基二甲基甲硅烷基，“ΟΡν”指新戊酸根c F-4a的详细合成在下面的实施例中进行描述。 根据又一种实施方式，本发明提供化合物F-5。
F-5
其中各PG1、PG2JG^LG1和R1同一般性定义以及上文和此处的亚类定义。 某些实施方式中，本发明提供式F-5的化合物，具有式F-5’或F-5a所示的立体化其中各PG^PG2JdG1和R1同一般性定义以及上文和此处的亚类定义。如以下方案IX所示，脱除中间体F_5a的PG3基团，然后将所得羟基化合物F_6与 化合物F-3a (其中R3为CH0)偶合，以生成F-7。方案IX 以上方案IX表示由F_3a和F_6制备中间体F_9的一种通用方法。先用正丁基锂和然后用醛F_3a处理砜中间体F-6。然后用Dess-Martin试剂氧 化所得的二醇中间体F-7以生成酮-醛中间体F-8，然后用SmI2处理F-8，得到中间体F-9。 这些步骤的详细内容在下面的实施例中进行描述。方案X法。首先，在与以上方案V所述的那些条件基本相似的条件下，进行分子内偶合以生成羟基 化合物F-10。另一种方法中，在本文所述的手性-恶唑配体的存在下进行分子内偶合。加入 手性P恶唑配体提高反应产率，增大反应效率。该反应的详细内容在下面的实施例中进行描 述。然后将化合物F-IO氧化成F-Il。用适当的方法脱除F-Il的羟基保护基得到F-12。本 领域普通技术人员将认识到脱除化合物F-Il的保护基的适当方法取决于实际使用的保护 基，包括Greene所述的那些基团。例如，当F-Il的各个羟基保护基均为TBS基时，可通过 任选缓冲的四丁基氟化铵处理来实现这种脱除。这些步骤的详细内容在下面的实施例中进 行描述。中间体F-12用于制备诸如美国专利6，365，759和美国专利6，469，182 (通过引用 将其全文结合到本文中)所述的各种软海绵素B类似物。实施例以软海绵素B类似物B-1939的制备为例，以下实施例描述了用本发明方法和化合 物合成软海绵素B类似物。
本领域的普通技术人员将认识到，通过本发明方法，由本发明化合物所制备的多 种软海绵素B类似物包括但不限于美国专利6，214，865和6，365，759 (将其全文引入作为 参考)所述的那些软海绵素B类似物。因此，应理解的是，以下以实施例形式描述的合成方 法并不限制所附权利要求定义的本发明范围。实施例1F-Ia 的制备 在适当大小的容器中，使D-葡糖醛酸-6，3-内酯(1份重量，1当量)与乙腈(3 份体积)及丙酮(9份体积)混合。加入浓硫酸催化剂，保持体系回流3小时。检查体系中 D-葡糖醛酸_6，3-内酯的溶解情况。冷却反应液至25°C，搅拌15小时。加入固体碳酸氢 钠(0.5份重量)，另外搅拌反应液3小时。过滤去除固体，部分浓缩有机物，并与另外的乙 腈(2份重量)共沸。ER-806045未经分离而用于下一步反应。 -20°C下，将粗品ER-806045 (1份重量，1当量)溶解于乙腈(6. 5份体积)中。保 持内温低于5°C条件下，加入吡啶(1. 5份体积，4. O当量)并缓慢加入SO2Cl2 (0. 38份体积， 1. 02当量)。保持内温低于10°C条件下，乙腈(0. 5份体积)冲洗下将反应液反加到冷水 (28份体积)中，进行猝灭。通过庚烷(2份体积)冲洗过滤及干燥分离得到白色固体状 ER-806410(0. 87 份重量，79%理论值)。 在适当大小的容器中加入ER_806410(1份重量，1当量)和THF(10份体积)，然 后冷却至10°C。加入湿的钯碳(5%，0. 5份重量)，搅拌多相溶液10分钟。反应液经吡啶 (0.44份重量，1.3当量)缓冲，在氢气氛下放置3小时。过滤反应液，用水(2份体积)和 乙酸乙酯(10份体积)冲洗固体。所得溶液经IN盐酸(2. 1份体积)酸化，充分混合，分离 所得各层。依次用碳酸氢钠水溶液(5份体积)和水(5份体积)洗涤有机层。减压浓缩有 机物，所得产物用IPA(3. 4份体积)重结晶，15°C下加入庚烷(3. 4份体积)进一步收获产 物，分离得到白色固体状ER-806047 (产率67% )。 在适当大小的容器中加入ER_806047(1份重量，1当量)和甲苯(8份体积)，然后 冷却至-40°C。保持内温低于_35°C条件下，加入DIBAL的17重量％甲苯溶液(4. 6份重 量，1. 1当量)。对反应液进行测定后，保持温度低于10°C条件下，加入丙酮(0. 15份重量， 0.5当量)，使过量的试剂猝灭。低于10°C下，反应液用乙酸乙酯(7份体积)和15%柠檬 酸水溶液(8份重量)稀释，在20°C下搅拌直至得到澄清溶液。分离各层，水层用乙酸乙酯 (2X10份体积)反萃取两次。合并的有机物依次用碳酸氢钠水溶液(5份体积)和盐水(5 份体积)洗涤后经硫酸镁(0.2份重量)干燥。过滤后，减压下部分浓缩有机层，并与甲苯 (4份体积)形成共沸物。以THF溶液的形式保存产物，用于下一步反应。 在适当大小的容器中加入TMSCH2MgCl的醚溶液(20重量％，2. 04份重量，3. 0当 量)，在5°C以下冷却。保持内温低于15°C条件下，向反应容器中加入ER-806048(1份重量， 1当量)的THF(7份体积)溶液。使反应液升温至35°C，保持1.5小时。冷却反应液，低于 20°C下用甲苯(7份体积)进行稀释，用乙酸(3份体积)进行猝灭。反应液进一步用10% 氯化铵水溶液(6份重量)稀释，充分混合，分离各层。有机层依次用碳酸氢钠水溶液(5份 体积)和盐水(5份体积)洗涤。经硫酸镁(0. 2份重量)干燥，过滤，然后减压浓缩溶液， 分离得到ER-807114的甲苯浓溶液(产率90% )。 在适当大小的容器中依次加入ER_807114(1份重量，1当量)和THF(20份体积)， 将溶液冷却至5°C以下。加入KHMDS的15重量％甲苯溶液(9. 16份重量，2. 0当量)。用 10%氯化铵水溶液(5份体积)猝灭反应。分离各层，有机层依次用氯化铵(5份体积)、2N 盐酸(8. 5份体积)、碳酸氢钠水溶液(5份体积)和水(5份体积)洗涤。用乙酸乙酯将有 机物转移至浓缩器中，浓缩至粘性油(产率90%)。在35°C下，用甲苯(4份体积)和庚烷 (4份体积)对该物质进行重结晶，在更低的温度下(15°C和10°C )，用庚烷(2X4份体积) 进一步收获产物(产率94% )。 在适当大小的容器中加入KOtBu(0.67份重量，1.2当量)和THF(7. 7份体积)， 冷却至内温为-20°C。保持内温低于_7°C条件下，加入ER-806049(1份重量，1当量)的 THF (2. 3份体积)溶液。最高温度保持在_7°C的条件下，加入纯BnBr。-20°C下搅拌反应液 2小时，10°C下搅拌10小时。反应液用10%氯化铵水溶液(4份体积)猝灭，用甲苯(4份 体积)稀释，充分混合。分离各层，有机层用10%盐水(4份体积)洗涤，经硫酸镁(0. 15份 重量)干燥。减压浓缩后分离得到ER-806050的tBuOH溶液(2. 5份体积)(产率95% )。 在适当大小的容器中依次加入K3Fe(CN)6(3. 5份重量，3. 4当量)、K2CO3(1. 5份重 量，3. 4当量)、(DHQ) 2AQN(0. 0134份重量，0. 005当量)、水(18份体积)UBuOH (13份体积) 和ER-806050的tBuOH溶液(1份重量，1当量溶于5份体积中)。将多相混合物冷却至内温 为 0°C，加入 K2OsO4 · 2H20 (0. 0029 份重量，0. 22 摩尔 ％ )。36 小时后，0°C下，用 Na2S2O3 (3. 5 当量，1.7份重量)猝灭反应，使烧瓶升温过夜至室温。15小时后，将混合物转移至后处理 容器(workup vessel)中，用甲苯(15份体积)和水(4份体积)稀释。剧烈搅拌并分离 两相混合物。有机层用盐水(10份体积)洗涤，经浓缩和溶剂交换得到二醇ER-806051和 ER-806052粗混合物的10%甲苯溶液(产率92% )。 用另外的甲苯(3份重量)对ER_806051/52(1份重量，1当量)的甲苯溶液(10. 1 重量％，9.9份重量)进行进一步稀释。在甲苯溶液中加入N-甲基吗啉(0.94份重量，3.0 当量)和DMAP (0.075份重量，0.2当量)，将所得混合物冷却至15°C以下。保持内温低于 25°C条件下，加入苯甲酰氯。然后在75°C下搅拌反应液12小时。冷却反应液至15°C，保持 温度低于25°C条件下，用IN盐酸(5份体积)进行猝灭。充分混合并分离各层。有机层依 次用盐水(3份重量)、碳酸氢钠水溶液(3份重量)和盐水(3份重量)洗涤。干燥有机层 (硫酸镁，0. 25份重量)，用活性碳(ο. ι份重量)处理，经甲苯(1份重量)过滤(Celite , 0.3份重量)。减压下部分浓缩产物，与甲苯(3份重量)形成共沸物。分离得到双苯甲酸 酯ER-806053/54的甲苯溶液(5份体积)(产率95% )。 在惰性气氛下，将20重量％ TiCl4 (6. 42份重量，3. 6当量)的甲苯溶液冷却至 15°C。保持内温低于30°C条件下，加入Ti(0iPr)4(0. 64份重量，1. 2当量)，搅拌所得溶液15 分钟。将烯丙基TMS (1. 03份重量，4. 8当量)与前一步骤得到的ER-806053/54(l份重量，1 当量)的22重量％甲苯溶液(4. 55份重量，1当量)预混合，加到新鲜生成的Ti (OiPr) Cl3 中。在加样期间保持内温低于30°C。20-30°C下，搅拌反应液2小时。冷却反应液至_5°C， 用IN盐酸(6份体积)进行猝灭，期间保持内温低于30°C。充分搅拌后，分离各层，有机层 依次用IN盐酸(3份体积)和盐水(2X3份体积)洗涤。有机层与硫酸镁(0. 3份重量) 及活性碳(0.15份重量)一起搅拌，甲苯(1体积)冲洗下，过滤通过Celite 塞(0. 2份重 量)。浓缩后分离得到C-34的3 1混合物形式的产物，产率83%。经IPA/正庚烷重结 晶，得到 ER-806055 (C-34 > 99. 5% d. e.，产率 71% ) 室温下，在适当大小的容器内加入醇ER_806055(1份重量，1当量)、甲苯(7份体 积)、DMSO (0. 31份重量，2. O当量)和三乙胺(0. 78份重量，4. O当量)。将所得溶液冷却 至-19°C。保持内温低于-10°C条件下，滴加TCAA(0.84份重量，1.4当量)。另外搅拌反应 液10分钟。保持内温低于10°C条件下，反应液用IPA(0. 5份体积)稀释，用IN盐酸(5份 体积)猝灭。分离各层，依次用碳酸氢钠水溶液(5份重量)和水(3份体积)洗涤有机层。 减压下部分浓缩有机层(粗产物产率100% )，进一步与另外的甲苯(4份体积)形成共沸 物。将所得的酮(ER-806058)溶解于最后4份体积的甲苯中，检测水份含量，用于下一步反 应。
将ER_107446(1份重量，1.5当量)的THF (2. 7份体积)溶液冷却至10°C，保持内 温低于15°C条件下，用25. 2重量％ LHMDS的THF溶液(5. 2份重量，1. 4当量)处理。在第 二个容器中，将粗品ER-806058的甲苯溶液(21. 9重量％，5. 4份体积)冷却至10°C。保持内温低于20°C条件下，将第一个容器中的内容物转移至含有基质(substrate)的溶液中。 搅拌反应液30分钟，然后加入IM盐酸(6. 5份体积)进行猝灭，期间保持内温低于20°C。 分离各层，有机层用1 1的甲醇/水(4X5份体积)洗涤四次后用碳酸氢钠水溶液(5份 体积)和盐水溶液(2X5份体积)洗涤。产物经硫酸镁(0. 52份重量)干燥、过滤(用0. 7 份体积甲苯冲洗)，减压浓缩至重油。
室温下，将ER-806059溶解于1 1甲苯/乙腈(5份体积)中。保持起始温度低 于40°C条件下，加入过滤TMSI (1. 23份重量，4当量)。加热反应液至60°C，保持2小时。冷 却反应液至-15°C，低于30°C下，用25%氢氧化铵水溶液进行猝灭。搅拌反应内容物过夜， 分离各层。在有机层中另加入甲苯(5份体积)和水(2份体积)。充分混合并分离各层。 然后依次用10%亚硫酸钠水溶液(5份体积)、1N盐酸(5份体积)、5%碳酸氢钠水溶液(5 份体积)和盐水(5份体积)洗涤有机层。有机层经硫酸镁(0.2份重量)干燥、过滤、部分 浓缩，得到50%甲苯溶液，用于下一步反应。 在适合大小的容器中，65 °C下混合NaBH (OAc) 3 (1. 19份重量，3. 15当量)、 Bu4NCl (1. 04份重量，2. 1当量)、DME (8. 2份体积)和甲苯(4份体积)，并室温下搅拌。将 混合物加热至75°C，保持1小时。75°C下加入50重量％ ER-806060 (1份重量，1当量)的 甲苯溶液，另用甲苯(0.3份体积)冲洗。反应温度升高至85°C，搅拌反应液2-4小时。冷 却反应液至< 10°C，保持内温低于20°C条件下，用水(3. 2份体积)进行猝灭。充分混合并 分离各层。有机层依次用碳酸氢钠水溶液(2X5份体积)和水(2X5份体积)洗涤。有机 层经过浓缩和溶剂交换得到40重量％ ER-806061的甲醇溶液。
将ER_806061(1份重量，1.0当量)的甲醇溶液(40重量％ )溶解于另外的甲醇 (1.6份体积)中。加入碳酸钾(0.24份重量，1.0当量)，反应温度升高至50°C，保持1小 时。冷却反应液至15°C，内温低于30°C条件下，用IN盐酸(3. 5份体积，2当量)进行猝灭。 用水(3. 9份体积)和甲苯(3份体积)稀释反应液。分离各层，水层用甲苯(1.5份体积) 反萃取。水相中加入碳酸氢钠(0. 3份重量)和氯化钠(0. 6份重量)，用nBu0H(3份体积) 反萃取。合并该三份有机相，并浓缩至干，得到粗品三醇ER-806064和无机盐。80°C下，将产 物溶解于7 1甲苯/nBuOH中，经热过滤、冷却重结晶和搅拌过夜。经过滤和甲醇冲洗后
分离得至Ij ER-806064 (F-Ib)(五步总产率 57% ) FAB (+) -MS M/z357 (M+H)

用 2，2-.
ER-806064IER-80S126
25°C下，使纯化的三醇ER-806064 (1份重量，1当量)分散于丙酮(2份体积)中， 二甲氧基丙烷(1份体积)稀释，用浓硫酸(0.0086份重量，0.03当量)处理。搅拌 反应液直至均勻。反应液用甲苯(5份体积)稀释，加至5%碳酸钾(2份体积)中进行猝 灭。充分混合并分离各层。有机层用10%盐水洗涤，经硫酸钠(0.5份重量)干燥。溶液经 过滤(甲苯冲洗)和减压浓缩得到黄色油状的ER-806126。该物质用于下一步骤。
将固体NaOtBu (0. 34份重量，1. 4当量)溶解于THF (2. 7份体积)和DMF (0. 3 份体积)后冷却至10°c以下。保持内温低于15°C条件下，THF(0. 5份体积)冲洗下，将 ER-806126 (1份重量，1当量)的THF (2. 5份体积)溶液加至NaOtBu溶液中。搅拌30分钟 后，保持温度低于15°C条件下，加入甲基碘(0. 204份体积，1.3当量)(放热)。使反应液升 温至25°C，反应液用水(5份体积)猝灭，用甲苯(7份体积)稀释。充分混合并分离各层。 有机层用盐水(2X5份体积)洗涤两次，经硫酸钠(0.5份重量)干燥、过滤和减压浓缩。
将ER_806068(1份重量，1当量)溶解于1份体积的甲醇中。加入水(1. 5份体积)和2N盐酸(1.25份体积，1当量)，并在25°C下搅拌反应液。10°C下，将反应液反加到 2M Na0H(1.34份体积)中进行猝灭。反应液用乙酸异丙酯(5份体积)稀释。充分混合并 分离各层。水层用5份体积的乙酸异丙酯反萃取，合并的有机层经硫酸镁(0.5份重量)干 燥、过滤和减压浓缩得到粗品二醇ER-806063。
向25°C的粗品ER-806063 (1份重量，1. O当量)的DMF (4份体积)溶液中加入咪 唑(0. 62份重量，3.4当量)，然后在低于30°C的内温下，加入TBSCl (1.02份重量，2. 53当 量)。25°C下搅拌反应液。反应液用MTBE(10份体积)稀释，用水(4份体积)洗涤。有机 层依次用IM盐酸(3份体积)、水(3份体积)、碳酸氢钠水溶液(3份体积)和盐水(3份体 积)洗涤。有机层经硫酸镁(0. 5份重量)干燥、用1份体积的MTBE冲洗过滤，减压浓缩， 用庚烷(4份体积)进行溶剂交换。 将ER_806065(1份重量，1当量)溶解于庚烷、异辛烷或IPA (10份体积)中。冷却 溶液至-60°C (士 10°C)以下。低温下，在溶液中鼓泡通过臭氧，直至该溶液保持蓝色。用 氮气吹扫溶液15-30分钟，边继续用氮气吹洗，边使反应液升温至5°C。加入7-15重量％ Lindlar催化剂(铅毒化的5%钯/碳酸钙，0. 1份重量)。反应器头(reactor head)用氮 气吹扫数次，抽空、置于一个氢气氛(g)下。然后使反应液升温至室温(20-25°C)。搅拌反 应液2.5小时。所得的多相溶液过滤通过Celite (ι.ο份重量，mtbe(2份体积)作为冲洗 液)。浓缩溶液至干，分离得到1. O份重量的粗品ER-806067。粗分离物经庚烷或异辛烷重 结晶，得到ER-806067 (F-Ia)，为白色固体结晶(五步产率68% )。FAB (+) -MS M/z601 (M+H)。 熔点 64. 5°C。实施例2F~2a 的制备 在反应器中加入预冲洗的Amberlystl5 (0. 05份重量)和水(4. 63份体积)，冷却 至内温为0-5°C。保持内温为约5°C条件下，在反应器中加入2，3_ 二氢呋喃(1份重量，1当量)，搅拌1.5小时。在第二个反应器中加入水(4. 63份体积)，加热至内温为35°C。在相 同反应器中加入锡粉(2. 2份重量，1. 3当量)，分别用2，3- 二溴丙烯(3. 71份重量，1. 3当 量)和48%氢溴酸(0. 002份体积)稀释。观察到反应开始(以温度示踪值达到36-38°C指 示)之后，保持内温低于45°C条件下，在第二个反应器中分批加入2，3_ 二溴丙烯(9X0. 37 份重量)。加样完毕后，在35°C内温下，另外搅拌第二个反应器的内容物60分钟。以使内 温不超过45°C的速度，将第一个反应器的过滤内容物加到第二个反应器中。加样完毕后， 撤除热源，在第二个反应器中加入Celite 545 (2. ο份重量)，搅拌所得混合物30分钟。多 相混合物过滤通过Celite 545垫(2. ο份重量)，另外用水(5份体积)洗涤滤饼。将所有 的滤液合并入一个反应器中，加入浓盐酸(1.5份体积)直至云雾状溶液变澄清。剧烈搅拌 下，在该反应器中加入氯化钠(3.6份重量)，分层。分离并搁置有机层。用正丁醇(20份体 积)萃取水层。排放水层，在反应器中加入第一次分离得到的有机物。有机物用浓碳酸氢钠 (24份体积)洗涤，然后用正丁醇(20份体积)反萃取水层。合并所有的有机物，并进行真 空浓缩。将浓缩物溶解于MTBE(10份体积)中，过滤，滤液浓缩至2份体积。搅拌下，使浓 缩物冷却至内温为0°C，然后加入正庚烷(4份体积)。0°C内温下，搅拌多相混合物2小时， 通过过滤分离得到目的产物，真空干燥得到白色粉末状的ER-806909 (1. 34份重量，0. 45当 量)O 在反应器中加入咪唑(0. 65份重量，2当量)、ER-806909 (1份重量，1当量)和无 水DMF (4. 04份体积)。搅拌下，将反应器冷却至内温为0°C，然后以使内温不超过15°C的速 度加入叔丁基二苯基氯硅烷(1.25份重量，0.95当量)。保持内温为< 15°C条件下，另外 搅拌反应液1小时。在反应器中加入水(3. 2份体积)和正庚烷(6. 4份体积)。搅拌混合 物5-15分钟，分层。分离并搁置有机层。用正庚烷(3.2份体积)萃取水层。合并所有的 有机物，用盐水(3. 2份体积)洗涤，真空浓缩至恒重，得到黄色油状的ER-806545(2. 13份 重量，0.95当量)。该产物未经进一步纯化而用于下一步骤。 用模拟移动床(SMB)色谱分离对映异构体ER-806909，得到黄色油状的 ER-808373(0. 55份重量，0. 55当量)和ER-806721 (0. 45份重量，0. 45当量)。用于分离对 映异构体ER-806909的SMB色谱规程如下柱和介质Chiracel OD 柱 20 μ m 30mmX150mm (12 根柱)溶剂体系96 4 (体积/体积)庚烷叔丁醇(流动相)模拟移动床色谱仪Knauer SMB系统CSEP C912
等温线(朗格缪尔，由迎头分析确定)非目标异构体Qi *= 2. 8768XCi/(1+0. 02327 * Ci)目标异构体Qi = 4. 5320 X Ci/(1+0. 0034595 * Ci)*其中Qi =固相浓度(g/L)，Ci =液相浓度(g/L)柱孔隙率0. 658温度27 °C用 EuroChrom 2000 for windows, SMB指南 1. 2 版(Wissenschaftliche Geratebau Dr. -Ing. Herbert Knauer GmbH, D—14163 柏林；作者 H. Kniep 禾口 k. Seidel—Morgenstern) 对流速等进行模拟计算
36g/L (ER-806909) 15mL/min 76. 4mL/min 107mL/min 134. 3mL/min (实际流速= 143. 5mL/min)
183. 4mL/min 149. 3mL/min 42. 3mL/min *萃余液=弱结合异构 体
49. lmL/min *萃取液=强结合异构 体
进样(feed)浓度 进样液流速(1号泵) 洗脱液流速(2号泵) IV区(3号泵)流速II区(4号泵)流速
I区流速 III区流速萃余液*流速萃取液流速
间歇时间(tact time)(端口切换时间)
0. 8864分钟(53. 18秒，实际间歇时 间=54秒)
用以上规程，按下列方式分离对映异构体ER-806909。对于11小时运转，将IOL 流动相(含36g/L的ER-806909)泵(Silog modelChemtech)送通过直径为142mm，孔径为 0. 45 μ m的尼龙滤器(Cole-Parmer #2916-48)，进入进样槽(feed tank)。洗脱液槽中注满 36L流动相，该流动相已通过管线内的直径为45mm的1 μ m玻璃纤维滤器(Whatman GFC)过 滤，在运转过程中另行加入的1份体积。SMB仪的内温调节至27°C。最初启动时，进样口和洗脱液进口均与洗脱液槽相连。用流动相溶剂对进样泵和 洗脱液泵进行注液和清洗。启动SMB仪的柱切换，开启泵，逐渐提高流速至全速，同时保持 各泵之间的绝对流速差。一旦达到全速，测量萃余液流速和萃取液流速，调节泵流速以对泵 技术规格中的偏差进行校正。进样泵(1号泵)减速至OmL/min，进口重新与进样槽相连，给 该泵注入进样溶液，然后逐步将流速回调到全速的运转速度。萃余液和萃取液出口连入分 离槽中，每2小时得到各个样品。用下述HPLC方法，通过分析HPLC监测样品的手性纯度。 调节2号、3号和4号泵的流速以及间歇时间，以得到所需要的出口纯度。运转结束时，再次将进样泵的流速降低至0，并使之与洗脱液槽相连。使进样泵恢 复至全速，洗涤体系20分钟。在洗涤期间，萃余液和萃取液出口保持开启10分钟(10次间 歇)，洗涤后，出口连入分离槽中。逐步浓缩洗柱液，并在后续运转时加入样品中。
35柱将每次运转结束时所收集的萃取液(ER-806721)与从同一批起始物中收集的物 质合并，用下表1所述的分析HPLC方法再次分析最后批合并物的手性纯度。对所收集的萃 余液(ER-808373)进行同样的操作。表1ER-806721手件纯度的HPLC分析 在反应器中加入三苯膦(0. 7份重量，1. 2当量)、对硝基苯甲酸(0. 45份重量，1. 2 当量)、ER-808373 (1份重量，1当量)和无水甲苯(8份体积)。冷却反应液至内温为0°C， 以使内温不超过7°C的速度，缓慢加入DEAD (1.17份重量，1.2当量)。加入正庚烷(3. 3份 体积)，将混合物冷却至内温为10°C，然后搅拌30-40分钟。过滤去除所得的沉淀物。分别 用正庚烷(3. 3份体积)、TBME(0. 55份体积)、正庚烷(1. 1份体积)和ΜΤΒΕ(0. 55份体积) 洗涤滤饼。合并所有的滤液并进行真空浓缩。将粗浓缩物溶解于THF(8份体积)中，然后加 入水(0. 8份体积)和二水氢氧化锂(0. 18份重量，2当量)。室温下搅拌混合物后加入正 庚烷(3. 3份体积)，搅拌5分钟。加入水(2. 2份体积)和正庚烷(3. 3份体积)，搅拌两相混合物5分钟，使分层。分离水层，必要时用正庚烷进行反萃取。合并有机层并进行真空浓 缩。粗产物经SiO2柱色谱纯化得到浅黄色油状的ER-806721 (0. 74-0. 85份重量，0. 74-0. 85
当量)。
在反应器中加入ER-806721 (1份重量，1当量)和无水二氯甲烷(4. 2份体积)。 将反应液冷却至内温为0-5°C，然后加入三乙胺(0. 34份重量，1. 5当量)、对甲苯磺酰氯 (0.51份重量，1.2当量)和4-( 二甲氨基)吡啶(0.001份重量，0.25当量)。室温下搅拌 所得的混合物48小时，然后加入水(1.8份体积)和二氯甲烷(1.8份体积)。充分搅拌后， 分离有机物，并浓缩有机物。将浓缩物溶解于MTBE (1.8份体积)中，用盐水(1.8份体积) 洗涤。分离并搁置有机层。水层用MTBE(1.8份体积)反萃取，然后合并所有的有机物并进 行真空浓缩。MTBE(7份体积)洗脱下，粗品油过滤通过SiO2塞(70-230目，1份重量)，真 空浓缩滤液。将浓缩物溶解于IPA(5份体积)中，加入水(0.25份体积)。将所得混合物 冷却至内温为15°C，然后加入ER-807204晶种。放入晶种后，将混合物冷却至内温为0°C， 搅拌4-5小时。过滤悬浮液，用冷的IPA(1份体积)洗涤滤饼，真空干燥滤饼至恒重，得到 白色粉末状的 ER-807204(1. 05 份重量，0. 78 当量)。IR(薄膜，cm_l) λ 2597，1633，1363， 1177,907,729. LRMS m/z 602(M+H). 在反应器中加入21%乙醇钠的乙醇溶液(2. 97份重量，0.9当量)。加热该溶液至 内温为65°C，然后以使内温不超过70°C的速度加入丙二酸二乙酯(3. 24份重量，2当量)。 搅拌混合物30分钟，然后经3-5小时加入ER-806906(1份重量，1当量)。加样完毕后，搅 拌反应液60分钟，然后冷却至内温为50°C。以使内温不超过65°C的速度加入浓盐酸(0.84 重量，1. 05当量)。蒸馏脱除DMF(3份体积)和乙醇后加入六水氯化镁(0. 21份重量，0. 1 当量)的蒸馏水(0. 25份体积，1. 4当量)溶液。将所得混合物加热至内温为135°C，同时去 除馏出液。回流加热混合物，然后冷却至室温，加入盐水(12份体积)和TBME (16份体积)。 分离有机层，用水(1. 3份体积)和盐水(1. 2份体积)洗涤后真空浓缩。产物经蒸馏纯化 得到 ER-805552 (0. 95-1. 09 份重量，0. 71 当量)。
Vqζ
甲基碘，LiHMDS的甲笨溶液 ER-805552THF1 -78 C “ER-806724在反应器中加入1.0M LHMDS的甲苯溶液(6.61份重量，1.04当量)，冷却至内温 为-75°C。将ER-805552 (1份重量，1当量)溶解于无水THF中，以使内温不超过-70°C的 速度加到反应器中。加样完毕后，搅拌所得混合物30分钟，在第二个反应器中加入无水
37THF(2.5份体积)和甲基碘(1.27份重量，1.25当量)，冷却至内温为-75°C。以使内温不
超过-65°C的速度，向甲基碘溶液中加入ER-805552的THF溶液。加样完毕后，_78°C内温
下搅拌反应液30分钟。剧烈搅拌下，将反应液逆猝灭(inverse quenched)至IN盐酸溶液
(10份体积)和MTBE(8份体积)中。加样完毕后，分离并弃去水层。有机层用盐水溶液(3
份体积)洗涤，进行真空浓缩。产物经蒸馏纯化得到ER-806724 (0.75份重量)的约6/1非
对映异构体混合物。

1) 二甲基羟胺， CH2CI2, 0 'C.
AIIVlea (2M曱苯溶淡) 在反应器中加入盐酸N，0_二甲基羟胺(1.05份重量，1.5当量)和无水CH2Cl2(8. 1 份体积)，冷却至内温为0°c。以使内温不超过5°C的速度加入2M三甲基铝的甲苯溶 液(3. 93份重量，1. 5当量)。另外搅拌反应液10分钟，以使内温不超过5°C的速度加入 ER-806724。反应液用CH2C12(15份体积)稀释，然后以使内温不超过10°C的速度加到内温 为0°C的1.3M酒石酸钠(20份体积)中进行逆猝灭。加样完毕后，使分层，分离并搁置水层。 有机物用水(1份体积)洗涤，经硫酸钠(1份重量)干燥、过滤，真空浓缩至除去极微量的 二氯甲烷。在浓缩物中分别加入无水DMF(6. 3份体积)、咪唑(0. 64份重量，1. 5当量)和 叔丁基二甲基氯硅烷(0. 94份重量，0. 97当量)。加入水(5份体积)和MTBE (10份体积)， 搅拌所得混合物，使分层。分离并弃去水层。有机层用水(5份体积)洗涤，分离各层。加 入IN氢氧化钠(2. 5份体积)和甲醇(2. 5份体积)，搅拌所得混合物。分离水层，有机层用 盐水(2. 5份体积)洗涤后真空浓缩得到棕色油状的ER-806753 (1.94份重量，0.91当量)。
O
ι 羣 OTBS
I)OsO4, NMO1 CH2CI2
II)NaIO4, NaIO4, THF 磷酸盐緩冲液ΡΗ=7
ι ‘ OTBS ER-806754
ER-806753 在反应器中加入ER-806753 (1份重量，1当量)、CH2Cl2 (5份体积)和NMO的50% 水溶液(0. 8份重量，1. 1当量)。将混合物冷却至内温为10°C后加入0. 197M OsO4的甲苯 (0. 06份体积，0. 004当量)溶液。加入亚硫酸钠(0. 1份重量，0. 25当量)和水(0. 85份体 积)，搅拌反应液1小时。混合物用盐水(0. 85份体积)稀释，真空浓缩有机物至约1/3体 积。在第二个反应器中先后加入高碘酸盐钠(1.3份重量，2当量)和THF (2. 5份体积)。混 合物用PH = 7的磷酸缓冲液(3.0份体积)稀释，冷却至内温为20°C。以使内温不超过30°C 的速度加入浓二醇。加样完毕后，室温下搅拌所得混合物。加入水(1.25份体积)、MTBE(7 份体积)和盐水溶液(1. 25份体积)，分离各层。有机物用盐水溶液(1份体积)和饱和碳 酸氢钠(1份体积)的混合物二次洗涤。最后，有机物与盐水(1份体积)和10% (重量/ 体积)硫代硫酸钠溶液(1份体积)的混合物搅拌1小时，然后真空浓缩。粗物质经SiO2
38柱色谱纯化得到黄色油状的ER-806754(0. 93份重量，0. 93当量)IR(薄膜，cm-1) λ 2953，
2856，1725，1664，.1463，1254，1092，833. LRMS m/z 332(M+H)。 在反应器中加ER_806629(1.53份重量，3. 1当量)和THF (10. 5份体积)，喷射 氮气60分钟，使溶液脱气。在第二个惰性反应器中加ER-807204(1份重量，1. O当量)、 ER-806754 (O. 66份重量，1. 2当量)和THF (2. 7份体积)，喷射氩气45分钟，使该溶液脱气。 在含有ER-806906的反应器中先后加入CrCl2 (0. 63份重量，3. 1当量)和三乙胺(0. 52份 重量，3.1当量)。在30-35°C内温下，搅拌该深绿色悬浮液1小时，冷却至0-5°C，然后加 入NiCl2 (0. 1当量)。经0. 5小时向第一个反应器中缓慢加入第二个反应器的内容物，使 反应液升温至室温。冷却反应液至内温为0°C，然后经30分钟加入乙二胺(1. O份重量，10 当量)，在25°C内温下，搅拌反应液至少30分钟。在反应液中加入水(4份体积)、TBME(10 份体积)和正庚烷(1份体积)，搅拌所得混合物15分钟，使各相分开(约30min)。分离水 层，用TBME(约7. 5份体积)反萃取。合并有机层，用水(5份体积)、盐水(3份体积)洗 涤，真空浓缩至最小体积。在粗混合物中加IPA(10份体积)和Si02(l份重量)，在25°C内 温下，搅拌所得混合物至多4天。过滤悬浮液，滤饼用IPA(2X1份体积)洗涤。在滤液中 加入正庚烷(6. 6份体积)，真空浓缩混合物直至形成悬浮液。过滤混合物，滤饼用正庚烷 洗涤，然后真空浓缩混合物。粗产物经SiO2柱色谱纯化得到亮黄色(clear yellow)油状 的 ER-807524(0. 54 份重量，0. 48 当量)IR(薄膜，cm-1) λ 2934，1668，1471，1108,833. LRMS m/z 704(M+Na)。 在反应器中加入ER_807524(1份重量，1当量)和无水THF (1. 25份体积)。将混合 物冷却至内温为-20°C，以使内温不超过0°C的速度加入3M甲基氯化镁(0. 59份体积，1. 2 当量)。加样完毕后，经2小时使混合物升温至内温为0°C。将反应混合物加至半饱和的氯 化铵(2. 62份体积)中进行逆猝灭，剧烈混合下，用TBME(2份体积)稀释所得混合物。弃 去水层，有机物用盐水(2份体积)洗涤后真空浓缩。粗产物经SiO2柱色谱纯化得到黄色 油状的 ER-807525 (0. 79-0. 82 份重量，0. 85-0. 88 当量)。 在反应器中加入ER-807525 (1份重量，1当量)、N_苯基双三氟甲磺酰胺(0. 59份 重量，1. 1当量)和无水THF(4. 1份体积)，将混合物冷却至内温为-75°c。以使内温不超 过-60°C的速度加入0. 5M KHMDS的甲苯溶液(2. 75份重量，1当量)，然后使反应液经2小时 升温至-20°C。以使内温不超过0°C的速度用半饱和的氯化铵(2. 4份体积)猝灭反应。使 混合物升温至内温为20°C，加入正庚烷(2. 4份体积)。搅拌混合物，分离并弃去水层。有机 层用饱和碳酸氢钠(每次2. 3份体积)洗涤三次，然后经真空浓缩得到ER-807526 (1. 2-1. 4 份重量，1. 0-1. 2当量)。该物质不经进一步纯化，用于下一步骤。 20°C下，在反应器中加入ER-807526 (1份重量，1当量)和无水甲醇(3份体积)。 加入1.25M盐酸的IPA溶液(4份体积，5当量)，搅拌混合物3小时。搅拌下分批加入固体 碳酸氢钠(0.42份重量，5当量)，直至反应混合物的pH达到6-7。甲醇(3X2份体积)洗 涤下，过滤反应混合物。真空浓缩所有的滤液，然后经SiO2柱色谱纯化得到ER-807527 (0. 43 份重量，0. 79-0. 85当量)。
用制备HPLC色谱对非对映异构体混合物ER-807527进行分离，浓缩目标级分 (desired fraction)，得到亮黄色油状的ER-806730 (0. 56份重量，0. 56当量)。用于分离 ER-806730的制备HPLC色谱规程如下
Kromasil球形硅胶柱，60A，粒径 10 μ ml，在 7. 7cmX60cm 的 Varian Dynamax Rampak 柱中填充至 7. 7cm (直径)X30cm(长度) Varian(Rainin)Dynamax Rampak 41/77mm柱填充站 Varian (Rainin) SD-I 钛泵头 Waters R403折射率检测器 Varian (Rainin) UV-I 检测器(带 有制备流动池) Varian(Rainin)Dynamax DA 1.4.6 版 Varian(Rainin)Dynamax R 4. 3 版 28. 5 63.7 7. 85 (体积/体积)正庚烷甲
HPLC填充站 HPLC 泵
主(primary) HPLC 检测器 副(secondary) HPLC 检测器
色谱控制和获得软件 色谱数据处理软件 流动相
基叔丁醚2-丙醇流速140mL/min柱温室温(25°C)检测折射率，阴极(在16X处衰减)，215nm处紫外吸收值流动相梯度等度运转时间40分钟进样量IOml，含 0. 8g/mL 的 ER-807527用以上规程，按下列方式对非对映异构体ER-807527进行分离。首先用流动相将 各批ER-807527稀释至0. lg/ml，并在真空下过滤通过孔径为1 μ m的47mm玻璃纤维滤器 (Whatman GFC)。然后用旋转蒸发仪真空浓缩滤液。开始在SD-IHPLC泵A (用流动相注液 和清洗)上流动，将流速逐渐提高到140mL/min。对体系进行洗涤直至UV和RI检测器达到 基线稳定。用新鲜的流动相对RI检测器的参比流动池进行冲洗。用流动相将当批ER-807527稀释至0. 8g/mL浓度，以获得8gER_807527注射样的 色谱。注射IOmL溶质的等分试样，对应ER-807527峰值(约在24分钟峰顶开始，持续至35 分钟)，收集洗脱液。继续随后的注样和级分收集，直至耗尽起始原料。将对应ER-806730的级分合并，用旋转蒸发仪进行真空浓缩。用表2所述的HPLC 分析方法评价非对映异构纯度和面积％纯度面积。
41
表2ER-806730非对映异构纯度的HPLC分析
柱Kromasil 桂股柱 250 χ 4.6mm, 5 μ m, MetaChem
产品目录号0475 - 250X046 lmL/min 27
10 μ L,溶剂A中的样品，2.5mg/mL Waters Alliance W2690,带 UV W2487
流速
温度(Γ ) 进样量 仪器 流动相组成 在反应器中加入ER-806730 (1份重量，1当量)和无水二氯甲烷(4. 8份体积)，冷 却至内温为0°C。加入2，4，6-三甲基吡啶(1. 16份重量，4当量)和DMAP (0. 03份重量，0. 1当量)，搅拌所得混合物15分钟，然后以使内温不超过10°C的速度加入三甲基乙酰氯(0. 3 份重量，1. 05当量)。加入水(3份体积)，搅拌混合物15分钟。加入TBME (10份体积)，另 外搅拌混合物10分钟。有机层用IN盐酸(10份体积)洗涤直至2，4，6_三甲基吡啶呈负 电性，然后分别用水(5份体积)、饱和碳酸氢钠(5份体积)和饱和盐水(5份体积)洗涤。 真空浓缩有机层，浓缩物经SiO2柱色谱纯化得到黄色油状的ER-806732(1. 02份重量，0. 85 当量)。
在反应器中加入ER-806732 (1份重量，1当量)和无水THF (2. 35份体积)，冷却 至内温为0°c。以使内温不超过10°C的速度先后加入三乙胺(0. 22份重量，1. 1当量)和 甲磺酰氯(0.24份重量，1.05当量)。在0°C内温下搅拌反应液，然后剧烈搅拌下加入正庚 烷(3. 4份体积)，使分层。有机物用饱和盐水(3. 4份体积)洗涤，经饱和硫酸钠(2份重 量)干燥、过滤，滤饼用正庚烷洗涤直至ER-805973(F-2a)呈负电性。真空浓缩滤液，得到 ER-805973(1. 12份重量，0. 97当量)。粗品ER-805973 (F_2a)未经进一步纯化而用于下一 步骤。IR(薄膜，cm-1) λ 2961，1725，1413，1208，926. LRMS m/z 579 (M+H)。实施例3 ER-806730的另一种制法
环己酮， 在反应器中加入奎尼酸(1份重量)、环己酮(2.11当量，1.08重量)和浓硫酸 (0. 011当量，0. 0056份重量)。加热反应混合物至160°C，通过共沸蒸馏脱除水分(在100°C 开始共沸)。将反应液冷却至90°C-100°C，加入碳酸氢钠(0.0096份重量)和甲苯(3. 6份 重量)。使反应液经4-6小时冷却至室温，所得沉淀物经过滤、甲苯(2X0. 9份重量)洗涤 以及干燥得到白色粉末状的1 (0. 97份重量)。
43 混合化合物1 (1当量，1份重量)和咪唑(2. 5当量，0. 80份重量)，用氮气吹扫，使 之悬浮于无水THF(10份体积)中。以使温度保持低于30°C的速度加入TMSCl (1.2当量， 0. 61份重量)。将反应液冷却至室温，加入庚烷(10份体积)，对所得的悬浮液进行过滤。滤 饼用1 1庚烷/THF (10份体积)洗涤，通过常压蒸馏，用甲苯交换滤液溶剂，得到2a (1.34 份重量，计算值)的甲苯(约5份重量)溶液。冷却2a溶液至_78°C，以使温度保持低于_65°C的速度加入DIBAL-H(1. 5M甲苯溶 液，1. 2当量，2. 1份重量)。用甲醇(0. 3当量，0. 034份重量)猝灭过量的DIBAL-H，使溶液 升温至0°C。以使温度保持低于25°C的速度，将溶液转移至30重量％罗谢尔盐(Rochelle Salt)水溶液(10份重量)和碳酸氢钠(1份重量)的溶液中。剧烈搅拌混合物，得到两相 溶液。分离各层，用MTBE (5份体积)萃取水层。合并的有机层先后用水(2. 5份重量)和 饱和盐水(2. 5份重量)洗涤。浓缩有机物，与 Η进行溶剂交换以得到2b (0. 98份重量， 计算值)的IFH (5份体积)溶液。冷却2b溶液至5°C，加入乙酸(2. 9当量，0. 51份体积)。加入水(1. O当量，0. 055 份体积)，在0°c -5°c下搅拌溶液。根据需要，另外加入至多两等分乙酸和一等分水以促 进甲硅烷基脱保护。以使温度保持低于20°C的速度加入三乙胺(12当量，3.6份重量)和 DMAP (0.05当量，0.02份重量)。加入乙酐(6当量，2. O份重量)，室温下搅拌反应液。将反 应液冷却至5°C，以使温度保持低于30°C的速度加入饱和碳酸氢钠水溶液(10份体积)。搅 拌所得混合物3-4小时，分离各层。用MTBE(5份体积)萃取水层。合并的有机物用水(5份 体积)洗涤。通过蒸馏使用IPA对萃取液进行溶剂交换，得到2c的IPA(3份体积)溶液。 将该溶液冷却至5°C，对所得的结晶进行过滤。浓缩母液，重结晶后获得二次收获，得到白色 固体结晶状的2c (0. 87份重量)。 将2c(l份重量)溶解于乙腈(6份体积)中，先后加入3-三甲基甲硅烷基戊-4-烯 酸甲酯(3. O当量，1. 86份重量)和TFAA (0. 2当量，0. 083份体积)。然后以使温度保持低于 25°C的速度向溶液中加入BF3OEt2 (1. O当量，0. 42份体积)。在反应液中加入饱和碳酸氢钠 水溶液(10份体积)，搅拌所得混合物15分钟。混合物先后用庚烷(10份体积)和MTBE (5 份体积)萃取，对合并的萃取液进行浓缩，得到橙色油状的3(0. 72份重量，计算值)。
O-^2as2c 以使温度保持低于25°C的速度，用甲醇钠(25%重量/重量甲醇溶液(1. 5当量， 2. 2份重量))处理3 (1份重量)的THF (9份体积)溶液。加入IN盐酸(10份体积)使反 应猝灭。分离有机层，水层用MTBE (10份体积)萃取。合并的有机物用水(2. 5份体积)、饱 和碳酸氢钠(2. 5份体积)和水(2. 5份体积)洗涤。浓缩溶液，得到4 (0. 88份重量，计算 值)的THF (2. 5份体积)溶液。该溶液直接用于下一步骤。 在4(1份重量)的四氢呋喃(2. 5份体积)溶液中加入甲醇(5份体积)。加入IN 盐酸(0. 75当量，2份体积)，使反应液升温至60-80°C。冷却反应液至室温，加入饱和碳酸 氢盐水溶液。混合物用DCM(3X2. 5份体积)萃取，合并的DCM萃取液与乙酸乙酯进行溶剂 交换，得到5的乙酸乙酯(3份体积)溶液。加入庚烷(2份体积)以诱导结晶，将所得悬浮 液冷却至0°C。过滤收集固体，滤饼用冷的乙酸乙酯/庚烷(1 1体积比)洗涤，经干燥得 到白色粉末状的5 (0. 55份重量)。 将化合物5(1份重量)溶解于乙腈(10份体积)中，然后依次加入2-乙酸基-2-甲 基溴丙烧(2-acetoxy-2-methylpropanyl bromide) (4. O 当量，2. 2 份重量)和水(1 当量， 0. 067份重量)。室温下搅拌所得混合物，然后冷却至5-10°C。加入NaOMe (25%重量/重量 甲醇溶液，8当量，6. 2份重量)，使反应液升温至室温。加入饱和碳酸氢钠(10份体积)猝 灭反应液，用MTBE(2X 10份体积)萃取。通过常压蒸馏与甲醇进行溶剂交换，得到6(0. 91 份重量，计算值)的甲醇(10份体积)溶液。
将6 (1份重量)的甲醇(10份体积)溶液加热至55°C。分6次加入硼氢化钠(5当量，0. 68份重量)，冷却反应液至5°C，用IN盐酸(10份体积)进行猝灭。加入盐水(5份 体积)，用乙酸乙酯(2X10份体积)萃取反应液。合并萃取液，经浓缩得到7，为褐色残渣。
将化合物7 (1份重量)溶解于CH2Cl2 (10份体积)中，然后在室温下加入DMAP (0. 1 当量，0. 054份重量)、三乙胺(3. 0当量，1. 85份体积)和TBDPSCI (1. 2当量，1. 38份体积)。 加入碳酸氢钠(10份体积)，分离有机层。水层再次用CH2Cl2 (10份体积)萃取。合并有机 萃取液，经浓缩得到无色油状的8 (1. 8份重量，计算值)。 室温下，在8(1份重量)的THF(10体积)溶液中加入LDA(1.5M环己烷溶液，4当 量，6份体积)。使该溶液升温至50°C后用IN盐酸(5份体积)进行猝灭，用MTBE (10份体
积)萃取。浓缩萃取液得到油状的9 (0. 9份重量)。 将9 (1份重量)的二氯甲烷(5份体积)和甲醇(5份体积)溶液冷却至-60°C，保 持温度低于-50°C条件下，用O3进行处理。用氮气吹扫反应液，加入NaBH4(C). 5当量，0. 04份 重量)，使混合物升温至0°C。另外分批加入NaBH4 (1当量，0. 08份重量)，使反应液升温至 室温。3小时后，用IN盐酸(10份体积)猝灭混合物，加入二氯甲烷(5份体积)，使分层。 水层用二氯甲烷(10份体积)再萃取，合并有机萃取液，经浓缩得到无色油状的10(0. 97份 重量)。
将化合物10溶解于THF (10份体积)中，加入磷酸盐缓冲液(pH = 7，5份体积)。 加入NaIO4 (2当量，0. 854份重量)，使反应液升温至室温。加入水(5份体积)和MTBE (10 份体积)，剧烈搅拌所得混合物10分钟。分离有机层，用10%重量/体积硫代硫酸钠水溶 液(5份体积)、水(5份体积)和盐水(5份体积)洗涤，然后与THF共沸蒸馏干燥(约含水200 111)，得到11(0.93份重量，计算值)的THF(10份体积)溶液。该溶液直接用于下一步 马聚ο 在11 (1份重量)的THF(10份体积)溶液中加入(甲酯基亚甲基)三苯膦(1份 重量)，加热至65°C。加入庚烷(40份体积)，搅拌所得混合物30分钟。对所得沉淀物进行 过滤，浓缩滤液至总体积为10份体积。加入SiO2 (5份重量)，悬浮液过滤通过SiO2垫(用 MTBE(20-40份体积)洗脱)。用甲醇交换溶剂，得到12 (0.95份重量，计算值)的甲醇(10
份体积)溶液，直接用于下一步骤。 在12(1份重量)的甲醇(10份体积)溶液中加入10%重量/重量钯碳(0. 23当 量，0.37份重量)，并用氢气处理。过滤悬浮液，同时用THF(10份体积)冲洗滤饼。用THF 交换溶剂，得到13 (0.95份重量，计算值)的THF(10份体积)溶液，直接用于下一步骤。 将13 (1份重量)的THF (10份体积)溶液冷却至0_5°C，以保持温度低于10°C的 速度加入LAH(1M THF溶液，0.78当量，1.5份体积)。然后以保持温度低于10°C的速度加 入水(1. 7当量，0. 06份体积)。以保持温度低于10°C的速度先后加入氢氧化钠10%重量 /水溶液(0. 16当量，0. 06份体积)和水(4. 98当量，0. 17份体积)，所得混合物在剧烈搅 拌下升温至室温。过滤悬浮液，滤饼用THF(5份体积)冲洗。对滤液进行部分浓缩，得到 14(0.9份重量，计算值)的THF(10份体积)溶液，直接用于下一步骤。 将14(1份重量)的THF(10份体积)溶液冷却至0°C，然后加入咪唑和TrCl (1. 5 当量，0. 59份重量)。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5份体积)，用庚烷(10份体积)萃取混合 物。萃取液用盐水(10份体积)洗涤，经浓缩得到15 (1. 35份重量)。 将化合物15 (1份重量)溶解于THF (10份体积)中，用TBAF (1M，1. 2当量，1. 6份 体积)进行处理。浓缩反应混合物至2份体积，然后加入庚烷(5份体积)和SiO2 (5份体 积)。过滤所得悬浮液，先后用庚烷(5份体积)和THF(10份体积)进行洗脱。收集THF洗 脱液，得到16(0. 61份重量，计算值)的THF(10份体积)溶液，直接用于下一步骤。 在16 (1份重量)的THF(10份体积)溶液中加入PPh3 (5当量，2. 3份重量)、吡啶 (10当量，1份体积)和NIS (3. 0当量，1. 1份重量)。然后加入20 %重量/重量柠檬酸水溶 液(10当量，14份重量)，搅拌所得混合物10分钟。反应液用庚烷(10份体积)稀释，分离 水层。有机层用水(5份体积)、10%重量/体积硫代硫酸钠水溶液(5份体积)、水(5份体 积)和盐水(5份体积)洗涤。用乙醇交换溶剂，浓缩至5份体积。加入水(10份体积)，对 所得沉淀物进行过滤收集，得到白色固体状的17(0. 65份重量)。 将化合物17 (1份重量)和氰化钾(6当量，0. 54份体积)悬浮于乙醇(5份体积) 和水(10份体积)中，将所得悬浮液加热至80°C。反应液用水(5份体积)和乙酸乙酯(10 份体积)稀释，混合10分钟。去除水层，有机层用水(5份体积)和盐水(5份体积)洗涤。 用乙醇交换溶剂，得到18(0. 75份重量)的乙醇(10份体积)溶液，直接用于下一步骤。 在18(1份重量)的乙醇(10份体积)溶液中加入锌(37当量，3. 9份重量)，加热 混合物至75-80°C。将反应液部分浓缩至2-3份体积，冷却至室温，用MTBE (10份体积)和 水(5份体积)使之分层。去除水层，有机层用饱和碳酸氢钠(5份体积)、水(5份体积)和 盐水(5份体积)洗涤。然后经THF共沸蒸馏干燥至含水约200ppm，得到19 (0. 81份重量) 的THF(10份体积)溶液。所得溶液直接用于下一步骤。 -78°C下，在19(1份重量)的THF (10份体积)溶液中加入LDA (1. OM THF溶液，1.2 当量，2. 4份体积)。搅拌所得混合物10分钟，然后在_78°C下，向甲基碘(1. 5当量，0. 19 份体积)的THF(5份体积)溶液中加入该烯醇化物溶液。将反应液加至饱和碳酸氢钠(10 份体积)中进行逆猝灭，用MTBE(15份体积)萃取。萃取液用盐水(5份体积)洗涤，浓缩 后经色谱纯化得到20 (0. 86份重量)。 0°C下，在盐酸二甲基羟胺(1份重量)的二氯甲烷(2. 5份体积)悬浮液中加入 AlMe3(2M甲苯溶液，1. 5当量，1. 5份体积)。以保持反应温度低于5°C的速度加入20(1份 重量)的二氯甲烷(5份体积)溶液。然后在保持温度低于10°C条件下，向酒石酸钠水溶 液(1.311，20份体积)中加入反应混合物。使分层并进行分离，有机层经硫酸钠(5份重量) 干燥。对所得悬浮液进行过滤，浓缩滤液。将残渣溶解于DMF (2份体积)中，然后加入咪唑 (0. 19份重量)和TBSCl (0. 29份重量)。反应液用水(5份体积)和MTBE (10份体积)稀 释，搅拌10分钟。去除水层，有机层用水(5份体积)洗涤。在氢氧化钠水溶液(1N，0.78 份体积)和甲醇(0.7份体积)的溶液中加入萃取液。搅拌反应液后去除水层，有机层用盐 水(2. 5份体积)洗涤，经浓缩得到21(1.2份重量)。 以保持反应温度低于0°C的速度，在21 (1份重量)的无水THF(1. 11份重量，1. 25 份体积)溶液中加入甲基氯化镁(3. 0M，59份重量，1.2当量)。0°C下搅拌后，将反应液加 至饱和氯化铵(2. 5份体积)和水(2. 3份体积)中进行逆猝灭。所得混合物用MTBE(10份 体积)稀释，剧烈搅拌。分离水层，有机层用盐水(2. 5份体积)洗涤，经浓缩得到22 (0. 84 份重量)。 将化合物22 (1份重量)溶解于THF (4份体积)中，冷却至-78 V。保持温度低 于-60°C条件下，加入KHMDSd. 5Μ甲苯溶液，1. 01当量，2. 78份重量)。加入Tf2NPh (0. 62 份重量，1. 1当量)的THF (1. 5份体积)溶液，使反应液升温至-20°C。加入饱和氯化铵(2. 5 份体积)、水(2. 5份体积)和正庚烷(2. 5份体积)，混合物升温至室温。使分层，去除水层。 有机萃取液用饱和碳酸氢钠水溶液(3X2. 5份体积)和盐水(2. 5份体积)洗涤，然后经真 空浓缩得到23 (1.1份重量)。 将化合物23溶解于甲醇(2. 5份体积)中，冷却至15°C。加入盐酸(5N IPA溶液， 1.30当量，1. 18份重量)，所得溶液升温至25°C。冷却反应液至0°C，加入碳酸氢钠(3当 量，0.33份重量)。搅拌反应液15分钟，过滤去除所得沉淀物。滤饼用ACS级甲醇(1份体 积)洗涤，合并滤液并进行浓缩。粗浓缩物经色谱纯化得到ER-806730 (24) (0. 5份重量)。实施例4a采用以上方案V所阐述的通用方案下，实施例4a提供另一种制备式A的化合物 (制备F2的中间体)的方法。该方法以ER-812935为中间体(根据实施例3 (化合物4)进
行制备)。
* 9:1C.23非对映异构体\"一* C.23非对映异构体将ER-812935 (1份重量)溶解于THF (10份体积)中，冷却至0°C。保持温度低于 5°C条件下，加入LAH(1. OM THF溶液，0. 70当量，2. 0份体积)。剧烈搅拌下，用水(0. 078 份体积)猝灭过量的试剂，期间保持温度低于5°C。边保持剧烈搅拌，边先后加入氢氧化钠 (15%重量/重量水溶液(0.078份体积))和水(0.18份体积)。加入Celite (2份重量) 后过滤悬浮液，用THF (5份体积)冲洗滤饼。将ER-817633(0. 92份重量，基于100%转化率
的计算值)浓缩至5份体积，直接用于下一步骤。 用THF(5份体积)稀释前面所制备的ER-816961溶液(1份重量溶于5份体积 THF)，冷却至5°C，加入三乙胺(3当量，0.94份重量)。以保持温度低于10°C的速度加入 MsCl (1.05当量，0.25份体积)。加入水(5份重量)，使反应猝灭。加入庚烷(8份体积)， 使混合物分层。分离水相并用MTBE(2份体积)萃取。合并的有机萃取液用饱和碳酸氢钠 (5份体积)和水(1.9份体积)洗涤。浓缩有机层，用乙醇交换溶剂以制备ER-818937(1.23 份重量，基于100%转化率的计算值)的乙醇(1份体积)溶液，直接用于下一步骤。
用乙醇(190标准强度，9份体积)稀释前面所制备的ER-818937溶液(1份重量溶 于0.8份体积乙醇)。加入氰化钾(3当量，0.41份重量)，加热悬浮液至70-80°C。冷却反 应液至室温，先后加入水(10份体积)和MTBE (10份体积)。分离各层，水层用MTBE (5份体积)萃取。 合并的有机物用水(2份体积)和饱和盐水(4份重量)洗涤。浓缩萃取液，直 接用于下-步骤。
将ER-818950溶解于乙酸(5份体积)中，加入盐酸(1. OM, 1当量，3份体积)，室 温下搅拌反应液。冷却反应液至0°c，以保持温度低于10°C的速度加入氢氧化钠(50重 量％，30当量，7份重量)。用庚烷(2X10份体积)萃取溶液。水相用氯化钠饱和，用乙腈 (2X10份体积)萃取。浓缩合并的乙腈萃取液，通过常压蒸馏，与乙酸乙酯进行溶剂交换， 得到ER-817664的乙酸乙酯(3份体积)溶液。从热溶液中滤出盐后冷却至0°C。过滤悬浮 液得到白色固体结晶状的ER-817664。实施例4b实施例4b提供另一种用以上方案Vb和Vc所述的通用方案制备式F-2的化合物 的方法。该方法以ER-817664(按照以上实施例4a进行制备)作为中间体。
将ER_817664(1份重量)溶解于乙腈(10份体积)中，冷却悬浮液至0°C，先后加 入2-乙酸基-2-甲基溴丙烷(4. O当量，2. 4份体积)和水(1. O当量，0. 07份体积)。0°C 下搅拌所得混合物2小时。0°C下，缓慢加入碳酸氢钠(饱和水溶液，8. O当量，40份体积)。 室温下搅拌所得混合物30分钟，然后用MTBE(2X20份体积)进行萃取。有机层用盐水(5
份体积)洗涤，经浓缩得到无色油状产物。
C15H18NO4 精确质量277.1314 Mol. Wt.: 277.3157 将刚刚在上面描述的溴起始物(1份重量)溶解于甲苯(10份体积)中。加入
DBU(1. 8当量，0. 73份体积)，80°C下，对混合物进行加热。 份体积)稀释，用水(5份体积)和盐水(5份体积)洗涤t 末状产物。
冷却混合物至室温，用MTBE (20 然后浓缩有机层得到灰白色粉
OAc
ER-818636
1.O31 CH2CI2/MeOH
2.NaBH4
3.K2CO3
4.HCI, NaIO,
NC"O
ER-818638将起始烯烃化合物(1份重量)(刚在上面描述)溶解于二氯甲烷(5份体积)和甲 醇(5份体积)中，冷却至_40°C至_45°C。用O3处理溶液。通过氮气吹扫除去过量的O3，使 溶液升温至_15°C。加入NaBH4 (1. O当量，0. 18份重量)，使混合物升温至0°C。加入碳酸钾 (1. 3当量)，室温下搅拌悬浮液。0°C下，用IN盐酸(约4当量，约20份体积)中和反应液， 溶液用MTBE(10份体积)萃取以除去亲脂物质。浓缩水层以除去二氯甲烷和甲醇。先后加 入THF (4份体积)和NaIO4 (2当量，2份重量)。反应液用MTBE (10份体积)和n_BuOH(10 份体积)萃取。对合并的有机萃取液进行浓缩，所得粉末经乙酸乙酯研制。过滤后分离得 到浅黄色粉末状的内半缩醛。
52 将ER-818638 (1份重量)与LiCl (2当量，0. 35份重量)搅拌于乙腈(8. 7份体积) 中。25°C下，加入Hunigs碱(1. 5当量)。加入IN盐酸(5份体积)，用MTBE (10份体积) 萃取混合物。浓缩有机物得到ER-818640，用于下一步骤。 将起始α-烯酯化合物(1份重量)(刚在上面描述)溶解于甲醇(10份体积)中， 氮气下加入10重量％钯碳(0.09当量，约0. 33份重量)。然后在氢气下搅拌该悬浮液。悬 浮液过滤通过Celite 垫(20份重量)，用甲醇(20份体积)冲洗滤饼。浓缩滤液，经快速 色谱纯化得到无色油状产物(产率94. 3% )。 在酯(1份重量)的THF(15份体积)溶液中分别加入吡啶(10当量)、Ph3P (7当 量)和NIS (4当量)。室温下搅拌反应混合物。加入柠檬酸水溶液(20重量％，10当量)， 用TBME(30份体积)稀释混合物。分离水层，有机层用水(5份体积)、硫代硫酸钠水溶液 (10%重量/体积，5份体积)、水(5份体积)和盐水(5份体积)洗涤。浓缩有机层，经快 速色谱纯化得到无色油状产物。
将碘起始物(1份重量)溶解于甲醇(30份体积)中，加热至55°C。55°C下，分6 次经80分钟加入NaBH4 (47当量)。冷却反应液至0°C，用IN盐酸(30份体积)进行猝灭。 搅拌5分钟后，混合物用盐水(30分体积)稀释，用DCM(50份体积X2)萃取。有机层经硫
酸钠干燥、浓缩。粗产物直接用于下一步骤。
将醇起始物(1份重量)(刚在上面描述)溶解于乙醇(70份体积)中，加入Ζη(165当量)。 75-80°C下，对悬浮液进行回流。冷却反应混合物至室温，加入IN盐酸(70份体 积)。用DCM(3X 100份体积)萃取混合物，有机层用盐水洗涤并进行浓缩。
将内酯起始物(刚在上面描述)溶解于DCM(50份体积)中，在氮气下，室温下分 别加入三乙胺(5. O当量)、DMAP (0. 3当量)和TBDPSCI (1. 5当量)，室温下搅拌所得溶液 2-3小时。反应完全后，混合物用TBME (100份体积)稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液(10份体 积)、水(10份体积)和盐水(10份体积)洗涤。浓缩有机层，经快速色谱纯化得到无色油 状产物。实施例4c采用以上方案VII所述的通用方案，实施例4c提供另一种制备式F-2的化合物的 方法。该方法以ER-811510(按照实施例3制备，其中用丙酮代替环己酮)作为中间体。 将ER_811510(1份重量，1当量)溶解于二氯甲烷(6. 3份体积)中，冷却至_5°C。 保持温度低于0°c条件下，先后加入吡啶(0. 41份体积，1. 1当量)和溴乙酰溴(0. 44份体 积，1. 1当量)。搅拌反应液1小时，升温至室温。加入水(8份体积)，使分层。有机层依次 用五水硫酸铜水溶液(1. 0M, 10份体积)、水(8份体积)和盐水(10份体积)洗涤，经硫酸 镁干燥、过滤以及真空浓缩，得到褐色固体状的ER-812771。 将ER_812771 (1份重量，1当量)溶解于乙腈(6份体积)中，加入三苯膦，加热 反应液至50°C，保持45分钟。冷却反应液至-10°C后加入1，8-二氮杂双环[5. 4. 0] i^一 碳-7-烯(DBU，0.35份体积，0.8当量)。搅拌反应液15分钟，加热至80°C，保持45分钟， 然后冷却至室温。加入氯化铵(饱和水溶液，10份体积)，水层用乙酸乙酯(3X10份体 积)萃取。合并的有机层经硫酸镁干燥，真空浓缩。粗产物经色谱纯化得到白色固体状的 ER-812772。 将ER_812772(1份重量，1当量)溶解于乙酸乙酯(8份体积)中，加入10%钯 碳(0.05份重量，0.01当量)，用氮气吹扫反应液后在氢气氛下搅拌2小时。在乙酸乙 酯洗涤下，通过硅藻土过滤脱除催化剂。对合并的滤液进行真空浓缩得到白色固体状的 ER-812829。实施例5F~3a 的制备 在反应容器中加入D-古洛糖酸内酯(1份重量，1当量)、环己酮(2-3当量)、甲苯 (6份体积)和对甲苯磺酸(0.021份重量，0.02当量)。搅拌下，加热反应液至回流。共沸 脱除水分后反应完全。将反应混合物冷却至85-90°C，搅拌加剧。搅拌下，经20-30分钟加 入庚烷(5. 2份体积)。冷却至65-70°C，在65-70°C下搅拌30分钟。在65_70°C下过滤固 体产物，同时保持母液温度>35°C。35-40°C下进行再过滤，母液保持室温30分钟。再过滤 母液。滤饼用庚烷(2X1.7份体积)洗涤两次后经干燥得到ER-805715(产率84%，1.6份 重量)。制备ER-805715的另一种方法中，将D-古洛糖酸内酯(1份重量)、环己酮(1.32 份重量，2.4当量)、对甲苯磺酸一水合物(0. 02份重量，0. 02当量)和甲苯(12份体积)一 起回流19小时，同时共沸脱除水分。混合物先后用5%碳酸氢钠水溶液(4份体积)和饱 和氯化钠水溶液(2份体积X2，pH = 7)洗涤。蒸馏浓缩有机相(剩余4. 5份计算体积甲 苯)，冷却至100°C后，在保持内温> 80°C条件下加入庚烷(10份体积)。加热混合物至回 流，保持至少1小时，然后冷却至85°C老化3小时，至80°C老化3小时后冷却至40°C老化
5512小时。过滤收集产物，滤饼用庚烷(2份体积)洗涤。气流干燥滤饼，得到ER-805715(产
率78%，1.48份重量)。 在反应容器中加入ER-805715 (1份重量，1当量)，使之溶解于无水THF (3. 34份体 积)和无水甲苯(2. 5份体积)中。冷却混合物至-15°C —10°C。-15°C —10°C下，经1小 时加入DIBALH(1. 5M甲苯溶液，2. 4份体积，1. 2当量)并搅拌混合物15-30分钟。10°C下， 将反应液加入酒石酸钾钠溶液(1份重量酒石酸钾钠溶于2. 9份重量水)中进行逆猝灭，使 所得混合物升温至室温，搅拌4小时。过滤混合物后分层，用MTBE(2份体积)萃取。合并 有机层，真空脱除溶剂，得到ER-805814(1.02份重量，产率100% )。 将ER_805814(1份重量)溶解于无水THF (3. 3份体积)，用(甲氧基甲基)三苯基 氯化膦(2. 11份重量，2. 1当量)处理。加热反应混合物至28-32°C，然后在保持反应温度 为30-35°C条件下，经100-140分钟加入K0tBu(0. 66份重量，2当量)的无水THF(2. 64份 体积)溶液。5小时后冷却反应液至20-25°C，加入MTBE(5. 11份体积)，搅拌混合物。加入 盐水(3份重量)和水(3份重量)(加料开始就出现放热，用水浴控制在20-25°C )。分离 有机层，用马来酸酐(0. 27份重量)的MTBE/THF(1/1体积比，1.78份体积)溶液进行处理。 向反应混合物中缓慢加入氢氧化钠溶液(0. 88份重量溶于2. 5份体积水)。浓缩有机层，得 到粗品ER-805815 (0. 985份重量)。残渣用MTBE/庚烷(1/4体积比，6. 6份体积)研制三 次。MTBE/庚烷(1/2体积比，45份体积)洗脱下，萃取液过滤通过SiO2 (3份重量)。浓缩 滤液得到ER-805815 (0. 88份重量，产率81% )0在制备ER-805815的另一种方法中，保持反应温度为0-10°C条件下，在(甲氧基甲 基)三苯基氯化膦(3. 12份重量，3. 1当量)的THF(1. 78份重量)悬浮液中加t_BuOK (0. 989 份重量，3当量)的THF (4份重量)溶液。用THF (2 X0. 7份重量)冲洗该加样容器(addition vessel)。保持0_10°C下，向反应液中加入ER-805814 (1份重量，1当量)的THF (1.42份重 量)溶液。用THF (2 X 0.7份重量)冲洗该加样容器。20-30°C下搅拌混合物过夜，30-35°C 下搅拌3小时。冷却反应液至30°C以下，先后用MTBE (3. 7份重量)和10重量％氯化钠水溶液(4份重量)稀释。搅拌混合物30分钟，分离各层。加入马来酸酐(0.63份重量，2. 2 当量)，室温下搅拌混合物30分钟。保持反应液低于15°C条件下，滴加水(6份重量)和氢 氧化钠溶液(48重量％，0.64份重量，2.6当量)。低于15°C下搅拌后，分离下层。先后加 入水(6份重量)和氢氧化钠溶液(48重量％，0. 64份重量，2. 6当量)，加样期间保持混合 物低于15°C。低于15°C下搅拌后分离下层。有机层用15重量％氯化钠水溶液(3X4份重 量)洗涤三次。真空浓缩有机层。残渣用MTBE(1份重量)稀释并进行真空浓缩。40-50°C 下，经30分钟滴加IPE (3份重量)对残渣进行稀释。40-50°C下，搅拌悬浮液1小时，缓慢 冷却至0-10°C，搅拌1小时。过滤固体，滤饼用IPE (2份重量)洗涤。真空浓缩滤液和洗 涤液。残渣用甲醇(2. 37份重量)和水(0.4份重量)处理，用庚烷(2. 74份重量)萃取。 下层用庚烷(2. 05份)萃取9次。合并萃取液，经真空浓缩得到ER-805815 (1. 07份重量， 98. 6% )。ER-805815的另一种后处理方法中，盐水洗涤和浓缩后所制得的粗有机层用 MTBE(2.86份重量)和硅藻土(0.5份重量)处理。搅拌2. 5小时后，经2小时加入庚烷 (1.46份重量)，搅拌混合物过夜。过滤沉淀物。滤饼用MTBE/庚烷(1 1，5份重量)洗 涤。真空浓缩滤液直至体积减小至约3份体积。残渣用甲醇(2份重量)和水(6份重量) 溶解，用庚烷/MTBE(5 1，3X6份重量)萃取混合物。分离有机层，经浓缩得到ER-805815， 用于下一步骤。 将ER-805815 (1份重量)溶解于丙酮(2. 4份体积)和水(0. 4份体积)中。加入 N-甲基吗啉N-氧化物(0. 62份重量，2当量)，冷却混合物至0-5°C。加入OsO4 (0. 15M水溶 液，0. 065份体积)，反应液保持在0-5°C。0-5°C下搅拌反应混合物12小时。0_2°C下，经1 小时加入水(0. 2份体积)。0-5°C下搅拌混合物1小时。过滤产物，用预冷(0-5°C )的丙 酮/水(1/1，体积比，2X0. 7份体积)洗涤固体两次。干燥产物，得到ER-805816(0. 526份 重量，52%产率，残留Os < 17ppm)。制备ER-805816的另一种方法中，在四颈烧瓶中加入ER-805815 (1份重量，1当 量)的丙酮(4份体积)溶液，然后在室温下加入水(0.5份重量)。在混合物中加入无水 N-甲基吗啉-N-氧化物(0. 38份重量，1. 2当量)。25-35°C下，边用水冷却，边分批加入二 水锇酸钾(0. 003份重量，0. 003当量)。将混合物在该温度下保持4小时。室温下加入硫 代硫酸钠(0. 075份重量，0. 49当量)的水(0. 5份重量)溶液，然后搅拌混合物0. 5小时。 将混合物冷却至0-5°C，搅拌2小时。收集所得的沉淀物，湿的滤饼用甲醇(0.6份重量) 和水(1. 5份重量)洗涤得到粗产物(1. 25份重量)。对粗产物样品进行干燥(0. 611份重 量)。在水(3. 05份重量)中加入粗品ER-805816 (1.25份重量)，约25°C下搅拌2小时。过
57滤沉淀物，用水(1. 53份重量)洗涤，得到粗品湿滤饼(1. 05份重量)。对粗产物样品进行 干燥和取样，ICPOs = 37ppm。在水(2. 81份重量)中加入粗品ER-805816 (1. 05份重量)， 约25°C下搅拌2小时。过滤沉淀物，用水(1.4份重量)和甲醇(0.45份重量)洗涤，得到 粗品ER-805816 (0. 736份重量)。对湿的滤饼进行干燥得到粗产物(0. 56份重量，ICP (Os) = 28ppm)。45-55°C下，将ER-805816 (0.56份重量)溶解于丙酮(1. 76份重量)中。在溶 液中加入活性碳(0.027份重量)，相同温度下搅拌0.5小时。过滤混合物，滤饼用热丙酮 (0.214份重量)洗涤。滤液保持在45-50°C，经10分钟加入水(0. 83份重量)，加水过程中 温度保持在40-50°C。冷却混合物至0-5°C，搅拌1. 5小时。过滤白色沉淀物，用丙酮(0. 17 份重量)和水(0. 22份重量)的溶液洗涤后干燥，得到ER-805816 (0. 508份重量，0. 49当 量，KF5. 0%, ICP(Os)9. 6ppm)。
将ER-805816 (1份重量)悬浮于乙酸(0. 89份体积，5. 8当量)和乙酸酐(3. 57份 重量，13当量)中。加入无水氯化锌(0.2份重量，0.54当量)。18-22°C下搅拌反应混合物 24小时。反应液在冰(5份重量)和水(5份体积)中进行猝灭。搅拌下加入乙酸乙酯(10 份体积)，分离水层。水层用乙酸乙酯(10份体积)反萃取。合并的有机层依次用盐水(10 份体积)、5%乙醇钠水溶液(6份体积)和盐水(6份体积)洗涤。浓缩有机层。将粗浓缩 物溶解于25 % EtOAc/hex (4份体积)中，经SiO2过滤。滤垫用25% EtOAc/hex (2 X 12份体 积)洗涤，进一步用25% EtOAc/hex(48份体积)洗涤。浓缩有机层，得到ER_805819(1份 重量，81% )。制备ER-805819的另一种方法中，将氯化锌(0.2份重量，0.54当量)、乙酸酐 (2. 75份重量，10当量)和乙酸(1份重量，6当量)混合。冷却混合物至15-20°C。保持 15-300C内温条件下，加入ER-805816 (1份重量，1当量)。然后在35-40°C下搅拌混合物6 小时。冷却反应混合物至25°C以下。保持反应温度低于25°C条件下，滴加甲醇(3. 2份重 量，4份体积)。加入庚烷(2. 7份重量，4份体积)。保持反应温度低于25°C条件下，加入 水(4份重量，4份体积)。搅拌混合物15分钟，然后分离各相。下层用庚烷(2.7份重量， 4份体积)洗涤两次，弃去庚烷层。下层用甲苯(6. 1份重量，8份体积)萃取两次。合并的 甲苯层用17重量％碳酸氢钾水溶液(0. 82份重量碳酸氢钾溶于3. 98重量份水，4. 36份体 积)洗涤两次，用水(4份重量)洗涤两次并进行浓缩。25-30°C下加入甲醇(3. 95份重量， 5份体积)，搅拌混合物10分钟。25-30°C下加入水(0. 3份重量)。冷却混合物至0°C，加 入晶种。0°c下搅拌混合物1小时，经1小时滴加水(0. 7份重量)。经1小时滴加水(4份 重量)。过滤所得的沉淀物，滤饼用0°C的甲醇(1.03份重量)和水(0.7份重量)的溶液 洗涤两次。干燥滤饼得到ER-805819 (0. 99份重量，0. 84当量)。 将ER-805819(1份重量)溶解于无水乙腈(15份体积)中，用ER-803055 (0. 93份 体积，2当量)处理。冷却反应混合物至0-5°C，经5分钟加入BF3-OEt2 (0. 54份体积，1. 95 当量)，期间保持反应温度为0-5°C。0-5°C下搅拌反应混合物12小时。剧烈搅拌下，将反 应液加至饱和碳酸氢钠(20份体积)中，进行猝灭。用乙酸乙酯(2X8份体积)萃取两次。 合并的有机物用盐水(12份体积)洗涤，经浓缩得到ER-805821(1份重量，88%产率，直接 使用)。制备ER-805821的另一种方法中，将ER_805819(1份重量，1当量)和 ER-803055(0.93份体积，2当量)溶解于无水乙腈(5. 46份重量，7份体积)中。冷却反 应混合物至0-5°C，经5分钟加入BF3-OEt2 (0. 54份体积，1. 95当量)，期间保持反应温度 为0-5°C。0-5°C下搅拌反应混合物20小时，然后在0-5°C下加入庚烷(5. 47份重量，8份 体积)。分离各相，0-5°C下用庚烷(5. 47份重量，8份体积)处理下层。保持反应温度为 0-15°C条件下，滴加7. 4%碳酸氢钾水溶液(0. 64份重量碳酸氢钾溶于8份重量水中)，使 反应猝灭。加入甲苯(8. 65份重量，10份体积)，搅拌混合物30分钟。分离下层，上层有机 层用水(10份体积)洗涤两次，经浓缩得到ER-805821粗品油(1. 05份重量，0. 935当量)。 将ER-805821 (1份重量)溶解于无水THF (8. 4份体积)和无水乙酸甲酯(2份体 积)中。维持17-23°C反应下，经2分钟加入Triton B (OH) (3. 6份体积)。搅拌反应液1. 5 小时。过滤反应混合物。浓缩滤液，通过SiO2- (5份重量，20份体积乙酸乙酯洗脱)。滤 液用盐水(2. 2份体积)洗涤，经蒸发得到ER-805822(0. 54份重量，72%产率)。制备ER-805822的另一种方法中，将ER-805821 (1份重量，1当量，11. 18g， 21.81mmol)溶解于无水MTBE (4. 4份重量，6份体积)中，冷却至0_5°C。0_5°C下，向混合物 中经1小时加入甲醇钠(28重量％甲醇溶液，0. 564份重量，1. 5当量)，相同温度范围下搅 拌3小时。加入乙酸(0. 188份重量，1.6当量)猝灭反应，加样期间保持0-5°C。搅拌混合 物过夜，然后在0-5°C下，用5重量％碳酸氢钾水溶液(3份重量)和乙酸乙酯(3. 6份重量，4 份体积)进行处理，随后搅拌15分钟。相分离后，下层用乙酸乙酯(3. 6份重量，4份体积) 萃取两次。对合并的有机层进行浓缩。残渣中加入丙酮(2份重量，2. 5份体积)和IPE (2
59份重量，2.7份体积)，0-51下搅拌过夜。混合物过滤通过Celite (ο. 25份重量)，用丙酮 (2份重量)洗涤。浓缩滤液得到粗品油(0.55份重量)。在残渣中加入丙酮(0.2份重量， 0. 25份体积)和IPE (0. 54份重量，0. 75份体积)并40_50°C下搅拌1小时。室温下在溶液 中加入ER-805822晶种，室温下搅拌过夜。室温下，经2小时向悬浮液中加入IPE (1. 27份 重量，1. 75份体积)。室温下搅拌5小时后，过滤收集沉淀物，滤饼用丙酮/IPE (1/10) (2份 体积)洗涤。所得滤饼在盘式腔室(tray-type chamber)中于30_40°C干燥过夜，得到目标 产物ER-805822(0. 286份重量，0. 38当量，基于ER-805819的产率为38. 0% ) 粗品ER-805822的另一种后处理方法中，将浓缩最终的乙酸乙酯溶液后所得到的 残渣溶解于IPA(2份重量)中，加热溶液至50°C。加入庚烷(5份重量)，冷却混合物至 20°C，并加入晶种。20°C下搅拌混合物过夜。加入庚烷(10份重量)，30分钟内将混合物冷 却至-5°C，在_5°C下搅拌5小时。过滤混合物，用庚烷(2份重量)洗涤滤饼。真空下对滤 饼进行气流干燥，得到ER-805822 (60% )。 将ER-805822 (1份重量)溶解于乙酸乙酯或其它适当的溶剂(5份体积)以及水 (5份体积)中。保持反应温度为0-10°C条件下，经30分钟-1小时分批加入NaIO4 (0. 58份 重量，1. 05当量)。搅拌反应液至多2小时。0-10°C下用氯化钠(1份重量)处理反应混合 物并搅拌30分钟。过滤反应混合物，滤饼用乙酸乙酯(2份体积)冲洗。分离各相，下层用 乙酸乙酯(5份体积)萃取三次。合并的有机层用20%氯化钠水溶液(5份重量)洗涤。浓 缩有机层得到ER804697(1份重量)。将残渣溶解于甲苯(2份体积)中，浓缩溶液。将残渣 溶解于乙腈(7份体积)中，用于下一步骤。
惰性气氛下，在反应容器中加入NiCl2 (0. 025份重量)和CrCl2 (2. 5份重量)。加 入无水二氯甲烷(5份体积)。开始搅拌，冷却混合物至0-3°C。保持温度低于20°C条件下， 加入无水DMSO (6. 7份体积)，同时剧烈搅拌45分钟。将ER-804697 (1份重量)溶解于无 水二氯甲烷(1份体积)中并加至反应容器中。使所得混合物升温至25°C，经20分钟加入 ER-806643(2.58份重量)。保持反应温度低于45°C。加样完毕后，在25_35°C下搅拌反应液30分钟。加入甲醇(5份体积)，搅拌混合物10分钟。加入MTBE(33份体积)，将悬浮液 转移至IN盐酸(25份体积)和水(10份体积)中。搅拌混合物5分钟。水层用MTBE(10 份体积)反萃取，合并的有机层依次用0. 2N盐酸(17份体积)、1%氯化钠溶液(2X17份体 积，洗涤两次)和盐水(13份体积)洗涤。浓缩有机层，经纯化(Si02，25份重量，10个柱体 积的乙酸乙酯/己烷，1/3. 5体积比)得到ER-804698 (0. 53份重量，61% )。另一种方法中，该反应在手性配体ER-807363的存在下进行，其方法与下文所述 的ER-118047制备方法基本相似。制备ER-804698的另一种方法中，对DMSO (7份体积)和乙腈(7份体积)进行脱气 并冷却至0-10°C。使内温不超过20°C条件下，用CrCl2(10当量，3. 47份重量)和NiCl2 (0. 1 当量，0.037份重量)分批处理该溶液。0-10°C下，滴加ER-804697(1份重量，1当量)的乙 腈(7份体积)溶液和ER-806643 (5当量，2. 5份重量)，期间内温不得超过15°C。5_15°C 下搅拌反应混合物过夜。在混合物中加入甲醇(5. 5份重量)、水(7份重量)和MTBE (5. 2 份重量)。搅拌反应液1小时，分离下层(层1)。在上层中加入氯化钠(1.5份重量)与 水(13. 5份重量)的预混溶液。搅拌混合物1小时，分离下层(层2)。在上层中加入庚烷 (4. 8份重量)、甲醇(2. 8份重量)以及氯化钠(1. 5份重量)与水(13. 5份重量)的预混 溶液。搅拌混合物1小时，分离下层(层3)。上层经除水后保存(有机物1)。在反应器中 加入层1、甲醇(2. 8份重量)和MTBE(2. 8份重量)。搅拌混合物过夜。分离并弃去下层。 用层2处理上层。搅拌混合物1小时，分离并弃去下层。用层3和庚烷(4. 8份重量)处 理上层。搅拌混合物1小时，分离并弃去下层。上层经除水后保存(有机物2)。在反应器 中加入层3、MTBE (0.8份重量)和庚烷(2.7份重量)。搅拌混合物1小时，分离并弃去下 层。将上层与有机物1和有机物2合并。对合并的有机物进行过滤和减压浓缩，得到粗品 ER-804698,经色谱纯化(SiO2, 25份重量，10个柱体积的乙酸乙酯/己烷，体积比1/3. 5)得 到 ER-804698 (0. 67 份重量，57 %产率)。制备ER-804698的另一种方法中，粗物质不经过纯化直接用于下一步骤。
用乙酸(4. 2份重量)和水(4. 2份重量)处理ER804698 (1份重量，1当量)。加热混 合物至90-97°C，保持100分钟。冷却混合物至15°C以下，然后在15°C以下用庚烷(2X2. 7 份重量)洗涤两次。相分离后，在使温度不超过15°C条件下，向下层滴加20重量％碳酸氢 钾水溶液(7. 7份重量，35当量)和MTBE (5. 95份重量)的混合物。相分离后，上层依次用 5重量％碳酸氢钾水溶液(0.2份重量)洗涤，用5重量％氯化钠水溶液(2X0.2份重量) 洗涤两次。减压浓缩有机层，加入MTBE(1. 49份重量)。将混合物加热至55°C，搅拌至溶解。 在溶液中加入庚烷(1.00份重量)，冷却溶液至40-45°C。在溶液中另外加入庚烷(4. 47份 重量)，冷却溶液至5-15°C，然后搅拌过夜。过滤结晶体，用庚烷冲洗，得到ER-807023 (0. 58 氮气氛下，在反应器中加入ER_807023(1份重量，1当量)和MTBE(7.43份重 量)。在反应液中加入2，6_ 二甲基吡啶(2. 15份重量，7.5当量)。0°C下，在混合物中滴 加TBSOTf (2. 47份重量，3. 5当量)。0-10°C下搅拌反应混合物30分钟，然后经1小时升温 至23°C，在23°C下保存16小时。保持温度低于30°C条件下，在反应混合物中依次滴加甲醇 (0. 21份重量，2. 5当量)和水(14. 8份重量)。相分离后，上层分别用IN盐酸水溶液(16. 2 份重量)、5%氯化钠水溶液(14. 8份重量)、5%碳酸氢钠水溶液(14.8份重量)、5%氯化钠 水溶液(14. 8份重量)和5%氯化钠水溶液(14. 8份重量)洗涤。通过减压蒸馏对上层有 机层进行浓缩，得到粗品ER-804699。加入甲醇(7. 91份重量)，加热混合物至50°C，保持 30分钟。经5小时将混合物冷却至0°C，然后在0°C下搅拌过夜。过滤固体，滤饼用冷甲醇 (4份重量)洗涤，经干燥得到ER-804699 (1. 42份重量，74%产率)。 氮气氛下，在反应器中加入ER-804699 (1份重量，1当量)的甲苯(2. 60份重量) 溶液。加入乙腈(4. 72份重量)。加入TBSCl (0.011份重量，0.05当量)。使反应混合物 升温至30°C，加入NIS (1.25份重量，4当量)。30°C下搅拌反应混合物22小时。冷却反 应液至25°C，保持内温低于30°C下，经10分钟加入硫代硫酸钠水溶液和碳酸氢钠的混合 物(10.35份重量)。25°C下，搅拌反应液30分钟。分离水层。上层用10%氯化钠水溶液 (2X9. 9份重量)洗涤两次。减压浓缩有机层，得到粗品ER-803895，经硅胶色谱纯化得到 ER-803895 (0. 96 份重量，89. 5%产率)。实施例6F-la. F~2a 和 F_3a 的组装及 B-1939 的制备A. (R)或(S)N-[2-(4_异丙基-4，5-二羟基-喝唑-2-基)-6-甲基-苯基]-甲
磺酰胺的制备 在预干燥的玻璃衬里的反应器中加入三光气(1份重量，1当量)和无水THF(2份 体积)，冷却至内温为-10°C。在第二个预干燥的玻璃衬里的反应器中加ER-807244(1. 27 份重量，2.5当量)和无水1~冊(3份体积)，冷却至内温为-101。以使内温不超过15°C的 速度将第一个反应器的内容物转移至第二个反应器中。加样完毕后，在0°C内温下搅拌反应 液1小时，然后逐渐升温至25°C。喷射氮气18小时以洗除过量的光气(用2N氢氧化钠溶 液收集废气)。加入MTBE (3份体积)，40-46氮气吹扫下蒸馏脱除溶剂，如果需要加入更多 的MTBE。完成脱除光气后，将混合物冷却至内温为5-10°C，在MTBE (3份体积)洗涤下对溶 液进行过滤，得到白色固体结晶状ER-807245(1. 12份重量，0. 97当量)。
体积)
在预干燥的惰性反应器1中，加入ER-807245(1份重量，1当量)和无水DMF (4份 搅拌下，将混合物加热至内温为95°C。加热反应器2至内温为90°C，在该反应器 中，将D或L-缬氨醇(1.05当量，0.61份重量)溶解于无水DMF(1.3份体积)中。将反应 器2的内容物转移至内温为90°C的反应器1中。发现有二氧化碳逸出，通过氮气流失排出 反应液。90°C下搅拌反应溶液3小时后，冷却至内温为65°C。然后，在反应器1中加入氢氧 化锂(0. 47份重量，2当量)的水(2份体积)悬浮液，65°C内温下搅拌悬浮液1小时。在 该反应器中加入水(5份体积)，经3小时冷却至内温为约5°C。约5°C内温下，搅拌混合物 8小时，在水(2X4份体积)和正庚烷(2X3份体积)依次洗涤下，过滤收集目标产物。真 空下，35°C下用氮气流干燥产物24小时或直至KF彡250ppm,得到固体结晶状的ER-806628 或 ER-808056 (0. 80 份重量，0. 60 当量)。
氮气下，在预干燥的惰性反应器中加入ER-806628或ER-808056 (1份重量，1当 量)、吡啶(3份重量，11. 4当量)和DMAP (0.03份重量，0.05当量)。将反应液冷却至内温 为-10°C后，以使内温低于15°C的速度加入甲磺酰氯(1.46份重量，3当量)。加样完毕后，在0-15°C内温下搅拌反应液1小时，然后经2小时缓慢升温至25°C。以使内温不超过35°C 的速度先后加入MTBE (2. 6份体积)和水(2份体积)。用6N盐酸(约1. 9份体积)分批滴 定两相混合物，直至水层的PH为约3-5。若pH低于3，加入30重量％碳酸钠水溶液进行反 滴定以得到所需要的PH。各相分开，分离水相。将所有的有机物与水(0.7份体积)混合， 弃去水相。将MTBE常压蒸馏至约2份体积，以得到55°C恒定沸点，且KF < 500ppm。如果需 要另外加入MTBE。冷却溶液至内温为5-10°C，需要时加入晶种诱导结晶。加入正庚烷(0.5 份体积)，5°C下搅拌混合物18小时，正庚烷(2X3份体积)洗涤下，过滤收集ER-806629 或ER-807363。将滤液浓缩至1/2体积并冷却至0°C，得到第二批结晶。氮气下干燥滤饼 18小时。在预干燥的反应器中加入粗称重的ER-806629，加入MTBE (3份体积)。将所得混 合物加热至内温为45-50°C，保持45分钟，然后经3小时缓慢冷却至5°C，需要时可加入晶 种。加入正庚烷(0.5份体积)，5°C内温下搅拌混合物18小时。正庚烷(2X3份体积)洗 涤下过滤收集固体产物，然后35°C下真空干燥24小时，得到固体结晶状的ER-806629或 ER-807363 (1. 7 份重量，0. 57 当量)。B. F-Ia和F_2a的组装以及分子内醚的形成 在适当大小的反应器1中加入ER-807363 (1.82份重量，3. 55当量)，进行氮气置 换。加入无水THF(15份体积)。在反应器2中，对ER-806067(F-la，l. 14份重量，1. 1当量) 和ER-805973 (F-2a, 1份重量，1当量)进行混合，使之溶解于无水THF (6. 3份体积)中。搅 拌下，对该两个反应器喷射氮气30-45分钟。惰性气氛下，在反应器2中加入CrCl2 (0. 75份 重量，3. 55当量)，然后加热至内温为30°C。以使内温不超过45°C的速度在反应器2中加入 三乙胺(0.62份重量，3. 55当量)。加样完毕后，保持30°C内温1小时。1小时后，将反应 器2冷却至0°C，加入NiCl2 (0. 02份重量，0. 1当量)形成惰性环境，加入反应器1的内容物 后使反应液升温至室温。冷却反应器2至内温为0°C，然后以使内温不超过10°C的速度加 入乙二胺(1.2份体积，10当量)。注意发现放热。搅拌反应液1小时，然后加入水(8份 体积)和正庚烷(20份体积)，搅拌两相混合物4分钟，分层。分离有机层，水层用MTBE(20 份体积)反萃取。将合并的有机层真空浓缩至粗品油，然后与无水THF(2X10.5份体积) 形成共沸物。粗产物溶解于无水THF(4. 5份体积)中，然后在_20°C下保存，直至用于下一 步骤。
64 对前一步骤所得到的ER-808227/ Η溶液进行KF分析。若KF < IOOOppm,则继 续反应。若狀> 1000 111，则与无水11冊(4.1份体积)进行真空共沸。重复共沸操作直至 符合要求。符合要求的终溶液中含有溶于无水THF(4. 1份体积)的粗品ER-808227。一 旦符合要求，在适当大小的惰性反应器中加入无水THF(106份体积)和前一步骤所得到的 ER-808227/ Η溶液。冷却反应器至内温为-15°C至_20°C，然后以使内温不超过_12°C的速 度加入0. 5M KHMDS的甲苯(9. 1份重量，3. 0当量)溶液。推进完全反应需要约4. 5当量的 KHMDS0 0°C内温下，将反应液加至半饱和的氯化铵(40份体积)中进行逆猝灭。加入正庚烷 (80份体积)，搅拌2-5分钟后分层。分离有机层，水层用MTBE (70份体积)反萃取，然后合 并有机层并用饱和氯化钠溶液(70份体积)洗涤。分离有机层并进行真空浓缩。在粗浓缩 物中加入正庚烷(60份体积)。注意ER-808373从溶液中沉淀出来。过滤所得的悬浮液， 用正庚烷(20份体积)洗涤固体。真空浓缩滤液，得到棕色油状的粗品ER-806746(约4份 重量)。注意当另外的ER-808373从溶液中沉淀出来时，重复过滤操作。粗品ER-806746 经SiO2柱色谱纯化得到亮黄色(clear yellowish)油状的ER-804027 (1. 16份重量，0. 55 当量)。色谱操作如下首先用足量的MTBE冲洗柱子以除去水分，然后用庚烷冲洗柱子以除 去MTBE。将ER-806746庚烷溶液形式装柱，先后用庚烷/MTBE(5 1)和庚烷/MTBE (4 1) 将其从柱中洗脱出来，用紫外检测器监测230nm处的级分。
在反应器中加入ER-804027 (1份重量，1当量)和无水二氯甲烷(7. 6份体积)。 冷却反应器至内温为_78°C，然后以使内温不超过_60°C的速度加入IM DIBALH的二氯甲 烷(3.0份重量，2. 25当量)溶液。以使内温不超过-60°C的速度加入甲醇(0.1份体积)。 注意逸出氢气，并用氮气流进行稀释。加样完毕后，使混合物升温至室温后加入IN盐 酸(10. 6份体积)和MTBE (25份体积)。搅拌混合物20分钟，分层。分离有机层，水层用 MTBE (15. 3份体积)反萃取。合并有机层，分别用水(3份体积)、饱和碳酸氢钠(3份体积) 和饱和氯化钠(3份体积)洗涤后真空浓缩。粗浓缩物经SiO2柱色谱纯化得到白色泡沫状 的 ER-804028 (0. 84 份重量，0. 93 当量)。
C. F-3a的并入以及转换成B-1939 氩气氛下，将ER-803895 (F_3a)溶解于无水甲苯(14份重量)中并冷却至< -75。 然后以使内部反应温度< -70°C的速度加入DIBALH(1. 5M甲苯溶液，0. 95份重量，1. 3当 量)。搅拌所得的混合物30分钟后用无水甲醇(0.13份重量，3. 2当量)进行猝灭，期间保 持内部反应温度< -65°C。使反应混合物升温至-10°C，在MTBE (3. 74份重量)冲洗下转移 至含有IN盐水(10.2份重量)的后处理容器中。搅拌混合物30分钟，排除水层。有机相 依次用IN盐酸(10. 2份重量)、水(10份重量)、饱和碳酸氢钠水溶液(10份重量)和盐水 (10份重量)洗涤，然后进行减压浓缩。浓缩物经硅胶柱色谱纯化得到ER-803896 (0. 96份 重量，93%产率)。该产物在-20°C下保存于氩气下。 0°C下，用正丁基锂(1. 6M己烷溶液，1. 02份重量，1. 5份体积，2. 05当量)以使内 温不超过5°C的速度处理共沸干燥的砜ER-804028(1.0份重量，1当量)的无水四氢呋喃(5 份体积，4. 45份重量)溶液。0-5°C内温下搅拌混合物10分钟，然后冷却至<-75°C。将共 沸干燥的醛ER-803896 (1.07份重量，1. 23当量)溶解于无水己烷(3. 53份重量，5. 35份体 积)后冷却至< _75°C。在内温< _65°C条件下，通过套管将醛溶液加至ER-804028阴离子 液中。_78°C内温下，搅拌混合物45分钟，然后加入饱和氯化铵(5份体积)、甲基叔丁基醚 (10份体积)和水(5份体积)进行猝灭。弃去水层，减压浓缩有机层。粗物质经C-18反相 色谱纯化得到ER-804029 (84%, 1. 57份重量)。 将砜-二醇ER-804029 (1份重量，1当量)溶解于湿的二氯甲烷(7. 4份体积，含水 0.04重量％)中，置于20-25°C水浴中。一次加入Dess-Martin试剂(0. 67份重量，2. 5当 量)。用饱和碳酸氢钠(10份体积)和10重量％亚硫酸钠水溶液(10份体积)猝灭反应 混合物，搅拌30分钟。混合物用饱和氯化钠(10份体积)稀释，用MTBE (25份体积)萃取。 弃去水层，浓缩有机层，经硅胶色谱纯化得到ER-804030(0. 9份重量，90% )。-20°C下，该物
质保存于惰性气氛下。
惰性气氛下，在预干燥的反应器中加入二碘化钐溶液(2. 5当量)，将该溶液冷却 至内温< _70°C。将ER-804030 (1份重量)溶解于无水甲醇(4. 1份重量)和无水THF (2. 3 份重量)中，然后冷却至<-70°C。以使内温不超过-70°C的速度在冷的钐溶液中加入 ER-804030。内温不超过-65条件下，用碳酸钾/罗谢尔盐/水(1/10/100 ；重量/重量/体 积，15份体积)和MTBE (5份体积)猝灭反应。后处理溶液加完后，使反应液升温至室温，用 后处理溶液(20份体积，冲洗)和MTBE (20份体积，冲洗)将混合物转移至另一个容器中。 弃去水层，蒸发有机层，残渣经硅胶色谱纯化得到ER-118049(0. 77份重量，85% )。-20°C下 该产物保存于惰性气氛下。
在预干燥的反应器中加入(S)-配体ER_807363(2. 05份重量)，进行氮气置换。一 次加入CrCl2 (0. 85份重量，10当量)后加入无水乙腈(21. 5份重量)，使混合物升温至并保 持在30°C _35°C。一次加入三乙胺(0. 7份重量，0. 96份体积，10当量)，搅拌混合物1小时。一次加入NiCl2 (0. 09份重量，1当量)后经30分钟加入酮醛ER-118049的无水THF (2. 43份 重量，2. 73份体积)溶液。撤除热源，加入庚烷(20.5份重量，30份体积)和€61^6 (1.5 份重量)。搅拌混合物5分钟，过滤通过Celite 垫(15份重量)用庚烷(7. 3份体积)和 乙腈(5份体积)冲洗Gelite 垫。将滤液转移至另外一个漏斗中，除去下层。需要时，用 乙腈(最多47. 2份重量，最多60份体积)洗涤合并的庚烷层。减压蒸发庚烷层，产物经硅 胶色谱纯化得到ER-118047/048 (0. 64份重量，70% ) 0 将烯丙基醇ER-118047/048溶解于二氯甲烷(含0.04重量％水，9体积)中，将反 应器至于水浴(20°C )中，用Dess-Martin试剂(0. 48份重量，1. 5当量)处理溶液。反应 混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(9份体积)和10%亚硫酸钠水溶液(9份体积)处理后搅拌 20分钟，通过DCM(10份体积)转移至另一个漏斗中。弃去水层，蒸发有机层至残渣。粗物 质经快速色谱纯化(用3个柱体积的DCM/庚烷(1 1体积比)预处理，用1 IDCM/庚 烷将物质装柱，然后用10/10/1庚烷/DCM/MTBE进行洗脱)。浓缩含有产物的级分，-20°C
下保存于惰性气氛下。 或者，按如下方法将ER-118047/48氧化成二酮ER-118046。在烧瓶中加入 ER-118047/48 (1份重量，1. 0当量)，室温下加入甲苯(10份体积)和DMSO (0. 15份重量，2. 5 当量)。加入三乙胺(0. 31份重量，4. 0当量)，将溶液冷却至-15°C。加入纯净TCAA(0. 33 份重量，1.4当量)，使反应液升温至0°C。然后在0°C下搅拌10分钟。再次搅拌反应液10 分钟后用IPA(0. 15份体积)进行猝灭。0°C下搅拌反应液10分钟。经2分钟加入IN盐酸 (5份体积)，使反应液升温至室温并用MTBE(5份体积)稀释。形成两个透明层，移除水层。 有机层用5份体积的5%碳酸氢盐(水溶液)洗涤，用旋转蒸发仪浓缩至深黄色油，经硅胶 色谱纯化(91%分离产率)。
68 室温下，在适当大小的反应容器(容器A)中先后加入盐酸咪唑(0. 39份重量，5当 量)和IM TBAF的THF溶液(7. 6份体积，10当量)。搅拌所得的混合物直至均勻(15-30 分钟)。在第二个反应容器(容器B)中加入ER-118046(1份重量，1当量)和THF(33份 体积)。将容器B的内容物置于惰性气氛下并进行搅拌直至ER-118046完全溶解。在烧瓶 B(ER-118046/THF)中一次加入烧瓶A的内容物(TBAF/咪唑)。3_4天后，将反应溶液装柱， 进行硅胶色谱纯化。 氮气氛下，将干燥的ER-118064(F_12，其中R1为甲氧基)残渣溶解于无水二氯甲 烷(28份体积)中，用PPTS (1. 0份重量，5. 2当量)一次处理。30-90分钟后，将反应混合 物直接从顶部装载入合适的柱子中，进行硅胶色谱纯化。真空浓缩目标级分ER-076349。对 所有的纯级分进行浓缩，所得到的物质在甲苯(20份体积)中共沸两次，得到易碎的无色固 体/泡沫状的ER-076349 (0. 44份重量，0. 79当量(对残留甲苯校正后))。
在清洁干燥的反应容器(烧瓶C)中，将ER-076349 (1份重量，1当量)溶解于无 水甲苯(20份体积)中，减压浓缩至干。将该物质再次溶解于无水甲苯(20份体积)中， 浓缩至干。将该物质溶于DCM(5份体积)中，将溶液置于氩气氛下。一次加入三甲基吡啶 (0.66份重量，4.0当量)。一次加入吡啶的DCM溶液(烧瓶B中)(5摩尔％ )。将烧瓶C 中的所得混合物冷却至内温为-20至-25 °C。保持内温低于-16°C下滴加Ts2O的DCM溶 液(1.02当量)。-20至-25°C下搅拌反应液80分钟后经20分钟升温至0°C，进一步搅拌 20分钟。用水(2份体积)猝灭反应。移除水浴，使反应液升温至室温(15-20°C)并进行 搅拌(20分钟)。用IPA(100份体积)将反应液冲洗至更大的容器中，在反应液中加入氢 氧化铵水溶液(100份体积)。室温下搅拌反应液15-36小时，监控就地生成的甲苯磺酸酯
69(ER-082892)和环氧化物(ER-809681)的消失情况。减压下，浓缩反应液至干或接近干。所 得物质用DCM(25-40份体积)稀释，用pHIO的缓冲液(碳酸氢钠/碳酸钠(水溶液)，10 份体积)洗涤。水相用25份体积的DCM反萃取，将合并的有机层浓缩至干。所得游离胺经 硅胶色谱(以乙腈/水缓冲液为流动相)纯化。对合并的级分进行减压浓缩以脱除乙腈。 所得水层用DCM(40份体积)和30份体积的缓冲储备液(pHIO，碳酸氢钠/碳酸钠)稀释。 充分混合各层并进行分离。水相用25份体积的DCM反萃取，将合并的有机层浓缩至干。所 得游离胺经精致过滤成3 IDCM/戊烷溶液，浓缩至干(0.80份重量)得到B-1939。
虽然，我们对本发明的大量实施方式进行了描述，显然可对我们的基本实施例进 行变换以提供利用本发明化合物及方法的其它实施方式。因此，应理解的是，本发明的范围 由所附的权利要求所定义，而不是由实施例方式表述的具体实施方式
加以限定。
权利要求
一种式F 4的化合物其中PG1、PG2和PG3各自独立为氢或合适的羟基保护基；R1为R或 OR；每个R独立为氢、C1 4卤代脂族基、苄基或C1 4脂族基；以及LG1为合适的离去基团。FSA00000204750600011.tif
2.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物为式F-4’的化合物
3.根据权利要求2所述的化合物，其中R1为0R，其中R为氢、甲基或苄基。
4.根据权利要求2所述的化合物，其中PG1和PG2均为氢。
5.根据权利要求2所述的化合物，其中PG1和PG2各自独立为合适的羟基保护基。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中PG1和PG2中的一个或两个连同各自结合的氧 原子一起为甲硅烷基醚或芳基烷基醚。
7.根据权利要求6所述的化合物，其中PG1和PG2均为叔丁基二甲基甲硅烷基。
8.根据权利要求5所述的化合物，其中PG1和PG2连同与它们结合的氧原子一起形成 二醇保护基。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中所述二醇保护基为环缩醛或缩酮、亚甲硅基衍 生物、环碳酸酯或环硼酸酯。
10.根据权利要求2所述的化合物，其中LG1为磺酰氧基，任选取代的烷基磺酰氧基、任 选取代的烯基磺酰氧基或任选取代的芳基磺酰氧基。
11.根据权利要求10所述的化合物，其中LG1为甲磺酰基或甲苯磺酰基。
12.根据权利要求2所述的化合物，其中所述化合物为
全文摘要
本发明提供用于制备软海绵素B的中间体。更具体而言，本发明提供式(F-4)的大环化合物、其合成方法及中间体。这类化合物及其组合物用于治疗或预防增生性疾病。
文档编号C07F7/18GK101899026SQ20101023663
公开日2010年12月1日 申请日期2005年6月3日 优先权日2004年6月3日
发明者B·奥斯塔, C·E·蔡斯, F·G·房 申请人:卫材R&D管理有限公司