用依帕珠单抗治疗自体免疫和炎性疾病的制作方法

专利名称：用依帕珠单抗治疗自体免疫和炎性疾病的制作方法
技术领域：
本发明涉及用抗CD22抗体(特别是依帕珠单抗)治疗自体免疫和炎性疾病，特别是全身性红斑狼疮。
背景技术：
自体免疫疾病包括超过80种慢性疾病，其影响约5 % -8 %的一般性群体。近几十年中，在了解免疫系统方面取得了重要进展，这使得更好地领会到B细胞在下列中的作用 先天性免疫和适应性免疫之间的相互作用，淋巴细胞活化和抗原加工，免疫耐受的原理，B 细胞和T细胞串扰(crosstalk)，细胞因子信号传导和通过耗竭或调节B细胞来治疗自体免疫疾病的新方法(包括阻断共刺激)。B细胞被认为在自体免疫疾病(例如类风湿性关节炎、血清阴性脊柱关节病、原发性干燥综合征、血管炎和全身性红斑狼疮(SLE))的免疫病原性中有中心的重要性。B细胞代表用于治疗自体免疫病症的靶标。迄今为止，有若干靶向 B细胞特异性抗原以耗竭或调节B细胞的治疗性抗体，利妥昔单抗(抗CD20嵌合抗体)，奥瑞珠单抗(人源化的抗CD20抗体)，奥法木单抗(人抗CD20抗体)和贝利单抗(抗BlyS 或BAFF人抗体)。用利妥昔单抗进行的临床研究显示出，在利妥昔单抗的简短给药方案之后，不可检测到循环的B细胞。用抗CD20抗体耗竭B细胞是治疗自体免疫疾病的新方法。 然而，与B细胞耗竭相关的持续免疫抑制关于传染性和肿瘤疾病的出现增加给患者造成了风险。迄今为止，可获得有限的长期安全性数据。因此，本领域中需要开发对于涉及B细胞的自体免疫病症(例如类风湿性关节炎、SLE、干燥综合征或血管炎)的治疗，这涉及调节B 细胞活性而没有严重的B细胞耗竭，从而增加治疗的安全性。全身性红斑狼疮(SLE)被归类为可涉及许多器官系统的自体免疫疾病、炎性多系统风湿病或胶原血管病。在一些研究中，对于欧洲和美国被影响的个体数目的估算在M 至6 5例/100，000人口的范围内。狼疮的促发因素包括亚洲或非洲人种和女性性别。90% 患有狼疮的患者是女性，并且症状的出现通常发生在15至50岁之间。全身性红斑狼疮似乎不是均一性的疾病而是一组相关的综合征，其具有广泛变化的呈现、身体系统参与的程度和临床病程。在SLE中常见的临床特征为血液和淋巴病症(淋巴结病)，心脏病症(例如心肌病、心包积液、心包炎)，眼睛病症(例如干燥性角结膜炎)，胃肠病症(例如口腔溃疡，胰腺炎，腹膜炎，咽炎)，一般性病症(例如不适、疲劳、发热、重量减少)，神经系统病症 (例如脑血管意外、认知障碍、偏头痛、头痛、外周性神经疾患)，肌肉骨骼及结缔组织病症 (例如关节痛、关节炎(不是腐蚀性或破坏性的)、纤维肌痛、破裂、肌炎、骨坏死、骨质疏松、 骨质减少)，精神病学病症(例如情绪障碍、焦虑、抑郁、神经症、由一般性的医疗状况引起的精神障碍、精神病病症)，肾和泌尿系统病症(例如狼疮性肾炎、肾病综合征)，呼吸系统、 胸及纵隔病症(例如胸膜炎、肺炎、肺动脉高压)，皮肤和皮下组织病症(例如脱发、皮肤红斑狼疮、皮炎、全身红斑、网状青斑、脂膜炎、丘斑疹、全身性红斑狼疮疹、荨麻疹)和血管病症(例如高血压、雷诺现象、毛细血管扩张、血小板减少症、血栓性静脉炎、血管炎)。此外， 大多数SLE患者呈现出异常的抗体样式，这包括存在抗核(ANA)和抗双链DNA(抗dsDNA) 抗体。
SLE的临床病程是阶段性的，其紧接着增加潜在的障碍和器官损伤而复发爆发。皮质类固醇是治疗的基石，但是其与大量的副作用相关，所述副作用最常见于长期使用的过程中。较低水平活性的设置中所使用的其它药物包括镇痛药、非类固醇类抗炎药(NSAIDs)、 局部类固醇类药和抗疟药(例如氯喹或羟基氯喹)，而常见的支持性药物包括用于肾性高血压或雷诺综合征的血管扩张剂(钙通道阻断剂、血管紧张素转换酶[ACE]抑制剂)，局部治疗疹或干燥综合征(sicca syndrome)，输注，用于血细胞减少的静脉内(i. v.)球蛋白， 抗惊厥药，抗偏头痛药物，用于复发性血栓形成的抗凝药，以及抗抑郁药。高剂量的皮质类固醇(例如0.5至1.0 mg/kg/天口服泼尼松(或等同物)或500mg至Ig每日脉冲(pulse) i.v.甲泼尼松)被用于处理急性SLE爆发，而免疫抑制剂(例如硫唑嘌呤、环磷酰胺、甲氨蝶呤、麦考酚酸酯、来氟米特)一般被用于中度和严重的情形中(当其它的治疗无效时)或者用于限制或预防由疾病或皮质类固醇应用(“类固醇节制”)引起的长期主要器官损伤。 这种现存的治疗性医疗设备是不足的，因为其有限的效力和和/或不良反应特征。尽管对于具有良好安全性特征的新的有效的SLE疗法有高的医疗需求，已证实此类疗法的开发是特别困难的，并且许多候选的疗法都失败了(Eisenberg，2009)。唾液酸粘附素CD22是免疫球蛋白超家族中细胞粘附分子组的成员，其显示出以末端唾液酸残基结合聚糖。CD22是130-kDa的蛋白，其含有七个细胞外免疫球蛋白样结构域、短的跨膜序列和78个氨基酸的胞质尾部。CD22是细胞表面糖蛋白，其独特地位于B细胞和源自B细胞的肿瘤细胞上。紧接着B细胞的活化，细胞表面CD22的表达水平起初增加，但是随后在被分化为产生抗体的细胞后被下调。CD22在B细胞活化中的关键性作用为开发干扰B细胞介导的免疫应答的试剂提供了非常好的可能性。鼠单克隆抗体LL2(原始命名为EPB-2)是B细胞(⑶22)特异性Ig^a单克隆抗体，其为针对Raji Burkitt淋巴瘤细胞产生的，并被发现对于正常B细胞和B细胞肿瘤有高选择性，但是与霍奇金氏病、实体肿瘤或非淋巴组织不反应(Pawlak-Byczkowska et al., 1989)。在LL2的嵌合之后(Leung et al.，1994)，开发了鼠LL2的人源化IgG1 (κ)形式用于临床应用，并将其命名为依帕珠单抗0iLL2) (Leung et al.，1995)。通过将鼠亲本源抗体的互补决定区(CDR)嫁接到人1 遗传骨架中而制造了编码依帕珠单抗的构建体。所产生的依帕珠单抗仅在抗原结合位点处含有原始的鼠序列，其构成分子的大约10%，其余的部分是人框架序列。在原发性斯耶格伦综合征(Steinfeldet al.，2006)和 SLE(Steinfeld and Youinou,2006)中进行了使用依帕珠单抗进行的有限非盲I期临床研究。在两个研究中，都应用了下列给药方案隔周一次、连续4次施用剂量为360mg/m2身体表面的依帕珠单抗。结果显示依帕珠单抗在治疗上述自体免疫病症中的临床效果，如由数个用于SLE的参数(包括英伦三岛狼疮评测小组(BILAG)评分)所确定的。由于所参与的患者数目有限，并且这些初步研究缺少安慰剂对照或活性对照臂，保证了进行进一步的研究来证实依帕珠单抗的效力，特别是来确定使用依帕珠单抗来治疗自体免疫和炎性疾病(特别是SLE)的优选剂量和给药方案。发明概述在患有活跃疾病的血清学-阳性SLE患者中，对依帕珠单抗的安全性和效力进行了临床nb期的随机、双盲、安慰剂对照的、剂量以及剂量方案变化的研究。此研究被确定为 UCB 研究 SL0007。有趣地，试验显示出，在用依帕珠单抗治疗炎症或自体免疫疾病(例如SLE)时，所施用的剂量与所观察到的效力之间有非线性的关系，因此，所施用的最高水平的剂量不是最有效的。事实上，剂量和效力之间的关系被更好地表征为钟型分布。令人惊讶地，所提供的最高剂量处的效力低于中等剂量时所观察到的效力，并且总体而言，在这种高剂量时患者的应答仅略高于对于安慰剂所观察到的应答。此外，查看8周和12周的BILAG改进评分， 发现最高的剂量比安慰剂差。作为此研究的结果，现在发现了依帕珠单抗在治疗自体免疫和炎性疾病(特别是 SLE)中的新给药方案。令人惊讶地，给出最佳结果的所述新给药方案不要求向需要治疗的患者施用最高的剂量，而是中等的剂量。在一个实施方案中，本发明涉及治疗人受试者中的自体免疫或炎性疾病的方法， 所述方法包括向需要治疗的人受试者施用依帕珠单抗或包含其的组合物，施用的量为400 至SOOmg (优选600mg)，给药方案包括在4至20周(优选8至16周，更优选12周)的治疗周期中每周一次地施用依帕珠单抗或包含其的组合物4次。此外，所述研究确立了用于隔周进行一次的治疗方案中的最有效的剂量。有趣地， 甚至当隔周施用一次时(作为1200mg/施用)，此剂量相对于安慰剂显示出统计学上的显著效力。因此，在其它实施方案中，本发明涉及治疗人受试者中的自体免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括向需要治疗的人受试者施用依帕珠单抗或包含其的组合物，施用的量为1000至1400mg (优选1200mg)，给药方案包括在4至20周(优选8至16周，更优选12 周)的治疗周期中隔周一次地施用依帕珠单抗或包含其的组合物2次。在其它的实施方案中，本发明涉及治疗人受试者中的自体免疫或炎性病症(特别是类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、血管炎或斯耶格伦综合征)的方法，所述方法包括向需要治疗的人受试者施用依帕珠单抗或包含其的组合物，施用的量为400至SOOmg(优选 600mg)，给药方案包括每周一次地施用所述组合物4次，进行至少一个12周的治疗周期。在其它的实施方案中，本发明涉及治疗人受试者中的自体免疫或炎性病症(特别是类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、血管炎或斯耶格伦综合征)的方法，所述方法包括向需要治疗的人受试者施用依帕珠单抗或包含其的组合物，施用的量为1000至1400mg (优选 1200mg)，给药方案包括在12周的治疗周期中，隔周一次地施用所述组合物2次。在其它的实施方案中，本发明涉及治疗人受试者中的自体免疫或炎性疾病(特别是类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、血管炎或斯耶格伦综合征)的方法，所述方法包括施用依帕珠单抗或包含其的组合物，其中以MOOmg依帕珠单抗的累计剂量每周一次或隔周一次地施用依帕珠单抗或包含其的组合物，优选以600mg依帕珠单抗的剂量每周一次地施用4次，或以1200mg依帕珠单抗的剂量隔周一次地施用2次。在其它的实施方案中，本发明涉及试剂盒，其包括(a)含量如本发明的任意实施方案中所述的依帕珠单抗；以及用于分别按照本发明的任意实施方案定量施用(a)的组合物的说明书。


图1显示了研究设计。在双盲、安慰剂对照的、随机、辅助性治疗设计中治疗具有高中度至严重疾病活跃性的患者(如通过BILAG 2004工具所证实的)，每周一次定量给药总共进行4次盲输注，筛选期为2周或更短。要求通过美国学院风湿病学标准和SLE的实验室标志物(例如对于抗核抗体为阳性)均将患者确诊为SLE。每4周进行追踪的安全性和效力评估。在第12周时测量主要终点(组合指数应答)。不需要皮质类固醇剂量渐减 (taper) 0本研究不提供在治疗臂之间进行单独的统计学比较。本研究的目的是通过从许多不同的剂量水平收集数据来寻找总体的剂量应答，从而使得能够鉴别出最佳的依帕珠单抗剂量和给药方案。图2显示了第1 2周时，意向治疗(ITT)群体中基于主要效力终点的组合指数应答。在隔周一次(EOW)接受1200 mg依帕珠单抗的臂中，37名患者中的两名被随机化但从未被给药。在初步分析中，过早终止治疗阶段的受试者被归类为非应答者。提供了 95%的置信区间(Cl)。图3显示了第12周时ITT群体中的应答者百分比，如由组合指数应答率(主要效力变量)所确定的。在隔周一次(EOW)接受1200mg依帕珠单抗的臂中，37名患者中的两名被随机化但从未被给药。在初步分析中，过早终止治疗阶段的受试者被归类为非应答者。 在初步分析中，对于总体治疗效果所评估的所有6个治疗臂的P值为P = O. 148。没有针对多重比较调节P值。图4显示了第12周时，通过罗吉斯回归分析的、意向治疗(ITT)组中的组合指数应答。过早终止治疗阶段的受试者被归类为非应答者。应用了具有下列因子的罗吉斯模型 治疗组、基线处的疾病严重性和基线处的相伴的免疫抑制性应用。为了测定剂量效应的比值比，将每周一次600mg的依帕珠单抗作为1200mg的剂量进行分析。提供了 95%的置信区间(Cl)。图5显示了第8周和第12周时应答者的百分比，如由组合指数应答率所确定的。 在第8周时，每周一次(QW)施用600mg Emab和隔周一次(EOW)施用1200 mg Emab的治疗臂中的应答已经比其它治疗臂中的应答更好。图6显示了第12周时，通过罗吉斯回归分析的、意向治疗(ITT)组中的组合指数应答。通过末次观察转入(LOCF)输入了第12周时数据缺失的受试者。应用了具有下列因子的罗吉斯模型治疗组、基线处的疾病严重性和基线处的相伴的免疫抑制性应用。提供了 95%的置信区间(Cl)。图7显示了通过探访的BILAG改进。BILAG改进被定义为研究开始时的BILAG“A” 评分改进至评分“B”，“C”，“D”，而研究开始时的BILAG “B”评分改进至评分“C”或“D”。 此外，患者在其它BILAG器官系统中必须“没有BILAG恶化’，从而没有新的BILAG “A”评分或两个新的BILAG “B”评分。图8显示了 BILAG总评分-自基线的最小二乘方平均变化-第1 2周。还显示了 ANCOVA模型，具有对于治疗组的效果、基线总BILAG评分、基线处的疾病严重性以及基线处的相伴的免疫抑制性应用。图9显示了 ITT组中的BILAG总评分-随时间的平均评分。图10显示了 6个治疗臂与安慰剂之间的比值比，以及95%的置信区间(Cl)。相比于其它治疗臂，每周一次(QW)施用600mg Emab和隔周一次(EOW)施用1200 mg Emab的治疗臂的比值比以及95% CI显著更高。图11显示了第12周时，治疗臂中的BILAG改进和增强的BILAG改进。BILAG改进被定义为研究开始时的BILAG A改进至B/C/D，而研究开始时的BILAG B改进至C/D。此夕卜，患者在其它BILAG器官系统中必须“没有BILAG恶化，，，从而没有新的BILAG A或两个新的BILAG B。增强的BILAG应答被定义为研究开始时的BILAG A改进至C/D，而研究开始时的BILAG B改进至C/D。此外，对于增强的BILAG应答，患者在其它BILAG器官系统中必须“没有BILAG恶化”，从而没有新的BILAGA或两个新的BILAG B。在第12周时，每周一次 (QW)施用600 mg Emab和隔周一次(EOW)施用1200 mg Emab的治疗臂显示出显著的BILAG 应答以及增强的BILAG应答。图12显示了依帕珠单抗的轻链的氨基酸序列(SEQ ID NO :1)。图1 3显示了依帕珠单抗的重链的氨基酸序列(SEQ ID NO 2)。发明详述本发明涉及治疗其中施用依帕珠单抗为有益的自体免疫或炎性疾病的方法。本发明的各种实施方案涉及用依帕珠单抗治疗自体免疫或炎性疾病。在患有活跃疾病的血清学-阳性SLE患者中，对依帕珠单抗的安全性和效力进行了临床nb期的随机、双盲、安慰剂对照的、剂量以及剂量方案变化的研究。在一个治疗周期后第12周时，在主要终点测量的所有依帕珠单抗治疗臂与安慰剂相比都具有优越的应答率。令人惊讶地，对于用依帕珠单抗进行的治疗的最佳应答是使用特定的剂量和给药方案而实现的。最有效的剂量和给药方案不要求所测试的最高累计剂量(3600 mg)而仅要求MOO mg的累计剂量。与其它的研究臂相比，4次每周一次600 mg 和2次隔周一次1200 mg的给药方案都显示出显著更高的效力。然而，低为200 mg的累计剂量在试验中显示出了效力。在患有活跃SLE的患者的应答方面，最佳的效果是在12周的治疗周期中进行4 次、每周一次600 mg依帕珠单抗的给药而实现的。为了使本发明可能更易理解，首先定义某些术语。如本文中所使用的，术语“给药”是指施用物质(例如依帕珠单抗)、或包含其的药物组合物，以达到治疗目的(例如，治疗自体免疫或炎性疾病)。如本文中所使用的，术语“累计剂量”是指在一定的时间段中(例如一个12周的治疗周期中)所施用的依帕珠单抗的总量。如本文中所使用的，术语“每周一次”当与用依帕珠单抗或包含其的组合物治疗、 依帕珠单抗或包含其的组合物的施用或给药相联系时，是指每5、6或优选7天施用依帕珠单抗或所述组合物。如本文中所使用的，术语“隔周一次”当与用依帕珠单抗或包含其的组合物治疗、 依帕珠单抗或包含其的组合物的施用或给药相联系时，是指每9-19天(更优选每11-17 天、甚至更优选每13-15天、最优选每14天)施用依帕珠单抗或所述组合物。隔周一次施用的给药方案不意在包括每周一次施用的给药方案。如本文中所使用的，术语“治疗周期”是指这样的时间段其中在施用了依帕珠单抗之后是没有施用依帕珠单抗的时间段。通常，在12周的治疗周期中，在12周治疗周期的开始4周中向需要治疗的人受试者施用依帕珠单抗[例如每周一次施用4次(即在开始4周中每周一次、施用4次)或者隔周一次(即在开始4周中隔周一次、施用2次)]，随后在治疗周期的最后8周中不施用依帕珠单抗。如本文中所使用的，术语“依帕珠单抗”是指人源化的抗体，其在本领域中作为国际非专利药品名称(INN)已知为依帕珠单抗并且作为人源化LL2被描述于美国专利号 5，789,5 中。依帕珠单抗具有的轻链具有SEQ ID NO :1中所示的氨基酸序列，其具有的重链具有SEQ ID NO 2中所示的氨基酸序列。术语“BILAG评分”或“BILAG”指数分别指英伦三岛狼疮评测小组评分和指数。在研究SL0007中，BILAG指数被用于评估在患有SLE的患者中的治疗效力。其为用于测量SLE 疾病活跃性的综合指数。BILAG指数的2004版本被用于研究中(Eisenberg，2009 ；Isenberg et al.，200幻。此版本由8个身体系统(一般的，粘膜皮肤的，神经学的，肌肉骨骼的，心血管的和呼吸系统的，血管炎的，肾脏的和血液学的)中的86个问题组成。这些问题中有一些是基于患者的历史，一些是基于检查的发现，其它的是基于实验室结果。每个身体系统评分的范围为E至A，其中A是最严重的疾病活跃性。对身体系统评分的解释如下M “活跃”)=严重活跃的疾病(足以要求疾病调整治疗，例如超过20 mg/天的泼尼松，免疫抑制齐U，细胞毒性剂)；B(“小心”)=中度活跃的疾病(仅要求症状性治疗，例如少于或等于20 mg/天的泼尼松或抗疟药；C (“满意”)=温和稳定的疾病(对于治疗中的改变没有指示)； D =以前活跃的疾病-但现在没有；E =没有之前的疾病活跃性。当BILAG字母顺序器官身体系统评分被转换为数值并汇总时(使用这样的规则，其中每个BILAGA = 9，每个BILAG B =3，每个BILAG C = 1且每个BILAG D或E价值为0)，这被称作总BILAG评分。术语“SLEDAI评分”或“SLEDAI”指数分别是指全身性红斑狼疮疾病活跃性评分/ 指数(Hawker et al.，199 3)。如本文中所使用的，术语“自体免疫疾病”或“炎性疾病”是指其中病理生理学和/ 或疾病症状中牵涉B细胞的自体免疫疾病或炎性疾病。此类自体免疫疾病和炎性疾病也可被称为B细胞介导的自体免疫疾病或炎性疾病B细胞被显示在各种自体免疫或炎性疾病的病理生理学中起作用(Browning，2006 drowning，2006)。例如，自体免疫疾病和炎性疾病包括但不限于类风湿性关节炎，全身性红斑狼疮，斯耶格伦综合征，ANCA相关血管炎，抗磷脂综合征，特发性血小板减少，自体免疫溶血性贫血，格林巴利综合征，慢性免疫多神经病，自体免疫甲状腺炎，I型糖尿病，爱迪生氏病，膜性肾小球肾病，古德帕斯彻氏病，自体免疫胃炎，恶性贫血，pemiphigus vulgarus,原发性胆汁性肝硬化，皮肌炎_多发性肌炎，重症肌无力，乳糜泻，免疫球蛋白A肾病，Henoch- Schonlein purpura,慢性移植物排斥，特应性皮炎，哮喘，过敏，系统性硬化，多发性硬化，神经莱姆病，溃疡性结肠炎，间质性肺疾病。在第一个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗用于在4至20周(优选8至16周，例如9，10，11，12，13， 14或15周，更优选12周)的治疗周期中每周一次以400至800 mg的量施用4次。在第二个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第一个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以 500至700 mg的量施用。在第三个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第二个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以550至650 mg的量施用。在第四个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第三个实施方案治疗自体免疫炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以 600 mg的量施用。在第五个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于在4至20周(优选8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15周，更优选12周)的治疗周期中隔周一次以1000至1400 mg 的量施用2次。在第六个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第五个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以 1100至1300 mg的量施用。在第七个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第六个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以 1150至1250 mg的量施用。在第八个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第七个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以 1200 mg的量施用。治疗慢性病症(例如炎性和自体免疫疾病，包括SLE)，可涉及治疗周期的重复。治疗周期可在例如数年中重复；例如可重复如本文中所公开的12周治疗周期从而治疗炎性和自体免疫疾病。因此，在第九个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的实施方案1-8中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于在多于一个4-20周(优选8至16周，更优选1 2周)的治疗周期中施用。在第十个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的实施方案1-9中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于静脉内施用。在第十一个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第十个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以8至12 mg/ml (优选9至llmg/ml，且优选10 mg/ml)依帕珠单抗的浓度施用。在第十二个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的实施方案1-9中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于皮下施用。在第十三个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的实施方案1-9中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于肌内施用。在第十四个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第十三个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中所述疾病为类风湿性关节炎，全身性红斑狼疮，斯耶格伦综合征或血管炎。在第十五个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的实施方案1-14中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于在至少2个10至14周(优选12周)的治疗周期中施用。在其它的实施方案中，依帕珠单抗或包含其的组合物用于根据本发明在3，4，5，6，7，8，10，12，15，20，30，40，50 或更多的治疗周期中施用，包括治疗周期的终生重复。在第十六个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于治疗自体免疫或炎性疾病，包括施用依帕珠单抗或包含其的组合物，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于在4至20周(优选8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15周，更优选12周) 的治疗周期中以MOO mg依帕珠单抗的累计剂量每周一次或隔周一次施用。在第十七个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第十六个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物用于以600 mg依帕珠单抗的剂量每周一次施用或以1200 mg依帕珠单抗的剂量隔周一次施用。在第十八个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第十七个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病，其中所述自体免疫或炎性疾病是类风湿性关节炎，SLE，斯耶格伦综合征或血管炎。在第十九个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，用于根据本发明的第十七个或第十八个实施方案中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病，其中依帕珠单抗或包含其的组合物在多于一个4至20周(优选8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15 周，更优选12周)的治疗周期中施用。在第二十个实施方案中，本发明涉及试剂盒，其包括(a)含量如第一至第十九个实施方案中的任一个所述的依帕珠单抗或包含其的组合物，以及用于分别根据本发明的第一至第十九个实施方案中的任一个定量施用(a)的依帕珠单抗的说明书。在第二十一个实施方案中，本发明涉及依帕珠单抗或包含其的组合物，其用于与其它活性化合物相结合而治疗自体免疫或炎性疾病，特别是类风湿性关节炎，SLE，斯耶格伦综合征，血管炎。在第二十二个实施方案中，本发明涉及治疗人受试者中的自体免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括向需要治疗的人受试者施用依帕珠单抗或包含其的组合物，施用的量为400至800 mg，给药方案包括在4至20周(优选8至16周，例如9，10，11，12，13，14或 15周，更优选12周)的治疗周期中每周一次施用依帕珠单抗4次。在第二十三个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第二十二个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中以500至700 mg的量施用依帕珠单抗或包含其的组合物。在第二十四个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第二十三个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中以550至650 mg的量施用依帕珠单抗或包含其的组合物。在第二十五个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第二十四个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中以600 mg的量施用依帕珠单抗或包含其的组合物。在第二十六个实施方案中，本发明涉及治疗人受试者中的自体免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括向需要治疗的人受试者施用依帕珠单抗或包含其的组合物，施用的量为1000至1400 mg，给药方案包括在4至20周(优选8至16周，例如9，10，11，12，13，14 或15周，更优选12周)的治疗周期中隔周一次施用依帕珠单抗或包含其的组合物2次。
在第二十七个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第二十六个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中以1100至1300 mg的量施用依帕珠单抗或包含其的组合物。在第二十八个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第二十七个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中以1150至1250 mg的量施用依帕珠单抗或包含其的组合物。在第二十九个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第二十八个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中以1200 mg的量施用依帕珠单抗或包含其的组合物。对于慢性病症(例如炎性和自体免疫疾病，包括SLE)的治疗，可涉及治疗周期的重复。治疗周期可在例如数年中重复；例如可重复如本文中所公开的1 2周治疗周期从而治疗炎性和自体免疫疾病。因此，在第三十个实施方案中，本发明涉及根据本发明的实施方案22-29中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中所述治疗方法包括多于一个4至20周(优选8 至16周，更优选12周)的治疗周期。在第三十一个实施方案中，本发明涉及根据本发明的实施方案22-30中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中静脉内施用依帕珠单抗或包含其的组合物。 在第三十二个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第三十一个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中组合物中的依帕珠单抗的浓度为8至12 mg/ml，优选9至 11 mg/ml，且优选10 mg/ml依帕珠单抗。在第三十三个实施方案中，本发明涉及根据本发明的实施方案22-30中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中依帕珠单抗或包含其的组合物是皮下施用的。在第三十四个实施方案中，本发明涉及根据本发明的实施方案22-30中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中依帕珠单抗或包含其的组合物是肌内施用的。在第三十五个实施方案中，本发明涉及根据本发明的实施方案22-34中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中所述疾病为类风湿性关节炎，全身性红斑狼疮，斯耶格伦综合征或血管炎。在第三十六个实施方案中，本发明涉及根据本发明的实施方案22-35中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中给药方案包括至少2个10至14周(优选12周)的治疗周期。在其它实施方案中，根据本发明，治疗包括3，4，5，6，7，8，10，12，15，20，30，40，50 或更多个治疗周期，包括治疗周期的终生重复。在第三十七个实施方案中，本发明涉及治疗自体免疫或炎性疾病的方法，所述方法包括施用依帕珠单抗或包含其的组合物，其中在4至20周(优选8至16周，例如9，10， 11，12，13，14或15周，更优选12周)的治疗周期中以MOO mg依帕珠单抗的累计剂量每周一次或隔周一次施用依帕珠单抗或包含其的组合物。在第三十八个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第三十七个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中以600 mg依帕珠单抗的剂量每周一次或以1200 mg依帕珠单抗的剂量隔周一次施用依帕珠单抗或包含其的组合物。在第三十九个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第三十八个实施方案治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中所述自体免疫或炎性疾病是类风湿性关节炎，SLE，斯耶格伦综合征或血管炎。在第四十个实施方案中，本发明涉及根据本发明的第三十八或三十九个实施方案中的任一个治疗自体免疫或炎性疾病的方法，其中所述治疗方法包括多于一个4至20周 (优选8至16周，例如9，10，11，12，13，14或15周，且更优选12周)的治疗周期。在第四十一个实施方案中，本发明涉及试剂盒，其包括(a)含量如本发明的实施方案22-40中的任一个所述的依帕珠单抗或包含其的组合物，以及用于分别按照本发明的实施方案1-19中的任一个定量施用(a)的依帕珠单抗的说明书。在第四十二个实施方案中，本发明提供用于与其它活性化合物相组合而治疗自体免疫或炎性疾病的方法，特别是类风湿性关节炎，SLE，斯耶格伦综合征，血管炎。在其它的实施方案中，将其它活性化合物掺入根据本发明的包含依帕珠单抗的组合物中。在某些实施方案中，依帕珠单抗与一种或多种其它治疗剂共配制和/或共施用。例如，依帕珠单抗可与下列共配制和/或共施用皮质类固醇，非类固醇类抗炎药(NSAIDs)， 氯喹，羟基氯喹，甲氨蝶呤，来氟米特，硫唑嘌呤，麦考酚酸酯，环磷酰胺，苯丁酸氮芥和环孢菌素，麦考酚酸酯，CD20拮抗剂，例如利妥昔单抗、奥瑞珠单抗、维妥珠单抗或奥法木单抗、 阿巴他塞，TNF拮抗剂，例如依那西普、他罗利姆、去氢表雄酮、来那度胺，CD40拮抗剂，例如抗CD40L抗体、阿贝莫司钠和/或贝利木单抗。在其它实施方案中，可根据本发明的实施方案将依帕珠单抗或包含其的组合物与一种或多种前述治疗剂组合使用。此类组合疗法可有利地利用所施用治疗剂的更低的剂量，从而避免与各种单一疗法相关的可能的毒性或并发症。用于根据本发明的方法使用的依帕珠单抗可被衍生化或与另一种功能性分子 (例如毒素或放射性核素)相连。因此，本发明的抗体和抗体部分意在包括衍生的和经其它修饰的形式的、本文所描述的依帕珠单抗。例如，依帕珠单抗可被功能性连接至(通过化学偶联、遗传融合、非公价缔合或其它方式)一种或多种其它分子实体，例如可检测的试剂、 细胞毒性试剂、药物试剂和/或可介导依帕珠单抗与另一种分子(例如抗生蛋白链菌素核心区域或多组氨酸标签)的缔合的蛋白或肽。用于根据本发明的方法使用的依帕珠单抗任选地与另一种试剂相缀合，所述另一种试剂为例如细胞毒性试剂(例如毒素，例如白喉毒素、美坦辛、美坦生类化合物、多柔比星、卡奇霉素、奥佐米星、auristatin、auristatin的衍生物(例如一甲基auristatin)、假单胞菌外毒素、蓖麻毒素、蓖麻毒素A链、液丝(brin)、相思豆毒素、槲寄生植物凝集素、蒴莲根毒素、商陆抗病毒蛋白、PAP、皂草素、榄香胶素Kbryodinl)、稷木毒素(bouganin)、白树毒素或α -八叠球菌)；放射性核素(例如钪-47，铜-64，铜-67，镓-67，钇-90，钇-91， 钯-103，铑-105，铟-111，锡-117，碘-125，碘-131，钐-153，镝-166，钬-166，镱-175， 铼-186，铼-188，镥-177，钇-192，锇-194，金-198或铋-213)；或者细胞因子(例如IL-2 或TNF)。用于根据本发明的方法的依帕珠单抗也可与治疗剂缀合，所述治疗剂为例如化学治疗剂、治疗性多肽、纳米颗粒、脂质体或治疗性核酸，或与显像剂(例如酶、放射性核素或荧光团)缀合。可通过在宿主细胞中重组表达免疫球蛋白轻链和重链基因来制备依帕珠单抗。为了重组地表达抗体，用一种或多种携带编码抗体的免疫球蛋白轻链和重链DNA的片段的重组表达载体转染宿主细胞，从而使得所述轻链和重链在所述宿主细胞中表达，并且优选地被分泌到培养宿主细胞的培养基中，所述抗体可从所述培养基中回收。使用标准的重组DNA 方法来获得抗体重链和轻链基因，将这些基因并入重组表达载体中并将所述载体弓I入宿主细胞中，例如在 Sambrook, Fritsch 禾口 Maniatis (eds), Molecular Cloning ；A Laboratory Manual,第二版，Cold Spring Harbor, N. Y. , (1989) > Ausubel, F. M. et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989)禾口美国专利号4，816，39 7中所描述的。为了表达依帕珠单抗，将通过本领域中已知的重组DNA技术获得的编码轻链和重链的DNA插入表达载体中，从而使所述基因可操作地连接至转录和翻译控制序列。在此情境中，术语“可操作地连接”意在指将抗体基因连接到载体中，从而使得载体中的转录和翻译控制序列发挥其调节依帕珠单抗基因的转录和翻译的预期功能。选择表达载体和表达控制序列，而使其与所使用的表达宿主细胞相容。依帕珠单抗轻链基因和依帕珠单抗重链基因可被插入单独的载体中，或者更通常地，将两个基因都插入相同的表达载体中。通过标准的方法(例如，连接依帕珠单抗基因片段和载体上的互补性限制位点，或者在不存在限制位点时进行平末端连接)将抗体基因插入表达载体中。重组表达载体可编码促进抗体链从宿主细胞分泌的信号肽。可将抗体链基因克隆到载体中，从而使得信号肽与依帕珠单抗链基因的氨基末端符合阅读框地连接。信号肽可以是免疫球蛋白信号肽或异源信号肽(即来自非免疫球蛋白的信号肽)。除了依帕珠单抗的抗体链基因之外，本发明的重组表达载体携带控制抗体链基因在宿主细胞中的表达的调控序列。术语“调控序列”意在包括启动子、增强子和控制抗体链基因的转录或翻译的其它表达控制元件(例如，多腺苷酸化信号)。此类调控序列被描述于，例如 Goeddel ；Gene Expression Technology :Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif. (1990)中。本领域技术人员将领会，表达载体的设计(包括调控序列的选择)可取决于例如下列因素待转化的宿主细胞的选择、所需蛋白的表达水平等。 用于哺乳动物宿主细胞表达的优选调控序列包括指导在哺乳动物细胞中高水平蛋白表达的病毒元件，例如源自下列的启动子和/或增强子巨细胞病毒(CMV)(例如CMV启动子/ 增强子)，猿猴病毒40 (SV40)(例如SV40启动子/增强子)，腺病毒[例如，腺病毒主要晚期启动子(AdMLP)]和多瘤病毒。除了抗体链基因和调控序列外，重组表达载体可携带其它的序列，例如调控载体在宿主细胞中的复制的序列(例如，复制的起始)和选择性标记基因。选择性标记基因促进选择在其中引入了载体的宿主细胞(见例如美国专利号5，179，017)。为了表达轻链和重链，通过标准技术将编码重链和轻链的表达载体转染到宿主细胞中。术语“转染”的各种形式意在包括通常用于将外源性DNA引入原核或真核宿主细胞中的各种技术，例如电穿孔、磷酸钙沉淀、DEAE-葡聚糖转染等。虽然理论上可能在原核或真核宿主细胞中表达本发明的抗体，在真核细胞(最优选在哺乳动物宿主细胞中)表达抗体是最优选的，因为与原核细胞相比，此类真核细胞(特别是哺乳动物细胞)更有可能组装并分泌恰当折叠且有免疫活性的抗体。用于表达用于根据本发明的方法的重组依帕珠单抗的优选哺乳动物宿主细胞包括中国仓鼠卵巢细胞(CH0细胞)、NS0骨髓瘤细胞、COS细胞和SP2细胞。当将编码抗体基因的重组表达载体引入哺乳动物宿主细胞中时，通过培养宿主细胞一定的时间段而产生抗体，所述时间段足以允许所述抗体在宿主细胞中表达，或更优选地，足以允许抗体分泌到宿主细胞所生长的培养基中。可使用标准蛋白纯化方法从培养基中回收抗体。在用于重组表达依帕珠单抗的优选系统中，通过磷酸钙介导的转染将编码抗体重链和抗体轻链二者的重组表达载体引入dhfr-CHO细胞中。在重组表达载体中，抗体重链和轻链基因各自与CMV增强子/AdMLP启动子调控元件可操作地连接，以驱动基因的高水平转录。重组表达载体还携带DHFR基因，其允许使用甲氨蝶呤选择/扩增来选择经载体转染的 CHO细胞。培养所选择的转化体宿主细胞以允许抗体重链和轻链的表达，并且从培养基中回收完整的抗体。使用标准的分子生物学技术来制备重组表达载体，转染宿主细胞，选择转化体，培养宿主细胞并从培养基中回收抗体。适于根据本发明的实施方案的方法向人受试者施用的优选组合物包含依帕珠单抗和药学上可接受的载体、赋形剂或稳定剂。如本文中所使用的，“药学上可接受的载体” 包括生理学上相容且适于向受试者施用而用于本文所描述的方法的任何及所有的溶剂、分散介质、涂层、抗细菌和抗真菌试剂、等张剂和吸收延迟剂等。可接受的载体、赋形剂或稳定剂以所采用的剂量和浓度对于接受者是非毒性的，并且包括缓冲剂(例如磷酸、柠檬酸和其它有机酸)；抗氧化剂(包括抗坏血酸和甲硫氨酸)；防腐剂(例如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六烃季铵；苯扎氯铵，苄索氯铵；苯酚，丁醇或苄醇；烷基-苯甲酸酯，例如甲基-或丙基-苯甲酸酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量 (不超过大约1 0个氨基酸残基)的肽；蛋白质，例如血清白蛋白，明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖类、二糖类及其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精类；螯合剂，例如 EDTA ；糖，例如蔗糖、甘露糖、海藻糖或山梨醇；形成盐的抗衡离子，例如钠；金属络合物(例如Si-蛋白质络合物)；和/或非离子性表面活性剂，例如TWEEN，PLUR0NICS或聚乙二醇。治疗性组合物通常在制造和储存的条件下必须是无菌且稳定的。可以溶液或冻干的形式配制所述组合物。可用本发明的剂量和根据本发明的给药方案将依帕珠单抗用于治疗自体免疫或炎性疾病，特别是类风湿性关节炎、类风湿性脊柱炎、血清阴性脊柱关节病、银屑病、银屑病性关节炎、全身性红斑狼疮、斯耶格伦综合征、血管炎、过敏、多发性硬化症、I型糖尿病、自体免疫葡萄膜炎和肾病综合征。在本说明书的情境中，包含意指包括。在技术上适当的时候，可将本发明的实施方案相组合。现在将参考下列实施例来描述本发明，所述实施例仅仅是示例性的而不应以任何方式被解释为限制本发明的范围。实施例1在IIb期的随机、双盲、安慰剂对照的、剂量和剂量方案变化的关于依帕珠单抗的安全性和效力的研究中，对患有活跃疾病的SLE患者进行治疗。在此研究中，根据下列方案，用依帕珠单抗治疗患有活跃SLE的189名患者。用安慰剂处理38名患者。
权利要求
1.依帕珠单抗，用于治疗自体免疫或炎性疾病，其中在12周的治疗周期中以400至800 mg的量每周一次施用依帕珠单抗4次。
2.根据权利要求1的依帕珠单抗，其中以500至700mg的量施用依帕珠单抗。
3.根据权利要求2的依帕珠单抗，其中以550至650mg的量施用依帕珠单抗。
4.根据权利要求3的依帕珠单抗，其中以600mg的量施用依帕珠单抗。
5.依帕珠单抗，用于治疗自体免疫或炎性疾病，其中在12周的治疗周期中以1000至 1400 mg的量隔周一次施用2次依帕珠单抗。
6.根据权利要求5的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于以1100至1300mg的量施用。
7.根据权利要求6的方法，其中依帕珠单抗用于以1150至1250mg的量施用。
8.根据权利要求7的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于以1200mg的量施用。
9.根据权利要求1-8中任一项的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于静脉内施用。
10.根据权利要求9的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于在组合物中以10mg/ml的浓度施用。
11.根据权利要求1-8中任一项的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于皮下施用。
12.根据权利要求1-8中任一项的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于肌内施用。
13.依帕珠单抗，用于治疗自体免疫或炎性疾病，其中所述依帕珠单抗用于在12周的治疗周期中以MOO mg依帕珠单抗的累计剂量每周一次或隔周一次施用。
14.根据权利要求13的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于以600mg依帕珠单抗的剂量每周一次施用，或用于以1200 mg依帕珠单抗的剂量隔周一次施用。
15.根据权利要求1-13中任一项的依帕珠单抗，其中所述自体免疫或炎性疾病为类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、斯耶格伦综合征或血管炎。
16.根据权利要求1-15中任一项的依帕珠单抗，其中依帕珠单抗用于在多于一个12周的治疗周期中施用。
17.试剂盒，其包括a)含量如权利要求1-16中任一项所述的依帕珠单抗，和b)用于分别根据权利要求1-16中的任一项定量施用a)的依帕珠单抗的说明书。
全文摘要
本发明涉及用针对CD22的抗体治疗自体免疫或炎性病症。特别地，本发明涉及以新的给药方案用依帕珠单抗治疗自体免疫或炎性病症。更特别地，本发明涉及治疗SLE。
文档编号C07K16/28GK102574920SQ201080041215
公开日2012年7月11日 申请日期2010年8月26日 优先权日2009年9月18日
发明者A-M·诺沃特尼-巴里, G·L·帕克, R·赫尔赫文, V·A·霍斯金 申请人:Ucb医药有限公司