专利名称：一种从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的方法
技术领域：
本发明涉及天然药物技术领域。具体涉及一种从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的方法。
背景技术：
车前子是我国传统药材之一，始见于《诗经》，药用始载于《神农本草经》并被列为药中上品，又名当道、牛遗、蛤蟆衣。此外，还有称车前菜、牛舌草、车轮菜、猪耳草等。车前子为车前科植物平车前(Plantago depressa Willd.)，又称小粒车前或车前(Plantago asiatica Lirm.)，又称大粒车前的干燥种子，在全国各地均有分布，资源广泛。具有利水通淋、渗湿止泻、清肝明目、清热化痰的作用。车前子中含大量粘液质(多糖类化合物)及车前子酸、胆碱、腺嘌呤、琥珀酸、蛋白质、微量元素等。含有黄酮类化合物主要有木犀草素、 高车前苷、车前苷等。三萜类化合物主要有熊果酸、齐墩果酸等。挥发油主要有2，6_ 二叔丁基对甲酚和3-叔丁基-4-羟基茴香醚等。环烯醚苷类化合物如桃叶珊瑚苷、京尼平苷酸等；苯乙醇苷类化合物毛蕊花糖苷等。其中最具有开发前景的活性成分的就是环烯醚苷类化合物，包含京尼平苷酸、桃叶珊瑚苷等。现代研究表明，环烯醚萜类化合物具有防治高血压、提神、抗疲劳、增强免疫功能、 抗肌肉骨骼老化、防癌抗癌、利肝保胆、预防性功能低下、增强记忆等优异功效。目前含京尼平及其衍生物的环烯醚萜类化合物的来源主要是从桅子和杜仲中提取得到。车前子与桅子、杜仲相比，对生长环境要求低，全国各地均有分布，来源广泛，价格低廉，药材中含量较高，从车前子提取环烯醚萜类活性具有更广阔的市场前景。但车前子成分复杂，很多化合物结构和性质相近，因此，从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的提取分离较为困难。目前尚未有报道从车前子中提取环烯醚萜类成分的方法。
发明内容
本发明提供了一种从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的方法，以及制备的富含环烯醚萜类的车前子提取物，车前子提取物中环烯醚萜类活性成分质量百分含量在50%以上。本发明提供的从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的方法，包括以下步骤步骤1 将车前子粉碎，用第一极性溶剂提取1-4次或回流提取或超声提取或冷浸或渗漉提取，抽滤出提取液；提取液离心或抽滤，分离出上清液；所述第一极性溶剂是 0-100% C1-C6烷基醇的水溶液、丙酮、丙酮与水的混合溶液或含酸或碱的上述溶剂；步骤2 将上清液用色谱法或色谱法和溶剂萃取法相结合的方法进行精制，上清液过色谱后用洗脱溶剂洗脱，收集富含环烯醚萜类活性成分的流份，浓缩干燥，得车前子提取物，所述车前子提取物中环烯醚萜类化合物的质量百分含量为52% -88%;其中所述色谱为大孔吸附树脂色谱、聚酰胺色谱、正相硅胶或反相硅胶色谱或其组合。
作为优选，所述第一极性溶剂为50-95% C1-C6烷基醇的水溶液、丙酮、丙酮与水的混合溶液或含酸或碱的上述溶剂。更优选地，所述C1-C6烷基醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇或它们组成的混合溶剂。作为优选，所述洗脱溶剂为水、C1-C6烷基醇、卤代烃、醚类溶剂、酮类溶剂、酯类溶剂或其两种以上组成的混合溶剂。更优选地，所述洗脱溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇、二氯甲烷、三氯甲烷、 乙醚、甲基叔丁醚、丙酮、2- 丁酮、乙酸乙酯、甲酸乙酯，或者所述洗脱溶剂为三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、水两者以上组成的混合溶剂。作为优选，步骤1所述用第一极性溶剂提取为每次加4-20BV的第一极性溶剂在 0V至溶剂回流的温度下提取。作为优选，步骤1提取液在分离上清前进行浓缩处理，优选浓缩为至提取液与车前子原料的体积质量比以ml/g计为0. 1-1 10-1。作为优选，步骤1所述用第一极性溶剂提取温度范围为室温至溶剂回流的温度。作为优选，所述含酸或碱的上述溶剂中所述酸或碱为强酸、强碱或弱酸、弱碱，优选为 0. 5% HCL、1%醋酸、0. 5% NaOH、或的 Na2C03。本发明所述从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的方法，根据对提取物环烯醚萜类活性成分含量的不同要求，可在色谱法前或后，与溶剂萃取法结合进行精制。溶剂萃取法所用萃取溶剂选自商代烃、醚类溶剂、酯类溶剂或其两者以上组成的混合溶剂。更优选地， 其中所述萃取溶剂为乙酸乙酯、氯仿、正丁醇。二氯甲烷、三氯甲烷、石油醚、乙醚、甲基叔丁醚、乙酸乙酯、甲酸乙酯或其两者以上的混合物，更优选为其中优选为乙酸乙酯或氯仿或正丁醇。本发明所述方法制备的车前子提取物，其中环烯醚萜类活性成分质量百分含量在 50%以上，优选为52% -88%,更优选在75%以上，环烯醚萜类活性成分主要成分为京尼平苷酸(Geniposidic acid)，其结构如下所示
权利要求
1.一种从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的方法，包括以下步骤步骤ι 将车前子粉碎，用第一极性溶剂提取1-4次或回流提取或超声提取或冷浸或渗漉提取，抽滤出提取液；提取液离心或抽滤，分离出上清液；所述第一极性溶剂是0-100% C1-C6烷基醇的水溶液、丙酮、丙酮与水的混合溶液或含酸或碱的上述溶剂；步骤2 将上清液用色谱法或色谱法和溶剂萃取法相结合的方法进行精制，上清液过色谱后用洗脱溶剂洗脱，收集富含环烯醚萜类活性成分的流份，浓缩干燥，得车前子提取物，所述车前子提取物中环烯醚萜类化合物的质量百分含量为52% -88%;其中所述色谱为大孔吸附树脂色谱、聚酰胺色谱、正相硅胶或反相硅胶色谱或其组合。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一极性溶剂为50-95%C1-C6烷基醇的水溶液、丙酮、丙酮与水的混合溶液或含酸或碱的上述溶剂。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述C1-C6烷基醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇或它们组成的混合溶剂。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱溶剂为水、C1-C6烷基醇、卤代烃、醚类溶剂、酮类溶剂、酯类溶剂或其两种以上组成的混合溶剂。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱溶剂为选自甲醇、乙醇、异丙醇、 正丁醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙醚、甲基叔丁醚、丙酮、2-丁酮、乙酸乙酯或甲酸乙酯。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱溶剂为三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、水两者以上组成的混合溶剂。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1所述用第一极性溶剂提取为每次加 4-20BV的第一极性溶剂在0°C至溶剂回流的温度下提取。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1提取液在分离上清前进行浓缩处理，优选浓缩为至提取液与车前子原料的体积质量比以ml/g计为0.1-1 10-1。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1所述用第一极性溶剂提取温度范围为室温至溶剂回流的温度。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述含酸或碱的上述溶剂中所述酸或碱为强酸、强碱或弱酸、弱碱，优选为0. 5%此！^丨^醋酸』.5% NaOH、或的Na2C03。
11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中溶剂萃取法所用萃取溶剂选自卤代烃、醚类溶剂、酯类溶剂或其两者以上组成的混合溶剂。
12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，其中所述萃取溶剂为乙酸乙酯、氯仿、 正丁醇。二氯甲烷、三氯甲烷、石油醚、乙醚、甲基叔丁醚、乙酸乙酯、甲酸乙酯或其两者以上的混合物。
全文摘要
本发明涉及天然药物技术领域。具体涉及一种从车前子中提取环烯醚萜类活性成分的方法。本发明所述方法采用溶剂提取，经色谱方法或色谱法和溶剂萃取法相结合的方法精制，得到车前子提取物；所制得的车前子提取物中环烯醚萜类成分质量百分含量在50％以上，方法简单，具有工业应用前景。
文档编号C07H17/04GK102351928SQ20111024368
公开日2012年2月15日 申请日期2011年8月23日 优先权日2011年8月23日
发明者王振辉, 王珂, 赵大龙, 陈明霞 申请人:北京科莱博医药开发有限责任公司