专利名称：一种从油茶饼中提取茶皂素的方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离纯化领域，具体地说涉及一种从油茶饼中提取纯化高纯度茶皂素的方法。
背景技术：
油茶(Camellia oleifera Abel)又名茶籽树、油茶树、白花茶，属山茶科山茶属， 是我国南方丘陵地区的一种重要油料植物，主要分布在湖南、江西、广西等省。油茶籽是油茶树的种子，而油茶饼则是经压榨之后的油茶籽副产品，其中含有大量的茶皂素。茶皂素 iTea saponin),又称茶皂甙、茶皂苷、皂角苷，是一种结构为齐墩果烷型五环三萜类皂苷的化合物，由七种配基、四种糖体和两种有机酸构成。茶皂素是一种优良的非离子型表面活性剂，在分散、湿润、发泡、稳泡、去污等方面具有良好的活性功能。茶皂素的另一重要特性是它的生理活性，具有明显的抗炎、抗渗透、祛痰、止咳、镇痛、杀菌、杀虫及促进植物生长等多种生理功效。因此，茶皂素在工业、农业、医药、食品等领域有着广泛的用途。现有文献表明，茶皂素的提取方法是目前研究茶籽粕资源利用的热点之一。茶皂素的传统提取方法主要是浸提法，如水提法，有机溶剂浸提法，随着工艺的改进，又有了超声波辅助提取法、微波辅助提取法等，超声波目前广泛应用于植物有效成分的提取，具有高提取率，提取时间短的优点，但目前超声波辅助提取茶皂素的报道比较少，且研究内容并不
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发明内容
本发明提供了一种从油茶饼中制取高纯度茶皂素的方法。本发明方法提取茶皂素时间短，效率高，所得的茶皂素纯度高。本发明采用的技术方案如下
一种从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于具体包括以下步骤
(1)原料预处理
a、将取油后的油茶饼在40-60°C条件下真空干燥后，粉碎至粉末状；
b、称取一定量的油茶饼粉末于容器中，加入油茶饼粉末重量的4-5倍石油醚，搅拌充分后，加热回流4-6小时；
c、然后过滤分离，挥干滤渣中的石油醚，得到完全脱脂的油茶饼粕；
(2)超声辅助提取
a、将一定量的完全脱脂的油茶饼粕投入容器中，按料液比1: (3-9)加入70-85%甲醇溶液，在30-70°C条件下，超声辅助提取30-65min ；b、所得提取液经过滤分离，减压浓缩得浸膏；
(3)萃取样液
a、将浓缩所得的浸膏用蒸馏水稀释，再加入正丁醇的饱和水溶液萃取多次，收集有机相并合并；
b、将收集合并的萃取液减压浓缩，在40-60°C下干燥得红棕色固体，即为粗茶皂素；
(4)柱层析纯化
a、将干燥的粗茶皂素溶解于蒸馏水中；
b、采用AB-8大孔树脂对粗茶皂素溶液进行纯化，粗茶皂素液上柱，控制流速为1-5BV/ hr，上样结束后，静置l_4h，再用蒸馏水洗去水溶性杂质；
c、然后用不同浓度的乙醇溶液洗脱树脂，洗脱时按照浓度由低到高顺序分次洗脱，并分别接收洗脱液；
(5)洗脱液的处理
a、用HPCE检测法检测收集的洗脱液纯度，将纯度较高的组份合并，弃去纯度低的洗脱
液；
b、将收集的纯度较高的洗脱液减压浓缩，回收溶剂乙醇，得到纯度高茶皂素产品。所述的从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于步骤(4)中所述的洗脱树脂的乙醇溶液的浓度范围为30%-90%。所述的从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于步骤(5)中所述的HPCE检测法，具体要求为缓冲溶液为30mmol/L的硼酸硼砂溶液，pH值为8. 0，检测波长210nm，毛细管柱温25 °C，检测电压20KV。本发明具有以下优点
(1)利用油茶饼作为原料，提取分离高纯度的茶皂素。油茶饼粕资源丰富，高纯度茶皂素的制取，既“变废为宝”，又充分提高了油茶资源的利用率，增加效益；
(2)提取工艺简单，容易控制，方法可靠；
(3)提取效率高，稳定性好；
(4)经过提取分离，尤其是采用柱层析大孔树脂纯化后，产品纯度较高，可达83% 以上。本发明以油茶饼为原料，为高纯度茶皂素的制取提供了理论依据，为油茶粕的资源综合利用提供了一定的参考价值，本发明在工业化实施后，对油茶产业的发展及资源深度开发利用具有深远意义。
具体实施例方式现以实验室实施为例，非限定实施例叙述如下
将油茶饼原料在40-60°C真空条件下干燥，粉碎。取200g油茶饼粉末，用石油醚加热回流6-10h，去除油脂，分离，过滤，并挥干残余溶剂，获得完全脱脂的油茶饼粕粉原料，加入 800ml的80%甲醇溶液，在50°C条件下，超声辅助提取45min，提取液经过滤分离后，减压浓缩得浸膏。浸膏溶解于500mL蒸馏水中，同时，加入600mL饱和正丁醇水溶液，分三次对其进行萃取，取正丁醇层，合并萃取液，将萃取液减压浓缩至干，40-60°C下干燥得红棕色固体，即为粗茶皂素。称取5g粗茶皂素(树脂量的1Λ0-1/40的粗提取物)溶解于500mL蒸馏水中，制成上柱液。湿法装柱，采用AB-8大孔树脂对粗茶皂素进行纯化，粗茶皂素液上柱后，控制流速为l_5BV/hr，上样结束后，静置池，再用蒸馏水洗去水溶性杂质，然后分别用浓度为30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇溶液依次洗脱，分步接收梯度洗脱段洗脱液，收集量达IOOmL时，用HPCE法测定茶皂素纯度，用HPCE法(缓冲溶液为30mmol/L的硼酸硼砂溶液，PH值为8. 0，检测波长210nm，毛细管柱温25°C，检测电压20KV)测定茶皂素纯度，合并纯度较高的洗脱液，减压回收，并挥去全部溶剂乙醇，所得干物质即为纯度较高的茶皂素，测得纯度为83. 23%。
权利要求
1.一种从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于具体包括以下步骤(1)原料预处理a、将取油后的油茶饼在40-60°C条件下真空干燥后，粉碎至粉末状；b、称取一定量的油茶饼粉末于容器中，加入油茶饼粉末重量的4-5倍石油醚，搅拌充分后，加热回流4-6小时；C、然后过滤分离，挥干滤渣中的石油醚，得到完全脱脂的油茶饼粕；(2)超声辅助提取a、将一定量的完全脱脂的油茶饼粕投入容器中，按料液比1:(3-9)加入70-85%甲醇溶液，在30-70°C条件下，超声辅助提取30-65min ；b、所得提取液经过滤分离，减压浓缩得浸膏；(3)萃取样液a、将浓缩所得的浸膏用蒸馏水稀释，再加入正丁醇的饱和水溶液萃取多次，收集有机相并合并；b、将收集合并的萃取液减压浓缩，在40-60°C下干燥得红棕色固体，即为粗茶皂素；(4)柱层析纯化a、将干燥的粗茶皂素溶解于蒸馏水中；b、采用AB-8大孔树脂对粗茶皂素溶液进行纯化，粗茶皂素液上柱，上样结束后，静置 l_4h，再用蒸馏水洗去水溶性杂质；c、然后用浓度范围为30%-90%的乙醇溶液洗脱树脂，洗脱时按照浓度由低到高顺序分次洗脱，并分别接收洗脱液；(5)洗脱液的处理a、用HPCE检测法检测收集的洗脱液纯度，将纯度较高的组份合并，弃去纯度低的洗脱液；b、将收集的纯度较高的洗脱液减压浓缩，回收溶剂乙醇，得到纯度高茶皂素产品。
2.根据权利要求1所述的从油茶饼中提取茶皂素的方法，其特征在于步骤(5)中所述的HPCE检测法，具体要求为缓冲溶液为30mmol/L的硼酸硼砂溶液，pH值为8. 0，检测波长 210nm,毛细管柱温25 °C，检测电压20KV。
全文摘要
本发明涉及一种从油茶饼中制取茶皂素的方法。以油茶饼为原料，制取高纯度的茶皂素包括以下工艺步骤油茶籽选择→油脂提取分离→油茶饼原料→适当预处理→超声波辅助提取粗茶皂素→过滤→去渣→提取液萃取→减压、浓缩→大孔树脂柱层析→分步洗脱→分别接收 →溶剂回收 →茶皂素产品，最终产品中差皂素纯度可达83.23%。本发明提取效率高，工艺简单，方法可靠，稳定性好，可充分利用油茶饼资源。促进油茶产业化发展。
文档编号C07J63/00GK102372761SQ201110304310
公开日2012年3月14日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者丁之恩, 丁昱, 周倩, 聂芸 申请人:安徽农业大学