专利名称：一种n-(2)-l-丙氨酰-l-谷氨酰胺的合成方法
技术领域：
本发明涉及一种丙氨酰谷氨酰胺二肽化合物的合成方法，尤其是N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。
背景技术：
酰胺氨基酸是机体内含量非常丰富的一种氨基酸，是机体多种组织代谢的参与体，具有许多重要的生理功能:能促进胃肠粘膜细胞增生，维持肠道的完整性；巨噬细胞的吞噬作用、淋巴细胞的增值及蛋白质的合成都必须依赖充足的谷氨酰胺。缺乏谷氨酰胺会引发多种疾病。动物在各种应激状态下，对L-谷氨酰胺的需求量大大增加，因此，给机体补充L-谷氨酰胺是极为必要的。但谷氨酰胺溶解度低且不稳定，加热后会产生有毒的焦谷氨酸和氨，因此限制了谷氨酰胺的肠外应用。而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺不仅溶解度高，是同样条件下游离谷氨酰胺的200倍，并且性质稳定。最重要的是能被机体快速有效地分解为丙氨酸和谷氨酰胺，满足机体需要，而无任何副作用。现有的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法主要有以下几种:
(I)以L-丙氨酸为原料，其氨基经保护生成叔丁氧羰基丙氨酸或苄氧羰基丙氨酸，接着与L-谷氨酰胺在碱性条件下生成Boc-Ala-Gln或Z-Ala-Gln,然后二氟乙酸脱保护得到目标化合物。其路线步骤多，较为繁琐，因而收率低。(2)以L-丙氨酸为原料，与光气反应生成N-羧酸酐，然后与L-谷氨酰胺在水中反应，即得。该方法步骤少而简单，但该反应中间环化物N-羧酸酐不稳定易分解，而且副产物难以除去，最终产品难以纯化，所以收率低，另外，光气为剧毒物质，对环境和人体危害大。利用N端保护的氨基酸与 三苯基膦反应生成活性酯，再与谷氨酰胺反应，然后用无机酸酸化，脱去保护基即得产物，该方法成本较高。(3)中国专利200510102315.公开了一种L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。该方法包括在缩合剂存在下，在惰性溶剂中将D-2-卤代丙酸和谷氨酰胺缩合、酸化得到D-2-卤代谷氨酰胺；然后勇敢水进行氨解得到目标化合物。
发明内容
本发明克服了已有技术中存在的不足，而提供一种工艺条件温和，反应成本低的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法。本发明采取以下方案:
一种N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其合成方法如下:
(O室温下将L-谷氨酰胺加入到甲苯和水的溶液中，甲苯和水配比为2:1，再加入5N无机碱，使溶液PH值达到8 10 ;滴加D- α -氯丙酰氯和甲苯混合溶液，用无机碱控制体系PH值为9 11。反应温度保持在0°C飞。C;滴加完毕后室温搅拌广2小时后，冷却，静置分出有几层，搅拌下将氯化钠加入剩余溶液中，滴加盐酸调PH值为f 2，继续搅拌20分钟，停止搅拌，冷却析出，过滤，干燥得N- (2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺。(2)将N-(2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺与30%氨水按重量1: l(Tl: 30的比例投入反应釜中反应5 10小时，反应温度为20°C 70°C、反应压力为2Kg/cm2，反应结束后冷却至室温，减压浓缩，将浓缩液移至结晶罐，滴加甲醇，滴加完毕后，继续搅拌I小时，冷却至10°C，放置2小时，过滤干燥得粗品。(3)将粗品投入到反应釜中，加入纯化水溶解，后加入活性炭，过滤，滤液加入甲醇，搅拌，过滤得精制品。所述步骤(I)中无机碱为氢氧化钠溶液；
所述步骤(I)中L-谷氨酰胺与甲苯溶液的体积比为1:7 1:11 ；
所述步骤(2)中N-(2)-D-氯丙酸-L-谷氨酸胺与30%氨水重量比为1:10 1:30。本发明工艺简单，不涉及氨基保护，成本低，与光气法相比，本发明毒性小，操作性高，有利于人们的身体健康和环境保护，更适合规模化生产。
具体实施方式
实施例1.N⑵-D- α -氯丙酰-L-谷氨酰胺的合成
在反应釜中先加入300kg水，150kg甲苯，室温下加入48.2kgL-谷氨酰胺，冰浴至0-50C。搅拌下加入66kg5N NaOH溶液至L-谷氨酰胺全溶。再缓慢加入42Kg的D-2-氯丙酰氯的90kg甲苯溶液，同时滴加74kg的5N NaOH溶液维持反应液PH 10(滴加两个小时)。滴加完毕后继续冰浴在0-5°C保持I小时。分层除去甲苯。60kgNaCl室温下加到水相。加入22kg浓HC1，调PH为2.5，加入晶种，搅拌半小时。加入8kg浓盐酸调PH I,静止I小时。过滤，干燥得产物。熔点(分解温度)148°C,产率:85.3%。2.N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成
称60kg上述产物加入压力釜，再加入600kg28%浓氨水，密封。搅拌升温至60°C，保温8小时,压力在2kg/cm2,冷却至室温,旋转浓缩,加入30kg水。滴加甲醇450kg,静止2小时。过滤干燥得产物。产率为69%。30kg粗产品溶于50kg水中，0.6kg活性炭，过滤，加入42kg甲醇。静止2小时，30°C加入138kg甲醇。过滤干 燥得产物。熔点为215-216。。。比旋光度为[a]2d°-3.50 (C=10, IN盐酸)。
权利要求
1.一种N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其特征在于其合成方法的步骤为: (O室温下将L-谷氨酰胺加入到甲苯和水的溶液中，甲苯和水配比为2:1，再加入5N无机碱，使溶液PH值达到8-10 ;滴加D- α -氯丙酰氯和甲苯混合溶液，用无机碱控制体系PH值为9-11 ;反应温度保持在0°C -5°C，滴加完毕后室温搅拌1-2小时后，冷却，静置分出有几层，搅拌下将氯化钠加入剩余溶液中，滴加盐酸调PH值为1-2，继续搅拌20分钟，停止搅拌，冷却析出，过滤，干燥得N- (2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺； (2 )将N- (2) -D-氯丙酰-L-谷氨酰胺与30%氨水按重量1:10-1:30的比例投入反应釜中反应5-10小时，反应温度为20°C _70°C、反应压力为2Kg/cm2，反应结束后冷却至室温，减压浓缩，将浓缩液移至结晶罐，滴加甲醇，滴加完毕后，继续搅拌I小时，冷却至10°C，放置2小时，过滤干燥得粗品； (3)将粗品投入到 反应釜中，加入纯化水溶解，后加入活性炭，过滤，滤液加入甲醇，搅拌，过滤得精制品。
2.根据权利要求1所述的N-(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其特征在于步骤(1)中L-谷氨酰胺与甲苯溶液的体积比为1:7-11 ;氯丙酰氯与L-谷氨酰胺的摩尔比为1:1-3。
3.根据权利要求1所述的N-(2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，其特征在于步骤⑵中N-(2)-D-氯丙酰-L-谷氨酰胺与30%氨水重量比为1:10-1:30。
全文摘要
本发明公开了一种N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，属于免疫二肽化合物的制备。其制备步骤为以D-2-氯代丙酰氯和L-谷氨酰胺为原料，缩合得到N-(D-2-氯丙酰)-L-谷氨酰胺，再经氨化后得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺；通过精制方法得到精制品。
文档编号C07K5/062GK103087148SQ20111034287
公开日2013年5月8日 申请日期2011年11月3日 优先权日2011年11月3日
发明者姚德勇, 郝智慧, 王艳玲 申请人:青岛康地恩药业股份有限公司