专利名称：泰地罗新半抗原、人工抗原及其制备方法
技术领域：
本发明属于免疫学领域，具体涉及一种泰地罗新半抗原、人工抗原及其制备方法。
背景技术：
泰地罗新(Tildipirosin)是由英特威-先灵德雅动物保健公司开发的一种新型的大环内酯类动物专用抗生素，CAS登录号为328898-40-4，化学名称为20-Deoxo-23-deoxy-5-0-[3, 6-dideoxy-3-(dimethylamino)-β -D-glucopyranosyl]-20, 23-di-l-piperidinyltylonolide,结构式如下
权利要求
1.一种泰地罗新半抗原，其特征在于其分子结构式为
2.一种如权利要求I所述的泰地罗新半抗原的制备方法，其特征在于它按照以下步骤顺序进行 (11)用丙酮或甲醇将泰地罗新溶解，制成溶液A; (12)搅拌状态下，向溶液A中滴加丁二酸酐或邻苯二甲酸酐的丙酮溶液，滴加完毕后继续搅拌反应，至反应完全，得透明溶液； (13)蒸除溶剂，得到淡黄色无定形粉末，然后加入二氯甲烷溶解，水洗，用碱液调节pH值，分离二氯甲烷层，干燥，过滤，蒸除溶剂，得粗产品；过硅胶柱，浓缩，得到泰地罗新半抗原。
3.根据权利要求2所述的泰地罗新半抗原的制备方法，其特征在于 ①所述的步骤(11)中泰地罗新与丙酮或甲醇的质量份数比为1:10 15； ②所述的步骤(12)中溶液A与丁二酸酐或邻苯二甲酸酐的丙酮溶液的质量份数比为I: I 2 ;滴加完毕后25°C搅拌反应15 h ； ③所述的步骤(13)中水洗至pH值为5.5 7. O ; 所述的碱液为lmol/L的NaOH溶液，用其调节pH值至10 ； 过硅胶柱，所用的洗脱液为体积比为I 4 I的乙酸乙酯与石油醚的混合物。
4.一种泰地罗新人工抗原，其特征在于其分子结构式为
5.一种如权利要求4所述的泰地罗新人工抗原的制备方法，其特征在于它是采用混合酸酐法或活性酯法制备所述的泰地罗新人工抗原。
6.根据权利要求5所述的泰地罗新人工抗原的制备方法，其特征在于所述混合酸酐法按照以下步骤顺序进行 (21)将O.8 I. Ommol泰地罗新半抗原与等当量的三正丁胺溶于10 20mL 二恶烧中，搅拌30 min后,加入等当量的氯甲酸异丁酯,用lmol/L的NaOH溶液调节pH至7. 5 8. 5，搅拌反应I h，制得溶液B ; (22)另取10mg/mL的载体蛋白的二恶烷与磷酸盐缓冲液50 100 mL，将溶液B滴加至缓冲液中，在3 5°C下搅拌反应24 h，制得溶液C; (23)将溶液C于4°C用蒸馏水透析3天，每天换液4次，冷冻干燥，得泰地罗新人工抗原Ml，-20°C保存。
7.根据权利要求6所述的泰地罗新人工抗原的制备方法，其特征在于步骤(22)中所述的载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵清蛋白。
8.根据权利要求5所述的泰地罗新人工抗原的制备方法，其特征在于所述活性酯法照按以下步骤顺序进行 (31)将O.8 I. Ommol的N,N,- 二环己基碳二亚胺溶于10 20mL 二恶烧中，搅拌状态下滴入等当量的泰地罗新半抗原与N-羟基琥珀酰亚胺的二恶烷溶液中，室温搅拌反应24 h，制得溶液D ; (32)将溶液D离心，取上清液滴加至50 100mL的10mg/mL载体蛋白的二恶烷与磷酸盐缓冲液中，3 5°C搅拌反应24 h，制得溶液E ； (33)将溶液E于4°C用蒸馏水透析3天，每天换液4次，冷冻干燥得泰地罗新人工抗原M2，-20°C保存。
9.根据权利要求8所述的泰地罗新人工抗原的制备方法，其特征在于步骤(32)中所述的载体蛋白为牛血清白蛋白或鸡卵清蛋白。
全文摘要
本发明公开了一种泰地罗新半抗原、人工抗原及其制备方法，其中泰地罗新半抗原的制备方法是通过在泰地罗新基本结构的基础上引入3-羧基丙酰基或2-羧基苯甲酰基制得，所制得的泰地罗新半抗原既保留了泰地罗新的基本结构又有利于与载体蛋白偶联，用于人工抗原的制备，易于被动物机体识别；泰地罗新人工抗原是以泰地罗新半抗原为基础，采用混合酸酐法或活性酯法制得，所制得的泰地罗新人工抗原可用于泰地罗新的ELISA残留检测，与目前使用的固相萃取液-质联用(SPE-HPLC-MS/MS)检测方法相比，具有简便、快速、灵敏度高、适宜高通量筛选的优点。本发明的制备方法用于泰地罗新半抗原、人工抗原的制备。
文档编号C07H1/00GK102816196SQ201210331798
公开日2012年12月12日 申请日期2012年9月10日 优先权日2012年9月10日
发明者岳永波, 李伟岭, 杨芳, 郭鸿志, 刘波, 刘毅, 刘海亮, 陈玲, 魏占勇, 杨国辉 申请人:河北远征药业有限公司