专利名称：用含量98.5%的牛羊胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法
技术领域：
本发明涉及一种熊去氧胆酸的制备方法，尤其涉及一种用含量98. 5%的牛羊胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法；是一种溶解胆固醇结石药物，同时也用于治疗原发性胆汁性肝硬化(PBS)、慢性丙型肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝的保肝护肝性药物。
背景技术：
早在1848年首先在鹅胆汁中发现了鹅去氧胆酸这一个有效成分，于1924年命名为鹅去氧胆酸(CDCA)这一名称。1937年以来 ，有人试图用含有鹅去氧胆酸的混合物溶解胆结石，后来又发现了鹅去氧胆酸具有纠正胆固醇饱和胆汁作用，英国于1972年正式开辟了溶解胆固醇结石的治疗，作为第一个纠正饱和胆汁和溶解胆结石的药物。鹅去氧胆酸的化学名称为3α、7α-二羟基-5β-胆烷酸，是白色针状结晶，无味，可溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、冰醋酸及稀碱液。不溶于水、石油酸及苯，熔点141-142°C [α ]。+11. 50°。熊去氧胆酸化学名3 α，7 β - 二羟基_5 β -胆烷酸，与鹅去氧胆酸、牛羊胆酸的分子式相同，立体结构不同，化学上把这两种化合物的结构关系称为同分异构体，本品是白色结晶粉末，无臭，味苦。易溶于乙醇、氯仿、冰醋酸、稀碱液，略溶于乙醚，难溶于水和稀矿酸，熔点203°C，[α]0 +57°C熊去氧胆酸是一种无毒性亲水胆酸，能竞争性地抑制毒性内源性胆酸在回肠的吸收，通过即或钙离子、蛋白激酶C组成的信号网络，并通过激活分离活性蛋白激酶来增强胆汁淤积肝细胞的分泌能力，使血液及肝细胞中的内源性蔬水胆酸浓度降低，达到抗胆汁淤积的作用。熊去氧胆酸还能竞争性地取代细胞膜和细胞器上的毒性胆酸分子，防止肝细胞和胆管细胞受到更多毒性胆酸的损害。在临床上，熊去氧胆酸主要用于溶解胆固醇型肝胆结石，原发性胆汁性肝硬化(PBC)、慢性丙型肝炎，同时还用于酒精性肝病、非酒精性脂肪肝、良性复发性肝内胆汁淤积症、先天性内胆管囊性扩张症。现有技术中，生产熊去氧胆酸的药物通常都是用从禽胆汁中分离、提取、纯化出的86%的鹅去氧胆酸通过化学方法转化成熊去氧胆酸，但是由于存在着禽胆汁量较少，难以收集的问题，所以导致目前熊胆药材稀缺，难以满足人们的需求。
发明内容
本发明针对上述现有技术中存在的问题，通过大量的摸索和试验总结，提供了一种用含量98. 5%的牛氧胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法；解决了现有技术中熊胆药材稀缺的问题，而且本发明工艺简单，成本低，提高了熊去氧胆酸的纯度，适合批量生产。本发明的技术方案包括下述步骤
取甲醇50-60kg，加入含量98. 5%的牛羊胆酸20-30kg，加热1_2小时，放置室温6_8小时后有结晶析出，过滤，滤液待回收甲醇，结晶用石油醚洗涤，在70°C真空干燥得胆酸甲酷；
取甲苯10-20kg，加入2-4kg吡啶投入反应釜中，然后再加入上述结晶的胆酸甲酯2-4kg在室温下搅拌40-50分钟，然后加水120-150kg，再次搅拌40-50分钟，然后静置5_6小时后，分离出甲苯后进行回收，析出结晶，结晶在70°C下真空干燥；结晶用石油醚反复洗涤得3α、7α_ 二乙酰胆酸甲酯；
取上述3 α、7α-二乙酰胆酸甲酯l_3kg，加入2_4kg醋酸钠，加入10_15kg甲醇进行回流30分钟，待温度达到5-10°C时加入次氯酸钠1kg，继续搅拌4-5小时，然后加入IOOkg水中，待结晶后过滤，结晶在70°C下真空干燥；结晶为3 α -7 α -二乙酰氧基_12_酮基胆烷酸甲酯；
取3 α -7 α - 二乙酰氧基_12_酮基胆烷酸甲酯20_30kg加入乙二醇200_250kg，水合肼溶剂20-30kg回流12-15小时，然后再升温至195-200°C再回流3_4小时，然后停止升温冷却至室温，再加入500-700kg水稀释，然后用稀硫酸调节PH2. O，待析出结晶，过滤，结晶在·70°C真空干燥，结晶为含量98. 5%鹅去氧胆酸；·
取上述含量98. 5%的鹅去氧胆酸10-20kg为原料，加入原料的10-15倍重量的甲醇，力口热60-80°C，溶解3-7小时，得溶液A ；
将上述溶液A温度降至5-10°C，然后加入次氯酸钠，次氯酸钠的重量是溶液A重量的6%-15%，在5-10°C下反应8-10小时，得反应液B ;
将上述反应液B再加温到50-60°C，然后加入碳酸钠30-40kg，加水100-150 kg过滤，弃掉过滤液，结晶在70°C真空干燥，得7-酮；
取上述7-酮8-12kg，加入仲丁醇30-40kg，升温至60-70°C溶解，加入金属钠3-8kg，在90-100°C搅拌2-3小时，然后停止搅拌，过滤，结晶在70°C真空干燥；
取上述干燥后的结晶品8-12kg,加入30-50kg乙酸乙酯,再加入1. 0_3kg三乙胺在50-75 0C溶解，并搅拌1-3小时，然后用HCl调节PH2. O左右，过滤，滤液弃掉，结晶在70 V真空干燥，得熊去氧胆酸。本发明的优点和有益效果如下
本发明是采用牛羊胆酸经过酯化、乙酰化、氧化、还原等四个步骤，将同分异构体的胆酸转化成鹅去氧胆酸的结构，形成了鹅去氧胆酸的化合物，再利用鹅去氧胆酸，通过反应后得到熊去氧胆酸；克服了只能从禽胆中提取鹅去氧胆酸的局限性，另外，禽胆的胆汁较少，牛羊的胆汁大而且较多，将牛羊胆酸转化成鹅去胆酸的工艺生产成本低，适合大批量生产；而且适合生产的熊去氧胆酸纯度高，达到了国际的先进水平。本发明不仅解决了现有技术中熊胆药材稀缺的问题，而且生产工艺简单，原料来源易得，成本低，提高了熊去氧胆酸的纯度，生产运输储存无任何风险，具有广阔市场前景。
具体实施例方式实施例1
取含量98. 5%的牛羊胆酸25kg，加入甲醇55kg，加热回流1. 5小时后，室温下放置7小时至产生结晶，过滤，结晶用型号90-120石油醚洗涤，在70°C真空干燥结晶得干燥品，然后取干燥品3kg，取甲苯15kg，取吡啶3kg —起放入反应罐中，在室温下搅拌45分钟，然后加入135kg水再次搅拌45分钟，然后静置5. 5小时后，分离出甲苯进行回收，析出结晶，结晶用型号90-120石油醚反复多次洗涤得3 α、7 α -二乙酰胆酸甲酯，在70°C真空干燥，取干燥品2kg加入3kg醋酸钠,然后取13kg甲醇一起放入反应罐中一起回流30分钟，然后将温度降至8°C加入次氯酸钠1kg，继续搅拌4. 5小时，然后加水100kg，继续搅拌30分钟后，析出结晶，过滤，结晶在70°C真空干燥。取上述干燥品25 kg加入乙二醇225kg，含量85%的水合肼25kg于130°C回流13小时，然后再升温至198°C再回流3. 5小时，然后停止升温冷却至室温后再加入600kg水稀释，然后用稀硫Ife调PH2. O待析出结晶后过滤，结晶在70 C真空干燥，结晶为含量98. 5%的鹅去氧胆酸。取含量为98. 5%的鹅去氧胆酸15kg，加入鹅去氧胆酸原料的13倍重量的甲醇在70°C溶解5小时，溶解后再将温度降至8°C，然后加入次氯酸钠，次氯酸钠的重量是溶液A重量的9%，在8°C搅拌9小时，然后将温度升高到55°C，加入碳酸钠35kg，加水125 kg产生沉淀，过滤，结晶在70°C真空干燥8小时，得到7-酮；取7-酮10kg，加入仲丁醇35 kg,在温度65°C时溶解，然后加5kg金属钠，在95°C搅拌2. 5小时，然后停止搅拌，过滤，结晶在70 V真空干燥。取上述干燥品10kg，加入40kg乙酸乙 酯，再加入2kg三乙胺在60°C溶解，并搅拌2小时，然后用HCl调节PH2. O左右，过滤，结晶，70°C真空干燥，即得纯度在98. 5%以上的熊去氧胆酸。实施例2
取含量在98. 5%以上的牛羊胆酸20kg，加入甲醇50kg，加热回流I小时后，室温下放置6小时至产生结晶，过滤，结晶用型号90-120石油醚洗涤，在70°C真空干燥结晶，然后取干燥品2kg，取甲苯10kg，取吡啶2kg —起放入反应罐中，在室温下搅拌40分钟，然后加入120kg水再次搅拌40分钟，然后静置5小时后，分离出甲苯进行回收，析出结晶，结晶用型号90-120石油醚反复多次洗涤得3a、7a-二乙酰胆酸甲酯，在70°C真空干燥，取干燥品Ikg加入2kg醋酸钠，然后取IOkg甲醇一起放入反应罐中一起回流30分钟，然后将温度降至5°C加入次氯酸钠3kg，继续搅拌4小时，然后加水100kg，继续搅拌30分钟后，析出结晶，过滤，结晶在70°C真空干燥。取上述干燥品20 kg加入乙二醇200kg，含量85%的水合肼20kg于130°C回流12小时，然后再升温至195°C再回流3小时，然后停止升温冷却至室温后再加A 500kg水稀释，然后用稀硫酸调PH2. O待析出结晶后过滤，结晶在70°C真空干燥，结晶为含量98. 5%的鹅去氧胆酸。取含量为98. 5%的鹅去氧胆酸10kg，加入鹅去氧胆酸原料的10倍重量的甲醇在60°C溶解3小时，溶解后再将温度降至5°C，然后加入次氯酸钠，次氯酸钠的重量是溶液A重量的12%，在5°C搅拌8小时，然后将温度升高到50°C，加入碳酸钠30kg，加水100 kg产生沉淀，过滤，结晶在70°C真空干燥8小时，得到7-酮；取7-酮8kg，加入仲丁醇30 kg，在温度60 V时溶解，然后加3kg金属钠，在90 V搅拌2小时，然后停止搅拌，过滤，结晶在70 V真空干燥。取上述干燥品8kg，加入30kg乙酸乙酯，再加入1. Okg三乙胺在50°C溶解，并搅拌I小时，然后用HCl调节PH2. O左右，过滤，结晶，70°C真空干燥，即得纯度在98. 5%以上的熊去氧胆酸。实施例3
取含量在98. 5%以上的牛羊胆酸30kg，加入甲醇60kg，加热回流2小时后，室温下放置8小时至产生结晶，过滤，结晶用型号90-120石油醚洗涤，在70°C真空干燥结晶即得，然后取干燥品4kg，取甲苯20kg，取吡啶4kg —起放入反应罐中，在室温下搅拌50分钟，然后加入150kg水再次搅拌50分钟，然后静置6小时后，分离出甲苯进行回收，析出结晶，结晶用型号90-120石油醚反复多次洗涤得3 α、7 α -二乙酰胆酸甲酯，在70°C真空干燥，取干燥品3kg加入4kg醋酸钠,然后取15kg甲醇一起放入反应罐中一起回流30分钟,然后将温度降至10°C加入次氯酸钠4kg，继续搅拌5小时，然后加水100kg，继续搅拌30分钟后，析出结晶，过滤，结晶在70°C真空干燥。取上述干燥品30 kg加入乙二醇250kg，含量85%的水合肼30kg于130°C回流15小时，然后再升温至200°C再回流4小时，然后停止升温冷却至室温后再加入700kg水稀释，然后用稀硫Ife调PH2. O待析出结晶后过滤，结晶在70 C真空干燥，结晶为含量98. 5%的鹅去氧胆酸。取含量为98. 5%的鹅去氧胆酸20kg，加入鹅去氧胆酸原料的15倍重量的甲醇在60°C溶解7小时，溶解后再将温度降至10°C，然后加入次氯酸钠，次氯酸钠的重量是溶液A重量的12%，在10°C搅拌10小时，然后将温度升高到60°C，加入碳酸钠40kg，加水150 kg产生沉淀，过滤，结晶在70°C真空干燥 8小时，得到7-酮；取7-酮12kg，加入仲丁醇40 kg,在温度70°C时溶解，然后加8kg金属钠，在100°C搅拌3小时，然后停止搅拌，过滤，结晶在70°C真空干燥。取上述干燥品12kg，加入50kg乙酸乙酯，再加入3kg三乙胺在75°C溶解，并搅拌3小时，然后用HCl调节PH2. O左右，过滤，结晶，70°C真空干燥，即得纯度在98. 5%以上的熊去氧胆酸。实施4
取含量98. 5%的牛羊胆酸27kg，加入甲醇58kg，加热回流2小时后，室温下放置7小时至产生结晶，过滤，结晶用型号90-120石油醚洗涤，在70°C真空干燥结晶得胆酸甲酯，然后取胆酸甲酯3kg，取甲苯18kg，取吡啶4kg—起放入反应罐中，在室温下搅拌50分钟，然后加入145kg水再次搅拌48分钟，然后静置6小时后，分离出甲苯进行回收，析出结晶，结晶用型号90-120石油醚反复多次洗涤得3 α、7 α -二乙酰胆酸甲酯，在70°C真空干燥，取上述干燥后的3 α、7 α -二乙酰胆酸甲酯2. 8kg加入3. 5kg醋酸钠,然后取14kg甲醇一起放入反应罐中一起回流30分钟，然后将温度降至10°C加入次氯酸钠4kg，继续搅拌5小时，然后加水100kg，继续搅拌30分钟后，析出结晶，过滤，结晶在70°C真空干燥。取上述干燥品28kg加入乙二醇240kg，含量85%的水合肼26kg于130°C回流15小时，然后再升温至200°C再回流4小时，然后停止升温冷却至室温后再加入650kg水稀释，然后用稀硫酸调PH2. O待析出结晶后过滤，结晶在70°C真空干燥，结晶为含量98. 5%的鹅去氧胆酸。取含量为98. 5%的鹅去氧胆酸18kg，加入鹅去氧胆酸原料的12倍重量的甲醇在60°C溶解6小时，溶解后再将温度降至10°C，然后加入次氯酸钠，次氯酸钠的重量是溶液A重量的15%，在10°C搅拌10小时，然后将温度升高到60°C，加入碳酸钠40kg，加水150 kg产生沉淀，过滤，结晶在70°C真空干燥8小时，得到7-酮；取7-酮12kg，加入仲丁醇40 kg,在温度70°C时溶解，然后加8kg金属钠，在100°C搅拌3小时，然后停止搅拌，过滤，结晶在70°C真空干燥。取上述干燥品Ilkg，加入45kg乙酸乙酯，再加入3kg三乙胺在75°C溶解，并搅拌3小时，然后用HCl调节PH2. O左右，过滤，结晶，70°C真空干燥，即得纯度在98. 5%以上的熊去氧胆酸。本发明的各项技术指标及有益效果，参照国家标准进行了全面系统的检验，其检测结果为了便于参照，列于表I。结论综合上述比较和对本发明的各项技术指标按国家标准进行的检测可知，本发明的各项技术指标均符合标准。并且充实证明本发明的熊去氧胆酸纯度高，适合批量生产。
权利要求
1.一种用含量98. 5%的牛羊胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法，其特征在于包括下述步骤取甲醇50-60kg，加入含量98. 5%的牛羊胆酸20-30kg，加热1_2小时，放置室温6_8 小时后有结晶析出，过滤，滤液待回收甲醇，结晶用石油醚洗涤，在70°C真空干燥得胆酸甲酷；取甲苯10-20kg，加入2-4kg吡啶投入反应釜中，然后再加入上述结晶的胆酸甲酯 2-4kg在室温下搅拌40-50分钟，然后加水120-150kg，再次搅拌40-50分钟，然后静置5_6 小时后，分离出甲苯后进行回收，析出结晶，结晶在70°C下真空干燥；结晶用石油醚反复洗涤得3 α、7α-二乙酰胆酸甲酯；取上述3 α、7α-二乙酰胆酸甲酯l_3kg，加入2_4kg醋酸钠，加入10_15kg甲醇进行回流30分钟，待温度达到5-10°C时加入次氯酸钠1kg，继续搅拌4-5小时，然后加入IOOkg 水中，待结晶后过滤，结晶在70°C下真空干燥；结晶为3 α -7 α -二乙酰氧基_12_酮基胆烷酸甲酯；取3 α -7 α - 二乙酰氧基_12_酮基胆烷酸甲酯20_30kg加入乙二醇200_250kg，水合肼溶剂20-30kg回流12-15小时，然后再升温至195-200°C再回流3_4小时，然后停止升温冷却至室温，再加入500-700kg水稀释，然后用稀硫酸调节PH2. O，待析出结晶，过滤，结晶在 70°C真空干燥，结晶为含量98. 5%鹅去氧胆酸；取上述含量98. 5%的鹅去氧胆酸10-20kg为原料，加入原料的10-15倍重量的甲醇，力口热60-80°C，溶解3-7小时，得溶液A ；将上述溶液A温度降至5-10°C，然后加入次氯酸钠，次氯酸钠的重量是溶液A重量的 6%-15%，在5-10°C下反应8-10小时，得反应液B ；将上述反应液B再加温到50-60°C，然后加入碳酸钠30-40kg，加水100-150 kg过滤， 弃掉过滤液，结晶在70°C真空干燥，得7-酮；取上述7-酮8-12kg，加入仲丁醇30-40kg，升温至60-70°C溶解，加入金属钠3-8kg， 在90-100°C搅拌2-3小时，然后停止搅拌，过滤，结晶在70°C真空干燥；取上述干燥后的结晶品8-12kg,加入30-50kg乙酸乙酯,再加入1. 0_3kg三乙胺在 50-750C溶解，并搅拌1-3小时，然后用HCl调节PH2. O左右，过滤，滤液弃掉，结晶在70 V真空干燥，得熊去氧胆酸。
2.根据权利要求1所述的用含量98.5%的牛羊胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法，其特征在于包括下述步骤取含量98. 5%的牛羊胆酸27kg，加入甲醇58kg，加热回流2小时后，室温下放置7小时至产生结晶，过滤，结晶用型号90-120石油醚洗涤，在70°C真空干燥结晶得胆酸甲酯，然后取胆酸甲酯3kg，取甲苯18kg，取吡啶4kg—起放入反应罐中，在室温下搅拌50分钟，然后加入145kg水再次搅拌48分钟，然后静置6小时后，分离出甲苯进行回收，析出结晶，结晶用型号90-120石油醚反复多次洗涤得3 α、7 α -二乙酰胆酸甲酯，在70°C真空干燥，取上述干燥后的3 α、7 α - 二乙酰胆酸甲酯2. 8kg加入3. 5kg醋酸钠,然后取14kg甲醇一起放入反应罐中一起回流30分钟，然后将温度降至10°C加入次氯酸钠4kg，继续搅拌5小时，然后加水100kg，继续搅拌30分钟后，析出结晶，过滤，结晶在70°C真空干燥；取上述干燥品28kg加入乙二醇240kg，含量85%的水合肼26kg于130°C回流15小时，然后再升温至200°C再回流4小时，然后停止升温冷却至室温后再加入650kg水稀释，然后用稀硫酸调PH2. O待析出结晶后过滤，结晶在70°C真空干燥，结晶为含量98. 5%的鹅去氧胆酸；取含量为98. 5%的鹅去氧胆酸18kg，加入鹅去氧胆酸原料的12倍重量的甲醇在60°C 溶解6小时，溶解后再将温度降至10°C，然后加入次氯酸钠，次氯酸钠的重量是溶液A重量的15%，在10°C搅拌10小时，然后将温度升高到60°C，加入碳酸钠40kg，加水150 kg产生沉淀，过滤，结晶在70°C真空干燥8小时，得到7-酮；取7-酮12kg，加入仲丁醇40 kg，在温度70°C时溶解，然后加8kg金属钠，在100°C搅拌3小时，然后停止搅拌，过滤，结晶在70°C 真空干燥；取上述干燥品11kg，加入45kg乙酸乙酯，再加入3kg三乙胺在75°C溶解，并搅拌3小时，然后用HCl调节PH2. O左右，过滤，结晶，70°C真空干燥，即得纯度在98. 5%以上的熊去氧胆酸。
3.根据权利要求1所述的用含量98.5%的牛羊胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法，其特征在于所述的石油醚为型号100-120石油醚。
4.根据权利要求1所述的用含量98.5%的牛羊胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法，其特征在于所述的水合肼溶剂为含量85%的水合肼溶剂。
全文摘要
本发明涉及一种用含量98.5%的牛羊胆酸生产熊去氧胆酸的生产方法，采用牛羊胆酸经过酯化、乙酰化、氧化、还原等四个步骤，将同分异构体的胆酸转化成鹅去氧胆酸的结构，形成了鹅去氧胆酸的化合物，利用鹅去氧胆酸，通过反应后得到熊去氧胆酸，然后再用乙酸乙酯进行分离得到纯度98.5%的熊去氧胆酸，该生产方法工艺过程简单，生产成本低，解决了禽胆汁量较少，难以收集的问题，而且合成生产的熊去氧胆酸纯度高，达到了国际的先进水平。
文档编号C07J9/00GK103012532SQ20121052690
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月10日 优先权日2012年12月10日
发明者姚凤云, 刘墨涵 申请人:辽宁百凤生物药业有限公司, 辽宁百隆生物工程有限公司, 刘墨涵