专利名称：新的羧酸衍生物,它们的制备以及在癌症治疗方面的用途的制作方法
对于癌症来说，有许多很有效的治疗方法，然而，由于各种类型癌症的流行及其造成的严重影响，需要有更有效的治疗方法，尤其是那些比现有方法具较少副作用的治疗方法。
本发明涉及新的羧酸衍生物，它们的制备以及在哺乳动物(例如人类)癌症治疗方面的用途，上述癌症中存在内皮素失调。
内皮素是由21个氨基酸组成的多肽，其由血管内皮合成和释放。内皮素存在三种异型，ET-1，ET-2和ET-3。这里所用的术语“内皮素”或“ET”是指内皮素的一种或所有的异型。内皮素是一个很强的血管收缩剂，并且对管音(vessel tone)具有较强的作用。人们已知这种血管收缩作用是由内皮素与其受体结合产生的(Nature，332(1988)411-415；FEBS Letters，231，(1988)440-444以及Biochem.Biophys.Res.Commun.，154，(1988)868-875)。
内皮素释放的增加或异常可以引起持续性的外周、肾及脑血管的血管收缩，它们可以导致疾病。文献中已有报道，在患有高血压、急性心肌梗塞、肺高血压、Raynaud’s综合症、动脉粥样硬化以及呼吸道哮喘等疾病的患者血清中，内皮素的水平有所提高(日本高血压杂志，12，(1989)79，J.Vascular Med.Biology.2，(1990)207，J.Am.Med.Association 264，(1990)2868)。
因此，专一抑制内皮素和受体结合的物质也应该可以拮抗内皮素的上述各种生理作用，并因此是有价值的药物。例如本发明化合物可以用于治疗高血压，肺高血压，心肌梗塞，心绞痛，急性肾衰竭，肾功能不全，脑血管痉挛，脑局部缺血，蛛网膜下出血，偏头疼，哮喘，动脉粥样硬化，内毒素休克，内毒素诱导的器官衰竭，血管内凝血，血管成形术后的再狭窄，轻微的前列腺增殖，或高血压，或者由局部缺血或中毒引起的肾衰竭，正如WO96/11914和WO95/26716中所述的。上述文献在这里被全文引入，作为参考文献。
我们发现一些作为内皮素受体抑制剂的式I或Ia羧酸衍生物也可以用来治疗癌症，例如前列腺癌。这里描述了这些羧酸衍生物，并可以参见WO96/11914和WO95/26716。上述文献在这里被全文引入，作为参考文献。
本发明涉及治疗个体癌症患者(例如人类)的方法，其中癌症是内皮素失调的肿瘤(例如前列腺肿瘤，肺肿瘤，乳腺肿瘤，脑肿瘤，胃肿瘤，结肠肿瘤，子宫内膜肿瘤，睾丸，甲状腺肿瘤，粘液肿瘤，膀胱肿瘤，肾肿瘤，胰腺肿瘤，以及脑脊膜肿瘤)。治疗的含义是通过给予个体患者有效剂量的下述一或多种式I和/或Ia化合物，抑制(部分或全部)内皮素失调的固体肿瘤的形成，逆转内皮素失调的固体肿瘤的发展或降低其进一步的发展。这里所用的术语有效剂量是指足够抑制(部分或全部)内皮素失调的固体肿瘤生长、逆转内皮素失调的固体肿瘤的发展或降低其进一步的发展的剂量。在本发明中，式Ia化合物是式I化合物的亚组。
一或多种式I和Ia化合物可以根据所需给药途径单独或与制药上可接受的载体或稀释剂一起给药。给药可以采用制药学上方便的任意途径进行，优选的是肿瘤制剂，包括口服和非肠道途径，例如皮下，静脉内，肌内，腹膜内，鼻腔或直肠给药。
哺乳动物(例如人类)的给药剂量包括有效剂量的式I或Ia化合物。对于特殊治疗条件或方法。给药剂量可以采用已知的方法由经验决定，并且取决于如下因素生物活性；毒性情况；给药方法；接受者的年龄、性别、健康状况和体重；症状的性质和程度；治疗频率；是否给予其它治疗剂；以及预期的效果。
对于口服给药而言，式I或Ia化合物的典型每日剂量约为0.5-5000mg/kg体重，对于非肠道途径给药而言，约为0.1-1000mg/kg体。在一个非肠道途径给药的实施方案中，每日剂量为50-500mg/kg体重，在一个特定的非肠道途径给药的实施方案中，每日剂量为100-300mg/kg体重(例如100，150或200mg/kg体重)。
新的化合物可用于常规的固体或液体药物剂型，例如未包衣或(膜)包衣的片剂，胶囊，粉剂，颗粒剂，栓剂，溶液，软膏剂，霜剂或喷雾剂。这些制剂可用常规的方法制备。可用于此目的的活性物质可与常规的制药辅助剂一起进行加工，例如片剂粘合剂，填充剂，防腐剂，崩解剂，流动调节剂，增塑剂，加湿剂，分散剂，乳化剂，溶剂，缓释剂，抗氧剂和/或推进气体(cf.H.Sucker等PharmazeutischeTechnologie，Thieme-Verlag，Stuttgart，1991)。用这种方式获得的给药剂型含有0.1-90％的活性成分(重量比)。
本发明方法中使用的羧酸衍生物为式I化合物
其中R为甲酰基，四唑基，氰基，COOH基团或可以被水解至COOH的基团，且其它基团具有下列含义R2为氢，羟基，NH2，NH(C1-C4-烷基)，N(C1-C4-烷基)2，卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基或C1-C4-烷硫基；X为氮或CR14，其中R14为氢或C1-C5-烷基，或CR14与CR3一起形成5-或6-元亚烷基或亚链烯基环，该环可以被一或两个C1-4-烷基取代，并且其中在每一种情况下，亚甲基基团可以被氧，硫，-NH或-N C1-4-烷基取代；R3为氢，羟基，NH2，NH(C1-C4-烷基)，N(C1-C4-烷基)2，卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，-NH-O-C1-C4-烷基，C1-C4-烷硫基，或如上所述，CR3与CR14相连形成5-或6-元环；R4和R5可以相同或不同，且为苯基或萘基，其可被下列一或多个基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，氨基，C1-C4-烷氨基或C1-C4-二烷基氨基；或苯基或萘基，其可通过直接连接在邻位与亚甲基，亚乙基或亚乙烯基，氧或硫原子或SO2-，NH-或N-烷基基团，或C3-C7-环烷基相连；或R4为C1-C10-烷基，其可以携带一至五个卤原子和/或下列基团之一C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，氰基，C1-C8-烷基羰基，C1-C8-烷氧羰基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中的苯基基团反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；C1-C10-烷基，其可以携带一至五个卤原子和下列基团之一5元芳香杂环，其中含有一至三个氮原子和/或一个硫原子或氧原子，并且其可以携带一至四个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基和/或苯基；C3-C12-环烷基或C3-C12-环链烯基，其中的每一个可以含一个氧或硫原子，并且可以携带一至五个卤原子和/或下列一个基团C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，氰基，C1-C8-烷基羰基，C1-C8-烷氧羰基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中苯基反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；C3-C6-链烯基或C3-C6-链炔基，其中的每一个可以携带一至五个卤原子和/或下列基团之一C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，氰基，C1-C8-烷基羰基，C1-C8-烷氧羰基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中苯基反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；5或6元芳香杂环，其可含有一至三个氮原子和/或一个硫原子或氧原子，并且其可以携带一至四个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中苯基反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；R4和R5与相邻的碳原子一起形成3-至8-元环，其可以含一个氧或硫原子，并可以携带一至三个下列基团C1-C4-烷基，卤素，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基[sic]；R5为氢，C1-C4-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基，C3-C6-环烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧烷基，C1-C4-烷硫基烷基，苯基或如上所述R5与R4一起形成3-至8元环；R6为氢，C1-C8-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基，C3-C6-环烷基，这些基团之中的每一个可被下列基团取代一或多次卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷氧基，C3-C6-链烯氧基，C3-C6-链炔氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷基羰基，C1-C4-烷氧羰基，C3-C8-烷基羰基烷基，C1-C4-烷基氨基，二-C1-C4-烷基氨基，苯基或可被卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，或C1-C4-烷硫基取代一或多次，例如1-3次，的苯基或苯氧基。
苯基或萘基，其可被下列一或多个基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，氨基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-烷氨基或C1-C4-二烷基氨基，亚甲基二氧基或亚乙基二氧基；5或6元芳香杂环，其可含有一至三个氮原子和/或一个硫原子或氧原子，并且其可以携带一至四个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中苯基反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；条件是当Z不为单键时R6仅可以为氢；Y为硫或氧或单键；Z为硫或氧或单键。
在具体的实施方案中，本发明方法中使用的羧酸衍生物为式Ia化合物，其为式I的亚组
其中R为甲酰基，四唑基，氰基，COOH基团或可以被水解至COOH的基团，且其它取代基具有下列含义R2为氢，羟基，NH2，NH(C1-C4-烷基)，N(C1-C4-烷基)2，卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基或C1-C4-烷硫基；X为氮或CR14，其中R14为氢或C1-C5-烷基，或CR14与CR3一起形成5-或6-元亚烷基或亚链烯基环，其可以被一或两个C1-4-烷基取代，并且其中在每一种情况下，亚甲基基团可以被氧，硫，-NH或-N C1-4-烷基取代；R3为氢，羟基，NH2，NH(C1-C4-烷基)，N(C1-C4-烷基)2，卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，-NH-O-C1-C4-烷基，C1-C4-烷硫基，或如上所述，CR3与CR14相连形成一个5-或6-元环；R4和R5可以相同或不同，且为苯基或萘基，其可被下列一或多个基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，氨基，C1-C4-烷氨基或C1-C4-二烷基氨基；或苯基或萘基，其可通过直键在邻位与亚甲基，亚乙基或亚乙烯基基团，氧或硫原子或SO2-，NH-或N-烷基基团，或C3-C7-环烷基相连；R6为氢，C1-C8-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基，C3-C6-环烷基，这些基团之中的每一个可被下列基团取代一或多次卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷氧基，C3-C6-链烯氧基，C3-C6-链炔氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷基羰基，C1-C4-烷氧羰基，C3-C8-烷基羰基烷基，C1-C4-烷基氨基，二-C1-C4-烷基氨基，苯基或苯氧基，可被卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，或C1-C4-烷硫基一或多次取代，例如1-3次，的苯基或苯氧基。
苯基或萘基，其可被下列一或多个基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，氨基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-烷氨基或C1-C4-二烷基氨基，亚甲基二氧基或亚乙基二氧基；5或6元芳香杂环，其可含有一至三个氮原子和/或一个硫原子或氧原子，并且其可以携带一至四个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中的苯基反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；条件是当Z不为单键时R6仅可以为氢；Y为硫或氧或单键；
Z为硫或氧或单键。
用于制备式I和Ia化合物的化合物及中间体，例如式IV和VI，可以具有一或多个不对称取代的碳原子。这类化合物可以纯的对映体或纯的非对映体或它们的混合物形式存在。优选的是使用对映体纯的化合物作为活性物质。
本发明进一步涉及上述羧酸衍生物用于制备药物的用途，特别是制备内皮素受体抑制剂的用途。
本发明进一步涉及对映体纯的式IV化合物的制备。已知将两个苯基取代基与烯烃进行对映选择性环氧化(J.Org.Chem.59，1994，4378-4380)。
根据本发明，其中Z为硫或氧的化合物的制备是从环氧化物IV开始的，式IV化合物可用常规的方法制得，例如按照J.March，AdvancedOrganic Chemistry，第二版，1983，p862和p750中所述的方法，从酮II或烯III开始
使通式IV环氧化物(例如R＝COOR10)与通式V醇或硫醇(其中R6和Z的含义同上)进行反应，可以得到通式VI羧酸衍生物。
为了实现此目的，将式IV化合物与式V化合物一起加热至50-200℃，优选的是80-150℃，两者的摩尔比约为1∶1至1∶7，优选的是1-3。
反应可以在稀释剂的存在下发生。所有不与反应试剂发生反应的溶剂均可用于此目的。
这类溶剂或稀释剂的实施例有水，脂肪，脂环和芳香烃类，在每种情况下它们可被氯代，例如己烷，环己烷，石油醚，石脑油，苯，甲苯，二甲苯，二氯甲烷，氯仿，四氯化碳，氯乙烷以及三氯乙烯，醚类，例如二异丙醚，二丁基醚，甲基叔丁基醚，氧化丙烯，二噁烷以及四氢呋喃，酮类，例如丙酮，甲乙酮，甲基异丙酮以及甲基异丁酮，腈类，例如乙腈和丙腈，醇类，例如甲醇，乙醇，异丙醇，丁醇和乙二醇，酯类，例如乙酸乙酯和乙酸戊酯，酰胺类，例如二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺以及N-甲基吡咯烷酮，亚砜和砜类，例如二甲基亚砜和环砜烷，碱例如吡啶，环尿类，例如1，3-二甲基咪唑烷-2-酮和1，3-二甲基-3，4，5，6-四氢-2(1H)-嘧啶酮。
反应优选在0℃至溶剂或溶剂混合物的沸点下进行。
催化剂的存在是有利的，合适的催化剂是强有机和无机酸以及Lewis酸。这类催化剂的实施例包括硫酸，盐酸，三氟乙酸，对甲苯磺酸，三氟化硼醚溶液以及钛(IV)醇化物。
使VI化合物(其中R4和R5为苯基，萘基，或如上述的取代苯基或萘基)进行亲核氢化反应，可以制备式VI化合物(其中R4和R5为环烷基)。
使对映体纯的式IV化合物与式V化合物按照所述方式进行反应，可以得到对映体纯的式VI化合物。
进一步地，采用合适的对映体纯的碱(例如蕃木鳖碱，马钱子碱，奎宁，奎尼丁，辛可尼定，辛可尼，育亨宾，吗啡，脱氢枞酸基胺，麻黄碱(-)，(+)，脱氧麻黄碱(+)，(-)，苏-2-氨基-1-(对硝基苯基)-1，3-丙二醇(+)，(-)，苏-2-(N，N-二甲基氨基)-1-(对硝基苯基)-1，3-丙二醇(+)，(-)，α-(2-萘基)乙基胺(+)，(-)，氨基甲基蒎烷，N，N-二甲基-1-苯基乙基胺，N-甲基-1-苯基乙基胺，4-硝基苯基乙基胺，伪麻黄碱，去甲麻黄碱，去甲伪麻黄碱，，氨基酸衍生物，肽衍生物)对式VI化合物的外消旋体或非对映体化合物进行经典的外消旋拆分，也可以获得对映体纯的式VI化合物。
使具通式VI的羧酸衍生物(其中取代基的定义同前)与通式VII化合物进行反应
其中R15为卤素或R16-SO2-，其中的R16可以为C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基或苯基，可以制备得到本发明化合物(其中Y为氧，其余取代基含义如式I和Ia中所述)。优选地，反应在室温至溶剂的沸点下于上述一种惰性稀释剂中进行，同时要加入合适的碱，该碱可使中间体VI脱质子。
式VII化合物是已知的，其可以购得，也可以用已知方法来制备。
可以用作碱的化合物包括碱金属或碱土金属氢化物，例如氢化钠，氢化钾或氢化钙，碳酸盐，例如碱金属碳酸盐，如碳酸钠或碳酸钾，碱金属或碱土金属氢氧化物，例氢氧化钠或氢氧化钾，有机金属化合物，例如丁基锂，或碱金属氨化物，例如二异丙基氨化锂。
使具通式VIII的羧酸衍生物(其可用已知的方法从通式VI化合物来制备，并且其中取代基的定义同前)与通式IX进行反应(其中R2为和R3以及X的含义如式I和Ia中定义)，可以制备本发明化合物(其中Y为硫，其余取代基的含义同通式I和Ia)。
优选地，反应在室温至溶剂的沸点下，于上述一种惰性稀释剂中进行，同时要加入合适的碱，该碱可使中间体IX脱质子。
可以用作碱的化合物除了上述提及的碱之外，还有有机碱，例如三乙胺，吡啶，咪唑或二氮杂双环十一碳烯。
使式IV环氧化物与式XI铜酸盐进行反应
可以制得式VIa羧酸衍生物(式VI中的Z＝直接连接)。
上述铜酸盐可用Tetrahedron Letters23，(1982)3755中所述的方法来制备。
可以从相应的羧酸起始来制备式I和Ia化合物，起始化合物中R为COOH，首先用常规的方法将它们转化为活性形式例如卤化物，酸酐或咪唑烷(imidazolide)，然后使后者与合适的羟基化合物HOR10进行反应。反应可在常规的溶剂中进行，通常需要加入碱，在这种情况下，上述提及的那些碱是合适的。这两步反应也可以简化，例如在脱水剂(例如碳化二亚胺)的存在下，使羧酸与羟基化合物发生作用。
另外，也可以从相应羧酸的盐起始来制备式I化合物，上述羧酸盐来源于式I和Ia化合物(其中的R为COR1，且R1为OM，其中的M为碱金属阳离子或碱土金属阳离子的等价物)。这些盐可与许多式R1-A化合物进行反应(其中的A为常规的离核离去基团)，例如卤素，如氯、溴、碘，或芳基或烷基磺酰基，其未被取代或被卤素、烷基或卤代烷基所取代，例如甲苯磺酰基以及甲磺酰基或其它相当的离去基团。带有活性取代基A的式R1-A化合物是已知的，并且运用一般的专业知识很容易获得。反应可在常规的溶剂中进行，优选的是加入碱，在这种情况下，上述提及的那些碱是合适的。
式I和Ia中的基团可以在一个广泛的范围内变化，例如，R为基团
其中R1具有下列含义a)氢；b)琥珀酰亚胺基氧基；c)与氮原子相连的5-元芳香杂环，例如吡咯基，吡唑基，咪唑基和三唑基，其可以携带一或两个卤原子，特别是氟和氯和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，例如甲基，乙基，1-丙基，2-丙基，2-甲基-2-丙基，2-甲基-1-丙基，1-丁基，2-丁基；C1-C4-卤代烷基，特别是C1-C2-卤代烷基，例如氟代甲基，二氟代甲基，三氟甲基，氯代二氟甲基，二氯代氟甲基，三氯甲基，1-氟乙基，2-氟乙基，2，2-二氟乙基，2，2，2，-三氟乙基，2-氯-2，2-二氟乙基，2，2-二氯-2-氟乙基，2，2，2-三氯乙基以及五氟乙基；C1-C4-卤代烷氧基，特别是C1-C2-卤代烷氧基，例如二氟代甲氧基，三氟代甲氧基，氯代二氟甲氧基，1-氟乙氧基，2-氟乙氧基，2，2-二氟乙氧基，1，1，2，2-四氟乙氧基，2，2，2，-三氟乙氧基，2-氯-1，1，2-三氟乙氧基以及五氟乙氧基，特别是三氟甲氧基；C1-C4-烷氧基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，1-甲基乙氧基，丁氧基，1-甲基丙氧基，2-甲基丙氧基，1，1-二甲基乙氧基，特别是甲氧基，乙氧基，1-甲基乙氧基；C1-C4-烷硫基，例如甲硫基，乙硫基，丙硫基，1-甲基乙硫基，丁硫基，1-甲基丙硫基，2-甲基丙硫基，1，1-二甲基乙硫基，特别是甲硫基和乙硫基；
其中m为0或1且R7和R8(其可以相同也可不同)具有下列含义氢，C1-C8-烷基，特别是如上所述的C1-C4-烷基；C3-C6-链烯基，例如2-丙烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，1-甲基-2-丙烯基，2-甲基-2-丙烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，4-戊烯基，1-甲基-2-丁烯基，2-甲基-2-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，1-甲基-3-丁烯基，2-甲基-3-丁烯基，3-甲基-3-丁烯基，1，1-二甲基-2-丙烯基，1，2-二甲基-2-丙烯基，1-乙基-2-丙烯基，2-己烯基，3-己烯基，4-己烯基，5-己烯基，1-甲基-2-戊烯基，2-甲基-2-戊烯基，3-甲基-2-戊烯基，4-甲基-2-戊烯基，3-甲基-3-戊烯基，4-甲基-3-戊烯基，1-甲基-4-戊烯基，2-甲基-4-戊烯基，3-甲基-4-戊烯基，4-甲基-4-戊烯基，1，1-二甲基-2-丁烯基，1，1-二甲基-3-丁烯基，1，2-二甲基-2-丁烯基，1，2-二甲基-3-丁烯基，1，3-二甲基-2-丁烯基，1，3-二甲基-3-丁烯基，2，2-二甲基-3-丁烯基，2，3-二甲基-2-丁烯基，2，3-二甲基-3-丁烯基，1-乙基-2-丁烯基，1-乙基-3-丁烯基，2-乙基-2-丁烯基，2-乙基-3-丁烯基，1，1，2-三甲基-2-丙烯基，1-乙基-1-甲基-2-丙烯基以及1-乙基-2-甲基-2-丙烯基，尤其是2-丙烯基，2-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基和3-甲基-2-戊烯基。
C3-C6-链炔基，例如2-丙炔基，2-丁炔基，3-丁炔基，1-甲基-2-丙炔基，2-戊炔基，3-戊炔基，4-戊炔基，1-甲基-3-丁炔基，2-甲基-3-丁炔基，1-甲基-2-丁炔基，1，1-二甲基-2-丙炔基，1-乙基-2-丙炔基，2-己炔基，3-己炔基，4-己炔基，5-己炔基，1-甲基-2-戊炔基，1-甲基-2-戊炔基，1-甲基-3-戊炔基，1-甲基-4-戊炔基，2-甲基-3-戊炔基，2-甲基-4-戊炔基，3-甲基-4-戊炔基，4-甲基-2-戊炔基，1，1-二甲基-2-丁炔基，1，1-二甲基-3-丁炔基，1，2-二甲基-3-丁炔基，2，2-二甲基-3-丁炔基，1-乙基-2-丁炔基，1-乙基-3-丁炔基，2-乙基-3-丁炔基以及1-乙基-1-甲基-2-丙炔基，优选的是2-丙炔基，2-丁炔基，1-甲基-2-丙炔基以及1-甲基-2-丁炔基，特别是2-丙炔基。
C3-C8-环烷基，例如环丙基，环丁基，环戊基，环己基和环庚基，环辛基，其中这些烷基，环烷基，链烯基和链炔基基团均可以携带1-5个卤原子，特别是氟或氯和/或1-或2个下列基团如上所述的C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-卤代烷氧基，C3-C6-链烯氧基，C3-C6-链烯硫基，C3-C6-链炔氧基，C3-C6-链炔硫基，存在于这些基团中的链烯基和链炔基优选地具有上述含义；C1-C4-烷基羰基，例如甲基羰基，乙基羰基，丙基羰基，1-甲基乙基羰基，丁基羰基，1-甲基丙基羰基，2-甲基丙基羰基，1，1-二甲基乙基羰基；C1-C4-烷氧羰基，例如甲氧羰基，乙氧羰基，丙氧羰基，1-甲基乙氧羰基，丁氧羰基，1-甲基丙氧羰基，2-甲基丙氧羰基，1，1-二甲基乙氧羰基；C3-C6-链烯羰基，C3-C6-链炔羰基，C3-C6-链烯氧羰基和C3-C6-链炔氧羰基，其中的链烯基和链炔基优选地具有上述详细含义；未取代或被下列基团取代一或多次(例如1-3次)的苯基卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基或C1-C4-烷硫基，例如2-氟苯基，3-氯苯基，4-溴苯基，2-甲基苯基，3-硝基苯基，4-氰基苯基，2-三氟甲基苯基，3-甲氧苯基，4-三氟乙氧苯基，2-甲硫基苯基，2，4-二氯苯基，2-甲氧-3-甲基苯基，2，4-二甲氧苯基，2-硝基-5-氰基-苯基，2，6-二氟苯基；二-C1-C4-烷基氨基，例如二甲基氨基，二丙基氨基，N-丙基-N-甲基氨基，N-丙基-N-乙基氨基，二异丙基氨基，N-异丙基-N-甲基氨基，N-异丙基-N-乙基氨基，N-异丙基-N-丙基氨基；R7和R8进一步为苯基，其可被下列一或多个基团取代(例如1-3个)如上所定义的卤素，硝基，氰基，羟基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基或C1-C4-烷硫基；或R7和R8一起构成C4-C7-亚烷基链，其合在一起形成环，其为未取代或取代的，例如可被C1-C4-烷基取代，并可以含选自氧，硫或氮的杂原子，例如-(CH2)4-，-(CH2)5-，-(CH2)6-，-(CH2)7-，-(CH2)2-O-(CH2)2-，-(CH2)2-S-(CH2)3-，-(CH2)2-O-(CH2)3-，-NH-(CH2)3-，-CH2-NH-(CH2)2-，-CH2-CH＝CH-CH2，-CH＝CH-(CH2)3-；R1进一步为下式基团
其中K为0，1和2，P为1，2，3和4，R9为C1-4烷基，C1-4卤代烷基，C3-6链烯基，C3-6链炔基，或取代或未取代苯基，具体如上定义。
f)R1进一步为基团OR10，其中R10为氢，碱金属阳离子如锂，钠，钾，或碱土金属阳离子如氦，镁和钡或具有环保兼容性的有机铵离子，例如叔C1-C4-烷基铵或铵离子；上述提及的C3-C8-环烷基，其可携带1-3个C1-C4-烷基；C1-C8-烷基，例如甲基，乙基，丙基，1-甲基乙基，丁基，1-甲基丙基，2-甲基丙基，1，1-二甲基乙基，戊基，1-甲基丁基，2-甲基丁基，3-甲基丁基，1，2-二甲基丙基，1，1-二甲基丙基，2，2-二甲基丙基，1-乙基丙基，己基，1-甲基戊基，2-甲基戊基，3-甲基戊基，4-甲基戊基，1，2-二甲基丁基，1，3-二甲基丁基，2，3-二甲基丁基，1，1-二甲基丁基，2，2-二甲基丁基，3，3-二甲基丁基，1，1，2-三甲基丙基，1，2，2-三甲基丙基，1-乙基丁基，2-乙基丁基，1-乙基-2-甲基丙基，其可以携带1-5个卤原子，特别是氟或氯和/或下列基团之一C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，氰基，C1-C4-烷基羰基，C3-C8-环烷基，C1-C4-烷氧羰基，苯基，苯氧基或苯基羰基，如上所述，其中的芳香基团反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；如上所述的C1-C8-烷基，其可以携带1-5个卤原子，特别是氟或氯，并且可以携带下列基团之一含有1-3个氮原子的5-元芳香杂环，或含有氮原子和氧原子或硫原子的5-元芳香杂环，其可以携带1-4个卤原子和/或1-2个下列基团硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，苯基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基。特别值得提及的是1-吡唑基，3-甲基-1-吡唑基，4-甲基-1-吡唑基，3，5-二甲基-1-吡唑基，3-苯基-1-吡唑基，4-苯基-1-吡唑基，4-氯-1-吡唑基，4-溴-1-吡唑基，1-咪唑基，1-苯并咪唑基，1，2，4-三唑-1-基，3-甲基-1，2，4-三唑-1-基，5-甲基-1，2，4-三唑-1-基，1-苯并三唑基，3-异丙基-5-异噁唑基，3-甲基-5-异噁唑基，2-噁唑基，2-噻唑基，2-咪唑基，3-乙基-5-异噁唑基，3-苯基-5-异噁唑基，3-叔丁基-5-异噁唑基；C2-C6-烷基，其可以在2-位上携带一个下列基团C1-C4-烷氧亚氨基，C3-C6-链炔氧亚氨基，C3-C6-烷氧基，C1-C4-卤代链烯氧亚氨基或苄氧亚氨基；C3-C6-链烯基或C3-C6-链炔基，这些基团反过来可以携带1至5个卤原子；R10进一步为苯基，其可以携带1至5个卤原子和/或1-3个下列基团硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，如上所述，特别是C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；通过氮原子相连的5-元芳香杂环，其含有1-3个氮原子并可以携带1-2个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，苯基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；特别值得提及的是1-吡唑基，3-甲基-1-吡唑基，4-甲基-1-吡唑基，3，5-二甲基-1-吡唑基，3-苯基-1-吡唑基，4-苯基-1-吡唑基，4-氯-1-吡唑基，4-溴-1-吡唑基，1-咪唑基，1-苯并咪唑基，1，2，4-三唑-1-基，3-甲基-1，2，4-三唑-1-基，5-甲基-1，2，4-三唑-1-基，1-苯并三唑基，3，4-二氯咪唑基；R10进一步为基团
其中的R11和R12可以相同也可以不同，为如上所述的C1-C8-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基，C3-C8-环烷基，这些基团可以携带C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基和/或未取代或取代的苯基基团；被一或多个(例如1-3个)下列基团取代的苯基卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；特别地，这些基团为那些上述提到的基团；
或R11和R12一起构成C3-C12-亚烷基链，其可以携带1-3个C1-C4-烷基，并可以含有氧，硫或氮的杂原子，特别是如上提及的R7和R8。
g)R1进一步为基团
其中的R13为如上所述的C1-C4-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基，C3-C8-环烷基，这些基团可以携带C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基和/或如上提及的苯基基团；特别是如上提及的未取代或取代的苯基。h)R1为基团
其中的R13具有上述含义。R可以进一步为四唑基或氰基。
在具体的实施方案中，通式I羧酸衍生物(纯对映体和纯非对映体或其混合物)是指那些其上取代基具有下列含义的化合物R2为氢，羟基，N(C1-C4-烷基)2，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基或C1-C4-烷硫基以及R1中提及的卤原子，尤其是氯，甲基，甲氧基，乙氧基，二氟甲氧基，三氟甲氧基；X为氮或CR14，其中R14为氢或烷基，或CR14与CR3一起形成4-或5-元亚烷基或亚链烯基环，其中在每一种情况下，亚甲基基团可以被氧或硫，例如CH2-CH2-O-，-CH＝CH-O-，-CH2-CH2-CH2-O-，-CH＝CH-CH2O-取代，特别是氢，-CH2-CH2-O-，-CH(CH3)-CH(CH3)-O-，-C(CH3)＝C(CH3)-O-，-CH＝C(CH3)-O-或C(CH3)＝C(CH3)-S-，R3为氢，羟基，N(C1-C4-烷基)2，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基以及R1中提及的卤原子，尤其是氯，甲基，甲氧基，乙氧基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，或与上述R14相连，形成5-或6-元环，R4和R5为苯基或萘基，其可被一或多个基团(例如1-3个)下列基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，巯基，氨基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-烷氨基，二-C1-C4-烷基氨基，C1-C4-烷羰基，C1-C4-烷氧羰基；特别是如上述对于R7和R8的描述，和/或例如3-羟基苯基，4-二甲基氨基-苯基，2-巯基苯基，3-甲氧基羰基苯基，4-乙酰苯基，1-萘基，2-萘基，3-溴-2-萘基，4-甲基-1-萘基，5-甲氧基-1-萘基，6-三氟甲基-1-萘基，7-氯-1-萘基，8-羟基-1-萘基；或R4和R5与相邻的碳原子一起形成3-至6-元环，其可以含有氧或硫原子，并未被取代或根据环的大小可以携带一至三个下列基团如上通式中和特定情况下所述的C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基；
苯基或萘基，其通过直键在邻位与亚甲基，亚乙基或亚乙烯基，氧或硫原子或SO2-，NH-或N-烷基，或C3-C7-环烷基相连；R4为如R1中特述的C1-C10-烷基，其可以携带一至五个卤原子，例如氟，氯，溴，碘，尤其是氟和氯，和/或下列基团之一如上通式中和R1中所述的烷氧基，烷硫基，氰基，烷基羰基，烷氧羰基，苯基，苯氧基或苯基羰基，如上R1中所述的C1-C10-烷基，其可以携带一至五个上述卤原子，尤其是氟和氯，并且其可以携带5元芳香杂环，其是未取代或被取代；C3-C12-环烷基，特别是C3-C7-环烷基，或C3-C12-环链烯基，特别是C4-C7-环链烯基，对于饱和或不饱和环上的亚甲基来说，其可以被氧或硫原子取代，例如环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，四氢呋喃基，四氢噻吩基，四氢吡喃基，四氢硫代吡喃基，环丙烯基，二氢呋喃基，二氢噻吩基，二氢吡喃基，二氢硫代吡喃基，其中的环烷基和环链烯基可被上述1至5个卤原子(尤其是氟和氯)和/或下列基团之一所取代C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，氰基，C1-C8-烷基羰基，C1-C8-烷氧羰基，苯基，苯氧基，苯基羰基，正如上面的通式中和特定情况下所述的。
如R1中所述的C3-C6-链烯基或C3-C6-链炔基，其中的每一个可以携带上述的一至五个卤原子(尤其是氟和氯)和/或下列基团之一C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，氰基，C1-C8-烷基羰基，C1-C8-烷氧羰基，苯基，苯氧基或苯基羰基，正如上面的通式中和特定情况下所述的；5或6元杂芳基，例如，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，三唑基，异唑基，唑基，异噻唑基，噻唑基，噻二唑基，吡啶基，嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，三嗪基，例如，2-呋喃基，3-呋喃基，2-噻吩基，3-噻吩基，3-异唑基，4-异唑基，5-异唑基，3-异噻唑基，4-异噻唑基，5-异噻唑基，2-唑基，4-唑基，5-唑基，2-噻唑基，4-噻唑基，5-噻唑基，2-咪唑基，4-咪唑基，5-咪唑基，2-吡咯基，3-吡咯基，3-吡唑基，4-吡唑基，5-吡唑基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，氧杂-2，4-二唑基，氧杂-3，4-二唑基，硫杂-2，4-二唑基，硫杂-3，4-二唑基[sic]以及三唑基，其中的杂芳环可以携带上述的1至5个卤原子(尤其是氟和氯)和/或下列基团之一C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，氰基，硝基，C1-C8-烷基羰基，C1-C8-烷氧羰基，苯基，苯氧基，苯基羰基，正如上面的通式中和特定情况下所述的；R5为氢，C1-C4-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基，C3-C8-环烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基烷基，C1-C4-烷硫基烷基或苯基，特别是如R4中所述的；R6为如上所述的C1-C8-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基或C3-C8-环烷基，这些基团之中的每一个可被下列基团取代一或多次卤素，羟基，硝基，氰基，C1-C4-烷氧基，C3-C6-链烯氧基，C3-C6-链炔氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C6-卤代烷氧基，C1-C4-烷基羰基，羟基羰基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷基羰基，羟基羰基，C1-C4-烷氧羰基，C1-C4-烷基氨基，二-C1-C4-烷基氨基，或未取代或取代的苯基或苯氧基；如上R7和R4中所述的苯基或萘基，其可被下列基团一或多次取代卤素，硝基，氰基，羟基，氨基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-烷基氨基，二C1-C4-烷基氨基，
如上R4中所述的5或6元芳香杂环，其可含有一至三个氮原子和/或一个硫原子或氧原子，并且其可以携带一至四个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中的苯基反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；Y为硫，氧或单键；Z为硫，氧，-SO-，SO2-或单键。
在具体的实施方案中，式I和Ia化合的纯对映体和纯非对映体或其混合物是指那些其中取代基具有下列含义的化合物R2为C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，X为氮或CR14，其中R14为氢或烷基，或CR14与CR3一起形成4-或5-元亚烷基或亚链烯基环，例如-CH2-CH2-O-，-CH＝CH-O-，-CH2-CH2-CH2-O-，-CH＝CH-CH2O-，特别是氢，-CH2-CH2-O-，-CH(CH3)-CH(CH3)-O-，-C(CH3)＝C(CH3)-O-，-CH＝-C(CH3)-O-或C(CH3)＝C(CH3)-S-；R3为R1中提及的C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，或与上述R14相连形成5-或6-元环；R4和R5为苯基(其可以相同也可不同)，其可被一或多个(例如1-3个)下列基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，C1-C4-烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基或R4和R5为苯基基团，其通过直键在邻位与亚甲基，亚乙基或亚乙烯基，氧或硫原子或SO2，NH或N-烷基相连；或R4和R5为C3-C7-环烷基；R6为C1-C8-烷基，C3-C6-链烯基或C3-C8-环烷基，这些基团之中的每一个可被下列基团取代一或多次卤素，羟基，硝基，氰基，C1-C4-烷氧基，C3-C6-链烯氧基，C1-C4-烷硫基；苯基或萘基，其可被下列一或多个基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，氨基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-烷氨基或C1-C4-二烷基氨基；5或6元芳香杂环，其可含有氮原子和/或硫原子或氧原子，并且其可以携带一至四个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-烷硫基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中的苯基反过来可以携带1至5个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；Y为硫，氧或单键；Z硫，氧，-SO-，SO2-或单键。
化合物有益的作用可在下列实验中显示体内生物学活性评价可以在任意的各种临床前试验中对本发明化合物进行进一步的实验以检验其体内抗癌活性。例如采用大约50mg大小肿瘤碎片，将在裸体小鼠内生长的人类肿瘤转移到新的接受小鼠身上。植入当天设置为0天。5-15天以后，用受试化合物处理小鼠，其经静脉或腹膜内注射给药，每个剂量下有5-10只小鼠。，每日给予化合物(持续5、10或15天)，剂量为0.1-1000mg/kg体重。
定期地测量肿瘤直径和体重。采用Vernier calipers方法，用测量到的直径计算肿瘤的质量，计算式如下(长度×宽度2)/2＝肿瘤重量mg每个处理组的平均肿瘤重量是相对于未处理的对照组的肿瘤计算出的。DU-145模型是此类型分析的一个具体实例，并在下面作了描述。DU-145模型将在裸体小鼠内生长的人类前列腺肿瘤碎片(HTB81)经套针皮下植入到新接受的裸体小鼠的背侧，植入当天设置为0天。
在植入后11天用表I中的化合物I-1开始进行治疗，每6只为一组，并采用表XI中所述的给药方式和给药剂量(mg/kg体重)。如前所述，在植入11天后，每日一次给予化合物I-1，连续10天(Q1D×10∶11)。
表IX列出了所有处理组对给予化合物I-1后的反应情况，正如％T/C平均肿瘤重量(MTW)值的降低所证明的。表IX
在DU-145前列腺肿瘤模型中使用化合物I-1
受体结合研究采用克隆的人类ETA受体表达的CHO细胞以及与ETA受体相比带有＞60％ETB的豚鼠小脑膜进行结合研究。
使ETA受体表达的CHO细胞在含有10％胎儿腓肠血清，1％葡糖胺，100U/ml青霉素以及0.2％链霉素的F12介质(Gibco BRL，Gaithersburg，MD，USA)中生长。48小时后，用PBS洗涤细胞，用005％含胰蛋白酶的PBS培养5分钟。用F12介质进行中和，在300×g的速度下离心收集细胞。为了溶解细胞，用溶解缓冲液(5mM Tris-HCl，pH7.4，带有10％的甘油)简要地洗涤小丸，然后在4℃下，在浓度为107个细胞/mL溶解缓冲液中培养30分钟。将膜在20,000×g的速度下离心10分钟，然后将小丸储存于液氮中。
在Potter-Elvejhem匀浆器中使豚鼠小脑进行匀化，在1000×g的速度下差异离心10分钟，并在20,000×g的速度下对上清液重复离心10分钟后得到膜。结合分析关于ETA和ETB受体结合分析，是将膜悬浮于培养缓冲液(50mMTris-HCl，5mM MnCl2，40μg/ml，且pH＝7.4；杆态菌以及0.2％BSA)中，上述膜的浓度为每个分析混合物中含有50μg蛋白质，并于25℃下，在有或无受试物质存在下，与25pM[125I]-ET1(ETA受体分析)或25pM[125I]-RZ3(ETB受体分析)一起进行培养。采用10-7MET1进行非特异结合测定。30分钟后，在Skatron细胞收集器(Skatron，Lier，Norway)上，经GF/B玻璃纤维过滤器分离游离和结合的放射配体(Whatman，England)，并且用冰冷的Tris-HCl缓冲液(pH＝7.4，带有0.2％BSA)洗涤滤器。采用Packard 2200 CA液体闪烁计数器对收集在滤器上的放射活性物质进行定量。
表A中的Ki值是通过使用LIGAND程序，通过非线性回归分析测定得到的。
表A中用实验中测定得到的Ki值[mol/l]给出了式I化合物的作用。表A Ki值[mol/l]<
>寻找内皮素受体(亚型A)拮抗剂的功能性体外分析系统此分析系统是一个用于内皮素受体的功能性并以细胞分析为基础的系统。当某些细胞被内皮素1(ET1)刺激时，这些细胞的细胞内钙浓度也显示有所升高。用钙敏感染料可以对完整细胞内的上述钙增加进行测定。
按照下列方法，将荧光染料Fura 2-an装载到从大鼠中分离出来的1-成纤维细胞(其中的A亚型内源性内皮素受体已经被检测出来)上受胰蛋白酶作用后，将细胞悬浮于缓冲液A中(120mM NaCl，5mM KCl，1.5mM MgCl2，1mM CaCl2，25mMHEPES，10mM葡萄糖，pH＝7.4)至密度为2×106/ml，然后在37℃黑暗处，与Fura 2-am(2μm)，Pluronics F-127(0.04％)以及DMSO(0.2％)一起培养30分钟。用缓冲液A洗涤细胞两次，并进行再悬浮，浓度为2×106/ml。
30℃下，采用Ex/Em380/510，连续记录来自2×105个细胞/ml的荧光信号。向细胞中加入受试化合物，培养3分钟后，加入ET1，测定荧光中的最大变化。将之前未加入受试化合物的细胞对ET1的反应做为对照，并将其值设定为100％。
表B中以实验中测得的IC50值[mol/l]的形式，给出了一些式I化合物的作用。表B
体内ET拮抗剂的实验用异戊巴比妥对体重为250-300G的雄性SD大鼠进行麻醉，人工换气，切断迷走神经并刺毁脑脊髓。插入颈总动脉和颈静脉导管。
在对照动物中，静脉给予1μg/kgET1导致血压的明显升高，其可持续较长的时间。
在给予ET1 5分钟之前，实验动物接受静脉注射受试化合物(1mg/kg)。为了测定ET-拮抗剂的性质，将实验动物的血压升高情况与对照动物进行比较。内皮素-1-诱导的小鼠突然死亡本实验的目的是通过用内皮素受体拮抗剂进行预处理来抑制小鼠体内由内皮素引起的突然心脏死亡，上述突然心脏死亡可能是由于冠状血管狭窄引起的。按照5ml/kg体重的体积，静脉注射10nmol/kg内皮素，在几分钟内即可以引起动物死亡。
在每一种情况下，对动物小组进行内皮素致死剂量的检查。如果通过静脉给予受试化合物，在参考组中致死剂量的内皮素-1的注射通常在其后5分钟进行。如果采用其它给药方式，则上述时间可以延长，合适的可达几小时。
记录存活率，测定可以保护50％动物(ED50)在内皮素引起的心脏死亡中可存活24h或更长时间的有效剂量。内皮素受体拮抗剂的血管功能性实验在最初的2g张力和1小时的松弛后，将兔子主动脉的片段置于37℃且pH＝7.3-7.4的Krebs-Henseleit溶液中，首先先用K+诱导收缩。洗涤后，建立内皮素剂量-反应关系，直至最大剂量。
在开始进行内皮素剂量-反应关系绘图之前15分钟，给予同一血管其它的强内皮素受体拮抗剂。将内皮素的作用校正为K+诱导的收缩的％。有效的内皮素拮抗剂导致了内皮素剂量-反应曲线的右移。式Ia化合物的合成实施例12-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯将5g(19.6mmol)的3，3-二苯基-2，3-环氧丙酸甲酯溶于50ml无水甲醇中，0℃下，加入0.1ml的三氟化硼醚性溶液。混合物于0℃下搅拌2小时，再于室温下搅拌12小时。蒸除溶液，残余物用乙酸乙酯提取，碳酸氢钠溶液和水洗涤，硫酸镁干燥。蒸馏除去溶剂后，得到5.5g(88％)浅黄色油状物。实施例22-羟基-3-苯氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯将5g(19.6mmol)的3，3-二苯基-2，3-环氧丙酸甲酯和5.6g(60mmol)苯酚一起于100℃下加热6小时。高真空下蒸除过量的苯酚，在硅胶上通过色谱对残余物进行纯化，以己烷/乙酸乙酯的混合物作洗脱液，得到4.9g(77％)浅黄色油状物。实施例32-(4，6-二甲氧基-嘧啶-2-基氧)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯将2.86g(10mmol)的2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯溶于40ml二甲基甲酰胺中，加入0.3g(12mmol)氢化钠。混合物搅拌1小时，然后加入2.2g(10mmol)4，6-二甲氧基-2-甲基磺酰基嘧啶。室温搅拌24小时后，用10ml水小心进行水解，用乙酸调节pH至5，高真空下蒸除溶剂。残余物用100ml乙酸乙酯提取，水洗涤，硫酸镁干燥，蒸除溶剂。将残余物与10ml乙醚混合，抽滤生成的沉淀。干燥后，得到3.48g(82％)白色粉末。实施例42-(4，6-二甲氧基-嘧啶-2-基氧)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸将2.12g(5mmol)2-(4，6-二甲氧基-嘧啶-2-基氧)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯溶于50ml二噁烷中，加入10ml 1N的KOH溶液。混合物在100℃下搅拌3小时。溶液用300ml水稀释，乙酸乙酯提取除去未反应的酯。水相用稀盐酸调节pH至1-2，乙酸乙酯提取。硫酸镁干燥后蒸除溶剂，残余物与酯/己烷混合物混合，抽滤生成的沉淀。干燥后，得到1.85g(90％)白色粉末。熔点167℃。实施例52-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸钠将1.68g(4mmol)2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸溶于4ml 1N NaOH+100ml水中，溶液冷冻干燥，定量地得到所用羧酸的钠盐。
将10g(34.9mmol)2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯溶于50ml甲醇和冰醋酸中，加入1ml RuO(OH)2的二烷溶液。于100℃，100bar的高压釜中，用氢气使之进行氢化30小时。滤除催化剂，浓缩混合物，与乙醚混合，NaCl溶液洗涤，有机相干燥并浓缩，得到10.1g 3，3-二环己基-2-羟基-3-甲氧基丙酸甲酯，其为油状物。实施例72-(4，6-二甲氧基-嘧啶-2-基硫)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯将7.16g(25mmol)2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯溶于50ml二氯甲烷中，加入3g(30mmol)三乙胺， 于搅拌下滴加3.2g(28mmol)甲磺酰氯，混合物于室温搅拌2小时后，水洗，硫酸镁干燥，减压下浓缩。残余物用DMF提取。0℃下，向悬浮液中滴加12.9g(75mmol)4，6-二甲氧基-嘧啶-2-硫醇和8.4g(100mmol)碳酸氢钠的100ml DMF溶液，室温搅拌2小时后，再于60℃下搅拌2小时。将混合物倾入1L冰水中，抽滤生成的沉淀。干燥后，得到3.19g(29％)白色粉末。实施例82-羟基-3，3-二苯基丁酸甲酯将1.5g(5.9mmol)3，3-二苯基-2，3-环氧丙酸甲酯溶于10ml无水乙醚中，将其滴加到铜酸盐溶液中(其可从溶于10ml无水乙醚中的635mg(7mmol)氰化铜(I)以及8.14ml(13mmol)1.6正甲基锂溶液来制备，并冷却至-78℃)。溶液于-78℃下搅拌1小时后，升至室温，用100ml乙醚和100ml水稀释，醚层用稀柠檬酸和碳酸氢钠溶液洗涤，硫酸镁干燥。在硅胶上对粗品进行色谱纯化，以己烷/乙酸乙酯的混合物作洗脱液，得到250mg(16％)浅黄色油状物。实施例92-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸室温下，将91.11g(0.5mol)二苯甲酮和45.92g(0.85mol)甲醇钠悬浮于150ml甲基叔丁基醚(MTB)中。冷却至-10℃，向其中加入92.24g(0.85mmol)氯代乙酸甲酯，加入方式以保持内部温度为40℃，而其外部继续在-10℃的浴下进行冷却为宜。混合物在没有冷却的自生温度下搅拌1小时。在加入250ml水并大致搅拌后，分除水相。MTB相用250mL稀氯化钠溶液洗涤。待溶剂换成甲醇后(250ml)，室温下，向其中加入1g对甲苯磺酸的10ml甲醇溶液。混合物于自生温度下搅拌1小时，然后加热至回流。蒸除甲醇后，向其中滴加400g 10％强氢氧化钠溶液，最后加入60ml水。蒸除甲醇，直至底部的温度达到97℃。冷却至55℃后，加入190ml MTB，混合物用约77mL的浓HCl酸化至pH2。冷却至室温后，分除水相，有机相通过蒸除60mLMTB进行浓缩。加入500mL庚烷对产品进行重结晶，慢慢冷却至室温。抽滤滤集粗重结晶的固体，用庚烷洗涤，40℃下，在真空烤箱中干燥至恒重。产量108.9g(80％)，HPLC＞99.5％面积。实施例10S-2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸(用L-脯氨酸甲酯进行外消旋拆分)室温下，将148.8g 30％浓甲醇钠甲醇溶液(0.826mol)滴加到240g57％的L-脯氨酸甲酯盐酸盐的浓甲醇溶液中(0.826mol)，加入2.4LMTB和225g(0.826mol)2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸。在蒸除2680moL MTB/甲醇混合物后(同时滴加2.4L MTB)，混合物慢慢冷却至室温，抽滤滤集结晶(R-2羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸×L-脯氨酸甲酯)，用150ml MTB洗涤固体。蒸馏浓缩滤液，除去1.5L MTB，加入1.0L水。室温下用浓HCl酸化至pH1.2，搅拌后分层，分出水层，用0.4L MTB提取。合并有机层，用0.4L水提取。除去MTB后，将残余物溶于650ml回流的甲苯中，产品通过晶种结晶并慢慢冷却下来。抽滤，甲苯洗涤，真空烤箱中干燥，得到78.7g S-2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸(基于外消旋体，产率为35％)。手性HPLC100％纯度HPLC99.8％实施例11S-2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸(用(S)-1-(4-硝基苯基)乙胺进行外消旋拆分)回流下，将30.5g(0.184mol)(S)-1-(4-硝基苯基)乙胺加到100g(0.368mol)2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸的750ml丙酮和750mlMTB中。在混合物中加入晶种，回流1小时，慢慢冷却至室温，以使之结晶。抽滤收集结晶(S-2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸×(S)-1-(4-硝基苯基)乙胺)，用MTB洗涤。将残余物悬浮于500ml水和350mlMTB中，室温下用浓HCl酸化至pH1.2，搅拌后分层，分出水层，用150ml MTB提取。合并有机层，用100ml水提取。蒸除370ml MTB后，回流下加入390mL正庚烷。混合物慢慢冷却至室温，此过程中有结晶析出。抽滤，正庚烷洗涤，真空烤箱中干燥，得到35.0g S-2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸(基于外消旋体，产率为35％)。手性HPLC100％纯度HPLC99.8％实施例123-甲氧基-2-(4-甲氧基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-2-基氧)-3，3-二苯基丙酸苄酯将24.48g(90mmol)3-甲氧基-3，3-二苯基-2-羟基丙酸溶于150mlDMF中，加入13.7g(99mmol)碳酸钾。室温下将悬浮液搅拌30分钟，在5分钟内，滴加10.7ml(90mmol)的溴苄，混合物搅拌1小时，在此过程中，其温度上升至32℃。
向此混合物中依次加入24.84g(180mmol)碳酸钾和20.52g(90mmol)2-甲磺酰-4-甲氧基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶，混合物在80℃下搅拌2小时。
就后处理而言，用约600mL水稀释烧瓶中的内容物，并用浓HCl小心地进行酸化，加入250mL乙酸乙酯。过滤沉淀得到31.4g纯产品。
从母液中分出乙酸乙酯相，水层再次用乙酸乙酯提取，合并的有机相进行浓缩。对油性残余物进行硅胶层析纯化(环己烷/乙酸乙酯＝9/1)进一步得到10.5g纯产品。总产量41.9g(82.2mmol)＝91％熔点143-147℃MSMH+＝511实施例133-甲氧基-2-(4-甲氧基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-2-基氧)-3，3-二苯基丙酸将40g(78.4mmol)3-甲氧基-2-(4-甲氧基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-2-基氧)-3，3-二苯基丙酸苄酯溶于400ml乙酸乙酯/甲醇(4∶1)中，加入约500mgPd/C(10％)。使混合物暴露于氢气中，直至没有气体再被吸收。滤除催化剂，蒸发溶液，残余物用乙醚进行重结晶。实施例142S-3，3-二苯基环氧乙烷-2-甲酸乙酯将2.57g(10.2mmol)3，3-二苯基丙烯酸乙酯以及464mg 4-苯基吡啶N-氧化物溶于24ml二氯甲烷中，加入432mg(6.5mol％)(S，S)-(+)-N，N’-双(3，5-二叔丁基亚水杨基)1，2-环己烷二氨基锰(III)氯化物。在冰冷却下，加入6.4ml 12％浓次氯酸钠溶液，混合物在冰浴下搅拌30分钟，然后在室温下过夜。用200mL水稀释，乙醚提取，干燥并蒸发。得到2.85g无色油状物。经MPLC(环己烷/乙酸乙酯＝9/1)进行纯化，得到1.12g油状物，其中对映体的比例为8∶1，S构型为主。1H-NMR[CDCl3]，δ＝1.0(t，3H)；3.9(m，3H)；7.3(m，10H)实施例152-甲基硫-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇将46.9g(330mmol)环戊酮-2-甲酸甲酯和53.5g(192mmol)S-甲基异硫脲硫酸盐依次加到29.6g(528mmol)KOH的396mL甲醇溶液中，混合物在室温下搅拌过夜，用1N盐酸酸化，水稀释。滤集析出的结晶并干燥。得到20g结晶。实施例164-氯-2-甲硫基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶将255ml氯化氧磷加到20g(110mmol)实施例15的化合物中，混合物在80℃下搅拌3小时。蒸除氯化氧磷，向残余物中加冰，抽滤滤集析出的结晶，得到18.5g浅棕色固体。实施例174-氯-2-甲硫基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶将18.05g(90mmol)4-氯-2-甲硫基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶溶于200ml甲醇中。于45℃下向其中滴加16.7g甲醇钠(30％甲醇浓溶液)，混合物搅拌2小时，蒸发溶液，乙酸乙酯提取，稀盐酸酸化，蒸发乙酸乙酯提取物。得到15.5g油状残留物。1H-NMR[DMSO]，δ＝2.1(五重峰，3H)；2.5(s，3H)；2.8(dt，4H)；3.9(s，3H)ppm实施例182-甲硫基-4-甲氧基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶将15g(76.2mmol)4-甲氧基-2-甲硫基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶溶于160ml冰乙酸/二氯甲烷(1∶1)中。向其中加入1.3g钨酸钠。35℃下向其中滴加17.5ml(170mmol)30％浓双氧水浓溶液)，混合物用500m水和100ml二氯甲烷稀释，分出有机层，干燥并蒸发，得到14g油状残留物，用乙醚重结晶。1H-NMR[CDCl3]，δ＝2.2(五重峰，2H)；3.0(dt，4H)；3.3(s，3H)；4.1(s，3H)ppm实施例191-苯磺酰基-3-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-4-甲氧基-4，4-二苯基-2-丁酮将0.37g(2.4mmol)苯基甲基砜溶于10ml干燥THF中，然后于-70℃下，向其中滴加2当量.丁基锂(2.94ml；1.6摩尔的己烷溶液)。1小时后，于-70℃下，将1g(2.4mmol)的2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙酸甲酯的5ml THF溶液滴加到其中。混合物在-70℃下搅拌1小时，于-10℃下搅拌1小时，然后升至室温。
就后处理而言，将大约10ml的饱和氯化铵溶液滴加到其中，用乙酸乙酯进行彻底的提取，合并的有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，硫酸钠干燥。干燥并浓缩后得到的残余物经硅胶层析纯化(环己烷/乙酸乙酯，15％-30％)，然后在RP硅胶上进行MPLC(乙腈/水+TFA)。得到0.3g白色无定型粉末。实施例203，3-二苯基环氧丙烷-2-腈将3.1g(54.9mmol)甲醇钠悬浮于20ml干燥THF中，然后于-10℃下，将5g(27.4mmol)二苯甲酮和4.2g(54.9mmol)氯代乙腈滴加到其中。
反应混合物在-10℃下搅拌2小时。将其倾入水中，用乙酸乙酯提取几次。合并的有机相经硫酸钠干燥并浓缩，残余物经硅胶层析纯化(正庚烷/乙酸乙酯)产量1.2g(20％)。1H-NMR[CDCl3]，δ＝3.9(s，1H)；7.4-7.5(m，10H)ppm实施例212-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙腈将6.5g(29.4mmol)3，3-二苯基环氧乙烷-2-腈溶于60ml甲醇中，0℃下加入约2mL三氟化硼的醚溶液。混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下过夜。对于后处理而言，用乙醚稀释，饱和氯化钠溶液洗涤，有机层用硫酸钠干燥并浓缩。残余物含有7.3g白色无定型粉末，其可以直接用于随后的反应。1H-NMR[CDCl3]，δ＝2.95(宽峰s，OH)，3.15(s，3H)；5.3(s，1H)，7.3-7.5(m，10H)ppm实施例222-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲氧基-3，3-二苯基丙腈将7.3g(28.8mmol)2-羟基-3-甲氧基-3，3-二苯基丙腈溶于90mlDMF中，加入4g(288mmol)碳酸钾和6.3g(28mmol)2-甲磺酰基-4，6-二甲氧基嘧啶。混合物于室温搅拌约12小时后，将其倾入水中，乙酸乙酯提取。合并的有机层再次用水洗涤，干燥并浓缩。用此种方法得到的残余物经硅胶层析纯化(正庚烷/乙酸乙酯)。产量6.9g白色无定型粉末。FAB-MS392(M+H+)1ZHZ-NMR[CDCl3]，δ＝3.3(s，3H)；4.95(s，6H)；5.85(s，1H)；6.3(s，1H)，7.3-7.5(m，10H)ppm实施例235-[1-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-2-甲氧基-2，2-二苯基-乙基]-1H-四唑将0.5g(1.3mmol)乙腈溶于10ml甲苯中，依次加入85mg(1.3mmol)NaN3和460mg(1.4mmol)Bu3SnCl。混合物回流约40小时，冷却，乙酸乙酯提取，依次用10％KF火溶液和NaCl溶液洗涤。硫酸镁干燥并浓缩，得到1.0g黄色油状物，其用硅胶层析进行纯化(正庚烷/乙酸乙酯)。
对组分进行浓缩，得到60mg 1H-四唑和110mg 1-甲基四唑，它们均为无定型白色固体。5-[1-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-2-甲氧基-2，2-二苯基-乙基]-1H-四唑电子喷射-MS435(M+H+)1H-NMR[CDCl3]，δ＝3.28(s，3H)；3.85(s，6H)；5.75(s，1H)；7.25-7.40(m，10H)；7.50(s，1H)5-[1-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-2-甲氧基-2，2-二苯基-乙基]-1甲基四唑电子喷射-MS471(M+H+)1H-NMR[CDCl3]，δ＝3.0(s，3H)；3.35(s，3H)；3.80(s，6H)；5.75(s，1H)；7.30-7.40(m，11H)实施例242-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲磺酰基-3，3-二苯基丙酸0℃下，将1.2g(2.9mmol)2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲基硫-3，3-二苯基丙酸引入15ml冰乙酸中，向其中滴加294μl 30％浓双氧水溶液。混合物于室温下搅拌过夜，将其倾入水中，二氯甲烷提取，用硫代硫酸钠溶液和盐水洗涤。干燥后，分离出1g物质，其为白色泡沫状物。实施例252-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲磺酰基-3，3-苯基丙酸室温下，将0.6g(1.45mmol)2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基氧)-3-甲基-亚磺酰基-3，3-二苯基丙酸加入15ml冰乙酸中，向其中滴加294μl30％浓双氧水溶液。混合物于室温下搅拌过夜，再于50℃下加热3小时。将其倾入水中，用硫代硫酸钠溶液和盐水洗涤。干燥后，分离出400mg白色固体。
可用相似的方法来制备表I中所列的化合物。
表1
表1(续)
表1(续)
表1(续)
表1(续)<
表1(续
表1(续)
表1
表1(续)<
表1(续)
表II
表IV
表IV(续)
表IV(续)
表IV(续)
表IV(续)<
>通式VI化合物的合成实施例263-甲氧基-3-(3-甲氧基苯基)-2-羟基丁酸甲酯将19.5g(88mmol)3-(3-甲氧基苯基)-2，3-环氧丁酸甲酯溶于200ml无水甲醇中，0℃下，加入0.1ml的三氟化硼醚溶液。混合物于室温下搅拌12小时。蒸除溶液，残余物用乙酸乙酯提取，碳酸氢钠溶液和水洗涤，硫酸钠干燥。蒸馏除去溶剂后，得到21.1g(88％)浅黄色残余物。产率94％(1∶1非对映体混合物)实施例273-苄氧基-3-苯基-2-羟基丁酸甲酯将9.6g(50mmol)3-苯基-2，3-环氧丁酸甲酯溶于150ml苄醇中，加入0.5ml浓硫酸。混合物于50℃下搅拌6小时，使之冷却至室温。用碳酸氢钠溶液中和后，高真空下蒸除过量的苄醇，用硅胶对残余物进行闪式层析纯化(正己烷/乙酸乙酯＝9/1洗脱)。蒸除溶剂后，留下6.5g无色油状物。产率43％(3∶2非对映体混合物)
可用相似的方法来制备表VI中所有提到的化合物。
表V式VI化合物的中间体(R1＝OCH3)
*非对映体比例通式I化合物的合成实施例283-苄氧基-3-苯基-2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧丁酸甲酯将3g(10mmol)3-苄氧基-3-苯基-2-羟基丁酸甲酯(化合物1.1)溶于40ml DMF中，加入0.3g(12mmol)氢化钠，混合物搅拌1小时后，加入2.2g(10mmol)4，6-二甲氧基-2-甲基磺酰嘧啶。混合物于室温下搅拌24小时，用10mL水小心水解，用乙酸调节pH至5。高真空下蒸除溶剂，残余物用100mL乙酸乙酯溶解，水洗，硫酸钠干燥，蒸除溶剂。向残余物中加入10mol甲基叔丁基醚，抽滤生成的沉淀。干燥后，得到2.4g白色粉末。产率55％(1∶1非对映体混合物)MP115-117℃实施例293-苄氧基-3-苯基-2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧丁酸将1.4g(3mmol)3-苄氧基-3-苯基-2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧丁酸甲酯(实施例3(现为37)溶于20ml MeOH和20mLTHF中，加入3.7g 10％NaOH溶液，混合物在60℃下搅拌6小时后，再于室温下搅拌12小时。减压蒸除溶剂，残余物用100mL水溶解，用乙酸乙酯提取未反应的酯。水相用稀盐酸调节pH至1-2，用乙酸乙酯提取。硫酸镁干燥，蒸除溶剂，向残余物中加入少量丙酮，抽滤生成的沉淀，干燥后得到1.2g白色粉末。产率88％(3∶2非对映体混合物)MP165℃实施例303-苯氧基-3-苯基-2-[(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)硫]丁酸甲酯将11g(25mmol)3-苯氧基-3-苯基-2-羟基丁酸甲酯(化合物1.1)溶于50ml二氯甲烷中，加入3g(30mmol)三乙胺，于搅拌下滴加3.2g(28mmol)甲磺酰氯，混合物于室温搅拌2小时后，水洗，硫酸镁干燥，减压下浓缩。残余物用DMF提取。0℃下，向悬浮液中滴加12.9g(75mmol)4，6-二甲氧基-嘧啶-2-硫醇和8.4g(100mmol)碳酸氢钠的100ml DMF溶液，室温搅拌2小时后，再于60℃下搅拌2小时。将混合物倾入1L冰水中，抽滤生成的沉淀。干燥后，得到3.2g白色粉末。产率29％(1∶1非对映体混合物)可用与上述相似的方法来制备表VI中说明的化合物。
表VI(续)
表VI(续
表VI(续)<
表VI(续)
表VI(续)
通式VI化合物的合成实施例31将28.2g(0.3mol)的苯酚和19.2g(0.1mol)3-苯基-2，3-环氧丁酸甲酯一起于100℃下加热6小时。高真空下蒸除过量的苯酚，用硅胶对残余物进行色谱纯化，以己烷/乙酸乙酯的混合物作洗脱液，得到17.9g(77％)浅黄色油状物。产率62.5％实施例323-(4-溴苯基)氧-3-苯基-2-羟基丁酸甲酯将51.9g(0.3mol)的4-溴苯酚和19.2g(0.1mol)3-苯基-2，3-环氧丁酸甲酯一起于100℃下加热8小时，室温下加热12小时。蒸除过量的苯酚后，用硅胶对残余物进行闪式色谱纯化(硅胶，己烷/乙酸乙酯＝9/1)，得到7.2g(77％)白色固体。产率20％MP.133-135℃可用相似的方法来制备表VII中给出的化合物。表VII式VI化合物的中间体(R1＝OCH3)
通式I化合物的合成实施例333-苯氧基-3-苯基-2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧丁酸甲酯将4.4g(15.4mmol)3-苯氧基-3-苯基-2-羟基丁酸甲酯(化合物1.1)溶于40ml DMF中，加入0.46g(18.4mmol)氢化钠，混合物搅拌1小时后，加入3.4g(15.4mmol)4，6-二甲氧基-2-甲基磺酰嘧啶。混合物于室温下搅拌24小时，用10mL水小心水解，用乙酸调节pH至5。高真空下蒸除溶剂，残余物用100mL乙酸乙酯溶解，水洗，硫酸钠干燥，蒸除溶剂。向残余物中加入甲基叔丁基醚，抽滤生成的沉淀。干燥后，得到1.6g白色粉末。产率24.5％MP143-145℃实施例343-苯氧基-3-苯基-2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧丁酸将1.3g 3-苯氧基-3-苯基-2-(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)氧丁酸甲酯(由实施例6变成42)溶于20ml MeOH和40mLTHF中，加入3.7g10％NaOH溶液，混合物在60℃下搅拌12小时后，减压蒸除溶剂，残余物用100mL水溶解，用乙酸乙酯提取未反应的酯。水相用稀盐酸调节pH至1-2，用乙酸乙酯提取。硫酸镁干燥，蒸除溶剂，得到1.0g白色粉末。产率79.7％MP50-55℃实施例353-苯氧基-3-苯基-2-[(4，6-二甲氧基-2-嘧啶基)硫]丁酸甲酯将7.2g(25mmol)3-苯氧基-3-苯基-2-羟基丁酸甲酯(化合物1.1)溶于50ml二氯甲烷中，加入3g(30mmol)三乙胺，于搅拌下滴加3.2g(28mmol)甲磺酰氯，混合物于室温搅拌2小时后，水洗，硫酸镁干燥，减压下浓缩。残余物用DMF提取。0℃下，向悬浮液中滴加12.9g(75mmol)4，6-二甲氧基-嘧啶-2-硫醇和8.4g(100mmol)碳酸氢钠的100ml DMF溶液，室温搅拌2小时后，再于60℃下搅拌2小时。将混合物倾入1L冰水中，抽滤生成的沉淀。干燥后，得到4.2g白色粉末。产率38％可用与上述相似的方法来制备表VIII中给出的化合物。
表VIII
表VIII(续)
表VIII(续)
实施例36用上述的结合分析方法给出了下列化合物的受体结合数据。
结果列于表III中表III受体结合数据(Ki值)
本领域普通技术人员将认识到或仅仅使用常规的实验即可以确定，有许多与在此所述的发明相当的方法及内容。这些相当的方法及内容将被包括在下列权利要求中。
权利要求
1.治疗需要治疗的人类体内癌症的方法，其包括给予人类足够剂量的式Ia化合物以抑制固体肿瘤的生长，上述癌症中存在内皮素失调，其中的式Ia为
其中R为甲酰基，四唑基，氰基，COOH基团或可以被水解至COOH的基团，且其它基团具有下列含义R2为氢，羟基，NH2，NH(C1-C4-烷基)，N(C1-C4-烷基)2，卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基或C1-C4-烷硫基；X为氮原子或CR14，其中R14为氢或C1-C5-烷基，或CR14与CR3一起形成5-或6-元亚烷基或亚链烯基环，其可以被一或两个C1-4-烷基取代，并且其中在每一种情况下，亚甲基基团可以被氧，硫，-NH或-N C1-4-烷基取代；R3为氢，羟基，NH2，NH(C1-C4-烷基)，N(C1-C4-烷基)2，卤素，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，-NH-O-C1-C4-烷基，C1-C4-烷硫基，或如上所述，CR3与CR14相连形成5-或6-元环；R4和R5可以相同或不同且为苯基或萘基，其可被下列一或多个基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，氨基，C1-C4-烷氨基或C1-C4-二烷基氨基；或苯基或萘基，其不通过直键在邻位与亚甲基，亚乙基或亚乙烯基基团，氧或硫原子或SO2-，NH-或N-烷基基团，或C3-C7-环烷基相连；或R6为氢，C1-C8-烷基，C3-C6-链烯基，C3-C6-链炔基，C3-C8-环烷基，这些基团之中的每一个可被下列基团取代一或多次卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷氧基，C3-C6-链烯氧基，C3-C6-链炔氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷基羰基，C1-C4-烷氧羰基，C3-C8-烷基羰基烷基，C1-C4-烷基氨基，二-C1-C4-烷基氨基，苯基或苯氧基，其可被卤素，硝基，氰基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，或C1-C4-烷硫基一或多次取代，例如1-3次；苯基或萘基，其可被下列一或多个基团取代卤素，硝基，氰基，羟基，氨基，C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，苯氧基，C1-C4-烷硫基，C1-C4-烷氨基或C1-C4-二烷基氨基，亚甲基二氧基或亚乙基二氧基；5或6元芳香杂环，其可含有一至三个氮原子和/或一个硫原子或氧原子，并且其可以携带一至四个卤原子和/或一或两个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基，C1-C4-烷硫基，苯基，苯氧基或苯基羰基，其中的苯基基团反过来可以携带一至五个卤原子和/或一至三个下列基团C1-C4-烷基，C1-C4-卤代烷基，C1-C4-烷氧基，C1-C4-卤代烷氧基和/或C1-C4-烷硫基；条件是当Z不为单键时仅R6可以为氢；Y为硫，氧或单键；Z为硫，氧，-SO-，-SO2或单键。
2.权利要求1中的方法，其中式Ia化合物中的R为COOH基团，R2为-OMe，R3为-OMe，R4为苯基，R5为苯基，R6为甲基，X为CR14，R14为H，Y为氧，且Z为氧。
3.权利要求1中的方法，其中式Ia化合物中的R为COOH基团，R2为甲基，R3为甲基，R4为苯基，R5为苯基，R6为甲基，X为CR14，R14为H，Y为氧，且Z为氧。
4.权利要求1中的方法，其中式Ia化合物中的R为COOH基团，R2为甲基，R3为甲基，R4为苯基，R5为苯基，R6为甲基，X为CR14，R14为H，Y为氧，且Z为一单键。
5.权利要求1中的方法，其中的癌症为前列腺癌。
6.权利要求2中的方法，其中的癌症为前列腺癌。
7.权利要求3中的方法，其中的癌症为前列腺癌。
8.权利要求4中的方法，其中的癌症为前列腺癌。
9.权利要求1-4中任意一个所述的式Ia化合物用于给药于人类，以抑制存在内皮素失调的固体肿瘤生长。
10.制备用于抑制人类体内存在内皮素失调的固体肿瘤生长的药物的方法，该方法的特征在于使用权利要求1-4中任意一个所述的式Ia化合物作为所述药物的必需成分。
11.权利要求9中所述的用途或权利要求10中所述的方法，其中所述的固体肿瘤包括前列腺，肺，肝，乳腺，脑，胃，结肠，子宫内膜，睾丸，甲状腺，粘膜，膀胱，肾，胰腺和脑(脊)膜肿瘤。
12.权利要求11中所述的用途或方法，其中所述的固体肿瘤为前列腺肿瘤。
全文摘要
本发明提供了治疗个体癌症患者的方法,其中的癌症是一种内皮素失调的肿瘤(例如前列腺肿瘤,肺肿瘤,乳腺肿瘤,脑肿瘤,胃肿瘤,结肠肿瘤,子宫内膜肿瘤,睾丸,甲状腺肿瘤,粘液肿瘤,膀胱肿瘤,肾肿瘤,胰腺肿瘤以及脑脊膜肿瘤)。该方法包括给予个体患者有效剂量这里所述的式(Ⅰ)和式(Ⅰa)化合物。
文档编号C07D409/12GK1251991SQ98803904
公开日2000年5月3日 申请日期1998年3月9日 优先权日1997年3月14日
发明者C·A·罗默达尔 申请人:巴斯福股份公司