一种亚临界水提取玛咖多糖的方法
【专利摘要】本发明一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，相比于传统热水浸提法提取得率为8.2%，本发明一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，玛咖多糖得率最高可达15.5%。本发明一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，采用亚临界水提取玛咖多糖，提取得率明显高于传统热水浸提法，提取时间短，效率高，绿色无污染，且设备要求低。同时，抗氧化活性实验表明，在该条件下亚临界水提取物抗氧化活性高于传统热水浸提提取物的抗氧化活性。
【专利说明】一种亚临界水提取玛咖多糖的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物活性成分提取领域，涉及一种亚临界水提取玛咖多糖的方法。
【背景技术】
[0002]玛咖(Lepidium meyenii Walp.)为十字花科独行菜属植物,原产于海拔3500~4500米的安第斯山脉，主要分布在秘鲁，有“秘鲁人参”之称，地下部分可食，在南美已有5800多年的食用历史。我国于2003年引入该种，在云南和新疆地区已有种植，2011年批准玛咖作为新资源食品。玛咖是一种药食两用植物，富含蛋白质、糖类、氨基酸、常量和微量元素等多种营养成分，脂肪含量较低(玛咖营养成分分析[J].江苏农业科学，2013，41 (4): 285-286)，传统用于治疗人畜性功能障碍和不育。现代药理学研究表明，玛咖具有提高性能力和生育能力、调节内分泌、抗疲劳、抗肿瘤、抗衰老等药理作用(南美高原植物玛咖的研究进展[J].中医临床研究，2011，3(19): 116-117)。玛咖含有氨基酸、生物碱、多糖、留醇、酚类等多种活性成分，其中玛咖生物碱和多糖为主要的活性成分(药食两用植物玛咖(Lepidium meyenii)的功效物质研究[D].华中科技大学，2006)。
[0003]亚临界水又称超加热水、高压热水或热液态水，是指在一定的压力下，将水加热到IOO0C以上，临界温度374°C以下的高温，水体仍然保持在液体状态。亚临界状态下流体微观结构的氢键、离子水合、离子缔合、簇状结构等发生了变化，改变温度和压力，可以改变水的极性、表面张力和粘度，使得亚临界水对活性成分的溶解能力很大的提高，从而提高其提取效率。亚临界水提取技术是利用亚临界水作为提取溶剂，该技术具有提取时间短、萃取率高、环境友好等技术优势，是一种易于实现工业化生产的绿色提取技术。
[0004]目前玛咖多糖的提取方法主要是采用传统热水浸提法、超声辅助提取、微波辅助提取和超高压提取等。陈燕青等采用传统热水浸提法从玛咖干根粉中提取玛咖多糖，正交实验优化得到水提玛咖多糖在`100°C、120min、料液比1:40，玛咖多糖提取率(提取液中多糖质量/玛咖干粉质量)为12.32%(玛咖多糖提取技术研究[J].食品科技，2008(9):156-158)。郝利民等采用传统热水浸提法在100°C、120min、料液比1:20,?咖多糖提取率(提取液中多糖质量/玛咖干粉质量)为15.9% (云南种植玛咖中多糖提取工艺的优化研究[J].食品工业科技，2013 (03):262-268)。王金全等采用超声辅助和微波辅助提取玛咖多糖，得到玛咖多糖在30min，50°C，功率160W，料液比1: 20超声处理后，提取液除淀粉，离心、定容后，按苯酚硫酸法测多糖含量，提取率为74.4% ;在6min，50°C，功率340W，料液比1: 70微波处理后，提取液除淀粉，离心、定容后，按苯酚硫酸法测定多糖含量，提取率为68.8%，但其提取率文中未见准确定义。发明专利(CN102898534A)公开了一种采用200~500MPa超高压条件提取和吸水树脂浓缩结合提取精制玛咖多糖的方法，但此法对设备的耐压要求很高。综上，现有的玛咖多糖提取方法存在着提取时间长，耗损大，设备要求高的缺点。有关采用亚临界水提取玛咖多糖的方法至今未见国内外文献报道，也未见相应专利公开。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是为解决上述【背景技术】中存在的不足，提供一种玛咖多糖提取的新方法和工艺。本发明的技术方案概述如下:
[0006]一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，制作方法步骤如下:
[0007]1、将玛咖干根粉碎，过200目筛，得马咖粉末；
[0008]2、将制得的粉末装入亚临界萃取釜，粉末与亚临界水的料液比为1:10~l:30g/ml，提取压力为3~lOMPa，提取温度为120~200°C，提取时间为30~60min，得提取液；
[0009]3、将提取液过滤，滤液在减压浓缩后体积为原来的33%，使用三氯乙酸溶液调节PH值至I，再将其冷藏，冷藏时间:4小时，冷藏温度:4°C，得冷藏液；
[0010]4、将冷藏液离心，分离上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量达到80%，将溶液冷藏，冷藏时间:12小时，冷藏温度:4°C ;过滤，得沉淀物；
[0011]5、在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，将溶解液冷冻干燥，冷冻时间:48小时，冷冻温度:-50°C，冷冻后即得玛咖多糖。
[0012]上述一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，优选地，所述粉末与亚临界水的料液比为1:20g/ml。
[0013]上述一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，优选地，所述亚临界萃取釜提取压力为5MPa，提取温度为15 0°C，提取时间为40min。
[0014]上述一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，所述三氯乙酸溶液浓度为15%。
[0015]上述一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，所述乙醇为无水乙醇。
[0016]相比于现有技术，本发明优点如下:相比于传统热水浸提法提取得率为8.2%，本发明一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，玛咖多糖得率最高可达15.5%。本发明一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，采用亚临界水提取玛咖多糖，提取得率明显高于传统热水浸提法，提取时间短，效率高，绿色无污染，且设备要求低。同时，抗氧化活性实验表明，在该条件下亚临界水提取物抗氧化活性高于传统热水浸提提取物的抗氧化活性。
【专利附图】
【附图说明】
图1为玛咖多糖对DPPH自由基的清除能力对比图。
其中，SWMP:亚临界水提玛咖多糖；WMP:水提玛咖多糖；Vc:抗坏血酸
【具体实施方式】
[0017]为了更清楚地说明本
【发明内容】
，用具体实施例说明如下，具体实施例不限定本
【发明内容】
范围。
[0018]实施例1:
[0019]一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，制作方法步骤如下:将玛咖干根粉碎，过200目筛，得马咖粉末；将制得的粉末装入亚临界萃取釜，粉末与亚临界水的料液比为l:10g/ml，提取压力为3MPa，提取温度为120°C，提取时间为30min，得提取液；将提取液过滤，滤液在减压浓缩后体积为原来的33%，使用浓度为15%的三氯乙酸溶液调节PH值至1，再将其冷藏，冷藏时间:4小时，冷藏温度:4°C，得冷藏液；将冷藏液离心，分离上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量达到80%，将溶液冷藏，冷藏时间:12小时，冷藏温度:4°C ;过滤，得沉淀物；在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，将溶解液冷冻干燥，冷冻时间:48小时，冷冻温度:-50°C，冷冻后即得玛咖多糖。
[0020]技术效果:所提取的玛咖多糖提取得率为12.7%。
[0021]实施例2:
[0022]一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，制作方法步骤如下:将玛咖干根粉碎，过200目筛，得马咖粉末；将制得的粉末装入亚临界萃取釜，粉末与亚临界水的料液比为l:20g/ml，提取压力为5MPa，提取温度为150°C，提取时间为40min，得提取液；将提取液过滤，滤液在减压浓缩后体积为原来的33%，使用浓度为15%的三氯乙酸溶液调节PH值至1，再将其冷藏，冷藏时间:4小时，冷藏温度:4°C，得冷藏液；将冷藏液离心，分离上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量达到80%，将溶液冷藏，冷藏时间:12小时，冷藏温度:40C ;过滤，得沉淀物；在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，将溶解液冷冻干燥，冷冻时间:48小时，冷冻温度:-50°C，冷冻后即得玛咖多糖。
[0023]技术效果:所提取的玛咖多糖提取得率为15.4%。
[0024]实施例3:
[0025]一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其中，制作方法步骤如下:将玛咖干根粉碎，过200目筛，得马咖粉末；将制得的粉末装入亚临界萃取釜，粉末与亚临界水的料液比为l:30g/ml，提取压力为lOMPa，提取温度为200°C，提取时间为60min，得提取液；将提取液过滤，滤液在减压浓缩后体积为原来的33%，使用浓度为15%的三氯乙酸溶液调节PH值至I，再将其冷藏，冷藏时间:4小时，冷藏温度:4°C，得冷藏液；将冷藏液离心，分离上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量达到80%，将溶液冷藏，冷藏时间:12小时，冷藏温度:40C ;过滤，得沉淀物；在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，将溶解液冷冻干燥，冷冻时间:48小时，冷冻温度:-50°C，冷冻后即得玛咖多糖。
`[0026]技术效果:所提取的玛咖多糖提取得率为13.2%。
[0027]亚临界水提玛咖多糖抗氧化活性测定
[0028]本发明亚临界水提玛咖多糖清除DPPH自由基作用:取实施例2中的玛咖多糖配成 100、200、400、600、800、1000ug/ml 的样品溶液，再准确称取 7.9mg DPPH.(I, 1- 二苯基苦基苯肼)标准品，用无水乙醇溶液溶解并定容至IOOmL棕色容量瓶中，配成0.2mmol/L的DPPH.乙醇溶液，量取2mL样品溶液于试管中，加入2mL的DPPH.乙醇溶液，混合均匀后，置于暗处反应30min，然后于517nm处测定其吸光度(Ai),以试样溶剂代替样品溶液测定空白吸光度(Atl),以无水乙醇代替DPPH.溶液测定吸光度(Aj),根据公式计算清除率，实施例2中的玛咖多糖和Vc (抗坏血酸)按照上述方法测定清除率，比较三种样品的清除率，结果见附图1，由图可知，以Vc (抗坏血酸)为阳性对照，亚临界水提玛咖多糖对DPPH自由基有很好的清除能力，当提取物浓度为800ug/mL时，对DPPH自由基的清除力可达85.1%，亚临界水提玛咖多糖对DPPH自由基的清除能力明显高于传统水提取物，其抗氧化活性优于传统水提取物。
[0029]
(A-A)
清除率(%)= 1-^——】丄X 100
【权利要求】
1.一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其特征在于，制作方法步骤如下: 将玛咖干根粉碎，过200目筛，得马咖粉末； 将制得的粉末装入亚临界萃取釜，粉末与亚临界水的料液比为1: l(Tl: 30g/ml，提取压力为3~10 MPa，提取温度为12(T200°C，提取时间为30~60 min，得提取液； 将提取液过滤，滤液在减压浓缩后体积为原来的33%，使用三氯乙酸溶液调节PH值至I，再将其冷藏，冷藏时间:4小时，冷藏温度:4°C，得冷藏液； 将冷藏液离心，分离上清液，在上清液中加入乙醇使溶液中乙醇含量达到80%，将溶液冷藏,冷藏时间:12小时，冷藏温度:4°C ;过滤，得沉淀物； 在沉淀物中加水直至沉淀物溶解，得溶解液，将溶解液冷冻干燥，冷冻时间:48小时，冷冻温度:-50°C，冷冻后即得玛咖多糖。
2.根据权利要求1所述的一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其特征在于，优选地，所述粉末与亚临界水的料液比为1:20g/ml。
3.根据权利要求1所述的一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其特征在于，优选地，所述亚临界萃取釜提取压力为5 MPa，提取温度为150°C，提取时间为40 min。
4.根据权利要求1所述的一种亚临界水提取玛咖多糖的方法，其特征在于，所述三氯乙酸溶液浓度为15%。
【文档编号】C08B37/00GK103819570SQ201310611656
【公开日】2014年5月28日 申请日期:2013年11月27日 优先权日:2013年11月27日
【发明者】王未, 毛日文 申请人:江苏江大源生态生物科技有限公司