本申请要求2014年7月11日提交的第62/023,775号美国临时申请的优先权权益，该申请的公开内容以全文引用的方式并入本文。
2.领域
本文提供用于治疗、预防或控制癌症的化合物。还提供包含所述化合物的药物组合物以及所述化合物和组合物的使用方法。在某些实施方案中，所述方法包括使用本文提供的化合物治疗、预防或控制癌症，包括实体肿瘤和血源性肿瘤。
3.背景
癌症的病理学
癌症的特征主要在于源自给定正常组织的异常细胞数目的增加、这些异常细胞对邻近组织的侵袭或恶性细胞对局部淋巴结及对远端部位的淋巴或血源性扩散(转移)。临床数据和分子生物学研究表明癌症是多步骤过程，其始于较小的肿瘤前变化，这在某些条件下可进展到瘤形成。肿瘤性病变可克隆地发展并形成增强的侵袭、生长、转移和异质性的能力，特别是在其中肿瘤性细胞避开了宿主的免疫监控的条件下。Roitt,I.、Brostoff,J和Kale,D.,Immunology,17.1-17.12(第3版，Mosby,St.Louis,Mo.,1993)。
在医学文献中详细描述有庞大种类的癌症。实例包括肺、结肠、直肠、前列腺、乳腺、脑和肠的癌症。随着总人口老龄化、随着新癌症形成以及随着易感人群(例如，感染AIDS的人或过度暴露于阳光的人)增长，癌症的发病率持续攀升。因此对于可用来治疗癌症患者的新方法及组合物有着巨大的需求。
许多类型的癌症与被称为血管生成的过程的新血管形成相关。已经阐明了涉及肿瘤诱导的血管生成的若干机理。这些机理中最直接的是由肿瘤细胞分泌具有血管生成性质的细胞因子。这些细胞因子的实例包括酸性和碱性成纤维细胞生长因子(a,b-FGF)、血管生成素、血管内皮生长因子(VEGF)和TNF-α。或者，肿瘤细胞可通过产生蛋白酶以及一些细胞因子存储(例如，b-FGF)之处的细胞外基质的随后分解而释放血管生成肽。血管生成也可通过炎症细胞(特别是巨噬细胞)的募集及其随后释放血管生成细胞因子(例如，TNF-α、b-FGF)而被间接诱导。
淋巴瘤是指发生于淋巴系统的癌症。淋巴瘤的特征在于淋巴细胞—B淋巴细胞和T淋巴细胞(即，B细胞和T细胞)的恶性肿瘤。淋巴瘤通常始于淋巴结或包括但不限于胃或肠在内的器官中的淋巴组织的集合。淋巴瘤在一些情况下可能涉及骨髓和血液。淋巴瘤可从身体的一个部位扩散到其它部分。
各种形式的淋巴瘤的治疗描述于例如第7,468,363号美国专利中，该专利全文以引用的方式并入本文。这类淋巴瘤包括但不限于霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮肤B细胞淋巴瘤、活化B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、滤泡中心型淋巴瘤、转化型淋巴瘤、中间分化型的淋巴细胞性淋巴瘤、中间型淋巴细胞性淋巴瘤(ILL)、弥漫性不良分化型淋巴细胞性淋巴瘤(PDL)、中心细胞性淋巴瘤、弥漫性小裂细胞淋巴瘤(DSCCL)、外周T细胞淋巴瘤(PTCL)、皮肤T细胞淋巴瘤和套区淋巴瘤及低度滤泡性淋巴瘤。
非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)是美国男性和女性中的第五大最常见的癌症，2007年估计有63,190例新病例且18,660例死亡。Jemal A等人，CA Cancer J Clin 2007；57(1)：43-66。形成NHL的可能性随着年龄而增加，并且在过去的十年中老年人的NHL发病率一直在稳步上升，引起了对美国人口老龄化趋势的关注。同上。Clarke C A等人，Cancer 2002；94(7)：2015-2023。
弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)占非霍奇金氏淋巴瘤的大约三分之一。虽然一些DLBCL患者用传统的化学疗法得到治愈，但其余的患者还是死于该疾病。抗癌药物可能是通过在成熟的T和B细胞中直接诱导细胞凋亡而使淋巴细胞快速和持续消耗。参见K.Stahnke等人，Blood 2001，98：3066-3073。已显示绝对淋巴细胞计数(ALC)是滤泡性非霍奇金氏淋巴瘤中的预后因子，并且近期的结果已表明诊断时的ALC是弥漫性大B细胞淋巴瘤中的重要预后因子。参见D.Kim等人，Journal of Clinical Oncology，2007年ASCO年会论文集第I部分，第25卷，第18S期(6月20日增刊)，2007：8082。
白血病是指血液形成组织的恶性肿瘤。各种形式的白血病描述于例如第7,393,862号美国专利和2002年5月17日提交的第60/380,842号美国临时专利申请中，这两者全文以引用的方式并入本文。虽然据报道病毒在动物中引起若干形式的白血病，但人类中的白血病的原因在很大程度上还是未知的。The Merck Manual,944-952(第17版，1999年)。向恶性的转化通常是通过两个或更多个步骤在单个细胞中发生，随后是增殖和克隆扩增。在一些白血病中，已经确认了具有一致的白血病细胞形态和特殊临床特征(例如，慢性髓细胞性白血病中的9和22的易位以及急性前髓细胞性白血病中的15和17的易位)的特异性染色体易位。急性白血病主要是未分化的细胞群，慢性白血病是更成熟的细胞形式。
急性白血病分为成淋巴细胞性(ALL)和非成淋巴细胞性(ANLL)类型。The Merck Manual,946-949(第17版，1999年)。可根据法-美-英(FAB)分类或根据它们的类型及分化程度通过它们的形态学和细胞化学外观对它们进行进一步的细分。使用特异性B和T细胞以及髓系抗原单克隆抗体对分类最有帮助。ALL主要是由实验室查验和骨髓检查确定的儿童期疾病。ANLL也称为急性骨髓性白血病或急性粒细胞性白血病(AML)，发生于所有年龄，并且是成人当中更常见的急性白血病；其是通常与作为致病因子的辐照相关的形式。
慢性白血病被描述为淋巴细胞性(CLL)或髓细胞性(CML)的。The Merck Manual,949-952(第17版，1999年)。CLL的特征在于在血液、骨髓和淋巴器官中出现成熟的淋巴细胞。CLL的标志是持续性绝对淋巴细胞增多症(>5,000/μL)和骨髓中的淋巴细胞增加。大多数CLL患者也具有带B细胞特性的淋巴细胞的克隆扩增。CLL是中年或老年的疾病。在CML中，特性特征是在血液、骨髓、肝脏、脾脏及其它器官中的分化的所有阶段粒细胞占主导地位。在诊断时有症状的患者中，总白血细胞(WBC)计数通常是约200,000/μL，但可达到1,000,000/μL。CML相对容易诊断，因为存在费城染色体。
除了急性和慢性分类之外，也基于引起这种病症的细胞将肿瘤分类成前体的或外周的。参见例如第2008/0051379号美国专利公布，其公开内容以全文引用的方式并入本文。前体肿瘤包括ALL和成淋巴细胞性淋巴瘤，并且在淋巴细胞已分化成T细胞或B细胞之前在其中发生。外周肿瘤是在已分化成T细胞或B细胞的淋巴细胞中发生的肿瘤。这类外周肿瘤包括但不限于B细胞CLL、B细胞前淋巴细胞性白血病、淋巴浆细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、粘膜相关淋巴组织的结外边缘区B细胞淋巴瘤、结边缘区淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、毛细胞白血病、浆细胞瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤。在95％以上的CLL病例中，克隆扩增的是B细胞系。参见Cancer:Principles&Practice of Oncology(第3版)(1989年)(第1843-1847页)。在不到5％的CLL病例中，肿瘤细胞具有T细胞表型。然而，尽管有这些分类，但正常造血作用的病理学损坏是所有白血病的标志。
多发性骨髓瘤(MM)是骨髓中浆细胞的癌症。通常，浆细胞产生抗体，并在免疫功能中发挥关键作用。然而，这些细胞的不受控制的生长导致骨痛和骨折、贫血、感染及其它并发症。多发性骨髓瘤是第二大最常见的血液恶性肿瘤，虽然多发性骨髓瘤的确切原因仍然不明。多发性骨髓瘤引起血液、尿和器官中的高水平蛋白质，包括但不限于M-蛋白及其它免疫球蛋白(抗体)、白蛋白和β-2-微球蛋白。M蛋白是单克隆蛋白的简称，也称为副蛋白，是由骨髓瘤浆细胞产生的特别异常的蛋白质，并且可见于几乎所有多发性骨髓瘤患者的血液或尿中。
包括骨痛在内的骨骼症状是多发性骨髓瘤的临床最显著的症状之一。恶性浆细胞释放破骨细胞刺激因子(包括IL-1、IL-6和TNF)，其导致钙从骨中浸出，引起溶骨性病变；高钙血症是另一种症状。破骨细胞刺激因子也称为细胞因子，其可防止骨髓瘤细胞的细胞凋亡或死亡。百分之五十的患者在诊断时具有可放射学检测的骨髓瘤相关性骨骼病变。多发性骨髓瘤的其它常见临床症状包括多发性神经病、贫血、高粘血症、感染和肾功能不全。
实体肿瘤是组织的异常肿块，其可含有但通常不含有囊肿或液体区域。实体肿瘤可以是良性的(不是癌症)或恶性的(癌症)。不同类型的实体肿瘤以形成它们的细胞的类型命名。实体肿瘤类型的实例包括但不限于恶性黑素瘤、肾上腺癌、乳腺癌、肾细胞癌、胰腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和未知原发性癌。通常对患有各种类型或阶段的实体肿瘤的患者施用的药物包括但不限于塞来昔布、依托泊苷、环磷酰胺、多西紫杉醇、卡培他滨(阿哌沙班)、IFN、他莫西芬、IL-2、GM-CSF或它们的组合。
虽然在初始治疗后达到完全缓解的患者具有良好的治愈机会，但没有反应或复发的那些患者实现治愈或反应持续超过3年的不到10％。参见Cerny T等人，Ann Oncol 2002；13增刊4：211-216。
已知利妥昔单抗消耗正常的宿主B细胞。参见M.Aklilu等人，Annals of Oncology 15：1109-1114，2004。用利妥昔单抗消耗B细胞的长期免疫效果以及在淋巴瘤患者中重建B细胞池的特点确定不清晰，尽管已广泛使用这种疗法。参见Jennifer H.Anolik等人，Clinical Immunology，第122卷，第2期，2007年2月，第139-145页。
对具有复发性或难治性疾病的患者的方法在很大程度上依赖于实验性治疗，随后是干细胞移植，其可能不适合于表现状态不佳或高龄的患者。因此，对可用于治疗患有NHL的患者的新方法有巨大需求。
癌症与细胞代谢改变之间的联系已经得到很好的确立。参见Cairns,R.A.等人，Nature Rev.，2011，11：85-95。了解肿瘤细胞代谢及其相关的基因变化可导致确认癌症治疗的改进方法。同上。例如，经由葡萄糖代谢增强的肿瘤细胞存活及增殖已经与PIK3途径相关联，由此诸如PTEN的肿瘤抑制基因中的突变激活肿瘤细胞代谢。同上。AKT1(也称为PKB)通过与PFKFB3、ENTPD5、mTOR和TSC2(也称为薯球蛋白)的各种相互作用刺激与肿瘤细胞生长相关的葡萄糖代谢。同上。
转录因子HIF1和HIF2主要负责对通常与肿瘤相关的低氧条件的细胞反应。同上。一旦HIF1被激活，则其促进肿瘤细胞进行糖酵解的能力。同上。因此，HIF1的抑制可减慢或逆转肿瘤细胞代谢。HIF1的激活已经与PI3K、诸如VHL的肿瘤抑制蛋白、琥珀酸脱氢酶(SDH)和延胡索酸水合酶相关联。同上。致癌转录因子MYC也已经与肿瘤细胞代谢、特别是糖酵解相关联。同上。MYC还通过谷氨酰胺代谢途径促进细胞增殖。同上。
AMP激活的蛋白激酶(AMPK)起到肿瘤细胞必须克服以便增殖的代谢检查点的作用。同上。已经确认了抑制肿瘤细胞中的AMPK信号传导的若干突变。参见Shackelford,D.B.&Shaw,R.J.,Nature Rev.Cancer,2009,9：563-575。STK11已被确认为与AMPK的作用有关的肿瘤抑制基因。参见Cairns,R.A.等人，Nature Rev.,2011,11：85-95。
转录因子p53(一种肿瘤抑制因子)在细胞代谢的调节中也具有重要作用。同上。肿瘤细胞中p53的损失可能是肿瘤细胞代谢改变为糖酵解途径的显著因素。同上。OCT1转录因子(化学治疗剂的另一潜在靶标)可与p53协作调节肿瘤细胞代谢。同上。
丙酮酸激酶M2(PKM2)促进细胞代谢的变化，这通过支持细胞增殖对癌细胞赋予代谢优势。同上。例如，已发现表达PKM2超过PKM1的肺癌细胞具有这种优势。同上。在临床中，PKM2已被确认为在许多癌症类型中过表达。同上。因此，PKM2可以是用于肿瘤的早期检测的有用的生物标志物。
异柠檬酸脱氢酶IDH1和IDH2中的突变已经与(特别是成胶质细胞瘤和急性骨髓性白血病中的)肿瘤发生相关联。参见Mardis,E.R.等人，N.Engl.J.Med.,2009,361：1058-1066；Parsons,D.W.等人，Science,2008,321：1807-1812。
随着总人口老龄化、随着新癌症形成以及随着易感人群(例如，感染AIDS的人、老年人或过度暴露于阳光)增长，癌症的发病率持续攀升。因此对于可用来治疗患有癌症的患者(包括但不限于患有淋巴瘤、NHL、多发性骨髓瘤、AML、白血病和实体肿瘤的患者)的新方法、治疗和组合物有着巨大的需求。
因此，可控制和/或抑制不需要的血管生成或抑制某些细胞因子(包括TNF-α)产生的化合物可适用于治疗和预防各种形式的癌症。
治疗癌症的方法
当前的癌症疗法可涉及外科手术、化学疗法、激素疗法和/或放射治疗以根除患者中的肿瘤性细胞(参见例如Stockdale,1998,Medicine，第3卷，Rubenstein和Federman编著，第12章，第IV部分)。近来，癌症疗法还可能涉及到生物疗法或免疫疗法。所有这些方法都可能对患者带来显著的弊端。例如，由于患者健康的原因，外科手术可能是禁忌的，或者可能是患者不可接受的。另外，外科手术可能不会完全去除肿瘤组织。放射疗法仅在肿瘤组织对辐射显示出比正常组织高的敏感性时有效。放射疗法也可经常引起严重的副作用。激素疗法很少作为单一药剂给出。虽然激素疗法可能有效，但其经常用于在其它疗法已除去大部分癌细胞之后预防或延缓癌症的复发。某些生物学及其它疗法数量有限，并且可能产生副作用，如皮疹或肿胀、流感样症状，包括发烧、发冷和疲劳、消化道问题或过敏反应。
关于化学疗法，有许多可供用于治疗癌症的化学治疗剂。许多癌症化学治疗剂通过抑制三磷酸脱氧核糖核苷酸前体的生物合成以防止DNA复制和伴随的细胞分裂而直接或间接地抑制DNA合成而起作用。Gilman等人，Goodman and Gilman’s:The Pharmacological Basis of Therapeutics，第十版(McGraw Hill，New York)。
尽管有多种化学治疗剂可供使用，但化学疗法具有诸多缺点。Stockdale,Medicine，第3卷，Rubenstein和Federman编著，第12章，第10节，1998年。几乎所有的化学治疗剂都是有毒的，并且化学疗法引起显著且经常是危险的副作用，包括严重的恶心、骨髓抑制和免疫抑制。另外，即使施用化学治疗剂的组合，许多肿瘤细胞也对化学治疗剂具有抗性或产生抗性。实际上，往往证明对治疗方案中使用的特定化学治疗剂具有抗性的那些细胞对其它药物也具有抗性，即使那些药剂通过与用在特定治疗中的药物不同的机理起作用。这种现象被称为多抗药性。由于抗药性的原因，许多癌症被证明是标准化学治疗方案所难治的。
对用于治疗、预防和控制癌症的安全和有效的化合物及方法有显著的需求，包括用于诸如外科手术、放射疗法、化学疗法和激素疗法的标准治疗所难治的癌症，同时减少或避免与常规疗法相关的毒性和/或副作用。
4.
技术实现要素：
本文提供了化合物、含有所述化合物的药物组合物及其在治疗包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症中的使用方法。在一个实施方案中，用在本文提供的组合物和方法中的化合物是式I的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是H、任选取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基；
R2和R3各自是卤基；且
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、环烷基、环烷基烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个基团Q1取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
本文提供了化合物、含有所述化合物的药物组合物及其在治疗包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症中的使用方法。
在一个实施方案中，用在本文提供的组合物和方法中的化合物是式I的或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是H、任选取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基或杂环基；
R2和R3各自是卤基；且
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、环烷基、环烷基烷基、-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)或-R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7各自独立地为氢或烷基。
在一个实施方案中，用在本文提供的组合物和方法中的化合物是式I的或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是任选取代的环烷基、芳基、杂芳基或杂环基；
R2和R3各自是卤基；且
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的芳基、-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)或-R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且R6和R7各自独立地为氢或烷基，或者R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在一个实施方案中，本文提供的化合物是式I的化合物。在一个实施方案中，本文提供的化合物是式I的化合物的药学上可接受的盐。在一个实施方案中，本文提供的化合物是式I的化合物的溶剂合物。在一个实施方案中，本文提供的化合物是式I的化合物的水合物。在一个实施方案中，本文提供的化合物是式I的化合物的包合物。
还提供了配制用于通过适当的途径施用的药物组合物以及含有有效浓度的本文提供的化合物中的一种或多种或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物且任选包含至少一种药物载体的装置。
在一个实施方案中，药物组合物递送有效用于治疗包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的量。在一个实施方案中，药物组合物递送有效用于预防包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的量。在一个实施方案中，药物组合物递送有效用于减轻包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的量。
本文还提供组合疗法，使用一种或多种本文提供的化合物或组合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，与例如针对癌症或其症状具有活性的另一种药剂的疗法相组合。所述方法范围内的疗法的实例包括但不限于外科手术、化学疗法、放射疗法、激素疗法、生物疗法、免疫疗法以及它们的组合。
可在施用一种或多种上述疗法的同时、之前或之后施用本文提供的化合物或组合物或其药学上可接受的衍生物。还提供了含有本文提供的化合物和一种或多种上述药剂的药物组合物。
在某些实施方案中，本文提供治疗、预防或减轻包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症或其一种或多种症状或病因的方法。在某些实施方案中，本文提供预防包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症或其一种或多种症状或病因的方法。在某些实施方案中，本文提供减轻包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症或其一种或多种症状或病因的方法。在某些实施方案中，血源性肿瘤是白血病。在某些实施方案中，本文提供的方法包括治疗各种形式的白血病的方法，如慢性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病和急性粒细胞性白血病。在某些实施方案中，本文提供的方法包括预防各种形式的白血病的方法，如慢性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病和急性粒细胞性白血病。在某些实施方案中，本文提供的方法包括控制各种形式的白血病的方法，如慢性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病和急性粒细胞性白血病。本文提供的方法包括治疗复发性的、难治性的或抗性的白血病。本文提供的方法包括预防复发性的、难治性的或抗性的白血病。本文提供的方法包括控制复发性的、难治性的或抗性的白血病。在一个实施方案中，本文提供的方法包括治疗急性骨髓性白血病的方法。在一个实施方案中，本文提供的方法包括预防急性骨髓性白血病的方法。在一个实施方案中，本文提供的方法包括控制急性骨髓性白血病的方法。
在实施所述方法中，对表现出待治疗的疾病或病症的症状的个体施用有效量的化合物或含有治疗有效浓度的化合物的组合物。所述量可有效地减轻或消除疾病或病症的一种或多种症状。
进一步提供了包括一个或多个装有药物组合物的一种或多种成分的容器的药物包装或试剂盒。任选与这类容器相关联的可有由管理药品或生物制品的生产、使用或销售的政府机构规定形式的通知书，该通知书表达所述机构批准了用于人类施用的生产、使用或销售。包装或试剂盒可标记有关于施用的模式、药物施用的顺序(例如，单独地、顺序地或同时地)等的信息。
参考以下详细描述将显而易见本文描述的主题的这些及其它方面。
5.发明详述
本文提供式I的化合物。本文提供式I的化合物的对映异构体。本文提供式I的化合物的对映异构体的混合物。本文提供式I的化合物的药学上可接受的盐。本文提供式I的化合物的药学上可接受的溶剂合物。本文提供式I的化合物的药学上可接受的水合物。本文提供式I的化合物的药学上可接受的共晶体。本文提供式I的化合物的药学上可接受的包合物。本文提供式I的化合物的药学上可接受的多晶型物。进一步提供了治疗包括实体肿瘤、血源性肿瘤在内的癌症的方法以及适用于这类方法的药物组合物和剂型。进一步提供了预防包括实体肿瘤、血源性肿瘤在内的癌症的方法以及适用于这类方法的药物组合物和剂型。进一步提供了减轻包括实体肿瘤、血源性肿瘤在内的癌症的方法以及适用于这类方法的药物组合物和剂型。在下面的部分中详细描述所述化合物、方法及组合物。
A.定义
除另有定义外，本文使用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常所理解相同的含义。所有的专利、申请、公开的申请及其它出版物均以引用的方式全文并入。在本文的术语有多种定义的情况下，除另有说明外，以本部分中的定义为准。
“烷基”是指这样的直链或支链烃链基团，其仅由碳和氢原子组成，不含不饱和度，具有一至十个、一至八个、一至六个或一至四个碳原子，且通过单键连接到分子的其余部分，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(叔丁基)等。
“亚烷基”和“亚烷基链”是指仅由碳和氢组成、不含不饱和度且具有一至八个碳原子的直链或支链二价烃链，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基、正亚丁基等。亚烷基链可通过链内的任何两个碳连接到分子的其余部分。
“亚烯基”或“亚烯基链”是指这样的直链或支链不饱和二价基，其仅由碳和氢原子组成，具有二至八个碳原子，其中不饱和度仅作为双键存在，且其中双键可存在于链中的任何两个碳原子之间，例如亚乙烯基、亚丙-1-烯基、亚丁-2-烯基等。亚烯基链可通过链内的任何两个碳连接到分子的其余部分。
“烷氧基”是指具有式-OR的基团，其中R是烷基或卤代烷基。“任选取代的烷氧基”是指具有式-OR的基团，其中R是如本文所定义的任选取代的烷基。
“氨基”是指具有式-NR’R”的基，其中R’和R”各自独立地为氢、烷基或卤代烷基。“任选取代的氨基”是指具有式–NR’R”的基，其中R’和R”中的一者或两者是如本文所定义的任选取代的烷基。
“芳基”是指碳环状环体系的基团，包括单环、双环、三环、四环C6-C18环体系，其中环中的至少一个是芳族的。芳基可以是完全芳族的，其实例有苯基、萘基、蒽基、苊基、薁基、芴基、茚基和芘基。芳基也可含有与非芳族环相组合的芳族环，其实例有苊烯、茚和芴。
“环烷基”是指这样的稳定一价单环或双环烃基团，其仅由碳和氢原子组成，具有三至十个是饱和的碳原子，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、十氢萘基、降冰片烷、降冰片烯、金刚烷基、双环[2.2.2]辛烷等。
“卤基”、“卤素”或“卤化物”是指F、Cl、Br或I。
“卤代烷基”是指其中氢原子中的一个或多个由卤素取代的烷基基团，在某些实施方案中是C1-6烷基基团。这类基团包括但不限于氯甲基、三氟甲基1-氯-2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2-氟丙基、2-氟丙-2-基、2,2,2-三氟乙基、1,1-二氟乙基、1,3-二氟-2-甲基丙基、2,2-二氟环丙基、(三氟甲基)环丙基、4,4-二氟环己基和2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基。
“杂环”或“杂环基”是指稳定的由碳原子和一至五个选自氮、氧和硫的杂原子组成的3至15元非芳族环基。在一个实施方案中，杂环状环体系基可以是单环、双环或三环状环或四环状环体系，其可包括稠合或桥接的环体系；且杂环状环体系基中的氮或硫原子可任选被氧化；氮原子可任选被季铵化；且杂环基可以是部分或完全饱和的。杂环状环体系可以在导致产生稳定化合物的任何杂原子或碳原子处连接到主结构。示例性杂环基包括吗啉基、哌啶基、哌嗪基、吡喃基、吡咯烷基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁基、奎宁环基、八氢喹嗪基、十氢喹嗪基、氮杂双环[3.2.1]辛基、氮杂双环[2.2.2]辛基、异二氢吲哚基、二氢吲哚基等。
“杂芳基”是指如上定义的是芳族的杂环基基团。杂芳基基团包括但不限于单环基、双环基和三环基基团，并且可以在导致产生稳定化合物的任何杂原子或碳原子处连接到主结构。这类杂芳基基团的实例包括但不限于：呋喃基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、嘧啶基、吡啶基、哒嗪基、噻唑基、噻吩基、苯并咪唑基、咪唑并[4,5-b]吡啶基、咪唑并[1,2-a]吡啶基、咪唑并[1,2-b]哒嗪基、咪唑并[1,2-a]吡嗪基等。
“IC50”是指经由本文描述的体外或基于细胞的测定法中的任意者测量的实现最大反应(如细胞生长或增殖)的50％抑制的特定测试化合物的量、浓度或剂量。
药学上可接受的盐包括但不限于胺盐，如但不限于N,N'-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、氨、二乙醇胺及其它羟烷基胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、普鲁卡因、N-苄基苯乙胺、1-对氯苄基-2-吡咯烷-1'-基甲基-苯并咪唑、二乙胺及其它烷基胺、哌嗪和三(羟甲基)氨基甲烷；碱金属盐，如但不限于锂、钾和钠；碱土金属盐，如但不限于钡、钙和镁；过渡金属盐，如但不限于锌；及其它金属盐，如但不限于磷酸氢钠和磷酸二钠；并且还包括但不限于无机酸的盐，如但不限于盐酸盐和硫酸盐；和有机酸的盐，如但不限于乙酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、丁酸盐、戊酸盐、延胡索酸盐和有机磺酸盐。
如本文所用且除另有所指外，术语“水合物”意指本文提供的化合物或其盐，其进一步包括通过非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量的水。
如本文所用且除另有所指外，术语“溶剂合物”意指由一种或多种溶剂分子与本文提供的化合物缔合形成的溶剂合物。术语“溶剂合物”包括水合物(例如一水合物、二水合物、三水合物、四水合物等)。
除说明书中具体描述另有说明外，要理解的是，取代可发生在烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基基团的任何原子上。
在未指定任何给定的取代基(例如，卤代烷基)的数目的情况下，可存在一个或多个取代基。例如，“卤代烷基”可包括一种或多种相同或不同的卤素。
当本文描述的基团(烷基基团除外)被说成是“取代的”时，它们可以被任何适当的取代基或多个取代基取代。取代基的说明性实例有见于本文公开的示例性化合物和实施方案中的那些，以及卤素(氯、碘、溴或氟)；烷基；羟基；烷氧基；烷氧基烷基；氨基；烷基氨基；羧基；硝基；氰基；硫醇；硫醚；亚胺；酰亚胺；脒；胍；烯胺；氨基羰基；酰基氨基；膦酸酯；膦；硫代羰基；亚磺酰基；砜；磺酰胺；酮；醛；酯；脲；氨基甲酸酯；肟；羟胺；烷氧基胺；芳氧基胺、芳烷氧基胺；N-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；氧(═O)；B(OH)2、O(烷基)氨基羰基；环烷基，其可以是单环的或稠合或非稠合多环的(例如，环丙基、环丁基、环戊基或环己基)，或杂环基，其可以是单环的或稠合或非稠合多环的(例如，吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或噻嗪基)；单环或稠合或非稠合多环芳基或杂芳基(例如，苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、吖啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基)芳氧基；芳烷基氧基；杂环基氧基；和杂环基烷氧基。当本文描述的烷基基团被说成是“取代的”时，它们可以被任何取代基或多个取代基取代，如见于本文公开的示例性化合物和实施方案中的那些，以及卤素(氯、碘、溴或氟)；烷基；羟基；烷氧基；烷氧基烷基；氨基；烷基氨基；羧基；硝基；氰基；硫醇；硫醚；亚胺；酰亚胺；脒；胍；烯胺；氨基羰基；酰基氨基；膦酸酯；膦；硫代羰基；亚磺酰基；砜；磺酰胺；酮；醛；酯；脲；氨基甲酸酯；肟；羟胺；烷氧基胺；芳氧基胺、芳烷氧基胺；N-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；B(OH)2或O(烷基)氨基羰基。
除另有特别说明外，在化合物可采取交替的互变异构、区域异构和/或立体异构形式的情况下，所有交替的异构体旨在包涵在所要求保护的主题范围内。例如，在化合物被描述为具有两种互变异构形式之一的情况下，旨在将两种互变异构体都包涵在本文中。
因此，本文提供的化合物可以是对映异构纯的或者是立体异构或非对映异构的混合物。
要理解的是，本文提供的化合物可含有手性中心。这类手性中心可以是(R)或(S)构型的，或者可以是它们的混合物。要理解的是，本文提供的化合物的手性中心可以在体内经历差向异构化。如此，本领域技术人员将会认识到，对于在体内经历差向异构化的化合物而言，施用其(R)形式的化合物等同于施用其(S)形式的化合物。
可使用手性合成子或手性试剂制备或采用常规技术(如手性固定相上的色谱法)拆分光学活性的(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体。
在本文的描述中，如果化学名称与化学结构之间存在任何差异的话，以结构为准。
如本文所用且除另有所指外，术语“治疗”(treat/treating/treatment)是指缓解或减轻与所治疗的疾病或病症相关的症状的严重程度。
术语“预防”包括抑制特定疾病或病症的症状。在一些实施方案中，具有包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的家族史的患者是预防性方案的候选者。通常，术语“预防”是指在症状发作之前施用药物，特别是对具有包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的风险的患者。
如本文所用且除另有所指外，术语“控制”包括防止罹患特定疾病或病症的患者的特定疾病或病症的复发、延长罹患所述疾病或病症的患者停留在缓解期的时间、降低患者的死亡率和/或保持降低与被控制的疾病或病症相关的症状的严重程度或避免所述症状。
如本文所用，“受试者”是动物，通常是哺乳动物，包括人，如人患者。
如本文所用，术语“肿瘤”是指所有的肿瘤性细胞生长和增殖(无论是恶性的还是良性的)以及所有的癌前和癌性细胞和组织。如本文所用的“肿瘤性”是指导致异常的组织生长的任何形式的失调或失控的细胞生长，无论是恶性的还是良性的。因此，“肿瘤性细胞”包括具有失调或失控的细胞生长的恶性和良性细胞。
如本文所用，“血液系统恶性肿瘤”是指身体的血液形成和免疫系统—骨髓和淋巴组织的癌症。这类癌症包括白血病、淋巴瘤(非霍奇金氏淋巴瘤)、霍奇金氏病(也称为霍奇金氏淋巴瘤)和骨髓瘤。
术语“白血病”是指血液形成组织的恶性肿瘤。白血病包括但不限于慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病和急性粒细胞性白血病。白血病可以是复发性的、难治性的或对常规疗法有抗性的。
如本文所用，“前髓细胞性白血病”或“急性前髓细胞性白血病”是指骨髓的恶性肿瘤，其中在细胞的髓系中存在成熟血细胞的缺乏且被称为前髓细胞的未成熟的细胞过量。其特点通常是染色体15和17的区域的交换。
如本文所用，“急性淋巴细胞性白血病(ALL)”也称为“急性成淋巴细胞性白血病”，是指由早期非粒状白血细胞或淋巴细胞的异常生长和发育引起的恶性疾病。
如本文所用，“T细胞白血病”是指其中被称为T淋巴细胞或T细胞的淋巴系统的某些细胞是恶性的疾病。T细胞是正常情况下能攻击病毒感染细胞、外来细胞和癌细胞并产生调节免疫反应的物质的白血细胞。
术语“复发性”是指这样的情况，其中在治疗之后白血病已缓解的患者的骨髓中白血病细胞返回并且正常血细胞减少。
术语“难治性或抗性”是指这样的情形，其中患者即使在强化治疗之后仍在其骨髓中残留有白血病细胞。
如本文所用且除另有规定外，术语化合物的“治疗有效量”和“有效量”是指足以在疾病的治疗、预防和/或控制中提供治疗有益效果、延迟或最小化与待治疗的疾病或病症相关的一种或多种症状的量。术语“治疗有效量”和“有效量”可涵盖改善总体治疗、减少或避免疾病或病症的症状或病因或增强另一治疗剂的治疗功效的量。
术语“共同施用”和“与...相组合”包括在没有特定时间限制的情况下同时、并行或顺序地施用两种治疗剂(例如，本文提供的化合物和另一抗癌剂)。在一个实施方案中，两种药剂同时存在于细胞中或患者体内，或者同时发挥其生物学或治疗效果。在一个实施方案中，两种治疗剂在同一组合物或单位剂型中。在另一实施方案中，两种治疗剂在分开的组合物或单位剂型中。
“支持性护理剂”是指治疗、预防或控制来自用式I的化合物治疗的副作用的任何物质。
术语“生物疗法”是指施用生物治疗剂，如脐带血、干细胞、生长因子等。
除另指出外，如本文所用的术语“约”是指高于或低于由该术语修饰的值不超过10％的值。例如，术语“约10mg/m2”意指9mg/m2至11mg/m2的范围。
“抗癌剂”是指抗代谢物(例如，5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、氟达拉滨)、抗微管剂(例如，长春花生物碱，如长春新碱、长春碱；紫杉烷类，如紫杉醇、多西紫杉醇)、烷化剂(例如，环磷酰胺、美法仑、卡莫司汀、亚硝基脲如双氯乙基亚硝基脲和羟基脲)、铂剂(例如，顺铂、卡铂、奥沙利铂、JM-216或沙铂、CI-973)、蒽环类(例如多柔比星、柔红霉素)、抗肿瘤抗生素(例如，丝裂霉素、伊达比星、阿霉素、道诺霉素)、拓扑异构酶抑制剂(例如，依托泊苷、喜树碱)、抗血管生成剂(例如，和贝伐单抗)或任何其它细胞毒性剂(磷酸雌莫司汀、泼尼氮芥)、激素或激素激动剂、拮抗剂、部分激动剂或部分拮抗剂、激酶抑制剂和放射治疗。
如本文所用，除另指出外，任何保护基团、氨基酸及其它化合物的缩写符合其常见的用法、公认的缩写或IUPAC-IUB委员会生物化学命名法(参见Biochem.1972,11：942-944)。
B.化合物
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的对映异构体，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的对映异构体的混合物，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的药学上可接受的盐，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的溶剂合物，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的水合物，其中
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的共晶体，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的多晶型物，其中：
R1是H、任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、环烷基、环烷基烷基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7各自独立地为氢或烷基。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的对映异构体，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的对映异构体的混合物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的药学上可接受的盐，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的溶剂合物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的水合物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的包合物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的共晶体，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在某些实施方案中，本文提供式I的化合物的多晶型物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
R2和R3各自是卤基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
其中当存在Q上的取代基时，其为一至三个基团Qa，其中每个Qa独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、氧代、羟基或烷氧基；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个Q1基团取代，其中每个Q1独立地为烷基、卤代烷基或卤基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；且
t是1或2。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
R1是任选取代的环烷基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基或任选取代的杂环基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的芳基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式II的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，化合物具有式I或式II，其中R1是任选取代的芳基；
其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的芳基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在一个实施方案中，化合物具有式I或式II，其中R1是任选取代的芳基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基或任选取代的杂芳基，其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为卤基、烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、-R4OR5或-R4N(R6)(R7)；每个R4独立地为直接键或亚烷基；每个R5独立地为氢、卤基、烷基、烷氧基、卤代烷氧基或卤代烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在一个实施方案中，化合物具有式I或式II，其中R1是任选取代的苯基、任选取代的环己基、任选取代的哌啶基或任选取代的吡啶基，其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为卤基、烷基、-R4OR5或-R4N(R6)(R7)；每个R4独立地为直接键或亚烷基；每个R5独立地为氢、卤基、烷基、烷氧基、卤代烷氧基或卤代烷基；且R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成5或6元杂环基环。
在一个实施方案中，化合物具有式I或式II，其中R1是任选取代的苯基、任选取代的环己基、任选取代的哌啶基或任选取代的吡啶基，其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为氯、溴、氟、甲基、异丙基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、异丙基氧基、甲氧基乙氧基、异丙基氧基乙氧基、三氟甲氧基、甲基氨基、二甲基氨基或哌啶基。
在一个实施方案中，化合物具有式I或式II，其中R1是任选取代的芳基，其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为卤基、烷基、-R4OR5、-R4SR5或R4OR4C(O)N(R6)(R7)；每个R4独立地为直接键或亚烷基；每个R5独立地为氢、卤基、烷基或卤代烷基；且R6和R7各自独立地为氢或烷基。
在一个实施方案中，化合物具有式I或式II，其中R1是任选取代的芳基，其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为氟、氯、甲基、-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5或R4OR4C(O)N(R6)(R7)；每个R4独立地为直接键或亚甲基；每个R5独立地为氢、甲基、乙基或三氟甲基；且R6和R7各自独立地为氢或甲基。
在一个实施方案中，化合物具有式I或式II，其中R1是任选取代的苯基，其中当存在R1上的取代基时，其为一至三个基团Q，其中每个Q独立地为氟、氯、甲基、叔丁基、-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5或R4OR4C(O)N(R6)(R7)；每个R4独立地为直接键或亚甲基；每个R5独立地为氢、甲基、乙基或三氟甲基；且R6和R7各自独立地为氢或甲基。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
每个Q1独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的芳基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤基、烷氧基、卤代烷基或羟烷基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环；且
n是0-3。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式III的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
每个Q1独立地为烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的芳基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成5或6元杂环基；且
n是0-3。
在一个实施方案中，本文的化合物是式III的化合物，其中每个Q1独立地为氢、Br、Cl、F、甲基、异丙基、叔丁基、异丙基、环丙基、-CF3、OH、-SCH3、-SCF3、-C(CH3)2F、-OCH3、-OCF3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、-OCH2CF3、-O(CH2)2OCH3、-O(CH2)2OCH(CH3)2、-O(CH2)2O(CH2)2OCH3、-NHCH3、-N(CH3)2、-O(CH2)2-吗啉基、哌啶基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-O(CH2)2-4,4-二氟-1-哌啶基或对氟苯基。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
Q2是氢、烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的芳基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7各自独立地为氢或烷基。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IV的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文的化合物是式IV的化合物，其中Q2是氢、卤基、烷基、任选取代的芳基、-R4OR5或-R4N(R6)(R7)；R4独立地为直接键或亚烷基；R5是氢、烷基或卤代烷基；且R6和R7各自独立地为氢或烷基。在一些实施方案中，Q2是氢、Br、Cl、F、甲基、异丙基、叔丁基、异丙基、-OCH3、-SCH3、-C(CH3)2F、-OCH(CH3)2、-O(CH2)2OCH3或对氟苯基。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
Q3和Q4各自独立地为氢、烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、羟烷基或烷氧基烷基；且
R6和R7各自独立地为氢或烷基。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式V的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文的化合物是式V的化合物，其中Q4和Q3各自独立地为氢、卤基、烷基、烷氧基烷基、-R4OR5或-R4N(R6)(R7)；R4是直接键或亚烷基；且R5是氢、烷基或卤代烷基；并且R6和R7各自独立地为氢或烷基。在一些这类实施方案中，Q4和Q3各自独立地为氢、F、甲基、-CF3、OH、-OCF3、-OCH2CH3、OCH(CH3)2、-OCH2CF3或-NHCH3。
在一个实施方案中，本文的化合物是式V的化合物，其中Q4是氢、Q3是氢、卤基、烷基、烷氧基烷基、-R4N(R6)(R7)或-R4OR5；R4是直接键或亚烷基；R5是氢、烷基或卤代烷基；且R6和R7各自独立地为氢或烷基。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
Q4和Q5各自独立地为氢、烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、烷氧基烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VI的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文的化合物是式VI的化合物，其中Q4和Q5各自独立地为氢、卤基、烷基、烷氧基烷基、-R4N(R6)(R7)或-R4OR5；R4是直接键或亚烷基；R5是氢、烷基或卤代烷基；且R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成6元杂环基。在一些这类实施方案中，Q4和Q5各自独立地为氢、F、Cl、OH、甲基、-CF3、-NHCH3、-N(CH3)2、-OCF3、-OCH2CH3、-OCH2CF3、-OCH(CH3)2、-O(CH2)2OCH3、-O(CH2)2OCH(CH3)2、-O(CH2)2O(CH2)2OCH3、O(CH2)2-吗啉基、哌啶基、吗啉基、-CH2-吗啉基或-O(CH2)2-4,4-二氟-1-哌啶基。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
Q5是氢、烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基、烷氧基烷基或羟烷基；且
R6和R7选择如下：
i)R6和R7各自独立地为氢或烷基；或者
ii)R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成任选被一个或两个卤基、烷基或卤代烷基取代的5或6元杂环基或杂芳基环。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VII的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文的化合物是式VII的化合物，其中Q5是氢、卤基、烷基、烷氧基烷基、-R4N(R6)(R7)或-R4OR5；R4是直接键或亚烷基；且R5是氢、烷基或卤代烷基；并且R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成6元杂环基。在一些这类实施方案中，Q5是氢、F、Cl、甲基、哌啶基、吗啉基、-CH2-吗啉基、-N(CH3)2、-O(CH2)2OCH3、-O(CH2)2OCH(CH3)2、-O(CH2)2O(CH2)2OCH3或-O(CH2)2-4,4-二氟-1-哌啶基。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
Q2和Q5各自独立地为氢、烷基、卤基、卤代烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的芳基、-R4OR5、-R4SR5、-R4N(R6)(R7)、R4OR4N(R6)(R7)或R4OR4C(J)N(R6)(R7)；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、烷基、卤代烷基或羟烷基；且
R6和R7各自独立地为氢或烷基，或者R6和R7连同在其上被它们取代的氮原子一起形成6元杂环基。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式VIII的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文的化合物是式VIII的化合物，其中Q2和Q5各自独立地为氢、卤基、烷基、烷氧基烷基、任选取代的芳基或-R4OR5；R4是直接键或亚烷基；且R5是氢、烷基或卤代烷基。在一些这类实施方案中，Q2和Q5各自独立地为氢、F、Br、Cl、甲基、异丙基、叔丁基、-C(CH3)2F、对氟苯基、环丙基、-N(CH3)2、-OCH3、-OCH(CH3)2、O(CH2)2OCH3、-O(CH2)2OCH(CH3)2、-O(CH2)2OCH3、-O(CH2)2O(CH2)2OCH3、-OCF3、-O(CH2)2-4,4-二氟-1-哌啶基、-SCF3、吗啉基、哌啶基或CH2-吗啉基。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物：
或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其中：
每个Q1独立地为烷基、卤基、卤代烷基、烷氧基烷基、羟基、烷氧基、任选取代的环烷基；任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、-R4OR5、-R4OR5-R4OR5、-R4N(R6)(R7)、-R4SR5、-R4OR4N(R6)(R7)、-R4OR4C(J)N(R6)(R7)、-C(J)R9或R4S(O)tR8；
J是O或S；
每个R4独立地为亚烷基、亚烯基或直接键；
每个R5独立地为氢、氧代、烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基，其中R5中的烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基或杂环基烷基基团各自独立地任选被1-3个选自烷基、卤代烷基或卤基的Q1基团取代；
R6和R7各自独立地为氢或烷基；
R8是烷基、卤代烷基或羟烷基；
R9是烷基或芳基；
J是O或S；
t是1或2；且
n是0-3。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的对映异构体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的对映异构体的混合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的药学上可接受的盐，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的溶剂合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的水合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的包合物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的共晶体，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文提供式IX的化合物的多晶型物，其中取代基如上所述。
在一个实施方案中，本文的化合物是式IX的化合物，其中每个Q1独立地为氢、卤基、烷基、卤代烷基、烷氧基烷基或卤代烷氧基烷基。在一些实施方案中，每个Q1独立地为氟、氯、溴、甲基、异丙基、叔丁基、-CF3、-O-CH2CH3、-O-CH(CH3)2或环丙基。
在一个实施方案中，本文提供的化合物选自：
在一个实施方案中，本文提供的化合物是表1的化合物。
本文还提供本文所提供化合物的同位素富集的类似物。先前已用一些类别的药物证明药物的同位素富集(例如，氘化)改善了药代动力学(“PK”)、药效动力学(“PD”)和毒性特征。参见例如Lijinsky等人，Food Cosmet.Toxicol.,20：393(1982)；Lijinsky等人，J.Nat.Cancer Inst.,69：1127(1982)；Mangold等人，Mutation Res.308：33(1994)；Gordon等人，Drug Metab.Dispos.,15：589(1987)；Zello等人，Metabolism,43：487(1994)；Gately等人，J.Nucl.Med.,27：388(1986)；Wade D,Chem.Biol.Interact.117：191(1999)。
不受任何特定理论的限制，药物的同位素富集可例如用于(1)减少或消除不需要的代谢物，(2)增加母体药物的半衰期，(3)减少实现期望效果所需的剂量数，(4)减少实现期望效果的必要剂量的量，(5)如果形成活性代谢物的话，增加活性代谢物的形成，和/或(6)减少有害代谢物在特定组织中的产生和/或形成用于组合疗法的更有效的药物和/或更安全的药物，无论所述组合疗法是否是有意为之。
将原子用其同位素中的一种置换往往会导致化学反应的反应速率变化。这种现象被称为动力学同位素效应(“KIE”)。例如，如果在化学反应中的速率决定步骤(即，过渡态能量最高的步骤)期间C–H键断裂，则氘对该氢的取代将导致反应速率降低，并且进程将减慢。这种现象被称为氘动力学同位素效应(“DKIE”)。(参见例如Foster等人，Adv.Drug Res.，第14卷，第1-36页(1985)；Kushner等人，Can.J.Physiol.Pharmacol.，第77卷，第79-88页(1999))。
DKIE的大小可表示为其中C-H键断裂的给定反应的速率与其中氘取代氢的相同反应的速率之间的比率。DKIE可以从约1(无同位素效应)变动到非常大的数，如50或更大，这意味着当氘取代氢时，反应可以慢五十倍或更多倍。不受特定理论的限制，高DKIE值可能部分地是由于称为隧道效应的现象所致，其是不确定性原理的结果。隧道效应归因于氢原子的小质量，并且是因为涉及质子的过渡态有时能在不存在所需活化能的情况下形成而发生。因为氘比氢质量大，所以其经历这种现象的可能性低得多。
氚(“T”)是氢的放射性同位素，用于研究、聚变反应堆、中子发生器和放射性药物。氚是在核中具有2个中子并且原子量接近3的氢原子。其以非常低的浓度天然存在于环境中，最常见为T2O。氚缓慢衰变(半衰期＝12.3年)并发射不能穿透人皮肤外层的低能β粒子。内部暴露是与此同位素相关的主要危险，但其必须被大量摄入才能构成显著的健康风险。与氘相比，氚在达到危险水平之前必须被消耗的量较少。氚(“T”)取代氢仍导致比氘强的键并产生数值更大的同位素效应。
类似地，其它元素(包括但不限于对于碳的13C或14C，对于硫的33S、34S,或36S，对于氮的15N，和对于氧的17O或18O)的同位素取代将提供类似的动力学同位素效应。
动物体表达多种酶，目的是从其循环系统中消除外来物质，如治疗剂。这类酶的实例包括细胞色素P450酶(“CYP”)、酯酶、蛋白酶、还原酶、脱氢酶和单胺氧化酶，以与这些外来物质反应并将其转化为更极性的中间体或代谢物用于肾排泄。药物化合物的一些最常见的代谢反应涉及碳-氢(C-H)键氧化成碳-氧(C-O)或碳-碳(C-C)π键。所得代谢物在生理条件下可以是稳定的或不稳定的，并且相对于母体化合物可具有基本上不同的药代动力学、药效动力学以及急性和长期的毒性特征。对于许多药物，这类氧化是快速的。其结果是，这些药物往往需要多次或高日剂量地施用。
与具有天然同位素组成的类似化合物相比，在本文提供的化合物的某些位置上的同位素富集可产生可检测到的影响本文提供的化合物的药代动力学、药理学和/或毒理学特征的KIE。在一个实施方案中，在代谢期间在C-H键裂解的位点上进行氘富集。
C.治疗和预防的方法
在一个实施方案中，本文提供治疗和预防癌症的方法，其包括对患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物，或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在另一实施方案中，本文提供控制癌症的方法，其包括对患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物，或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
本文还提供治疗先前已经治疗癌症但对标准疗法无反应的患者以及先前未治疗的患者的方法。本发明还包括不论患者的年龄如何而治疗患者的方法，虽然一些疾病或病症在某些年龄组中更常见。本发明还包括治疗已经历外科手术以试图治疗待解决的疾病或病症以及没有进行外科手术的患者的方法。因为癌症患者具有多样化的临床表现和不同的临床结果，所以给予患者的治疗可根据他/她的预后而有所不同。熟练的临床医生将无需过多的实验就能够确定可有效用于治疗患有癌症的个体患者的具体次要药剂、外科手术的类型和基于非药物的标准疗法的类型。
如本文所用，术语“癌症”包括但不限于实体肿瘤和血源性肿瘤。术语“癌症”是指皮肤组织、器官、血液和血管的疾病，包括但不限于膀胱、骨、血液、脑、乳腺、宫颈、胸、结肠、子宫内膜、食管、眼、头、肾、肝、淋巴结、肺、口、颈、卵巢、胰腺、前列腺、直肠、胃、睾丸、喉和子宫的癌症。具体的癌症包括但不限于晚期恶性肿瘤、淀粉样变性、成神经细胞瘤、脑膜瘤、血管外皮细胞瘤、多发性脑转移瘤、多形性成胶质细胞瘤、成胶质细胞瘤、脑干胶质瘤、预后不良恶性脑肿瘤、恶性胶质瘤、复发性恶性胶质瘤、间变性星形细胞瘤、间变性少突神经胶质瘤、神经内分泌肿瘤、直肠腺癌、Dukes C&D结肠直肠癌、不可切除的结肠直肠癌、转移性肝细胞癌、卡波西氏肉瘤、核型急性粒细胞性白血病、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、皮肤B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、低度滤泡性淋巴瘤、恶性黑素瘤、恶性间皮瘤、恶性胸腔积液间皮瘤综合征、腹膜癌、乳头状浆液性癌、妇科肉瘤、软组织肉瘤、硬皮病、皮肤血管炎、朗格汉斯细胞组织细胞增生症、平滑肌肉瘤、进行性骨化纤维发育不良、激素难治性前列腺癌、切除高风险软组织肉瘤、不可切除的肝细胞癌、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、郁积性骨髓瘤、无痛性骨髓瘤、输卵管癌、雄激素非依赖性前列腺癌、雄激素依赖性IV期非转移性前列腺癌、激素不敏感性前列腺癌、化学疗法不敏感性前列腺癌、乳头状甲状腺癌、滤泡性甲状腺癌、甲状腺髓样癌和平滑肌瘤。
在某些实施方案中，癌症是实体肿瘤。在某些实施方案中，实体肿瘤是转移性的。在某些实施方案中，实体肿瘤是抗药性的。在某些实施方案中，实体肿瘤是肝细胞癌、前列腺癌、卵巢癌或成胶质细胞瘤。
在某些实施方案中，癌症是血源性肿瘤。在某些实施方案中，血源性肿瘤是转移性的。在某些实施方案中，血源性肿瘤是抗药性的。在某些实施方案中，癌症是白血病。
在一个实施方案中，本文提供的方法包括通过施用治疗有效量的式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物来治疗、预防或控制各种类型的白血病，如慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性髓细胞性白血病(CML)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)和急性粒细胞性白血病(AML)。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括治疗、预防或控制受试者的急性白血病。在一些实施方案中，急性白血病是急性骨髓性白血病(AML)，其包括但不限于未分化的AML(M0)、粒细胞性白血病(M1)、粒细胞性白血病(M2)、前髓细胞性白血病(M3或M3变体[M3V])、髓单核细胞性白血病(具有嗜酸性粒细胞增多症[M4E])的M4或M4变体)、单核细胞性白血病(M5)、红白血病(M6)和成巨核细胞白血病(M7)。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是未分化的AML(M0)。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是粒细胞性白血病(M1)。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是粒细胞性白血病(M2)。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是前髓细胞性白血病(M3或M3变体[M3V])。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是髓单核细胞性白血病(具有嗜酸性粒细胞增多症[M4E])的M4或M4变体)。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是单核细胞性白血病(M5)。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是红白血病(M6)。在一个实施方案中，急性骨髓性白血病是成巨核细胞白血病(M7)。因此，治疗、预防或控制受试者的急性骨髓性白血病的方法包括对受试者施用一定量的本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤，所述量有效用以单独或组合地治疗、预防或控制急性骨髓性白血病。在一些实施方案中，所述方法包括以有效用以治疗、预防或控制急性骨髓性白血病的量与第二活性剂相组合地对受试者施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括治疗、预防或控制受试者的急性淋巴细胞性白血病(ALL)。在一些实施方案中，急性淋巴细胞性白血病包括源自骨髓(B细胞)、胸腺(T细胞)和淋巴结的胚细胞的白血病。急性淋巴细胞性白血病可根据法-美-英(FAB)形态分类方案分类为L1-成熟显现的成淋巴细胞(T细胞或前B细胞)、L2-未成熟和多形性(各种形状的)成淋巴细胞(T细胞或前B细胞)和L3-成淋巴细胞(B细胞；伯基特细胞)。在一个实施方案中，急性淋巴细胞性白血病源自骨髓的胚细胞(B细胞)。在一个实施方案中，急性淋巴细胞性白血病源自胸腺(T细胞)。在一个实施方案中，急性淋巴细胞性白血病源自淋巴结。在一个实施方案中，急性淋巴细胞性白血病是特征在于成熟显现的成淋巴细胞(T细胞或前B细胞)的L1型。在一个实施方案中，急性淋巴细胞性白血病是特征在于未成熟和多形性(各种形状的)成淋巴细胞(T细胞或前B细胞)的L2型。在一个实施方案中，急性淋巴细胞性白血病是特征在于成淋巴细胞(B细胞；伯基特细胞)的L3型。在某些实施方案中，急性淋巴细胞性白血病是T细胞白血病。在一个实施方案中，T细胞白血病是外周T细胞白血病。在另一实施方案中，T细胞白血病是T细胞成淋巴细胞性白血病。在另一实施方案中，T细胞白血病是皮肤T细胞白血病。在另一实施方案中，T细胞白血病是成人T细胞白血病。因此，治疗、预防或控制受试者的急性淋巴细胞性白血病的方法包括对受试者施用一定量的本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤，所述量有效用以单独或与第二活性剂相组合地治疗、预防或控制急性淋巴细胞性白血病。在一些实施方案中，所述方法包括以有效用以治疗、预防或控制急性淋巴细胞性白血病的量与第二活性剂相组合地对受试者施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括治疗、预防或控制受试者的慢性骨髓性白血病(CML)。所述方法包括对受试者施用一定量的本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤，所述量有效用以治疗、预防或控制慢性骨髓性白血病。在一些实施方案中，所述方法包括以有效用以治疗、预防或控制慢性骨髓性白血病的量与第二活性剂相组合地对受试者施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤。
在一些实施方案中，本文提供的方法包括治疗、预防或控制受试者的慢性淋巴细胞性白血病(CLL)。所述方法包括对受试者施用一定量的本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤，所述量有效用以治疗、预防或控制慢性淋巴细胞性白血病。在一些实施方案中，所述方法包括以有效用以治疗、预防或控制慢性淋巴细胞性白血病的量与第二活性剂相组合地对受试者施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的步骤。
在某些实施方案中，本文提供治疗、预防和/或控制肾功能受损的患者的疾病的方法。在某些实施方案中，本文提供治疗、预防和/或控制肾功能受损的患者的癌症的方法。在某些实施方案中，本文提供为由于但不限于疾病、衰老或其他患者因素而肾功能受损的患者提供适当的剂量调整的方法。
在某些实施方案中，本文提供治疗、预防和/或控制包括非霍奇金氏淋巴瘤在内的淋巴瘤的方法。在一些实施方案中，本文提供采用预后因素治疗或控制非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)(包括但不限于弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL))的方法。
在某些实施方案中，本文提供治疗、预防和/或控制肾功能受损的患者的多发性骨髓瘤(包括复发性/难治性多发性骨髓瘤)或其症状的方法，包括对肾功能受损的复发性/难治性多发性骨髓瘤患者施用治疗有效量的式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、立体异构体、互变异构体或外消旋混合物。
在某些实施方案中，化合物的治疗或预防有效量为每天约0.005至约1,000mg、每天约0.01至约500mg、每天约0.01至约250mg、每天约0.01至约100mg、每天约0.1至约100mg、每天约0.5至约100mg、每天约1至约100mg、每天约0.01至约50mg、每天约0.1至约50mg、每天约0.5至约50mg、每天约1至约50mg、每天约0.02至约25mg、每天约0.05至约10mg、每天约0.05至约5mg、每天约0.1至约5mg或每天约0.5至约5mg。
在某些实施方案中，治疗或预防有效量为每天约0.1、约0.2、约0.5、约1、约2、约3、约4、约5、约6、约7、约8、约9、约10、约15、约20、约25、约30、约40、约45、约50、约60、约70、约80、约90、约100或约150mg。在一些这类实施方案中，治疗或预防有效量为每天约2、约3、约4、约5、约6或约7mg。
在一个实施方案中，针对本文描述的病状，式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的推荐日剂量范围在每天约0.5mg至约50mg的范围内，优选以单一的一天一次剂量或在整个一天当中分次的剂量给予。在一些实施方案中，剂量范围是每天约1mg至约50mg。在其它实施方案中，剂量范围是每天约0.5至约5mg。每天具体的剂量包括每天0.1、0.2、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50mg。
在具体的实施方案中，推荐的起始剂量可以是每天0.5、1、2、3、4、5、10、15、20、25或50mg。在另一实施方案中，推荐的起始剂量可以是每天0.5、1、2、3、4或5mg。可以将剂量增加到15、20、25、30、35、40、45和50mg/天。在具体的实施方案中，可以约25mg/天的量对患有包括AML在内的白血病的患者施用化合物。在特定的实施方案中，可以约10mg/天的量对患有包括AML在内的白血病的患者施用化合物。在特定的实施方案中，可以约5mg/天的量对患有包括AML在内的白血病的患者施用化合物。在特定的实施方案中，可以约4mg/天的量对患有包括AML在内的白血病的患者施用化合物。在特定的实施方案中，可以约3mg/天的量对患有包括AML在内的白血病的患者施用化合物。
在某些实施方案中，治疗或预防有效量为约0.001至约100mg/kg/天、约0.01至约50mg/kg/天、约0.01至约25mg/kg/天、约0.01至约10mg/kg/天、约0.01至约9mg/kg/天、0.01至约8mg/kg/天、约0.01至约7mg/kg/天、约0.01至约6mg/kg/天、约0.01至约5mg/kg/天、约0.01至约4mg/kg/天、约0.01至约3mg/kg/天、约0.01至约2mg/kg/天、约0.01至约1mg/kg/天或约0.01至约0.05mg/kg/天。
也可以按不同于mg/kg/天的单位表示施用的剂量。例如，肠胃外施用的剂量可表示为mg/m2/天。本领域普通技术人员很容易知道对受试者的给定身高或体重或这两者如何将剂量从mg/kg/天转换为mg/m2/天(参见www.fda.gov/cder/cancer/animalframe.htm)。例如，对于65kg的人来说，1mg/kg/天的剂量大约等于38mg/m2/天。
在某些实施方案中，施用的化合物的量足以提供范围在约0.001至约500μM、约0.002至约200μM、约0.005至约100μM、约0.01至约50μM、约1至约50μM、约0.02至约25μM、约0.05至约20μM、约0.1至约20μM、约0.5至约20μM或约1至约20μM的化合物的稳态血浆浓度。
在其它实施方案中，施用的化合物的量足以提供范围在约5至约100nM、约5至约50nM、约10至约100nM、约10至约50nM或约50至约100nM的化合物的稳态血浆浓度。
如本文所用，术语“稳态血浆浓度”是在施用本文提供的化合物(例如，式I的化合物)或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物一段时间之后达到的浓度。一旦达到稳态，在化合物的血浆浓度的依时曲线上有较小的峰和谷。
在某些实施方案中，施用的化合物的量足以提供范围在约0.001至约500μM、约0.002至约200μM、约0.005至约100μM、约0.01至约50μM、约1至约50μM、约0.02至约25μM、约0.05至约20μM、约0.1至约20μM、约0.5至约20μM或约1至约20μM的化合物的最大血浆浓度(峰值浓度)。
在某些实施方案中，施用的化合物的量足以提供范围在约0.001至约500μM、约0.002至约200μM、约0.005至约100μM、约0.01至约50μM、约1至约50μM、约0.01至约25μM、约0.01至约20μM、约0.02至约20μM、约0.02至约20μM或约0.01至约20μM的化合物的最小血浆浓度(谷浓度)。
在某些实施方案中，施用的化合物的量足以提供范围在约100至约100,000ng*hr/mL、约1,000至约50,000ng*hr/mL、约5,000至约25,000ng*hr/mL或约5,000至约10,000ng*hr/mL的化合物的曲线下面积(AUC)。
在某些实施方案中，待采用本文提供的方法之一治疗的患者在施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物之前尚未采用抗癌疗法进行治疗。在某些实施方案中，待采用本文提供的方法之一治疗的患者在施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物之前已采用抗癌疗法进行治疗。在某些实施方案中，待采用本文提供的方法之一治疗的患者已对所述抗癌疗法产生了抗药性。
本文提供的方法包括不论患者的年龄如何而治疗患者，虽然一些疾病或病症在某些年龄组中更常见。
根据待治疗的疾病和受试者的病状，可通过口服、肠胃外(例如，肌肉内、腹膜内、静脉内、CIV、脑池内注射或输注、皮下注射或植入)、吸入、经鼻、经阴道、经直肠、舌下或外用(例如，透皮或局部)施用途径施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。可单独或以合适的剂量单位与适于每种施用途径的药学上可接受的赋形剂、载体、佐剂和媒介物一起配制式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在一个实施方案中，口服施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在另一实施方案中，肠胃外施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在又一实施方案中，静脉内施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
可以单次剂量(举例如单次推注或口服片剂或丸剂)；或者按经时方式(举例如经时连续输注或经时分开的推注剂量)递送式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。如果必要，可以反复施用所述化合物，例如直到患者经历稳定的疾病或消退，或者直到患者经历疾病进展或不可接受的毒性。例如，对于实体肿瘤而言稳定的疾病通常意指可测量的病变的垂直直径自最后一次测量起没有增加25％或更多。Response Evaluation Criteria in Solid Tumors(RECIST)Guidelines,Journal of the National Cancer Institute 92(3)：205-216(2000)。通过本领域中已知的方法确定稳定的疾病或缺乏稳定的疾病，如评估患者症状、身体检查、将已经使用X射线、CAT、PET或MRI扫描进行成像的肿瘤可视化及其它公认的评估模式。
可每日一次(QD)施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，或者将其分成多个日剂量，如每日两次(BID)、每日三次(TID)和每日四次(QID)。此外，施用可以是连续的(即，在连续的数天中每日施用或每天地施用)、间断的(例如按周期的方式，即包括数天、数周或数月休止而无药物)。如本文所用，术语“每日”旨在表示例如持续一段时间每天一次或多于一次施用治疗性化合物，如式I的化合物。术语“连续”旨在表示持续10天至52周的不间断时段每日施用治疗性化合物，如式I的化合物。如本文所用的术语“间断”或“间断地”旨在表示按有规律的或无规律的间隔停止和开始。例如，式I的化合物的间断施用为每周一至六天施用、按周期的方式施用(例如，每日施用持续二至八个连续周，然后是长达一周无施用的休止时段)或隔日施用。如本文所用的术语“周期(cycling)”旨在表示每日或连续但有休止时段地施用治疗性化合物，如式I的化合物。在一些这类实施方案中，施用为一天一次，持续二至六天，然后是五至七天无施用的休止时段。
在一些实施方案中，施用的频率在约日剂量到约月剂量的范围内。在某些实施方案中，施用是一天一次、一天两次、一天三次、一天四次、每隔一天一次、一周两次、每周一次、每两周一次、每三周一次或每四周一次。在一个实施方案中，一天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在另一实施方案中，一天两次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在又一实施方案中，一天三次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。还在另一实施方案中，一天四次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，从一天至六个月、从一周至三个月、从一周至四周、从一周至三周或从一周至两周每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在某些实施方案中，持续一周、两周、三周或四周每天一次施用式I的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物。在一个实施方案中，持续4天每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在一个实施方案中，持续5天每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在一个实施方案中，持续6天每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在一个实施方案中，持续一周每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在另一实施方案中，持续两周每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在又一实施方案中，持续三周每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。还在另一实施方案中，持续四周每天一次施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
C-1.与第二活性剂的组合疗法
也可以将式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物组合或与适用于治疗和/或预防本文描述的癌症的其它治疗剂相组合使用。
在一个实施方案中，本文提供了治疗、预防或控制癌症的方法，包括对患者施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物；或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物；与一种或多种第二活性剂相组合，以及任选与放射疗法、输血或外科手术相组合。本文中公开了第二活性剂的实例(参见，例如第5.4节)。
如本文所用，术语“相组合”包括采用多于一种疗法(例如，一种或多种预防和/或治疗剂)。然而，术语“相组合”的使用不限制对患有疾病或病症的患者施用的疗法(例如，预防和/或治疗剂)的顺序。可在对受试者施用第二疗法(例如，预防或治疗剂)之前(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周前)、与其同时或在其之后(例如，5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周后)施用第一疗法(例如，预防或治疗剂，如本文提供的化合物、本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物)。本文也设想了三联疗法。
可通过相同或不同的施用途径同时或顺序地对患者进行式I的化合物和一种或多种第二活性剂的施用。针对特定活性剂所采用的特定施用途径的适当性将取决于活性剂本身(例如，其是否可以口服施用而不会在进入血流之前分解)和所治疗的癌症。
式I的化合物的施用途径独立于第二疗法的施用途径。在一个实施方案中，口服施用式I的化合物。在另一实施方案中，静脉内施用式I的化合物。因此，根据这些实施方案，口服或静脉内施用式I的化合物，且可口服、肠胃外、腹膜内、静脉内、动脉内、透皮、舌下、肌内、经直肠、经颊、鼻内、经脂质体、经由吸入、经阴道、眼内、经由通过导管或支架的局部递送、皮下、脂肪内、关节内、鞘内或以慢释剂型施用第二疗法。在一个实施方案中，通过相同的口服施用模式或通过IV施用式I的化合物和和第二疗法。在另一实施方案中，通过一种施用模式(例如，通过IV)施用式I的化合物，而通过另一种施用模式(例如，口服)施用第二药剂(抗癌剂)。
在一个实施方案中，静脉内或皮下且每日一次或两次以约1至约1000mg、约5至约500mg、约10至约350mg或约50至约200mg的量施用第二活性剂。第二活性剂的具体量将取决于所使用的具体药剂、所治疗或控制的疾病的类型、疾病的严重程度和阶段以及本文提供的式I的化合物和对患者并行施用的任何任选的另外的活性剂的量。
在本文提供的方法和组合物中，一种或多种第二活性成分或药剂可以与式I的化合物一起使用。第二活性剂可以是大分子(例如，蛋白质)或小分子(例如，合成的无机、有机金属或有机分子)。
大分子活性剂的实例包括但不限于造血生长因子、细胞因子以及单克隆和多克隆抗体，特别是癌抗原的治疗性抗体。典型的大分子活性剂是生物分子，如天然存在的或合成的或重组的蛋白质。特别适用于本文提供的方法和组合物的蛋白质包括在体外或体内刺激造血前体细胞和免疫活性形成细胞(immunologically active poietic cell)的存活和/或增殖的蛋白质。其它有用的蛋白质在体外或体内刺激细胞中的定型红系祖细胞的分裂和分化。特定的蛋白质包括但不限于：白介素，如IL-2(包括重组IL-II(“rIL2”)和金丝雀痘IL-2)、IL-10、IL-12和IL-18；干扰素，如干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素α-n1、干扰素α-n3、干扰素β-I a和干扰素γ-I b；GM-CF和GM-CSF；和EPO。
在某些实施方案中，在四周或六周周期中的约五天期间以约1至约750mg/m2/天、约25至约500mg/m2/天、约50至约250mg/m2/天或约50至约200mg/m2/天范围内的量皮下施用GM-CSF、G-CSF、SCF或EPO。在某些实施方案中，以约60至约500mcg/m2的量经2小时静脉内施用或以约5至约12mcg/m2/天的量皮下施用GM-CSF。在某些实施方案中，初始可以约1mcg/kg/天的量皮下施用G-CSF并且可根据总粒细胞计数的上升进行调整。可以约300(在较小的患者中)或480mcg的量皮下施用G-CSF的维持剂量。在某些实施方案中，可每周3次以10,000单位的量皮下施用EPO。
可用于所述方法和组合物的特定蛋白质包括但不限于：非格司亭，其在美国以商品名销售(Amgen,Thousand Oaks,CA)；沙格司亭，其在美国以商品名销售(Immunex,Seattle,WA)；和重组EPO，其在美国以商品名销售(Amgen,Thousand Oaks,CA)。
可如第5,391,485；5,393,870；和5,229,496号美国专利中所述制备GM-CSF的重组和突变形式，所述专利均以引用的方式并入本文。可如第4,810,643；4,999,291；5,528,823；和5,580,755号美国专利中所述制备G-CSF的重组和突变形式，所述专利以全文引用的方式并入本文。
还提供与本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物相组合使用的是天然的、天然存在的和重组的蛋白质。进一步包括天然存在的蛋白质的突变体和衍生物(例如，修饰形式)，其在体内表现出它们所基于的蛋白质的至少一些药理学活性。突变体的实例包括但不限于具有一个或多个氨基酸残基的蛋白质，所述氨基酸残基不同于蛋白质的天然存在的形式中的相应残基。术语“突变体”还包括缺少通常以其天然存在的形式(例如，非糖基化形式)存在的碳水化合物部分的蛋白质。衍生物的实例包括但不限于聚乙二醇化衍生物和融合蛋白，如通过将IgG1或IgG3与所关注的蛋白质或蛋白质的活性部分融合而形成的蛋白质。参见例如Penichet,M.L.和Morrison,S.L.，J.Immunol.Methods 248：91-101(2001)。
可与本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物相组合使用的抗体包括单克隆和多克隆抗体。抗体的实例包括但不限于曲妥单抗利妥昔单抗贝伐单抗(AvastinTM)、帕妥珠单抗(OmnitargTM)、托西莫单抗依决洛单抗和G250。也可以将本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物与抗-TNF-α抗体和/或抗-EGFR抗体(举例如或帕尼单抗)组合或相组合使用。
可以抗癌疫苗的形式施用大分子活性剂。例如，分泌或引起分泌诸如IL-2、G-CSF和GM-CSF的细胞因子的疫苗可用于所提供的方法和药物组合物中。参见例如Emens,L.A.等人，Curr.Opinion Mol.Ther.3(1)：77-84(2001)。
为小分子的第二活性剂也可用于减轻与施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物相关的副作用。然而，与一些大分子一样，当与本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物一起(例如，之前、之后或同时)施用时，据信许多都能够提供协同作用。小分子第二活性剂的实例包括但不限于抗癌剂、抗生素、免疫抑制剂和类固醇。
在某些实施方案中，第二药剂是HSP抑制剂、蛋白酶体抑制剂、FLT3抑制剂或TOR激酶抑制剂。
要在本文描述的方法或组合物范围内使用的的抗癌剂的实例包括但不限于：阿西维辛；阿柔比星；盐酸阿考达唑；阿克罗宁；阿多来新；阿地白介素；六甲蜜胺；安波霉素；醋酸阿美蒽醌；安吖啶；阿那曲唑；安曲霉素；天冬酰胺酶；曲林菌素；阿扎胞苷；阿扎替派；阿佐霉素；巴马司他；苯佐替派；比卡鲁胺；盐酸比生群；二甲磺酸双萘法德；比折来新；硫酸博莱霉素；布喹那钠；溴匹立明；白消安；放线菌素；卡鲁睾酮；卡拉酰胺；卡贝替姆；卡铂；卡莫司汀；盐酸卡柔比星；卡折来新；西地芬戈；塞来昔布(COX-2抑制剂)；苯丁酸氮芥；西罗霉素；顺铂；克拉屈滨；氯法拉滨；甲磺酸克雷斯托；环磷酰胺；Ara-C；达卡巴嗪；更生霉素；盐酸柔红霉素；地西他滨；右奥马铂；地扎胍宁；甲磺酸地扎胍宁；地吖醌；多西紫杉醇；多柔比星；盐酸多柔比星；屈洛昔芬；柠檬酸屈洛昔芬；丙酸屈他雄酮；达佐霉素；依达曲沙；盐酸依氟乌氨酸；依沙芦星；恩洛铂；恩普氨酯；依匹哌啶；盐酸表柔比星；厄布洛唑；盐酸依索比星；雌莫司汀；磷酸雌莫司汀钠；依他硝唑；依托泊苷；磷酸依托泊苷；艾托卜宁；盐酸法曲唑；法扎拉滨；维甲酰酚胺；氟尿苷；磷酸氟达拉滨；氟尿嘧啶；氟西他滨；磷喹酮；佛司曲辛钠；吉西他滨；盐酸吉西他滨；羟基脲；盐酸伊达比星；异环磷酰胺；伊莫福新；异丙铂；伊立替康；盐酸伊立替康；醋酸兰瑞肽；来曲唑；醋酸亮丙瑞林；盐酸利阿唑；洛美曲塞钠；洛莫司汀；盐酸洛索蒽醌；马索罗酚；美登素；盐酸氮芥；醋酸甲地孕酮；醋酸美仑孕酮；美法仑；美诺立尔；巯嘌呤；甲氨蝶呤；甲氨蝶呤钠；氯苯氨啶；美妥替哌；米丁度胺；米托凯星(mitocarcin)；米托罗明(mitocromin)；米托洁林；米托马星；丝裂霉素；米托司培；米托坦；盐酸米托蒽醌；麦考酚酸；诺考达唑；诺加霉素；高三尖杉酯碱(omacetaxine)；奥马铂；奥昔舒仑；紫杉醇；培门冬酶；培利霉素；戊氮芥；硫酸培洛霉素；培磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；盐酸吡罗蒽醌；普卡霉素；普洛美坦；卟吩姆钠；泊非霉素；泼尼氮芥；盐酸丙卡巴肼；嘌呤霉素；盐酸嘌呤霉素；吡唑呋喃菌素；利波腺苷；沙芬戈；盐酸沙芬戈；司莫司汀；辛曲秦；索拉非尼；磷乙酰天冬氨酸钠(sparfosate sodium)；司帕霉素；盐酸锗螺铵；螺莫司汀；螺铂；链黑菌素；链佐星；磺氯苯脲；他利霉素；替可加兰钠；泰索帝；替加氟；盐酸替洛蒽醌；替莫泊芬；替尼泊苷；替罗昔隆；睾内酯；硫咪嘌呤；硫鸟嘌呤；塞替哌；噻唑呋林；替拉扎明；柠檬酸托瑞米芬；醋酸曲托龙；磷酸曲西瑞宾；三甲曲沙；葡糖醛酸三甲曲沙；曲普瑞林；盐酸妥布氯唑；尿嘧啶氮芥；乌瑞替哌；伐普肽；维替泊芬；硫酸长春碱；硫酸长春新碱；长春地辛；硫酸长春地辛；硫酸长春匹定；硫酸长春甘酯；硫酸长春罗新；酒石酸长春瑞滨；硫酸长春罗定；硫酸长春利定；伏氯唑；折尼铂；净司他丁；和盐酸佐柔比星。
要包括在所述方法或组合物范围内的其它抗癌药物包括但不限于：20-表-1,25二羟基维生素D3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龙；阿柔比星；酰基富烯(acylfulvene)；腺环戊醇；阿多来新；阿地白介素；ALL-TK拮抗剂；六甲蜜胺；氨莫司汀；2,4-二氯苯氧基乙酸(amidox)；氨磷汀；氨基乙酰丙酸；氨柔比星；安吖啶；阿那格雷；阿那曲唑；穿心莲内酯；血管生成抑制剂；拮抗剂D；拮抗剂G；安雷利克斯；抗背部化形成蛋白-1；前列腺癌抗雄激素；抗雌激素；抗瘤酮；反义寡核苷酸；甘氨酸阿非迪霉素；细胞凋亡基因调节剂；细胞凋亡调节剂；脱嘌呤核酸；ara-CDP-DL-PTBA；精氨酸脱氨酶；阿舒拉林；阿他美坦；阿莫司汀；海洋环肽1；海洋环肽2；海洋环肽3；阿扎司琼；阿扎毒素；重氮酪氨酸；浆果赤霉素III衍生物；巴拉诺；巴马司他；BCR/ABL拮抗剂；苯并二氢卟酚；苯甲酰星孢菌素；β-内酰胺衍生物；β-阿立辛；贝拉霉素B(betaclamycin B)；桦木酸；bFGF抑制剂；比卡鲁胺；比生群；双吖丙啶基精胺；双萘法德；双曲群A；比折来新；比锐来特；溴匹立明；布朵替坦；丁硫氨酸亚砜胺；钙泊三醇；卡弗他丁C；喜树碱衍生物；卡培他滨；甲酰胺-氨基-三唑；羧基酰胺基三唑；CaRest M3；CARN 700；软骨源抑制剂；卡折来新；酪蛋白激酶抑制剂(ICOS)；栗精胺；天蚕素B；西曲瑞克；绿素类(chlorlns)；氯喹喔啉磺酰胺；西卡前列素；顺卟啉；克拉屈滨；克罗米芬类似物；克霉唑；克里霉素A；克里霉素B；考布他汀A4；考布他汀类似物；康纳京尼；卡那贝西汀816；克雷斯托；念珠藻素8；念珠藻素A衍生物；卡拉新A；环戊蒽醌；环普兰姆；西匹霉素；Ara-C烷磷酯；溶细胞因子；磷酸己烷雌酚；达昔单抗；地西他滨；去氢膜海鞘素B；地洛瑞林；地塞米松；右异环磷酰胺；右雷佐生；右维拉帕米；地吖醌；膜海鞘素B；地多西；二乙基降精胺；二氢-5-氮杂胞苷；二氢紫杉醇,9-；二恶霉素；二苯基螺莫司汀螺莫司汀；多西紫杉醇；二十二烷醇；；多拉司琼；脱氧氟尿苷；多柔比星；屈洛昔芬；屈大麻酚；度卡霉素SA；依布硒啉；依考莫司汀；依地福新；依决洛单抗；依洛尼塞；揽香烯；乙嘧替氟；表柔比星；爱普列特；雌莫司汀类似物；雌激素激动剂；雌激素拮抗剂；依他硝唑；磷酸依托泊苷；依西美坦；法曲唑；法扎拉滨；维甲酰酚胺；非格司亭；非那雄胺；夫拉平度；氟卓斯汀；夫斯特隆；氟达拉滨；盐酸氟道诺霉素；伏芬尼美司；福美司坦；福司曲星；福莫司汀；钆德卟啉；硝酸镓；加洛他滨；加尼瑞克；明胶酶抑制剂；吉西他滨；谷胱甘肽抑制剂；亥舒凡(hepsulfam)；调蛋白；六亚甲基双乙酰胺；金丝桃素；伊班膦酸；伊达比星；艾多昔芬；伊决孟酮；伊莫福新；伊洛马司他；伊马替尼(例如，)；咪喹莫特；免疫刺激肽；胰岛素样生长因子-1受体抑制剂；干扰素激动剂；干扰素；白介素；碘苄胍；碘代多柔比星；甘薯苦醇,4-；伊罗普拉；伊索拉啶；异苯胍唑；异高软海绵素B；伊他司琼；杰斯普拉克立德；卡拉立德F；三醋酸片螺素-N；兰瑞肽；雷那霉素；来格司亭；硫酸香菇多糖；立托斯坦汀(leptolstatin)；来曲唑；白血病抑制因子；白细胞α干扰素；亮丙立德+雌激素+孕酮；亮丙瑞林；左旋咪唑；利阿唑；线性多胺类似物；亲脂性二糖肽；亲脂铂化合物；立索克林酰胺7；洛铂；蚯蚓磷脂；洛美曲索；氯尼达明；洛索蒽醌；洛索立宾；勒托替康；镥德卟啉；立索茶碱；裂解肽；美坦新；麦洛坦汀A；马立马斯他；马索罗酚；乳腺丝抑蛋白(maspin)；基质溶解因子抑制剂；基质金属蛋白酶抑制剂；美诺立尔；麦尔巴隆(Merbarone)；美替瑞林(Meterelin)；甲硫氨酸酶(Methioninase)；甲氧氯普胺；MIF抑制剂；米非司酮；米替福新；米立司亭；米托胍腙；二溴卫矛醇；丝裂霉素类似物；米托萘胺；迈托毒素成纤维细胞生长因子-皂草素；米托蒽醌；莫法罗汀；莫拉司亭；爱必妥，人绒毛膜促性腺激素；单磷酰脂质A+分枝杆菌细胞壁sk；莫哌达醇；芥子抗癌剂；美卡普罗B；分枝杆菌细胞壁提取物；美瑞泡仁；N-乙酰地那林(N-acetyldinaline)；N-取代苯甲酰胺；那法瑞林；纳格瑞替(nagrestip)；纳洛酮+喷他佐辛；纳普维(napavin)；萘特非(naphterpin)；那托司亭；奈达铂；奈莫柔比星；奈立膦酸；尼鲁米特；尼沙霉素；一氧化氮调节剂；硝基氧抗氧化剂；里挫林(nitrullyn)；奥利默森O6-苄基鸟嘌呤；奥曲肽；奥克恩(okicenone)；寡核苷酸；奥那司酮；昂丹司琼；昂丹司琼；奥拉新(oracin)；口服细胞因子诱导剂；奥马铂；奥沙特隆；奥沙利铂；厄诺霉素；紫杉醇；紫杉醇类似物；紫杉醇衍生物；帕劳胺(palauamine)；棕榈酰根霉素；帕米膦酸；人参炔三醇；帕诺米芬；副细菌素(parabactin)；帕折普汀；培门冬酶；培得星；戊聚糖多硫酸钠；喷司他丁；喷托唑(pentrozole)；全氟溴烷；培磷酰胺；紫苏子醇；苯连氮霉素(phenazinomycin)；醋酸苯酯；磷酸酶抑制剂；皮西巴尼(picibanil)；盐酸匹罗卡品；吡柔比星；吡曲克辛；胎盘素A；胎盘素B；纤溶酶原激活物抑制剂；铂络合物；铂化合物；铂-三胺络合物；卟吩姆钠；泊非霉素；强的松；丙基双吖啶酮；前列腺素J2；蛋白酶体抑制剂；基于蛋白A的免疫调节剂；蛋白激酶C抑制剂；蛋白激酶C抑制剂，微藻；蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂；嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂；红紫素；吡唑并吖啶；吡哆醛化血红蛋白聚氧乙烯缀合物；raf拮抗剂；雷替曲塞；雷莫司琼；ras法尼基蛋白转移酶抑制剂；ras抑制剂；ras-GAP抑制剂；去甲基化瑞替普汀；依替膦酸铼Re l86；根霉素；核酶；RII维甲酰胺；罗希吐碱；罗莫肽；罗喹美克；卢比格酮B1；卢伯西(ruboxyl)；沙芬戈；圣特平(saintopin)；SarCNU；肌肉叶绿醇A；沙格司亭；Sdi 1模拟物；司莫司汀；衰老源性抑制剂1；正义寡核苷酸；信号转导抑制剂；西佐喃；索布佐生；硼卡钠；苯基醋酸钠；索佛罗(solverol)；生长调节素结合蛋白；索纳明；斯帕福斯酸(sparfosic acid)；斯卡霉素D；螺莫司汀；斯耐潘定；软海绵素1；角鲨胺；斯替皮米德(stipiamide)；溶基质素抑制剂；索非罗新(sulfinosine)；超活性血管活性肠肽拮抗剂；磺化偏端霉素(suradista)；苏拉明；苦马豆素；他莫司汀；甲碘化他莫昔芬；牛黄莫司汀；他扎罗汀；替可加兰钠；替加氟；替鲁里姆(tellurapyrylium)；端粒酶抑制剂；替莫泊芬；替尼泊苷；十氧化四氯；替唑明(tetrazomine)；噻立拉斯汀(thaliblastine)；噻考瑞林(thiocoraline)；血小板生成素；血小板生成素模拟物；胸腺法新；胸腺生成素受体激动剂；胸腺曲南；促甲状腺激素；锡乙基初卟啉(tinethyl etiopurpurin)；替拉扎明；二氯二茂钛；托普升替(topsentin)；托瑞米芬；翻译抑制剂；维甲酸；三乙酰基尿苷；曲西立滨；三甲曲沙；曲普瑞林；托烷司琼；妥罗雄脲；酪氨酸激酶抑制剂；替伏汀(tyrphostin)；UBC抑制剂；乌苯美司(ubenimex)；尿生殖窦源性生长抑制因子；尿激酶受体拮抗剂；伐普肽；凡瑞林B；维拉雷琐；藜芦胺；凡啶(verdin)；维替泊芬；长春瑞滨；维萨汀(vinxaltine)；维他欣(vitaxin)；伏氯唑；扎诺特隆；折尼铂；亚苄维C(zilascorb)；和净司他丁斯酯。
特别适应于所述方法或组合物中的具体的第二活性剂包括但不限于利妥昔单抗、奥利默森英利昔单抗、多西紫杉醇、塞来昔布、美法仑、地塞米松类固醇、吉西他滨、顺铂、替莫唑胺、依托泊苷、环磷酰胺、替莫唑胺、卡铂、丙卡巴肼、格列奈、他莫昔芬、拓扑替康、甲氨蝶呤、紫杉醇、泰索帝、氟尿嘧啶、亚叶酸、伊立替康、希罗达、CPT-11、干扰素α、聚乙二醇化干扰素α(例如，PEG INTRON-A)、卡培他滨、顺铂、塞替哌、氟达拉滨、卡铂、脂质体柔红霉素、Ara-C、多西他赛、紫杉醇、长春碱、IL-2、GM-CSF、达卡巴嗪、长春瑞滨、唑来膦酸、帕米膦酸盐(palmitronate)、克拉霉素、白消安、双膦酸盐、泼尼松、双膦酸盐、三氧化二砷、长春新碱、多柔比星紫杉醇、更昔洛韦、阿霉素、雌莫司汀磷酸钠苏灵大和依托泊苷。
在本文提供的方法的某些实施方案中，本领域技术人员在认为适当的情况下可以在施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物期间或之后不久改变或延迟与本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物相组合的第二活性剂的使用。在某些实施方案中，当适当时，单独或与其它疗法相组合施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的受试者可接受包括止吐剂、骨髓生长因子和血小板输注在内的支持性护理。在一些实施方案中，根据本领域技术人员的判断，施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物的受试者可施用生长因子作为第二活性剂。在一些实施方案中，提供的是与红细胞生成素或达泊匹丁(Aranesp)相组合施用本文提供的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对患有局部晚期或转移性移行细胞膀胱癌的患者与吉西他滨和顺铂一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与如下的第二活性成分相组合施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物：对患有复发性或进行性脑肿瘤或复发的成神经细胞瘤的儿科患者施用替莫唑胺；对于复发性或进行性CNS癌症施用塞来昔布、依托泊苷和环磷酰胺；对患有复发的或进行性脑膜瘤、恶性脑膜瘤、血管外皮细胞瘤、多发性脑转移瘤、复发性脑肿瘤或新诊断的多形性成胶质细胞瘤的患者施用替莫唑胺；对患有复发的成胶质细胞瘤的患者施用伊立替康；对患有脑干胶质瘤的儿科患者施用卡铂；对患有进行性恶性胶质瘤的儿科患者施用丙卡巴肼；对患有预后不良恶性脑肿瘤、新诊断或复发的多形性成胶质细胞瘤的患者施用环磷酰胺；对于高度复发的恶性胶质瘤施用对于间变性星形细胞瘤施用替莫唑胺和他莫昔芬；或者对于胶质瘤、成胶质细胞瘤、间变性星形细胞瘤或间变性少突神经胶质瘤施用拓扑替康。
在某些实施方案中，对患有转移性乳腺癌的患者与甲氨蝶呤、环磷酰胺、紫杉烷、abraxane、拉帕替尼、赫赛汀、芳香酶抑制剂、选择性雌激素调节剂、雌激素受体拮抗剂和/或PLX3397(Plexxikon)一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对患有神经内分泌肿瘤的患者与替莫唑胺一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对患有复发的或转移性头或颈部癌的患者与吉西他滨一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对患有胰腺癌的患者与吉西他滨一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与阿伐他汀、紫杉醇和/或泰索帝相组合对患有结肠癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对患有难治性结肠直肠癌的患者或一线治疗失败或在结肠或直肠腺癌中表现差的患者与卡培他滨和/或PLX4032(Plexxikon)一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对患有Dukes C&D结肠直肠癌的患者或者对先前已治疗转移性结肠直肠癌的患者与氟尿嘧啶、亚叶酸和伊立替康相组合施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与卡培他滨、希罗达和/或CPT-11相组合对患有难治性结肠直肠癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对患有难治性结肠直肠癌的患者或者对患有不可切除的或转移性结直肠癌的患者与卡培他滨和伊立替康一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，单独或与干扰素α或卡培他滨相组合对患有不可切除或转移性肝细胞癌的患者；或者与顺铂和塞替哌相组合对患有原发性或转移性肝癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与聚乙二醇化干扰素α相组合对患有卡波西氏肉瘤的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与氟达拉滨、卡铂和/或拓扑替康相组合对患有难治性或复发性或高危急性骨髓性白血病的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与脂质体柔红霉素、拓扑替康和/或阿糖胞苷相组合对患有不利核型急性粒细胞性白血病的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与吉西他滨、紫杉醇、埃罗替尼、吉非替尼和/或伊立替康相组合对患有非小细胞肺癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与卡铂和伊立替康相组合对患有非小细胞肺癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，对先前已经用carbo/VP 16和放射疗法治疗的患有非小细胞肺癌的患者与多西他赛一起施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与卡铂和/或泰索帝相组合或者与卡铂、紫杉醇和/或胸部放射疗法相组合对患有非小细胞肺癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与泰索帝相组合对患有IIIB或IV期非小细胞肺癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与奥利默森相组合对患有小细胞肺癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与ABT-737(Abbott Laboratories)和/或obatoclax(GX15-070)相组合对患有淋巴瘤及其它血癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，单独或与诸如长春碱或氟达拉滨的第二活性成分相组合对患有各种类型的淋巴瘤(包括但不限于霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、皮肤B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤或复发性或难治性低度滤泡性淋巴瘤)的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与泰索帝、IL-2、IFN、GM-CSF、PLX4032(Plexxikon)和/或达卡巴嗪相组合对患有各种类型或阶段的黑素瘤的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，单独或与长春瑞滨相组合对有胸膜植入物或恶性胸腔积液间皮瘤综合征的患有恶性间皮瘤或IIIB期非小细胞肺癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与地塞米松、唑来膦酸、帕米膦酸盐、GM-CSF、甲红霉素(biaxin)、长春碱、美法仑、白消安、环磷酰胺、IFN、帕米膦酸盐、泼尼松、双膦酸盐、塞来昔布、三氧化二砷、PEG INTRON-A、长春新碱或其组合相组合对患有各种类型或阶段的多发性骨髓瘤的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与多柔比星长春新碱和/或地塞米松相组合对患有复发性或难治性多发性骨髓瘤的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与紫杉醇、卡铂、多柔比星、吉西他滨、顺铂、希罗达、紫杉醇、地塞米松或其组合相组合对患有各种类型或阶段的卵巢癌(如腹膜癌、乳头状浆液性癌、难治性卵巢癌或复发的卵巢癌)的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与希罗达、5FU/LV、吉西他滨、伊立替康加吉西他滨、环磷酰胺、长春新碱、地塞米松、GM-CSF、塞来昔布、泰索帝、更昔洛韦、紫杉醇、阿霉素、多西紫杉醇、雌莫司汀、Emcyt、denderon或其组合相组合对患有各种类型或阶段的前列腺癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与卡培他滨、IFN、他莫昔芬、IL-2、GM-CSF、或其组合相组合对患有各种类型或阶段的肾细胞癌的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与IFN、诸如的COX-2抑制剂和/或苏灵大相组合对患有各种类型或阶段的妇科子宫或软组织肉瘤癌症的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与西乐葆、依托泊苷、环磷酰胺、多西紫杉醇、阿哌沙班、IFN、他莫昔芬、IL-2、GM-CSF或其组合相组合对患有各种类型或阶段的实体肿瘤的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在某些实施方案中，与西乐葆、依托泊苷、环磷酰胺、多西紫杉醇、阿哌沙班、IFN、他莫昔芬、IL-2、GM-CSF或其组合相组合对患有硬皮病或皮肤血管炎的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
本文还包括增加可安全且有效地对患者施用的抗癌药物或药剂的剂量的方法，其包括对患者(例如，人)施用或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。可受益于此方法的患者是那些苦于与治疗皮肤、皮下组织、淋巴结、脑、肺、肝、骨、肠、结肠、心脏、胰腺、肾上腺、肾、前列腺、乳腺、结直肠或其组合的特定癌症的抗癌药物相关的副作用的患者。施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，减轻或降低了如此严重的副作用，不然抗癌药物的量将受到限制。
在一个实施方案中，在出现与对患者施用抗癌药物相关的副作用之前、期间或之后口服且每日以约0.1至约150mg、约1至约50mg或约2至约25mg范围内的量施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。在某些实施方案中，与诸如肝素、阿司匹林、香豆素或G-CSF的特定药剂相组合施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，以避免与抗癌药物相关的副作用，如但不限于中性粒细胞减少症或血小板减少症。
在一个实施方案中，与另外的活性成分(包括但不限于抗癌药物、抗炎药、抗组胺药、抗生素和类固醇)相组合对患有与不良的血管生成相关或特征在于不良的血管生成的疾病和病症的患者施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在另一实施方案中，本文包括治疗、预防和/或控制癌症的方法，其包括与包括但不限于外科手术、免疫疗法、生物疗法、放射疗法或目前用于治疗、预防或控制癌症的其它非基于药物的疗法的常规疗法协作(例如，在其之前、期间或之后)施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。组合使用本文提供的化合物和常规疗法可在某些患者中提供出乎意料有效的独特治疗方案。不受理论的限制，据信当与常规疗法并行给药时，式I的化合物可提供附加或协同作用。
如本文他处所讨论的那样，本文包括减少、治疗和/或预防与包括但不限于外科手术、化学疗法、放射疗法、激素疗法、生物疗法和免疫疗法的常规疗法相关的副作用或不良作用的方法。可在出现与常规疗法相关的副作用之前、期间或之后对患者施用本文提供的化合物(例如，式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物)及其它活性成分。
在一个实施方案中，可在采用常规疗法之前、期间或之后以约0.1至约150mg、约1至约25mg或约2至约10mg范围内的量口服且每日单独或与本文公开的第二活性剂(参见，例如第5.4节)相组合施用式I的化合物。
在某些实施方案中，对先前用carbo/VP 16和放射疗法治疗的患有非小细胞肺癌的患者施用本文提供的化合物(例如，式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物)和多西他赛。
C-2.与移植疗法一起使用
本文提供的式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物可用于降低移植物抗宿主病(GVHD)的风险。因此，本文包括治疗、预防和/或控制癌症的方法，其包括与移植疗法协作施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
本领域普通技术人员都知道，癌症的治疗通常以疾病的阶段和机理为基础。例如，由于在癌症的某些阶段发生不可避免的白血病转化，可能有必要进行外周血干细胞、造血干细胞制备物或骨髓的移植。组合使用本文提供的式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物和移植疗法提供了独特且出乎意料的协同作用。特别地，式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物显示出免疫调节活性，当在癌症患者中与移植疗法并行给药时，这可提供附加或协同作用。
式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物可与移植疗法相组合起作用，减少与移植的侵入性程序相关的并发症和GVHD的风险。本文包括治疗、预防和/或控制癌症的方法，其包括在脐带血、胎盘血、外周血干细胞、造血干细胞制备物或骨髓的移植之前、期间或之后对患者(例如，人)施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。第7,498,171号美国专利中公开了适合用于本文提供的方法的干细胞的一些实例，该专利的公开内容以全文引用的方式并入本文。
在一个实施方案中，在自体外周血祖细胞的移植之前、期间或之后对患有多发性骨髓瘤的患者施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
在一个实施方案中，在自体外周血祖细胞的移植之前、期间或之后对患有NHL(例如，DLBCL)的患者施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。
C-3.周期疗法
在某些实施方案中，对患者周期性地施用本文提供的预防或治疗剂。周期疗法涉及施用活性剂一段时间，接着休止一段时间，并重复这种顺序施用。周期疗法可减少对一种或多种疗法产生抗性、避免或降低疗法之一的副作用和/或提高治疗的功效。
因此，在某些实施方案中，按四至六周的周期，休止期为约一周或两周，以单次或分次剂量每日施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物。周期方法进一步允许增加给药周期的频率、次数和长度。因此，本文在某些实施方案中包括施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其施用的周期数比当其单独施用时的典型周期数多。在某些实施方案中，施用本文提供的化合物，例如式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，其施用的周期次数比通常将在还没施用第二活性成分的患者中引起剂量限制性毒性的周期次数多。
在一个实施方案中，以约0.1至约150mg/d的剂量持续三或四周每日且连续地施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物，接着中断一或两周。
在另一实施方案中，在四至六周的周期期间口服施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物和第二活性成分，式I的化合物的施用在第二活性成分之前30至60分钟进行。在某些实施方案中，通过在每一周期经约90分钟静脉内输注施用式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物和第二活性成分的组合。在某些实施方案中，一个周期包括持续三至四周每日施用约0.1至约150mg/天的式I的化合物或其对映异构体或对映异构体的混合物，或其药学上可接受的盐、溶剂合物、水合物、共晶体、包合物或多晶型物和约50至约200mg/m2/天的第二活性成分，然后休止一周或两周。在某些实施方案中，对患者施用组合治疗期间的周期次数在约一至约24个周期、约二至约16个周期或约四至约三个周期范围内。
D.患者群体
在本文提供的方法的某些实施方案中，受试者是动物，优选哺乳动物，更优选非人灵长类动物。在具体的实施方案中，受试者是人。受试者可以是男性或女性受试者。
特别适用于本文提供的方法的受试者包括人癌症患者，例如已经诊断为患有白血病的那些，包括急性骨髓性白血病、急性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病和慢性骨髓性白血病。在某些实施方案中，受试者尚未被诊断为患有急性前髓细胞性白血病。
在一些实施方案中，受试者具有高于正常的胚胞(blast)群体。在一些实施方案中，受试者具有至少10％的胚胞群体。在一些实施方案中，受试者具有10％与15％之间的胚胞群体。在一些实施方案中，受试者具有至少15％的胚胞群体。在一些实施方案中，受试者具有15％与20％之间的胚胞群体。在一些实施方案中，受试者具有至少20％的胚胞群体。在一些实施方案中，受试者具有约10-15％、约15-20％或约20-25％的胚胞群体。在其它实施方案中，受试者具有不到10％的胚胞群体。在本文描述的方法的背景下，具有不到10％的胚胞群体的适用受试者包括由于任何原因根据本领域技术人员判断需要用本文提供的化合物单独或与第二活性剂相组合治疗的那些受试者。
在一些实施方案中，基于受试者针对白血病的美国东部肿瘤协作组(ECOG)表现状态评分来治疗受试者。可以按0至5的标度对ECOG表现状态进行评分，0表示无症状；1表示有症状但完全能走动；2表示有症状且在一天期间<50％卧床；3表示有症状且>50％卧床，但不是离不开床；4表示离不开床；且5表示死亡。在一些实施方案中，受试者具有0或1的ECOG表现状态评分。在一些实施方案中，受试者的ECOG表现状态评分为0。在一些实施方案中，受试者的ECOG表现状态评分为1。在其它实施方案中，受试者的ECOG表现状态评分为2。
在某些实施方案中，本文提供的方法包括治疗先前尚未针对白血病进行治疗的受试者。在一些实施方案中，受试者尚未经历同种异体骨髓移植。在一些实施方案中，受试者尚未经历干细胞移植。在一些实施方案中，受试者尚未接受羟基脲治疗。在一些实施方案中，受试者尚未针对白血病用任何试验制品进行治疗。在一些实施方案中，受试者尚未用全身性糖皮质激素进行治疗。
在其它实施方案中，所述方法包括治疗先前已针对白血病治疗过或目前正针对白血病进行治疗的受试者。例如，受试者可先前已针对白血病用标准治疗方案治疗过或目前正针对白血病用标准治疗方案进行治疗。受试者可已经用本领域技术人员已知的任何标准白血病治疗方案治疗过。在某些实施方案中，受试者先前已经用至少一种诱导/再诱导或巩固AML方案治疗过。在一些实施方案中，受试者已经历自体骨髓移植或干细胞移植作为巩固方案的一部分。在一些实施方案中，在根据本文提供的方法治疗之前至少3个月进行骨髓或干细胞移植。在一些实施方案中，受试者已经历羟基脲治疗。在一些实施方案中，羟基脲治疗不晚于根据本文提供的方法治疗之前24小时。在一些实施方案中，受试者已经历先前采用阿糖胞苷(Ara-C)的诱导或巩固治疗。在一些实施方案中，受试者已经历采用全身性糖皮质激素的治疗。在一些实施方案中，糖皮质激素治疗的进行不晚于根据本文描述的方法治疗之前24小时。在其它实施方案中，所述方法包括治疗先前已针对癌症治疗过但对标准疗法无反应的受试者。
还包括治疗患有复发性或难治性白血病的受试者的方法。在一些实施方案中，受试者已被诊断为患有由世界卫生组织(WHO)定义的复发性或难治性AML亚型。复发性或难治性疾病可以是新发性AML或继发性AML，例如治疗相关的AML(t-AML)。
在一些实施方案中，本文提供的方法用于治疗抗药性白血病，如慢性骨髓性白血病(CML)。因此，用本文提供的化合物治疗可为对其它治疗方法不反应的患者提供替代方案。在一些实施方案中，这类其它治疗方法包括用(甲磺酸伊马替尼)治疗。在一些实施方案中，本文提供治疗费城染色体阳性慢性骨髓性白血病(Ph+CML)的方法。在一些实施方案中，本文提供治疗(甲磺酸伊马替尼)抗性费城染色体阳性慢性骨髓性白血病(Ph+CML)的方法。
还包括不考虑受试者的年龄治疗受试者的方法，虽然一些疾病或病症在某些年龄组中更常见。在一些实施方案中，受试者至少18岁。在一些实施方案中，受试者超过18、25、35、40、45、50、55、60、65或70岁。在其它实施方案中，受试者不到65岁。在一些实施方案中，受试者不到18岁。在一些实施方案中，受试者不到18、15、12、10、9、8或7岁。
在一些实施方案中，所述方法可应用于年龄至少50岁的受试者，虽然更年轻的受试者同样可受益于所述方法。在其它实施方案中，受试者年龄至少55岁、至少60岁、至少65岁和至少70岁。在另一实施方案中，受试者具有不利的细胞遗传学。“不利的细胞遗传学”定义为任何非二倍体核型或者大于或等于3个染色体异常。在另一实施方案中，受试者年龄至少60岁且具有不利的细胞遗传学。在另一实施方案中，受试者年龄60-65岁且具有不利的细胞遗传学。在另一实施方案中，受试者年龄65-70岁且具有不利的细胞遗传学。
在某些实施方案中，治疗的受试者在根据本文提供的方法治疗的三个月内没有心肌梗死的病史。在一些实施方案中，受试者在根据本文提供的方法治疗的三个月内没有脑血管意外或短暂性脑缺血发作的病史。在一些实施方案中，受试者在根据本文提供的方法治疗的28天内没有遭受任何血栓栓塞事件，包括深静脉血栓形成或肺栓塞。在其它实施方案中，受试者尚未经历或未经历不受控制的弥散性血管内凝血。
因为患有癌症的受试者具有多样化的临床表现和不同的临床结果，所以给予患者的治疗可根据他/她的预后而有所不同。熟练的临床医生将能够在无需过度实验的情况下很容易地确定出可有效用于治疗患有癌症的个体受试者的具体次要药剂、外科手术的类型和非基于药物的标准疗法的类型。
要理解的是，本文设想了本文提供的化合物与一种或多种前述化合物和任选一种或多种进一步的药理学活性物质的每种合适的组合。
E.药物组合物的制剂
本文提供的药物组合物含有治疗有效量的一种或多种本文提供的化合物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
可将化合物配制成药物制剂，如溶液、悬浮液、片剂、分散片、丸剂、胶囊、粉末、缓释制剂或酏剂，用于口服施用，或在无菌溶液或悬浮液中，用于眼部或肠胃外施用，以及透皮贴片制剂和干粉吸入剂。通常采用本领域中熟知的技术和程序将上述化合物配制成药物组合物(参见例如，Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms，第七版，1999年)。
在组合物中，将有效浓度的一种或多种化合物或药学上可接受的盐与合适的药物载体或媒介物混合。在某些实施方案中，组合物中化合物的浓度对于递送在施用后治疗、预防或减轻包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的一种或多种症状和/或进展的量是有效的。
通常，将组合物配制成用于单次剂量施用。为配制组合物，以能使被治疗的病状得到缓解或减轻的有效浓度将化合物的重量分数溶解、悬浮、分散或以其它方式混合在选定的媒介物中。适合用于施用本文提供的化合物的药物载体或媒介物包括本领域技术人员已知适合用于特定施用模式的任何这类载体。
此外，可将化合物配制为组合物中唯一的药物活性成分，或者可将其与其它活性成分组合。包括诸如肿瘤靶向脂质体的组织靶向脂质体在内的脂质体悬浮液也可适合作为药学上可接受的载体。这些可根据本领域技术人员已知的方法进行制备。例如，可如本领域中已知的那样制备脂质体制剂。简言之，可通过在烧瓶的内部上干燥卵磷脂酰胆碱和脑磷脂酰丝氨酸(7:3摩尔比)来形成诸如多层囊泡(MLV)的脂质体。添加本文提供的化合物在没有二价阳离子的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的溶液并摇动烧瓶，直到脂质膜分散。洗涤所得囊泡以除去未包封的化合物，通过离心丸粒化并然后再悬浮于PBS中。
使活性化合物包括在药学上可接受的载体中，其量足以在对治疗的患者没有不可取的副作用的情况下发挥治疗上有用的作用。可通过在本文描述的体外和体内系统中测试化合物并然后由其外推用于人的剂量来经验性地确定治疗有效浓度。
药物组合物中活性化合物的浓度将取决于活性化合物的吸收、组织分布、失活和排泄速率、化合物的物理化学特性、给药方案和施用量以及本领域技术人员已知的其它因素。例如，递送的量足以减轻包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的一种或多种症状。
在某些实施方案中，治疗有效剂量应产生约0.1ng/mL至约50-100μg/mL的活性成分的血清浓度。在一个实施方案中，药物组合物提供每天每千克体重约0.001mg至约2000mg化合物的剂量。制备药物剂量单位形式以提供每剂量单位形式约1mg至约1000mg以及在某些实施方案中约10至约500mg基本活性成分或基本活性成分的组合。
可将活性成分按一次施用，或者可将其分成许多较小的剂量以按时间间隔施用。要理解的是，治疗的精确剂量和持续时间视所治疗的疾病而定，并且可采用已知的测试方案或通过由体内或体外测试数据外推来经验性地确定。要指出的是，浓度和剂量值也可随要缓解的病状的严重程度而变化。进一步要理解的是，对于任何特定的受试者，应根据个体需要和施用或指导施用组合物的人员的专业判断来随时间调整具体的给药方案，且本文提出的浓度范围仅是示例性的，并不旨在限制所要求保护的组合物的范围或实施。
因此，将有效浓度或量的一种或多种本文描述的化合物或其药学上可接受的盐与用于全身、外用或局部施用的合适药物载体或媒介物混合以形成药物组合物。以有效用于减轻一种或多种症状或用于治疗、延迟进展或预防的量包括化合物。组合物中活性化合物的浓度将取决于活性化合物的吸收、组织分布、失活、排泄速率、给药方案、施用量、具体制剂以及本领域技术人员已知的其它因素。
旨在通过包括但不限于口服、肠胃外、经直肠、外用和局部的合适途径施用组合物。对于口服施用，可配制胶囊和片剂。组合物呈液体、半液体或固体形式，并且以适合每种施用途径的方式进行配制。
用于肠胃外、皮内、皮下或外用施加的溶液或悬浮液可包括任何以下组分：无菌稀释剂，如注射用水、盐水溶液、固定油、聚乙二醇、甘油、丙二醇、二甲基乙酰胺或其它合成溶剂；抗微生物剂，如苯甲醇和对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，如抗坏血酸和亚硫酸氢钠；螯合剂，如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲剂，如乙酸盐、柠檬酸盐和磷酸盐；和用于调节张力的试剂，如氯化钠或右旋糖。肠胃外制剂可封装在安瓿、笔、一次性注射器或由玻璃、塑料或其它合适材料制成的单次或多次剂量小瓶中。
在其中化合物显示出溶解度不足的情况下，可采用使化合物增溶的方法。这类方法是本领域技术人员已知的，并且包括但不限于使用诸如二甲基亚砜(DMSO)的共溶剂、使用诸如的表面活性剂或在碳酸氢钠水溶液中溶解。
在混合或添加化合物后，所得混合物可以是溶液、悬浮液、乳液等。所得混合物的形式取决于许多因素，包括预期的施用模式和化合物在选定载体或媒介物中的溶解度。有效浓度足以减轻所治疗的疾病、病症或病状的症状，并且可经验性地予以确定。
提供药物组合物用于以含有合适量的化合物或其药学上可接受的盐的诸如片剂、胶囊、丸剂、粉末、颗粒、无菌肠胃外溶液或悬浮液和口服溶液或悬浮液以及油水乳液的单位剂型对人和动物施用。以单位剂型或多剂型配制和施用药学治疗活性化合物及其盐。如本文所用的单位剂型是指适合人和动物受试者并且如本领域中已知的那样单独包装的物理上不连续的单位。每个单位剂量含有与所需的药物载体、媒介物或稀释剂相关联的足以产生所需治疗效果的预定量的治疗活性化合物。单位剂型的实例包括安瓿和注射器以及单独包装的片剂或胶囊。单位剂型可按其分数或倍数施用。多剂型是包装在单个容器中待以分离的单位剂型施用的多个相同的单位剂型。多剂型的实例包括片剂或胶囊的小瓶、瓶或品脱或加仑的瓶。因此，多剂型是未在包装中分离的单位剂量的倍数。
也可制备缓释制剂。缓释制剂的合适实例包括含有本文提供的化合物的固体疏水性聚合物的半透性基质，所述基质呈成形制品的形式，例如膜或微胶囊。缓释基质的实例包括离子电渗贴片、聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚丙交酯、L-谷氨酸和L-谷氨酸乙酯的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、诸如LUPRON DEPOTTM的可降解乳酸-乙醇酸共聚物(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。虽然诸如乙烯-乙酸乙烯酯和乳酸-乙醇酸的聚合物使得能够释放分子超过100天，但某些水凝胶释放蛋白质时间段较短。当包封的化合物长时间在体内保留时，它们可能会由于在37℃下暴露于水分而变性或聚集，导致失去生物活性并且有可能改变其结构。可根据所涉及的作用机理设计用于稳定化的合理策略。例如，如果发现聚集机理是通过硫代-二硫化物互换的分子间S--S键形成，则可通过修饰巯基残基、自酸性溶液冻干、控制水分含量、使用适当的添加剂和产生特定的聚合物基质组合物来实现稳定化。
可制备含有0.005％至100％范围内的活性成分且余量由无毒载体组成的剂型或组合物。对于口服施用，通过掺入任何通常使用的赋形剂形成药学上可接受的无毒组合物，所述赋形剂举例如药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、纤维素衍生物、交联羧甲纤维素钠、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁或糖精钠。这类组合物包括溶液、悬浮液、片剂、胶囊、粉末和缓释制剂，如但不限于植入物和微胶囊化递送系统以及生物可降解的生物相容性聚合物，如胶原、乙烯乙酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、聚原酸酯、聚乳酸等。制备这些组合物的方法是本领域技术人员已知的。设想的组合物可含有约0.001％100％的活性成分，在某些实施方案中约0.1 85％或约75-95％。
可以与载体一起制备活性化合物或药学上可接受的盐，载体防范化合物从体内的快速消除，如延时释放制剂或包衣。
组合物可包括其它活性化合物以获得所需的性质组合。也可为治疗或预防目的与一般领域中已知在治疗上文提到的一种或多种疾病或医学病状(如与氧化应激有关的疾病)方面有价值的别的药理学药剂一起有利地施用本文提供的化合物或如本文描述的其药学上可接受的盐。要理解的是，这种组合疗法构成本文提供的组合物和治疗方法的进一步的方面。
本文提供的无乳糖组合物可含有本领域中熟知并列于例如美国药典(USP)SP(XXI)/NF(XVI)中的赋形剂。一般来说，无乳糖组合物含有活性成分、粘结剂/填充剂以及药学上相容和药学上可接受量的润滑剂。示例性无乳糖剂型含有活性成分、微晶纤维素、预胶化淀粉和硬脂酸镁。
进一步包括无水药物组合物和含有本文提供的化合物的剂型。例如，在制药领域中广泛接受加水(例如，5％)作为模拟长期储存的手段，以便确定诸如保质期或制剂随时间的稳定性的特性。参见例如Jens T.Carstensen,Drug Stability：Principles&Practice，第2版，Marcel Dekker，NY，NY，1995，第379-80页。实际上，水和热加速一些化合物的分解。因此，水对制剂的影响可能是非常重要的，因为在制剂的生产、处理、包装、储存、运输和使用期间通常会遇到水分和/或湿度。
可采用无水或含低水分的成分以及低水分或低湿度条件制备本文提供的无水药物组合物和剂型。包含乳糖和至少一种包含伯胺或仲胺的活性成分的药物组合物和剂型是无水的，如果预期在生产、包装和/或储存期间与水分和/或湿度充分接触的话。
无水药物组合物应被制备和储存成使得其无水性质得到维持。因此，使用已知防止暴露于水的材料来包装无水组合物，使得可以将它们包括在合适的配制药盒中。合适包装的实例包括但不限于密封箔、塑料、单位剂量容器(例如，小瓶)、泡罩包装和条带包装。
E-1.口服剂型
口服药物剂型是固体、凝胶或液体。固体剂型是片剂、胶囊、颗粒和散装粉末。口服片剂的类型包括压制的可咀嚼锭剂和可以是肠溶包衣、糖包衣或膜包衣的片剂。胶囊可以是硬或软明胶胶囊，而颗粒和粉末可以非泡腾或泡腾形式与本领域技术人员已知的其它成分组合提供。
在某些实施方案中，制剂是固体剂型，如胶囊或片剂。片剂、丸剂、胶囊、糖锭等可含有任何以下的成分或类似性质的化合物：粘结剂；稀释剂；崩解剂；润滑剂；助流剂；甜味剂；和调味剂。
粘结剂的实例包括微晶纤维素、黄蓍胶、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶溶液、蔗糖和淀粉糊。润滑剂包括滑石、淀粉、硬脂酸镁或硬脂酸钙、石松粉和硬脂酸。稀释剂包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、高岭土、盐、甘露醇和磷酸二钙。助流剂包括但不限于胶态二氧化硅。崩解剂包括交联羧甲纤维素钠、淀粉羟乙酸钠、海藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、膨润土、甲基纤维素、琼脂和羧甲基纤维素。着色剂包括例如任何批准认证的水溶性FD和C染料、其混合物；和悬浮在水合氧化铝上的水不溶性FD和C染料。甜味剂包括蔗糖、乳糖、甘露醇和诸如糖精的人工甜味剂以及任意数量的喷雾干燥香料。调味剂包括从诸如水果的植物提取的天然香料和产生快感的化合物(如但不限于薄荷和水杨酸甲酯)的合成共混物。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、二乙二醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂醚。催吐包衣包括脂肪酸、脂肪、蜡、虫胶、氨化虫胶和醋酸邻苯二甲酸纤维素。膜包衣包括羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000和醋酸邻苯二甲酸纤维素。
如果期望的是口服施用，则可以在组合物中提供化合物，所述组合物保护其免受胃的酸性环境的影响。例如，可以将组合物配制在肠溶包衣中，肠溶包衣保持其在胃中的完整性并在肠中释放活性化合物。也可与抗酸剂或其它这样的成分相组合配制组合物。
当剂量单位形式是胶囊时，除了上述类型的材料之外，其还可含有诸如脂肪油的液体载体。此外，剂量单位形式可含有改变剂量单位的物理形式的各种其它材料，例如糖及其它肠溶剂的包衣。也可以将化合物作为酏剂、悬浮液、糖浆、薄片、喷洒剂、口香糖等的组分施用。除了活性化合物之外，糖浆可含有作为甜味剂的蔗糖和某些防腐剂、染料和着色剂及香料。
活性材料还可以与不损害所需作用的其它活性材料或与补充所需作用的材料混合，如抗酸剂、H2阻断剂和利尿剂。活性成分是如本文描述的化合物或其药学上可接受的盐。可包括高达活性成分的约98重量％的较高浓度。
片剂中包括的药学上可接受的载体是粘结剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂和润湿剂。肠溶包衣的片剂由于有肠溶包衣而抵抗胃酸的作用，并且在中性或碱性肠中溶解或崩解。糖包衣片剂是施加了不同层的药学上可接受的物质的压制片剂。膜包衣片剂是已经用聚合物或其它合适的包衣进行包衣的压制片剂。多重压制片剂是通过不止一个利用先前提到的药学上可接受的物质进行压制循环制成的压制片剂。着色剂也可用在上述剂型中。调味剂和甜味剂用在压缩片剂、糖包衣片剂、多重压制片剂和可咀嚼片剂中。调味剂和甜味剂特别适用于形成可咀嚼片剂和锭剂。
液体口服剂型包括水溶液、乳液、悬浮液、由非泡腾颗粒重构的溶液和/或混悬液以及由泡腾颗粒重构的泡腾制剂。水溶液包括例如酏剂和糖浆。乳液是水包油的或油包水的。
酏剂是透明的增甜水醇制剂。酏剂中使用的药学上可接受的载体包括溶剂。糖浆是例如蔗糖的糖的浓缩水溶液，并且可含有防腐剂。乳液是两相系统，其中一种液体以小球珠的形式分散遍布于另一种液体中。乳液中使用的药学上可接受的载体是非水液体、乳化剂和防腐剂。悬浮液使用药学上可接受的悬浮剂和防腐剂。要重构成液体口服剂型的非泡腾颗粒中使用的药学上可接受的物质包括稀释剂、甜味剂和润湿剂。要重构成液体口服剂型的泡腾颗粒中使用的药学上可接受的物质包括有机酸和二氧化碳源。着色剂和调味剂用在所有上述剂型中。
溶剂包括甘油、山梨醇、乙醇和糖浆。防腐剂的实例包括甘油、对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸、苯甲酸钠和醇。用在乳液中的非水液体的实例包括矿物油和棉籽油。乳化剂的实例包括明胶、阿拉伯胶、黄蓍胶、膨润土和诸如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯的表面活性剂。悬浮剂包括羧甲基纤维素钠、果胶、黄蓍胶、维格姆和阿拉伯胶。稀释剂包括乳糖和蔗糖。甜味剂包括蔗糖、糖浆、甘油和诸如糖精的人工甜味剂。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯、脱水山梨糖醇单油酸酯、二乙二醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂基醚。有机添加物包括柠檬酸和酒石酸。二氧化碳源包括碳酸氢钠和碳酸钠。着色剂包括任何批准认证的水溶性FD和C染料及其混合物。调味剂包括从诸如水果的植物提取的天然香料和产生愉悦味觉的化合物的合成共混物。
对于固体剂型，将例如在碳酸亚丙酯、植物油或甘油三酯中的溶液或悬浮液包封在明胶胶囊中。这类溶液及其制备和包封公开在第4,328,245；4,409,239；和4,410,545号美国专利中。对于液体剂型，可以将例如在聚乙二醇中的溶液用足量的药学上可接受的液体载体(例如，水)稀释以容易进行施用测量。
或者，可通过将活性化合物或盐溶解或分散在植物油、二醇、甘油三酯、丙二醇酯(例如，碳酸亚丙酯)及其它这类载体中并将这些溶液或悬浮液包封在硬或软明胶胶囊壳中来制备液体或半固体口服制剂。其它适用的制剂包括但不限于含有本文提供的化合物、二烷基化单或聚亚烷基二醇(包括但不限于1,2-二甲氧基甲烷、二甘醇二甲醚、三甘醇二甲醚、四甘醇二甲醚、聚乙二醇-350-二甲基醚、聚乙二醇-550-二甲基醚、聚乙二醇-750-二甲基醚，其中350、550和750是指聚乙二醇的近似平均分子量)和一种或多种抗氧化剂(如丁基化羟基甲苯(BHT)、丁基化羟基茴香醚(BHA)、没食子酸丙酯、维生素E、氢醌、羟基香豆素、乙醇胺、卵磷脂、脑磷脂、抗坏血酸、苹果酸、山梨醇、磷酸、硫代二丙酸及其酯和二硫代氨基甲酸酯)的那些。
其它制剂包括但不限于包括药学上可接受的缩醛的水醇溶液。这些制剂中使用的醇是具有一个或多个羟基基团的任何药学上可接受的水混溶性溶剂，包括但不限于丙二醇和乙醇。缩醛包括但不限于低级烷基醛的二(低级烷基)缩醛，如乙醛缩二乙醇。
在所有实施方案中，可以如本领域技术人员已知的那样将片剂和胶囊制剂包衣，以改变或维持活性成分的溶解。因此，例如可将它们用诸如水杨酸苯酯、蜡和醋酸邻苯二甲酸纤维素的常规肠消化型包衣进行包衣。
E-2.注射剂、溶液和乳液
本文也设想了肠胃外施用，通常其特征在于皮下、肌内或静脉内注射。可以作为液体溶液或悬浮液的常规形式、适合用于注射之前在液体中的溶液或悬浮液的固体形式或作为乳液制备注射剂。合适的赋形剂例如是水、盐水、右旋糖、丙三醇或乙醇。此外，如果需要的话，待施用的药物组合物也可含有少量的无毒辅助物质，如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂、稳定剂、增溶剂及其它这类试剂，举例如乙酸钠、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯和环糊精。本文也设想了慢释或缓释系统的植入，使得恒定的剂量水平得以维持。简言之，将本文提供的化合物分散在固体内部基质(例如，聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑或未增塑的聚氯乙烯、增塑尼龙、增塑聚对苯二甲酸乙二醇酯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、硅酮碳酸酯共聚物、诸如丙烯酸和甲基丙烯酸的酯的水凝胶的亲水性聚合物、胶原、交联的聚乙烯醇和交联的部分水解的聚乙酸乙烯酯)中，所述固体内部基质被在体液中不溶的外部聚合物膜(例如，聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、与乙酸乙烯酯的氯乙烯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、离聚物聚对苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡胶表氯醇橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物)包围。化合物在释放速率控制步骤中扩散通过外部聚合物膜。这类肠胃外组合物中所含的活性化合物的百分比高度取决于其具体性质以及化合物的活性和受试者的需要。
组合物的肠胃外施用包括静脉内、皮下和肌内施用。用于胃肠外施用的制剂包括准备注射用的无菌溶液、无菌干燥可溶性产品(如准备在临使用前与溶剂组合的冻干粉末，包括皮下片剂)、准备注射用的无菌悬浮液、准备在临使用前与媒介物组合的无菌干燥不溶性产品和无菌乳液。溶液可以是水溶液或非水溶液。
如果静脉内施用，则合适的载体包括生理盐水或磷酸盐缓冲盐水(PBS)以及含有诸如葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物的增稠剂和增溶剂的溶液。
肠胃外制剂中使用的药学上可接受的载体包括水性媒介物、非水媒介物、抗微生物剂、等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂、局部麻醉剂、悬浮和分散剂、乳化剂、掩蔽或螯合剂及其它药学上可接受的物质。
水性媒介物的实例包括氯化钠注射液、林格注射液、等渗右旋糖注射液、无菌水注射液、右旋糖和乳酸林格注射液。非水肠胃外媒介物包括植物来源的固定油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。必须向包装在多剂量容器中的肠胃外制剂中添加抑菌或抑真菌浓度的抗微生物剂，其包括酚或甲酚、汞、苄醇、氯丁醇、对羟基苯甲酸甲酯和丙酯、硫柳汞、苯扎氯铵和苄索氯铵。等渗剂包括氯化钠和右旋糖。缓冲剂包括磷酸盐和柠檬酸盐。抗氧化剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。悬浮和分散剂包括羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化剂包括聚山梨醇酯80(80)。金属离子的掩蔽或螯合剂包括EDTA。药物载体还包括用于水混溶性媒介物的乙醇、聚乙二醇和丙二醇以及用于pH调节的氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸。
调节药物活性化合物的浓度，使得注射提供用以产生所需药理学效果的有效量。如本领域中已知的那样，确切的剂量取决于患者或动物的年龄、体重和病状。
将单位剂量肠胃外制剂包装在安瓿、小瓶或带针的注射器中。如本领域中已知和实践的那样，所有用于肠胃外施用的制剂必须是无菌的。
示例性地，含有活性化合物的无菌水溶液的静脉内或动脉内输注是有效的施用模式。另一实施方案是无菌水性或油性溶液或悬浮液，其含有根据需要注射的活性物质以产生所需的药理学效果。
注射剂被设计用于局部和全身施用。通常将治疗有效剂量配制成含有对治疗的组织为至少约0.1％w/w直到约90％w/w或更多(如超过1％w/w)的活性化合物的浓度。可将活性成分按一次施用，或者可将其分成许多较小的剂量以按时间间隔施用。要理解的是，治疗的精确剂量和持续时间视所治疗的组织而定，并且可采用已知的测试方案或通过由体内或体外测试数据外推来经验性地确定。要指出的是，浓度和剂量值也可随所治疗的个体的年龄而变化。进一步要理解的是，对于任何特定的受试者，应根据个体需要和施用或指导施用制剂的人员的专业判断来随时间调整具体的给药方案，且本文提出的浓度范围仅是示例性的，并不旨在限制所要求保护的制剂的范围或实施。
可以将化合物以微粉化或其它合适的形式悬浮，或者可以将其衍生化以产生溶解度更大的活性产物或产生前药。所得混合物的形式取决于许多因素，包括预期的施用模式和化合物在选定载体或媒介物中的溶解度。有效浓度足以减轻病状的症状，并且可经验性地予以确定。
E-3.冻干粉末
本文还关注了冻干粉末，其可被重构以作为溶液、乳液及其它混合物施用。它们也可以被重构和配制为固体或凝胶。
通过在合适的溶剂中溶解本文提供的化合物或其药学上可接受的盐来制备无菌冻干粉末。溶剂可含有提高稳定性的赋形剂或粉末或由粉末制备的重构溶液的其它药理学成分。可使用的赋形剂包括但不限于右旋糖、山梨醇、果糖、玉米糖浆、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其它合适的试剂。溶剂也可含有缓冲剂，如柠檬酸盐、磷酸钠或磷酸钾或本领域技术人员已知的其它这类缓冲剂，在一个实施方案中为约中性pH。溶液的后续无菌过滤接着在本领域技术人员已知的标准条件下冻干提供了所需的制剂。一般地，将所得溶液分配到用于冻干的小瓶中。每个小瓶将含有化合物的单次剂量(包括但不限于10-1000mg或100-500mg)或多次剂量。可在诸如约4℃至室温的适当条件下储存冻干粉末。
将此冻干粉末用注射用水重构得到用于肠胃外施用的制剂。为了重构，每mL无菌水或其它合适的载体添加约1-50mg、约5-35mg或约9-30mg冻干粉末。精确的量取决于选定的化合物。这种量可经验性地予以确定。
E-4.外用施用
如针对局部和全身施用所描述的那样制备外用混合物。所得混合物可以是溶液、悬浮液、乳液等，并且配制为乳膏、凝胶、软膏、乳液、溶液、酏剂、洗液、悬浮液、酊剂、糊剂、泡沫、气雾剂、灌洗剂、喷雾剂、栓剂、绷带、皮肤贴片或适合用于外用施用的任何其它制剂。
可将所述化合物或其药学上可接受的盐配制为用于诸如通过吸入的外用施加的气雾剂(参见例如第4,044,126、4,414,209和4,364,923号美国专利，它们描述了用于递送适用于治疗炎性疾病、特别是哮喘的类固醇的气雾剂)。用于对呼吸道施用的这些制剂可呈用于喷雾器的气雾剂或溶液的形式，或者作为用于吹入的微细粉末，单独或与诸如乳糖的惰性载体相组合。在这种情况下，制剂的颗粒将具有小于50微米或小于10微米的直径。
可将化合物配制成用于局部或外用施加，如用于对皮肤和粘膜外用施加，如在眼睛中呈凝胶、乳膏和洗液的形式，以及用于对眼睛施加或用于脑池内或脊柱内施加。设想了外用施用，用于透皮递送并且还用于对眼睛或粘膜施用或用于吸入疗法。也可单独或与其它药学上可接受的赋形剂相组合施用活性化合物的鼻用溶液。
可用适当的盐将这些溶液、特别是预期用于眼科用途的溶液配制为pH约5-7的0.01％-10％等渗溶液。
E-5.用于其它施用途径的组合物
本文还设想了其它施用途径，如外用施加、透皮贴片和直肠施用。
例如，用于直肠施用的药物剂型是用于全身作用的直肠栓剂、胶囊和片剂。直肠栓剂在本文中用于指插入直肠中的固体，其在体温下融化或软化，释放出一种或多种药理学或治疗活性成分。用在直肠栓剂中的药学上可接受的物质是碱或媒介物和用以提高融点的试剂。碱的实例包括可可脂(可可属油)、甘油明胶、碳蜡(聚氧乙二醇)及脂肪酸的甘油单酯、甘油二酯和甘油三酯的适当混合物。可使用各种碱的组合。提高栓剂的融点的试剂包括鲸蜡和蜡。可通过压制方法或通过成型来制备直肠栓剂。直肠栓剂的示例性重量为约2至3克。
使用相同的药学上可接受的物质并通过与用于口服施用的制剂相同的方法生产用于直肠施用的片剂和胶囊。
E-6.缓释组合物
可通过控释手段或通过本领域普通技术人员熟知的递送装置来施用本文提供的活性成分。实例包括但不限于以下号的美国专利中描述的那些：3,845,770；3,916,899；3,536,809；3,598,123；以及4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556、5,639,480、5,733,566、5,739,108、5,891,474、5,922,356、5,972,891、5,980,945、5,993,855、6,045,830、6,087,324、6,113,943、6,197,350、6,248,363、6,264,970、6,267,981、6,376,461、6,419,961、6,589,548、6,613,358、6,699,500和6,740,634，上述专利每一者以引用的方式并入本文。这类剂型可用于使用例如羟丙基甲基纤维素、其它聚合物基质、凝胶、可渗透膜、渗透系统、多层包衣、微粒、脂质体、微球体或其组合提供一种或多种活性成分的慢释或控释，以提供不同比例的所需释放曲线。可以很容易地选择用于与本文提供的活性成分一起使用的本领域普通技术人员已知的合适控释制剂，包括本文描述的那些。
所有的控释药物产品具有共同的目标，即改进药物疗法以优于其非受控对应药物所能达到的疗效。在一个实施方案中，优化设计的控释制剂在医学治疗中的用途的特征在于使用最少的药物物质在最短的时间内治愈或控制病状。在某些实施方案中，控释制剂的优点包括药物的活性延长、给药频率降低和患者依从性提高。此外，控释制剂可用于影响作用开始的时间或其它特性，如药物的血液水平，并且可因此影响副作用(例如，不利作用)的发生。
大多数控释制剂被设计成初始释放一定量的药物(活性成分)，其迅速产生所需的治疗效果，并逐渐和连续地释放其它量的药物以在延长的时间段内维持这种水平的治疗或预防效果。为了维持药物在体内的这种恒定水平，必须以将代替从体内代谢和排泄的药物的量的速率从剂型中释放药物。可通过各种条件来刺激活性成分的控释，包括但不限于pH、温度、酶、水或其它生理条件或化合物。
在某些实施方案中，可采用静脉内输注、植入式渗透泵、透皮贴片、脂质体或其它施用方式来施用药剂。在一个实施方案中，可使用泵(参见Sefton，CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14：201(1987)；Buchwald等人，Surgery 88：507(1980)；Saudek等人，N.Engl.J.Med.321：574(1989)。在另一实施方案中，可使用聚合物材料。在又一实施方案中，可将控释系统放置在治疗靶标附近，即，因此仅需要全身剂量的一小部分(参见例如，Goodson，Medical Applications of Controlled Release，第2卷，第115-138页(1984)。
在一些实施方案中，将控释装置引入受试者在不适当的免疫激活或肿瘤的部位附近。Langer的综述(Science 249：1527-1533(1990)中讨论了其它控释系统。可将活性成分分散在固体内部基质(例如，聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑或未增塑的聚氯乙烯、增塑尼龙、增塑聚对苯二甲酸乙二醇酯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、硅酮碳酸酯共聚物、诸如丙烯酸和甲基丙烯酸的酯的水凝胶的亲水性聚合物、胶原、交联的聚乙烯醇和交联的部分水解的聚乙酸乙烯酯)中，所述固体内部基质被在体液中不溶的外部聚合物膜(例如，聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、与乙酸乙烯酯的氯乙烯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、离聚物聚对苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡胶表氯醇橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物)包围。然后活性成分在释放速率控制步骤中扩散通过外部聚合物膜。这类肠胃外组合物中所含的活性成分的百分比高度取决于其具体性质以及受试者的需要。
E-7.靶向制剂
也可将本文提供的化合物或其药学上可接受的盐配制成靶向待治疗的受试者的身体的特定组织、受体或其它区域。许多这类靶向方法是本领域技术人员熟知的。本文设想了所有这类靶向方法用于本发明的组合物。对于靶向方法的非限制性实例，参见例如第6,316,652、6,274,552、6,271,359、6,253,872、6,139,865、6,131,570、6,120,751、6,071,495、6,060,082、6,048,736、6,039,975、6,004,534、5,985,307、5,972,366、5,900,252、5,840,674、5,759,542和5,709,874号美国专利。
在一个实施方案中，脂质体悬浮液，包括组织靶向的脂质体，如肿瘤靶向的脂质体，也可适合作为药学上可接受的载体。这些可根据本领域技术人员已知的方法进行制备。例如，可如第4,522,811号美国专利中描述的那样制备脂质体制剂。简言之，可通过在烧瓶的内部上干燥卵磷脂酰胆碱和脑磷脂酰丝氨酸(7:3摩尔比)来形成诸如多层囊泡(MLV)的脂质体。添加本文提供的化合物在没有二价阳离子的磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的溶液并摇动烧瓶，直到脂质膜分散。洗涤所得囊泡以除去未包封的化合物，通过离心丸粒化并然后再悬浮于PBS中。
E-8.制品
可将化合物或其药学上可接受的盐包装为制品，所述制品含有包装材料、用于治疗、预防或减轻包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的一种或多种症状或进展的本文提供的化合物或其药学上可接受的盐以及指示所述化合物或其药学上可接受的盐用于治疗、预防或减轻包括实体肿瘤和血源性肿瘤在内的癌症的一种或多种症状或进展的标签。
本文提供的制品含有包装材料。用于包装药物产品的包装材料是本领域技术人员熟知的。参见例如第5,323,907、5,052,558和5,033,252号美国专利。药物包装材料的实例包括但不限于泡罩包装、瓶、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、笔、瓶及适合用于选定制剂和预期的施用及治疗方式的任何包装材料。设想了本文提供的化合物和组合物的广泛系列制剂。
F.化合物的活性评价
标准生理学、药理学和生物化学程序可供用于测试化合物以确定出具有所需抗增殖活性的那些化合物。
这类测定例如包括诸如结合测定的生物化学测定、放射性掺入测定以及各种基于细胞的测定。
G.化合物的制备
可通过本领域技术人员已知的方法并按照类似于本文实施例部分中描述的程序及其常规的修改方案来制备本文提供的化合物。
制备化合物的示例性反应方案如下所示。
要理解的是，前述详细描述和所附的实施例仅仅是说明性的，并不应被视为限制主题范围。对所公开的实施方案进行各种变化和修改是本领域技术人员可显而易见的。在不偏离其实质和范围的情况下可进行这类变化和修改，包括且不限于与本文提供的化学结构、取代基、衍生物、中间体、合成、制剂和/或使用方法有关的变化和修改。本文提到的美国专利及出版物以引用的方式并入。
6.实施例
通过以下非限制性实施例说明本发明的某些实施方案。
实施例1
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺的合成
4-溴-2-甲基苯甲酸甲酯：将4-溴-2-甲基苯甲酸(100g，465.02mmol)、甲醇(1L)中的浓硫酸(52mL)合并且加热到65℃持续18h。将反应物浓缩并将残余物用乙酸乙酯(500mL)稀释，用饱和碳酸氢钠溶液(150mL)、水(200mL)、盐水(250mL)洗涤，并经硫酸钠干燥。将有机相在减压下浓缩并在高真空下进一步干燥，得到4-溴-2-甲基苯甲酸甲酯(102g，445.27mmol，95％产率)，为红色液体。1H NMR(400MHz,氯仿-d1)δ7.78(d,J＝8.3Hz,1H),7.45–7.30(m,2H),3.88(s,3H),2.57(s,3H)。
4-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯：将4-溴-2-甲基苯甲酸甲酯(102g，445.27mmol)、NBS(79.2g，445.27mmol)、乙腈(600mL)中的偶氮-异丁腈(2.58g，16mmol)合并且在85℃下回流18h。将混合物浓缩并向残余物中添加二氯甲烷(150mL)。通过过滤除去所得固体。将滤液浓缩并通过快速柱色谱法(己烷中0-4％EtOAc)纯化。将含有产物的级分在减压下浓缩并在高真空下进一步干燥，得到4-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯(100g，324.70mmol，72.9％产率)，为灰白色固体。1H NMR(300MHz,二甲基亚砜-d6)δ7.88(d,J＝2.2Hz,1H),7.82(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),7.72–7.64(m,1H),5.00(s,2H),3.88(s,3H)。
3-(5-溴-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮：将4-溴-2-(溴甲基)苯甲酸甲酯(100g，324.70mmol)、3-氨基哌啶-2,6-二酮盐酸盐(53.2g，324.70mmol)、三乙胺(113.29mL，811.75mmol)和无水二甲基甲酰胺(400mL)合并且在室温和惰性气氛下搅拌18h。将反应物冷却至5℃并用水(400mL)、乙酸(115mL)、乙醚(300mL)稀释，伴随在室温下继续搅拌2h。将所得固体过滤，用醚(100mL)洗涤并在高真空下进一步干燥，得到3-(5-溴-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(46g，142.35mmol，43.8％产率)，为浅蓝色固体。MS(ESI)m/z 325.0[M+1]+。
2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-甲腈：将3-(5-溴-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(46g，142.35mmol)、1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁(788mg，1.423mmol)、氰化锌(25g，213.52mmol)、乙酸锌(7.83g，42.7mmol)和无水二甲基甲酰胺(360mL)合并且在添加三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.364g，0.398mmol)之前脱气。将混合物抽空并用氩气置换3次，然后在120℃下搅拌20h。将混合物冷却至室温、过滤并通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷中0-5％甲醇)纯化。将含有产物的级分合并且在减压下除去溶剂，然后在高真空下进一步干燥，得到2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-甲腈(22g，81.78mmol，57.2％产率)，为棕色固体。MS(ESI)m/z 268.0[M-H+]。
3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮：将2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-甲腈(10g，37.13mmol)、甲磺酸(2.6mL，40.85mmol)、10％干燥碳载钯(4g)和二甲基乙酰胺(320mL)合并且在氢化容器中摇动，并在50Psi和40℃下保持20h。将氢气氛抽空并将混合物通过硅藻土垫过滤，用水(100mL)洗涤并浓缩。向所得残余物中添加1％甲醇-二氯甲烷，其经过滤并在高真空下干燥，得到3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮(5.6g，15.17mmol，40％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 272.0[M-1]。
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2,2-二氟-2-(4-甲氧基苯基)乙酸(0.109g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲氧基苯基)乙酰胺(0.080g，0.175mmol，32.3％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.57(t,J＝6.15Hz,1H)7.69(d,J＝7.88Hz,1H)7.48-7.57(m,2H)7.34-7.45(m,2H)7.07(m,J＝8.83Hz,2H)5.11(dd,J＝13.24,5.36Hz,1H)4.38-4.50(m,3H)4.23-4.36(m,1H)3.81(s,3H)2.85-2.98(m,1H)2.56-2.68(m,1H)2.39(dd,J＝12.93,4.73Hz,1H)1.95-2.07(m,1H)。MS(ESI)m/z 458.2[M+1]+。
实施例2
2-(3-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
2-(3-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2-(3-氯苯基)-2,2-二氟乙酸(0.112g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到2-(3-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(.090g，0.195mmol，36.0％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.70(t,J＝5.99Hz,1H)7.53-7.71(m,5H)7.32-7.45(m,2H)5.11(dd,J＝13.40,5.20Hz,1H)4.39-4.51(m,3H)4.25-4.38(m,1H)2.85-2.99(m,1H)2.55-2.68(m,1H)2.40(dd,J＝13.08,4.57Hz,1H)1.95-2.05(m,1H)。MS(ESI)m/z 462.2[M+1]+。
实施例3
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟苯基)乙酰胺的合成
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟苯基)乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2,2-二氟-2-(4-氟苯基)乙酸(0.103g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟苯基)乙酰胺(0.100g，0.225mmol，41.5％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(br.s.,1H)9.66(t,J＝5.99Hz,1H)7.58-7.73(m,3H)7.29-7.47(m,4H)5.11(dd,J＝13.40,5.20Hz,1H)4.38-4.53(m,3H)4.24-4.36(m,1H)2.81-3.00(m,1H)2.56-2.67(m,1H)2.40(qd,J＝13.19,4.57Hz,1H)1.91-2.07(m,1H)。
实施例4
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(对甲苯基)乙酰胺的合成
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(对甲苯基)乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2,2-二氟-2-(对甲苯基)乙酸(0.101g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(对甲苯基)乙酰胺(.110g，0.249mmol，46.0％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.59(t,J＝6.15Hz,1H)7.68(d,J＝7.88Hz,1H)7.48(d,J＝8.20Hz,2H)7.26-7.43(m,4H)5.11(dd,J＝13.24,5.04Hz,1H)4.37-4.50(m,3H)4.22-4.34(m,1H)2.84-2.99(m,1H)2.56-2.67(m,1H)2.31-2.45(m,4H)1.93-2.07(m,1H)。MS(ESI)m/z 442.2[M+1]+。
实施例5
2-(3,4-二氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
2-(3,4-二氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2-(3,4-二氯苯基)-2,2-二氟乙酸(0.130g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到2-(3,4-二氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(.110g，0.222mmol，40.9％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.71(t,J＝5.99Hz,1H)7.79-7.88(m,2H)7.69(d,J＝7.88Hz,1H)7.59(dd,J＝8.51,2.21Hz,1H)7.43(s,1H)7.38(d,J＝7.88Hz,1H)5.11(dd,J＝13.08,5.20Hz,1H)4.39-4.51(m,3H)4.26-4.37(m,1H)2.86-2.98(m,1H)2.61(d,J＝18.92Hz,1H)2.39(dd,J＝13.40,4.89Hz,1H)1.95-2.06(m,1H)。MS(ESI)m/z 498.0[M+1]+。
实施例6
2-(2-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
2-(2-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2-(2-氯苯基)-2,2-二氟乙酸(0.112g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到2-(2-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(.090g，0.195mmol，36.0％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.68(t,J＝6.31Hz,1H)7.68-7.79(m,2H)7.56-7.63(m,2H)7.49-7.56(m,2H)7.46(d,J＝7.88Hz,1H)5.12(dd,J＝13.24,5.36Hz,1H)4.40-4.56(m,3H)4.27-4.38(m,1H)2.92(ddd,J＝17.50,13.71,5.36Hz,1H)2.61(d,J＝16.71Hz,1H)2.32-2.46(m,1H)1.94-2.10(m,1H)。MS(ESI)m/z 462.0[M+1]+。
实施例7
2-(4-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
2-(4-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2-(4-氯苯基)-2,2-二氟乙酸(0.112g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到2-(4-氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(.080g，0.173mmol，32.0％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.68(t,J＝6.15Hz,1H)7.69(d,J＝7.88Hz,1H)7.58-7.66(m,4H)7.33-7.44(m,2H)5.11(dd,J＝13.24,5.04Hz,1H)4.39-4.50(m,3H)4.24-4.35(m,1H)2.85-2.98(m,1H)2.61(dd,J＝15.29,2.05Hz,1H)2.39(dd,J＝12.93,4.73Hz,1H)1.95-2.07(m,1H)。MS(ESI)m/z462.0[M+1]+。
实施例8
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺的合成
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2,2-二氟-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酸(0.130g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(.080g，0.161mmol，29.8％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.70(t,J＝6.15Hz,1H)7.66-7.81(m,3H)7.47-7.59(m,3H)7.44(d,J＝8.51Hz,1H)5.12(dd,J＝13.40,5.20Hz,1H)4.40-4.54(m,3H)4.27-4.38(m,1H)2.85-3.00(m,1H)2.57-2.67(m,1H)2.35-2.45(m,1H)1.94-2.07(m,1H)。
实施例9
2-(4-(叔丁基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
2-(4-(叔丁基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向在DMF(3mL)中的3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(0.200g，0.541mmol)中添加HATU(0.226g，0.596mmol)、2-(4-(叔丁基)苯基)-2,2-二氟乙酸(0.124g，0.541mmol)，接着添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.262mL，1.624mmol)。在25℃下搅拌16h。添加30mL水并过滤。用EtOAc冲洗，在真空下干燥，得到2-(4-(叔丁基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(0.095g，0.196mmol，36.3％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)ppm 10.98(s,1H)9.61(t,J＝5.99Hz,1H)7.68(d,J＝7.88Hz,1H)7.49-7.60(m,4H)7.33-7.44(m,2H)5.11(dd,J＝13.24,5.04Hz,1H)4.37-4.50(m,3H)4.24-4.35(m,1H)2.86-2.98(m,1H)2.57-2.67(m,1H)2.38(dd,J＝13.40,4.57Hz,1H)1.92-2.06(m,1H)1.22-1.36(m,9H)。MS(ESI)m/z 484.0[M+1]+。
实施例10
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-苯基乙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-苯基乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟-2-苯基乙酸(0.023g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-苯基乙酰胺(0.039g，0.091mmol，67.4％产率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)11.00(s,1H),9.67(t,J＝6.25Hz,1H),7.67(d,J＝7.81Hz,1H),7.50-7.62(m,5H),7.34-7.42(m,2H),5.11(dd,J＝5.08,13.28Hz,1H),4.38-4.47(m,3H),4.24-4.31(m,1H),2.86-2.97(m,1H),2.55-2.64(m,1H),2.32-2.45(m,1H),1.99(dtd,J＝2.34,5.25,12.55Hz,1H)。MS(ESI)m/z 428.2[M+1]+。
实施例11
2-(3-氯-4-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
A.2-(3-氯-4-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2-(3-氯-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(0.030g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到2-(3-氯-4-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)11.01(s,1H),9.72(t,J＝6.05Hz,1H),7.81(dd,J＝1.76,7.23Hz,1H),7.69(d,J＝7.81Hz,1H),7.58-7.65(m,2H),7.43(s,1H),7.35-7.39(m,1H),5.11(dd,J＝5.08,13.28Hz,1H),4.40-4.48(m,3H),4.26-4.34(m,1H),2.92(ddd,J＝5.47,13.77,17.48Hz,1H),2.56-2.64(m,1H),2.31-2.45(m,1H),1.95-2.04(m,1H)。MS(ESI)m/z 480.0[M+1]+。
实施例12
2-(2,6-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
A.2-(2,6-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2-(2,6-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸(0.028g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到2-(2,6-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(0.039g，0.084mmol，62.2％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)
10.98(s,1H),9.73(t,J＝5.99Hz,1H),7.65-7.73(m,2H),7.49(s,1H),7.43(d,J＝7.88Hz,1H),7.27(dd,J＝8.67,9.62Hz,2H),5.11(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.50(d,J＝5.99Hz,2H),4.46(d,J＝17.34Hz,1H),4.29-4.35(m,1H),2.91(ddd,J＝5.36,13.71,17.50Hz,1H),2.57-2.63(m,1H),2.40(qd,J＝4.57,13.19Hz,1H),2.01(dtd,J＝2.36,5.26,12.65Hz,1H)。MS(ESI)m/z 464.2[M+1]+。
实施例13
2-(5-氯-2-甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
A.2-(5-氯-2-甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2-(5-氯-2-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(0.032g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到2-(5-氯-2-甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(0.044g，0.089mmol，66.1％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.41(t,J＝5.99Hz,1H),7.73(d,J＝7.88Hz,1H),7.59(dd,J＝2.84,8.83Hz,1H),7.53(d,J＝2.52Hz,1H),7.48(s,1H),7.43(d,J＝7.57Hz,1H),7.17(d,J＝8.83Hz,1H),5.11(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.43-4.49(m,3H),4.29-4.35(m,1H),3.68(s,3H),2.91(ddd,J＝5.36,13.71,17.50Hz,1H),2.57-2.63(m,1H),2.40(qd,J＝4.26,13.08Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.52,5.32,12.69Hz,1H)。MS(ESI)m/z 492.2[M+1]+。
实施例14
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-氟-2-甲氧基苯基)乙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-氟-2-甲氧基苯基)乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟-2-(5-氟-2-甲氧基苯基)乙酸(0.030g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-氟-2-甲氧基苯基)乙酰胺(0.043g，0.090mmol，66.8％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.40(t,J＝5.99Hz,1H),7.73(d,J＝7.57Hz,1H),7.49(s,1H),7.44(d,J＝7.88Hz,1H),7.36-7.41(m,2H),7.13-7.18(m,1H),5.11(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.43-4.50(m,3H),4.29-4.35(m,1H),3.65(s,3H),2.92(ddd,J＝5.52,13.64,17.42Hz,1H),2.57-2.63(m,1H),2.40(qd,J＝4.10,13.24Hz,1H),2.01(dtd,J＝2.21,5.34,12.65Hz,1H)。MS(ESI)m/z476.0[M+1]+。
实施例15
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(邻甲苯基)乙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(邻甲苯基)乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟-2-(邻甲苯基)乙酸(0.025g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(邻甲苯基)乙酰胺(0.038g，0.086mmol，63.6％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.59(t,J＝5.99Hz,1H),7.69(d,J＝8.20Hz,1H),7.50-7.53(m,1H),7.39-7.46(m,3H),7.28-7.34(m,2H),5.10(dd,J＝5.36,13.24Hz,1H),4.41-4.49(m,3H),4.27-4.33(m,1H),2.87-2.95(m,1H),2.57-2.63(m,1H),2.39(qd,J＝4.41,13.24Hz,1H),2.33(s,3H),2.00(dtd,J＝2.21,5.32,12.69Hz,1H)。MS(ESI)m/z 442.2[M+1]+。
实施例16
2-(4-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
A.2-(4-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2-(4-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(0.037g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到2-(4-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(0.021g,0.040mmol,29.4％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.56(t,J＝6.15Hz,1H),7.67(dd,J＝0.63,7.57Hz,1H),7.46-7.50(m,2H),7.35-7.38(m,2H),7.00-7.04(m,2H),5.10(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.89(s,2H),4.39-4.46(m,3H),4.26-4.31(m,1H),2.99(s,3H),2.87-2.95(m,1H),2.84(s,3H),2.57-2.62(m,1H),2.33-2.43(m,1H),2.00(dtd,J＝2.36,5.18,12.49Hz,1H)。MS(ESI)m/z 529.2[M+1]+。
实施例17
2-(2,5-二甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
A.2-(2,5-二甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2-(2,5-二甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(0.031g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到2-(2,5-二甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(0.043g，0.088mmol，65.2％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.33(t,J＝5.99Hz,1H),7.72(d,J＝7.88Hz,1H),7.49(s,1H),7.42-7.46(m,1H),7.04-7.10(m,3H),5.11(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.43-4.49(m,3H),4.29-4.35(m,1H),3.75(s,3H),3.61(s,3H),2.91(ddd,J＝5.52,13.56,17.50Hz,1H),2.57-2.64(m,1H),2.40(qd,J＝4.73,13.24Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.36,5.30,12.57Hz,1H)。MS(ESI)m/z 488.2[M+1]+。
实施例18
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟苯基)乙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟苯基)乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟-2-(2-氟苯基)乙酸(0.026g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟苯基)乙酰胺(0.030g，0.067mmol，49.8％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.69(t,J＝6.15Hz,1H),7.70(d,J＝8.20Hz,1H),7.61-7.67(m,2H),7.47(s,1H),7.40-7.44(m,1H),7.34-7.40(m,2H),5.11(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.50(d,J＝6.31Hz,2H),4.45(d,J＝17.34Hz,1H),4.29-4.34(m,1H),2.91(ddd,J＝5.52,13.64,17.42Hz,1H),2.57-2.63(m,1H),2.40(qd,J＝4.73,13.24Hz,1H),2.01(dtd,J＝2.36,5.26,12.65Hz,1H)。MS(ESI)m/z 446.2[M+1]+。
实施例19
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2-(2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(0.029g，0.135mmol)，二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酰胺(0.045g，0.095mmol，70.5％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.31(t,J＝6.15Hz,1H),7.70(d,J＝7.88Hz,1H),7.55(dd,J＝1.58,7.57Hz,1H),7.47-7.52(m,2H),7.45(d,J＝8.51Hz,1H),7.11(d,J＝8.20Hz,1H),7.05(td,J＝0.79,7.49Hz,1H),5.11(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.42-4.48(m,3H),4.28-4.34(m,1H),3.99(q,J＝6.94Hz,2H),2.87-2.96(m,1H),2.57-2.63(m,1H),2.40(qd,J＝4.41,13.24Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.21,5.08,12.53Hz,1H),1.13(t,J＝6.94Hz,3H)。MS(ESI)m/z 472.2[M+1]+。
实施例20
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)，2,2-二氟-2-(2-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(0.035g，0.135mmol)，二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(0.047g，0.092mmol，67.9％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.69(t,J＝5.83Hz,1H),7.77(dd,J＝1.58,7.88Hz,1H),7.68-7.74(m,2H),7.48-7.56(m,3H),7.43(d,J＝7.88Hz,1H),5.11(dd,J＝5.04,13.24Hz,1H),4.49(d,J＝6.31Hz,2H),4.44(d,J＝17.34Hz,1H),4.28-4.33(m,1H),2.91(ddd,J＝5.36,13.79,17.42Hz,1H),2.57-2.63(m,1H),2.40(qd,J＝4.26,13.19Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.36,5.26,12.65Hz,1H)。MS(ESI)m/z 512.2[M+1]+。
实施例21
2-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺的合成
A.2-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(0.045g，0.135mmol)，二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到2-(3-溴-4-(三氟甲氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(0.048g，0.081mmol，60.1％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.99(s,1H),9.75(t,J＝6.15Hz,1H),8.01(d,J＝1.89Hz,1H),7.73-7.78(m,2H),7.69(d,J＝7.57Hz,1H),7.45(s,1H),7.38(d,J＝7.88Hz,1H),5.11(dd,J＝5.04,13.24Hz,1H),4.41-4.49(m,3H),4.28-4.34(m,1H),2.92(ddd,J＝5.36,13.71,17.50Hz,1H),2.58-2.64(m,1H),2.39(qd,J＝4.41,13.24Hz,1H),2.01(dtd,J＝2.21,5.20,12.61Hz,1H)。MS(ESI)m/z592.0[M+2]+。
实施例22
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟丙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟丙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟丙酸(0.015g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟丙酰胺(0.016g，0.044mmol，32.4％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.98(s,1H),9.36(t,J＝5.99Hz,1H),7.71(d,J＝7.88Hz,1H),7.49(s,1H),7.42(d,J＝7.88Hz,1H),5.12(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.43-4.49(m,3H),4.30-4.35(m,1H),2.92(ddd,J＝5.52,13.64,17.42Hz,1H),2.58-2.64(m,1H),2.40(qd,J＝4.57,13.19Hz,1H),2.01(dtd,J＝2.21,5.16,12.69Hz,1H),1.74-1.84(m,3H)。MS(ESI)m/z 366.2[M+1]+。
实施例23
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2,3,3-四氟丙酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2,3,3-四氟丙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2,3,3-四氟丙酸(0.020g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2,3,3-四氟丙酰胺(0.013g，0.032mmol，23.93％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.92(t,J＝5.99Hz,1H),7.71(d,J＝7.88Hz,1H),7.47(s,1H),7.41(d,J＝7.88Hz,1H),6.64-6.89(m,1H),5.11(dd,J＝5.04,13.24Hz,1H),4.50(d,J＝6.31Hz,2H),4.46(d,J＝17.34Hz,1H),4.29-4.34(m,1H),2.87-2.95(m,1H),2.57-2.63(m,1H),2.39(qd,J＝4.73,13.24Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.21,5.24,12.53Hz,1H)。MS(ESI)m/z 402.0[M+1]+。
实施例24
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟丁酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟丁酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟丁酸(0.017g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟丁酰胺(0.027g，0.071mmol，52.6％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)10.97(s,1H),9.37(t,J＝5.99Hz,1H),7.70(d,J＝7.88Hz,1H),7.47(s,1H),7.41(d,J＝7.88Hz,1H),5.10(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.42-4.48(m,3H),4.28-4.34(m,1H),2.91(ddd,J＝5.36,13.64,17.58Hz,1H),2.57-2.63(m,1H),2.39(qd,J＝4.57,13.29Hz,1H),1.97-2.14(m,3H),0.92(t,J＝7.41Hz,3H)。MS(ESI)m/z380.2[M+1]+。
实施例25
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-3-羟基-3-甲基丁酰胺的合成
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-3-羟基-3-甲基丁酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟-3-羟基-3-甲基丁酸(0.021g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在室温下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-3-羟基-3-甲基丁酰胺(0.049g，0.120mmol，88％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6) 10.97(s,1H),9.07(t,J＝5.99Hz,1H),7.68(d,J＝8.20Hz,1H),7.50(s,1H),7.43(d,J＝7.25Hz,1H),5.46(br.s.,1H),5.10(dd,J＝5.04,13.24Hz,1H),4.41-4.46(m,3H),4.27-4.33(m,1H),2.86-2.96(m,1H),2.57-2.63(m,1H),2.39(qd,J＝4.57,13.19Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.36,5.26,12.65Hz,1H),1.24(s,6H)。MS(ESI)m/z 410.2[M+1]+。
实施例26
2-(3-氯-4-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(3-氯-4-甲基苯基)乙酮：在室温下向3-氯-4-甲基苯甲腈(3g，19.86mmol)在苯(25mL)中的搅拌溶液中添加甲基碘化镁(6.6mL，19.86mmol，乙醚中3M)并在80℃下搅拌8h。然后将反应混合物冷却至室温，添加6N盐酸(25mL)并在80℃下搅拌6h。将反应混合物冷却至室温并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(3-氯-4-甲基苯基)乙酮(2g，11.90mmol，60％产率)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.93(d,J＝1.8Hz,1H),7.82(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),7.51(dd,J＝7.7,1.0Hz,1H),2.57(s,3H),2.40(s,3H)。
B.2-(3-氯-4-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(3-氯-4-甲基苯基)乙酮(500mg，2.97mmol)在吡啶(5mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(660mg，5.95mmol)并在100℃下搅拌12h。将反应混合物用二氯甲烷(20mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(2mL)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用1N盐酸水溶液酸化(直到pH-4)并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(2×5mL)、盐水(5mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氯-4-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(300mg，1.32mmol，45％)，为棕色液体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.99(dd,J＝5.5,1.7Hz,1H),7.86(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.59(dd,J＝11.6,7.9Hz,1H),4.42(q,J＝7.1Hz,2H),2.44(s,3H),1.33(t,J＝7.1Hz,3H)。
C.2-(3-氯-4-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向2-(3-氯-4-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(300mg，1.32mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(2mL)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(2×5mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氯-4-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(200mg，0.804mmol，61％)，为棕色液体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63–7.52(m,2H),7.47(dd,J＝7.9,1.9Hz,1H),4.32(q,J＝7.1Hz,2H),2.39(s,3H),1.23(t,J＝7.1Hz,4H)。
D.2-(3-氯-4-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-氯-4-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(200mg，0.806mmol)在甲醇/四氢呋喃/水(10mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(169mg，4.03mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氯-4-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸(150mg，0.68mmol，84％产率)，为棕色半固体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.61–7.50(m,2H),7.45(dd,J＝8.0,1.8Hz,1H),2.39(s,3H)。
E.2-(3-氯-4-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向3-(5-(氨基甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(200mg，0.619mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加2-(3-氯-4-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸(150mg，0.68mmol)，接着添加N,N-二异丙基乙胺(240mg，1.85mmol)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(352mg，0.92mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(2×10mL)萃取，将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的70％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化产物，得到2-(3-氯-4-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(40mg，0.08mmol，14％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 476.18[M+1]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.66(t,J＝6.0Hz,1H),7.68(d,J＝7.9Hz,1H),7.61–7.50(m,2H),7.49–7.33(m,3H),5.10(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),4.51–4.12(m,4H),2.98-2.83(m,1H),2.65-2.55(m,1H),2.46–2.27(m,4H),2.06-1.93(m,1H)。
实施例27
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酰胺
A.1-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酮。取磷酸钾(19.38g，91.44mmol)、分子筛(5g，)、硫-8(2.92g，91.44mmol)、碳酸银(16.80g，60.96mmol)、(4-乙酰基苯基)硼酸(5g，30.48mmol)、硫氰酸铜(1)(370mg，3.04mmol)和1,10-菲咯啉(1.09g，6.09)到搅拌和抽空的圆底烧瓶中，向圆底烧瓶中添加在无水N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的三甲基(三氟甲基)硅烷(21.67g，152.43mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，添加冷水(20mL)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到1-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酮(2.8g，13.20mmol，45％)，为浅黄色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03–7.89(m,2H),7.75(d,J＝7.9Hz,2H),2.80–2.42(m,3H)。
B.2-氧代-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸乙酯。向1-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酮(2.5g，11.79mmol)在吡啶(50mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2.61g，23.58mmol)并在100℃下搅拌4h。将反应混合物用二氯甲烷(50mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加二氯甲烷(30mL)，接着添加氯甲酸乙酯(5mL)并搅拌2h。用1N盐酸水溶液将反应混合物的pH调节至pH-4并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到为液体的2-氧代-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸乙酯(2.0g，7.19mmol，62％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12–8.04(m,2H),7.84–7.72(m,2H),4.61–4.33(m,2H),1.49–1.34(m,3H)。
C.2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸乙酯。向2-氧代-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸乙酯(2.0g，7.19mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(1.4mL，10.79mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到为液体的2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸乙酯(2.0g，6.66mmol，95％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75(d,J＝8.2Hz,2H),4.32(q,J＝7.1Hz,2H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)。
D.2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸乙酯(1.5g，5.0mmol)在含水甲醇(10mL，80％)中的搅拌冷(0℃)溶液中添加氢氧化钠(0.4g，10.0mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸(1g，3.67mmol，73％产率)，为棕色固体。MS(ESI)m/z 271.22[M-1]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酰胺。向3-(5-(氨基甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮甲磺酸盐(500mg，1.61mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酸(520mg，1.94mmol)、N,N-二异丙基乙胺(0.86mL，4.8mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(920mg，2.4mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用水(100mL)稀释并将沉淀的固体过滤，在真空下干燥并使用甲酸水溶液(0.1％)中的70％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(三氟甲硫基)苯基)乙酰胺(60mg，0.11mmol，7％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 528.07[M+1]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.76(t,J＝6.1Hz,1H),7.91(d,J＝8.1Hz,2H),7.81–7.61(m,3H),7.53–7.21(m,2H),5.10(dd,J＝13.4,5.1Hz,1H),4.57–4.10(m,4H),2.85-2.93(m,1H),2.72–2.56(m,1H),2.42–2.26(m,1H),2.10–1.94(m,1H)。
实施例28
2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(3-氯-4-甲氧基苯基)乙酮(2g，10.83mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(3g，27.08mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(30mL)洗涤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(6mL)并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×25mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(20mL)和盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.45g，5.98mmol，55％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 242.1[M]+。
B.2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下将2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.45g，5.99mmol)分批添加到二乙基氨基三氟化硫(2.35mL)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化，得到2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1g，3.78mmol，63％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 264.1[M]+。
C.2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1g，3.78mmol)在四氢呋喃:乙醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(480mg，11.36mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将所得残余物溶于水(20mL)并用乙酸乙酯(2×15mL)洗涤。将水层用1N盐酸溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(550mg，2.32mmol，61％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.57–7.52(m,2H),7.29(d,J＝8.7Hz,1H),3.92(s,3H)。
D.2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。在0℃下向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的搅拌溶液中添加2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(252mg，1.07mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(442mg，1.16mmol)和二异丙基乙胺(375mg，2.91mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将获得的残余物溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中45-55％乙腈)纯化，得到2-(3-氯-4-甲氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(58mg，11.7mmol，12％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 492.47[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.62(t,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.60(d,J＝2.3Hz,1H),7.53(d,J＝8.7Hz,1H),7.41(s,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.29(d,J＝8.7Hz,1H),5.10(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.45(d,J＝5.4Hz,2H),4.42(d,J＝17.9Hz,1H),4.28(d,J＝17.9Hz,1H),3.91(s,3H),2.96–2.86(m,1H),2.64–2.55(m,1H),2.47–2.25(m,1H),2.08–1.94(m,1H)。
实施例29
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(间甲苯基)乙酰胺
A.2-氧代-2-间甲苯基乙酸乙酯。向1-间甲苯基乙酮(3.0g，22.37mmol)在吡啶(50mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(4.96g，44.74mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(50mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(6mL)并搅拌2h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到为液体的2-氧代-2-间甲苯基乙酸乙酯(2.0g，10.41mmol，46.6％)。GC-MS(ESI)m/z 192.2。
B.2,2-二氟-2-间甲苯基乙酸乙酯。使2-氧代-2-间甲苯基乙酸乙酯(2.0g，10.41mmol)的搅拌溶液与二乙基氨基三氟化硫(3.41mL，26.02mmol)反应，并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到为液体的2,2-二氟-2-间甲苯基乙酸乙酯(1.2g，5.60mmol，52.4％)。GC-MS(ESI)m/z 214.1。
C.2,2-二氟-2-间甲苯基乙酸。向2,2-二氟-2-间甲苯基乙酸乙酯(1.2g，7.47mmol)在四氢呋喃-甲醇-水溶剂混合物(45mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加氢氧化锂(1.85g，44.84mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到为棕色固体的2,2-二氟-2-间甲苯基乙酸(900mg，4.83mmol，86.5％产率)。MS(ESI)m/z 185.21[M-1]-。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(间甲苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-间甲苯基乙酸(216.6mg，0.970mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加三氯化磷(0.3mL，2.912mmol)并在0℃-5℃下搅拌1h。在0℃下将(300mg，2.40mmol)添加到反应混合物中，并在室温下继续搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45％乙腈通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化粗产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(间甲苯基)乙酰胺(63mg，0.147mmol，14.7％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 442.25[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.61(t,J＝6.1Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.48–7.32(m,6H),5.10(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),4.49–4.22(m,4H),2.98–2.82(m,1H),2.64–2.53(m,1H),2.45-2.24(m,4H),2.05–1.93(m,1H)。
实施例30
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酰胺
A.1-(4-异丙氧基苯基)乙酮。在0℃下向1-(4-羟苯基)乙酮(2.5g，18.38mmol)在N,N-二甲基甲酰胺中的搅拌溶液中添加碳酸钾(6.34g，45.95mmol)，接着添加异丙基碘(4.59g，27.57mmol)，然后在100℃下加热16h。将反应混合物用冰水淬灭并用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将获得的粗化合物通过快速柱色谱法(100-200硅胶，20％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到为液体的1-(4-异丙氧基苯基)乙酮(2g，11.23mmol，61％产率)。MS(ESI)m/z 179.13[M+H]+。
B.2-(4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(4-异丙氧基苯基)乙酮(3g，16.85mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(4.67g，42.1mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(30mL)洗涤。将滤液冷却至0℃，用氯甲酸乙酯(6mL)处理并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×30mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(3g，12.76mmol，75％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 236.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯。在0℃下向2-(4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(3g，12.76mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(4.9mL)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(100-200硅胶，10％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(2g，7.75mmol，61％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 258.2[M+H]+。
D.2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(2g，7.75mmol)在四氢呋喃:乙醇:水(20mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(1.6g，38.75mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将所得残余物溶于水(20mL)并用乙酸乙酯(2×20mL)洗涤。将水层用1N盐酸溶液酸化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酸(1.2g，5.21mmol，67％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.47(d,J＝8.7Hz,2H),7.03(d,J＝9Hz,2H),4.71–4.63(m,1H),1.28(d,J＝6Hz,6H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酸(267mg，1.16mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加磷酰氯(0.27mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(甲酸水溶液0.1％中的45-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基苯基)乙酰胺(27mg，0.05mmol，6％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 486.09[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.56(t,J＝6.3Hz,1H),7.67(d,J＝7.7Hz,1H),7.48(d,J＝8.4Hz,2H),7.43–7.33(m,2H),7.03(d,J＝8.4Hz,2H),5.10(dd,J＝13.3,5.2Hz,1H),4.74-4.62(m,1H),4.49–4.27(m,4H),3.02–2.83(m,1H),2.69–2.58(m,1H),2.39–2.28(m,1H),2.05–1.95(m,1H),1.27(d,J＝6.0Hz,6H)。
实施例31
2-(3,4-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(3,4-二氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(3,4-二氟苯基)乙酮(1g，6.4mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(1.7g，16.01mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(30mL)洗涤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(4mL)并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×25mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3,4-二氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(750mg，3.50mmol，55％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 214.1[M]+。
B.2-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在氮气氛和0℃下将2-(3,4-二氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(750mg，3.5mmol)添加到二乙基氨基三氟化硫(1.37mL)中，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化，得到2-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(520mg，2.20mmol，63％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 236.1[M]+。
C.2-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(500mg，2.11mmol)在四氢呋喃:乙醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(267mg，6.35mmol)并在室温下搅拌16h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸(300mg，1.44mmol，68％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 208.1[M]+。
D.2-(3,4-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。在0℃下向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的搅拌溶液中添加2-(3,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸(222mg，1.07mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(442mg，1.16mmol)和二异丙基乙胺(0.5mL，2.91mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将获得的粗品溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗化合通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化(0.1％甲酸水溶液中的45-55％乙腈，得到2-(3,4-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(75mg，0.16mmol，17％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 463.99[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.69(t,J＝5.9Hz,1H),7.72–7.62(m,2H),7.61(d,J＝8.4Hz,1H),7.51–7.44(m,1H),7.43(s,1H),7.37(d,J＝7.8Hz,1H),5.10(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),4.46(d,J＝5.4Hz,2H),4.43(d,J＝17.4Hz,1H),4.29(d,J＝17.1Hz,1H),2.98–2.87(m,1H),2.65–2.56(m,1H),2.45–2.29(m,1H),2.08–1.90(m,1H)。
实施例32
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酰胺
A.2-(3-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(3-氟苯基)乙酮(2g，14.48mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(4.01g，36.19mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(30mL)洗涤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(6mL)并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×25mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.5g，7.65mmol，53％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z196.1[M]+。
B.2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酸乙酯。在0℃下将2-(3-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.5g，7.65mmol)添加到二乙基氨基三氟化硫(3mL)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酸乙酯(850mg，3.89mmol，90％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 218.1[M]+。
C.2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酸乙酯(850mg，3.89mmol)在四氢呋喃:乙醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(491mg，11.69mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将获得的粗品溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酸(500mg，2.63mmol，67％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 190.1[M]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酰胺。在0℃下向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(203mg，1.07mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的搅拌溶液中添加2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酸(300mg，0.97mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(442mg，1.16mmol)和N,N-二异丙基乙胺(375mg，2.91mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将获得的粗品溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗化合物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中45-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟苯基)乙酰胺(45mg，0.1mmol，10％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 446.04[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.68(t,J＝5.9Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.60(dd,J＝13.5,7.8Hz,1H),7.47–7.41(m,4H),7.36(d,J＝8.1Hz,1H),5.10(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),4.46(d,J＝5.7Hz,2H),4.42(d,J＝15.0Hz,1H),4.28(d,J＝17.4Hz,1H),2.96–2.86(m,1H),2.65–2.54(m,1H),2.46–2.28(m,1H),2.05–1.92(m,1H)。
实施例33
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酰胺
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)放入装有N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)、2,2-二氟-2-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酸(0.033g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)的小瓶中。将反应混合物在RT下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酰胺(0.033g，0.066mmol，49.1％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.59(t,J＝6.15Hz,1H),8.99(d,J＝4.73Hz,1H),8.47(dd,J＝1.26,8.20Hz,1H),7.88(dd,J＝4.73,8.20Hz,1H),7.74(d,J＝7.57Hz,1H),7.60(s,1H),7.51(dd,J＝0.63,7.88Hz,1H),5.12(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.55(d,J＝6.31Hz,2H),4.49(d,J＝17.34Hz,1H),4.32-4.37(m,1H),2.88-2.97(m,1H),2.58-2.64(m,1H),2.36-2.46(m,1H),2.02(dtd,J＝2.21,5.16,12.69Hz,1H)。MS(ESI)m/z 497.4[M+1]+。
实施例34
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酰胺
A.2-(4-异丙基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-异丙基苯基)乙酮(2.0g，12.33mmol)在吡啶(25mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(3.42g，30.82mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(50mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(6mL)并搅拌2h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用二氯甲烷(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-异丙基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(2.0g，9.09mmol，74％产率)。MS(ESI)m/z 221.29[M+1]+。
B.2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酸乙酯。在0℃下向2-(4-异丙基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.0g，4.27mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(3mL)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酸乙酯(1.0g，4.13mmol，91％产率)。GCMS(m/z)242.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酸乙酯(1.0g，4.13mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(868mg，20.66mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酸(700mg，3.27mmol，79％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 213.33[M-1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酸(200mg，0.93mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(429mg，2.80mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(290mg，0.93mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙基苯基)乙酰胺(85mg,0.18mmol,19％产率)，为淡黄色固体。MS(ESI)m/z 470.21[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.60(t,J＝6.1Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.57-7.47(m,2H),7.45-7.30(m,4H),5.10(dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.48-4.22(m,4H),3.02-2.84(m,2H),2.74–2.54(m,1H),2.46-2.30(m,1H),2.05-1.93(m,1H),1.3-1.12(m,6H)。
实施例35
2-(2,4-二氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(2,4-二氯苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(2,4-二氯苯基)乙酮(3.0g，15.87mmol)在吡啶(20mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(3.5g，31.74mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(6mL)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2,4-二氯苯基)-2-氧代乙酸乙酯(3.0g，12.19mmol，76％产率)。1HNMR符合。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88–7.82(m,2H),7.65(d,J＝8.4Hz,1H),4.37(q,J＝7.0Hz,2H),1.30(t,J＝7.0Hz,3H),
B.2-(2,4-二氯苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。将2-(2,4-二氯苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.0g，4.58mmol)和二乙基氨基三氟化硫(3.7g，22.89mmol)的溶液在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2,4-二氯苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，3.73mmol，92％产率)。GCMS(m/z)268[M]+。
C.2-(2,4-二氯苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(2,4-二氯苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，3.73mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(940.2mg，22.38mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2,4-二氯苯基)-2,2-二氟乙酸(800mg，3.33mmol，89％产率。MS(ESI)m/z 241[M+2]+。
D.2-(2,4-二氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(2,4-二氯苯基)-2,2-二氟乙酸(279.6mg，1.165mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.3mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化，得到2-(2,4-二氯苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(60mg，0.12mmol，12％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 496.03[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(m,1H),9.70(t,J＝6.3Hz,1H),7.84–7.65(m,3H),7.66–7.57(d,J＝8.4Hz,1H),7.50(s,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),,5.11(dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.49(br d,J＝5.5Hz,2H),4.43(s,1H),4.34(s,1H),4.28(s,1H),2.99–2.84(m,1H),2.60–2.57(m,1H),2.44–2.31(m,1H),2.05–1.94(m,1H)。
实施例36
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酰胺
A.2-(2-甲氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(2-甲氧基苯基)乙酮(2.0g，13.32mmol)在吡啶(25mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(3.7g，33.29mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(50mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(6mL)并搅拌2h。将反应混合物用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-甲氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(2.0g，9.62mmol，72％产率)。GCMS(m/z)208.2[M]+。
B.2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酸乙酯。在0℃下向2-(2-甲氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.0g，4.81mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(3mL)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酸乙酯(1.0g，4.35mmol，90％产率)。GCMS(m/z)230.2[M+]。
C.2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酸乙酯(1.0g，4.35mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(913mg，21.74mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酸(700mg，3.46mmol，79％产率)。MS(ESI)m/z 201.29[M-1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酸(200mg，0.99mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(454mg，0.99mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(306mg，0.99mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-甲氧基苯基)乙酰胺(80mg，0.17mmol，17％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 458.15[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.37(t,J＝5.9Hz,1H),7.73(d,J＝7.7Hz,1H),7.59-7.41(m,4H),7.17-7.03(m,2H),5.11(dd,J＝5.0,13.0Hz,1H),4.53-4.26(m,4H),3.66(s,3H),3.01-2.85(m,1H),2.74–2.54(m,1H),2.45-2.29(m,1H),2.09-1.90(m,1H)
实施例37
2-(4-环丙基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(4-环丙基苯基)乙酮。向1-(4-溴苯基)乙酮(1g，5.02mmol)在水:1,4-二噁烷(1:10，50mL)中的搅拌且脱气溶液中添加环丙基硼酸(519mg，6.02mmol)，接着添加磷酸钾(3.2g，15.07mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(205mg，0.25mmol)。将反应混合物脱气10分钟并在100℃下加热8h。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤。向滤液中添加冷水(50mL)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的20％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到1-(4-环丙基苯基)乙酮(700mg，4.37mmol，87％产率)。GCMS(m/z)160.2[M]+。
B.2-(4-环丙基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-环丙基苯基)乙酮(700mg，4.37mmol)在吡啶(10mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(1.2g，10.93mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(20mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(2mL)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×60mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-环丙基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(890mg，4.08mmol，93％产率)。GCMS(m/z)218.2[M]+
C.2-(4-环丙基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。将2-(4-环丙基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(890mg，4.08mmol)和二乙基氨基三氟化硫(3.7g，22.89mmol)的溶液在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-环丙基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(920mg，3.83mmol，94％产率)。GCMS(m/z)240.2[M]+
D.2-(4-环丙基苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-环丙基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(920mg，3.83mmol)在四氢呋喃-甲醇-水(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(483mg，11.49mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-环丙基苯基)-2,2-二氟乙酸(750mg，3.53mmol，92％产率)。GCMS(m/z)212.1[M]+。
E.2-(4-环丙基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(4-环丙基苯基)-2,2-二氟乙酸(200mg，0.943mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.4mL，2.830mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(359mg，1.16mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-45％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(4-环丙基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(90mg，0.192mmol，20.0％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 468.13[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.58(t,J＝5.9Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.44(d,J＝8.1Hz,2H),7.39-7.31(m,2H),7.21(d,J＝8.1Hz,2H),5.10(dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.49-4.21(m,4H),3.00-2.81(m,1H),2.67-2.56(m,1H),2.45-2.29(m,1H),2.07-1.92(m,2H),1.04-0.97(m,2H),0.55–0.77(m,2H)。
实施例38
2-(4-氯-2-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(4-氯-2-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-氯-2-氟苯基)乙酮(2.0g，11.588mmol)在吡啶(30mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2.57g，23.176mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(4mL)并搅拌2h。向反应混合物中添加水(30mL)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5-10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-(4-氯-2-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.71g，7.434mmol，64％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z.230.1。
B.2-(4-氯-2-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。使2-(4-氯-2-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.71g，7.434mmol)与二乙基氨基三氟化硫(2.45mL，18.585mmol)反应并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-2-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，4.087mmol，55％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z.252.1。
C.2-(4-氯-2-氟苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，4.087mmol)在四氢呋喃:乙醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(0.85g，20.436mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩成2-(4-氯-2-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(550mg，2.455mmol，62％产率)，为棕色固体。MS(ESI)m/z.224.0。
D.2-(4-氯-2-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(4-氯-2-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(217mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.906mmol)并在0-5℃下搅拌1h。向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(4-氯-2-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(59mg，0.123mmol，12％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 480.07[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.74(s,1H),7.69(dd,J＝11.1,7.8Hz,3H),7.55–7.29(m,3H),5.16-5.09(dd,J＝5.1Hz,1H),4.52–4.27(m,4H),3.00–2.84(m,1H),2.66-2.55(m,1H),2.41-2.30(m,1H),2.04-1.94(m,1H)。
实施例39
2-(4-氯-3-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(4-氯-3-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-氯-3-氟苯基)乙酮(2.0g，11.62mmol)在吡啶(20mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2.5g，23.25mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(6mL)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-3-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(2.0g，8.69mmol，75％产率)。GCMS(m/z)230[M]+。
B.2-(4-氯-3-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下将2-(4-氯-3-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.0g，4.34mmol)和二乙基氨基三氟化硫(3.7g，22.89mmol)的溶液搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-3-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(900mg，3.57mmol，82％产率)。GCMS(m/z)252.1[M]+。
C.2-(4-氯-3-氟苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-氯-3-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(800mg，3.17mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(20mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(798mg，19.04mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-3-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(600mg，2.67mmol，84％产率。MS(ESI)m/z 223.1[M-1]+。
D.2-(4-氯-3-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(4-氯-3-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(261mg，1.165mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.3mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化，得到2-(4-氯-3-氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(50mg，0.10mmol，11％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 480.05[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.70(br s,1H),7.81(br t,J＝7.9Hz,1H),7.71–7.60(m,2H),7.49–7.32(m,3H),5.10(br dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.49–4.38(m,3H),4.34–4.25(m,1H),2.99–2.83(m,1H),2.63–2.56(br s,1H),2.44–2.26(m,1H),2.06–1.94(m,1H)。
实施例40
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酰胺
A.1-(3-氟-2-甲基苯基)乙酮。在0℃下向3-氟-2-甲基苯甲腈(3g，22.22mmol)在苯(20mL)中的搅拌溶液中添加甲基碘化镁(9.0mL，26.64mmol，乙醚中3M)并在80℃下搅拌8h。然后将反应混合物冷却至室温，添加6N盐酸(25mL)并在加热80℃下搅拌8h。将反应混合物冷却至室温并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(3-氟-2-甲基苯基)乙酮(920mg，6.05mmol，27％产率)。GCMS(m/z)152.2[M]+
B.2-(3-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(3-氟-2-甲基苯基)乙酮(900mg，5.91mmol)在吡啶(25mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(1.7g，14.79mmol)并在100℃下搅拌12h。将反应混合物用二氯甲烷(20mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(3mL)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.2g，5.71mmol，96％)。GCMS(m/z)210.2[M]+
C.2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酸乙酯。在室温下将2-(3-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.2g，5.71mmol)和二乙基氨基三氟化硫(4.3g，26.67mmol)的溶液搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酸乙酯(1.0g，4.31mmol，76％)，为棕色液体。GCMS(m/z)232.2[M]+
D.2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酸乙酯(1.0g，4.31mmol)在甲醇:四氢呋喃:水(1:1:1，30mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(543mg，12.93mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酸(800mg，3.92mmol，91％产率)。GCMS(m/z)204.1[M]+
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酸(200mg，0.98mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.3mL，2.94mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(303mg，0.98mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-45％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟-2-甲基苯基)乙酰胺(80mg，0.17mmol，18.0％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 460.10[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.68(t,J＝5.9Hz,1H),7.70(d,J＝8.1Hz,1H),7.49–7.31(m,5H),5.10(dd,J＝4.8,13.2Hz,1H),4.52-4.22(m,4H),3.00-2.82(m,1H),2.67-2.54(m,1H),2.46-2.30(m,1H),2.21(br s,3H),2.09-1.92(m,1H)。
实施例41
2-(3-氯-2-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(3-氯-2-甲基苯基)乙酮。在0℃下向3-氯-2-甲基苯甲腈(2.0g，13.245mmol)在苯(30mL)中的搅拌溶液中添加乙醚溶液(5.3mL，15.89mmol)中的甲基碘化镁(3M)并在75℃下搅拌16h。在0℃下将反应混合物用6N盐酸水溶液(20mL)处理并在75℃下搅拌4h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5-8％乙酸乙酯将获得的残余物通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化，得到1-(4-氯-2-甲基苯基)乙酮(1.4g，8.333mmol，63％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.168.1。
B.2-(3-氯-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在0℃下向1-(4-氯-2-甲基苯基)乙酮(1.4g，8.333mmol)在吡啶(30mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(1.85g，16.666mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(3mL)并搅拌2h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5-10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-(3-氯-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.1g，4.867mmol，58.5％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.226.1。
C.2-(3-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向2-(3-氯-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.1g，4.867mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(1.6mL，12.168mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(710mg，2.862mmol，58％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.248.1。
D.2-(3-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(710mg，2.862mmol)在四氢呋喃:乙醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加氢氧化锂(0.6g，14.314mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到为固体的2-(3-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸(382g，1.736mmol，60％产率)。MS(ESI)m/z219.17[M-1]-。
E.2-(3-氯-2-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(3-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸(213mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.906mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤并经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(3-氯-2-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(62mg，0.130mmol，13％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 476.07[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.68(s,1H),7.68(dd,J＝15.3,7.9Hz,2H),7.55(d,J＝7.3Hz,1H),7.46(s,1H),7.44–7.34(m,2H),5.11(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),4.52–4.27(m,4H),3.00–2.84(m,1H),2.66-2.55(m,1H),2.43-2.30(m,4H),2.04-1.94(m,1H)。
实施例42
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯。在室温下向4-氟-1-碘-2-(三氟甲基)苯(500mg，1.72mmol)在二甲基亚砜(5.2mL)中的搅拌溶液中添加铜(329mg，5.17mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(418mg，2.07mmol)并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。将合并的有机层用水(2×25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(300mg，1.05mmol，61％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87–7.83(m,1H),7.51–7.48(m,1H),7.39–7.34(m,1H),4.35–4.30(m,2H),1.30(t,J＝5.1Hz,3H)。
B.2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(300mg，1.05mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(132mg，3.15mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(220mg，0.85mmol，81％产率)。MS(ESI)m/z257.1[M-1]+。
C.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(200mg，0.78mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(356mg，2.32mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(302mg，0.78mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的55-60％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(75mg，0.17mmol，21％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 514.07[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.73–9.62(m,1H),7.96-7.82(m,2H),7.78-7.67(m,2H),7.49-7.37(m,2H),5.11(dd,J＝4.8,13.2Hz,1H),4.53-4.26(m,4H),3.00-2.82(m,1H),2.77-2.54(m,1H),2.44-2.23(m,1H),2.08-1.93(m,1H)
实施例43
2-(4-氯-2-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(4-氯-2-甲基苯基)乙酮。在0℃下向4-氯-2-甲基苯甲腈(2.0g，13.193mmol)在苯(30mL)中的搅拌溶液中添加乙醚溶液(5.27mL，15.83mmol)中的甲基碘化镁(3M)并在75℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至0℃，用6N盐酸溶液(20mL)淬灭并在75℃下继续搅拌4h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5-10％乙酸乙酯将获得的残余物通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化，得到1-(4-氯-2-甲基苯基)乙酮(1.5g，8.928mmol，67％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.168.1。
B.2-(4-氯-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-氯-2-甲基苯基)乙酮(1.5g，8.928mmol)在吡啶(30mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2g，17.857mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(3mL)并搅拌2h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5-10％乙酸乙酯将获得的残余物通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化，得到2-(4-氯-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.1g，4.867mmol，54％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z.226.2。
C.2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向2-(4-氯-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.1g，4.867mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(1.6mL，12.168mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(692mg，2.790mmol，57％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.248.1。
D.2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(692mg，2.790mmol)在四氢呋喃:乙醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加氢氧化锂(585mg，13.951mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸(446g，2.027mmol，72％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 219.29[M-1]-。
E.2-(4-氯-2-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸(213mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.906mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-60％乙腈将获得的残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(4-氯-2-甲基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(90mg，0.189mmol，19.5％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 476.09[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.65(t,J＝5.9Hz,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.54(d,J＝8.3Hz,1H),7.50–7.31(m,4H),5.11(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.52–4.25(m,4H),3.00–2.85(m,1H),2.65-2.55(m,1H),2.45-2.31(m,4H),2.08–1.94(m,1H)。
实施例44
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酰胺
A.1-(4-氟-2-甲基苯基)乙酮。在0℃下向4-氟-2-甲基苯甲腈(2.0g，14.803mmol)在苯(30mL)中的搅拌溶液中添加乙醚溶液(5.92mL，17.764mmol)中的甲基碘化镁(3M)并在75℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至0℃，用6N盐酸溶液(20mL)淬灭并在75℃下继续搅拌4h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5-10％乙酸乙酯将获得的残余物通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化，得到1-(4-氟-2-甲基苯基)乙酮(1.6g，10.526mmol，71％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.152.2。
B.2-(4-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-氟-2-甲基苯基)乙酮(1.6g，10.526mmol)在吡啶(30mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2.3g，21.052mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(3.2mL)并搅拌2h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5-10％乙酸乙酯将获得的残余物通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化，得到2-(4-氟-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.37g，6.523mmol，62％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.210.1。
C.2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酸乙酯。向2-(4-氯-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.37g，6.523mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(2.1mL，16.307mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酸乙酯(860mg，3.706mmol，57％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z.232.2。
D.2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酸。向2-(4-氯-2-甲基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(860mg，3.706mmol)在四氢呋喃:乙醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(933mg，22.241mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酸(684g，2.948mmol，72％产率)，为棕色液体。LCMS(ESI)m/z 203.37[M-1]-ve。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酸(197mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.906mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3X 50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-60％乙腈通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化获得的残余物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-甲基苯基)乙酰胺(79mg，0.172mmol，18％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 460.10[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.63(t,J＝6.0Hz,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.56(dd,J＝8.7,5.8Hz,1H),7.46(s,1H),7.40(d,J＝7.6Hz,1H),7.25–7.11(m,2H),5.11(dd,J＝13.3,5.0Hz,1H),4.50–4.27(m,4H),2.98-2.86(m,1H),2.68–2.55(m,1H),2.46-2.28(m,4H),2.08-1.94(m,1H)。
实施例45
2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向4-氯-1-碘-2-(三氟甲基)苯(1.0g，3.26mmol)在二甲基亚砜(15mL)中的搅拌溶液中添加铜(539mg，8.48mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(994mg，4.89mmol)，并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(900mg，2.98mmol，91％)。GCMS(m/z)302.0[M]+。
B.2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(900mg，2.98mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(375mg，8.94mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2,2-二氟乙酸(700mg，2.55mmol，86％产率)。GCMS(m/z)274.1[M]+。
C.2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2,2-二氟乙酸(200mg，0.72mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(336mg，2.18mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(226mg，0.72mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的80-90％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(4-氯-2-(三氟甲基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(80mg，0.11mmol，21％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 530.05[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.70(br t,J＝5.9Hz,1H),8.03(s,1H),7.97(br d,J＝8.4Hz,1H),7.85(d,J＝9Hz,1H),7.70(d,J＝7.7Hz,1H),7.47(s,1H),7.41(br d,J＝7.7Hz,1H),5.11(br dd,J＝4.8,13.2Hz,1H),4.53-4.25(m,4H),3.01-2.82(m,1H),2.67–2.54(m,1H),2.48–2.30(m,1H),2.08–1.94(m,1H)
实施例46
2-环己基-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-环己基-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下将2-环己基-2-氧代乙酸乙酯(1g，5.43mmol)添加到二乙基氨基三氟化硫(2.5mL)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂蒸发。通过柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2-环己基-2,2-二氟乙酸乙酯(900mg，4.36mmol，80％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)4.32(q,J＝6.9Hz,2H),2.06–2.04(m,1H),1.80–1.60(m,6H),1.37–1.30(m,4H),1.26–1.19(m,3H)。
B.2-环己基-2,2-二氟乙酸。向2-环己基-2,2-二氟乙酸乙酯(900mg，4.36mmol)在四氢呋喃:乙醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(550mg，13.10mmol)并在室温下搅拌16h。将挥发物在减压下蒸发，将所得残余物溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(2×15mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂蒸发，得到2-环己基-2,2-二氟乙酸(550mg，3.08mmol，70％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 178[M]+。
C.2-环己基-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-环己基-2,2-二氟乙酸(207mg，1.16mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将反应混合物用3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)处理并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂蒸发。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中的50-55％乙腈)纯化，得到2-环己基-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(53mg，0.122mmol，12％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 434.07[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.35(t,J＝6.0Hz,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.47(s,1H),7.41(d,J＝7.8Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.4Hz,1H),4.45(d,J＝16.8Hz,1H),4.44(d,J＝6.6Hz,2H),4.31(d,J＝17.7Hz,1H),2.93–2.85(m,1H),2.63–2.56(m,1H),2.45–2.36(m,1H),2.10–1.97(m,2H),1.74–1.64(m,5H),1.23–1.08(m,5H)。
实施例47
2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.4-氯-1-碘-2-(三氟甲氧基)苯。在0℃下向4-氯-2-(三氟甲氧基)苯胺(2g，10.025mmol)在66％硫酸水溶液(10mL)中的溶液中添加亚硝酸钠(760mg，11.027mmol)在水(2mL)中的溶液，并在0℃下搅拌20分钟。然后在0℃下添加脲(90mg，1.5mmol)在水(1mL)中的溶液并在相同温度下搅拌10分钟。然后在0℃下添加碘化钾(3.49g，21.052mmol)在水(5mL)中的溶液并在50℃下搅拌2h。向反应混合物中添加乙酸乙酯(300mL)，用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用戊烷为洗脱液通过硅胶(100-200)色谱法纯化所得残余物，得到4-氯-1-碘-2-(三氟甲氧基)苯(2.1g，6.52mmol，69％产率)，为无色糖浆状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.79(d,J＝8.8Hz,1H),7.32-7.26(m,1H),7.05(dd,J＝2.4,8.3Hz,1H)。
B.2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向4-氟-1-碘-2-(三氟甲基)苯(2.1g，6.525mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液中添加铜粉(1.03g，16.31mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.25mL，9.78mmol)，并在60℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用戊烷中的5％乙醚为洗脱液，通过硅胶(100-200)色谱法纯化所得残余物，得到2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.8g，5.66mmol，87％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm)7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.44-7.32(m,2H),4.34(q,J＝7.3Hz,2H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)。
C.2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸酯(1.8g，6.14mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(774mg，18.42mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(1.2g，4.137mmol，73％产率)。MS(ESI)m/z289.14[M-1]+。
D.2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)和2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(280mg，0.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(375mg，2.91mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(480mg，1.26mmol)并在室温下继续搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)稀释并将获得的固体过滤，用乙醚(20mL)洗涤，干燥并采用硅胶色谱法(氯仿中3％甲醇)纯化，得到2-(4-氯-2-(三氟甲氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(70mg，0.128mmol，13％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 545.97(M+1)+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.95(br s,1H),9.72(br t,J＝5.7Hz,1H),7.79(d,J＝9.2Hz,1H),7.71-7.61(m,3H),7.46(s,1H),7.41(d,J＝8.1Hz,1H),5.10(br dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.50-4.25(m,4H),2.99-2.80(m,1H),2.68-2.53(m,1H),2.47-2.30(m,2H),2.04-1.92(m,1H)。
实施例48
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-3-(2-甲氧基乙氧基)苯。在RT下向3-碘苯酚(2g，9.09mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(3.13g，22.72mmol)，接着添加1-溴-2-甲氧基乙烷(1.51g，10.90mmol)，并在70℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。使用石油醚中15％乙酸乙酯为洗脱液通过柱色谱法(100-200硅胶)纯化获得的粗品，得到1-碘-3-(2-甲氧基乙氧基)苯(1.3g，4.69mmol，52％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 279.04[M+1]+。
B.2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯。在0℃下向1-碘-3-(2-甲氧基乙氧基)苯(1g，3.6mmol)在二甲基亚砜(15mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.69mL，5.41mmol)和铜(0.59g，9.36mmol)，并在60℃下搅拌5h。将反应混合物用冰水淬灭并通过硅藻土垫过滤；将滤液用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(0.60g，2.19mmol，61％)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 274.1[M]+。
C.2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(800mg，2.93mmol)在甲醇:四氢呋喃:水混合物(15mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(370mg，8.79mmol)并在室温下搅拌5h。将反应混合物浓缩，将获得的粗品用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用2N盐酸水溶液(10mL)酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤；将滤液浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸(600mg，3.47mmol，83％产率)，为棕色半固体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.37–7.33(m,1H),7.22–7.15(m,2H),7.05–7.03(m,1H),4.84(brs,1H),4.14(s,3H),3.86–3.77(m,4H)。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸(285mg，1.16mmol)在吡啶(3mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.27mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并过滤、浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺(48mg，0.09mmol，9％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 501.96[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.54(t,J＝5.8Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.47–7.35(m,3H),7.16–7.11(m,3H),5.12(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.45–4.27(m,4H),4.11(t,J＝4.2Hz,2H),3.65(t,J＝4.5Hz,2H),3.30(s,3H),2.91–2.80(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.44–2.36(m,1H),2.08–2.05(m,1H)。
实施例49
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酰胺
A.(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷。在0℃下向2-溴乙醇(10g，80mmol)在二氯甲烷(100mL)中的搅拌溶液中添加叔丁基氯二甲基硅烷(14.5g，96.77mmol)和咪唑(10g,161.2mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液(40mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(8g，33.61mmol，42％产率)，为无色液体。
B.叔丁基(2-(3-碘苯氧基)乙氧基)二甲基硅烷。在RT下向(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(5.19g，21.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(6.27g，45.45mmol)、四丁基碘化铵(1.34g，3.63mmol)，接着添加3-碘苯酚(4g，18.18mmol)，并在70℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(20mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中15％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到叔丁基(2-(3-碘苯氧基)乙氧基)二甲基硅烷(3.5g，9.25mmol，43％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.28–7.26(m,2H),6.98(t,J＝8.4Hz,1H),6.89–6.86(m,1H),4.02–3.94(m,4H),0.90(s,9H),0.07(s,6H)。
C.2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸甲酯。在0℃下向叔丁基(2-(3-碘苯氧基)乙氧基)二甲基硅烷(1g，2.64mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.8g，3.97mmol)和铜(0.43g，6.87mmol)，并在60℃下搅拌5h。将反应混合物用冰水淬灭并通过硅藻土垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(3×20mL)萃取并将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸甲酯(0.2g，0.77mmol，29％)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 260.2[M]+。
D.2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸甲酯(200mg，0.77mmol)在甲醇:四氢呋喃:水混合物(15mL，1:1:1)中的冰冷溶液中添加一水合氢氧化锂(97mg，2.31mmol)并在室温下搅拌5h。在减压下除去挥发物，将所得残余物用水(6mL)稀释并用乙酸乙酯(2×5mL)洗涤。将水层用2N盐酸水溶液(5mL)酸化并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸(150mg，0.65mmol，84％产率)，为棕色半固体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.49–7.43(m,1H),7.19–7.05(m,3H),4.05–3.99(m,2H),3.85(brs,1H),3.73–3.70(m,2H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)和2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸(225mg，0.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冰冷溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.52mL，2.91mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(479mg，1.26mmol)，并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并将获得的粗品通过Reveleris C-18反相柱(0.1％甲酸水溶液中50％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-羟基乙氧基)苯基)乙酰胺(61mg，0.16mmol，16％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 488.08[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.56(s,1H),7.67(d,J＝7.8Hz,1H),7.47–7.35(m,3H),7.15–7.12(m,3H),5.10(dd,J＝12.6,4.5Hz,1H),4.88(t,J＝5.7Hz,1H),4.45–4.27(m,4H),4.11(t,J＝4.8Hz,2H),3.71(q,J＝4.8Hz,2H),2.91–2.87(m,1H),2.62–2.56(m,1H),2.41–2.35(m,1H),2.02–1.97(m,1H)。
实施例50
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-4-(2-甲氧基乙氧基)苯。在rt下向4-碘苯酚(2g，9.09mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的搅拌溶液中添加1-溴-2-甲氧基乙烷(1.5g，10.90mmol)、四丁基碘化铵(670mg,1.818mmol)和碳酸钾(3.13g，22.72mmol)，并在70℃下搅拌16h。将反应混合物用冰冷水(40mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-碘-4-(2-甲氧基乙氧基)苯(600mg，2.15mmol，24％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 277.9[M+1]+。
B.2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯。使1-碘-4-(2-甲氧基乙氧基)苯(500mg,1.798mmol)在二甲基亚砜(5mL)中的搅拌溶液与2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.34mL，2.69mmol)、铜(297mg，4.67mmol)反应并在50℃下搅拌12h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(120mg，0.437mmol，24％)，为棕色液体。GCMS(m/z)274[M]+
C.2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(1g，3.64mmol)在乙醇/四氢呋喃/水混合物(15mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(460mg，10.94mmol)并在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸(600mg，2.43mmol，66％产率)，为棕色半固体。粗化合物不经进一步纯化用于下一步。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(2-羟乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸(573mg，2.33mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加氧氯化磷(0.54mL，5.82mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(600mg，1.94mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺(40mg，0.079mmol，4％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 502.08[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ10.98(s,1H),9.57(br t,J＝6.1Hz,1H),7.68(d,J＝7.7Hz,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,2H),7.42-7.32(m,2H),7.07(d,J＝8.8Hz,2H),5.10(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.44-4.25(m,4H),4.20-4.10(m,2H),3.78-3.60(m,2H),3.25(s,3H),3.00-2.83(m,1H),2.66-2.56(m,1H),2.45-2.32(m,1H),2.05-1.94(m,1H)。
实施例51
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙基)苯基)乙酰胺
A.2-(3-碘苯基)乙醇：在0℃下向2-(3-碘苯基)乙酸(1g，3.81mmol)在四氢呋喃(20mL)中的搅拌溶液中添加硼烷二甲基硫醚络合物(1mL，11.45mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用4N盐酸(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-碘苯基)乙醇(0.9g，3.63mmol，95％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.61(s,1H),7.55(d,J＝7.8Hz,1H),7.25(d,J＝7.8Hz,1H),7.08(dd,J＝7.8,7.5Hz,1H),3.59(t,J＝6.6Hz,2H),2.67(t,J＝6.0Hz,2H)。
B.3-碘苯乙酸乙酯。在0℃下向2-(3-碘苯基)乙醇(900mg，3.62mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加乙酸酐(1.11g，10.88mmol)并在80℃下搅拌2h。在室温下将反应混合物用1N盐酸水溶液(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到3-碘苯乙酸乙酯(700mg，2.41mmol，66％产率)，为无色液体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.66(s,1H),7.59(d,J＝5.7Hz,1H),7.28(d,J＝6.5Hz,1H),7.11(dd,J＝8.0Hz,7.8Hz,1H),4.20(t,J＝6.8Hz,2H),2.85(t,J＝6.8Hz,2H),1.97(s,3H)。
C.2-(3-(2-乙酰氧基乙基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向3-碘苯乙酸乙酯(1g，3.46mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.05g，5.19mmol)，接着添加铜粉(0.57g，8.99mmol)并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-(2-乙酰氧基乙基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(550mg，1.92mmol，55％)，为棕色液体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.49–7.46(m,2H),7.41–7.34(m,2H),4.31–4.27(m,4H),2.98(t,J＝7.2Hz,2H),2.03(s,3H),1.31(t,J＝6.8Hz,3H)。
D.2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙基)苯基)乙酸。向2-(3-(2-乙酰氧基乙基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(0.8g，2.77mmol)在乙醇/四氢呋喃/水混合物(15mL，1:1:1)中的冰冷溶液中添加一水合氢氧化锂(349mg，8.3mmol)并在室温下搅拌16h。除去挥发物并将残余物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用2N盐酸水溶液(10mL)酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-羟基乙基)苯基)乙酸(450mg，2.08mmol，75％产率)，为棕色半固体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.56–7.39(m,4H),3.62(t,J＝6.6Hz,2H),2.78(t,J＝6.6Hz,2H),1.91(s,1H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙基)苯基)乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)和2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙基)苯基)乙酸(209mg，0.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冰冷溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.52mL，2.91mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(479mg，1.26mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过Reveleris C-18反相柱(0.1％甲酸水溶液中50％乙腈)纯化获得的粗产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-羟乙基)苯基)乙酰胺(50mg，0.10mmol，11％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 472.11[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.61(t,J＝6.3Hz,1H),7.67(d,J＝8.1Hz,1H),7.43–7.41(m,5H),7.36(d,J＝8.1Hz,1H),6.67(t,J＝5.1Hz,1H),5.10(dd,J＝13.8,5.1Hz,1H),4.45(d,J＝6.0Hz,2H),4.43(t,J＝15.3Hz,1H),4.28(d,J＝17.7Hz,1H),3.61(q,J＝5.1Hz,2H),2.96–2.83(m,1H),2.75(t,J＝6.9Hz,2H),2.67–2.54(m,1H),2.46–2.30(m,1H),2.04–1.92(m,1H)。
实施例52
2-(3-(二甲基氨基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.3-碘-N,N-二甲基苯胺。在0℃下向3-碘苯胺(300mg，1.36mmol)在乙醇(10mL)中的搅拌溶液中添加甲醛(82mg，2.73mmol)、分子筛(1g)和乙酸(2mL)，在室温下搅拌8h。将反应混合物在0℃下冷却，用氰基硼氢化钠(200g，2.73mmol)处理并在室温下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将滤液用水(10mL)稀释，用碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩，得到粗化合物。通过硅胶柱色谱法(石油醚中30％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到为液体的3-碘-N,N-二甲基苯胺(210mg，0.85mmol，74％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.03–6.89(m,3H),6.67–6.64(m,1H),2.92(s,6H)。
B.2-(3-(二甲基氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在RT下向3-碘-N,N-二甲基苯胺(250mg，1.01mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.19mL，1.52mmol)，接着添加铜粉(167mg，2.63mmol)并在55℃下搅拌5h。将反应混合物用水稀释并通过硅藻土垫过滤。将滤液用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到2-(3-(二甲基氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(80mg，6.99mmol，33％)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 243.2[M]+
C.2-(3-(二甲基氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-(二甲基氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(500mg，2.06mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(15mL，1:1:1)中的冰冷溶液中添加一水合氢氧化锂(260mg，6.17mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将所得残余物用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用硫酸氢钾水溶液(10mL)酸化并用乙酸乙酯(3X 10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-(二甲基氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸(400mg，1.86mmol，91％产率)，为棕色半固体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.64–7.55(m,3H),7.38–7.32(m,1H),2.56(s,6H)。
D.2-(3-(二甲基氨基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)和2-(3-(二甲基氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸(208mg，0.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冰冷溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.52mL，2.91mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(479mg，1.26mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过Reveleris C-18反相柱(0.1％甲酸水溶液中50％乙腈)纯化获得的粗品，得到2-(3-(二甲基氨基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(63mg，0.13mmol，13％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 470.8[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.21(t,J＝5.8Hz,1H),7.72(d,J＝7.8Hz,1H),7.62(d,J＝7.5Hz,1H),7.57–7.48(m,4H),7.32(dd,J＝8.4,6.9Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,4.8Hz,1H),4.48(d,J＝6.6Hz,2H),4.46(d,J＝16.5Hz,1H),4.32(d,J＝17.4Hz,1H),2.98–2.86(m,1H),2.73–2.57(m,1H),2.51–2.33(m,1H),2.34(s,6H),2.07–1.98(m,1H)。
实施例53
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酰胺
A.1-(3-碘苯基)哌啶。在0℃下向3-碘苯胺(5g，22.83mmol)在甲苯(50mL)中的搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(20mL，114.1mmol)，接着添加1,5-二溴戊烷(4.06mL，29.68mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物以饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤；滤液并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(石油醚中25％乙酸乙酯)纯化，得到1-(3-碘苯基)哌啶(2.8g，9.75mmol，43％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 287.90[M+1]+。
B.2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酸乙酯。在室温下向1-(3-碘苯基)哌啶(500mg，1.74mmol)在二甲基亚砜(5mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(690mg，2.61mmol)，接着添加铜粉(290mg，4.53mmol)并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用水稀释并通过硅藻土垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(3×10mL)萃取并将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得粗产物通过快速柱色谱法(石油醚中25％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酸乙酯(200mg，0.71mmol，41％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 283.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酸乙酯(250mg，0.88mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(5mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(110mg，2.65mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将获得的残余物溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酸(200mg，0.78mmol，88％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.27(d,J＝9.3Hz,1H),7.89(s,1H),7.70(d,J＝7.5Hz,1H),7.49(dd,J＝7.8Hz,7.6Hz,1H),4.28(brs,1H),3.49–3.39(m,4H),2.12–2.08(m,4H),1.69–1.65(m,2H)。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酸(206mg，0.81mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(371mg，2.43mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(250mg，0.81mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(哌啶-1-基)苯基)乙酰胺(62mg，0.12mmol，15％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 510.81[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.57(t,J＝5.7Hz,1H),7.66(d,J＝7.5Hz,1H),7.39(s,1H),7.35(d,J＝5.1Hz,1H),7.30(d,J＝8.1Hz,1H),7.08(d,J＝8.7Hz,1H),7.00(s,1H),6.92(d,J＝7.5Hz,1H),5.10(dd,J＝13.2,4.8Hz,1H),4.45(d,J＝6.0Hz,2H),4.41(d,J＝17.7Hz,1H),4.27(d,J＝17.4Hz,1H),3.31–3.11(m,4H),2.98–2.86(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.40–2.27(m,2H),2.01–1.97(m,1H),1.57–1.54(m,5H)。
实施例54
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酰胺
A.2,2'-氧基双(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸酯。在0℃下向2,2'-氧基二乙醇(2.0g，18.86mmol)在二氯甲烷(20mL)中的搅拌溶液中添加甲磺酰氯(2.1g，47.16mmol)、三乙胺(13mL，94.33mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用二氯甲烷(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2'-氧基双(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸酯(4.0g，15.26mmol，81％产率)。GC MS(m/z)263.1。
B.4-(3-碘苯基)吗啉。向3-碘苯胺(1.0g，4.56mmol)在甲苯(20mL)中的搅拌溶液中添加2,2'-氧基双(乙烷-2,1-二基)二甲磺酸酯(2.1g，9.13mmol)、二异丙基乙胺(4mL，22.82mmol)并在回流下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到4-(3-碘苯基)吗啉(1.2g，4.15mmol，91％产率)。LCMS(ESI)m/z290.16[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酸乙酯。向4-(3-碘苯基)吗啉(1.2g，4.15mmol)在二甲基亚砜(50mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.6mL，4.98mmol)、铜(686mg，10.79mmol)，并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酸乙酯(700mg，2.45mmol，59％产率)。GCMS(m/z)285.2。
D.2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酸乙酯(700mg，2.45mmol)在四氢呋喃-甲醇-水(20mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(309mg，7.36mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(5mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酸(550mg，2.14mmol，87％产率)。LCMS(ESI)m/z 258.12[M+1]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酸(300mg，1.16mmol)在吡啶(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.4mL，3.50mmol)并在0-5℃下搅拌1h。向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(361mg，1.16mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-45％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-吗啉代苯基)乙酰胺(80mg，0.15mmol，13％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 512.95[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.58(br t,J＝6.1Hz,1H),7.67(d,J＝7.8Hz,1H),7.52-7.31(m,2H),7.11(br d,J＝8.3Hz,1H),7.07-6.95(m,1H),5.10(dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.51-4.26(m,4H),3.77-3.66(m,4H),3.14-3.03(m,4H),2.98-2.84(m,1H),2.66-2.55(m,1H),2.45-2.30(m,1H),2.06-1.94(m,1H)
实施例55
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酰胺
A.1-(4-氟-2-异丙氧基环己基)乙酮。向1-(4-氟-2-羟苯基)乙酮(3g，19.48mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液中添加2-溴丙烷(5.94g，48.76mmol)、碳酸钾(8.06g 58.44mmol)，并在90℃下搅拌16h。将反应混合物用乙酸乙酯(30mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酮(2.5g，12.75mmol，65％产率)为棕色液体。MS(ESI)m/z 197.33[M]+
B.2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酮(2.0g，10.20mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2.83g，25.51mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。将滤液在0℃下用氯甲酸乙酯(6mL)处理并在室温下搅拌3h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用100-200目硅胶，己烷中10％乙酸乙酯洗脱，采用柱色谱法纯化粗品，得到2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(800g，3.14mmol，32％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 255.33[M]+
C.2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酸乙酯。向2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(450mg，1.77mmol)的搅拌溶液中添加二乙基氨基三氟化硫(714mg，4.42mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化至pH-8并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(200mg，0.724mmol，40％产率)，为棕色液体。GC-MS(ESI)m/z 276[M]+
D.2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(350mg，1.26mmol)在四氢呋喃/甲醇/水混合物(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(160mg，3.80mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩；将获得的残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酸(200mg，0.806mmol，63％产率)，为棕色半固体。GC-MS(ESI)m/z 224.0[M]+；1H NMR(300MHz,CDCl3)δppm7.62(dd,J＝8.4,2.1Hz,1H),7.19(brs,1H),6.72(ddd,J＝10.8,8.4,2.1Hz,1H),6.65(brd,J＝10.5Hz,1H),4.58(sep,J＝5.7Hz,1H),1.33(d,J＝6.3Hz,6H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酸(289mg，1.165mmol)在吡啶(10mL)中的冰冷溶液中添加POCl3(446mg，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后将反应混合物用3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.970mmol)处理，并在0-30℃下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。通过Reveleris C-18反相柱(0.1％甲酸水溶液中45-55％乙腈)纯化粗产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-异丙氧基苯基)乙酰胺(35mg，0.069mmol，7％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 503.95[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.98(s,1H),9.32(t,J＝5.7Hz,1H),7.70(d,J＝7.70Hz,1H),7.60-7.50(m,2H),7.46(br d,J＝7.7Hz,1H),7.08(br d,J＝11.0Hz,1H),6.85(dd,J＝8.7,6.3Hz,1H),5.11(dd,J＝13.6,4.77Hz,1H),4.68(sep,J＝6.3Hz,1H),4.53-4.23(m,3H),3.00-2.81(m,1H),2.68-2.49(m,1H),2.44-2.30(m,1H),2.07-1.93(m,1H),1.11(dd,J＝4.5Hz,0.2Hz,6H)。
实施例56
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2，2，2-三氟乙氧基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯。向2-碘苯酚(2g，9.09mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的搅拌溶液中添加1,1,1-三氟-2-碘乙烷(1.34mL，13.63mmol)，接着添加碳酸钾(3.76g 2.72mmol)并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(40mL)稀释并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-碘-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯(1.6g，5.46mmol，58％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 302.0[M]+。
B.2,2-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸乙酯。在RT下向1-碘-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯(1.5g，5.63mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.1mL，8.44mmol)，接着添加铜(0.92g，14.63mmol)并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸乙酯(410mg，1.37mmol，24％)，为无色液体。MS(ESI)m/z 298.1[M]+。
C.2,2-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸乙酯(400mg，1.34mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(169mg，4.02mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸(270mg，1mmol，59％产率)，为半固体化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72(d,J＝6.3Hz,1H),7.51(t,J＝8.4Hz,1H),7.19(t,J＝7.8Hz,1H),6.93(d,J＝8.4Hz,1H),6.68(brs,1H),4.38(q,J＝8.1Hz,1H)。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2’-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸(262mg，1.16mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)，在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)，并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酰胺(60mg，0.11mmol，11％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 525.89[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.42(t,J＝5.4Hz,1H),7.70(d,J＝7.5Hz,1H),7.63-7.52(m,2H),7.49(s,1H),7.43(d,J＝8.1Hz,1H),7.26(d,J＝8.1Hz,1H),7.18(dd,J＝7.7,7.6Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,4.8Hz,1H),4.75(q,J＝8.7Hz,2H),4.46(d,J＝17.1Hz,1H),4.45(d,J＝6.0Hz,2H),4.31(d,J＝17.4Hz,1H),2.92–2.86(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.42–2.37(m,1H),2.02–1.98(m,1H)。
实施例57
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(2-乙氧基-4-氟苯基)乙酮。向1-(4-氟-2-羟苯基)乙酮(3g，19.48mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液中添加溴乙烷(5.30g，48.76mmol)、碳酸钾(8.06g 58.44mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用乙酸乙酯(30mL)稀释并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(2-乙氧基-4-氟苯基)乙酮(2.6g，14.28mmol，74％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 183.17[M]+
B.2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(2-乙氧基-4-氟苯基)乙酮(1.0g，5.49mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(1.52g，13.73mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(3mL)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用100-200目硅胶，10％乙酸乙酯-石油醚洗脱，采用柱色谱法纯化粗品，得到2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(880g，3.66mmol，67％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 241.14[M]+
C.2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(800mg，3.33mmol)的搅拌溶液中添加二乙基氨基三氟化硫(1.34g，8.33mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(450mg，1.71mmol，51％产率)，为棕色液体。GC-MS(ESI)m/z 262[M]+
D.2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1g，3.81mmol)在四氢呋喃/甲醇/水混合物(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(480mg，11.45mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(600mg，2.56mmol，67％产率)，为棕色半固体。将粗化合物不经进一步纯化用于下一步。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(181mg，0.776mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(294mg，1.93mmol)并在0℃-5℃下搅拌1h。然后在0℃下向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(200mg，0.647mmol)，并使其经1h时段温热室温搅拌。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中45-55％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化粗产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基-4-氟苯基)-2,2-二氟乙酰胺(80mg，0.163mmol，25％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 489.95[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.35(br t,J＝5.8Hz,1H),7.71(d,J＝7.7Hz,1H),7.59(dd,J＝8.6,6.8Hz,1H),7.50(s,1H),7.44(d,J＝7.7Hz,1H),7.05(br d,J＝11.0Hz,1H),6.88(td,J＝8.5,2.4Hz,1H),5.11(dd,J＝13.3,5.3Hz,1H),4.50-4.26(m,4H),4.00(q,J＝6.9Hz,2H),3.00-2.85(m,1H),2.67-2.55(m,1H),2.44-2.31(m,1H),2.06-1.95(m,1H),1.11(t,J＝6.9Hz,3H)。
实施例58
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酰胺
A.1-碘-2-异丙氧基苯。向2-碘苯酚(2g，9.09mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴丙烷(3.38mL，36.3mmol)，接着添加碳酸钾(3.76g，27.27mmol)并在90℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(25mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-碘-2-异丙氧基苯(2.0g，7.63mmol，84％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 262.21[M]+。
B.2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酸乙酯。在RT下向1-碘-2-异丙氧基苯(2g，7.6mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.5mL，11.45mmol)，接着添加铜(1.26g，19.84mmol)并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化获得的粗产物，得到2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(1.3g，5.03mmol，66％)，为无色液体。MS(ESI)m/z259.23[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(1g，3.87mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(0.49g，11.62mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的粗品溶于水(15mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酸(600mg，2.60mmol，67％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.75(brs,1H),7.65(d,J＝7.2Hz,1H),7.44(dd,J＝8.0,7.6Hz,1H),7.03(dd,J＝8.0,7.2Hz,1H),6.94(d,J＝8.4Hz,1H),4.66(Sep,J＝6.0Hz,1H),1.32(d,J＝6.0Hz,6H)。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酸(267mg，1.16mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中的50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-异丙氧基苯基)乙酰胺(40mg，0.08mmol，8％产率)。为白色固体。MS(ESI)m/z485.98[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.26(t,J＝5.8Hz,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.55–7.45(m,4H),7.12(d,J＝8.4Hz,1H),7.02(dd,J＝7.2,7.0Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.46(Sep,J＝6.0Hz,1H),4.45(d,J＝6.3Hz,2H),4.44(d,J＝17.2,1H),4.31(d,J＝17.4Hz,1H),2.98–2.86(m,1H),2.57–2.49(m,1H),2.43–2.30(m,1H),2.04–1.94(m,1H),1.13(d,J＝6.0Hz,3H),1.12(d,J＝6.0Hz,3H)。
实施例59
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酰胺
A.1-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酮。向1-(2-氟-4-羟苯基)乙酮(300mg，1.95mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的搅拌溶液中添加异丙基碘(397mg，2.33mmol)，接着添加碳酸钾(672mg，4.87mmol)并在90℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酮(300mg，1.53mmol，79％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 197.2[M+1]+。
B.2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酮(300mg，1.63mmol)在吡啶(3mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(452mg，3.38mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(10mL)彻底洗涤。在0℃下将氯甲酸乙酯(0.64mL)添加到滤液中，并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(200mg，0.787mmol，48％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 255.28[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯。在0℃下将2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(200mg，0.787mmol)添加到二乙基氨基三氟化硫(0.4mL)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化获得的粗产物，得到2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(200mg，0.72mmol，92％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 276.1[M+1]+。
D.2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(200mg，0.72mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(10mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(91mg，2.17mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将所得残余物溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸(160mg，0.65mmol，89％产率)，为半固体化合物。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸(289mg，1.16mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得粗产物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟-4-异丙氧基苯基)乙酰胺(60mg，0.12mmol，12％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 503.99[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.59(d,J＝7.2Hz,1H),7.70(d,J＝7.6Hz,1H),7.48(dd,J＝8.8,8.7Hz,1H),7.47(s,1H),7.41(d,J＝8.0Hz,1H),6.96(dd,J＝13.2,2.0Hz,1H),6.87(dd,J＝8.3,2.0Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.71(sep,J＝6.0Hz,1H),4.48(d,J＝6.4Hz,2H),4.45(d,J＝17.2Hz,1H),4.31(d,J＝18.0Hz,1H),2.95–2.87(m,1H),2.62–2.58(m,1H),2.41–2.37(m,1H),2.02–1.99(m,1H),1.28(d,J＝5.6Hz,6H)。
实施例60
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酸乙酯。向2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯(1.2g，5.26mmol)在乙醇(25mL)中的搅拌溶液中添加吗啉(0.91g，10.52mmol)、乙酸(0.63mL，10.52mmol)并在0℃下搅拌1h，然后添加氰基硼氢化钠(0.661g10.52mmol)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酸乙酯(0.8g，2.67mmol，51％产率)，为棕色液体。LCMS(ESI)m/z 300.0。
B.2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酸乙酯(0.8g，2.67mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(15mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(337mg，8.02mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酸(600mg，2.21mmol，82％产率)，为棕色固体。LCMS(ESI)m/z 272。
C.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酸酸(290mg，1.06mmol)和3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.970mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.6mL，3.33mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(553.3mg，1.45mmol)，并在室温下搅拌4h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩并在真空下干燥。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(吗啉代甲基)苯基)乙酰胺(40mg，0.06mmol，8％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 526.7[M+1]+。1H NMR(300MHz,TFA-d4)δ＝8.03-7.92(m,2H),7.83(br s,1H),7.72(br s,2H),7.64-7.54(m,2H),5.64-5.0(m,1H),4.80(br s,2H),4.73(br s,2H),4.6(br s,2H),4.4(s,2H),4.08(t,J＝11.7Hz,2H),3.73(d,J＝11.7Hz,1H),3.51(d,J＝12.1Hz,1H),3.33-3.04(m,2H),2.92-2.61(m,1H),2.53(s,1H)。
实施例61
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酰胺
A.1-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酮。向1-(4-氟-2-羟苯基)乙酮(1g，6.48mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加1,1,1-三氟-2-碘乙烷(0.64mL，6.48mmol)，接着添加碳酸钾(2.68g，19.46mmol)并在90℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，得到1-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酮(325mg，1.36mmol，20％产率)，为无色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90(dd,J＝6.8,6.8Hz,1H),6.85–6.81(m,1H),6.61(dd,J＝2.0,2.4Hz,1H),4.42–4.38(m,2H),2.61(s,3H)。
B.2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酮(320mg，1.35mmol)在吡啶(10mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(376mg，3.38mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(10mL)洗涤。在0℃下将氯甲酸乙酯(0.64mL)添加到滤液中并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(15mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-2-氧代乙酸乙酯(300mg，1.02mmol，75％产率)，为无色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99–7.95(m,1H),6.94–6.89(m,1H),6.66(dd,J＝2.4,9.6Hz,1H),4.42–4.35(m,4H),1.38(t,J＝7.6Hz,3H)。
C.2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸乙酯。在0℃下将2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)-2-氧代乙酸乙酯(300mg，1.02mmol)添加到二乙基氨基三氟化硫(DAST，0.9mL)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸乙酯(250mg，0.79mmol，77％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.71–7.66(m,1H),6.91–6.85(m,1H),6.66(d,J＝9.6Hz,1H),4.39–4.28(m,4H),1.33(t,J＝4.2Hz,3H)。
D.2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸乙酯(390mg，1.23mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(12mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(155mg，3.70mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物在减压下浓缩，将获得的粗品溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸(280mg，0.98mmol，79％产率)，为半固体化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72–7.69(m,1H),6.91–6.87(m,1H),6.66(d,J＝9.2Hz,1H),6.57(brs,1H),4.39–4.34(m,2H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酸(280mg，0.97mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中的50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基)乙酰胺(45mg，0.08mmol，8％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 544.03[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.44(t,J＝5.7Hz,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.64(dd,J＝9.0,6.6Hz,1H),8.49(s,1H),7.42(d,J＝8.1Hz,1H),7.26(dd,J＝11.1,0.6Hz,1H),7.02(ddd,J＝10.8,8.7,2.4Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.81(q,J＝8.7Hz,2H),4.45(d,J＝7.2Hz,2H),4.44(d,J＝16.2Hz,1H),4.31(d,J＝17.1Hz,1H),2.93–2.90(m,1H),2.63–2.54(m,1H),2.45–2.36(m,1H),2.01–1.98(m,1H)。
实施例62
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酰胺
A.1-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酮。向1-(4-羟基-2-甲基苯基)乙酮(2.0g，13.333mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(5.5g，49.0mmol)，接着添加异丙基碘(2mL，20.0mmol)并在80℃下搅拌4h。将反应混合物过滤，添加水(20mL)并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的0-10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到1-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酮(1.58g，8.229mmol，62％产率)。MS(ESI)m/z 193.48[M+1]+。
B.2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酮(1.58g，8.229mmol mmol)在吡啶(30mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(1.82g，16.46mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(40mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(3mL)并搅拌2h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.0g，4.01mmol，49％)，为无色液体。MS(ESI)m/z 251.40[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酸乙酯。使2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.0g，4.01mmol)的搅拌溶液与二乙基氨基三氟化硫(1.32mL，10.025mmol)反应并在室温下搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到为液体的2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酸乙酯(990mg，3.639mmol，91％)。GC-MS(m/z)272.2[M]+。
D.2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酸乙酯(990mg，3.694mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(1:1:1，10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加氢氧化锂(916mg，21.838mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酸(719mg，2.618mmol，81％产率)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 9.59(br s,1H)7.49(d,J＝8.80Hz,1H)6.58-6.85(m,2H)4.41-4.67(m,1H)2.41(s,3H)1.34(m,,6H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酸(236mg，0.968mmol)在吡啶(25mL)中的搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.3mL，2.16mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-50％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-甲基苯基)乙酰胺(79mg，0.158mmol，16％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 500.2329[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.98(s,1H),9.51(br t,J＝6.05Hz,1H),7.69(d,J＝7.70Hz,1H),7.51-7.28(m,3H),6.83(s,2H),5.11(br dd,J＝13.20,5.14Hz,1H),4.66(dt,J＝12.10,6.05Hz,1H),4.51-4.25(m,4H),2.99–2.82(m,1H),2.67–2.54(m,1H),2.46–2.30(m,1H),2.28(s,3H),2.07–1.95(m,1H),1.26(m,6H)。
实施例63
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酰胺
A.1-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酮。在室温下向1-(4-羟基-3-甲基苯基)乙酮(3.0g，19.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(8.3g，59.91mmol)、异丙基碘(4.0g，23.96mmol)，并在100℃下搅拌4h。将反应混合物用水(150mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酮(3.2g，16.66mmol，84％产率)。LCMS(ESI)m/z 193.3[M+1]+。
B.2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酮(3.2g，16.66mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(4.6g，41.66mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(9mL)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(2.5g，10.0mmol，60％产率)。LCMS(ESI)m/z 251.28[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酸乙酯。使2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(500mg，2.00mmol)的搅拌溶液与二乙基氨基三氟化硫(2.5g，15.26mmol)反应并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酸乙酯(450mg，1.65mmol，83％产率)。GCMS(m/z)272.2[M]+。
D.2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酸乙酯(450mg，1.65mmol)在四氢呋喃-甲醇-水(20mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(208mg，4.96mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(5mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酸(200mg，0.81mmol，50％产率)。LCMS(ESI)m/z243.34[M-1]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酸(200mg，0.81mmol)在吡啶(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.3mL，2.45mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后添加3-(5-(氨基甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(253mg，0.81mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-45％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-3-甲基苯基)乙酰胺(90mg，0.18mmol，22.0％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 500.57[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.52(br t,J＝6.1Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.44-7.26(m,2H),7.06(d,J＝8.3Hz,1H),5.11(dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.72-4.60(m,1H),4.50-4.20(m,4H),3.00-2.83(m,1H),2.67-2.54(m,1H),2.44-2.29(m,1H),2.14(s,3H),2.05-1.95(m,1H),1.29(d,J＝6.4Hz,6H)。
实施例64
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酰胺
A.1-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酮。在室温下向1-(3-氟-4-羟苯基)乙酮(3.0g，19.46mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(8.0g，58.38mmol)、异丙基碘(3.9g，23.35mmol)，并在100℃下搅拌4h。将反应混合物用水(150mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酮(3.1g，15.81mmol，81％产率)。LCMS(ESI)m/z 197.3[M+1]+。
B.2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。向1-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酮(3.1g，15.81mmol)在吡啶(15mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(4.6g，39.54mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(30mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(9mL)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(2.5g，9.84mmol，62％产率)。LCMS(ESI)m/z 255.28[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯。向2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.2g，4.72mmol)的搅拌溶液中添加二乙基氨基三氟化硫(3.1g，19.23mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(900mg，3.26mmol，69％产率)。GCMS(m/z)276.2[M]+。
D.2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸乙酯(900mg，3.26mmol)在四氢呋喃-甲醇-水(20mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(410mg，9.78mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(5mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸(700mg，2.82mmol，87％产率)。LCMS(ESI)m/z 247.52[M-1]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酸(300mg，1.20mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.4mL，3.62mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后添加3-(5-(氨基甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(374mg，1.20mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的35-40％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-氟-4-异丙氧基苯基)乙酰胺(80mg，0.15mmol，13.0％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 504.56[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.60(br t,J＝6.1Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.45-7.26(m,5H),5.10(dd,J＝5.1,13.5Hz,1H),4.73(m,1H),4.50-4.23(m,4H),2.98-2.85(m,1H),2.67–2.55(m,1H),2.45-2.30(m,1H),2.04-1.95(m,1H),1.30(d,J＝5.9Hz,6H)。
实施例65
2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(3-氯-4-异丙氧基苯基)乙酮。向1-(3-氯-4-羟苯基)乙酮(2.5g，14.62mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的搅拌溶液中添加2-碘丙烷(2.98g，17.54mmol)，接着添加碳酸钾(5.04g，36.55mmol)，并在90℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(40mL)稀释并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-(3-氯-4-异丙氧基苯基)乙酮(2.3g，10.84mmol，74％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 213.23[M]+。
B.2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(3-氯-4-异丙氧基苯基)乙酮(2g，8.26mmol)在吡啶(30mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2.69g，24.79mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(30mL)洗涤。在0℃下将氯甲酸乙酯(6mL)添加到滤液中并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×30mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.8g，6.66mmol，80％产率)，为无色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J＝2.0Hz,1H),7.92(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),7.00(d,J＝8.8Hz,1H),4.71(sep,J＝6.2Hz,1H),4.44(q,J＝6.8Hz,2H),1.44(d,J＝6.5Hz,6H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。
C.2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下将二乙基氨基三氟化硫(1.47mL)添加到2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1g，3.7mmol)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(900mg，3.08mmol，89％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 293.1[M+1]+。
D.2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(0.45g，1.54mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(195mg，4.54mmol)并在室温下搅拌16h。在减压下除去挥发物并将获得的残余物溶于水(10mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(300mg，1.13mmol，74％产率)，为半固体化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41(brs,1H),7.65(d,J＝2.1Hz,1H),7.47(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),6.97(dd,J＝5.1,8.7Hz,1H),4.62(sep,J＝5.7Hz,1H),1.40(d,J＝6.3Hz,6H)。
E.2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(235mg，0.89mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.23mL，2.43mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(250mg，0.81mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到2-(3-氯-4-异丙氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(60mg，0.11mmol，14％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 520.01[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.62(t,J＝5.7Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.59(d,J＝2.4Hz,1H),7.49(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),7.41(s,1H),7.37(d,J＝8.1Hz,1H),7.31(d,J＝8.7Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.4Hz,1H),4.76(sep,J＝6.3Hz,1H),4.45(d,J＝5.7Hz,2H),4.42(d,J＝18.0Hz,1H),4.28(d,J＝17.7,1H),2.93–2.87(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.40–2.30(m,1H),2.04–1.94(m,1H),1.31(d,J＝5.7Hz,6H)。
实施例66
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯。在室温下向1-碘-2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯(1.0g，3.31mmol)在二甲基亚砜(13mL)中的搅拌溶液中添加铜(546mg，8.60mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.638mL 4.96mmol)并在55℃下搅拌2h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(50mL)中和并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(900mg，3.02mmol，91％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65-7.58(d,1H),7.18-7.02(m,2H),4.41–4.25(m,2H),2.43(s,3H),1.36–1.29(m,3H)。(在1H NMR中乙酸乙酯痕迹与产物一起显示)
B.2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(900mg，3.020mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(634mg，15.106mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(25mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(450mg，1.66mmol，55％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.65-7.49(d,J＝9.2Hz,1H),7.20-7.16(m,2H),2.18(s,3H)。
C.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(261mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.27mL，2.906mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-60％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(60mg，0.114mmol，11％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 526.52[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.65(t,J＝5.9Hz,1H),7.73–7.63(m,2H),7.46(s,1H),7.43–7.38(d,J＝8.0Hz,1H),7.38–7.32(m,2H),5.10(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.52–4.28(m,4H),2.96–2.85(m,1H),2.68–2.53(m,1H),2.47–2.31(m,4H),2.08–1.94(m,1H)。
实施例67
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺
A.2-氟-1-碘-4-(三氟甲氧基)苯。在室温下向1-溴-2-氟-4-(三氟甲氧基)苯(500mg，1.93mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(579mg，3.86mmol)、碘化亚铜(18mg，0.09mmol)和反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(30mg，0.11mmol)，然后在110℃下加热16h。将反应混合物用水(10mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-氟-1-碘-4-(三氟甲氧基)苯(400mg，1.3mmol，68％产率)，为棕色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.78(dd,J＝8.4,6.9Hz,1H),6.98(dd,J＝8.1,1.5Hz,1H),6.84(d,J＝8.3Hz,1H)。
B.2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯。在RT下向2-氟-1-碘-4-(三氟甲氧基)苯(1g，3.27mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.6mL，4.9mmol)，接着添加铜(0.54g，8.49mmol)，并在60℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化获得的粗产物，得到2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(800mg，2.64mmol，81％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 302.1[M]+。
C.2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(800mg，2.64mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(333mg，7.94mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(450mg，1.64mmol，62％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 298.1[M]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70(dd,J＝9.6Hz,1.6Hz,1H),7.14(d,J＝7.9Hz,1H),7.06(dd,J＝7.8Hz,1.8Hz,1H),5.02(brs,1H)。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(274mg，1.55mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷搅拌溶液中滴加氧氯化磷(0.36mL，3.87mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将反应混合物用3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(400mg，1.29mmol)处理，并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-氟-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(60mg，0.11mmol，9％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 529.6[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.76(t,J＝5.8Hz,1H),7.82(dd,J＝8.4,8.3Hz,1H),7.70(d,J＝7.5Hz,1H),7.63(d,J＝11.4Hz,1H),7.48(s,1H),7.43–7.40(m,2H),5.11(dd,J＝12.9,4.8Hz,1H),4.50(d,J＝6.3Hz,2H),4.46(t,J＝17.7Hz,1H),4.31(d,J＝17.4,1H),2.90–2.63(m,1H),2.63–2.56(m,1H),2.42–2.27(m,1H),2.02–1.98(m,1H)。
实施例68
2-(5-氯吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(5-氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向5-氯-2-碘吡啶(1.0g，4.18mmol)在二甲基亚砜(11mL)中的搅拌溶液中添加铜(690mg，10.86mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.01g，5.01mmol)，并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(5-氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(700mg，2.98mmol，70％)。GCMS(m/z)235.1[M]+。
B.2-(5-氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(5-氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(800mg，3.40mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(429mg，10.21mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(5-氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(400mg，1.94mmol，57％产率)。MS(ESI)m/z 208.30[M+1]+。
C.2-(5-氯吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(5-氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(200mg，0.96mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(443mg，2.89mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.96mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-45％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(5-氯吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(65mg，0.14mmol，14％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 462.69[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝10.99(s,1H),9.69(t,J＝5.9Hz,1H),8.81(d,J＝2.2Hz,1H),8.19(dd,J＝2.6,8.4Hz,1H),7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(d,J＝8.1Hz,1H),7.50(s,1H),7.44(d,J＝7.7Hz,1H),5.11(dd,J＝5.0,13.0Hz,1H),4.56-4.27(m,4H),3.00-2.84(m,1H),2.74-2.55(m,1H),2.45-2.22(m,1H),2.09-1.91(m,1H)。
实施例69
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酰胺
A.5-氟-2-碘吡啶。在室温下向2-溴-5-氟吡啶(2.5g，14.2mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(4.26g，28.4mmol)、碘化亚铜(135mg，0.71mmol)，接着添加反式-N,N-二甲基环己烷-1,2-二胺(0.24mL，1.56mmol)，并在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到5-氟-2-碘吡啶(2.2g，9.86mmol，71％产率)，为棕色液体。LCMS(m/z)224.3[M+]。
B.2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸乙酯。在RT下向5-氟-2-碘吡啶(300mg，1.34mmol)在二甲基亚砜(3.4mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(409mg，2.02mmol)，接着添加铜(22mg，3.49mmol)并在60℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸乙酯(200mg，0.72mmol，54％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z278[M]+。
C.2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸乙酯(250mg，1.14mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(10mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(144mg，3.42mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的粗品溶于水(10mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸(150mg，0.78mmol，69％产率)，为半固体化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s,1H),8.37(brs,1H),7.84(dd,J＝8.8Hz,4.4Hz,1H),7.64(ddd,J＝10.8Hz,8.8Hz,2.4Hz,1H)。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酸(221mg，1.16mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-氟吡啶-2-基)乙酰胺(60mg，0.11mmol，14％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 446.7[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.67(t,J＝5.7Hz,1H),8.76(d,J＝2.4Hz,1H),8.01–7.89(m,2H),7.71(d,J＝7.8Hz,1H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝8.1Hz,1H),5.11(dd,J＝13.5,5.1Hz,1H),4.50(d,J＝5.4Hz,2H),4.47(d,J＝17.4Hz,1H),4.32(d,J＝17.1,1H),2.98–2.84(m,1H),2.66–2.58(m,1H),2.43–2.30(m,1H),2.02–1.94(m,1H)。
实施例70
2-(2,4-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(2,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向2,4-二氟-1-碘苯(800mg，3.33mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.01g，4.99mmol)、铜(550mg，8.65mmol)，并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(400mg，1.69mmol，51％)，为棕色液体。GCMS:236.1[M]+。
B.2-(2,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(2,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(400mg，1.69mmol)在乙醇:四氢呋喃:水(10mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(214mg，5.08mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸(250mg，1.20mmol，71％产率)。MS(ESI)m/z 207.43[M-1]+
C.2-(2,4-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌冷(0℃)溶液中添加2-(2,4-二氟苯基)-2,2-二氟乙酸(202mg，0.97mmol)，接着添加二异丙基乙胺(0.52mL，2.91mmol)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(480mg，1.26mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)稀释并将获得的固体过滤，用乙醚(20mL)洗涤，干燥并使用二氯甲烷中的4％甲醇为洗脱液通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化，得到2-(2,4-二氟苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(60mg，0.129mmol，13％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 463.68[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.72(br t,J＝5.9Hz,1H),7.78-7.65(m,2H),7.55-7.34(m,3H),7.29-7.18(m,1H),5.11(br dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.56-4.16(m,4H),3.08-2.80(m,1H),2.75-2.59(m,1H),2.44-2.32(m,1H),2.06-1.92(m,1H)。
实施例71
2-(4-溴苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(4-溴苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向1-溴-4-碘苯(300mg，2.81mmol)在二甲基亚砜(3mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(324mg，1.6mmol)，接着添加铜粉(175mg，2.75mmol)并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2-(4-溴苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(200mg，0.72mmol，25％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z 278.1[M]+
B.2-(4-溴苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-溴苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(200mg，0.72mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(90mg，2.15mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的残余物溶于水(15mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，得到2-(4-溴苯基)-2,2-二氟乙酸(150mg，0.60mmol，84％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 251.43[M-H]+
C.2-(4-溴苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(4-溴苯基)-2,2-二氟乙酸(291mg，1.16mmol)在吡啶(6mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)，并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中，并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(甲酸水溶液中50-55％0.1％乙腈)纯化，得到2-(4-溴苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(50mg，0.098mmol，10％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 505.6[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.68(t,J＝5.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.4Hz,2H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.54(d,J＝8.7Hz,2H),7.39(s,1H),7.36(d,J＝8.1Hz,1H),5.10(dd,J＝13.2,4.8Hz,1H),4.45(d,J＝6.0Hz,2H),4.43(d,J＝18.1Hz,1H),4.28(d,J＝17.4Hz,1H),2.96–2.86(m,1H),2.63–2.49(m,1H),2.41–2.30(m,1H),2.07–1.94(m,1H)。
实施例72
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-2-(2-甲氧基乙氧基)苯。在室温下向2-碘苯酚(1g，4.54mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(1.88g，13.64mmol)，接着添加碘化钾(0.07g，0.45mmol)和1-溴-2-甲氧基乙烷(0.46mL，4.99mmol)，并在70℃下搅拌16h。将反应混合物用水(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-碘-2-(2-甲氧基乙氧基)苯(0.8g，2.87mmol，84％产率)，为无色液体。GCMS(m/z)278.1[M+]。
B.2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯。在RT下向1-碘-2-(2-甲氧基乙氧基)苯(800mg，2.87mmol)在二甲基亚砜(15mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.42mL，4.31mmol)，接着添加铜粉(470mg，7.46mmol)，并在60℃下搅拌6h。将反应混合物用水淬灭并通过硅藻土垫过滤。将滤液用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(460mg，1.37mmol，24％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 274.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(450mg，1.64mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(206mg，4.92mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的粗品溶于水(10mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸(290mg，1.17mmol，72％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 247.28[M+H]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酸(262mg，1.07mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将反应混合物用3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)处理并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2-甲氧基乙氧基)苯基)乙酰胺(60mg，0.12mmol，12％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 502.34[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.23(t,J＝5.6Hz,1H),7.71(d,J＝8.1Hz,1H),7.55(dd,J＝9.6,1.5Hz,1H),7.52–7.48(m,2H),7.45(d,J＝8.1Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),7.07(dd,J＝7.8,7.2Hz,1H),5.11(dd,J＝13.5,5.1Hz,1H),4.47(d,J＝6.3Hz,2H),4.45(d,J＝15.9Hz,1H),4.31(d,J＝17.4Hz,1H),4.05(t,J＝4.8Hz,2H),3.45(t,J＝5.1Hz,2H),3.24(s,3H),2.96–2.86(m,1H),2.66–2.57(m,1H),2.45–2.30(m,1H),2.04–1.94(m,1H)。
实施例73
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-羟基环己基)乙酰胺
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-羟基环己基)乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)(0.050g，0.113mmol)放入装有2,2-二氟-2-(1-羟基环己基)乙酸(0.026g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)的小瓶中。将反应混合物在40℃下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-羟基环己基)乙酰胺(0.041g，0.091mmol，67.4％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.04(t,J＝6.15Hz,1H),7.68(d,J＝7.88Hz,1H),7.50(s,1H),7.43(d,J＝7.88Hz,1H),5.19(s,1H),5.10(dd,J＝5.04,13.24Hz,1H),4.40-4.47(m,3H),4.27-4.34(m,1H),2.86-2.96(m,1H),2.57-2.63(m,1H),2.40(qd,J＝4.57,13.19Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.05,5.28,12.61Hz,1H),1.70(d,J＝12.30Hz,2H),1.45-1.61(m,5H),1.34-1.43(m,2H),1.00-1.13(m,1H)。MS(ESI)m/z 450.2[M+1]+。
实施例74
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-羟基环戊基)乙酰胺
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-羟基环戊基)乙酰胺。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮、甲磺酸(0.050g，0.135mmol)(0.050g，0.113mmol)放入装有2,2-二氟-2-(1-羟基环戊基)乙酸(0.024g，0.135mmol)、二异丙基乙胺(0.071mL，0.406mmol)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(0.057g，0.149mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL)的小瓶中。将反应混合物在40℃下搅拌18h。将反应混合物吸收在二甲基亚砜中，并采用反相半制备型HPLC(5-100％乙腈+水中0.1％甲酸+0.1％甲酸，经20分钟)纯化。合并含有所需产物的级分并在减压下除去挥发性有机物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-羟基环戊基)乙酰胺(0.044g，0.101mmol，74.7％产率)，为白色固体。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.10(t,J＝6.15Hz,1H),7.68(d,J＝7.57Hz,1H),7.49(s,1H),7.43(d,J＝7.88Hz,1H),5.35(s,1H),5.10(dd,J＝5.20,13.40Hz,1H),4.40-4.49(m,3H),4.27-4.33(m,1H),2.91(ddd,J＝5.36,13.79,17.42Hz,1H),2.57-2.63(m,1H),2.39(qd,J＝4.57,13.29Hz,1H),2.00(dtd,J＝2.36,5.26,12.65Hz,1H),1.88-1.96(m,2H),1.62-1.76(m,4H),1.52-1.60(m,2H)。MS(ESI)m/z 436.2[M+1]+。
实施例75
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺
A.4-碘-2-甲基-1-(三氟甲氧基)苯。在室温下向4-溴-2-甲基-1-(三氟甲氧基)苯(1g，3.92mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(1.17g，7.84mmol)、碘化亚铜(37.3mg，0.19mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(61.3mg，0.43mmol)，并在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到4-碘-2-甲基-1-(三氟甲氧基)苯(1.0g，3.31mmol，84％)，为棕色液体。GCMS(m/z)302[M+]。
B.2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯。使4-碘-2-甲基-1-(三氟甲氧基)苯(1.0g，3.31mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液与2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(802mm，3.97mmol)、铜(547mg，8.61mmol)反应，并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(700mg，2.35mmol，70％)为棕色液体。GCMS(m/z)298.1[M]+。
C.2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(700mg，2.35mmol)在乙醇:四氢呋喃:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加氢氧化锂(296mg，7.05mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(400mg，1.48mmol，63％产率)。MS(ESI)m/z 269.45[M-1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(200mg，0.74mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(340mg，2.22mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(229mg，0.74mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-50％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(80mg，0.15mmol，20％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 526.26[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMS)-d6)δ＝10.98(s,1H),9.68(t,J＝6.1Hz,1H),7.68(d,J＝7.9Hz,1H),7.62(s,1H),7.57-7.47(m,2H),7.42(s,1H),7.37(d,J＝7.9Hz,1H),5.10(dd,J＝5.2,13.4Hz,1H),4.49-4.25(m,4H),2.98-2.85(m,1H),2.69-2.55(m,1H),2.44-2.34(m,1H),2.33(s,3H),2.05-1.94(m,1H)。
实施例76
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酰胺
A.3-乙氧基-2-碘吡啶。在室温下向2-碘吡啶-3-醇(1g，4.52mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(0.936g，6.78mmol)并搅拌10分钟。在室温下向此反应混合物中添加乙基碘(1.41g，9.04mmol)并在80℃下搅拌2h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。100％己烷为洗脱液，通过柱色谱法(硅胶100-200)纯化所得残余物，得到3-乙氧基-2-碘吡啶(1g，4.0mmol，88.8％产率)，为棕色液体。LCMS(ESI)m/z 251.1[M]+。
B.2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向3-乙氧基-2-碘吡啶(1.0g，4.01mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.6mL，8.03mmol)、铜(0.66g，10.44mmol)，并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(800mg，3.26mmol，81％)，为棕色液体。LCMS(ESI)m/z246.1[M]+。
C.2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(800mg，3.26mmol)在甲醇:四氢呋喃:水(9mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(410mg，9.78mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(500mg，2.13mmol，88％产率)，为棕色半固体。将反应混合物不经进一步纯化带到下一步。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(252mg，1.16mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(446.4mg，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酰胺(60mg，0.12mmol，13％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 473.29[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.41(br t,J＝6.3Hz,1H),8.22(dd,J＝1.1,4.4Hz,1H),7.72(d,J＝7.9Hz,1H),7.66-7.61(m,1H),7.59-7.53(m,2H),7.48(d,J＝7.9Hz,1H),5.12(dd,J＝5.6,13.2Hz,1H),4.53-4.27(m,4H),4.08(q,J＝7.2,2H),2.99-2.86(m,1H),2.70-2.56(m,1H),2.47-2.32(m,1H),2.05-1.96(m,1H),1.19(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例77
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯。向2-碘-3-甲基吡啶(0.7g，3.19mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.8mL，6.39mmol)、铜(0.52g，8.29mmol)，并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯(500mg，2.32mmol，73％)，为棕色液体。GCMS(m/z)215.2。
B.2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯(500mg，2.32mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(9mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(327mg，6.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酸(400mg，2.13mmol，88％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 188.31。
C.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酸(300mg，1.60mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(735mg，4.80mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(395mg，1.60mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈，将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-甲基吡啶-2-基)乙酰胺(40mg，0.09mmol，7％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 443.30[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.45(br t,J＝6.1Hz,1H),8.51(br d,J＝3.9Hz,1H),7.84(br d,J＝7.8Hz,1H),7.72(d,J＝7.8Hz,1H),7.63(s,1H),7.51(br d,J＝7.8Hz,2H),5.19-5.03(m,1H),4.58-4.28(m,4H),2.92–2.85(m,1H),2.68-2.54(m,1H),2.45-2.30(m,4H),2.10-1.92(m,1H)。
实施例78
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺
A.2-碘-5-甲基吡啶。在室温下向2-溴-5-甲基吡啶(2g，11.63mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(3.4g，23.24mmol)、碘化亚铜(110mg,0.58mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(180mg，1.26mmol)，并于密封管中在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-碘-5-甲基吡啶(1.3g，5.93mmol，52％产率)，为棕色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.2(s,1H),7.6–7.56(d,J＝8.1Hz,1H),7.18-7.12(m,1H),2.3–2.25(s,1H)。
B.2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯。向2-碘-5-甲基吡啶(1g，4.56mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.2mL，9.13mmol)、铜(0.75g，11.85mmol)，并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙基乙酯(600mg，2.72mmol，60％)，为棕色液体。GCMS(m/z)215.0
C.2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯(500mg，2.32mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(9mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(327mg，6.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸(350mg，1.87mmol，87％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 188.39。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸(180mg，0.97mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.2mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈，将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺(64mg，0.14mmol，13％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 443.30[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.60(br t,J＝5.9Hz,1H),8.55(bs,1H),7.88-7.98(m,1H),7.69-7.63(t,J＝8.6Hz,2H),7.52(s,1H),7.49-7.40(m,1H),5.11(dd,J＝5.1,13.5Hz,1H),4.59-4.21(m,4H),2.98-2.85(m,1H),2.68-2.53(m,1H),2.45-2.39(m,4H),2.06-1.97(m,1H)。
实施例79
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基-6-氟苯基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-乙氧基-3-氟-2-碘苯。在室温下向2-溴-1-乙氧基-3-氟苯(1g，4.58mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(1.37g，9.17mmol)、碘化亚铜(43.6mg,0.22mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(71.2mg，0.504mmol)，并于密封管中在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-乙氧基-3-氟-2-碘苯(1g，5.93mmol，52％产率)，为棕色液体。GC-MS(ESI)m/z 266。
B.2-(2-乙氧基-6-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向1-乙氧基-3-氟-2-碘苯(1g，3.17mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.53g，7.54mmol)、铜(0.62g，9.80mmol)，并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-乙氧基-6-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(800mg，3.05mmol，81％)，为棕色液体。GC-MS(ESI)m/z 262.2
C.2-(2-乙氧基-6-氟苯基)-2,2-二氟乙酸。向的冷(0℃)搅拌溶液中并浓缩，得到乙醇/四氢呋喃/水混合物(9mL，1:1:1)中的2-(2-乙氧基-6-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(500mg，2.32mmol)，添加一水合氢氧化锂(327mg，6.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-乙氧基-6-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(400mg，1.70mmol，56％产率)，为棕色半固体。LCMS(ESI)m/z 233.4[M-1]-。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸(272mg，1.16mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.3mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈，将所得残余物通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酰胺(60mg，0.12mmol，12％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 490.3[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.36(br t,J＝6.1Hz,1H),7.71(d,J＝7.6Hz,1H),7.54-7.47(m,3H),7.45(d,J＝7.6Hz,1H),7.00-6.84(m,1H),5.11(br dd,J＝5.0,13.3Hz,1H),4.52-4.27(m,4H),3.99(q,J＝7.0Hz,1H),3.04-2.82(m,1H),2.71-2.54(m,1H),2.46-2.28(m,1H),2.04-1.94(m,1H),1.14(t,J＝7.0Hz,1H)。
实施例80
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酰胺
A.1-(4'-氟联苯-4-基)乙酮。向1-(4-溴苯基)乙酮(2g，10.05mmol)在甲苯/乙醇((10mL，2:1)中的溶液中添加4-氟苯基硼酸(1.68g，12.06mmol)，接着添加碳酸钾(3.46g，25.12mmol)并脱气10分钟。向反应混合物中进一步装入四(三苯基膦)钯(0)(1.16mg，1.005mmol)并再脱气10分钟，并于密封管中在80℃下加热6h。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤。将滤液用冷水稀释并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的残余物通过柱色谱法(100-200硅胶，己烷中30％乙酸乙酯)纯化，得到1-(4'-氟联苯-4-基)乙酮(1g，4.67mmol，48％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 215.27[M+1]+。
B.2-(4'-氟联苯-4-基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(4'-氟联苯-4-基)乙酮(1.5g，7.009mmol)在吡啶(10mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(1.94g，17.52mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(15mL)洗涤。在0℃下将氯甲酸乙酯(15mL)添加到滤液中并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸(15mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(4'-氟联苯-4-基)-2-氧代乙酸乙酯(900mg，3.308mmol，47％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 273.51[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酸乙酯。在0℃下将2-(4'-氟联苯-4-基)-2-氧代乙酸乙酯(1g，3.676mmol)分批添加到二乙基氨基三氟化硫(1.4mL)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法[使用(100-200)硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯]纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酸乙酯(800mg，2.72mmol，80％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z 294[M+1]+。
D.2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酸乙酯(900mg，3.06mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(12mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(385mg，9.18mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物在减压下浓缩并将获得的残余物溶于水(10mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酸(400mg，2.91mmol，44％产率)，为半固体化合物。将粗品不经纯化用于下一步。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酸(266mg，1.16mmol)在吡啶(15mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(445mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中，并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4'-氟联苯-4-基)乙酰胺(60mg，0.114mmol，11％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 522.46[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.98(s,1H),9.68(t,J＝5.8Hz,1H),7.86–7.72(m,4H),7.72–7.62(m,3H),7.43–7.28(m,4H),5.09(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.47(d,J＝5.7Hz,2H),4.38(d,J＝17.1Hz,1H),4.24(d,J＝17.1Hz,1H),3.00–2.81(m,1H),2.64–2.53(m,1H),2.38–2.20(m,1H),2.03–1.90(m,1H)。
实施例81
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(2-乙氧基-5-氟苯基)乙酮。向1-(5-氟-2-羟苯基)乙酮(500mg，3.24mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液中添加乙基溴(607mg，3.89mmol)，接着添加碳酸钾(1.11g，8.10mmol)，并在90℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-(2-乙氧基-5-氟苯基)乙酮(350mg，1.36mmol，20％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 183.34[M+1]+。
B.2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(2-乙氧基-5-氟苯基)乙酮(2g，10.99mmol)在吡啶(10mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(3.05g，27.47mmol)，在100℃下加热16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(15mL)洗涤。在0℃下向滤液中添加4mL的氯甲酸乙酯并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×30mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.7g，7.08mmol，75％产率)，为无色液体。不经进一步纯化用于下一步。
C.2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下将2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1g，4.16mmol)添加到二乙基氨基三氟化硫(2mL)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(800mg，3.05mmol，73％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 262.2[M]+。
D.2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(600mg，2.29mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(12mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(288mg，6.87mmol)并在室温下搅拌16h。在减压下除去挥发物，将获得的残余物溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，得到2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(310mg，1.32mmol，87％产率)，为半固体化合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.38(dd,J＝8.8,3.2Hz,1H),7.16(ddd,J＝11.2,8.8,3.2Hz,1H),6.91(dd,J＝9.2,4.4Hz,1H),4.08(q,J＝7.2Hz,2H),2.68(brs,1H),1.39(t,J＝6.8Hz,3H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酸(151mg，0.65mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.18mL，1.94mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(200mg，0.65mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2-(2-乙氧基-5-氟苯基)-2,2-二氟乙酰胺(55mg，0.11mmol，17％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 490.1[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.38(t,J＝5.6Hz,1H),7.70(d,J＝7.5Hz,1H),7.50(s,1H),7.44(d,J＝8.4Hz,1H),7.39–7.34(m,2H),7.19–7.11(m,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.47(d,J＝6.6Hz,2H),4.45(d,J＝16.5Hz,1H),4.31(d,J＝17.7,1H),3.97(q,J＝6.9Hz,2H),2.96–2.85(m,1H),2.67–2.55(m,1H),2.45–2.30(m,1H),2.04–1.94(m,1H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例82
2-环戊基-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(1-羟基环戊基)乙酸乙酯。在0℃下向环戊酮(1g，11.90mmol)在四氢呋喃(20mL)中的搅拌溶液中添加无水氯化铈(III)(0.06g，0.24mmol)，接着添加活化锌粉(0.93g，14.28mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(2.01mL，15.47mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且将溶剂浓缩，并通过硅胶柱色谱法(石油醚中30％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(1-羟基环戊基)乙酸乙酯(0.55g，2.40mmol，22％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.48(s,1H),4.27(q,J＝6.9Hz,2H),1.87–1.81(m,2H),1.75–1.57(m,6H),1.26(t,J＝6.9Hz,3H)。
B.2-环戊烯基-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(1-羟基环戊基)乙酸乙酯(50mg，0.24mmol)在吡啶(1.7mL)中的搅拌溶液中添加亚硫酰氯(0.17mL，2.40mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(4mL)稀释，用碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×4mL)萃取。将合并的有机层用水(4mL)、盐水(4mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚中30％乙酸乙酯)纯化获得的粗产物，得到2-环戊烯基-2,2-二氟乙酸乙酯(25mg，0.13mmol，45％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 190.1[M]+。
C.2-环戊基-2,2-二氟乙酸乙酯。在氮气流下向2-环戊烯基-2,2-二氟乙酸乙酯(100mg，0.52mmol)在乙酸乙酯(10mL)中的搅拌溶液中添加10％氢氧化钯(30mg)在乙酸乙酯中的浆料，并在氢气球压力和室温下搅拌4h。将氢气氛抽空并将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将滤液浓缩，得到2-环戊基-2,2-二氟乙酸乙酯(60mg，0.31mmol，59％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.32(q,J＝7.2Hz,2H),2.67–2.57(m,1H),1.79–1.55(m,8H),1.35(t,J＝6.9Hz,3H)。
D.2-环戊基-2,2-二氟乙酸。向2-环戊基-2,2-二氟乙酸乙酯(450mg，2.34mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(295mg，7.03mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物，将所得残余物溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-环戊基-2,2-二氟乙酸(280mg，1.70mmol，72％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.68(brs,1H),2.69–2.59(m,1H),1.84–1.59(m,8H)。
E.2-环戊基-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-环戊基-2,2-二氟乙酸(159mg，0.97mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)，并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中，并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到2-环戊基-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(50mg，0.12mmol，12％产率)为白色固体。MS(ESI)m/z 420.17[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.36(t,J＝6.3Hz,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.47(s,1H),7.40(d,J＝8.1Hz,1H),5.11(dd,J＝13.5,5.1Hz,1H),4.46(d,J＝17.1Hz,1H),4.44(d,J＝6.0Hz,2H),4.31(d,J＝17.7Hz,1H),2.92–2.87(m,1H),2.73–2.57(m,2H),2.40–2.36(m,1H),2.02–1.98(m,1H),1.70–1.53(m,8H)。
实施例83
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺
A.2-氯-4-碘-1-(三氟甲氧基)苯。在0℃下向3-氯-4-(三氟甲氧基)苯胺(2.5g，11.79mmol)在H2SO4水溶液(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加亚硝酸钠(894mg，12.96mmol)、脲(106mg，1.768mmol)和碘化钾(4.1g，24.75mmol)，并在50℃下搅拌2h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液(40mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-氯-4-碘-1-(三氟甲氧基)苯和粗品(2g，6.23mmol，52％产率)，后者为无色液体，其不经任何纯化用于下一步。
B.2-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。使2-氯-4-碘-1-(三氟甲氧基)苯(1.5g，4.56mmol)在二甲基亚砜(12mL)中的搅拌溶液与2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(138g 6.84mmol)、铜(753mg，11.85mmol)反应，并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.1g，3.45mmol，78％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 318[M+1]+。
C.2-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(2g，6.289mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(10mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(792mg，18.86mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物浓缩，将残余物用1,4-二噁烷中的10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸和粗品(800mg，2.75mmol，44％产率)，后者为棕色半固体，其不经任何纯化用于下一步。
D.2-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(250mg，0.809mmol)和2-(3-氯-4-(三氟甲氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(234mg，0.970mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.4mL，2.42mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(614mg，1.61mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并在真空下浓缩干燥。使用甲酸水溶液(0.1％)中的60％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酰胺(35mg，0.064mmol，8％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 546.26[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6,)δ10.98(s,1H),9.75(br t,J＝5.9Hz,1H),7.92-7.90(m,1H),7.82-7.64(m,3H),7.47-7.34(m,2H),5.10(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.51-4.24(m,4H),2.99-2.84(m,1H),2.67-2.55(m,1H),2.45-2.25(m,1H),2.05-1.93(m,1H)。
实施例84
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
A.1-溴-4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯。在0℃下向4-溴-3-(三氟甲基)苯酚(2g，8.29mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中分批添加氢化钠(398mg，16.59mmol)，并在室温下搅拌30分钟。在0℃下向此反应物料中添加甲基碘(671mg，10.78mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。100％己烷为洗脱液，通过柱色谱法(硅胶100-200)纯化所得残余物，得到1-溴-4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯(1.2g，4.72mmol，57％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 254.1[M]+。
B.1-碘-4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯。在室温下向1-溴-4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯(1g，3.93mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(1.76g，11.79mmol)、碘化亚铜(150mg，0.786mmol)，接着添加反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(168mg，1.18mmol)，并在微波中在110℃下搅拌2h。将反应混合物用水(20mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-碘-4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯(800g，2.65mmol，68％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 302.0[M]+。
C.2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯。向1-碘-4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯(800mg，2.65mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-碘-2,2-二氟乙酸乙酯(0.62mL，3.97mmol)、铜(438g，6.89mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(600mg，2.01mmol，76％)为棕色液体。MS(ESI)m/z 298.1[M]+。
D.2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(600mg，2.01mmol)在甲醇/四氢呋喃/水(9mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(253mg，6.03mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(450mg，1.66mmol，83％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 269.30[M-1]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(314mg，1.16mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.7mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。向此中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(35mg，0.07mmol，7％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z526.21[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.97(br s,1H),9.59(br t,J＝5.87Hz,1H),7.81–7.60(m,2H),7.56–7.20(m,4H),5.11(br dd,J＝13.39,4.95Hz,1H),4.56–4.14(m,4H),3.89(s,3H),3.02–2.85(m,1H),2.67–2.55(m,1H),2.46–2.30(m,1H),2.06–1.94(m,1H)。
实施例85
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酰胺
A.(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷。在0℃下向2-溴乙醇(10g，80mmol)在二氯甲烷(100mL)中的搅拌溶液中添加叔丁基氯二甲基硅烷(14.5g，96.77mmol)和咪唑(10g,161.2mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液(40mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(8g，33.61mmol，42％产率)，为无色液体。
B.叔丁基(2-(2-碘苯氧基)乙氧基)二甲基硅烷。在0℃下向2-碘苯酚(3g，13.6mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加(2-溴乙氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(3.89g，16.36mmol)、叔丁基碘化铵(1g 2.72mmol)和碳酸钾(4.69g 34mmol)，并在80℃下搅拌16h。将反应混合物用水(40mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到叔丁基(2-(2-碘苯氧基)乙氧基)二甲基硅烷(2.5g，6.613mmol，49％产率)，为无色液体。
C.2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸乙酯。向叔丁基(2-(2-碘苯氧基)乙氧基)二甲基硅烷(3g，7.936mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(2.41g 11.90mmol)、铜粉(1.3.g，20.63mmol)，并在50℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸乙酯(900mg，3.406mmol，45％)，为棕色液体。
D.2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸乙酯(1.2g，3.20mmol)在乙醇/四氢呋喃/水混合物(15mL，1:1:1)中的冰冷溶液中添加一水合氢氧化锂(404mg，9.62mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将所得残余物用1,4-二噁烷(10mL)中的10％盐酸水溶液中和，并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸(650mg，2.82mmol，65％产率)，为棕色半固体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.68(d,J＝7.2Hz,1H),7.46(dd,J＝8.1Hz,7.8Hz,1H),7.09(dd,J＝8.0,7.8Hz,1H),6.91(d,J＝8.4Hz,1H),6.38(brs,1H),4.12(t,J＝5.4Hz,2H),3.99(t,J＝3.9Hz,2H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.970mmol)和2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酸(225mg，0.970mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冰冷溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.5mL，2.91mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(737mg，1.94mmol)，并在室温下搅拌12h。将反应混合物用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并在真空下浓缩干燥。通过Reveleris C-18反相柱(0.1％甲酸水溶液中60％乙腈)纯化产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(2-羟乙氧基)苯基)乙酰胺(40mg，0.082mmol，8％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 488.12。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ＝10.98(s,1H),9.29(t,J＝5.7Hz,1H),7.70(d,J＝7.7Hz,1H),7.60-7.39(m,4H),7.16(br d,J＝8.1Hz,1H),7.10-7.01(m,1H),5.11(dd,J＝13.0,5.0Hz,1H),4.72(t,J＝5.5Hz,1H),4.51-4.27(m,4H),3.98(t,J＝5.3Hz,1H),3.60(q,J＝5.3Hz,1H),3.00-2.82(m,1H),2.63-2.54(m,1H),2.45-2.32(m,1H),2.06-1.94(m,1H)。
实施例86
2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.1-(4-氯-2-乙氧基苯基)乙酮。向1-(4-氯-2-羟苯基)乙酮(2g，11.76mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液中添加乙基碘(2.8mL，29.4mmol)，接着添加碳酸钾(4.87g，35.29mmol)，并在90℃下搅拌16h。将反应混合物用冰水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-(4-氯-2-乙氧基苯基)乙酮(1.7g，8.58mmol，73％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 199.41[M+1]+。
B.2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯。在室温下向1-(4-氯-2-乙氧基苯基)乙酮(1.7g，8.58mmol)在吡啶(10mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(2.38g，21.46mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(15mL)洗涤。在0℃下将氯甲酸乙酯(3.4mL)添加到滤液中并在室温下搅拌4h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×20mL)萃取。将合并的有机层用1N盐酸溶液(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1.2g，4.68mmol，54％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 256.1[M]+。
C.2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下将2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2-氧代乙酸乙酯(1g，3.9mmol)添加到二乙基氨基三氟化硫(1.89g，11.72mmol)中并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(570mg，2.05mmol，52％产率)，为无色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,J＝8.4Hz,1H),7.03(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),6.91(s,1H),4.31(q,J＝7.6Hz,2H),4.05(q,J＝6.8Hz,2H),1.37(t,J＝7.2Hz,3H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。
D.2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(470mg，1.69mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(12mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(213mg，5.07mmol)并在室温下搅拌16h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，得到2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(260mg，1.04mmol，61％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.58(d,J＝8.7Hz,1H),7.05(d,J＝8.1Hz,1H),6.94(s,1H),4.09(q,J＝7.2Hz,2H),1.39(t,J＝6.9Hz,3H)。
E.2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(4氯-2-乙氧基苯基)-2,2-二氟乙酸(178mg，0.71mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.18mL，1.94mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(200mg，0.64mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到2-(4-氯-2-乙氧基苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(58mg，0.11mmol，18％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 506.1[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.38(t,J＝5.6Hz,1H),7.71(d,J＝7.8Hz,1H),7.56(d,J＝8.1Hz,1H),7.50(s,1H),7.44(d,J＝7.5Hz,1H),7.22(s,1H),7.12(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.46(d,J＝17.2Hz,1H),4.46(d,J＝5.7Hz,2H),4.31(d,J＝17.4,1H),4.03(q,J＝6.9Hz,2H),2.98–2.85(m,1H),2.67–2.55(m,1H),2.43–2.30(m,1H),2.04–1.93(m,1H),1.11(t,J＝6.9Hz,3H)。
实施例87
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-羟苯基)乙酰胺
A.1-碘-2-(甲氧基甲氧基)苯。在0℃下向2-碘苯酚(3g，13.63mmol)在二氯甲烷(30mL)中的搅拌溶液中添加二异丙基乙胺(7.2mL，40.89mmol)，接着添加氯甲基甲基醚(1.63g，20.45mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用冰水(30mL)淬灭并用二氯甲烷(3×30mL)萃取。将合并的有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得粗产物通过硅胶柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到1-碘-2-(甲氧基甲氧基)苯(2.5g，9.61mmol，72％产率)为棕色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.78(dd,J＝8.0,1.6Hz,1H),7.28(ddd,J＝8.5,7.4,1.6Hz,1H),7.07(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),6.76(ddd,J＝8.8,7.2,0.8Hz,1H),5.24(s,2H),3.52(s,3H)。
B.2,2-二氟-2-(2-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯。在0℃下向1-碘-2-(甲氧基甲氧基)苯(3g，8.24mmol)在二甲基亚砜(11.5mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(2.67g，13.18mmol)，接着添加铜粉(1.31g，20.6mmol)并在60℃下搅拌5h。将反应混合物用冰水(30mL)淬灭并通过硅藻土垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(3×30mL)萃取并将合并的有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗产物通过快速色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯纯化，得到2,2-二氟-2-(2-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(1.3g，5.0mmol，62％产率)为无色液体。MS(ESI)m/z 260.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(2-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸。在0℃下向2,2-二氟-2-(2-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(2g，7.69mmol)在甲醇:四氢呋喃:水混合物(20mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(970mg，23.07mmol)，并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(2×15mL)洗涤。将水层用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(2-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸(1.2g，4.87mmol，63％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 246.3[M]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-羟苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(2-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸(258mg，1.16mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-羟苯基)乙酰胺(33mg，0.07mmol，8％产率)为白色固体。MS(ESI)m/z 444.35[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.00(s,1H),10.24(bs,1H),9.38(bs,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.51(s,1H),7.47–7.44(m,2H),7.34(dd,J＝7.8,7.5Hz,1H),6.91–6.87(m,2H),5.11(dd,J＝13.5,5.1Hz,1H),4.48(d,J＝4.5Hz,2H),4.46(d,J＝18.0Hz,1H),4.32(d,J＝17.4Hz,1H),2.96–2.86(m,1H),2.58–2.49(m,1H),2.42–2.27(m,1H),2.07–1.98(m,1H)。
实施例88
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(甲基氨基)苯基)乙酰胺
A.2-碘苯基氨基甲酸苄酯。在0℃下向2-碘苯胺(3g，13.69mmol)在4N氢氧化钠水溶液(3mL)、水(10mL)中的搅拌溶液中添加氯甲酸苄酯(2.79g，16.43mmol)，并在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-碘苯基氨基甲酸苄酯(3g，8.49mmol，62％产率)，为无色液体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.08(d,J＝8.8Hz,1H),7.76(dd,J＝11.8Hz,1.8Hz,1H),7.48–7.32(m,6H),7.02(brs,1H),6.79(ddd,J＝8.0,7.7,1.8Hz,1H),5.23(s,2H)。
B.2-碘苯基(甲基)氨基甲酸苄酯。在0℃下向2-碘苯基氨基甲酸苄酯(1.5g，4.24mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的搅拌溶液中添加碳酸铯(4.13g,12.72mmol)，接着添加碘甲烷(0.9g，6.37mmol)，并在60℃下搅拌5h。将反应混合物用水(25mL)稀释并用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。将合并的有机层用水(25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。使用石油醚中的30％乙酸乙酯通过硅胶柱色谱法纯化获得的粗品，得到2-碘苯基(甲基)氨基甲酸苄酯(1.2g，3.26mmol，80％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 368.01[M+1]+
C.2-(2-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下向2-碘苯基(甲基)氨基甲酸苄酯(1g，2.72mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.83g，4.08mmol)，接着添加铜(0.45g，7.08mmol)，并在60℃下搅拌5h。将反应混合物用冰水淬灭并通过硅藻土垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(3×15mL)萃取并将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯纯化，得到2-(2-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(0.72g，1.98mmol，73％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 363.1[M]+。
D.2-(2-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(2-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(700mg，1.9mmol)在甲醇:四氢呋喃:水混合物(15mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(242mg，5.78mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的残余物溶于水(10mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到为半固体的2-(2-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸(620mg，1.85mmol，97％产率)。MS(ESI)m/z 336.4[M+1]+。
E.2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯基(甲基)氨基甲酸苄酯。向2-(2-((苄氧基羰基)(甲基)氨基)苯基)-2,2-二氟乙酸(325mg，0.97mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中的50-55％乙腈)纯化，得到2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯基(甲基)氨基甲酸苄酯(150mg，0.25mmol，26％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 591.62[M+1]+。
F.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(甲基氨基)苯基)乙酰胺。在氮气流下向2-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯基(甲基)氨基甲酸苄酯(0.1g，0.169mmol)在甲醇(15mL)中的搅拌溶液中添加10％氢氧化钯(10mg)在甲醇中的浆料，并在60psi氢压力及室温下搅拌6h。将氢气氛抽空，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并浓缩滤液。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(2-(甲基氨基)苯基)乙酰胺(62mg，0.13mmol，80％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 457.23[M+H]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.56(t,J＝6.0Hz,1H),7.67(d,J＝8.7Hz,1H),7.42(s,1H),7.39–7.28(m,3H),6.70–6.65(m,2H),5.43(q,J＝4.2Hz,1H),5.10(dd,J＝13.5,5.1Hz,1H),4.47(d,J＝6.0Hz,2H),4.42(d,J＝17.9Hz,1H),4.28(d,J＝17.1Hz,1H),2.91–2.85(m,1H),2.74(d,J＝4.8Hz,3H),2.62–2.50(m,1H),2.43–2.34(m,1H),2.01–1.99(m,1H)。
实施例89
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
A.1-溴-4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯。向4-溴-3-(三氟甲基)苯酚(5g，20.83mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(8.6g，62.49mmol)，接着添加异丙基碘(3.1mL，31.24mmol)，并在80℃下搅拌4h。将反应混合物过滤，添加水(50mL)并用乙酸乙酯(2×60mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的0-10％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到1-溴-4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯(3.5g，12.41mmol，59％产率)。LCMS(ESI)m/z 284.38[M+2]+。
B.1-碘-4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯。在室温下向1-溴-4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯(3.5g，12.41mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(5.58g，37.23mmol)、碘化亚铜(471mg，2.48mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(529mg，3.72mmol)，并于密封管中在110℃下搅拌16。将反应混合物用水(20mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×300mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-碘-4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯(3g，9.09mmol，73％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 331.0[M]+。
C.2,2-二氟-2-(2-甲基-4-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯。在室温下向1-碘-4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯(3g，9.09mmol)在二甲基亚砜(25mL)中的搅拌溶液中添加铜(1.5g，23.63mmol)和2-碘-2,2-二氟乙酸乙酯(2.005mL，13.63mmol)，并在55℃下搅拌2h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(50mL)中和并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(2.5g，7.66mmol，84％)。GCMS(ESI)m/z 326.2。
D.2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙基乙酯(2.5g，7.66mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(30mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加氢氧化锂(1.6g，38.34mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(1.8g，6.04mmol，78％产率)，为棕色液体。将粗品不经进一步纯化带到下一步。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(380mg，1.165mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加POCl3(0.27mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下继续搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-60％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-异丙氧基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(48mg，0.086mmol，10％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z554.03[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.58(t,J＝5.6Hz,1H),7.73–7.64(m,2H),7.47(s,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),7.32–7.28(m,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),5.00–4.25(m,4H),3.00–2.85(m,1H),2.69–2.55(m,1H),2.44–2.35(m,J＝2.0Hz,1H),2.05–1.95(m,1H),1.35–1.25(m,6H)。
实施例90
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(1-羟基-4-甲基环己基)乙酸乙酯。在0℃下向4-甲基环己酮(1g，8.92mmol)在四氢呋喃(20mL)中的搅拌溶液中添加催化量的无水氯化铈(III)(0.22g，0.89mmol)，接着添加活化锌粉(0.75g，11.6mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.13mL，11.6mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚中30％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(1-羟基-4-甲基环己基)乙酸乙酯(0.9g，3.81mmol，41％产率)，为无色液体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ5.33(d,J＝13.2Hz,1H),4.27(q,J＝7.2Hz,2H),2.37(dt,J＝13.3,7.8Hz,1H),2.18–2.13(m,1H),1.94–1.86(m,1H),1.78–1.70(m,4H),1.48–1.39(m,2H),1.26(t,J＝7.3Hz,3H),0.91(dt,J＝18.8,5.6Hz,3H)。
B.2,2-二氟-2-(4-甲基环己-1-烯基)乙酸乙酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(1-羟基-4-甲基环己基)乙酸乙酯(1.8g，7.62mmol)在吡啶(18mL)中的搅拌溶液中添加亚硫酰氯(9mL，76.27mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(20mL)稀释，用碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。使用石油醚中20％乙酸乙酯通过硅胶柱色谱法纯化获得的粗产物，得到2,2-二氟-2-(4-甲基环己-1-烯基)乙酸乙酯(1g，4.23mmol，62％产率)为无色液体。MS(ESI)m/z218.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酸乙酯。在氮气流下向2,2-二氟-2-(4-甲基环己-1-烯基)乙酸乙酯(700mg，3.21mmol)在乙酸乙酯(15mL)中的搅拌溶液中添加10％氢氧化钯(200mg)在乙酸乙酯中的浆料，并在氢气球压力和室温下搅拌4h。将氢气氛抽空并将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将滤液浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酸乙酯(500mg，1.3mmol，37％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z220.2[M]+。
D.2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酸乙酯(500mg，2.27mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(286mg，6.81mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物，将获得的残余物溶于水(10mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酸(280mg，1.45mmol，64％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.26(brs,1H),2.04–2.02(m,1H),1.85-1.78(m,3H),1.60–1.52(m,2H),1.36–1.24(m,2H),1.01–0.87(m,2H),0.90(d,J＝6.3Hz,3H)。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酸(186mg，0.97mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲基环己基)乙酰胺(45mg，0.1mmol，10％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 448.19[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.35(t,J＝6.0Hz,1H),7.70(d,J＝7.5Hz,1H),7.47(s,1H),7.41(d,J＝8.1Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.4Hz,1H),4.45(d,J＝16.5Hz,1H),4.44(d,J＝6.6Hz,2H),4.31(d,J＝17.4Hz,1H),2.92–2.87(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.41–2.36(m,1H),2.02–1.98(m,2H),1.68–1.65(m,3H),1.48–1.42(m,3H),1.24–1.15(m,2H),0.99–0.86(m,1H),0.87(dd,J＝6.9,6.3Hz,3H)。
实施例91
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯(200mg，0.92mmol)在四氢呋喃(10mL)中的搅拌溶液中添加偶氮二甲酸二异丙酯(373mg，1.85mmol)，接着添加三苯基膦(485mg，1.85mmol)和2-异丙氧基乙醇(96.2mg，0.92mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用冰水淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用水(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(100mg，0.33mmol，36％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z 302.6[M]+。
B.2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酸乙酯(210mg，0.69mmol)在甲醇:四氢呋喃:水混合物(10mL，1:1:1)中的冰冷搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(87mg，2.086mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的残余物溶于水(10mL)，用乙酸乙酯(2×6mL)洗涤。将水层用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到为半固体的2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酸(180mg，0.65mmol，95％产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.29(dd,J＝8.2,7.5Hz,1H),7.18(d,J＝7.8Hz,1H),7.11(s,1H),6.99(d,J＝7.5Hz,1H),4.11(t,J＝5.4Hz,2H),3.82(t,J＝5.1Hz,2H),3.75(sep,J＝6.0Hz,1H),1.23(d,J＝5.7Hz,6H)。
C.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酸(221mg，0.81mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(371mg，2.47mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(250mg，0.81mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-异丙氧基乙氧基)苯基)乙酰胺(62mg，0.116mmol，15％产率)为白色固体。MS(ESI)m/z 529.9[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.60(t,J＝6.0Hz,1H),7.67(d,J＝7.5Hz,1H),7.45(d,J＝8.1Hz,1H),7.40(s,1H),7.36(d,J＝7.5Hz,1H),7.15–7.12(m,3H),5.10(dd,J＝13.5,5.1Hz,1H),4.45(d,J＝5.7Hz,2H),4.42(d,J＝18.0Hz,1H),4.27(d,J＝17.4Hz,1H),4.08(t,J＝4.5Hz,2H),3.69(t,J＝4.8Hz,2H),3.62(sep,J＝5.7Hz,1H),2.98–2.87(m,1H),2.66–2.56(m,1H),2.45–2.30(m,1H),2.04–1.94(m,1H),1.09(d,J＝6.3Hz,6H)。
实施例92
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酰胺
A.1-碘-3-(甲氧基甲氧基)苯。在0℃下向3-碘苯酚(1g，4.54mmol)在二氯甲烷(10mL)中的搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(2.4mL，13.63mmol)，接着添加氯甲基甲基醚(0.5mL，6.81mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-碘-3-(甲氧基甲氧基)苯(1.0g，3.78mmol，83％产率)。GCMS(m/z)264.0[M]+。
B.2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯。向1-碘-3-(甲氧基甲氧基)苯(800mg，3.03mmol)在中二甲基亚砜(10mL)的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(738mg，3.97mmol)，接着添加铜(501mg，7.88mmol)并在55℃下搅拌5h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(700mg，2.69mmol，89％产率)。GCMS(m/z)260.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(700mg，2.69mmol)在甲醇-四氢呋喃-水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(339mg，8.07mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(50mL)稀释，用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸(400mg，1.72mmol，64％产率)。LCMS(ESI)m/z 231.31[M-1]-。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸(300mg，1.29mmol)在吡啶(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.4mL，3.87mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(400mg，1.29mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酰胺(250mg，0.51mmol，40％产率)。LCMS(ESI)m/z488.39[M+1]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酰胺。向N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酰胺(250mg，0.51mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加1,4-二噁烷.HCl(2.0mL)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酰胺(75mg，0.16mmol，33.0％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 444.13[M+1]+。1H NMR(300MHz,dmso)δ＝10.98(s,1H),9.87(s,1H),9.62-9.53(m,1H),7.67(d,J＝7.7Hz,1H),7.42-7.27(m,4H),7.02-6.68(m,3H),5.10(br dd,J＝5.0,13.4Hz,1H),4.50-4.22(m,4H),2.96-2.82(m,1H),2.68-2.54(m,1H),2.44-2.30(m,1H),2.05-1.93(m,1H)。
实施例93
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯。向4-碘苯甲醛(5g，21.55mmol)在二甲基亚砜(50mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(6.0mL，43.11mmol)、铜(4.0g，56.03mmol)并在55℃下搅拌4h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯(3.5g，15.35mmol，71％)。GCMS(m/z)228.2。
B.2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酸乙酯。向2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯(1.0g，4.38mmol)在乙醇(25mL)中的搅拌溶液中添加1-甲基哌嗪(878mg，8.77mmol)、乙酸(526mg，8.77mmol)，并在0℃下搅拌1h。然后向此反应混合物中添加氰基硼氢化钠(551mg，8.77mmol)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酸乙酯(1.0g，3.20mmol，74％产率)。LCMS(ESI)m/z 313.53[M+1]+
C.2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酸乙酯(1.0g，3.20mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(1:1:1，30mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(403mg，5.01mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酸(750mg，2.64mmol，82％产率)。LCMS(ESI)m/z 284.9[M+1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酸(350mg，1.23mmol)在吡啶(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.3mL，3.69mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(381mg，1.23mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酰胺(40mg，0.26mmol，6％产率)，为淡黄色固体。LCMS(ESI)m/z 540.40[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.67(t,J＝5.8Hz,1H),7.87(br s,2H),7.67-7.55(m,3H),7.45-7.33(m,2H),5.10(dd,J＝4.9,13.3Hz,1H),4.48-4.24(m,6H),3.65-3.03(m,8H),3.01-2.82(m,4H),2.66-2.54(m,1H),2.48-2.30(m,1H),2.29-1.82(m,1H)。
实施例94
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-4-甲基-2-(三氟甲基)苯。在室温下向1-溴-4-甲基-2-(三氟甲基)苯(1.0g，4.18mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(1.3g，8.36mmol)、碘化亚铜(40mg,0.20mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(66mg，0.46mmol)，并于密封管中在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-碘-4-甲基-2-(三氟甲基)苯(900mg，3.14mmol，75％产率)。GCMS(m/z)286。
B.2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯。向1-碘-4-甲基-2-(三氟甲基)苯(900mg，3.14mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.3g，6.29mmol)、铜(520mg，8.18mmol)，并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(800mg，2.83mmol，90％)。GCMS(m/z)282.1。
C.2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸乙酯(800mg，2.83mmol)在四氢呋喃-甲醇-水(15mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(357mg，8.51mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(400mg，1.57mmol，56％产率)。LCMS(ESI)m/z 253.32[M-1]-。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酸(400mg，1.57mmol)在吡啶(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.4mL，4.72mmol)并在0-5℃下搅拌1h。向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(487mg，1.57mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-甲基-2-(三氟甲基)苯基)乙酰胺(50mg，0.09mmol，6.0％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 510.28[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.62(br t,J＝6.1Hz,1H),7.78-7.60(m,4H),7.75(s,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),5.11(dd,J＝5.1,13.5Hz,1H),4.51-4.21(m,4H),2.98-2.85(m,1H),2.65-2.54(m,1H),2.47-2.31(m,4H),2.04-1.96(m,1H)。
实施例95
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-3-(甲氧基甲氧基)苯。在0℃下向3-碘苯酚(1g，4.54mmol)在二氯甲烷(10mL)中的搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(2.4mL，13.63mmol)，接着添加氯甲基甲基醚(0.5mL，6.81mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用冰水淬灭并用二氯甲烷(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到1-碘-3-(甲氧基甲氧基)苯(1.0g，3.78mmol，83％产率)。MS(ESI)m/z 264.0[M]+。
B.2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯。向1-碘-3-(甲氧基甲氧基)苯(800mg，3.03mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(738mg，3.97mmol)，接着添加铜(501mg，7.88mmol)并在55℃下搅拌5h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(700mg，2.69mmol，89％产率)。MS(ESI)m/z 260.2[M]+。
C.2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(1g，3.84mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的冰冷溶液中添加1,4-二噁烷·HCl(5mL)并在室温下搅拌3h。在减压下除去挥发物并将获得的粗品通过快速柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯(0.7g，3.24mmol，84％产率)为无色液体。MS(ESI)m/z 216.1[M]+。
D.2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯(1g，4.63mmol)在四氢呋喃(10mL)中的搅拌溶液中顺序地添加偶氮二甲酸二异丙酯(1.87g，9.26mmol)、三苯基膦(2.42g，9.26mmol)和2-(2-甲氧基乙氧基)乙醇(0.55g，4.63mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用冰水淬灭并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯(0.5g，1.57mmol，34％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z 318.6[M]+。
E.2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯(500mg，1.57mmol)在甲醇:四氢呋喃:水混合物(15mL，1:1:1)中的冰冷溶液中添加一水合氢氧化锂(198mg，4.71mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的粗产物溶于水(10mL)，用乙酸乙酯(2×8mL)洗涤。然后，将水层用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到为半固体的2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酸(300mg，0.65mmol，84％产率)。MS(ESI)m/z 289.36[M-1]+。
F.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酸(375mg，1.29mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(593mg，3.88mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(400mg，1.29mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中的50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)乙酰胺(46mg，0.08mmol，7％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z546.06[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(bs,1H),9.60(t,J＝6.3Hz,1H),7.67(d,J＝7.5Hz,1H),7.44(dd,J＝8.1,7.8Hz,1H),7.40(s,1H),7.37(d,J＝7.8Hz,1H),7.16–7.12(m,3H),5.10(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.45(d,J＝5.7Hz,2H),4.41(d,J＝18.2Hz,1H),4.27(d,J＝17.7Hz,1H),4.11(t,J＝4.2Hz,2H),3.73(t,J＝4.5Hz,2H),3.58(t,J＝4.5Hz,2H),3.45(t,J＝5.1Hz,2H),3.24(s,3H),2.98–2.83(m,1H),2.67–2.53(m,1H),2.44–2.30(m,1H),2.05–1.94(m,1H)。
实施例96
2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺盐酸盐
A.2-(3-碘苯氧基)-N,N-二甲基乙胺。向3-碘苯酚(2g，9.09mmol)在丙酮(20mL)中的搅拌溶液中添加2-氯-N,N-二甲基乙胺盐酸盐(1.57g,10.90mmol)、碳酸钾(5.07g，36.36mmol)，并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。100％己烷为洗脱液，通过柱色谱法(硅胶100-200)纯化所得残余物，得到2-(3-碘苯氧基)-N,N-二甲基乙胺(1.5g，5.22mmol，57％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 291[M]+。
B.2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向2-(3-碘苯氧基)-N,N-二甲基乙胺(1.5g，5.22mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.36mL，10.45mmol)，接着添加铜(0.86g，13.58mmol)并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.5g粗品)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 288.4[M]+。
C.2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，3.48mmol)在甲醇/四氢呋喃/水(20mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(438.4mg，10.44mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(600mg)，为棕色半固体，其不经进一步纯化带到下一步。
D.2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺盐酸盐。向2-(3-乙氧基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(252mg，1.16mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(446.4mg，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺盐酸盐(50mg，0.07mmol，7.5％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 515.13[M+11H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.99(s,1H),10.31(br s,1H),9.68(br t,J＝5.9Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.50(t,J＝7.8Hz,1H),7.43-7.33(m,3H),7.26-7.13(m,3H),5.11(dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.50-4.34(m,4H),4.33-4.23(m,2H),3.00-2.87(m,1H),2.83-2.70(br s,2H),2.67-2.55(m,1H),2.45-2.25(m,7H),2.05-1.94(m,1H)。
实施例97
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酰胺
A.5-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺。向5-溴吡啶-2-胺(3.5g，20.34mmol)在1,4-二噁烷.水(1:1，40mL)中的搅拌且脱气溶液中添加磷酸钾(12.94g，61.04mmol)并继续脱气10分钟。然后添加4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(5.21g，30.51mmol)，接着添加[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(1.47mg，2.014mmol)，伴随搅拌脱气10分钟并加热到100℃达2h。将反应混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤。向滤液中添加冷水并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的40％乙酸乙酯通过硅胶(100-200目)柱色谱法纯化所得残余物，得到5-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺(2.5g，18.65mmol，91％产率)，为棕色固体。MS(ESI)m/z 135.18[M+1]+。
B.5-异丙基吡啶-2-胺。向20％氢氧化钯(1g)在乙酸乙酯(50mL)中的浆料中添加5-(丙-1-烯-2-基)吡啶-2-胺(2.5g，18.65mmol)，并在氢气球(1atm)下室温搅拌2h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到5-异丙基吡啶-2-胺(2g，14.70mmol，79％产率)为棕色液体。MS(ESI)m/z 137.15[M+1]+。
C.2-溴-5-异丙基吡啶。向5-异丙基吡啶-2-胺(2g，14.70mmol)在47％氢溴酸水溶液(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加亚硝酸钠的溶液(2.63g，38.23mmol，在5mL水中)，并在相同温度下搅拌30分钟。在-5℃下向此反应混合物中滴加溴(2.27mL，44.1mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物用氢氧化钠水溶液中和并用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层用饱和硫代硫酸钠水溶液(100mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-溴-5-异丙基吡啶(1.8g，9.04mmol，62％产率)，为棕色液体。MS(ESI)(m/z)200.23[M+1]+。
D.2-碘-5-异丙基吡啶。在室温下向2-溴-5-异丙基吡啶(1.8g，9.04mmol)在乙腈(20mL)中的搅拌溶液中添加碘化钾(3.75g，22.61mmol)和乙酰氯(1.42g，18.08mmol)，并在85℃下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液中和并用二氯甲烷(2×50mL)萃取。将合并的有机层用饱和硫代硫酸钠水溶液(100mL)、盐水(50mL)洗涤并经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中的5％乙酸乙酯为洗脱液通过硅胶(100-200目)柱色谱法纯化所得残余物，得到2-溴-5-异丙基吡啶(850mg，3.44mmol，39％产率)。MS(ESI)(m/z)248.24[M+1]+。
E.2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酸乙酯。向2-碘-5-异丙基吡啶(800mg，3.23mmol)在二甲基亚砜(15mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.62mL，4.845mmol)，接着添加铜(534g，8.39mmol)，并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酸乙酯(650mg，2.67mmol，82％)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 244.28[M+1]+。
F.乙基2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酸乙酯(600mg，2.46mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(9mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(310mg，7.40mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到乙基2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酸(450mg，2.09mmol，85％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 216.30[M-1]+。
G.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酰胺。向乙基2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酸(333mg，1.54mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.4mL，3.87mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。向此中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(400mg，1.29mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用二氯甲烷中的3-4％甲醇为洗脱液通过柱色谱法纯化所得残余物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-异丙基吡啶-2-基)乙酰胺(65mg，0.138mmol，11％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 471.10[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.99(s,1H),9.61(br t,J＝6.05Hz,1H),8.62(s,1H),7.91(dd,J＝8.07,1.83Hz,1H),7.71(d,J＝8.07Hz,2H),7.52(s,1H),7.46(br d,J＝7.70Hz,1H),5.11(br dd,J＝13.57,5.14Hz,1H),4.55–4.27(m,4H),3.10–3.00(m,1H),2.95–2.85(m,1H),2.75–2.67–2.54(m,1H),2.44–2.30(m,1H),2.07–1.93(m,1H),1.30–1.20(m,6H)。
实施例98
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酰胺
A.(2-(3-碘苯氧基)乙基)(甲基)硫烷。在0℃下向3-碘苯酚(5g，22.72mmol)在四氢呋喃(60mL)中的搅拌溶液中添加偶氮二甲酸二异丙酯(8.9mL，45.45mmol)，接着添加三苯基膦(11.9g，45.45mmol)和2-(甲硫基)乙醇(1.97mL，22.72mmol)，并在室温下搅拌3h。将反应混合物用冰水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(石油醚中1％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到(2-(3-碘苯氧基)乙基)(甲基)硫烷(2.5g，8.503mmol，37％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)7.33–7.24(m,1H),7.04–6.95(m,1H),6.90–6.83(m,1H),4.12(t,J＝6.8Hz,1H),2.87(t,J＝6.8Hz,1H),2.21(s,1H)。
B.1-碘-3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯。在0℃下向(2-(3-碘苯氧基)乙基)(甲基)硫烷(2.5g，8.503mmol)在二氯甲烷(25mL)中的搅拌溶液中添加间氯过苯甲酸(4.4g，25.5mmol)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用NaHCO3水溶液(200mL)碱化并用二氯甲烷(3×50mL)萃取，用盐水(50mL)洗涤并经硫酸钠干燥，将有机相浓缩。使用己烷中的5％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化获得的残余物，得到1-碘-3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯(1.2g，3.68mmol，43％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 349.26[M+Na]+。
C.2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯。在室温下向1-碘-3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯(1.2g，3.68mmol)在二甲基亚砜(12mL)中的搅拌溶液中添加铜(708mg，11.04mmol)和2-碘-2,2-二氟乙酸乙酯(1.1g，4.42mmol)，并在室温下搅拌16h。向反应混合物中添加饱和氯化铵水溶液(50mL)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯(720mg，2.23mmol，61％产率)。MS(ESI)m/z 345.4[M+Na]+。
D.2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酸。在室温下向2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯(720mg，2.23mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中添加4M盐酸水溶液(15mL)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，用盐水(50mL)洗涤并经硫酸钠干燥，将有机相浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酸(550mg，1.87mmol，84％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 293.21[M+H]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酸(250mg，0.85mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.2mL，2.55mmol)并在0℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(394mg，1.02mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基磺酰基)乙氧基)苯基)乙酰胺(50mg，0.091mmol，11％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 549.81[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.98(s,1H),9.63(br t,J＝5.9Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.52–7.44(m,1H),7.41–7.34(m,2H),7.23–7.13(m,3H),5.10(dd,J＝5.1,13.5Hz,1H),4.45(br d,J＝6.4Hz,2H),4.40–4.22(m,4H),3.64(t,J＝5.4Hz,1H),2.97–2.84(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.44–2.33(m,1H),2.04–1.95(m,1H)。
实施例99
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯。在室温下向3-碘苯甲醛(4g，17.24mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(5.25g，25.86mmol)，接着添加铜粉(2.84g，44.82mmol)并在60℃下搅拌5h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，并将获得的粗品通过快速柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯(2.3g，8.27mmol，58％)为无色液体。MS(ESI)m/z228.1[M]+。
B.2,2-二氟-2-(3-乙烯基苯基)乙酸乙酯。在-78℃下向甲基三苯基溴化鏻(1.58g，4.4mmol)在四氢呋喃/乙醚混合物(30mL，2:1)中的搅拌溶液中添加正丁基锂(1mL，2.49mmol)，并在相同的温度下搅拌30分钟。然后，在-78℃下将2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯(0.5g，2.27mmol)添加到反应混合物中并在0℃下搅拌3h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并将溶剂浓缩，并将获得的粗品通过快速柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(3-乙烯基苯基)乙酸乙酯(0.32g，1.41mmol，64％产率)，为无色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.63(s,1H),7.53–7.48(m,2H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),6.73(dd,J＝17.6,10.4Hz,1H),5.81(d,J＝17.6Hz,1H),5.33(d,J＝10.8Hz,1H),4.30(q,J＝7.2Hz,2H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。
C.3-(甲基磺酰基)丙-1-烯。在0℃下向烯丙基(甲基)硫烷(5g，56.81mmol)在二氯甲烷(50mL)中的搅拌溶液中添加间氯过氧苯甲酸(19.65g，113.63mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液碱化并用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到3-(甲基磺酰基)丙-1-烯(2.5g，20.83mmol，36％产率)为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.98(ddt,J＝17.2,14.8,7.2Hz,1H),5.48(dd,J＝17.2,1.2Hz,2H),3.74(d,J＝7.6Hz,2H),2.88(s,3H)。
D.(E)-2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙-1-烯基)苯基)乙酸乙酯。在室温下向2,2-二氟-2-(3-乙烯基苯基)乙酸乙酯(100mg，0.44mmol)在二氯甲烷(10mL)中的搅拌溶液中添加3-(甲基磺酰基)丙-1-烯(265mg，2.21mmol)，接着添加格鲁布斯II代催化剂(19mg，0.02mmol)，并在40℃下回流16h。在减压下除去挥发物并将获得的残余物通过快速柱色谱法(石油醚中30％乙酸乙酯)纯化，得到(E)-2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙-1-烯基)苯基)乙酸乙酯(60mg，0.18mmol，42％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.64(s,1H),7.59–7.42(m,3H),6.76(d,J＝16.2Hz,1H),6.41–6.31(m,1H),4.31(q,J＝6.9Hz,2H),3.91(d,J＝7.2Hz,2H),2.92(s,3H),1.31(t,J＝6.9Hz,3H)。
E.2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酸乙酯。在氮气流下向(E)-2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙-1-烯基)苯基)乙酸乙酯(220mg，0.69mmol)在乙酸乙酯(10mL)中的搅拌溶液中添加10％氢氧化钯(50mg)在乙酸乙酯中的浆料。将反应混合物在氢气球压力及室温下搅拌16h。将氢气氛抽空并将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将过滤并浓缩获得的残余物通过快速柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酸乙酯(120mg，0.37mmol，54％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.48(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(s,1H),7.39(d,J＝7.5Hz,1H),7.32(dd,J＝8.1,7.9Hz,1H),4.31(q,J＝6.9Hz,2H),2.99(t,J＝7.5Hz,2H),2.89(s,3H),2.66(t,J＝7.5Hz,2H),2.23–2.15(m,2H),1.32(t,J＝6.9Hz,3H)。
F.2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酸乙酯(150mg，0.47mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(10mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(59mg，1.41mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的粗产物溶于水(15mL)，用乙酸乙酯(2×6mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×8mL)萃取。将合并的有机层用盐水(8mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酸(130mg，0.44mmol，94％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.50–7.41(m,4H),3.32(brs,1H),3.12–3.09(m,2H),3.04(s,3H),2.78(t,J＝7.8Hz,2H),2.04–1.96(m,2H)。
G.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(180mg，0.58mmol)和2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酸(136mg，0.46mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冰冷溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.3mL，1.74mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(442mg，1.16mmol)，并在室温下搅拌4h。将反应混合物用水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过Reveleris C-18反相柱(0.1％甲酸水溶液中50％乙腈)纯化获得的粗产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(3-(甲基磺酰基)丙基)苯基)乙酰胺(40mg，0.07mmol，12％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 472.11[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.63(t,J＝5.6Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.44-7.36(m,6H),5.10(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.45(d,J＝5.1Hz,2H),4.42(d,J＝17.9Hz,1H),4.28(d,J＝17.7,1H),3.11(t,J＝8.1Hz,2H),2.96(s,3H),2.91-2.85(m,1H),2.76(t,J＝7.8Hz,2H),2.67–2.55(m,1H),2.45–2.30(m,1H),2.06–1.92(m,3H)。
实施例100
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(2-氟丙-2-基)苯基)乙酰胺
A.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(2-氟丙-2-基)苯基)乙酰胺。向N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(2-羟基丙-2-基)乙酰胺(170mg，0.35mmol)在二氯甲烷(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加二乙基氨基三氟化硫(0.06mL，0.52mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液(20mL)稀释并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的65％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(2-氟丙-2-基)苯基)乙酰胺(70mg，0.16mmol，41％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 486.23[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.65(br t,J＝6.1Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.64-7.54(m,1H),7.40–7.38(m,4H),7.37-7.32(d,J＝8.3Hz,2H),5.10(br dd,J＝5.1,13.4Hz,1H),4.54-4.38(m,3H),4.31-4.23(m,1H),2.99-2.84(m,1H),2.69-2.55(m,1H),2.43-2.29(m,1H),2.05-1.93(m,1H),1.69(s,3H),1.63(s,3H)。
实施例101
2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2，2-二氟乙酰胺
A.1-苄基-5-碘吡啶-2(1H)-酮。在室温下向5-碘吡啶-2-醇(5g，22.62mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(9.36g，67.86mmol)，接着添加苄基溴(2.95mL，24.88mmol)，并在70℃下搅拌4h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中30％乙酸乙酯为洗脱液通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到1-苄基-5-碘吡啶-2(1H)-酮(4.5g，14.46mmol，64％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 311.98[M+1]+。
B.5-乙酰基-1-苄基吡啶-2(1H)-酮。向1-苄基-5-碘吡啶-2(1H)-酮(1.2g，3.858mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(12mL)中的搅拌溶液中添加1-(乙烯氧基)丁烷(1.93g，19.29mmol)，接着添加3M碳酸钾水溶液(2.4mL，11.57mmol)，添加Pd(OAc)2(400mg，0.192mmol)，接着添加1,3-双(二苯基膦基)丙烷(477mg，1.157mmol)，并在80℃下搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，添加1N盐酸水溶液(12mL)并在40℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，添加水(40mL)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取，用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤并经硫酸钠干燥，将有机相浓缩。使用己烷中的30％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化获得的残余物，得到5-乙酰基-1-苄基吡啶-2(1H)-酮(700mg，3.08mmol，80％产率)，为黄色糖浆状物。MS(ESI)m/z 228.24[M+H]+。
C.2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氧代乙酸乙酯。向5-乙酰基-1-苄基吡啶-2(1H)-酮(700mg，3.08mmol)在吡啶(7mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(855mg，7.709mmol)并在100℃下搅拌3h。将反应混合物用二氯甲烷(14mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(2.1mL)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用1N盐酸水溶液中和(直到pH-4)并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氧代乙酸乙酯(500mg，1.75mmol，57％产率)，为黄色糖浆状物。MS(ESI)m/z 286.12[M+H]+。
D.2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在0℃下向2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氧代乙酸乙酯(500mg，1.75mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(1.5mL)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×25mL)、盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(450mg，1.46mmol，84％产率)。MS(ESI)m/z265.07[M+1]+。
E.2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(400mg，1.302mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(10mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(112mg，3.906mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。将合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,2-二氟乙酸(350mg，1.254mmol，96％产率)。MS(ESI)m/z 280.32[M+1]+。
F.2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2,2-二氟乙酸(279mg，1.294mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.36mL，3.894mmol)并在0℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(400mg，1.294mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的50-55％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(1-苄基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(80mg，0.148mmol，11％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 535.09[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.99(s,1H),9.62(br t,J＝5.9Hz,1H),8.18(br s,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.56(dd,J＝2.7,9.5Hz,1H),7.44(s,1H),7.40–7.24(m,6H),5.16(s,1H),5.10(br dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.46(br d,J＝5.9Hz,1H),4.41(br d,J＝17.6Hz,1H),4.27(br d,J＝17.6Hz,1H),2.97–2.85(m,1H),2.69–2.56(m,1H),2.43–2.30(m,1H),2.02–1.98(m,1H)。
实施例102
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酰胺
A.2-碘-5-甲氧基吡啶。在室温下向2-溴-5-甲氧基吡啶(2g，10.63mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(3.3g，21.27mmol)、碘化亚铜(100mg,0.53mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(150mg，1.16mmol)，并于密封管中在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(20mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-碘-5-甲氧基吡啶(1.1g，4.46mmol，47％产率)，为棕色液体。GCMS(m/z)235.0[M]+。
B.2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯。向2-碘-5-甲氧基吡啶(1g，4.32mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.1mL，8.65mmol)、铜(0.73g，11.20mmol)，并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯(700mg，3.03mmol，71％)，为棕色液体。GCMS(m/z)231.1。
C.2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯(600mg，2.59mmol)在乙醇/四氢呋喃/水混合物(9mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(327mg，7.79mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酸(450mg，2.21mmol，85％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 204.23[M+1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酸(300mg，1.47mmol)和3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(360mg，1.18mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.8mL，2.20mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(670mg，4.41mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(70mL)稀释并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的57％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化所得残余物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-甲氧基吡啶-2-基)乙酰胺(58mg，0.12mmol，8％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 459.20[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.61-9.53(m,1H),8.41(br d,J＝2.9Hz,1H),7.72(dd,J＝8.3,11.2Hz,2H),7.57(dd,J＝2.9,8.8Hz,1H),7.52(s,1H),7.45(br d,J＝8.3Hz,1H),5.11(br dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.53-4.27(m,4H),3.89(s,3H)2.98-2.85(m,1H),2.69-2.56(m,1H),2.44-2.31(m,1H),2.06-1.95(m,1H)。
实施例103
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酰胺
A.6-羟基-N-甲氧基-N-甲基烟酰胺。向6-羟基烟酸(10g，45.24mmol)在四氢呋喃(100mL)中的搅拌溶液中顺序地添加EDC.HCl(13.01g，67.87mmol)、HOBT(10.39g，67.87mmol)、N,O-二甲基羟胺HCl(5.29g，67.87mmol)、N,N-二异丙基乙胺(31.55mL，180.99mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用5％甲醇:二氯甲烷通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到6-羟基-N-甲氧基-N-甲基烟酰胺(8g，43.95mmol，96％产率)。LCMS(ESI)m/z 183.0[M+1]+。
B.N-甲氧基-N,1-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺。在室温下向6-羟基-N-甲氧基-N-甲基烟酰胺(8g，43.95mmol)在N,N-二甲基甲酰胺中的搅拌溶液中添加甲基碘(3.01mL，48.35mmol)、碳酸钾(18.19g，131.86mmol)并搅拌3h。将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用4％甲醇:二氯甲烷通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到N-甲氧基-N,1-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺(6g，30.61mmol，69％产率)。LCMS(ESI)m/z197.29[M+1]+。
C.5-乙酰基-1-甲基吡啶-2(1H)-酮。在0℃下向N-甲氧基-N,1-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺(6g，30.61mmol)在无水四氢呋喃(50mL)中的搅拌溶液中添加乙醚(2.67mL)中的甲基锂1.6M达3h。将反应混合物用饱和氯化铵溶液淬灭并用乙酸乙酯(2×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用7-10％甲醇:二氯甲烷通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到5-乙酰基-1-甲基吡啶-2(1H)-酮(4g，26.49mmol，86％产率)。MS(ESI)m/z 152.14[M+1]+。
D.2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氧代乙酸乙酯。向5-乙酰基-1-甲基吡啶-2(1H)-酮(4g，26.49mmol)在吡啶(50mL)中的搅拌溶液中添加二氧化硒(7.35g，66.22mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用二氯甲烷(50mL)稀释并通过硅藻土垫过滤。在0℃下向滤液中添加氯甲酸乙酯(12mL)并搅拌2h。向所得反应混合物中添加水(30mL)并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中15-20％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氧代乙酸乙酯(2g，9.56mmol，36％产率)。LCMS(ESI)m/z 210.29[M+1]+。
E.2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酸乙酯。在室温下向2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氧代乙酸乙酯(2g，9.56mmol)中添加二乙基氨基三氟化硫(3.2mL，23.92mmol)并搅拌12h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到为液体的2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酸乙酯(1g，4.32mmol，45％)。LCMS(ESI)m/z 232.33[M+1]+。
F.2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酸乙酯(1g，4.32mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加氢氧化锂(0.909g，21.64mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酸(500g，2.46mmol，56％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 204.35[M+1]+。
G.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酸(196.6mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.27mL，2.906mmol)并在0-5℃下搅拌1h。向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-60％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相Grace柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)乙酰胺(60mg，0.131mmol，13％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 459.16[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.98(s,1H),9.58(br t,J＝5.85Hz,1H),8.05(s,1H),7.70(d,J＝7.68Hz,1H),7.58-7.35(m,3H),6.49(d,J＝9.50Hz,1H),5.11(dd,J＝13.16,5.12Hz,1H),4.5-4.35(m,3H),4.35-4.25(d,1H),3.53-3.45(s,3H),2.98-2.82(m,1H),2.67-2.52(m,1H),2.45-2.30(m,1H),2.05-1.95(m,1H)。
实施例104
2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.5-溴吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯。向5-溴吡啶-2-胺(20g，116.30mmol)在二氯甲烷(200mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加三乙胺(34mL，255.87mmol)、二碳酸二叔丁酯(35mL，151.19mmol)，接着添加4-二甲基氨基吡啶(1.4g，11.63mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用水淬灭并用二氯甲烷(2×200mL)萃取。将合并的有机层用水(200mL)、盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。用石油醚中5％乙酸乙酯为洗脱液通过柱色谱法纯化所得残余物，得到5-溴吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(25.0g，91.91mmol，79％产率)。LCMS(ESI)m/z219.08[M+1]+。
B.5-叔丁基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯。向氰化铜(33g，367.64mmol)在无水四氢呋喃(1200mL)中的冷(-78℃)搅拌溶液中缓慢添加叔丁基氯化镁(四氢呋喃中2.0M)(362mL，735.29mmol)并搅拌1h。在-78℃下向此反应混合物中添加5-溴吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(25.0g，91.91mmol)，搅拌2h并将其在室温下搅拌16h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用水(200mL)、盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。用石油醚中10％乙酸乙酯洗脱液通过柱色谱法纯化所得残余物，得到5-叔丁基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(15.0g，60.00mmol，65％产率)。LCMS(ESI)m/z 251.48[M+1]+。
C.2-溴-5-叔丁基吡啶。向5-叔丁基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁酯(13.0g，52.00mmol)在氢溴酸水溶液(150mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中缓慢添加亚硝酸钠(9.3g，135.2mmol)并搅拌15分钟。向此反应混合物中添加液溴(8.0mL，156.00mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物用氢氧化钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。用石油醚中5％乙酸乙酯洗脱液通过柱色谱法纯化所得残余物，得到2-溴-5-叔丁基吡啶(3.2g，15.02mmol，29％产率)。LCMS(ESI)m/z 214.11[M+1]+。
D.5-叔丁基-2-碘吡啶。在室温下向2-溴-5-叔丁基吡啶(3.2g，15.02mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(4.5g，30.04mmol)、碘化亚铜(145mg,0.75mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(235mg，1.65mmol)，并于密封管中在100℃下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到5-叔丁基-2-碘吡啶(3.5g，13.40mmol，89％产率)。GCMS(m/z)261.0。
E.2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向5-叔丁基-2-碘吡啶(3.5g，13.40mmol)在二甲基亚砜(30mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(5.4g，26.81mmol)，接着添加铜(2.2g，34.86mmol)并在55℃下搅拌5h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(2.8g，10.89mmol，81％产率)。LCMS(ESI)m/z 258.17[M+1]+。
F.2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(2.8g，10.89mmol)在甲醇-四氢呋喃-水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(1.4g，32.68mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(50mL)稀释，用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤浓缩，得到2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(2.0g，8.73mmol，80％产率)。LCMS(ESI)m/z 230.32[M+1]+。
G.2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(2.0g，8.73mmol(300mg，1.31mmol)在吡啶(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.4mL，3.87mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(404mg，1.31mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(5-叔丁基吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(75mg，0.15mmol，12％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 485.17[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(br s,1H),9.62(br t,J＝6.1Hz,1H),8.78(d,J＝2.4Hz,1H),8.02(dd,J＝2.4,8.3Hz,1H),7.71(dd,J＝2.2,8.1Hz,1H),7.52(s,1H),7.46(d,J＝7.8Hz,1H),5.11(dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.53-4.28(m,4H),2.99-2.84(m,1H),2.69-2.55(m,1H),2.45-2.30(m,1H),2.06-1.94(m,1H),1.35(s,9H)。
实施例105
2-(5-环丙基吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.5-环丙基吡啶-2-胺。向5-溴吡啶-2-胺(5g，28.90mmol)在10％水:甲苯混合物(100mL)中的搅拌且脱气溶液中添加环丙基硼酸(3.73g，43.35mmol)，接着添加磷酸钾(12.25g，57.80mmol)、三环己基膦(794mg，2.89mmol)并继续脱气10分钟。然后，添加乙酸钯(II)(650mg，2.89mmol)，再脱气10分钟并在110℃下加热3h。将反应混合物冷却至室温并通过硅藻土垫过滤。向滤液中添加冷水(100mL)并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到5-环丙基吡啶-2-胺(3.0g，22.39mmol，77％产率)。GCMS(m/z)134.1[M]+。
B.2-溴-5-环丙基吡啶。向5-环丙基吡啶-2-胺(3.0g，22.39mmol)在47％氢溴酸水溶液(25mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加亚硝酸钠(4.0g，58.21mmol)的溶液并在相同温度下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加溴(10.75g，67.16mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物倒入水(100mL)中并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用石油醚中15-20％乙酸乙酯通过组合柱色谱法纯化所得残余物，得到2-溴-5-环丙基吡啶(1.2g，6.09mmol，27％产率)。GCMS(m/z)197.0[M]+。
C.5-环丙基-2-碘吡啶。在室温下向2-溴-5-环丙基吡啶(1.2g，6.09mmol)在1,4-二噁烷(25mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(1.83g，12.18mmol)、碘化亚铜(58mg，0.30mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(95mg，0.67mmol)，并在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到5-环丙基-2-碘吡啶(1.2g，4.90mmol，81％)。GCMS(m/z)245.0[M]+。
D.2-(5-环丙基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向5-环丙基-2-碘吡啶(1.2g，4.90mmol)在二甲基亚砜(12mL)中的搅拌溶液中添加铜(809mg，12.73mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.48g，7.35mmol)，并在55℃下搅拌2h。向反应混合物中添加饱和氯化铵水溶液(50mL)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(5-环丙基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，4.15mmol，85％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(br s,1H),7.61(br s,1H),7.43(d,J＝8.0Hz,1H),4.42–4.30(m,2H),2.04–1.91(m,1H),1.40–1.24(m,3H),1.12–1.09(m,2H),0.84–0.77(m,2H)。
E.2-(5-环丙基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(5-环丙基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，4.15mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(523mg，12.45mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物浓缩，将残余物用饱和硫酸氢钾(25mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(5-环丙基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(500mg，2.35mmol，50％产率)。MS(ESI)m/z 214.3[M-1]-ve。
F.2-(5-环丙基吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(5-环丙基吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(300mg，1.41mmol)在吡啶(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(646mg，4.22mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(435mg，1.41mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的60-65％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到2-(5-环丙基吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(140mg，0.30mmol，21％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 469.06[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.58(t,J＝6.1Hz,1H),8.53(s,1H),7.71(d,J＝7.8Hz,1H),7.66-7.60(m,2H),7.51(s,1H),7.46(d,J＝8.3Hz,1H),5.11(dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.56-4.28(m,4H),3.08-2.85(m,1H),2.67-2.56(m,1H),2.45-2.32(m,1H),2.10-1.96(m,2H),1.13-1.03(m,2H),0.89-0.79(m,2H)。
实施例106
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酰胺
A.2-溴-5-异丙氧基吡啶。向6-溴吡啶-3-醇(2g，11.49mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加2-碘丙烷(1.4mL，13.79mmol)、碳酸钾(4.7g，34.47mmol)并在80℃下搅拌6h。将反应混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-溴-5-异丙氧基吡啶(1.4g，6.48mmol，58％)，为淡黄色固体。MS(ESI)m/z216.20
B.2-碘-5-异丙氧基吡啶。在室温下向密封管中2-溴-5-异丙氧基吡啶(1.4g，6.48mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(1.9g，12.96mmol)、碘化亚铜(61mg,0.32mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(101mg，0.71mmol)，并在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(30mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-碘-5-异丙氧基吡啶(1g，3.83mmol，58％产率)，为棕色固体。GCMS(m/z)263.0。
C.2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯。向2-碘-5-异丙氧基吡啶(1g，3.80mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1mL，7.60mmol)、铜(0.6g，10.09mmol)并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酸乙酯(500mg，2.30mmol，60％)，为棕色液体。MS(m/z)259.1。
D.2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酸酯(500mg，2.32mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(9mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(280mg，6.91mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酸(350mg，1.51mmol，79％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 232.24
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酰胺。向3-(6-((甲基氨基)甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(400mg，1.29mmol)和2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酸(300mg，1.29mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.7mL，3.86mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(735mg，1.93mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(70mL)稀释并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的58％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化所得残余物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-异丙氧基吡啶-2-基)乙酰胺(70mg，0.14mmol，11％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 487.20[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.55(br t,J＝6.1Hz,1H),8.36(d,J＝2.6Hz,1H),7.76-7.66(m,2H),7.60-7.50(m,2H),7.45(d,J＝8.1Hz,1H),5.11(dd,J＝4.8,13.2Hz,1H),4.80-4.75(m,1H),4.65-4.26(m,4H),3.02-2.83(m,1H),2.75-2.54(m,1H),2.46-2.305(m,1H),2.06-1.94(m,1H),1.31(m,6H)。
实施例107
2-(5-溴吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(5-溴吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向5-溴-2-碘吡啶(3g，10.56mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(3.13g，15.84mmol)，接着添加铜粉(1.74g，27.46mmol)，并在55℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚中20％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2-(5-溴吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.5g，5.35mmol，60％)，为无色液体。MS(ESI)m/z 280.2[M+1]+。
B.2-(5-溴吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(5-溴吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.5g，5.37mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(677mg，16.13mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将所得粗产物溶于水(15mL)，用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(5-溴吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(900mg，3.57mmol，69％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 252.2[M+H]+。
C.2-(5-溴吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(5-溴吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸(243mg，0.97mmol)在吡啶(6mL)中的冷溶液中滴加氧氯化磷(1.8mL，2.9mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到2-(5-溴吡啶-2-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(33mg，0.065mmol，7％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 507.8[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.68(t,J＝4.5Hz,1H),8.89(d,J＝1.6Hz,1H),8.31(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.78(d,J＝8.4Hz,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.49(s,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.50(d,J＝6.4Hz,2H),4.46(d,J＝17.9Hz,1H),4.32(d,J＝17.6Hz,1H),2.95–2.87(m,1H),2.66–2.55(m,1H),2.45–2.30(m,1H),2.05–1.96(m,1H)。
实施例108
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺
A.(2-氟-6-(三氟甲氧基)苯基)三甲基硅烷。向1-氟-3-(三氟甲氧基)苯(2.0g，11.11mmol)和TMEDA(1.3mL，11.11mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的冷(-78℃)搅拌溶液中添加仲丁基锂(在环己烷中1.4M，8mL)并搅拌2h。在-78℃下向此反应混合物中添加三甲基氯硅烷(1.81g，16.66mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用乙醚(2×50mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到(2-氟-6-(三氟甲氧基)苯基)三甲基硅烷(1.8g，7.14mmol，64％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ(ppm)7.35(dt,J＝6.6,8.2Hz,1H),7.05–7.00(m,1H),6.92(t,J＝8.3Hz,1H),0.41–0.33(m,9H)。
B.(6-氟-3-碘-2-(三氟甲氧基)苯基)三甲基硅烷。向2,2,6,6-四甲基哌啶(897mg，6.34mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的冷(-78℃)搅拌溶液中缓慢添加正丁基锂(正己烷中2.5M，2.5mL，6.34mmol)，接着添加四氢呋喃(5mL)中的(2-氟-6-(三氟甲氧基)苯基)三甲基硅烷(1.6g，6.34mmol)，并在相同温度下搅拌2h。在-78℃下将无水四氢呋喃(10mL)中的碘(2.4g，9.52mmol)添加到此反应混合物中并将其在0℃下搅拌1h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用乙醚(2×50mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到(6-氟-3-碘-2-(三氟甲氧基)苯基)三甲基硅烷(2.0g，5.29mmol，84％产率)。GCMS(m/z)378.1。
C.2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯。向于密封管中(6-氟-3-碘-2-(三氟甲氧基)苯基)三甲基硅烷(2.0g，5.29mmol)在二甲基亚砜(30mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(2.1g，10.58mmol)，接着添加铜(874mg，13.76mmol)并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用氯化铵水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(1.5g，4.96mmol，94％产率)。GCMS(m/z)302.1。
D.2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酸乙酯(1.5g，4.96mmol)在甲醇:四氢呋喃:水混合物(15mL，1:1:1中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(1.4g，14.90mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(50mL)稀释，用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(1.0g，3.64mmol，73％产率)。LCMS(ESI)m/z 273.26[M-1]-。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(300mg，1.09mmol)在吡啶(5mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.3mL，3.28mmol)并在0-5℃下搅拌1h。将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(338mg，1.09mmol)添加到此反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(37mg，0.06mmol，6％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 530.07[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.98(s,1H),9.78(br t,J＝5.9Hz,1H),7.82(t,J＝8.6Hz,1H),7.71(d,J＝8.1Hz,1H),7.63(br d,J＝11.4Hz,1H),7.51–7.38(m,3H),5.11(br dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.56–4.40(m,3H),4.31(d,J＝17.6Hz,1H),3.00–2.83(m,1H),2.66–2.54(m,1H),2.44–2.30(m,1H),2.08–1.93(m,1H)。
实施例109
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酰胺
A.8-氟-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯。在0℃下向1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(12g，76.92mmol)在吡啶(120mL)中的搅拌溶液中添加二乙基氨基三氟化硫(37g，230mmol)并在室温下搅拌48h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到8-氟-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯(6.5g，41mmol，54％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 158.1[M]+。
B.8-氟-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷。在氮气流下向8-氟-1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯(1g，3.53mmol)在乙酸乙酯(15mL)中的搅拌溶液中添加乙酸乙酯中的10％钯碳(200mg)的浆料。在氢气氛下将反应混合物室温搅拌4h。将氢气氛抽空并将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将滤液浓缩，得到8-氟-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(500mg，1.3mmol，37％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 160.1[M]+。
C.4-氟环己酮。在0℃下向8-氟-1,4-二氧杂螺[4.5]癸烷(3.5g，21.87mmol)在四氢呋喃(20mL)中的搅拌溶液中添加20mL的4N盐酸水溶液，并在室温下搅拌6h。将反应混合物用水(10mL)稀释，用碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到4-氟环己酮(1.2g，10.34mmol，48％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 116.1[M]+
D.2,2-二氟-2-(4-氟-1-羟基环己基)乙酸乙酯。在0℃下向4-氟环己酮(1.6g，13.7mmol)在四氢呋喃(20mL)中的搅拌溶液中添加七水合氯化铈(III)(340mg 1.37mmol)，接着添加锌(1.07g，16.55mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(3.35g，16.55mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过快速色谱法(石油醚中30％乙酸乙酯)纯化获得的粗产物，得到2,2-二氟-2-(4-氟-1-羟基环己基)乙酸乙酯(1.1g，4.58mmol，34％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.60(s,1H),4.83(dt,J＝49.2,2.7Hz,1H),4.29(q,J＝7.2Hz,2H),1.82–1.64(m,8H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H)。
E.2,2-二氟-2-(4-氟环己-1-烯基)乙酸乙酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(4-氟-1-羟基环己基)乙酸乙酯(0.75g，3.12mmol)在吡啶(22.6mL)中的搅拌溶液中添加亚硫酰氯(3.72g，31.25mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(10mL)稀释，用碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚中5％乙酸乙酯)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(4-氟环己-1-烯基)乙酸乙酯(0.3g，1.35mmol，43％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 221.9[M]+。
F.2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酸乙酯。在氮气流下向2,2-二氟-2-(4-氟环己-1-烯基)乙酸乙酯(200mg，0.9mmol)在乙酸乙酯(10mL)中的搅拌溶液中添加乙酸乙酯中的10％氧化铂(20mg)的浆料。将反应混合物在60psi氢压力下室温搅拌16h。将氢气氛抽空并将反应混合物通过硅藻土垫过滤，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酸乙酯(100mg，0.44mmol，50％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.83(dt,J＝49.2,2.7Hz,1H),4.34(q,J＝7.2Hz,2H),2.16–1.98(m,4H),1.70–1.57(m,4H),1.51–1.41(m,1H),1.26(t,J＝6.6Hz,3H)。
G.2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酸乙酯(100mg，0.446mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(6mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(56mg，1.34mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物并将获得的粗品溶于水(5mL)，用乙酸乙酯(2×5mL)洗涤。将水层用1N盐酸水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酸(50mg，0.255mmol，59％产率)，为半固体化合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ4.82(dt,J＝42.2,6.6Hz,1H),2.18–1.20(m,10H)。
H.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酸(190mg，0.97mmol)在吡啶(9mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(445mg，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐添加到反应混合物中并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中的50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-氟环己基)乙酰胺(33mg，0.073mmol，7％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 452.15[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.56(t,J＝5.6Hz,1H),7.70(d,J＝8.1Hz,1H),7.47(s,1H),7.41(d,J＝8.1Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.4Hz,1H),4.84(d,J＝48.6Hz,1H),4.45(d,J＝17.1Hz,1H),4.44(d,J＝6.3Hz,2H),4.31(d,J＝17.4Hz,1H),2.96–2.72(m,1H),2.62–2.51(m,1H),2.40–2.21(m,2H),2.07–1.90(m,4H),1.62–1.41(m,6H)。
实施例110
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-4-(甲基磺酰基)苯。在室温下向1-溴-4-(甲基磺酰基)苯(2g，8.506mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(2.55g，17.01mmol)、碘化亚铜(80mg,0.42mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(133mg，0.93mmol)，并于密封管中在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-碘-3-(甲基磺酰基)苯(1.8g，6.38mmol，75％产率)，为棕色固体。LCMS(ESI)m/z 283.16[M+H]+。
B.2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酸乙酯。向1-碘-4-(甲基磺酰基)苯(500mg，1.77mmol)在二甲基亚砜(5mL)中的搅拌溶液中添加2-碘-2,2-二氟乙酸乙酯(0.32mL，2.313mmol)、铜(107mg，1.68mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶(100-200目，己烷中20％乙酸乙酯)纯化所得残余物，得到2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酸乙酯(250mg，0.899mmol，50％)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 279.26[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酸乙酯(250mg，0.899mmol)在甲醇/四氢呋喃/水(6mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(75mg，0.798mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酸(180mg，0.72mmol，80％产率)，为胶状固体。MS(ESI)m/z 249.26[M-1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酰胺。向2 2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酸(194mg，0.776mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.18mL，1.94mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。向此中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(200mg，0.64mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用0.1％甲酸水溶液中52％ACN为洗脱液通过grace柱色谱法纯化所得残余物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(4-(甲基磺酰基)苯基)乙酰胺(70mg，0.138mmol，21％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 506.06[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.78(br t,J＝6.1Hz,1H),8.11(d,J＝8.3Hz,2H),7.88(d,J＝8.3Hz,2H),7.69(d,J＝7.8Hz,1H),7.42–7.34(m,2H),5.10(dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.53–4.37(m,3H),4.28(d,J＝17.2Hz,1H),3.29(s,3H),2.98–2.87(m,1H),2.68–2.55(m,1H),2.46–2.31(m,1H),2.06–1.94(m,1H)。
实施例111
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酰胺
A.1-碘-3-(甲基磺酰基)苯。在室温下向1-溴-3-(甲基磺酰基)苯(1g，4.25mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的搅拌溶液中添加碘化钠(1.92g，12.76mmol)、碘化亚铜(81mg,0.425mmol)、反式-N,N’-二甲基环己烷-1,2-二胺(90mg，0.63mmol)，并于密封管中在110℃下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-碘-3-(甲基磺酰基)苯(900g，3.19mmol，75％产率)，为棕色固体。LCMS(ESI)m/z 282.85[M+H]+。
B.2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酸乙酯。向1-碘-3-(甲基磺酰基)苯(900mg，3.19mmol)在二甲基亚砜(15mL)中的搅拌溶液中添加2-碘-2,2-二氟乙酸乙酯(0.56mL，4.147mmol)、铜(527mg，8.29mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。通过硅胶(100-200目，己烷中12％乙酸乙酯)纯化所得残余物，得到2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酸乙酯(850mg，3.05mmol，95％)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 320.32[M+1]+(ACN(+41)加合物)
C.2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酸乙酯(800mg，2.87mmol)在甲醇/四氢呋喃/水(10mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(361mg，8.61mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(20mL)中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酸(650mg，1.74mmol，70％产率)，为胶状固体。MS(ESI)m/z 251.07[M+1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酰胺。向2 2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酸(291mg，1.16mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.27mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌30分钟。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用52％的ACN-0.1％甲酸水溶液为洗脱液通过grace柱色谱法纯化所得残余物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(甲基磺酰基)苯基)乙酰胺(72mg，0.142mmol，15％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 506.01[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.98(s,1H)9.80(br t,J＝5.85Hz,1H),8.12–8.09(m,2H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.90–7.80(m,1H),7.67(d,J＝7.68Hz,1H),7.41(s,1H),7.36(d,J＝7.8Hz,1H),5.10(dd,J＝13.16,5.12Hz,1H),4.54-4.20(m,4H),3.30(d,J＝8.04Hz,3H),3.01-2.79(m,1H),2.67–2.55(m,1H),2.47–2.30(m,1H),2.06–1.92(m,1H)。
实施例112
2-(2-氨基嘧啶-5-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(2-氨基嘧啶-5-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。使5-碘嘧啶-2-胺(1g，4.52mmol)在二甲基亚砜(20mL)中的搅拌溶液与2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.1mL，9.04mmol)、铜(0.75g，11.76mmol)反应，并在50℃下搅拌16h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-氨基嘧啶-5-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(600mg，2.76mmol，61％)，为棕色液体。GCMS(m/z)217.1。
B.2-(2-氨基嘧啶-5-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(2-氨基嘧啶-5-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(500mg，2.30mmol)在乙醇/四氢呋喃/水(12mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(290mg，6.91mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-氨基嘧啶-5-基)-2,2-二氟乙酸(300mg，1.58mmol，69％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 190.22.[M+1]+。
C.2-(2-氨基嘧啶-5-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向2-(2-氨基嘧啶-5-基)-2,2-二氟乙酸(800mg，4.23mmol)和3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(915mg，2.96mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(2.3mL，12.69mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(2.4g，6.34mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(70mL)稀释且用乙酸乙酯(2×20mL)萃取，并将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化产物，得到2-(2-氨基嘧啶-5-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(45mg，1.01mmol，15％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 445.44[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),9.59(br t,J＝5.8Hz,1H),8.36(s,2H),7.67(d,J＝7.7Hz,1H),7.43(s,1H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.26(s,2H),5.10(dd,J＝5.2,13.4Hz,1H),4.65-4.24(m,4H),3.02-2.83(m,1H),2.67-2.54(m,1H),2.46-2.30(m,1H),2.01-1.95(m,1H)。
实施例113
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酰胺
A.6-溴吡啶-3-基氨基甲酸叔丁酯。在0℃下向6-溴吡啶-3-胺(7g，40.46mmol)在二氯甲烷(70mL)中的搅拌溶液中添加二碳酸二叔丁酯(10.58mL，48.55mmol)，接着添加4-二甲基氨基吡啶(0.99g，8.09mmol)、三乙胺(0.99g，8.09mmol)，并在室温下搅拌6h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(5％乙酸乙酯/石油醚)纯化获得的粗品，得到6-溴吡啶-3-基氨基甲酸叔丁酯(6g，22.05mmol，54％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z273.22[M+1]+。
B.2-(5-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向6-溴吡啶-3-基氨基甲酸叔丁酯(6g，16.08mmol)在二甲基亚砜(40mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(4.89mL，24.12mmol)，接着添加铜粉(2.65g，41.73mmol)并在60℃下搅拌6h。将反应混合物用水稀释并通过硅藻土垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(3×50mL)萃取并将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(5％乙酸乙酯/石油醚)纯化获得的粗品，得到2-(5-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(4g，12.65mmol，57％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.42(d,J＝2.1Hz,1H),8.16(d,J＝6.9Hz,1H),7.66(d,J＝9.0Hz,1H),6.67(bs,1H),4.36(q,J＝7.1Hz,2H),1.53(s,9H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)。
C.2,2-二氟-2-(5-氰硫基吡啶-2-基)乙酸乙酯。在0℃下2-(5-(叔丁氧基羰基氨基)吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(4g，12.65mmol)在6N HCl(80mL)中的搅拌溶液并在室温下搅拌30分钟。然后，在-5℃下将亚硝酸钠(0.87g，12.65mmol)添加到反应混合物中，接着添加硫氰酸铜(I)(0.77g，6.32mmol)、硫氰酸钾(0.99g，8.09mmol)，并在室温下搅拌1h。将反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液中并用乙酸乙酯(3×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(5％乙酸乙酯/石油醚)纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(5-氰硫基吡啶-2-基)乙酸乙酯(0.7g，2.71mmol，21％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 259.23[M+1]+。
D.2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酸乙酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(5-氰硫基吡啶-2-基)乙酸乙酯(700mg，2.71mmol)在四氢呋喃(10mL)中的搅拌溶液中添加三氟甲基三甲基硅烷(770mg，5.42mmol)，接着添加四正丁基氟化铵(1.08mL，1.08mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(100-200硅胶，2％乙酸乙酯/石油醚)纯化，得到2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酸乙酯(170mg，0.56mmol，21％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 302.27[M+1]+。
E.2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酸乙酯(170mg，0.56mmol)在四氢呋喃:乙醇:水(5mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(71mg，1.69mmol)并在室温下搅拌4h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品溶于水(5mL)并用乙酸乙酯(2×4mL)洗涤。将水层用硫酸氢钾水溶液酸化并用乙酸乙酯(3×5mL)萃取。将合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酸(140mg，0.51mmol，91％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 274.18[M+1]+。
F.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-基)乙酸(220mg，0.81mmol)在吡啶(5mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(371mg，2.42mmol)并在0-5℃下搅拌1h。然后，将3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(250mg，0.81mmol)添加到反应混合物中并在室温下搅拌1h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(50-55％乙腈/0.1％甲酸水溶液)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(5-(三氟甲硫基)吡啶-2-yl)乙酰胺(45mg，0.08mmol，10％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 529.03[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.77(t,J＝5.4Hz,1H),9.01(s,1H),8.44(dd,J＝7.8,0.8Hz,1H),7.98(d,J＝8.4Hz,1H),7.71(d,J＝7.5Hz,1H),7.50(s,1H),7.44(d,J＝7.5Hz,1H),5.11(dd,J＝12.9,5.1Hz,1H),4.51(d,J＝6.3Hz,2H),4.46(d,J＝17.9Hz,1H),4.31(d,J＝17.6Hz,1H),2.92–2.88(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.41–2.36(m,1H),2.02–2.00(m,1H)。
实施例114
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基氨基)乙氧基)苯基)乙酰胺盐酸盐
A.2-(3-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯(2g，9.25mmol)在四氢呋喃(20mL)中的搅拌溶液中添加2-羟乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.43g 13.88mmol)、N,N-偶氮二甲酸二异丙酯(1.87g 9.25mmol)，接着添加三苯基膦(2.4g，9.25mmol)并在50-55℃下搅拌16h。将反应物料直接浓缩。30％乙酸乙酯-己烷为洗脱液，通过柱色谱法(硅胶100-200)纯化所得残余物，得到2-(3-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1g，4.0mmol，29％产率)，为棕色液体。MS(ESI)m/z 274.2[M-100]+。
B.2-(3-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g，2.67mmol)在甲醇/四氢呋喃/水(15mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(224.5mg，5.64mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(10mL)中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到乙基2-(3-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(600mg，1.73mmol，65％产率)，为棕色半固体。MS(ESI)m/z 343.8[M-1]+。
C.2-(3-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯。在室温下向乙基2-(3-(2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(447.8mg，1.44mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的溶液中添加(3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(500mg，1.44mmol)，随后添加二异丙基乙胺(561.8mg，4.34mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(825.9g，2.17mmol)，将反应继续至室温达2h。将反应混合物倒入冰冷水(40mL)中观察到灰白色固体。使用甲酸水溶液(0.1％)中的45-50％乙腈通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化所得残余物，得到2-(3-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.33mmol，20％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 501[M-100]+(De Boc质量)。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(甲基氨基)乙氧基)苯基)乙酰胺盐酸盐。向2-(3-(2-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基氨基)-1,1-二氟-2-氧代乙基)苯氧基)乙基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，0.26mmol)中添加二噁烷(5mL)中的4M盐酸并在室温下搅拌4h。将溶液在减压下蒸出并用乙醚洗涤，得到3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(60mg，0.11mmol，42％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 501.59[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.99(s,1H),9.87–9.58(m,1H),8.98(br s,2H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.53–7.46(m,1H),7.44–7.40(m,1H),7.39–7.34(m,1H),7.46–7.32(m,1H),7.24–7.16(m,3H),5.11(dd,J＝5.1,13.5Hz,1H),4.48–4.39(m,3H),4.33–4.24(m,3H),3.40–3.25(m,2H),2.97–2.85(m,1H),2.67–2.55(m,4H),2.39(dq,J＝4.4,13.2Hz,4H),2.05–1.94(m,1H)。
实施例115
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酰胺
A.2-(6-氯哒嗪-3-基丙二酸1-叔丁酯3-乙酯。在10℃下将丙二酸1-叔丁酯乙酯(26.6mL，140.54mmol)滴加到氢化钠(12.9g，324.32mmol)在二噁烷中的悬浮液中。将反应物在10℃下搅拌1h，然后将其升至室温。然后在25℃下向反应物中分批添加3,6-二氯哒嗪(20g，135.13mmol)并回流2小时。将反应混合物用冰冷水(500mL)稀释，用乙酸乙酯(5×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用6％EtoAc:己烯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-(6-氯哒嗪-3-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(16g,53.33mmol，39％产率)。LCMS(ESI)m/z 301.31[M+1。
B.2-(6-氯哒嗪-3-基)-2-氟丙二酸1-叔丁酯3-乙酯。在0℃下向2-(6-氯哒嗪-3-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(16g，53.33mmol)在四氢呋喃(200mL)中的溶液中添加氢化钠(2.31g，58.133mmol)并搅拌15分钟。在0℃下经20分钟的时段滴加SelectFluor(20.5g，58.13mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(40mL)中的混浊溶液，然后将反应物在室温下搅拌2h。将反应物用氯化铵(200mL)淬灭并用乙酸乙酯(5×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用5％EtoAc:己烯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-(6-氯哒嗪-3-基)-2-氟丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(11g，34.59mmol，64％产率)。LCMS(ESI)m/z 219.27[M+1]+。
C.2-(6-氯哒嗪-3-基)-2-氟乙酸乙酯。将2-(6-氯哒嗪-3-基)-2-氟丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(11g，34.54mmol)在三氟乙酸:二氯甲烷混合物(1:1，60mL)中的溶液在25℃下搅拌2h，然后经旋转蒸发器浓缩至干。将所得残余物溶于乙酸乙酯(100mL)，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经硫酸钠干燥并然后浓缩至干，得到2-(6-氯哒嗪-3-基)-2-氟乙酸乙酯(6g，27.52mmol 79％产率)，LCMS(ESI)m/z 219.06[M+1]+。将该物质不经进一步纯化带到下一步。
D.2-氟-2-(6-羟基哒嗪-3-基)乙酸乙酯。向2-(6-氯哒嗪-3-基)-2-氟乙酸乙酯(6g，27.52mmol)在乙酸(20mL)中的搅拌溶液中添加乙酸钠(22.56g，275.52mmol)并在100℃下搅拌16h。将反应混合物用冰冷水(500mL)稀释，用乙酸乙酯(5×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的30％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-氟-2-(6-羟基哒嗪-3-基)乙酸乙酯(4g，20.00mmol，72％产率)。LCMS(ESI)m/z201.22[M+1]+。
E.2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸乙酯。在室温下向2-氟-2-(6-羟基哒嗪-3-基)乙酸乙酯(4g，20.00mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的搅拌溶液中添加甲基碘(1.86mL，30.00mmol)、碳酸钾(8.28g，60.00mmol)并搅拌3h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的40％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸乙酯(3g，14.01mmol，70％产率)。LCMS(ESI)m/z215.66[M+1]+。
F.2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸乙酯。在-78℃下向2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸乙酯(3g14.01mmol)在无水四氢呋喃(30mL)中的溶液中滴加六甲基二甲硅烷基叠氮化锂(14mL,16.82mmol)并搅拌15分钟。经10分钟的时段向此中滴加SelectFluor(5.9g，16.8mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的悬浮液。添加完成后，经30分钟的时段将反应物升至室温。将反应物饱和氯化铵(50mL)淬灭并蒸出有机级分。将获得的残余物用冰冷水(500mL)稀释并用乙酸乙酯(5×500mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的42％乙酸乙酯通过Combi-Flash柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸乙酯(1.2g，5.17mmol，36％产率)。LCMS(ESI)m/z 233.33[M+1]+。
G.2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸乙酯(1.2g，5.17mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(30mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(1.08g，25.86mmol)并在室温下搅拌6h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％盐酸水溶液中和并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸(700mg，3.43mmol，66％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 205.31[M+1]+。
H.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酸(197.6mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.27mL，2.906mmol)并在0-5℃下搅拌1h。向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下继续搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-60％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-基)乙酰胺(70mg，0.152mmol，15％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 460.52[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝10.98(s,1H),9.68(br t,J＝5.8Hz,1H),7.79-7.69(m,2H),7.51(s,1H),7.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.12(d,J＝9.5Hz,1H),5.11(dd,J＝4.9,13.3Hz,1H),4.58-4.27(m,4H),3.66(s,3H),2.99-2.83(m,1H),2.67-2.56(m,1H),2.45-2.29(m,1H),2.08-1.93(m,1H)。
实施例116
2-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.4-碘嘧啶-2-胺。在0℃下向4-氯嘧啶-2-胺(5g，38.5mmol)在氢碘酸(100mL)中的冰冷溶液中添加碘化钠(17.2g，115.7mmol)并在室温下搅拌2h。在0℃下将反应混合物小心地用碳酸氢钠水溶液淬灭并用二氯甲烷(3×150mL)萃取。将合并的有机层用水(150mL)、盐水(150mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到4-碘嘧啶-2-胺(1.55g，7.01mmol，18％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 222[M+H]+。
B.2-(2-氨基嘧啶-4-基)-2,2-二氟乙酸乙酯。向4-碘嘧啶-2-胺(5g，22.60mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(4.53mL，33.92mmol)，接着添加铜粉(3.7g，58.75mmol)并在50℃下搅拌4h。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液中和并用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(2-氨基嘧啶-4-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1.4mg，6.45mmol，28％)为棕色液体。MS(ESI)m/z 218[M+H]+。
C.2-(2-氨基嘧啶-4-基)-2,2-二氟乙酸。向2-(2-氨基嘧啶-4-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(700mg，3.22mmol)在四氢呋喃中的冷(0℃)搅拌溶液中添加1N盐酸并在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩并将获得的残余物与甲苯共蒸馏，得到2-(2-氨基嘧啶-4-基)-2,2-二氟乙酸(550mg，2.91mmol，82％产率)，为白色固体。MS(ESI)m/z 188[M-H]+。
D.2-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向3-(6-((甲基氨基)甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮·盐酸盐(683mg，2.21mmol)和2-(2-氨基嘧啶-4-基)-2,2-二氟乙酸(500mg，2.21mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冷(0℃)溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(1.15mL，6.63mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(1g，2.65mmol)并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(70mL)稀释并用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的58％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化所得残余物，得到2-(2-氨基嘧啶-4-基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(52mg，11.6mmol，5％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 445.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.57(t,J＝6.0Hz,1H),8.46(d,J＝4.8Hz,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(s,1H),7.60(d,J＝7.6Hz,1H),7.07(s,1H),6.86(d,J＝4.8Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,4.8Hz,1H),4.48(d,J＝5.2Hz,2H),4.46(d,J＝16.9Hz,1H),4.31(d,J＝17.2Hz,1H),2.93–2.89(m,1H),2.67–2.58(m,1H),2.40–2.33(m,1H),2.01–1.98(m,1H)。
实施例117
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(2-(甲硫基)嘧啶-4-基)乙酸乙酯。在RT下向4-氯-2-(甲硫基)嘧啶(5g，21.55mmol)在二甲基亚砜(50mL)中的搅拌溶液中添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(8mL，62.2mmol)，接着添加铜粉(5.93g，93.4mmol)，并在60℃下搅拌6h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液碱化并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用水(40mL)、盐水(40mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且将溶剂浓缩，并使用石油醚中20％乙酸乙酯通过硅胶柱色谱法纯化获得的粗品，得到2,2-二氟-2-(3-甲酰基苯基)乙酸乙酯(3g，12.00mmol，38％)，为无色液体。MS(ESI)m/z 249.66[M+1]+。
B.2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酸乙酯。在0℃下将四氢呋喃中的2,2-二氟-2-(2-(甲硫基)嘧啶-4-基)乙酸乙酯(2.8g，11.29mmol)添加到三甲基硅烷(5.3mL)中并添加10％Pd/C(622mg)，然后在室温下搅拌5h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将获得的粗品通过快速柱色谱法(100-200硅胶，石油醚中10％乙酸乙酯)纯化，得到2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酸乙酯(800mg，3.96mmol，36％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 203.65[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酸。向2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酸乙酯(1g，4.95mmol)在四氢呋喃:乙醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(624mg，14.85mmol)并在室温下搅拌16h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩至2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酸(800mg，4.59mmol，92％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 175[M+1]+。
D.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酸(203mg，1.16mmol)在吡啶(10mL)中的冰冷溶液中滴加氧氯化磷(0.27mL，2.91mmol)并在0-5℃下搅拌1h，然后添加3-(6-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.97mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用水(15mL)、盐水(15mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法(0.1％甲酸水溶液中50-55％乙腈)纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(嘧啶-4-基)乙酰胺(55mg，0.12mmol，12％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 430.47[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.81(t,J＝6.0Hz,1H),9.41(s,1H),9.12(d,J＝5.1Hz,1H)7.95(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H)7.71(d,J＝7.5Hz,1H),7.52(s,1H),7.44(d,J＝7.5Hz,1H),5.11(dd,J＝13.2,5.1Hz,1H),4.51(d,J＝6.3Hz,2H),4.47(d,J＝17.6Hz,1H),4.32(d,J＝17.4Hz,1H)2.96–2.88(m,1H),2.63–2.57(m,1H),2.43–2.38(m,1H),2.07–1.98(m,1H)。
实施例118
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸甲酯。在0℃下向2,2-二氟-2-(3-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酸乙酯(13.0g，49.98mmol)在二氯甲烷(130mL)中的搅拌溶液中添加三氟乙酸(65mL)并在室温下搅拌5h。将反应混合物用水(200mL)淬灭并用二氯甲烷(3×200mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸甲酯(8.0g，37.03mmol，74％产率)。GCMS(m/z)216.1。
B.1-(2-氯乙基)哌啶。在0℃下向2-(哌啶-1-基)乙醇(4.0g，30.95mmol)在二氯甲烷(40mL)中的搅拌溶液中添加亚硫酰氯(7.0mL，92.87)并在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用二氯甲烷(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到1-(2-氯乙基)哌啶(1.8g，12.24mmol，40％产率)。GCMS(m/z)147.1。
C.2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯。向2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸甲酯(1.0g，4.62mmol)在丙酮(15mL)中的搅拌溶液中添加1-(2-氯乙基)哌啶(885mg，6.01mmol)、碳酸钾(1.9g，13.88mmol)，并在55℃下搅拌4h。将反应混合物用硅藻土床)过滤并用乙酸乙酯(3×50mL)洗涤。将滤液经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯(1.4g，4.28mmol，93％产率)。LCMS(ESI)m/z 328.0。
D.2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酸乙酯(1.4g，4.28mmol)在甲醇-四氢呋喃-水混合物(20mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(539mg，12.84mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酸(700mg，2.34mmol，55％产率)。LCMS(ESI)m/z 300.0。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酸(300mg，1.00mmol)和3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(310mg，1.00mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(389mg，3.01mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(572mg，1.50mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩并在真空下干燥。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)苯基)乙酰胺(56mg，0.09mmol，9％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 555.23[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ(ppm)10.99(s,1H),9.66(br t,J＝5.9Hz,1H),9.47(br s,1H),7.68(d,J＝7.7Hz,1H),7.51(t,J＝8.1Hz,1H),7.42(s,1H),7.36(d,J＝7.8Hz,1H),7.27–7.12(m,3H),5.11(br dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.56–4.21(m,6H),3.61–3.45(m,4H),3.10–2.83(m,3H),2.68–2.55(m,1H),2.44–2.30(m,1H),2.08–1.91(m,1H),1.90–1.60(m,5H),1.50–1.30(m,1H)。
实施例119
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)乙酰胺
A.2,2-二氟-2-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)乙酸乙酯。向2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸甲酯(2.0g，9.25mmol)在丙酮(25mL)中的搅拌溶液中添加4-(2-氯乙基)吗啉盐酸(2.23g，12.03mmol)、碳酸钾(3.83g27.77mmol)，并在55℃下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×20mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)乙酸乙酯(1.5g，4.55mmol，49％产率)，为棕色液体。LCMS(ESI)m/z 330.0[M+1]+。
B.2,2-二氟-2-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)乙酸乙酯(1.5g，4.55mmol)在甲醇/四氢呋喃/水混合物(20mL，1:1:1)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(382mg，9.11mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用10％硫酸氢钾水溶液(20mL)中和并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(吗啉代乙氧基)苯基)乙酸(600mg，1.99mmol，44％产率)，为棕色固体。LCMS(ESI)m/z 302.0[M+1]+。
C.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(2-吗啉代乙氧基)苯基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(3-(吗啉代乙氧基)苯基)乙酸(513mg，1.66mmol)和3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(500mg，1.66mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(643.8mg，4.98mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(946.4mg，2.49mmol)并在室温下搅拌4h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，浓缩并在真空下干燥。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40％乙腈通过Reveleris C-18反相柱纯化产物，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(吗啉代乙氧基)苯基)乙酰胺盐酸盐(40mg，0.07mmol，4.4％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 557.2[M+1]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.99(s,1H),10.17(br s,1H),9.66(br t,J＝6.1Hz,1H),7.68(d,J＝7.8Hz,1H),7.51(t,J＝8.1Hz,1H),7.42(s,1H),7.36(d,J＝7.8Hz,1H),7.25–7.15(m,3H),5.11(dd,J＝4.9,13.2Hz,1H),4.48–4.37(m,5H),4.28(d,J＝17.2Hz,1H),3.98(br d,J＝12.2Hz,2H),3.73(br t,J＝11.7Hz,2H),3.64–3.49(m,5H),3.48–3.22(m,2H),2.98–2.84(m,1H),2.68–2.56(m,1H),2.45–2.31(m,1H),2.05–1.95(m,1H)。
实施例120
2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺
A.2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙酸乙酯。在室温下向4,4-二氟哌啶·盐酸盐(2g，12.048mmol)在四氢呋喃(45mL)中的搅拌溶液中添加2-溴乙酸乙酯(2.83g，18.07mmol)、三乙胺(6.51mL，48.19mmol)，接着添加四丁基碘化铵(2.2g，6.024mmol)，并将其在相同温度下搅拌16h。将反应物用冰水淬灭并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙酸乙酯(1.5g，7.2mmol，60％产率)，为无色液体。GCMS(ESI)m/z 207[M]+。
B.2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙醇：在0℃下向2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙酸乙酯(2g，9.66mmol)在四氢呋喃(15mL)中的搅拌溶液中添加氢化铝锂(9.6mL，19.32mmol)并在室温下搅拌3h。将反应混合物冷却至0℃，用硅藻土/硫酸钠·水合物(4:1)淬灭并在室温下搅拌1h。将白色浆料通过硅藻土垫过滤并用二氯甲烷(60mL)彻底洗涤。将滤液经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙醇(1g，6.06mmol，62％产率)，为无色液体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.45(bs,1H),3.50(t,J＝5.6Hz,2H),2.54-2.43(m,6H),2.00–1.87(m,4H)。
C.甲磺酸2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙酯。在0℃下向2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙醇(1g，4.8mmol)在四氢呋喃中的溶液中添加甲磺酰氯(0.706mL)并在室温下搅拌1h。将反应混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到甲磺酸2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙酯(800mg，3.27mmol，54％产率)，为无色液体。将粗化合物不经进一步纯化用于下一步。
D.叔丁基(3-碘苯氧基)二甲基硅烷。在0℃下向3-碘苯酚(5g，22.7mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加叔丁基二甲基氯硅烷(8.2mL，27.24mmol)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物倒入冰水(15mL)中并用乙酸乙酯(2×10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到叔丁基(3-碘苯氧基)二甲基硅烷(10g，17.96mmol，80％产率)，为半固体化合物，其不经进一步纯化带到下一步。
E.2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯。在室温下向叔丁基(3-碘苯氧基)二甲基硅烷(10g，22.33mmol)在二甲基亚砜(75mL)中的搅拌溶液中添加铜粉(3.5g，55.82mmol)，接着添加2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(4.3mL 33.49mmol)，并在55℃下搅拌16h。将反应混合物倒入水(20mL)中并通过硅藻土垫过滤。将滤液用乙酸乙酯(3×30mL)萃取并将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯(3.5g，16.20mmol，54％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 215.34[M-1]+。
F.2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯。在室温下向2,2-二氟-2-(3-羟苯基)乙酸乙酯(700mg，2.86mmol)在甲苯(20mL)中的搅拌溶液中添加甲磺酸2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙酯(619mg，2.86mmol)，接着添加碳酸钾(1.59g，11.47mmol)、四丁基碘化铵(30mg)，并将其在110℃下搅拌16h。将反应混合物倒入冰水中并用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(600mg，1.65mmol，60％产率)，为无色液体。MS(ESI)m/z 364.14[M+1]+。
G.2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸。向2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸乙酯(1g，2.75mmol)在四氢呋喃:甲醇:水(15mL，1:1:1)中的搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(348mg，8.26mmol)并在室温下搅拌3h。在减压下除去挥发物，将获得的粗品溶于水(15mL)并用乙酸乙酯(2×10mL)洗涤。将水层用1N盐酸溶液酸化并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(800mg，2.38mmol，86％产率)，为半固体化合物。MS(ESI)m/z 334.04[M]+。
H.2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺。向3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(276mg，0.895mmol)和2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-2,2-二氟乙酸(300mg，0.895mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加N,N-二异丙基乙胺(0.3mL，1.79mmol)，接着添加1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(408mg，1.074mmol)，并在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(2×40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。将粗化合物通过Reveleris C-18反相柱(60％乙腈/0.1％甲酸水溶液)纯化，得到2-(3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)苯基)-N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟乙酰胺(45mg，0.076mmol，8％产率)为灰白色固体。MS(ESI)m/z591.17。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.61(t,J＝5.6Hz,1H),7.67(d,J＝8.0Hz,1H),7.44(dd,J＝8.0,7.6Hz,1H),7.40(s,1H),7.36(d,J＝7.6Hz,1H),7.16–7.11(m,3H),5.10(dd,J＝13.2,5.6Hz,1H),4.45(d,J＝6.0Hz,2H),4.42(d,J＝17.8Hz,1H),4.28(d,J＝17.2Hz,1H),4.09(t,J＝5.6Hz,2H),2.95–2.87(m,1H),2.78(t,J＝5.6Hz,2H),2.65–2.59(m,5H),2.45–2.35(m,1H),2.03–1.88(m,5H)。
实施例121
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺
A.4,5-二氯-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮。向4,5-二氯哒嗪-3-醇(20g，0.121mol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的搅拌溶液中添加碳酸钾(42g，0.303mol)，接着添加甲基碘(18.9g，0.133mol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物过滤，向滤液中添加水(100mL)并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的10-20％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到4,5-二氯-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮(15g，0.0837mol，69％产率)。MS(ESI)m/z 179.03[M+1]+。
B.5-碘-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮。向4,5-二氯-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮(15g，83.79mmol)中添加47％的氢碘酸水溶液(185mL)并在140℃下搅拌24h。向此反应混合物中添加饱和硫代硫酸钠水溶液并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(2×50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的30-40％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到5-碘-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮(8.5g，36.016mmol，43％产率)。MS(ESI)m/z 237.22[M+1]+。
C.2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯。在10℃下向氢化钠(2.07g，86.44mmol)在1,4-二噁烷(85mL)中的悬浮液中滴加丙二酸叔丁酯乙酯(7g，37.45mmol)，并伴随搅拌经1h将其升至25℃。然后在25℃下分批添加5-碘-2-甲基哒嗪-3(2H)-酮(8.5g，36.016mmol)并回流2h。将反应混合物用冰冷水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×100mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的20-30％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(7g，23.64mmol，65％产率)。MS(ESI)m/z 296.97[M+1]+。
D.2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯。在0℃下向2-(6-氯哒嗪-3-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(7g，23.64mmol)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中添加氢化钠(1.2g，25.77mmol)。将反应物搅拌15分钟。在0℃下经10分钟的时段滴加SelectFluor(9.12g，25.77mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(无水20mL)中的混浊溶液，并将其在室温下搅拌2h。将反应物用氯化铵(50mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×70mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的25-35％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(5g，15.92mmol，67％产率)。LCMS(ESI)m/z 315.40[M+1]+。
E.2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸乙酯。在室温下将2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)丙二酸1-叔丁酯3-乙酯(5g，15.92mmol)在25mL三氟乙酸/二氯甲烷(1:1)中的溶液搅拌4h。向此反应混合物中添加饱和碳酸氢钠水溶液并用乙酸乙酯(3×70mL)萃取。将合并的有机层用水(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的25-35％乙酸乙酯通过柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸乙酯(3g，32.71mmol，88％产率)。LCMS(ESI)m/z 215.13[M+1]+。
F.2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸乙酯。在-78℃下经10分钟的时段向2-氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸乙酯(3g，32.71mmol)在无水四氢呋喃(30mL)中的溶液中滴加六甲基二甲硅烷基叠氮化锂(16.8mL，39.25mmol)。在相同温度下搅拌15分钟后，经10分钟的时段滴加SelectFluor(5.9g，16.8mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的溶液。添加完成后，伴随搅拌将反应物升至室温达30分钟，并用饱和氯化铵(50mL)淬灭。旋转蒸发器蒸发有机级分后，将反应混合物用冰冷水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(5×50mL)萃取。将合并的有机层用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用己烷中的20-30％乙酸乙酯通过CombiFlash柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化所得残余物，得到2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸乙酯(1.2g，5.17mmol，36％产率)。LCMS(ESI)m/z 233.39[M+1]+。
G.2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸。在5℃下向2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸乙酯(1.2g，5.17mmol)在1,4-二噁烷(36mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加3N盐酸水溶液(24mL)，并在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸(700mg，3.43mmol，66％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 205.02[M+1]+。
H.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺。向2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酸(197.6mg，0.968mmol)在吡啶中的冷(0℃)搅拌溶液中滴加磷酰氯(0.27mL，2.906mmol)，并在0-5℃下搅拌1h。然后向此反应混合物中添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(300mg，0.968mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物用饱和碳酸氢钠水溶液中和(直到pH-8)并用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。将合并的有机层用水(2×10mL)、盐水(10mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。使用甲酸水溶液(0.1％)中的40-60％乙腈将所得残余物通过Reveleris C-18反相柱色谱法纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(1-甲基-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-4-基)乙酰胺(70mg，0.152mmol，15％产率)，为灰白色固体。MS(ESI)m/z 459.16[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δppm 10.98(s,1H)9.80(br t,J＝5.66Hz,1H)8.06(d,J＝2.19Hz,1H)7.70(d,J＝7.68Hz,1H)7.47(s,1H)7.40(d,J＝8.04Hz,1H)7.15(s,1H)5.11(dd,J＝13.16,5.12Hz,1H)4.55–4.23(m,4H)3.69(s,1H)3.01–2.82(m,1H)2.68-2.45(m,1H)2.46–2.31(m,1H)2.06–1.93(m,1H)。
实施例121
N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酰胺
A.2-(3-溴苯基)乙酸甲酯。在0℃下向2-(3-溴苯基)乙酸(25g，116.27mmol)在二氯甲烷(60mL)中的溶液中添加草酰氯(20mL，232.25mmol)，接着添加N,N-二甲基甲酰胺(1mL)，并在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩，向此所得残余物中添加甲醇(250mL)并在室温下搅拌1h。将反应物料浓缩，将所得残余物用饱和碳酸氢钠水溶液(250mL)淬灭并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用水(2×100mL)、盐水(200mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2-(3-溴苯基)乙酸甲酯(20g，87.71mmol，76％产率)为无色液体。LCMS(ESI)m/z 270.29[M+42]+。(ACN加合物)。
B.2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸乙酯。向2-(3-溴苯基)乙酸甲酯(20g，87.71mmol)在甲苯(250mL)中的脱气溶液中添加1-甲基哌嗪(10.52g，105.52mmol)、碳酸铯(40g，122.79mmol)并脱气30分钟。然后向此反应混合物中添加2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(818mg，1.31mmol)、乙酸钯(II)(590mg，0.877mmol)，并在110℃下搅拌16h。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，将滤液浓缩，用水(300mL)稀释并用乙酸乙酯(3×200mL)萃取。将合并的有机层用水(200mL)和盐水(150mL)洗涤，经硫酸钠干燥，将有机层在减压下浓缩，得到粗残余物，使用二氯甲烷中的21-24％甲醇将其通过CombiFlash柱色谱法(100-200二氧化硅)纯化，得到2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸乙酯(4.0g，16.12mmol，19％产率)，为棕色固体。LCMS(ESI)m/z249.26[M+1]+。
C.2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸乙酯。在-78℃下向2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸乙酯(4g，16.12mmol)在无水四氢呋喃(80mL)中的溶液中滴加六甲基二硅酰胺锂(1M，于四氢呋喃中)(24mL，24.18mmol)并搅拌15分钟。经10分钟的时段向此中滴加N-氟代二苯磺酰亚胺(7.6g，24.18mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的溶液。添加完成后，经30分钟的时段将反应物升至室温，并在室温下搅拌1h。将反应物用饱和氯化铵(50mL)淬灭，用冰冷水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸乙酯(2.2g，8.87mmol)，为浅棕色固体。LCMS(ESI)m/z285.40[M+1]+。
D.2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸。向2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸乙酯(2.0g，7.04mmol)在四氢呋喃:甲醇:水混合物(1:1:1，30mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加一水合氢氧化锂(504mg，21.12mmol)并在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩，将残余物用水(50mL)稀释并用乙醚(2×50mL)洗涤。将水层用10％硫酸氢钾水溶液(15mL)中和并放置冷冻干燥，得到2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸(1.2g，4.44mmol)。LCMS(ESI)m/z270.11[M+1]+。
E.N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酰胺。在0-5℃下向2,2-二氟-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)乙酸(524mg，1.94mmol)在吡啶(10mL)中的冷(0℃)搅拌溶液中添加磷酰氯(0.45mL，4.83mmol)，并在相同温度下搅拌1h。然后添加3-(5-(氨甲基)-1-氧代异吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮盐酸盐(500mg，1.61mmol)并在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩。将所得残余物通过PREP-HPLC((Atlantis-T3柱)，使用乙腈-水中0.1％的碳酸氢铵)纯化。冷冻干燥后，LCMS指示观察到84％的所需m/z、16％的开环m/z，使用二氯甲烷中的6-7％甲醇通过CombiFlash柱色谱法将其进一步纯化，得到N-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚啉-5-基)甲基)-2,2-二氟-2-(3-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯基)乙酰胺(35mg，0.067mmol，4％产率)，为灰白色固体。LCMS(ESI)m/z 526.39[M+1]+。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ＝11.00(s,1H),9.59(br t,J＝6.1Hz,1H),7.67(d,J＝7.7Hz,1H),7.45–7.29(m,3H),7.11(br d,J＝8.4Hz,1H),7.04(s,1H),6.97(br d,J＝7.7Hz,1H),5.11(br dd,J＝5.1,13.2Hz,1H),4.53–4.34(m,3H),4.33–4.21(m,1H),3.42-3.26(m,4H),3.14(br s,4H),3.00–2.84(m,1H),2.66–2.66(m,1H),2.42–2.33(br dd,J＝4.2,13.0Hz,1H),2.27(br s,3H),2.06–1.92(m,1H)。
实施例123
测试化合物对KG-1细胞增殖的作用
在处理后72小时，评价测试化合物对KG-1细胞系(美国典型培养物保藏中心[ATCC]：目录号CCL-246TM)的抗增殖活性。优化对KG-1的接种密度以确保384孔板中的测定线性度。
经由声学分配器(EDC ATS-100)将增加浓度的测试化合物(0.5nM至10μM)以10点连续稀释方式(3倍稀释)一式两份点样到空384孔板当中。对于0.1％DMSO的最终测定浓度，保持二甲基亚砜(DMSO)浓度恒定。在测试之前，将KG-1细胞在具有10％FBS(胎牛血清：HyClone)的RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute-1640)培养基中生长，并在培养瓶中扩增以提供足够量的起始材料。然后将细胞以50μL体积稀释至每孔5000个细胞，并直接添加到化合物点样的384孔板中。使细胞在37℃下在5％CO2中生长72小时。在当细胞暴露于化合物开始之时(t0)，通过定量由存活细胞中存在的腺苷-5'-三磷酸(ATP)产生的发光水平，根据制造商的说明书(Promega Corporation，Madison，WI)以1体积:2体积比例经由细胞滴定-发光细胞活力测定法评估初始存活细胞数目。72小时后，经由细胞滴定评估经t处理的细胞的细胞活力并读取发光。表1中提供了示例性化合物的IC50值。
在表1中，提供的IC50值如下：
A：<0.01 M；B：0.01至0.05M；C：>0.05M至0.1 M；和D：>0.1 M至10 M。
表1
上述实施方案旨在仅为示例性的，本领域技术人员将会认识到或者能够仅采用常规的实验确定出具体化合物、材料和程序的多种等效方案。所有这类等效方案被视为属于本发明的范围内，并且被所附权利要求所涵盖。
本发明的化合物用于医学。
本发明的化合物用于本文提供的治疗方法。