本发明涉及杂环炔烃及其作为mglur5受体活性的别构调节剂的用途、包括这样的化合物的药物组合物及用其治疗的方法。本发明的化合物可以用于治疗和/或预防与谷氨酸功能障碍相关的神经的和精神的病症，如精神分裂症或认知减退，痴呆或认知损害，或可以直接地或间接地与谷氨酸功能障碍有关的其它病理学。
背景技术：
谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中的主要的兴奋性氨基酸。由谷氨酸介导的神经传递已经被证明在许多生理过程中是关键的，如突触可塑性、涉及学习和记忆以及感官知觉的长时程增强(riedeletal.,behav.brainres.,(2003),vol.140,pp.1-47,综述)。此外，已经证明谷氨酸神经传递的不平衡在各种神经的和精神的疾病的病理生理学中起关键作用。
谷氨酸的兴奋性神经传递通过至少两种不同类型的受体被介导：离子型谷氨酸受体，如n-甲基-d-天冬氨酸受体(nmda)、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸受体(ampa)或红藻氨酸；和代谢型谷氨酸受体(mglur)。离子型受体是配体门控性离子通道，并且被认为负责调节两个神经元之间的快速神经元传递。代谢性谷氨酸受体是g蛋白偶联受体(gpcr)，其似乎不仅介导突触传递，而且调节神经递质释放的程度以及突触后受体激活。
谷氨酸能神经传递中的调节异常，例如通过改变的谷氨酸释放或突触后受体激活，已经在各种神经的和精神的病症中被证明。nmda受体的机能减退不仅在阿尔茨海默病的患者中被证明，而且越来越多地被认为是精神分裂症的推定原因(farberetal.,prog.brainres.,(1998),vol.116,pp.421-437；coyleetal.,cell.andmol.neurobiol.,(2006),vol.26,pp.365-384)。这一点得到了临床研究的支持，临床研究显示nmda受体的拮抗剂诱导与精神分裂症患者所遭受的症状不能区分的症状(javittetal.,amj.psychiatry,(1991),vol.148,pp.1301-1308；meltzerhy,biol.psychiatry,(1999),vol.46(10),pp.1321-1327)。因此，可以增强或正常化nmda受体信号传导的方法具有治疗神经的和精神的病症的潜力。mglur5，一种由grm5基因编码的g蛋白偶联受体，属于目前八种被鉴定的iii型gpcr的超家族，其特征在于谷氨酸配体结合到大细胞外氨基末端蛋白质结构域。
基于氨基酸同源性以及它们调节的细胞内信号级联放大(schoeppetal.,neuropharma,(1999),vol.38,pp.1431-1476)和药理学外形，该超家族被进一步分为三组(i组、ii组和iii组)。mglur5属于i组，并且被偶联到调节细胞内钙动员的磷脂酶c信号级联放大。
在中枢神经系统(cns)中，mglur5已经被证明主要在皮质、海马体、伏隔核和尾状核壳中被表达。已知这些脑区涉及记忆形成和认知功能以及情绪反应。mglur5已经显示在突触后被局部化，与突触后致密物质相邻(lujanetal.,eur.j.neurosci.(1996),vol.8,pp.1488-1500)。mglur5和nmda受体之间的功能相互作用也已经被证明，其中mglur5的激活增强了nmda受体的激活状态(mannaionietal.,neurosci.,(2001),vol.21,pp.5925-5924；rosenbrocketal.,eur.j.pharma.,(2010),vol.639,pp.40-46)。此外，mglur5的激活已经在临床前体内模型中被证明，以挽救认知损害以及由nmda受体拮抗剂诱导的的精神紊乱(chanetal.,psychopharma.(2008),vol.198,pp.141-148)。因此，mglur5的激活，以及由此的nmda受体信号传导的增强或正常化，是治疗精神的和神经的病症的潜在机制。
mglur5的大多数激动剂结合正构谷氨酸结合位点。由于mglur家族成员之间的谷氨酸结合位点是高度保守的，因此开发具有可接受的cns渗透的选择性mglur5激动剂并且证明体内活性一直是具有挑战性的。
实现mglur家族成员之间的选择性的可替代的方法是开发结合到别构位点的化合物，其在家族成员之间不是高度保守的。这些别构结合化合物不会干扰天然谷氨酸结合和信号传导，但是调节受体激活状态。不存在正构配体时，具有激动活性或反向激动活性的别构配体分别被称为别构激动剂或拮抗剂。不存在正构配体时，没有作用的别构配体被称为调节剂(负向或正向)。
mglur5的正向别构调节剂最近已经被鉴定(o'brienetal.,mol.pharma.(2003),vol.64,pp.731-740；lindsleyetal.,j.med.chem.(2004),vol.47,pp.5825-5828)，其中已经确定这些化合物在结合型谷氨酸存在下增强mglur5活性。不存在结合型谷氨酸时，mglur5正向调节剂不展示任何内在活性。
因此，这些化合物增强mglur5的天然信号传导，而与以永久、非天然的方式激活受体的激动剂截然相反。因此，mglur5正向别构调节剂代表一种增强mglur5信号传导的方法，其依次增强和正常化在神经的和精神的病症中检测到的nmda受体机能减退。mglur5负向别构调节剂对于减弱mglur5信号传导是有用的，其依次降低和正常化在一些神经的、精神的病症中和更一般的cns病症中检测到的nmda受体机能亢进。这两种类型的别构调节剂也可以与一些罕见疾病有关，例如，没有任何限制，脆性x染色体综合征、雷特(rett)综合征、费伦-麦克德米德(phelan-mcdermid)综合症或结节状硬化症。
技术实现要素：
本发明提供具有通式i的化合物：
或其对映异构体、非对映体、n-氧化物或药学上可接受的盐，其中：
r1是烷基基团，可选地被取代的含有1至5个选自n、o和s的杂原子的单环-、双环-或三环c1-c13杂环基团；可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，可选地被取代的c3-c6环烷基基团，可选地被取代的c3-c6环烯基基团；或可选地被一个或更多个r2基团或取代基取代的键、co、cs、ch、ch2、so2基团；
r2不存在或者是可选地被取代的含有从1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的单环或双环c1-c9杂环基团，可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，或者可选地被取代的选自烷基、环烷基、烷氧基、环烷氧基、芳氧基、环烷基、环烷氧基、杂芳氧基、烷基硫代、氨基、n-烷基氨基、n,n-二烷基氨基、n-烷基-n-烷氧基氨基或n-烷基-n-烷氧基氨基的基团；
r3是可选地被取代的烷基基团，可选地被取代的含有1至5个选自n、o和s的杂原子的单环-、双环-或三环c1-c13杂环基团，可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，可选地被取代的c3-c6环烷基基团，或可选地被取代的c3-c6环烯基基团；并且
n是1-3。
可选的取代基独立地选自卤素原子和c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羟基、巯基、硝基、氰基、桥氧基、卤代(c1-c6)烷基、卤代(c1-c6)烷氧基、c1-c6烷基硫代、c1-c6烷基磺酰基、c1-c6烷基羰基、氨磺酰基、c1-c6烷基氨磺酰基、二(c1-c6)烷基氨磺酰基、(c1-c6)烷氧基羰基和(c1-c6)烷基羰基(c1-c6)烷基基团，以及选自式-nr*r*、-c(＝o)-nr*r*、-a、-o-a、-c(＝o)-a、-(ch2)q-a、-nr**-a、-c(＝o)-nr**-a、-nr**c(＝o)-a和-o-c(＝o)-a的基团，其中每一个r*独立地代表氢原子或c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6烷基羰基、苯基或苄基基团，r**代表氢原子或c1-c6烷基，q是从1至6的整数并且a代表苯基基团或含有从1至3个选自n、o和s的杂原子的c1-c8杂环基团；c1-c6环烷基基团；每一个基团a可选地以从1至3个独立地选自卤代、羟基、氰基、硝基和c1-c6烷基的基团被取代，优选地其中可选的取代基选自由卤素原子和c1-c6烷基基团组成的组。
根据本发明的最优选的化合物是其中r1代表co基团并且n是1的化合物。
在本发明的一个实施方案中，r2优选地是可选地被取代的含有从1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的单环-或双环c1-c9杂环基团，或可选地被取代的选自环烷基、烷氧基、环烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、氨基、n-烷基氨基、n,n-二烷基氨基或n-烷基-n-烷氧基的基团。
例如，当r2代表可选地被取代的含有从1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的单环-或双环c1-c9杂环基团时，r2优选地是2-呋喃基、5-甲基-2-呋喃基、3-呋喃基、4-吗啉基、4-四氢吡喃基、哌啶基、1-甲基-4-哌啶基、4-甲基哌嗪基、3-(1,5-二甲基)吡唑基、3-吡啶基氨基、吡咯烷基或4-噻唑基基团。
例如，当r2代表可选地被取代的环烷基基团时，r2优选地是环戊基或4-(1,1-二氟环己基)基团。
例如，当r2代表可选地被取代的烷氧基基团时，r2优选地是乙氧基、异丙氧基、2,2-二甲基丙氧基、叔丁氧基或3-甲基丁氧基基团。
例如，当r2代表可选地被取代的环烷氧基基团时，r2优选地是环丙基甲氧基或环戊氧基基团。
例如，当r2代表可选地被取代的杂芳氧基基团时，r2优选地是4-四氢吡喃基氧基基团。
例如，当r2代表可选地被取代的氨基基团时，r2优选地是异丙基氨基、2,2-二甲基丙基氨基、叔丁基氨基、3-戊基氨基环戊基氨基或3-吡啶基氨基基团。
例如，当r2代表可选地被取代的n-烷基氨基、n,n-二烷基氨基或n-烷基-n-烷氧基氨基基团时，r2优选地是n,n-二甲基、n,n-二乙基、n-乙基-n-异丙基、n-甲氧基-n-甲基或n-(2-甲氧基乙基)-n-甲基基团。
在本发明的替代实施方案中，r2优选地代表具有下式的基团：
-or4
其中r4是c1-c10直链或支链烷基基团、c1-c10环烷基基团或含有至少一个选自n或o的杂原子的c1-c10杂环基团。
例如，当r4是c1-c10直链或支链烷基基团时，r4优选地是乙基、异丙基、2,2-二甲基丙基、叔丁基或3-甲基丁基基团，使得r2优选地是乙氧基、异丙氧基、2,2-二甲基丙氧基，叔丁氧基或3-甲基丁氧基基团。
例如，当r4是c1-c10环烷基基团时，r4优选地是环丙基甲基或环戊基基团，使得r2优选地是环丙基甲氧基或环戊氧基基团。
例如，当r4是含有至少一个选自n或o的杂原子的c1-c10杂环基团时，r4优选地是4-四氢吡喃基基团，使得r2是4-四氢吡喃基氧基基团。
在本发明的替代实施方案中，r2优选地是饱和的或不饱和的可选地被取代的五元或六元的同素环基团或杂环基团，所述杂环基团含有至少一个选自n或o的杂原子。
例如，当r2是可选地被取代的五元同素环基团时，r2优选地是环戊基基团。当r2是可选地被取代的六元同素环基团时，r2优选地是4-(1,1-二氟环己基)基团。
例如，当r2是可选地被取代的含有至少一个选自n或o的杂原子的五元杂环基基团时，r2优选地是2-呋喃基、5-甲基-2-呋喃基、3-呋喃基、3-(1,5-二甲基)吡唑基、吡咯烷基或4-噻唑基基团。当r2是可选地被取代的含有至少一个选自n或o的杂原子的五元杂环基基团时，r2优选地是4-吗啉基、4-四氢吡喃基、哌啶基、1-甲基-4-哌啶基、4-甲基哌嗪基或3-吡啶基氨基基团。
在本发明的替代实施方案中，r2优选地代表具有下式的基团：
-nr5r6
其中r5是c1-c10直链或支链烷基或烷氧基基团或氢；r6是c1-c10直链或支链烷基或烷氧基基团，r5和r6相同或不同；或其中r5和r10与氮原子一起形成五或六元杂环。
例如，当r5或r6是c1-c10直链或支链烷基基团时，r5或r6优选地是甲基、乙基、异丙基、2,2-二甲基丙基、叔丁基或3-戊基基团，并且r2优选地是n,n-二甲基、n,n-二乙基、n-乙基-n-异丙基、异丙基氨基、叔丁基氨基、3-戊基氨基或2,2-二甲基丙基氨基基团。
例如，当r5或r6是c1-c10直链或支链烷氧基基团时，r5或r6优选地是甲氧基或2-甲氧基乙基基团，并且r2优选地是n-甲氧基-n-甲基或n-(2-甲氧基乙基)-n-甲基基团。
例如，当r5和r6与氮原子一起形成五元或六元杂环时，r2优选地是4-甲基哌嗪基、4-吗啉基、哌啶基或吡咯烷基基团。
在本发明的一个实施方案中，r3优选地是可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，可选地被取代的含有至少一个选自n或o的杂原子的五元或六元杂环基团，可选地被取代的c3-c6环烷基基团，或可选地被取代的c3-c6环烯基基团。例如，当r3是可选地被取代的单环-、二环-或三环c6-c14芳基基团时，r3优选地是苯基基团。当r3是可选地被取代的含有至少一个选自n或o的杂原子的五元或六元杂环基团时，r3优选地是吡啶基基团。
在本发明的替代实施方案中，r3最优选地是可选地被取代的苯基或吡啶基基团，所述可选的取代基选自c1-c10烷基基团或卤代基团。例如，r3代表苯基、3-甲基苯基、3-溴苯基、3-氯苯基、3-氟苯基或6-甲基-2-吡啶基基团。
在本发明的替代实施方案中，r1代表可选地被取代的co基团，r2不存在，r3代表苯基、3-溴苯基、3-氯苯基、3-氟苯基、3-甲苯基或6-甲基-2-吡啶基基团，并且n是1。
在本发明的一个高度优选的实施方案中，r1代表co基团，r2代表4-吗啉基基团，r3代表3-氯苯基、3-氟苯基或3-甲苯基基团，并且n是1。
在本发明的进一步高度优选的实施方案中，r1代表co基团，r2代表2,2-二甲基丙氧基、叔丁基氨基、3-甲基丁氧基或环戊基氨基基团，r3代表3-氯苯基基团，并且n是1。
在本发明的一个实施方案中，根据通式i提供了化合物或对映异构体、非对映体、n-氧化物或药学上可接受的盐，通式i选自：
在本发明的进一步实施方案中，优选地提供了包括式i的化合物的药物组合物，
或其对映异构体、非对映体、n-氧化物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体，其中r1是烷基基团，可选地被取代的含有1至5个选自n、o和s的杂原子的单环-、双环-或三环c1-c13杂环基团；可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，可选地被取代的c3-c6环烷基基团或可选地被取代的c3-c6环烯基基团；或可选地被一个或更多个r2基团或取代基取代的键、co、cs、ch、ch2、so2基团；r2不存在或者是可选地被取代的含有从1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的单环或双环c1-c9杂环基团，可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，或者可选地被取代的选自烷基、环烷基、烷氧基、环烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、烷基硫代、氨基、n-烷基氨基、n,n-二烷基氨基或n-烷基-n-烷氧基氨基的基团；r3是可选地被取代的烷基基团，可选地被取代的含有1至5个选自n、o和s的杂原子的单环-、双环-或三环c1-c13杂环基团；可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，可选地被取代的c3-c6环烷基基团，或可选地被取代的c3-c6环烯基基团；并且
n是1-3。
在本发明的另一个实施方案中，式i的化合物，
或其对映异构体、非对映体、n-氧化物或其药学上可接受的盐，用于在对其有需要的患者中治疗和/或预防与谷氨酸机能障碍相关的神经病症、精神病性病症或精神病症，其中r1是烷基基团，可选地被取代的含有1至5个选自n、o和s的杂原子的单环-、双环-或三环c1-c13杂环基团；可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，可选地被取代的c3-c6环烷基基团或可选地被取代的c3-c6环烯基基团；或可选地被一个或更多个r2基团或取代基取代的键、co、cs、ch、ch2、so2基团；r2不存在或者是可选地被取代的含有从1至3个选自氮、氧和硫的杂原子的单环或双环c1-c9杂环基团，可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，或者可选地被取代的选自烷基、环烷基、烷氧基、环烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、烷基硫代、氨基、n-烷基氨基、n,n-二烷基氨基或n-烷基-n-烷氧基氨基的基团；r3是可选地被取代的烷基基团，可选地被取代的含有1至5个选自n、o和s的杂原子的单环-、双环-或三环c1-c13杂环基团；可选地被取代的单环-、双环-或三环c6-c14芳基基团，可选地被取代的c3-c6环烷基基团，或可选地被取代的c3-c6环烯基基团；并且n是1-3。
在本发明的一个实施方案中，根据式i的化合物被用于治疗和/或预防与谷氨酸功能障碍相关的神经病症、精神病性病症或精神病症。
优选地，与谷氨酸功能障碍相关的神经病症、精神病性病症或精神病症是精神分裂症、分裂情感障碍、药物诱发型精神病性障碍、年龄相关的学习和记忆损害或损失、脑卒中后痴呆、集中力缺损(deficitsinconcentration)、轻度认知损害、阿尔茨海默病认知功能障碍、精神分裂症的认知功能障碍、认知减退、痴呆或认知损害。
更优选地，该病症是脆性x染色体综合征、雷特综合征、费伦-麦克德米德综合症或结节状硬化症。
使用的术语和定义
除非另有陈述，以下定义适用于本说明书和权利要求书全文。这些定义适用于无论是否术语被单独地使用或与其他术语组合使用。例如，定义“烷基”不仅适用于烷基基团本身还适用于烷氧基、烷基氨基、烷基硫代或烷基羰基基团等的烷基部分。此外，针对化学基团描述的所有范围，例如，“从1至13个碳原子”或“c1-c6烷基”包含其中碳原子的范围和具体个数的所有组合和亚组合。
“烷基”意为在链中具有从1至20个碳原子的直链或支链的脂肪族烃基团。优选的烷基基团在链中具有从1至12个碳原子。更优选的烷基基团在链中具有从1至6个碳原子。“低级烷基”意为在链中具有约1至6个碳原子的烷基基团，所述链可以是直链的或支链的。适合的烷基基团的实施例包含甲基、乙基、正丙基、异丙基、仲丁基、正丁基和叔丁基。
“烯基”意为具有至少一个碳碳双键并且在链中具有从2至15个碳原子的直链或支链脂肪族烃基团。优选的烯基基团在链中具有从2至12个碳原子。更优选的烯基基团在链中具有从2至6个碳原子。“低级烯基”意为在链中具有2至约6个碳原子的烯基基团，所述链可以是直链的或支链的。适合的烯基基团的实施例包含乙烯基、丙烯基、异丙烯基、正丁烯基、1-己烯基和3-甲基丁-2-烯基。
“炔基”意为具有至少一个碳碳三键并且在链中具有从2至15个碳原子的直链或支链脂肪族烃基团。优选的炔基基团在链中具有从2至12个碳原子。更优选的炔基基团在链中具有从2至6个碳原子。“低级炔基”意为在链中具有2至约6个碳原子的炔基基团，所述链可以是直链的或支链的。适合的炔基基团的实施例包含乙炔基、丙炔基和2-丁炔基。
“单环-、双环-或三环杂环”意为芳族的或非芳族的具有从2至14个环碳原子，并且含有从1至5个单独地或组合地选自n、o和s的环原子的饱和的单环、双环或三环的环体系。双环-和三环杂环基团在2个或4个点被稠合或者在一个点经由键或杂原子连接物(o、s、nh或n(c1-c6烷基))被联接。所述“单环-、双环-或三环杂环”可以通过用一个或更多个取代基代替在环上的可用氢原子而在环上可选地被取代，所述一个或更多个取代基可以是相同的或不同的。杂环的氮原子或硫原子可以可选地被氧化为相应的n-氧化物、s-氧化物或s-二氧化物。适合的杂环的实施例包含呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噁二唑基、噁唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、噻唑基、三唑基、四唑基、噻吩基、咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、异喹啉基、异吲哚基、吖啶基和苯并异噁唑基、吖丙啶基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、四氢苯硫基、吗啉基和硫代吗啉基。
具有芳香性特征的杂环可以被称为杂芳基或杂芳族。适合的杂芳族的实施例包含呋喃基、咪唑基、异噁唑基、噁二唑基、噁唑基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、噻唑基、三唑基、四唑基、噻吩基、咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、异喹啉基、异吲哚基、吖啶基、苯并异噁唑基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、3-苯基吡啶、3-环己基吡啶、3-(吡啶-3-基)吗啉、3-苯基异噁唑和2-(哌啶-1-基)嘧啶。
“单环-、双环-或三环芳基”意为芳族的单环、双环或三环的包括6至14个碳原子的环体系。双环-和三环芳基基团在2个或4个点被稠合或者在一个点经由键或杂原子连接物(o、s、nh或n(c1-c6烷基))被联接(例如联二苯、1-苯基萘基)。所述芳基基团可以在环上可选地用一个或更多个取代基取代，优选地1至6个取代基，所述取代基可以是相同的或不同的。适合的芳基基团的实施例包含苯基和萘基。
“环烷基”意为单环或双环碳环体系，所述碳环体系具有从3至14个碳原子，优选地从3至6个碳原子。环烷基可以通过用一个或更多个取代基代替在环上的可用氢原子而在环上可选地被取代，所述取代基可以是相同的或不同的。适合的单环环烷基的实施例包含环丙基、环戊基、环己基和环庚基。适合的多环环烷基的实施例包含1-十氢萘基、降冰片基和金刚烷基。
“环烯基”具有相应于环烷基的含义，除了在环内具有一个或两个双键(例如，环己烯基、环己二烯)。
“胺”是氨的衍生物，其中一个或更多个氢原子已经被取代基(如烷基或芳基基团)代替。这些可以分别称为烷基胺和芳基胺；其中两种类型的取代基都连接到一个氮原子的胺可以被称为烷基芳基胺。
胺可以被进一步地划分成四个子类。当氨中的三个氢原子中的一个被烷基或芳族基团代替(分别为n-烷基氨基或n-芳基氨基)时，伯胺产生。合适的伯烷基胺的实施例包含甲胺或乙醇胺，或作为芳族胺实施例的苯胺(aniline)(苯胺(phenylamine))。仲胺具有两个有机取代基(独立地烷基或芳基基团)，所述两个有机取代基与一个氢一起被结合至氮原子(或者如果一个取代基键是双键，则无氢)。合适的仲胺的实施例包含二甲胺和甲基乙醇胺，而芳族胺的实施例是二苯胺。根据取代基的种类，这样的化合物也可以被称为“n,n-二烷基氨基”、“n,n-二芳基氨基”或“n,n-烷基芳基氨基”基团。如本文中定义的，被烷氧基基团取代的仲胺将被称为例如“n-烷基-n-烷氧基氨基”化合物。在叔胺中，所有三个氢原子被有机取代基代替，如三甲胺。最后的子类是环胺，所述环胺是仲胺或叔胺。合适的环胺的实施例包含3-元环氮丙啶和六元环哌啶。n-甲基哌啶和n-苯基哌啶是环叔胺的合适的实施例。
“酰胺”是具有被连接至羰基基团的氮原子的化合物，因此具有结构r–co–nr’r”，基团r’和r”独立地选自如本文定义的烷基或芳族基团。例如，当r’是氢并且r”是3-吡啶基基团时，所得到的酰胺具有3-吡啶基氨基取代基。可替代地，当r’是氢并且r”是环戊基基团时，所得到的酰胺具有环戊基氨基取代基。
“卤素(halogen)”、“卤化物(halide)”或“卤(halo)”意为氟、氯、溴或碘。优选的卤素是氟、氯或溴，并且最优选的是氟和氯。
术语“酰基”，无论单独使用或在术语(比如“酰氨基”)之内使用，表示由在从有机酸移除羟基之后的剩余部分提供的根基。术语“酰氨基”是指被酰基基团取代的氨基根基。“酰氨基”根基的实施例为ch3c(＝o)-nh-，其中胺可以进一步被烷基、芳基或芳烷基基团取代。
在子式中可以使用星号来表示连接到如本文中定义的母体或核心分子的键。
立体化学
除非特别说明，在本说明书和权利要求书全文中，给定的化学式或名称应包括互变异构体和所有立体、光学和几何异构体(例如对映异构体、非对映体、e/z异构体等)及其外消旋体。这包含分离的对映异构体的不同比例的混合物，非对映体的混合物，或任何的其存在这样的异构体和对映体的前述形式的混合物，以及盐，所述盐包含药学上可接受的盐及其溶剂化物，如水合物、游离的化合物的溶剂化物或化合物的盐的溶剂化物。
本发明化合物的衍生物
本发明还包括式i的化合物的盐、溶剂化物、水合物、n-氧化物、前体药物和活性代谢物。
短语“药学上可接受的”在本文中被采用以指明那些在合理的医学判断范围内，适合用于接触没有过量的毒性、刺激、变态反应或其他问题或并发症的人和动物的组织，并且与合理的益处/风险比相当的化合物、材料、组合物和/或剂型。
如本文中使用的，“药学上可接受的盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸盐或碱盐被修饰。药学上可接受的盐的实施例包含但不限于碱性残基的无机盐或有机酸盐，如胺；酸性残基的碱金属盐或有机盐，如羧酸；等等。例如，这样的盐包含来自氨、l-精氨酸、甜菜碱、苯乙苄胺、苄星青霉素、氢氧化钙、胆碱、二甲基乙醇胺、二乙醇胺(2,2’-亚氨基双(乙醇))、二乙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、2-氨基乙醇、乙二胺、n-乙基-葡糖胺、哈胺、1h-咪唑、赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟乙基)-吡咯烷、氢氧化钠、三乙醇胺(2,2’,2”-次氮基三(乙醇))、氨丁三醇、氢氧化锌、乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、l-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、2,5-二羟基苯甲酸、4-乙酰氨基-苯甲酸、(+)-樟脑酸、(+)-樟脑-10-磺酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己氨磺酸、癸酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、乙二胺四乙酸、甲酸、富马酸、粘酸、龙胆酸、d-葡庚糖酸、d-葡萄糖酸、d-葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、2-桥氧基-戊二酸、甘油磷酸、甘氨酸、乙醇酸、己酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异丁酸、dl-乳酸、乳糖酸、月桂酸、赖氨酸、马来酸、(-)-l-苹果酸、丙二酸、dl-扁桃酸、甲磺酸、粘酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、辛酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸(双羟萘酸)、磷酸、丙酸、(-)-l-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-l-酒石酸、硫氰酸、p-甲苯磺酸和十一碳烯酸。进一步的药学上可接受的盐可以用来自金属(如铝、钙、锂、镁、钾、钠、锌等)的阳离子形成(参见pharmaceuticalsalts,berge,s.m.etal.,j.pharm.sci.,(1977),vol.66,pp.1-19)。
本发明的药学上可接受的盐可以通过常规化学方法由含有碱性部分或酸性部分的母体化合物被合成。通常，这样的盐可以通过使这些化合物的游离酸形式或碱形式与足够量的适当的碱或酸在水中或有机稀释剂(如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈或其混合物)中反应来制备。
除了上述那些以外，例如对于于提纯或分离本发明化合物(例如三氟乙酸盐)有用的的其他酸的盐也包括本发明的一部分。
典型地，式i的化合物的药学上可接受的盐通过视情况而使用期望的酸或碱可以容易地被制备。所述盐可以从溶液中沉淀，并且用过滤收集，或可以通过蒸发溶剂被回收。例如，酸的水溶液(如盐酸)可以被加入到式i的化合物的水悬浮液中并且所得到的混合物蒸发至干燥(冻干)以得到为固体的酸加成盐。可替换地，式i的化合物可以被溶解在适合的溶剂中，例如醇，如异丙醇，并且酸可以被加入到相同的溶剂或另一种适合的溶剂中。所得到的酸加成盐可以随后被直接沉淀或通过加入较小极性的溶剂(如二异丙醚或己烷)沉淀，并且通过过滤被分离。
式i化合物的酸加成盐可以以常规方式通过用足够量的期望的酸接触游离碱形式产生盐而被制备。游离碱形式可以通过用碱接触盐形式并且以常规方式分离游离碱被再生。游离碱形式在某些物理性质(如在极性溶剂中的溶解度)上稍微区别于其各自的盐形式，但是除此之外对于本发明的目的，盐等同于其各自游离碱。
也包含总盐和部分盐两者，也就是说每摩尔式i的酸具有1、2或3，优选2，当量的碱的盐，或者每摩尔式i的碱具有1、2或3当量，优选1当量，的酸的盐。
药学上可接受的碱加成盐用金属或胺类形成，如碱金属和碱土金属或有机胺。用作阳离子的金属的实施例为钠、钾、镁、钙等。适合的胺类的实施例为n,n’-二苯基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、二环己基胺、乙二胺、n-甲葡糖胺和普鲁卡因。
所述酸性化合物的碱加成盐通过用足够量的期望的碱接触游离酸形式产生盐而以常规的方式制备。游离酸形式可以通过用酸与盐形式接触并且分离游离酸而被再生。
本发明的化合物可以具有碱性中心和酸性中心两者，并且因此可以是两性离子或内盐的形式。
典型地，式i化合物的药学上可接受的盐可以通过视情况使用期望的酸或碱被容易地制备。所述盐可以从溶液中沉淀，并且通过过滤被收集，或者可以通过蒸发溶剂被回收。例如，酸的水溶液(如盐酸)可以被加入到式i的化合物的水悬浮液中并且所得到的混合物蒸发至干燥(冻干)以得到为固体的酸加成盐。可替换地，式i的化合物可以被溶解在适合的溶剂中，例如醇(如异丙醇)，并且酸可以被加入到相同的溶剂或另一种适合的溶剂中。所得到的酸加成盐可以随后被直接沉淀，或通过加入较小极性的溶剂(如二异丙醚或己烷)沉淀，并且通过过滤被分离。
有机化学领域的技术人员将理解很多有机化合物可以与它们在其中反应或它们从其中沉淀或结晶的溶剂形成复合物。这些复合物被称为“溶剂化物”。例如，与水的复合物被称为“水合物”。本发明的化合物的溶剂化物在本发明的范围之内。式i的化合物的盐可以形成溶剂化物(例如，水合物)，并且本发明也包含所有这样的溶剂化物。单词“溶剂化物”的含义对于本领域技术人员来说公知为通过溶剂和溶质的相互作用(即，溶剂化作用)形成的化合物。针对溶剂化物制备的技术在本领域被完善地建立(例如，参见brittain.polymorphisminpharmaceuticalsolids.marceldecker,newyork,1999)。
本发明还包括式i的化合物的n-氧化物。术语“n-氧化物”意为对于含有另外的未被取代sp2n原子的杂环化合物，n原子可以承载共价结合的o原子，即-n→o。这样的n-氧化物取代的杂环化合物的实施例包含吡啶基n-氧化物、嘧啶基n-氧化物、吡嗪基n-氧化物和吡唑基n-氧化物。
本发明还包括式i的化合物的前体药物，即当被施用于哺乳动物受试者时，在体内释放根据式i的活性母体药物的化合物。前体药物是药理学上活性化合物，或者更典型地，通过代谢转化被转变为药理学上活性剂的非活性化合物。式i的化合物的前体药物通过修饰存在于式i的化合物中的功能性基团而被制备，所述修饰通过这样的方式使修饰后的形式可以在体内切割以释放母体化合物。在体内，在生理条件下(例如，通过天然存在的一种或多种酶而起作用)，前体药物容易经历化学变化，导致药理学活性剂的释放。前体药物包含式i的化合物，其中式i的化合物的羟基、氨基或羧基被键合到可以在体内被切割以各自再生游离的羟基、氨基或羧基基团的任何基团。前体药物的实施例包含式i的化合物的酯(例如，醋酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物)或任何其他衍生物，所述衍生物一旦被带到生理ph或通过酶作用就被转化为活性母体药物。针对适合的前体药物衍生物的选择和制备的常规的程序在本领域已经被描述(参见，例如bundgaard.designofprodrugs.elsevier,1985)。
前体药物可以以与它们转变为的活性成分相同的方式被施用，或者它们可以以储库形式被递送，例如，透肤贴剂或适合于允许(通过供应酶或其他适合的试剂)前体药物随时间缓慢转化为活性成分并且递送活性成分至患者的其他储库。
本发明还包括代谢物。本文公开的化合物的“代谢物”是当所述化合物被新陈代谢时形成的该化合物的衍生物。术语“活性代谢物”是指当所述化合物被新陈代谢时形成的该化合物的生物学活性衍生物。术语“新陈代谢”是指在活体中一些过程的总合，通过这些过程，特定物质被改变。简言之，存在于身体内的所有化合物在身体之内被酶所操纵，以便获得能量和/或将它们从身体排出。特别的酶对化合物产生特别的结构改变。例如，细胞色素p450催化各种氧化和还原反应，而尿苷二磷酸葡糖醛酸基转移酶催化激活的葡糖醛酸分子转化为芳族醇、脂肪醇、羧酸、胺类和游离巯基基团。关于新陈代谢的进一步的信息可以从thepharmacologicalbasisoftherapeutics,9thedition,mcgraw-hill(1996),11-17页获得。
本文公开的化合物的代谢物可以或者通过将化合物施用于宿主并且分析来自宿主的组织样品，或者通过在体外用肝细胞孵育化合物并且分析所得到的化合物而被识别。两种方法在本领域公知。
术语“载体”是指稀释剂、赋形剂和/或活性化合物用其被施用的运载体(vehicle)。本发明的药物组合物可以含有多于一种载体的组合。这样的药物载体可以是无菌液体，如水、盐溶液、葡萄糖水溶液、甘油水溶液，以及油，所述油包含石油、动物、植物或合成来源的那些油，如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。水或水溶液盐水溶液和葡萄糖水溶液和甘油水溶液被优选地采用作为载体，特别是用于可注射的溶液。合适的药物载体由e.w.martin在第18版的“remington’spharmaceuticalsciences”中描述。
“药学上可接受的赋形剂”意为对于制备药物组合物有用的赋形剂，所述药物组合物通常是安全的、无毒的，并且无论是生物学上还是其他方面均符合期望的，并且“药学上可接受的赋形剂”包含适用于兽用用途以及人用药物用途的赋形剂。本申请中使用的“药学上可接受的赋形剂”包含一种和多于一种这样的赋形剂。
本发明的化合物可以以任何方便的方式被配制用于施用于人用或兽用药中，并且因此本发明在其范围内包含包括适用于人用或兽用药中的本发明的化合物的药物组合物。借助于一种或更多种合适的载体，这样的组合物可以以常规方式存在以便使用。针对治疗用途的可接受的载体在药物领域公知，并且被描述于，例如remington’spharmaceuticalsciences,mackpublishingco.(a.r.gennaro编，1985)中。药物载体的选择可以针对计划施用途径和标准制药实践被选择。除了载体之外，所述药物组合物可以包括任意适合的粘合剂、润滑剂、悬浮剂、涂覆剂和/或增溶剂作为载体。
包括式i的化合物的药物组合物
虽然化合物i可以作为原材料被施用是可能的，但优选的是其呈现为在药物制剂中的活性成分，例如，其中所述试剂在具有药学上可接受的载体的掺合物中，所述载体针对计划施用途径和标准制药实践被选择。
相应地，本发明进一步提供一种药物组合物，所述药物组合物包括与药学上可接受的载体掺合的式i的化合物，或其溶剂化物、水合物、对映异构体、非对映体、n-氧化物或药学上可接受的盐。术语“载体”是指稀释剂、赋形剂和/或活性化合物用其被施用的运载体(vehicle)。
式i的化合物可以与其他治疗方法和/或活性剂组合使用。相应地，在进一步的方面，本发明提供一种药物组合物，所述药物组合物包括式i的化合物或其溶剂化物、水合物、对映异构体、非对映体、n-氧化物或药学上可接受的盐，第二活性剂和药学上可接受的载体。
除了载体之外，所述药物组合物可以包括任意适合的粘合剂、润滑剂、悬浮剂、涂覆剂和/或增溶剂作为载体。
防腐剂、安定剂、染料和调味剂也可以在所述药物组合物中被提供。抗氧化剂和悬浮剂也可以被使用。
本发明的化合物可以使用已知的研磨程序(如湿磨法)被研磨以得到适合用于片剂构造和用于其他制剂类型的颗粒尺寸。本发明的化合物的精细磨碎(纳米颗粒)制备可以通过本领域已知的工艺被制备，例如，参见wo02/00196。
施用途径和单位剂量剂型
施用途径包含口服(例如，作为片剂、胶囊，或作为可摄取的溶液)、外用的、粘膜的(例如，作为鼻用喷雾或用于吸入的气溶胶)、鼻的、胃肠道外的(例如，通过注射形式)、胃肠的、脊柱内的、腹膜内的、肌肉的、静脉内的、子宫内的、眼内的、皮肤内的、颅内的、气管内的、阴道内的、脑室内的、大脑内的、皮下的、眼的(包含玻璃体内的或前房的)、透皮的、直肠的、颊含的、硬脑膜外的和舌下的。本发明的组合物可以针对那些施用途径的任一种而被特别地配制。在优选的实施方案中，本发明的药物组合物被配制为适合口服递送的形式。
取决于不同的递送系统，可以存在不同的组成/制剂要求。将被理解的是，不是所有的化合物都需要通过相同途径被施用。同样地，如果组合物包括多于一种活性组分，那么，那些组分可以通过不同的途径被施用。例如，本发明的药物组合物可以被配制为使用微型泵或通过粘膜途径而被递送(例如，作为鼻用喷雾或用于吸入的气溶胶或可摄取的溶液)，或者胃肠道外地被递送，其中所述组合物被配制为可注射的形式用于递送(例如，通过静脉内的、肌肉的或皮下的途径)。可替代地，制剂可以被设计为通过多种途径递送。
在试剂要通过胃肠粘膜而被以粘膜方式递送的情况中，所述试剂应该能够在运输通过胃肠道期间保持稳定；例如，其应该耐受蛋白水解降解，在酸性ph稳定并且耐受胆汁的清洁效果。例如，式i的化合物可以用肠溶衣层包覆。肠溶衣层材料可以被分散或溶解在或者水中或者适合的有机溶剂中。可以单独地或组合地以下的一种或更多种作为肠溶衣层聚合物；例如，甲基丙烯酸共聚物，乙酸邻苯二甲酸纤维素、乙酸丁酸纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、聚乙烯基乙酸酯邻苯二甲酸酯、乙酸偏苯三酸纤维素、羧甲基乙基纤维素、虫胶或其他适合的一种或多种肠溶衣层聚合物的溶液或分散体。出于环保的理由，水性包衣工艺可以是优选的。在这样的水性工艺中，甲基丙烯酸共聚物是最优选的。
当适当时，药物组合物可以被施用，通过吸入，以栓剂或阴道栓的形式；通过外用，以洗剂、溶液、乳膏、油膏或撒粉的形式；通过使用皮肤贴剂；通过口服，以包含赋形剂(如淀粉或乳糖)的片剂的形式，或是或者单独的或者与赋形剂掺合的胶囊或的形式，或者以含有调味剂或着色剂的酏剂、溶液或悬浮液的形式；或者其可以被胃肠道外地注射，例如，静脉注射、肌内注射或皮下注射。对于口腔或舌下施用，组合物可以以片剂或锭剂的形式被施用，所述片剂或锭剂可以以常规的方式被配制。
当本发明的组合物要被胃肠道外地施用时，这样的施用包含一种或更多种的：静脉内、动脉内、腹腔内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内或皮下施用所述试剂；和/或通过使用输注技术。
本发明的药物组合物可以胃肠道外地施用，例如，通过输注或注射。适合用于注射或输注的药物组合物可以是以含有活性成分的无菌水溶液、分散体或无菌粉末的形式，如果必要，所述活性成分被调整用于制备这样的适用于输注或注射的无菌溶液或分散体。该制备物可以可选地被包封到脂质体中。在所有情况中，最终的制备物必须是无菌的，液体，并且在生产和储存条件下稳定。为了提高储存稳定性，这样的制备物也可以含有防腐剂以防止微生物生长。防止微生物作用可以通过加入各种抗菌剂和抗真菌剂获得，例如，对羟基苯甲酸酯(paraben)、氯丁醇或抗坏血酸。在很多情况中，等渗物质被推荐，例如，食糖、缓冲剂和氯化钠，以确保渗透压相似于体液(特别是血液)的渗透压。这样的可注射的混合物的延长的吸收可以通过引入吸收延迟剂获得，如单硬脂酸铝或明胶。
分散体可以被制备在液体载体或中间物中，如甘油、液体聚乙二醇、三醋汀油及其混合物。所述液体载体或中间物可以是溶剂或液体分散介质，例如所述溶剂或液体分散介质含有水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇等)、植物油、无毒的甘油酯及其适合的混合物。适合的流动性可以通过产生脂质体，在是分散体的情况中给予适合的颗粒尺寸，或通过加入表面活性剂而被维持。
对于胃肠道外施用，化合物最好以无菌水溶液的形式被使用，所述无菌水溶液可以含有其他物质，例如，足够的盐或葡萄糖以使所述溶液与血液等渗。如果必要，所述水溶液应该是适当地缓冲的(优选为从3至9的ph)。在无菌条件下制备适合的胃肠道外制剂对于本领域技术人员来说通过公知的标准制药技术可以被容易地完成。
无菌可注射的溶液可以通过将式i的化合物与适当的溶剂和一种或更多种的前述载体混合，接着是无菌过滤而被制备。在适合用于制备无菌可注射的溶液的无菌粉末的情况中，优选的制备方法包含在真空干燥和冻干，所述方法提供醛固酮受体拮抗剂和后续无菌溶液的制备所需的赋形剂的粉末状混合物。
根据本发明的化合物可以被配制为在通过注射(例如，通过静脉内推注射(intravenousbolusinjection)或输注或经由肌内、皮下或鞘内途径)的人用或兽用药中使用，并且可以以单位剂量剂型存在在安瓿或其他单位剂量容器中，或者在多剂量容器中，如果必要，伴随以额外的防腐剂。用于注射的组合物可以是以悬浮液、溶液或乳液的形式，在油性或水性运载体中，并且可以含有配制试剂，如悬浮剂、稳定剂、增溶剂和/或分散剂。可替代地，活性成分可以以无菌粉末的形式，在使用前与适合的运载体重构，例如，无菌无热原的水。
针对立即-、延迟-、缓释-、持久-、脉冲式-或受控释放应用，本发明的化合物可以以片剂、胶囊、卵泡、酏剂、溶液或悬浮液的形式被施用(例如，口服或外用)，所述形式可以含有调味剂或着色剂。
本发明的化合物也可以针对人用或兽用用途以适合用于口服施用或颊含施用的形式存在，例如以溶液、凝胶、糖浆、漱口水或悬浮液的形式，或者在使用前与水或其他适合的运载体进行构建的干燥粉末的形式，可选地伴随以调味剂和着色剂。固体组合物(如片剂、胶囊、锭剂(lozenges)、软锭剂(pastilles)、丸剂、大丸剂(boluses)、粉末、糊剂、颗粒剂、弹丸或预混合制备物)也可以被使用。用于口服使用的固体组合物和液体组合物可以根据本领域公知的方法而被制备。这样的组合物也可以含有一种或更多种药学上可接受的载体和赋形剂，所述载体和赋形剂可以是固体或液体的形式。
所述片剂可以含有赋形剂，如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、磷酸氢钙和甘氨酸；崩解剂，如淀粉(优选地玉米淀粉、马铃薯淀粉或木薯淀粉)、羟基乙酸淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠和某些络合硅酸盐；以及造粒粘结剂(granulationbinder)，如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(hpmc)、羟丙基纤维素(hpc)、蔗糖、明胶和阿拉伯胶。
此外，可以包含润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸、甘油二十二烷酸酯和滑石。
组合物可以被口服地施用，以快速释放或受控释放的片剂、微粒、微型片剂、胶囊、囊剂(sachets)和口服溶液或悬浮液，或者用于其制备的粉末的形式。除了本发明的新固态形式的泮托拉唑(pantoprazole)作为活性物质之外，口服制备物可以可选地包含各种标准药物载体和赋形剂，如粘结剂、填充剂、缓冲剂、润滑剂、助流剂、染料、崩解剂、气味剂(odourants)、甜味剂、表面活性剂、脱模剂、抗粘剂和包衣。一些赋形剂可以在组合物中起到多重作用，例如，充当粘结剂和崩解剂两者。
用于口服组合物的药学上可接受的崩解剂的实施例包含淀粉、预糊化淀粉、羧基乙酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、海藻酸盐、树脂、表面活性剂、泡腾组合物、水性硅酸铝和交联聚乙烯吡咯烷酮。
用于口服组合物的药学上可接受的粘结剂的实施例包含阿拉伯胶；纤维素衍生物，如甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素或羟乙基纤维素；明胶、葡萄糖、右旋糖、木糖醇、聚甲基丙烯酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、山梨糖醇、淀粉、预糊化淀粉、黄芪胶、黄原树脂(xanthaneresin)、海藻酸盐、硅酸镁铝、聚乙二醇或膨润土。
用于口服组合物的药学上可接受的填充剂的实施例包含乳糖、乳糖酐(anhydrolactose)、乳糖一水合物、蔗糖、右旋糖、甘露糖醇、山梨糖醇、淀粉、纤维素(特别是微晶纤维素)、二氢-或无水-磷酸钙、碳酸钙和硫酸钙。
在本发明的组合物中有用的药学上可接受的润滑剂的实施例包含硬脂酸镁、滑石、聚乙二醇、环氧乙烷的聚合物、十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸镁、油酸钠、十八烷基富马酸钠和胶体二氧化硅。
适合用于口服组合物的药学上可接受的气味剂的实施例包含合成香料和天然芳香油，如油、花、水果(例如，香蕉、苹果、酸樱桃、桃)的提取物及其组合，以及相似的香料。它们的使用取决于很多因素，最重要的是针对将要服用所述药物组合物的人群的感官可接受度。
适合用于口服组合物的药学上可接受的染料的实施例包含合成的和天然的染料，如二氧化钛、β-胡萝卜素和葡萄柚皮的提取物。
用于口服组合物有用的药学上可接受的包衣的实施例包含羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素和丙烯酸酯-甲基丙烯酸酯共聚物，所述包衣典型地用于便利吞咽，修饰释放性质、改进外观和/或掩蔽组合物的味道。
用于口服组合物的药学上可接受的甜味剂的实施例包含阿斯巴甜、糖精、糖精钠、甜蜜素、木糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖和蔗糖。
药学上可接受的缓冲剂的实施例包含柠檬酸、柠檬酸钠、碳酸氢钠、磷酸氢钠、氧化镁、碳酸钙和氢氧化镁。
药学上可接受的表面活性剂的实施例包含十二烷基硫酸钠和聚山梨醇酯。
在明胶胶囊中，相似类型的固体组合物也可以被采用作为填充剂。在这一点上，优选的赋形剂包含乳糖(lactose)、淀粉、纤维素、乳糖(milksugar)或高分子量聚乙二醇。针对水性悬浮液和/或酏剂，试剂可以与各种增甜剂或调味剂、着色物质或染料，与乳化和/或悬浮剂，以及与稀释剂(如水、乙醇、丙二醇和甘油及其组合)组合。
例如，本发明的化合物也可以被配制为栓剂(例如，含有常规栓剂基质)用于在人用或兽用药中使用，或被配置为阴道栓(例如，含有常规的阴道栓基质)。
根据本发明的化合物可以被配制用于外施用，用于在人用和兽用药中使用，以油膏、乳膏、凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、洗发剂、粉末(包含喷雾粉末或扑粉粉末)、阴道栓、棉塞、喷雾、浸液、气溶胶、滴剂(例如，眼、耳或鼻滴剂)或浇淋剂的形式。
针对皮肤外用的应用，本发明的试剂可以被配制为适合的油膏，例如，所述油膏包含悬浮在或溶解在具有以下一种或更多种物质的混合物中的活性化合物：矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、乳化蜡、山梨醇酐单硬脂酸酯、聚乙二醇、液体石蜡、聚山梨醇酯60、十六醇酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。这样的组合物也可以含有其他药学上可接受的赋形剂，如聚合物、油、液体载体、表面活性剂、缓冲剂、防腐剂、稳定剂、抗氧化剂、保湿剂、软化剂、着色剂和气味剂。
适合用于这样的外用组合物的药学上可接受的聚合物的实施例包含丙烯酸聚合物；纤维素衍生物，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素或羟丙基纤维素；天然聚合物，如海藻酸盐、黄芪胶、果胶、黄原胶和壳聚糖(cytosan)。
如此有用的适合的药学上可接受的油的实施例包含矿物油、硅酮油、脂肪酸、醇类和二醇类。
适合的药学上可接受的液体载体的实施例包含水、醇类或二醇类，如乙醇、异丙醇、丙二醇、己二醇、甘油和聚乙二醇，或其混合物，其中假多晶型物(pseudopolymorph)被溶解或被分散，可选地伴随以无毒的阴离子、阳离子或非离子型表面活性剂，以及无机或有机缓冲剂。
药学上可接受的防腐剂的实施例包含苯甲酸钠、抗坏血酸、p-羟基苯甲酸的酯和各种抗菌剂和抗真菌剂，如溶剂，例如乙醇、丙二醇、苯甲醇、氯丁醇、季铵盐和对羟基苯甲酸酯类(如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸丙酯)。
药学上可接受的稳定剂和抗氧化剂的实施例包含乙二胺四乙酸(edta)、硫脲、生育酚和丁基羟基茴香醚。
药学上可接受的保湿剂的实施例包含甘油、山梨糖醇、尿素和聚乙二醇。
药学上可接受的软化剂的实施例包含矿物油、肉豆蔻酸异丙酯和棕榈酸异丙酯。
化合物也可以经皮肤或透皮施用，例如，通过使用皮肤贴剂。
针对眼科应用，化合物可以被配制为在等渗的、ph调节的、无菌盐水中的微粒化的悬浮液，或者优选地被配制为在等渗的、ph调节的、无菌盐水中的溶液，可选地与防腐剂(如氯化苄基烷醇盐(benzylalkoniumchloride))组合。
如已经说明的，本发明的化合物可以被鼻内施用或通过吸入施用，并且被方便地递送，以干燥粉末吸入剂或气溶胶喷雾的形式，所述气溶胶喷雾自加压容器、泵、喷雾器或雾化器呈现，伴随以使用适合的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氢氟烷烃(如1,1,1,2-四氟乙烷(hfa134at)或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷(hfa227ea))、二氧化碳或其他适合的气体。在加压气溶胶的情况下，剂量单位可以通过提供阀以递送测量的量而被确定。加压容器、泵、喷雾器或雾化器可以含有活性化合物的溶液或悬浮液，例如，使用乙醇和推进剂的混合物作为溶剂，其可以附加地含有润滑剂，例如，山梨醇酐三油酸酯。
用于在吸入器或吹入器中使用的胶囊和弹丸(例如，由明胶制成)可以被配制为含有化合物和适合的粉末基质(如乳糖或淀粉)的粉末混合物。
针对通过吸入剂的外施用，根据本发明的化合物可以经由喷雾器被递送用于在人用或兽用药中使用。
本发明的药物组合物可以包含从0.01至99％重量每体积的活性材料。针对外施用，例如，组合物将通常含有从0.01-10％，更优选地0.01-1％的活性材料。
活性剂也可以以脂质体递送系统的形式被施用，比如小单室囊泡(vesicle)、大单室囊泡和多室囊泡。脂质体可以由各种磷脂质形成，如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱。
可以按照上文给出的指导原则，根据通过常规测试限定的剂量和给药方案，本发明的药物组合物或单位剂量形式可以被施用，以得到最佳的活性，同时针对特定病人最小化毒性或副作用。然而，按照本文给出的指导原则，治疗方案的这样的微调是常规的。
本发明的活性剂的剂量可以根据各种因素变化，比如潜在疾病条件、个体条件、体重、性别和年龄，以及施用方式。对于治疗病症的有效量可以通过对于本领域技术人员来说已知的经验方法被容易地确定，例如，通过建立剂量和施用频率的模型(matrix)并且将模型中的一组实验单元或每个点的对象进行比较。要被施用给患者的准确量将根据病症的状态和严重性以及患者的身体条件而变化。任何症状或参数的可测量的改进可以被本领域技术人员决定或通过患者报告给医师。
被施用的试剂的量可以在约0.01mg/kg/天和约25mg/kg/天之间的范围，优选地在约0.1mg/kg/天和约10mg/kg/天之间，并且最优选地在0.2mg/kg/天和约5mg/kg/天之间。将被理解的是本发明的药物制剂不必须需要含有有效治疗病症的全部量的试剂，因为通过这种药物制剂的多次剂量的施用也可以达到这样的有效量。
在本发明的优选的实施方案中，根据式i的化合物被配制成胶囊或片剂，优选地含有10mg至200mg的本发明的化合物，并且优选地以10mg至300mg，优选地20mg至150mg，最优选地约50mg的总的日剂量被施用于患者。
基于总药物组合物的100％重量，用于胃肠道外施用的药物组合物含有从约0.01％至约100％重量的本发明的活性剂。
通常，相对于剂量形式的100％总重量，经透皮给药剂量形式含有从约0.01％至约100％重量的活性剂。
药物组合物或单位剂量形式可以以单一日剂量被施用，或者总的日剂量可以以分开的剂量被施用。此外，用于治疗病症的另一种化合物的共同施用或顺序施用可以是符合期望的。为了此目的，组合的活性物质被配制为简单的单位剂量。
针对其中多种化合物是在单独的剂量制剂中的组合治疗，所述多种化合物可以被同时地施用，或者每一种可以以交错间隔被施用。例如，本发明的化合物可以在早晨被施用，而抗毒蕈碱的化合物可以在晚上被施用，或者相反。附加的化合物也可以在特定的间隔被施用。施用的顺序将取决于各种因素，包含年龄、体重、性别和患者的身体状况；要被治疗的病症的严重性和病因学、施用途径、患者的肾功能和肝功能、患者的治疗史，以及患者的响应能力。施用的顺序的决定可以被微调，并且按照本文给出的指导原则，这样的微调是常规的。
具体实施方式
合成
式i的化合物及其对映异构体、非对映体、n-氧化物和药学上可接受的盐可以通过下文概述的一般方法被制备，所述方法构成本发明的再一个方面。
除了在文献中已知的其他标准操作，本发明的化合物可以通过采用以下方案中示出的，在实验部分中被例举或对本领域技术人员来说是清楚的反应被制备。本文中未描述的起始材料是商业上可获得的或者可以通过采用文献中描述的反应被制备，或者对于本领域技术人员来说是清楚的。以下实施例被提供，使得本发明可以被更充分地理解，仅是说明性的，并且不应该被解释为限制性的。
将被本领域技术人员理解的是使用受保护的中间体的衍生物是符合期望的，这些中间体衍生物被用于根据式i的化合物的制备中。功能基团的保护和去保护可以通过本领域已知的方法进行(参见，例如，greenandwutsprotectivegroupsinorganicsynthesis.johnwileyandsons,newyork,1999)。
缩写pg描述了在进行某些操作之前被引入到反应性基团中，并且随后被去除去的“保护基团”。用于保护反应性基团的pg的实施例包含：用于氨基基团的乙酰基-、三氟乙酰基-、苯甲酰基-、乙氧基羰基-、n-叔丁氧基羰基-(boc)、n-苄氧羰基-(cbz)、苄基-、甲氧基苄基-、2,4-二甲氧基苄基，加之以及用于氨基-烷基氨基或者亚氨基基团的邻苯二甲酰基-基团；用于酰胺基团的n-甲氧甲基-(mom)、n-苄氧甲基-(bom)、n-(三甲基硅烷基)乙氧甲基-(sem)、n-叔丁基-二甲基硅氧烷基甲基-、n-叔丁基-二甲基甲硅烷基-(tbdms)、n-三异丙基甲硅烷基(tips)、n-苄基-、n-4-甲氧基苄基(pmb)、n-三苯甲基-(tr)、n-叔丁氧羰基-(boc)、n-苄氧羰基-(cbz)或者n-三甲基甲硅烷基乙磺酰基-(ses)；用于羟基基团的甲氧基-、苄氧基-、三甲基甲硅烷基-(tms)、乙酰基-、苯甲酰基-、叔丁基-、三苯甲基-、苄基-或四氢吡喃基(thp)基团；或者用于羧基基团的三甲基甲硅烷基-(tms)、甲基-乙基-、叔丁基-、苄基-或四氢吡喃基(thp)基团。
本发明的化合物通常根据以下方案被制备，其中基团r1、r2、r3和n如本文中先前所定义的：
在一些情况下，最终产物可以被进一步修饰，例如，通过取代基的操作。这些操作可以包含但不限于本领域技术人员普遍已知的还原、氧化、烷基化、酰化和水解作用。在一些情况下，进行上述反应方案的顺序可以被改变，以便便利反应或者避免不需要的反应产物。以下实施例被提供，使得本发明可以被更全面地理解。这些实施例仅是说明性的，并且不应该以任何方式被构建为限制本发明。
如方案1中所示，甲硅烷基保护的丙炔醛肟1先经由卤化消除形成氧化腈，与n-保护的不饱和环胺通过1,3-偶极环加成反应(参见，例如kanemasa,s.；nishiuchi,m.；kamimure,a.；hori,k.j.am.chem.soc.(1994),vol.116,pp.2324)。然后，由此形成的化合物2可以与r3lg化合物直接反应，或者通过使用标准方法将炔烃部分去保护(例如，meoh中的naoh或na2co3，或者thf中的四丁基氟化铵)。lg代表离去基团，如卤素、甲磺酸基、甲苯磺酸基、烷基磺酸基、三氟甲烷磺酸基或者其它不受限制的基团。该反应借助于钯催化剂和碘化亚铜，例如通过进行sonogashira(chinchillaetal.,chem.rev.,(2007),vol.107(3),pp.874–922)或类似的反应而被实施。在通过标准方法进行n-去保护之后，继续进行与r2-r1-lg基团的反应，其中lg如上所定义。该最后的衍生化步骤可以使用标准方法完成，如，例如，布赫瓦尔德(buchwald)反应、酰化反应、与烷基/芳基异氰酸酯、烷基/芳基氯甲酸酯、氯甲酰胺、还原胺化、烷基化反应或者任何种类的n-衍生化反应，所述n-衍生化反应对于形成根据式i的化合物是有用的，并且对于本领域技术人员是众所周知的。该最后的反应也可以通过先前形成的合适的中间体(例如，中间体5的氯磺酰基n-衍生物或氯甲酰基n-衍生物)而进行。
可替代地，本发明的化合物可以根据方案2被制备：
按照方案2，r3基团在合成途径开始时通过丙炔醛的二烃化物或环状缩醛与适当的烷基化、芳基化或者衍生化试剂r3-lg的sonogashira或者sonogashira类似的反应被引入，其中lg是如上所定义的离去基团。
在上文一般描述中尚未被描述的其他化合物的合成在接下来本发明的实验部分中被充分记载。
在本领域公知的标准条件下，根据式i的化合物的游离碱，其非对映体或对映异构体可以被转化为相应的药学上可接受的盐。例如，游离碱被溶解在适合的有机溶剂(如甲醇)中，用例如一当量的马来酸或草酸、一或二当量的盐酸或甲基磺酸处理，并且随后在真空下浓缩以提供相应的药学上可接受的盐。剩余物可以随后从适合的有机溶剂或有机溶剂混合物(如甲醇/二乙醚)通过重结晶提纯。
根据式i的化合物的n-氧化物可以通过本领域技术人员已知的简单的氧化程序被合成。
通式ⅰ的化合物的制备
除非另有说明，下文所述的实施例的化合物的一种或更多种互变异构形式可以在原位和/或单独地被制备。下文所述的实施例的化合物的所有互变异构形式应该被认为是公开的。
本发明通过以下实施例被说明，其中可以采用以下缩写：
acoh乙酸
an乙腈
boc叔丁氧基羰基
conc.浓缩的
dcm二氯甲烷
dipean,n-二异丙基乙胺
dmfn,n-二甲基甲酰胺
dmso二甲基亚砜
dppf1,1’-双(二苯基-膦基)二茂铁
ei电子电离作用
esi电喷雾离子化法
etoac乙酸乙酯
etoh乙醇
hatu2-(7-氮杂-1h-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐
hcl盐酸
hcooh甲酸
hplc高效液相色谱法
hplc-ms高效液相色谱结合质谱法
i.vac.真空下
meoh甲醇
ms质谱分析法
mw分子量
naoh氢氧化钠
nh4oh氢氧化铵(水中30％的氨)
pe石油醚
rf保留值(从薄层色谱)
rt室温
r.sub.t保留时间(从hplc)
tbtu2-(1h-苯并三唑基-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸盐
thf四氢呋喃
tea三乙胺
tfa三氟乙酸
thf四氢呋喃
下表(表1)说明了根据方案1或者方案2制备的根据通式i的本发明的一些实施例化合物：
表1：本发明的实施例化合物
上述被选择的化合物的1h-nmr数据如下表2中所示。
表2：被选择的1h-nmr数据
以下实施例说明如上文描述的一些通式i的化合物。这些实施例仅是说明性的，不意图限定本发明的范围。试剂和起始材料对于本领域普通技术人员来说是容易获得的。
实施例6(方法1-参考方案2)
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(吗啉-4-基)甲酮
1-氯代-3-(3,3-二乙氧基丙-1-炔基)苯(中间体6a)
1-氯代-3-碘代苯(4g，16.8mmol)、丙炔醛二乙基乙缩醛(2.66ml，18.5mmol)、双(三苯基膦)钯(ii)二氯化物(295mg，0.42mmol)、碘化亚铜(160mg，0.84mmol)和三乙胺(60ml)的混合物在室温被搅拌3h。在4h之后，反应混合物用h2o急冷，用etoac萃取，用盐水洗，在na2so4上干燥，并且在真空中蒸发至干燥。剩余物通过自动快速色谱(
ms：[m+h]+＝239.32。
3-(3-氯苯基)丙-2-炔醛(中间体6b)
38.8ml的水和7.7ml的三氟乙酸被加入到中间体6a(4g，16.7mmol)在ch2cl2(50ml)中的溶液中。在搅拌4h之后，另外的4当量三氟乙酸被加入。在24h之后，转化完成；2层被分离，有机层用水洗，在na2so4上干燥，并且在真空中蒸发至干燥，以给予为带黄褐色的油的标题化合物，在下一个步骤中被使用而没有进一步提纯。
ms：[m+h]+＝165.35。
3-(3-氯苯基)丙-2-炔醛肟(中间体6c)
将3-氯苯基炔丙基醛(22.8g，139mmol)、盐酸羟胺(416mmol，28.9g)、etoh(200ml)和水(50ml)的混合物在室温被搅拌24h。反应混合物用h2o稀释，用et2o:etoac萃取，用盐水洗，并且在真空中蒸发至干燥，给予为24g的为糊状带褐色的固体的标题化合物(顺:反1:1)。浅褐色剩余物在下一个步骤中被使用而没有进一步提纯。产率：96.4％。
ms:[m+h]+＝180.16。
叔丁基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体6d)
n-氯代琥珀酰亚胺(23.64mmol，3.16g)被加入到中间体6c(20.68mmol，3.72g)在n,n-二甲基甲酰胺(40ml)中的溶液中，并且混合物在室温被搅拌2h。然后加入水，并且水层用et2o萃取。有机相在na2so4上干燥、过滤和蒸发。粗剩余物被溶解在ch2cl2(40ml)中并且在0℃冷却，然后加入叔丁基-2,3-二氢吡咯-1-羧酸乙酯(5.91mmol，1g)，随后加入tea(17.73mmol，1.79g，2.47ml)，并且混合物在室温被搅拌整夜。然后，加入水，两相被分离，有机层用水和盐水洗，在na2so4上干燥。溶剂在真空中被除去，并且粗剩余物经由自动快速色谱(
3-(3-氯苯基乙炔基)-4,5,6,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑(中间体6e)
向0℃搅拌的叔丁基-3-[2-(3-氯苯基)乙炔基]-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体6d，2.88mmol，1g)在chcl3(40ml)中的溶液中滴加三氟乙酸(28.84mmol，3.288g，2.208ml)，并且混合物在60℃被加热5h。反应通过lc/ms被检查，显示正确的(m+h)+峰。混合物在0-5℃被冷却并且用naoh碱化至ph＝9。然后，加入水，两相被分离，有机层用水和盐水洗，在na2so4上干燥。溶剂在真空中被除去，给予为褐色油的标题产物(0.7g，98.4％)，所述标题产物在下一个步骤中被使用而没有提纯。
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(吗啉-4-基)甲酮
向3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑(中间体6e，0.6g，2.4mmol)在二氯甲烷(40ml)和三乙胺(0.63ml，2.8mmol)中的溶液中滴加4-吗啉羰基氯(0.42ml，3.6mmol)，并且所得到的混合物在室温被搅拌整夜。然后，所述混合物在50℃被加热4h。然后，反应混合物被倒入水中，有机层被分离，在na2so4上干燥，在真空中蒸发至干燥。粗产物通过快速色谱(
1hnmr(400mhz,三氯甲烷-d)δppm2.10-2.23(m,1h)2.30(dd,1h)3.18(td,1h)3.43-3.50(m,4h)3.73(m,4h)3.87-3.98(m,2h)6.57(d,1h)7.33(dd,1h)7.43(m,2h)7.54(s,1h)。
ms:[m+h]+＝239.32。
实施例6a
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-吗啉基甲酮的较小极性的对映异构体
实施例6b
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-吗啉基甲酮的较大极性的对映异构体
实施例化合物6a和6b通过手性hplc提纯从实施例6的化合物获得。
实施例20(方法2-参考方案1)
乙基-3-[(6-甲基-2-吡啶基)乙炔基]-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
n-羟基-3-三甲基硅烷基-丙-2-炔酰亚胺氯(中间体20a)
向室温搅拌的3-三甲基甲硅烷基丙-2-炔醛肟(carreira,erickm.；lohse-fraefel,nina,organicletters,(2005),vol.7,no.10,pp.2011-2014,68g,11.9mmol)在11.9mldmf中的溶液中加入n-氯代琥珀酰亚胺(1.99g，14.8mmol)。在4h的搅拌之后，溶液被倒入水中，并且用et2o萃取。在通常的分离净化实验之后，剩余物(2.09g)按照原样被用于下一个步骤。
叔丁基-3-[(三甲基硅烷基)乙炔基]-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体20b)
将tea(0.554ml，3.85mmol)在9.4ml二氯甲烷中的溶液滴加到在0℃搅拌的化合物20a(1.67g，2.57mmol)和叔丁基-2,3-二氢吡咯-1-羧酸乙酯(600mg，2.57mmol)在42ml的二氯甲烷中的溶液中。然后，反应混合物在室温被搅拌24h；随后所述反应混合物用冷水稀释。有机层用盐水洗，在na2so4上干燥，在真空中蒸发至干燥。粗产物通过自动快速色谱(
叔丁基-3-[(6-甲基吡啶-2-基)乙炔基]-3a,4,5,6a-四氢-吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体20c)
向中间体20b(200mg，0.65mmol)和2-溴代-6-甲基吡啶(81.1μl，0.72mmol)在用氮气流脱气5min的n,n-二甲基甲酰胺(4ml)中的溶液中，按顺序快速加入四(三苯基膦)钯(0)(22.5mg，0.02mmol)、四丁基氟化铵(186mg，0.713mmol)和乙酸钠(106mg，1.3mmol)。混合物在微波炉中在120℃被加热10min。反应混合物被倒入水中，并且用乙酸乙酯萃取。有机层在na2so4上干燥并且蒸发至干燥。粗产物用从8:2至3:7的梯度石油醚:乙酸乙酯通过自动快速色谱(
3-[(6-甲基吡啶-2-基)乙炔基]-4,5,6,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑(中间体20d)
标题化合物使用上述针对中间体6e报告的方法合成，除了将中间体20c代替为中间体6d。在通常的分离净化实验之后，剩余物借助于自动快速色谱(
乙基-3-[(6-甲基-2-吡啶基)乙炔基]-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
向中间体20d(60mg，0.26mmol)在ch2cl2(6ml)中的溶液中加入tea(0.08ml)，并且然后滴加氯甲酸乙酯(38.1μl，0.4mmol)。反应混合物在室温被搅拌1h。然后，反应混合物被倒入水中，并且用乙酸乙酯萃取。有机层在na2so4上干燥并且蒸发至干燥。粗产物用从9:1至4:6的梯度石油醚:乙酸乙酯通过自动快速色谱
1hnmr(400mhz,三氯甲烷-d)δppm1.28-1.38(m,3h)2.11-2.28(m,1h)2.40(dd,1h)2.60(s,3h)3.22(td,1h)3.73-3.93(m,1h)3.93-4.08(m,1h)4.24(d,2h)6.28-6.52(m,1h)7.20(d,1h)7.40(d,1h)7.57-7.66(m,1h)。
中间体20c的合成的可替代的步骤
叔丁基-3-乙炔基-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体20e)
向中间体20b(530mg，1.72mmol)在meoh(20ml)中的溶液中加入k2co3(713mg，5.16mmol)，并且混合物在室温被搅拌1h，通过hplc-ms被检查，被倒入水中并且用etoac萃取。标题化合物通过用从7:3至6:4的梯度石油醚:乙酸乙酯用自动快速柱色谱
叔丁基-3-[(6-甲基吡啶-2-基)乙炔基]-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体20c)
向中间体20e(200mg，0.85mmol)和2-溴代-6-甲基吡啶(106μl，0.93mmol)在用氮气流脱气5min的n,n-二甲基甲酰胺(4ml)中的溶液中，按顺序快速加入四(三苯基膦)钯(0)(29.3mg，0.025mmol)和乙酸钠(139mg，1.7mmol)，并且混合物在微波炉中在120℃被加热10min。反应混合物被倒入水中，并且用乙酸乙酯萃取。有机层在na2so4上干燥并且蒸发至干燥。粗产物用从8:2至3:7的梯度石油醚:乙酸乙酯通过自动快速色谱
从中间体6e(为盐酸盐)开始，下列化合物被如下制备：
实施例21
异丙基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，0.15mmol)，随后是在甲苯(127μl，0.12mmol)中的1.0m氯甲酸异丙酯。搅拌在室温被持续整夜。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出55mg的粗产物。粗产物通过制备型tlc(hex:etoac6:4)提纯，用etoac中的5％meoh占据二氧化硅。滤液在真空下被浓缩以给出11.4mg(38％产率)的标题产物。
ms:[m+h]+＝333.1,[2m+na]＝687.3；
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77–7.73(m,1h),7.63–7.57(m,2h),7.53–7.47(m,1h),6.35–6.26(m,1h),4.89–4.78(m,1h),4.21–4.12(m,1h),3.73–3.65(m,1h),3.08–2.97(m,1h),2.26–2.18(m,2h),1.23(d,6h)。
实施例22
环丙基甲基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，0.15mmol)，随后是环丙基甲基氯甲酸酯(17mg，0.12mmol)。搅拌在室温被持续整夜。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出48mg的粗产物。粗产物通过制备型tlc(hex:etoac6:4)提纯，用etoac中的5％meoh占据二氧化硅。滤液在真空下被浓缩以给出18.6mg(50％产率)的标题产物。
ms:[m+h]+＝345.8
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77–7.74(m,1h),7.64–7.56(m,2h),7.51(dd,1h),6.33(d,1h),4.23–4.11(m,2h),3.76–3.67(m,1h),3.14–2.97(m,2h),2.29–2.16(m,2h),1.21–1.07(m,1h),0.53(d,2h),0.35–0.26(m,2h)。
实施例23
环戊基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，0.15mmol)，随后是环戊基氯甲酸酯(16μl,0.13mmol)。搅拌在室温被持续1小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用etoac(10ml，3x)萃取。有机层在na2so4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出54mg的粗产物。粗产物使用etoac:dcm:hex3:1:1作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。获得了27mg的为黄色稠油的标题化合物(71％产率)。
ms:[2m+na]＝739.4
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.78–7.73(m,1h),7.63–7.57(m,2h),7.53–7.47(m,1h),6.29(dd,1h),5.05(s,1h),4.26–4.11(m,1h),3.73–3.62(m,1h),3.14–2.95(m,1h),2.27–2.15(m,2h),1.90–1.75(m,2h),1.75–1.50(m,6h)。
实施例24
2,2-二甲基丙基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，0.15mmol)，随后是新戊基氯甲酸酯(19μl,0.13mmol)。搅拌在室温被持续1小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用etoac(10ml，4x)萃取。有机层在na2so4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出48mg的粗产物。粗产物使用etoac:dcm:hex3:1:1作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。获得了33mg的为黄色稠油的标题化合物(86％产率)。
ms:[2m+na]＝743.6
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.76(s,1h),7.66–7.56(m,2h),7.54–7.45(m,1h),6.40–6.26(m,1h),4.28–4.10(m,1h),3.89–3.62(m,3h),3.22–2.95(m,1h),2.24(s,2h),0.97–0.90(m,9h)。
实施例25
3-(3-氯苯基乙炔基)-n-(丙-2-基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(32μl，0.23mmol)，随后是异丙基异氰酸酯(10μl,0.11mmol)。搅拌在室温被持续24小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出41mg的粗产物。剩余物经由制备型hplc提纯，以给予23mg的标题化合物(66％产率)。
ms:[m+h]+＝332.1
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.75(t,1h),7.63–7.56(m,2h),7.53–7.46(m,1h),6.44(d,1h),6.35(d,1h),4.14–4.06(m,1h),3.84–3.75(m,1h),3.70–3.61(m,1h),3.00–2.89(m,1h),2.24–2.10(m,2h),1.09(dd,6h)。
实施例26
n-叔丁基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.45ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(49μl，0.35mmol)，随后是叔丁基异氰酸酯(17μl,0.14mmol)。搅拌在室温被持续24小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出45mg的粗产物。剩余物在二氧化硅上经由快速柱色谱提纯，用acoet:hex1:1洗脱。收集的合并的级分用己烷接纳，并且最后经由制备型tlc(acoet:hex1:9)提纯，用etoac中5％的meoh占据二氧化硅。滤液在真空下被浓缩，以给出14mg(33％产率)的标题产物。
ms:[m+h]+＝346
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.75(t,1h),7.62–7.57(m,2h),7.53–7.47(m,1h),6.48(d,1h),5.82(s,1h),4.14–4.05(m,1h),3.69–3.60(m,1h),3.03–2.90(m,1h),2.22–2.11(m,2h),1.29(s,9h)。
实施例27
3-(3-氯苯基乙炔基)-n-环戊基-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.45ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(35μl，0.25mmol)，随后是环戊基异氰酸酯(14μl,0.12mmol)。搅拌在室温被持续24小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出48mg的粗产物。粗产物在二氧化硅上经由快速柱色谱提纯，用从hex:etoac9:1至etoac的梯度洗脱。收集的合并的级分蒸发至干燥，用己烷接纳，通过制备型tlc(hex：etoac9:1)并且最后通过制备型hplc提纯，以给予14mg(36％产率)的标题产物。
ms:[m+h]+＝358.1
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77–7.73(m,1h),7.59(m,2h),7.53–7.46(m,1h),6.46(d,1h),6.41(d,1h),4.10(t,1h),4.00–3.88(m,1h),3.71–3.62(m,1h),3.00–2.89(m,1h),2.23–2.09(m,2h),1.86–1.74(m,2h),1.68–1.60(m,2h),1.53–1.37(m,4h)。
实施例28
3-(3-氯苯基)乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(呋喃-3-基)甲酮
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，0.14mmol)，随后是呋喃-3-羰基氯(17mg,0.12mmol)。搅拌在室温被持续整夜。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出53mg的粗产物。粗产物在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯，随后是制备型tlc(hex:etoac2:8)，用etoac中5％的meoh占据二氧化硅。滤液在真空下被浓缩，以给出22.4mg(62％产率)的标题产物。
ms:[m+h]+＝341.5
1hnmr(400mhz,dmso)δ8.30–8.14(m,1h),7.86–7.74(m,2h),7.66–7.57(m,2h),7.51(t,1h),6.85–6.78(m,1h),6.69–6.54(m,1h),4.36–4.07(m,2h),3.14–2.98(m,1h),2.38–2.15(m,2h)。
实施例29
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(5-甲基呋喃-2-基)甲酮
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，0.14mmol)，随后是5-甲基呋喃-2-羰基氯(18mg,0.13mmol)。搅拌在室温被持续1小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用etoac(10ml，3x)萃取。有机层在na2so4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出50mg的粗产物。粗产物使用etoac:dcm:hex3:1:1作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。获得了30mg的为黄色稠油的标题化合物(80％产率)。
ms:[m+h]+＝355.1,[2m+na]＝731.4
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.78(t,1h),7.66–7.56(m,2h),7.55–7.46(m,1h),7.11(d,1h),6.81(s,1h),6.33(dd,1h),4.30(s,1h),4.21–3.86(m,2h),3.08(s,1h),2.36(s,3h),2.30(s,1h)。
实施例30
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(环戊基)甲酮
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(37μl，0.26mmol)，随后是环戊基羰基氯(15μl，0.13mmol)。搅拌在室温被持续1小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出46mg的粗产物。粗产物使用己烷:etoac7:3作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯，以给予35mg的标题产物(96％产率)。
ms:[m+h]+＝343.1
1hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的混合物)δ7.78–7.75(m,1h),7.64–7.58(m,2h),7.50(t,1h),6.60(d,1h主要旋转异构体),6.45(d,1h次要旋转异构体),4.28(t,1h主要旋转异构体),4.13(t,1h次要旋转异构体),3.92–3.82(m,1h),3.24–3.14(m,1h主要旋转异构体),3.09–3.00(m,1h次要旋转异构体),2.99–2.87(m,1h),2.29–2.11(m,2h),1.93–1.77(m,2h),1.73–1.52(m,6h)。
实施例31
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(四氢吡喃-4-基)甲酮
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(37μl，0.26mmol)，随后是四氢-2h-吡喃-4-羰基氯(19mg，0.13mmol)。搅拌在室温被持续1小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出65mg的粗产物。粗产物使用从8:2至6:4的梯度dcm:etoac作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。获得了32mg的标题化合物(84％产率)。
ms:[m+h]+＝359.1
1hnmr(400mhz,dmso-d6,旋转异构体的混合物)δ7.78–7.75(m,1h),7.64–7.57(m,1h),7.51(t,1h),6.67(d,1h主要旋转异构体),6.46(d,1h次要旋转异构体),4.29(t,1h主要旋转异构体),4.13(t,1h次要转转异构体),3.94–3.77(m,4h),3.44–3.33(m,3h),3.00–2.87(m,1h),2.35–2.08(m,2h),1.71–1.52(m,4h)。
实施例32
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(37μl，0.26mmol)，随后是4-甲基-1-哌嗪羰基氯(17μl，0.13mmol)。搅拌在室温被持续1小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出42mg的粗产物。粗产物使用dcm:meoh19:1作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。获得了20mg的标题产物(51％产率)。
ms:[m+h]+＝373.3
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77–7.73(m,1h),7.62–7.57(m,2h),7.53–7.46(m,1h),6.52(d,1h),4.12(t,1h),3.59(dd,1h),3.36–3.28(m,2h,信号被水部分地覆盖),3.28–3.19(m,2h),3.16–3.07(m,1h),2.36–2.24(m,4h),2.23–2.16(m,4h),2.15–2.05(m,1h)。
实施例33
4-四氢吡喃基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，15mmol)，随后是四氢呋喃-4-基氯甲酸酯(21mg,0.13mmol)。搅拌在室温被持续1.5小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用etoac(10ml，3x)萃取。有机层在na2so4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出60mg的粗产物。粗产物使用etoac:dcm3:1作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。在进一步快速提纯之后，获得了28mg的为黄色稠油的标题化合物(70％产率)。
ms:[2m+na]+＝771.3
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.75(s,1h),7.65–7.56(m,2h),7.53–7.47(m,1h),6.35(t,1h),4.83(s,1h),4.20(s,1h),3.87–3.63(m,3h),3.50(d,2h),3.05(s,1h),2.24(s,2h),1.87(s,2h),1.59(s,2h)。
实施例34
3-甲基丁基-3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(21μl，0.15mmol)，随后是3-甲基丁基氯甲酸酯(19mg,0.13mmol)。搅拌在室温被持续1小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用etoac(10ml，3x)萃取。有机层在na2so4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出53mg的粗产物。粗产物使用etoac:dcm3:1作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。获得了34mg的为黄色稠油的标题产物(89％产率)。
ms:[2m+na]+＝743.3
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.76(s,1h),7.64–7.56(m,2h),7.55–7.46(m,1h),6.37–6.23(m,1h),4.24–4.14(m,1h),4.16–4.05(m,2h),3.77–3.61(m,1h),3.12–2.97(m,1h),2.22(m,2h),1.79–1.58(m,1h),1.49(dt,2h),0.91(d,6h)。
实施例35
3-(3-氯苯基乙炔基)-n-(戊-3-基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
中间体6e(40mg，0.14mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.45ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(54μl，0.038mmol)，随后是2-乙基丙基异氰酸酯(18mg，0.15mmol)。搅拌在室温被持续24小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出57mg的粗产物。粗产物经由制备型hplc提纯，以给予42mg的标题产物(78％产率)。
ms:[m+h]+＝360.0
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.75(t,1h),7.63–7.56(m,2h),7.54–7.46(m,1h),6.48(d,1h),6.19(d,1h),4.17–4.07(m,1h),3.73–3.62(m,1h),3.50–3.41(m,1h),3.03–2.92(m,1h),2.24–2.13(m,2h),1.52–1.31(m,4h),0.83(td,6h)。
实施例36
3-(3-氯苯基乙炔基)-n-(吡啶-3-基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
中间体6e(40mg，0.14mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.8ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(47μl，0.33mmol)，随后是吡啶-3-异氰酸酯(19mg,0.15mmol)。搅拌在室温被持续24小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出61mg的粗产物。粗产物用梯度己烷至hex:etoac1:1作为洗脱液在二氧化硅上经由快速柱色谱提纯。合并的收集的级分蒸发至干燥，并且通过制备型tlc(hex:etoac6:4)进一步提纯。获得了40mg的标题化合物(77％产率)。
ms:[m+h]+＝367.2,[2m+na]+＝755.2
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.86(s,1h),8.70(d,1h),8.22(dd,1h),7.94(dd,1h),7.77(t,1h),7.65–7.58(m,2h),7.55–7.48(m,1h),7.32(dd,1h),6.60(d,1h),4.24(t,1h),3.91–3.82(m,1h),3.21–3.10(m,1h),2.37–2.24(m,2h)。
实施例37
3-(3-氯苯基乙炔基)-n-(2,2-二甲基丙基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
中间体6e(30mg，0.1mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.45ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(32μl，0.24mmol)，随后是2,2-二甲基丙基异氰酸酯(12mg,0.1mmol)。搅拌在室温被持续24小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在mgso4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出39mg的粗产物。粗产物经由制备型hplc提纯，以产生23mg的标题产物(60％)。
ms:[m+h]+＝360.2
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.75(t,1h),7.63–7.56(m,2h),7.53–7.47(m,1h),6.53–6.45(m,2h),4.16–4.09(m,1h),3.71–3.64(m,1h),3.07–2.96(m,2h),2.78(dd,1h),2.23–2.16(m,2h),0.84(s,9h)。
实施例38
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(1,5-二甲基-1h-吡唑-3-基)甲酮
中间体6e(50mg，0.18mmol)在室温在dcm(1ml)中被悬浮。tea(52μl，37mmol)被加入，并且悬浮液变成澄清的黄色溶液。为固体的1,5-二甲基-1h-吡唑-3-羰基氯(28mg，18mmol)被加入。反应溶液在室温被搅拌2h。溶剂在真空中被除去。副产物通过将粗产物溶解在meoh中并且用乙醚沉淀被除去。然后，溶剂在真空中被除去，并且剩余物被溶解在10mletoac中，并且用1mkhso4洗3次，以给出符合期望的产物(34mg，53％产率)。
ms:[m+h]+＝369.1,[2m+h]+＝759.2
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.77(t,1h),7.66–7.56(m,2h),7.50(t,1h),7.34(d,1h),6.50(d,1h),4.30(t,1h),4.01(dd,1h),3.80(d,3h),3.06(td,1h),2.36–2.10(m,5h)。
实施例39
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(噻唑-4-基)甲酮
中间体6e(50mg，0.18mmol)在室温在dcm(1ml)中被悬浮。tea(52μl，0.37mmol)被加入，并且悬浮液变成澄清的黄色溶液。接着，为固体的1,3-噻唑-4-羰基氯(26mg，0.18mmol)被加入。反应溶液在室温被搅拌2h。溶剂在真空中被除去，并且粗产物使用快速柱色谱hex:etoac1:1提纯，tlcrf＝0.24。用et2o研磨将产物纯度从91％提高到93％。最后的纯化步骤在制备型hplc上进行，其产生具有99.7％的纯度的11mg符合期望的产物(为甲酸盐)(17％产率)。
ms:[m+h]+＝358.1
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.30–9.16(m,1h),8.44(d,1h),7.78(t,1h),7.61(tt,2h),7.55–7.45(m,1h),7.35(d,1h),4.34–4.23(d,1h),4.03(dd,1h),3.15(dd,1h),2.32–2.22(m,2h)。
实施例40
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(4,4-二氟环己基)甲酮
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(37μl，26mmol)，随后是4,4-二氟环己烷-1-羰基氯(23mg,0.13mmol)。搅拌在室温被持续整夜。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层用盐水萃取，并且在减压下蒸发至干燥。粗产物使用dcm：meoh95：5作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯，以给出38.0mg。所获得的产物使用作为洗脱液的acoet:己烷(1:1)通过制备型tlc并且最后通过制备型hplc进一步提纯，以给出17mg的标题化合物(41％产率)。
ms:[2m+na]+＝807.3
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.78–7.75(m,1h),7.64–7.58(m,2h),7.54–7.48(m,1h),6.65(d,1h主要旋转异构体),6.45(d,1h次要旋转异构体),4.36–4.27(m,1h主要旋转异构体),4.17–4.10(m,1h次要旋转异构体),3.96–3.89(m,1h次要旋转异构体),3.89–3.80(m,1h主要旋转异构体),2.95(td,1h),2.88–2.79(m,1h),2.31–2.20(m,2h),2.18–2.00(m,2h),1.98–1.75(m,4h),1.69–1.52(m,2h)。
实施例41
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(1-甲基-哌啶-4-基)甲酮
中间体6e(30mg，0.11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.3ml)中。催化剂dmf被加入，然后是1-甲基哌啶-4-羧酸(30mg，0.21mmol)和dipea(55μl，32mmol)。搅拌在室温被持续15分钟。在15分钟之后，hatu(85mg，0.22mmol)被加入，并且搅拌在室温被持续整夜。碳酸氢钠饱和水溶液被加入(5ml)，并且反应混合物被用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在减压下蒸发至干燥。粗产物使用作为洗脱液的dcm:meoh9:1在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯，以给出20mg的固体标题化合物(51％产率)。
ms:[m+h]+＝372.3
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.78–7.74(m,1h),7.64–7.58(m,2h),7.54–7.47(m,1h),6.64(d,1h主要旋转异构体),6.45(d,1h次要旋转异构体),4.35–4.28(m,1h主要旋转异构体),4.18–4.11(m,1h次要旋转异构体),3.96–3.80(m,1h),3.27–3.00(m,3h),3.00–2.89(m,1h),2.84–2.71(m,1h),2.31–2.23(m,1h),2.21–2.08(m,1h),1.92–1.58(m,4h),1.21–1.11(m,1h)。
来自ch3基团的信号被dmso-d6覆盖。
实施例42
3-(3-氯苯基乙炔基)-n-(2-甲氧基乙基)-n-甲基-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
3-(3-氯苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羰基氯(中间体42a)
三光气(18mg，0.06mmol)在氩气氛下被溶解于干燥的dcm(0.4ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且吡啶(14μl，0.18mmol)被加入。在5min之后，被溶解于干燥的dcm中的中间体6e(50mg，0.18mmol)被缓慢加入。反应混合物被升温至室温。搅拌在室温被持续2小时。反应用1mhcl(0.35ml)急冷，用dcm(10ml,5x)萃取，并且用nahco3的饱和水溶液(5ml)洗。有机层在na2so4上干燥、浓缩并且在减压下干燥，以给出73mg粗产物。粗产物使用etoac:dcm3:1作为洗脱液通过快速柱色谱提纯。获得了35mg黄色稠油。产物在下一个步骤中被立即使用而没有进一步提纯。
3-(3-氯苯基乙炔基)-n-(2-甲氧基乙基)-n-甲基-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-酰胺
中间体42a(35mg，11mmol)在氩气氛下被溶解在dcm(0.6ml)中。反应混合物被冷却至0℃，并且加入三乙胺(32μl，0.23mmol)，随后是(2-甲氧基乙基)甲胺(25μl，0.23mmol)。搅拌在室温被持续2小时。加入水(5ml)，并且反应混合物用dcm(10ml，3x)萃取。有机层在na2so4上干燥，并且在减压下蒸发至干燥，以给出53mg的粗产物。粗产物使用etoac:dcm3:1作为洗脱液在二氧化硅上通过快速柱色谱提纯。获得了25mg的黄色稠油(61％产率)。
ms:[2m+na]+＝745.3
1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.75(t,1h),7.64–7.55(m,2h),7.54–7.46(m,1h),6.52(d,1h),4.12(t,1h),3.61–3.39(m,4h),3.31–3.27(m,1h),3.26(s,3h),3.18–3.05(m,1h),2.88(s,3h),2.25–2.01(m,2h)。
实施例43
3-(3-氟苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-吗啉-4-基-甲酮
叔丁基-(3-三甲基甲硅烷基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体20b，可替代的步骤)
当搅拌时，叔丁基-2,3-二氢吡咯-1-羧酸乙酯(500mg，2.95mmol)和3-三甲基甲硅烷基丙-2-炔醛肟(459.06mg，3.25mmol)在mtbe(15ml)中的溶液被冷却至0-5℃。次氯酸钠(2.806ml，5.91mmol)被滴加，保持反应温度低于20℃。反应混合物在相同温度被搅拌3小时；然后，反应混合物用na2so3溶液急冷；两相被分离，有机层用水和盐水洗，在na2so4上干燥、过滤并且在真空中蒸发至干燥。粗剩余物用从95:5至7:3的梯度石油醚:etoac通过自动快速色谱(biotagesp1,筒式snap25)提纯。用从5:5至0:10的梯度石油醚:etoac通过自动快速色谱(isolerabiotage)的进一步提纯给予250mg的标题产物。产率：27％。
叔丁基-3-(3-氟苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体43a)
标题化合物使用上述针对中间体20c报告的方法合成，除了用1-氟代-3-碘代-苯代替2-溴代-6-甲基吡啶。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物用自动快速色谱(isolerabiotage；从95:5至7:3的梯度石油醚:etoac)提纯，以给出标题化合物。产率：76％。
ms:[m+h]+＝331.65
3-(3-氟苯基乙炔基)-4,5,6,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑(中间体43b)
标题化合物使用上述针对中间体6e报告的方法合成，除了用中间体43a代替中间体6d。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物在下一个步骤中被使用而没有进一步提纯。产率：95％(粗产物)。
ms:[m+h]+＝231.54
3-(3-氟苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-吗啉-4-基-甲酮
向中间体43b(50mg，0.21mmol)在ch2cl2(6ml)中的溶液中加入tea(56μl，0.43mmol)，并且然后滴加吗啉-4-羰基氯(38.1μl，0.32mmol)。反应物在50℃被加热4小时。然后，反应混合物被倒入水中，有机层被分离，在na2so4上干燥并且在真空中蒸发至干燥。粗产物通过快速色谱(
ms:[m+h]+＝344.54
1hnmr(400mhz,dmso-d6)ppm7.45-7.58(m,3h)7.34-7.43(m,1h)6.54(d,1h)4.10-4.19(m,1h)3.51-3.69(m,5h)3.30-3.38(m,2h)3.19-3.28(m,2h)3.12(td,1h)2.05-2.25(m,2h)
实施例44
3-(3-氟苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(吡咯烷-1-基)甲酮
标题化合物使用上述针对实施例43报告的方法合成，除了将4-吡咯烷基羰基氯代替为吗啉基-4-羰基氯。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物通过快速色谱(
ms:[m+h]+＝328.54
1hnmr(400mhz,dmso-d6)ppm7.45-7.58(m,3h)7.29-7.44(m,1h)6.54(d,1h)4.19(dd,1h)3.68(dd,1h)3.35-3.46(m,2h)3.23-3.28(m,2h)3.11(td,1h)2.04-2.28(m,2h)1.59-1.93(m,4h)
实施例45
3-苯基乙炔基-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(吗啉-4-基)甲酮
叔丁基-3-(2-苯乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体45a)
标题化合物使用上述针对中间体20c报告的方法合成，除了用碘苯代替2-溴代-6-甲基吡啶。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物借助于自动快速色谱(isolera–biotage；从95:5至7:3的梯度石油醚:etoac)提纯，以给出标题化合物。产率：59％。
ms:[m+h]+＝313.51
3-(2-苯乙炔基)-4,5,6,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑(中间体45b)
标题化合物使用上述针对中间体6e报告的方法合成，除了用中间体45a代替中间体6d。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物在下一个步骤中被使用而没有进一步提纯。产率：98％(粗产物)。
ms:[m+h]+＝213.54
3-苯乙炔基-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(吗啉-4-基)甲酮
标题化合物使用上述针对实施例43报告的方法合成，除了使用中间体45b代替中间体43b。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物通过快速色谱(
ms:[m+h]+＝326.55
1hnmr(400mhz,dmso-d6)ppm7.59-7.66(m,2h)7.43-7.56(m,3h)6.53(d,1h)4.13(dd,1h)3.52-3.69(m,5h)3.33-3.41(m,2h)3.19-3.28(m,2h)3.13(td,1h)2.05-2.24(m,2h)
实施例46
3-(3-溴苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(吡咯烷-1-基)甲酮
叔丁基-3-(3-溴苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-羧酸乙酯(中间体46a)
标题化合物使用上述针对中间体20c报告的方法合成，除了用1-溴代-3-碘代-苯代替2-溴代-6-甲基吡啶。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物借助于自动快速色谱(isolera–biotage；从9:1至6:4的梯度石油醚:etoac)提纯，以给出标题化合物。产率：42％。
ms:[m+h]+＝392.66
3-(3-溴苯基乙炔基)-4,5,6,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑(中间体46b)
标题化合物使用上述针对中间体6e报告的方法合成，除了用中间体46a代替中间体6d。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物在下一个步骤中被使用而没有进一步提纯。产率：89％(粗产物)。
ms:[m+h]+＝292.78
3-(3-溴苯基乙炔基)-3a,4,5,6a-四氢吡咯并[3,2-d]异噁唑-6-基-(吡咯烷-1-基)甲酮
标题化合物使用上述针对实施例43报告的方法合成，除了使用中间体46b代替中间体43b，并且将4-吡咯烷基羰基氯代替为吗啉-4-羰基氯。在通常的分离净化实验步骤之后，剩余物通过快速色谱(
ms:[m+h]+＝389.71
1hnmr(400mhz,dmso-d6)ppm7.87(m,1h),7.72(m,1h),7.64(m,1h),7.39-7.48(m,1h),6.54(d,1h),4.07-4.18(m,1h),3.60-3.72(m,1h),3.34-3.44(m,2h),3.31(d,2h),3.11(m,1h),2.03-2.30(m,2h),1.64-1.94(m,4h)
生物学测定
使用四环素调控表达系统(t-rextm系统，invitrogenlifetechnologies)，使用编码人mglu5受体的可诱导的表达载体产生稳定转染的细胞系。将人mglur5开放阅读框(orf)(即全面的终止密码子)克隆到携带teto2的pcdna4/to/myc-histma载体中。插入位点是用于mglur5受体的hindiii-psti。然后，使用fugene协议(roche)将所获得的构建体转染到t-rexchotm细胞系中；chot-rextm细胞系在10μg/ml的杀稻瘟菌素的选择下稳定表达tet阻抑蛋白(来自pcdna6/tr质粒)。用1mg/ml博莱霉素选择，并且在5％co2的气氛中，在37℃，维持在补充有透析的fbs、博莱霉素、杀稻瘟菌素的ultracho培养基(lonza)中，稳定的克隆被获得。在结合实验前用1μg/ml四环素去抑制h-mglur5受体的表达18h，而在钙荧光实验之前分别用3ng/ml和10ng/ml四环素去抑制h-mglur5受体的表达18h。
对天然mglur5和mglur5受体亚型的放射性配体结合测定
根据anderson(andersonetal.,jpharmacol.exp.ther.,(2002),vol.303(3),pp.1044-51)的方法伴随一些修正评估对跨膜的谷氨酸代谢型mglur5受体亚型的亲和力。克隆的mglur5通过在ph7.4的20mmhepes、2mmmgcl2、2mmcacl2中重悬chot-rexh-mglur5细胞(50μg/孔)被获得，然后在不存在或存在竞争药物的条件下，在1ml最终体积中，克隆的mglur5与4nm[3h]mpep在25℃被孵育60min。非特异性结合在10μmmpep的存在下被确定。通过加入ph7.4的冷的tris缓冲液并且快速过滤通过0.2％聚乙烯亚胺预处理的filtermat1204-401(perkinelmer)过滤器来终止孵育。随后，用冷的缓冲液洗涤过滤器，并且通过液闪光谱法(betaplate1204bs-wallac)对保留在过滤器上的放射性进行计数。
钙荧光测量
将细胞以80000细胞/孔的密度接种到补充有10％透析的fbs的rpmi(没有酚红、没有l-谷氨酰胺；gibcolifetechnologies，ca)中的黑壁、透明底部、96孔板中。在用四环素孵育18小时后，将细胞在具有20μmhepes(sigma)和2.5mm丙磺舒(sigma)的hanks平衡盐溶液(hbss，gibcolifetechnologies，ca)中在37℃装载2mmca2+敏感荧光染料fluo-4/am(分子探针)1小时。用hbss洗细胞三次以除去细胞外染料。通过使用荧光酶标仪flexstationiii(分子器件)，以1.5s的采样间隔测量荧光信号60s。
使用用作激动剂的使君子氨酸的ec80确定拮抗剂效能，并且使用激动剂(使君子氨酸或谷氨酸)的ec20确定mglu5活化的增强。在施用激动剂之前10分钟施用化合物。对于结合和钙测定研究，化合物根据其溶解度被溶解在dmso或者脱矿质水中。所有报告的剂量是相应的盐或碱的剂量。
统计学分析
通过使用软件prism4.0(graphpad，sandiego，ca)的非线性回归分析确定测试化合物对天然和克隆的mglur1和mglur5亚型的抑制曲线。通过程序估计ic50值和pseudo-hill斜率系数。抑制常数ki的值根据方程ki＝ic50/(1+[l]/kd)被计算，其中[l]是放射性配体的浓度，并且kd是放射性配体-受体复合物的平衡解离常数(chengetal.,biochem.pharmacol.(1973),vol.22,pp.3099–3108)。
根据本发明制备的一些感兴趣的化合物的被选择的数据在下表3中被示出。
表3：生物测试数据。