1.一种用于捕获循环肿瘤细胞团簇的微流体芯片,其特征在于,包括:
采用负性光刻胶制成设计模板,其上设置三角形矩阵,设计模板厚度为50um~100um,三角形之间间距为10um-20um。
2.根据权利要求1所述的微流体芯片,其特征在于:所述三角形形状为等边三角形,三角形的边长为92um,三角形之间间距为12um。
3.根据权利要求1所述的微流体芯片,其特征在于:所述负性光刻胶采用SU8胶制成设计模板。
4.根据权利要求3所述的微流体芯片,其特征在于:所述负性光刻胶厚度为50um,厚度均匀,避免造成尺寸大小不均匀。
5.一种如权利要求1所述的用于捕获循环肿瘤细胞团簇的微流体芯片的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取出PDMS材料,按重量百分比10:1混合搅拌;
(2)将混合好的PDMS放入真空干燥器中抽真空去除因搅拌产生的气泡;
(3)放置30分钟,待气泡完全消失,取出PDMS准备浇注,将PDMS倒入芯片模子上;
(4)将浇注的模子放入真空干燥器中抽真空;
(5)放置至气泡消除;
(6)将模子取出,平放于70度烘箱硬化45m分钟;
(7)将硬化后的模子放置超净工作台面,用手术刀沿着硅片周边切开,用镊子夹起;
(8)切开后的PDMS,将内侧翻过来,用打孔器在头尾两处分别打孔;
(9)将PDMS内侧面朝上,然后将微流体基板与玻璃板置于氧等离子清洗机内,用最大功率纯氧处理表面1分钟;
(10)把PDMS微流体基板与玻璃板从等离子机里取出,放置于超净工作台,用镊子夹取PDMS微流体基板处理面与玻璃板迅速封合;
(11)将封合好的PDMS放置于80℃烘箱20分钟,使其充分结合;
(12)插入导管,完成。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:还包括血样处理步骤,使用加入抗凝剂的FPBS稀释血样,血样浓度过高会堵塞一些芯片通道,导致收集效率降低。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:步骤(9)中,使用效果稳定的微量注射泵控制样品的流速,经过反复实验,确定流速为2.5ml/hr时捕获效率达到最高。
8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:在4℃时更利于肿瘤团簇细胞的捕获和洗脱。