从青稞谷粒中提取和纯化β‑葡聚糖的方法与流程

技术特征：

1.一种从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A1、原料预处理：将选出的青稞谷粒研磨后过0.4mm筛网，即得粉末样品；

A2、酶解：将粉末样品加蒸馏水溶解，依次加入耐高温α-淀粉酶、木瓜蛋白酶、糖化酶进行酶解，将酶解液离心，得上清液a；

A3、醇沉：在上清液a中滴加无水乙醇，静置过夜后离心，得醇沉沉淀物；

A4、真空冷冻干燥：醇沉沉淀物用蒸馏水复溶，60～90℃水浴蒸发浓缩，所得浓缩液-20℃下冷冻后，真空冷冻干燥24～48h，得固体粉末；

A5、脱脂：将固体粉末在60～90℃水浴条件下反复抽提6～8h；然后30～50℃下烘干即得粗制样品；

A6、洗脱：取粗制样品加蒸馏水溶解后离心，得上清液b，将上清液b先经DE-32洗脱，再经S-400洗脱后即可得到高纯度β-葡聚糖。

2.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，步骤A2中，所述酶解的具体采用以下方法：在溶解后的粉末样品中加入耐高温α-淀粉酶，80～100℃水浴1～2h；水浴温度调至60～80℃，加入木瓜蛋白酶，水浴1～2h；100℃水浴灭酶10～20min，冷却后加入糖化酶，60～80℃水浴1～2h；100℃水浴灭酶10～20min，冷却后60～90℃水浴2～4h，得酶解液。

3.如权利要求1或2所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述固体样品以10g计，耐高温α-淀粉酶、木瓜蛋白酶、糖化酶的加入量分别为50～100μL、10～20mg、100～500μL。

4.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，步骤A3中，所述上清液a与无水乙醇的体积比为1：2～3。

5.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述离心的条件均为：转速3000rmp、离心15min。

6.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，步骤A5中，所述抽提的溶剂为正己烷。

7.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述经DE-32洗脱时，流速为0.1～1.0mL/min，流动相为蒸馏水；层析柱的规格为：2.6cmx 30cm。

8.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述经S-400洗脱时，流速为0.1～1.0mL/min，流动相为蒸馏水；层析柱的规格为：1.6cmx 100cm。

9.如权利要求1所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述上清液b经S-400洗脱后分开收集单一糖分的滤液，将含β-葡聚糖的滤液经60～90℃水浴蒸发浓缩至约5mL；-20℃冷冻后，真空冷冻干燥24～48h即得纯化的β-葡聚糖。

10.如权利要求9所述的从青稞谷粒中提取和纯化β-葡聚糖的方法，其特征在于，所述单一糖分的滤液的糖分纯度采用高效液相色谱仪测定，采用的糖柱型号为SUGARKS-805检测器温度为30℃，柱温为30～60℃；流动相为蒸馏水，流速为0.5～1.0mL/min。