本发明涉及一种平菇母种培养基的制备方法及平菇母种培养基，属于培养基制备技术领域。
背景技术：
食用菌菌种一般分母种、原种和栽培种。母种是直接从子实体(组织或孢子)、菇木(耳木)分离得到的菌种。培养基常采用营养丰富、较易吸收的马铃薯琼脂培养基(pda培养基)。
平菇母种一般采用斜面保藏法，一般将平菇母种放入冰箱4℃进行保藏，但是在此温度下，平菇菌丝的新陈代谢活动并未停止，其平菇菌丝代谢活动旺盛，变异速度也较快。
pda培养基为平菇母种保藏的常用培养基，此培养基制作方法简单，成本较低，便于保藏。但是常规的pda培养基中，葡萄糖为主要碳源，培养基中缺乏适于平菇菌丝生长的纤维素，因此平菇母种长期保藏在此培养基中，平菇菌丝分解纤维素、半纤维素的能力下降，最终造成菌种的退化。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种平菇母种培养基的制备方法及采用该方法制得的平菇母种培养基，该培养基能有效防止菌种的退化。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种平菇母种培养基的制备方法，包括如下步骤：
1)a、取棉籽壳25-35g、玉米芯65-75g，置于400-500ml水中煮沸20-40min，过滤得滤液，即为纤维素滤汁；
b、取150-170g马铃薯置于400-500ml水中煮沸20-40min，过滤得滤液，即为马铃薯滤汁；
2)将将步骤1)得到的马铃薯滤汁、纤维素滤汁与10-16g葡萄糖、15-17g琼脂混合，加水补至1000ml，灭菌即得。
步骤1)的a中，将所述棉籽壳、玉米芯置于400-500ml水中浸泡6-10小时后再煮沸。
优选的，步骤1)的a中，将所述棉籽壳、玉米芯分别用四层纱布包起。
步骤1)的a中所述过滤为采用两层纱布过滤。
步骤1)的b中所述过滤为采用四层纱布过滤。
步骤1)的b中所述马铃薯为去皮后切片的马铃薯。
所述步骤2)中灭菌为121℃高压蒸汽灭菌35-45min。
所述棉籽壳为新鲜、无霉变的棉籽壳。
所述玉米芯为新鲜、无霉变的玉米芯。
步骤1)的步骤b中所述煮沸为煮至马铃薯熟而不烂。
本发明制得的平菇母种培养基在常规的pda培养基的基础上加入棉籽壳与玉米芯煮的滤汁，添加了适于平菇菌丝生长的纤维素天然培养基，有效提高了平菇菌丝分解纤维素的能力，有效的防止平菇菌种的退化，并对平菇菌种有一定的复壮作用，有利于保持平菇原有的菌种特性。
本发明的制得的平菇母种培养基在常规的pda培养基进行改进，降低了原料中马铃薯、葡萄糖、琼脂粉的含量，降低pda培养基中营养浓度，有利于降低平菇菌丝新陈代谢活动，从而降低平菇母种的变异速度，防止平菇优良性状的退化。
本发明的平菇母种培养基的制备方法操作简便，适于大量生产。
使用本发明制得的平菇母种培养基转接的平菇母种，菌丝洁白、浓密、粗壮、饱满、均匀，符合平菇优良母种的标准，洁白浓密。使用本发明制得的平菇母种培养基培养出的平菇母种用于制作平菇原种时，菌丝生长旺盛，洁白浓密，接种后，菌丝生长速度较快，分解纤维素的能力较强，同时抗病能力强。同时该培养基母种接种成功率达到99％以上，适于推广。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明。
实施例1
本实施例中平菇母种培养基的制备方法，包括如下步骤：
1)a、取新鲜、无霉变的棉籽壳30g、玉米芯70g，分别用四层纱布包起，置于500ml水中浸泡10h，然后煮沸30min，采用两层纱布过滤得滤液，即为纤维素滤汁；
b、取去皮后切片的160g马铃薯，置于500ml水中煮沸30min，至马铃薯熟而不烂，采用四层纱布过滤得滤液，即为马铃薯滤汁；
2)将马铃薯滤汁、纤维素滤汁与10g葡萄糖、16g琼脂混合，加水补至1000ml，121℃高压蒸汽灭菌35min即得。
本实施例中的平菇母种培养基由以上方法制备得到。
实施例2
本实施例中平菇母种培养基的制备方法，包括如下步骤：
1)a、取新鲜、无霉变的棉籽壳25g、玉米芯75g，分别用四层纱布包起，置于400ml水中浸泡6h，然后煮沸20min，采用两层纱布过滤得滤液，即为纤维素滤汁；
b、取去皮后切片的150g马铃薯，置于400ml水中煮沸20min，至马铃薯熟而不烂，采用四层纱布过滤得滤液，即为马铃薯滤汁；
2)将马铃薯滤汁、纤维素滤汁与16g葡萄糖、15g琼脂混合，加水补至1000ml，121℃高压蒸汽灭菌40min即得。
本实施例中的平菇母种培养基由以上方法制备得到。
实施例3
本实施例中平菇母种培养基的制备方法，包括如下步骤：
1)a、取新鲜、无霉变的棉籽壳35g、玉米芯65g，分别用四层纱布包起，置于450ml水中浸泡8h，然后煮沸40min，采用两层纱布过滤得滤液，即为纤维素滤汁；
b、取去皮后切片的170g马铃薯，置于450ml水中煮沸40min，至马铃薯熟而不烂，采用四层纱布过滤得滤液，即为马铃薯滤汁；
2)将马铃薯滤汁、纤维素滤汁与11g葡萄糖、17g琼脂混合，加水补至1000ml，121℃高压蒸汽灭菌45min即得。
本实施例中的平菇母种培养基由以上方法制备得到。
对比例
本对比例中的平菇母种培养基为现有常用的pda培养基。
试验例
使用实施例1及对比例中的平菇母种培养基培养平菇母种，观察培养结果：
具体步骤为：
(1)将同一平菇母种分别接种于上述培养基的试管(18mm×18cm)与培养皿(90mm×90mm)中，置于25℃的恒温箱中培养，每个处理3个重复。每天同一时间观察记录菌丝生长情况及菌落形态。每天根据菌丝生长情况进行划线，菌丝长满后统计菌丝生长速度，同时记录试管与培养皿菌丝长满的天数。
(2)分别将实施例1中的培养基与现有pda培养基所培养的的母种，同时用于平菇原种(20cm×75mm)的制作(原种培养料配方采用常规配方)，置于同样的条件观察其菌丝生长情况。
经过试验，25℃条件下，不同处理的平菇菌种块接种后1天均可萌发。但是各个处理菌丝长势、菌丝生长速度及菌丝长满有一定的差异。各个处理在同温度条件下培养，每天进行划线，菌丝长满后统计菌丝平均生长速度，具体菌丝生长情况见表1：
表1各处理下菌丝特征及平均生长速度(cm/d)及长势
注：菌丝长势：+++洁白浓密；++++洁白浓密粗壮
由表1可知，在试管与培养皿的培养基中，pda培养基的生长速度快于实施例1的培养基，但是菌丝长势却不如实施例1的培养基。在原种制作中，实施例1的培养基充分表现其优势，分解纤维素能力较强，因此菌丝生长速度大于pda培养基，且菌丝长势较好，洁白、浓密、粗壮。
使用本发明制得的平菇母种培养基转接的平菇母种，菌丝洁白、浓密、粗壮、饱满、均匀，符合平菇优良母种的标准。使用本发明制得的平菇母种培养基培养出的平菇母种用于制作平菇原种时，菌丝生长旺盛，洁白浓密，接种后，菌丝生长速度较快，分解纤维素的能力较强，同时抗病能力强。同时该培养基母种接种成功率达到99％以上，适于推广。