一种富硒螺旋藻蛋白水解肽的制作方法

文档序号:13274525阅读:339来源:国知局

本发明涉及生物加工技术领域,尤其是涉及一种富硒螺旋藻蛋白水解肽。



背景技术:

螺旋藻体内优质高蛋白含量高达60-70%,是鱼类的3倍,是肉类的4倍,是鸡蛋的5倍多,而叶绿素含量是蔬菜的10倍多。此外,维生素b3的含量大约是大豆的6.4倍;β-胡萝卜素大约是普通胡萝卜中含量的4倍;螺旋藻中大约含有11种脂肪酸,其中的亚油酸和亚麻酸都是人体必需脂肪酸;螺旋藻含有人和动物必需的常量和微量元素,不但含有大量的铁,而且可以与蛋白质和藻蓝素螯合形成有机硒,因而有利于被吸收利用,是一种理想的营养保健品,市场前景美好。

现有技术如授权公告号为cn102851344b的中国发明专利,公开了一种螺旋藻抗肿瘤多肽的制备方法,通过木瓜蛋白酶酶解螺旋藻蛋白制得螺旋藻多肽,但是该方法中螺旋藻多肽有机硒含量低,且酶解不彻底,螺旋藻资源没有得到充分利用。



技术实现要素:

本发明的目的在于提供一种富硒螺旋藻蛋白水解肽,该水解肽有机硒含量大,人体吸收利用率高,生物活性强,且螺旋藻蛋白的酶解彻底,酶解效率高。

本发明针对背景技术中提到的问题,采取的技术方案为:一种富硒螺旋藻蛋白水解肽,制备方法包括蛋白提取,酶解,脱色。工艺方法简单,制备的一种富硒螺旋藻蛋白水解肽质量稳定,生物活性好,具有较好的应用效果,且螺旋藻资源利用率高,增加了产品的经济效益。

作为优选,蛋白提取过程中,准确称取5-8份螺旋藻粉,用液氮充分研磨,加水混合,设置料液比为1/20-1/25,常温下磁力搅拌30-35min,送入均质机,在5000-8000r/min下均质2-3min,以570-580w的功率超声20-25min,将获得的溶液于8000-10000r/min条件下离心25-30min,将蛋白上清液真空冷冻干燥,得螺旋藻蛋白,置于-20℃下保存。采用均质和超声对螺旋藻进行破壁处理,再以水为溶剂提取螺旋藻蛋白,蛋白提取率高,保留了螺旋藻的全蛋白,为后续的酶解过程提供了丰富的蛋白质,提高了酶解液中多肽的种类,且水提蛋白的复溶性好,使用方便。

作为优选,酶解过程中,将螺旋藻蛋白与超纯水混合,设置料水比为1/8-1/10,加入木瓜蛋白酶300-400u/g和活性多肽,活性多肽占螺旋藻蛋白质量的0.1-0.2%,调ph为6-8,在40-43℃下酶解2.5-3.5h,灭酶活,离心分离得酶解液。该条件下,木瓜蛋白酶的稳定性高,不易变性,底物转变成产物的速度快,酶解效率高,产物主要以低分子的短肽和游离氨基酸为主,且有机硒含量大,使螺旋藻资源得到了充分利用。

作为优选,酶解过程中加入的活性多肽的氨基酸序列为:hshacasrcrrarrcgyyvshrgrcycrclrcrvlhpgklcvcvncsr。在ph为6-8的条件下,活性多肽促进了底物与木瓜蛋白酶活性中心的结合,提高了肽键弯曲变形的程度,增加了肽键的活性,使肽键更易受到水分子的攻击而发生解离,使蛋白的酶解更加彻底。

作为优选,脱色过程中,取10-13份酶解液,加入0.1-0.13份活性炭,在ph为6-7,温度为52-57℃下震荡20-25min,离心分离得富硒螺旋藻蛋白水解肽。脱色过程将脱辅基蛋白与色基间的硫醚键断裂,极大地降低了色基的残留,提高了制备的蛋白水解肽的品质,增加了产品的经济效益。

与现有技术相比,本发明的优点在于:本发明公开的一种富硒螺旋藻蛋白水解肽有机硒含量大,人体吸收利用率高,生物活性强;制备工艺方法简单,产品质量稳定性好,应用效果好,具有良好的经济,是一种绿色环保工艺;加入的活性多肽促进了底物与木瓜蛋白酶活性中心的结合,提高了肽键弯曲变形的程度,增加了肽键的活性,使肽键更易受到水分子的攻击而发生解离,使蛋白的酶解更加彻底。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明做进一步说明:

实施例1:

一种富硒螺旋藻蛋白水解肽,制备方法包括:

1)蛋白提取:准确称取5份螺旋藻粉,用液氮充分研磨,加水混合,设置料液比为1/20,常温下磁力搅拌30min,送入均质机,在5000r/min下均质2min,以570w的功率超声20min,将获得的溶液于8000r/min条件下离心25min,将蛋白上清液真空冷冻干燥,得螺旋藻蛋白,置于-20℃下保存。采用均质和超声对螺旋藻进行破壁处理,再以水为溶剂提取螺旋藻蛋白,蛋白提取率高,保留了螺旋藻的全蛋白,为后续的酶解过程提供了丰富的蛋白质,提高了酶解液中多肽的种类,且水提蛋白的复溶性好,使用方便;

2)酶解:将螺旋藻蛋白与超纯水混合,设置料水比为1/8,加入木瓜蛋白酶300u/g和活性多肽,活性多肽占螺旋藻蛋白质量的0.1%,调ph为6,在40℃下酶解2.5h,灭酶活,离心分离得酶解液。活性多肽的氨基酸序列为:hshacasrcrrarrcgyyvshrgrcycrclrcrvlhpgklcvcvncsr。该条件下,木瓜蛋白酶的稳定性高,不易变性,底物转变成产物的速度快,酶解效率高,产物主要以低分子的短肽和游离氨基酸为主,有机硒含量大,使螺旋藻资源得到了充分利用;

3)脱色:取10份酶解液,加入0.1份活性炭,在ph为6,温度为52℃下震荡20min,离心分离得富硒螺旋藻蛋白水解肽。脱色过程将脱辅基蛋白与色基间的硫醚键断裂,极大地降低了色基的残留,提高了制备的蛋白水解肽的品质,增加了产品的经济效益。

实施例2:

一种富硒螺旋藻蛋白水解肽,制备方法包括:首先是蛋白提取:准确称取8份螺旋藻粉,用液氮充分研磨,加水混合,设置料液比为1/25,常温下磁力搅拌35min,送入均质机,在8000r/min下均质3min,以580w的功率超声25min,将获得的溶液于10000r/min条件下离心30min,将蛋白上清液真空冷冻干燥,得螺旋藻蛋白,置于-20℃下保存;接着是酶解:将螺旋藻蛋白与超纯水混合,设置料水比为1/10,加入木瓜蛋白酶400u/g和活性多肽,活性多肽占螺旋藻蛋白质量的0.2%,活性多肽的氨基酸序列为:hshacasrcrrarrcgyyvshrgrcycrclrcrvlhpgklcvcvncsr。调ph为8,在43℃下酶解3.5h,灭酶活,离心分离得酶解液;最后是脱色:取13份酶解液,加入0.13份活性炭,在ph为7,温度为57℃下震荡25min,离心分离得富硒螺旋藻蛋白水解肽。该条件下,制备的一种富硒螺旋藻蛋白水解肽质量稳定,生物活性好,具有较好的应用效果,且螺旋藻资源利用率高,增加了产品的经济效益。

本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知,在此不进行赘述。

以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明,应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例,并不用于限制本发明,凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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