本发明涉及水飞蓟技术领域，具体涉及一种水飞蓟宾的提取方法。
背景技术：
水飞蓟(silybummarianum(l.)gaertn)是菊科水飞蓟属植物，是一种优良的药用植物和油料植物，以干燥成熟果实入药，味苦，性凉，归肝、胆经，具有清热解毒，舒肝利胆的功能，用于治疗肝胆湿热、胁痛、黄疸。
水飞蓟原产于欧洲、地中海地区、北非及亚洲中部。1952年北京植物园从英国引进作观赏植物栽培，1972年由中国土产畜产进出口公司天津土产分公司从德国引种作为药用植物栽培。江苏沿海地区从上世纪九十年代引进水飞蓟进行栽培，目前在东台地区已有大面积种植，并已成为当地一种重要的经济作物。
从水飞蓟的种子中可提取得到水飞蓟素。水飞蓟素主要分布于种壳中，含量约为壳中的3％～5％，种仁中含量极少。水飞蓟素是一种黄酮类化合物，其主要成分为水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁和水飞蓟亭等物质，水飞蓟宾是水飞蓟素中的主要成分。水飞蓟宾能保护及稳定肝细胞膜，对抗肝细胞坏死，减轻脂肪变性，抑制谷丙转氨酶的增高，临床用于治疗急、慢性肝炎、早期肝硬化及中毒性肝炎等。水飞蓟宾还能防止酒精、化学毒素、重金属、药物、食物毒素、环境污染等对肝脏造成的损伤，促进肝细胞的再生和修复，所以被称为“天然的保肝药”。目前国内已开发出水飞蓟的相关产品益肝灵片及复方益肝灵片，国外也有利肝隆片剂和胶囊剂。水飞蓟种仁中含有丰富的水飞蓟油，水飞蓟油颜色浅黄透明，无臭无味，无毒,含大量亚油酸，其营养价值与豆油相等，具有降低胆固醇的作用。提取水飞蓟素后的药渣含有许多淀粉和蛋白质，可作饲料和酿酒用。水飞蓟还是欧洲传统的观赏植物，亦可作蜜源植物。
目前，缺乏一种无有害有毒溶剂残留的水飞蓟宾的提取方法。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种无有害有毒溶剂残留的水飞蓟宾的提取方法。
为达到上述目的，本发明采用了下列技术方案：本发明的一种水飞蓟宾的提取方法，包括如下步骤：(1)将待萃取的水飞蓟壳清洗干净后沥干水分，然后进行微波干燥，使其中水分降到10％以下；
(2)加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮；
(3)总黄酮加水溶解后，取得沉淀物加入乙醇溶液，溶解得水飞蓟宾粗品，采用丙酮为溶剂，加入水飞蓟宾粗品进行加热溶解，加热至回流，其中丙酮与水飞蓟宾粗品的质量比为8-16:1；
(4)采用大孔阳离子交换树脂进行吸附，从而得到饱和的大孔阳离子交换树脂；将饱和的大孔树脂进行酸洗，然后进行醇洗，从而得到水飞蓟宾的乙醇溶液；
(5)在10-30℃冷却搅拌析晶，冷却至13℃以下，搅拌4-6小时；过滤，95％乙醇洗涤，抽干；滤饼置于在60-85℃，干燥，得到水飞蓟宾成品；
(6)将水飞蓟宾成品重新加入到纯水中，然后加热升温，从而使得水飞蓟宾成品中残留的乙醇溶解进纯水中；对纯水中沉淀出的水飞蓟宾成品进行二次真空干燥浓缩，制得精制的水飞蓟宾。
进一步地，在步骤(1)中，提取温度为50-85℃。
进一步地，在步骤(1)中，所述微波干燥的频率为800-1000mhz，干燥时间为4-6min。
更进一步地，在步骤(2)中，所述水飞蓟壳与所述的醋酸乙酯的质量比为1:3.5-1:4。
进一步地，在步骤(4)中，过滤为趁热过滤，滤液浓缩可减压为常压。
进一步地，在步骤(4)中，滤饼的干燥时间为6-12小时。
更进一步地，在步骤(5)中，热滤，滤液在35-55℃下浓缩掉丙酮原量的40-70％。
有益效果：本发明简单高效，无有害有毒溶剂残留、产品纯度高、环境友好且适合工艺化生产。
与现有技术相比，本发明具有如下优点:
(1)本发明进行二次真空干燥浓缩，产品纯度为92％提高至97.5％以上；由2.5％降至0.3％以下。
(2)精制后产品外观，含量，有关物质均得到较大改善，比现有精制方法效果好。
(3)整个过程避免了有毒有害的有机溶剂的使用，仅使用乙醇作为溶剂，产品无毒害溶剂残留，且乙醇可以回收后重复利用，降低污染，节约成本。
具体实施方式
通过以下实施例进一步详细说明本发明，但应注意本发明的范围并不受这些实施例的任何限制。
实施例1
本发明的一种水飞蓟宾的提取方法，包括如下步骤：(1)将待萃取的水飞蓟壳清洗干净后沥干水分，然后进行微波干燥，使其中水分降到10％以下；提取温度为50℃。所述微波干燥的频率为1000mhz，干燥时间为6min。
(2)加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮；所述水飞蓟壳与所述的醋酸乙酯的质量比为1:3.5。
(3)总黄酮加水溶解后，取得沉淀物加入乙醇溶液，溶解得水飞蓟宾粗品，采用丙酮为溶剂，加入水飞蓟宾粗品进行加热溶解，加热至回流，其中丙酮与水飞蓟宾粗品的质量比为16:1；
(4)采用大孔阳离子交换树脂进行吸附，从而得到饱和的大孔阳离子交换树脂；将饱和的大孔树脂进行酸洗，然后进行醇洗，从而得到水飞蓟宾的乙醇溶液；滤饼的干燥时间为6小时。过滤为趁热过滤，滤液浓缩可减压为常压。
(5)在10℃冷却搅拌析晶，冷却至13℃以下，搅拌6小时；过滤，95％乙醇洗涤，抽干；滤饼置于在85℃，干燥，得到水飞蓟宾成品；热滤，滤液在55℃下浓缩掉丙酮原量的70％。
(6)将水飞蓟宾成品重新加入到纯水中，然后加热升温，从而使得水飞蓟宾成品中残留的乙醇溶解进纯水中；对纯水中沉淀出的水飞蓟宾成品进行二次真空干燥浓缩，制得精制的水飞蓟宾。
实施例2
实施例2与实施例1的区别在于：
本发明的一种水飞蓟宾的提取方法，包括如下步骤：在步骤(1)中，将待萃取的水飞蓟壳清洗干净后沥干水分，然后进行微波干燥，使其中水分降到10％以下；提取温度为65℃。所述微波干燥的频率为800mhz，干燥时间为5min。
在步骤(2)中，加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮；所述水飞蓟壳与所述的醋酸乙酯的质量比为1:4。
在步骤(3)中，总黄酮加水溶解后，取得沉淀物加入乙醇溶液，溶解得水飞蓟宾粗品，采用丙酮为溶剂，加入水飞蓟宾粗品进行加热溶解，加热至回流，其中丙酮与水飞蓟宾粗品的质量比为12：1；
在步骤(4)中，采用大孔阳离子交换树脂进行吸附，从而得到饱和的大孔阳离子交换树脂；将饱和的大孔树脂进行酸洗，然后进行醇洗，从而得到水飞蓟宾的乙醇溶液；滤饼的干燥时间为10小时。过滤为趁热过滤，滤液浓缩可减压为常压。
在步骤(5)中，在20℃冷却搅拌析晶，冷却至13℃以下，搅拌4小时；过滤，95％乙醇洗涤，抽干；滤饼置于在75℃，干燥，得到水飞蓟宾成品；热滤，滤液在35℃下浓缩掉丙酮原量的40％。
实施例3
实施例3与实施例1的区别在于：
本发明的一种水飞蓟宾的提取方法，包括如下步骤：在步骤(1)中，将待萃取的水飞蓟壳清洗干净后沥干水分，然后进行微波干燥，使其中水分降到10％以下；提取温度为85℃。所述微波干燥的频率为900mhz，干燥时间为4min。
在步骤(2)中，加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮；所述水飞蓟壳与所述的醋酸乙酯的质量比为1:3.8。
在步骤(3)中，总黄酮加水溶解后，取得沉淀物加入乙醇溶液，溶解得水飞蓟宾粗品，采用丙酮为溶剂，加入水飞蓟宾粗品进行加热溶解，加热至回流，其中丙酮与水飞蓟宾粗品的质量比为8:1；
在步骤(4)中，采用大孔阳离子交换树脂进行吸附，从而得到饱和的大孔阳离子交换树脂；将饱和的大孔树脂进行酸洗，然后进行醇洗，从而得到水飞蓟宾的乙醇溶液；滤饼的干燥时间为12小时。过滤为趁热过滤，滤液浓缩可减压为常压。
在步骤(5)中，在30℃冷却搅拌析晶，冷却至13℃以下，搅拌5小时；过滤，95％乙醇洗涤，抽干；滤饼置于在60℃，干燥，得到水飞蓟宾成品；热滤，滤液在45℃下浓缩掉丙酮原量的60％。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，本发明要求保护范围由所附的权利要求书、说明书及其等效物界定。