微生物菌剂及其制备方法和应用与流程

文档序号:14340150阅读:1131来源:国知局
本发明涉及一种微生物菌剂及其制备方法和应用,属于植物病害的综合防治领域。
背景技术
:番茄溃疡病是番茄生产上最严重的病害之一,自首次在美国报道以来,迅速蔓延并传播到世界多个番茄主产区,逐渐成为一种世界性病害。目前该病害遍布于北美洲、欧洲、亚洲、非洲、大洋洲,涵盖了美国、英国、加拿大、德国、日本等60多个国家。我国于1985年首次在北京平谷发现番茄溃疡病,现已扩展到多个番茄产区。1993年首次证实了我国东北地区有番茄溃疡病的发生,2002年在安徽国宁市方塘乡番茄发病率超过80%,2007~2009年在贵州省修文县由番茄溃疡病造成的损失达到40%~50%。近年来随着气候的异常变化及番茄种植规模的扩大,番茄溃疡病有逐年加重的趋势,目前在我国黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、新疆、河北、河南、山东、上海、海南、重庆、湖北、贵州等地都有不同程度的发生,给当地的番茄种植造成了一定的影响,是我国对番茄病害检疫的唯一一个病种。番茄溃疡病菌除侵染番茄外,还侵染辣椒、龙葵、裂叶茄及其他番茄属植物,也可寄生在心叶烟和其他茄属植物。致病菌可在番茄植株、种子、病残体、土壤和杂草上越冬,在干燥的种子上可存活20年,可通过种子、种苗、雨水、昆虫、农事操作等多种途径传播,危害较重,波及范围较广,因此掌握番茄细菌性溃疡病的发生规律和防治技术,对于控制该病害的发生有重要意义。目前番茄溃疡病主要以预防为主,在发病初期做好预防工作对病害的控制会起到较好的效果,采用的方法主要有加强检疫、种子处理、土壤处理、作物轮作、药剂防治等措施,然而这些方法存在处理不彻底、污染环境、影响作物生长等诸多弊端,而且治标不治本,并没有从根源上杀灭致病菌,只能暂时减缓病害的发生,一旦防控措施失效,病害会再度发生。技术实现要素:针对现有技术存在的上述缺陷,本发明提出了一种微生物菌剂及其制备方法和应用。本发明是采用以下的技术方案实现的:一种微生物菌剂,包括功能微生物、营养剂和保护剂;所述微生物包括泾阳链霉菌streptomyceschingyangensis、淡紫灰链霉菌streptomycesfradiae、金色链霉菌streptomycesaureus和绿色木霉trichodermaviride。所述微生物菌剂的重量百分比为功能微生物50%~80%、营养剂10%~30%、保护剂10%~30%。所述营养剂包括葡萄糖、乳清粉和硫酸镁,其质量比例为40~70:30~60:2~5。所述保护剂包括海藻糖、抗坏血酸和硫酸铜,其质量比例为30~60:30~60:5~10。一种如上述所述微生物菌剂的制备方法,将功能微生物、营养剂和保护剂混合均匀,真空包装。一种如上述所述微生物菌剂在防治番茄溃疡病中的应用。用于植物喷洒、种子或种苗浸涂时,将微生物菌剂稀释1000~2000倍使用。用于农具消毒或土壤处理时,将微生物菌剂稀释500~1500倍使用。用于加入灌溉水中冲施时,按150~300g/亩添加微生物菌剂。本发明的有益效果是:微生物菌剂的功能微生物筛选于自然界,采用以菌抑菌的方式发挥作用,杀灭致病菌,不会造成环境污染,减少药物的使用;微生物菌剂安全无害,对作物和人体不会产生有害影响,可以用于植株喷洒、种子浸泡、种苗喷涂、灌溉水消毒、农具消毒和土壤处理等,从多种途径阻断致病菌的传播途径,防治病害的发生;微生物菌剂使用方法灵活、安全、简单。具体实施方式为了使本发明目的、技术方案更加清楚明白,下面通过实施例,对本发明作进一步详细说明。实施例一:功能微生物的筛选在番茄溃疡病发病地区,选择病害程度较轻的区域采集土壤样品,以及发病植株未出现病害的叶片样品,进行微生物的分离、培养和保存,通过初步筛选,土壤样品分离得到7株菌种,编号a01-a07,叶片样品分离得到4株菌种,编号a08-a11。同时从实验室菌种库中选出用于植物病害防治的枯草芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、哈茨木霉、轮枝菌、泾阳链霉菌、淡紫拟青霉、黄色木霉、白粉寄生菌9株菌种。将11株初筛菌种和9株实验室菌种进行抑菌试验,观察各菌种对番茄溃疡病致病菌的抑制作用。具体结果如下:注:“+++”表示效果显著,“++”表示效果明显,“+”表示效果一般,“-”表示没有效果。从抑菌结果可以看出初筛菌种中有5株菌具有明显的防治效果,经过菌落形态分析和菌种分子鉴定,确定a02和a10为淡紫灰链霉菌,a07为金色链霉菌,a04和a09为绿色木霉,即实际筛选到3株菌种;实验室菌种有防治效果的菌种为侧孢芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌、泾阳链霉菌和绿色木霉。经过应用实验发现,侧孢芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌在使用过程中的生长繁殖能力较弱,而且不同菌种在不同环境中表现出的适应能力不同,因此选取淡紫灰链霉菌、金色链霉菌、绿色木霉、泾阳链霉菌4株菌种,采用多种微生物复配的方式制备微生物菌剂,根据不同应用环境选择相应的菌种组合。实施例二:制备微生物菌剂a:将泾阳链霉菌、淡紫灰链霉菌、金色链霉菌、绿色木霉按照1:1:1:1的比例混合制成微生物菌粉.b:将葡萄糖、乳清粉、硫酸镁按照60:35:5的比例混合,制备成营养剂。c:将海藻糖、抗坏血酸、硫酸铜按照50:40:10的比例混合,制备保护剂。d:将微生物菌粉、营养剂、保护剂混合均匀,真空包装,制备得到微生物菌剂,测得菌剂中活菌量为24亿/g。实施例三:通过实验考察微生物菌剂的抑菌效果和使用剂量采用盆栽实验栽种番茄幼苗,5天后挑选出长势一致的幼苗,采用人工接种的方式接种致病菌,待出现发病症状后放入隔离开的不同区域备用。将实施例一制备的微生物菌剂分别稀释500倍、1000倍、1500倍、2000倍、2500倍、3000倍制备成不同浓度的菌液,按照正常喷药速度对已发病的幼苗进行喷洒。然后按照常规方法进行管理,每7天喷洒一次,观察植物发病情况。通过实验发现,稀释2500倍和3000倍菌液的组,发病症状的蔓延明显减慢,但仍在缓慢扩散,说明稀释过度,减弱了菌剂的防治作用;稀释500倍、1000倍、1500倍和2000倍的菌剂能够有效发挥作用,已发病部位没有再继续蔓延,也没有新的发病部位出现,说明稀释2000倍以内的菌液可以很好的发挥作用,为保证效果,可采用稀释1000倍和1500倍的方式使用。实施例四:通过应用实验验证微生物菌剂防治番茄溃疡病的实际效果从番茄种植区选取近期发生过番茄溃疡病的区域进行实验,实验分为三组,分别为对照组、药剂组和微生物组,对照组不做任何处理;药剂组使用20%络氨铜水剂500倍液,每隔7天喷施1次;微生物组采用实施例一制备的微生物菌剂,稀释1000倍使用,每隔7天喷施1次。各试验区域之间采取隔离措施,防止相互影响。每个组种植100株番茄种苗,实验期为30天,其他条件按常规栽种管理办法进行。实验结果如下:组别对照组药剂组微生物组发病株数3265发病率32%6%5%结果表明,药剂组和微生物组对番茄溃疡病的防治效果都比较明显,能够有效达到防治作用。但是药剂会导致作物残留和土壤污染,因此综合对比,微生物菌剂优于化学药剂。实施例五:通过应用实验验证防治效果的持久性实验分为三组,分别为药剂组、微生物和微生物+土壤组。药剂组使用20%络氨铜水剂500倍液,每隔7天喷施1次;微生物组采用实施例一制备的微生物菌剂,稀释1000倍使用,每隔7天喷施1次;微生物+土壤组除正常喷洒微生物菌剂外,在实验开始时采用微生物菌剂处理土壤一次。三组各喷施4次后停止喷施,第30天将发病番茄植物计数后去除,继续观察20天,考察植株发病情况。实验结果如下:组别药剂组微生物组微生物+土壤组第30天植株总数929197发病株数23140发病率25%15%0%从实验结果可以看出,药剂组停用药物后发病率大幅上升,高达25%,说明药剂能够遏制致病菌发病,但不能从根本上解决病害问题;微生物组发病率低于药剂组,但也高达15%,加剧趋势明显。药剂组和微生物组的发病率明显升高,原因在于两者的主要作用是杀灭地上部分的致病菌,而对土壤中致病菌的作用极为有限,因此第三组专门考察了微生物土壤处理的影响。从数据可以看出,采用微生物菌剂对种植区域地下部分和地上部分同时处理后,对番茄溃疡病的防治效果极为明显,除初期出现3株发病植株外,后期没有再出现发病植株。以上所述仅为本发明的较佳实施例而己,并不以本发明为限制,凡在本发明的精神和原则之内所作的均等修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的专利涵盖范围内。当前第1页12
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