1.一种c末端cdnf片段,其至少包括在seqidno:1:
mpamkiceklkkldsqicelkyektldlasvdlrkmrvaelkqilhswgeecracaektdyvnliqelapkyaathpktel
所示的序列中的位置38-70或25-57处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置38-70或25-57处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,
其中,所述片段是细胞膜穿透肽并且对神经元细胞具有保护作用,并用作药物。
2.根据权利要求1所述的片段,其用于治疗退行性疾病或病症。
3.根据权利要求2所述的片段,其中,所述退行性疾病是神经退行性疾病。
4.根据权利要求3所述的片段,其中,所述神经退行性疾病是选自以下的中枢神经系统(cns)疾病:阿尔茨海默氏病,帕金森氏病,多系统萎缩症,肌萎缩侧索硬化症,额颞叶变性,路易体痴呆,轻度认知障碍,亨廷顿氏病,创伤性脑损伤,药物成瘾性和中风。
5.根据权利要求4所述的片段,其中,所述cns疾病是帕金森氏病。
6.根据权利要求2所述的片段,其用于治疗i型或ii型糖尿病。
7.根据权利要求3所述的片段,其用于治疗肌萎缩侧索硬化症。
8.根据权利要求2所述的片段,其用于治疗视网膜病症,例如色素性视网膜炎。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的片段,其中,所述片段通过静脉内给药、腹膜内、皮下、鞘内、脑室内、鼻内、透皮、脑内、肌内、眼内或动脉内给药来施用,或所述片段通过病毒表达载体来施用。
10.根据权利要求9所述的片段,其中,所述静脉内给药是外周给药。
11.根据前述权利要求中任一项所述的片段,其优选具有长达33-81个氨基酸的长度,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置38-70或25-57处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置38-70或25-57处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,并且,如果存在,则在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:1中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。
12.根据权利要求11所述的片段,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置37-70、36-70、35-70、34-70、33-70、32-70或31-70处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置37-70、36-70、35-70、34-70、33-70、32-70或31-70处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,如果存在,则在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:1中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。
13.根据权利要求11所述的片段,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置25-57、25-58、25-59、25-60、25-61、25-62、25-63、25-64、25-65、25-66、25-67、25-68、25-69或25-70处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置25-57、25-58、25-59、25-60、25-61、25-62、25-63、25-64、25-65、25-66、25-67、25-68、25-69或25-70处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,如果存在,则在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:1中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。
14.根据权利要求12或13所述的片段,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置31-73(肽6;seqidno:15)、位置25-73(肽4;seqidno:13)、位置21-73(肽3;seqidno:12)、位置21-70(肽7;seqidno:16)、位置31-81(肽5;seqidno:14)、位置25-81(肽2;seqidno:11)、位置25-57(肽15,seqidno:24)或位置37-73(肽8,seqidno:17)处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置31-73、25-73、21-73、21-70、31-81、25-81、25-57或37-73处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,如果存在,则在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:1中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。
15.根据权利要求14所述的片段,其中所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置31-73或25-57处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置31-73或25-57处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,如果存在,则在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:1中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。
16.根据前述权利要求中任一项所述的片段,其具有长达43-81个氨基酸、优选43-61个氨基酸的长度。
17.根据前述权利要求中任一项所述的片段,其中,所述片段的末端包括进一步的修饰以保护所述片段免于酶促降解。
18.根据前述权利要求中任一项所述的片段,其中,所述c末端cdnf片段由seqidno:1:
mpamkiceklkkldsqicelkyektldlasvdlrkmrvaelkqilhswgeecracaektdyvnliqelapkyaathpktel
所示的序列或者与seqidno:1的序列具有至少90%的同源性或序列同一性的序列中的至少50个连续氨基酸残基组成。
19.根据权利要求18所述的片段,其中,与序列seqidno:1具有至少90%的同源性或序列同一性的所述序列包括在seqidno:1中的位置52-55处的序列cxxc,其中x是任意氨基酸。
20.根据权利要求19所述的片段,其中,与序列seqidno:1具有至少90%的同源性或序列同一性的所述序列由以下序列seqidno:3的至少50个连续氨基酸残基组成:
mpamkiceklkkldsqicelkyektldlasvdlrkmrvaelkqilhswgeecxxcaektdyvnliqelapkyaathpktel
其中,x是任意氨基酸。
21.根据权利要求19所述的片段,其中,与序列seqidno:1具有至少90%的同源性或序列同一性的所述序列包括seqidno:1的位置52-55中的序列ckgc。
22.根据权利要求17至21中任一项所述的片段,其中,所述片段包括seqidno:1的位置81中的c末端氨基酸l。
23.根据权利要求17、18或20中任一项所述的片段,其中,所述片段缺少与seqidno:1的位置78-81相对应的er滞留信号ktel。
24.根据前述权利要求17至23中任一项所述的片段,其中,所述片段包括c末端的酰胺化和n末端的乙酰化作为进一步的修饰。
25.根据前述权利要求中任一项所述的片段,其还与可检测的化学或生物化学的部分缀合。
26.根据前述权利要求中任一项所述的片段,其中,所述片段是细胞穿透肽,并且能够穿透人血脑屏障。
27.根据前述权利要求中任一项所述的片段,其中所述片段对蛋白酶切割具有抗性。
28.根据权利要求27所述的片段,其中,所述片段包括延伸、缺失、插入、替代或修饰,使得所述延伸、缺失、插入、替代或修饰消除了至少一个蛋白酶切割位点。
29.根据权利要求27或28所述的片段,其中,所述蛋白酶选自半胱氨酸蛋白酶、金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶。
30.根据权利要求27至29中任一项所述的片段,其中,所述半胱氨酸蛋白酶是组织蛋白酶k。
31.根据权利要求27至29中任一项所述的片段,其中,所述金属蛋白酶为mmp-9。
32.根据权利要求27至29中任一项所述的片段,其中,所述金属蛋白酶是mmp-3。
33.根据权利要求27至29中任一项所述的片段,其中,所述丝氨酸蛋白酶是糜蛋白酶a或弹性蛋白酶-2。
34.根据权利要求27至33中任一项所述的片段,其中,与seqidno:1中的残基1-8、16-23、26-33、32-39、37-44、38-45、43-50、46-53、57-64、59-66、60-67或68-75相对应的区域内的任意一个氨基酸是被替换的、缺失的或经修饰的。
35.根据权利要求27至34中任一项所述的片段,其中,与seqidno:1中的46、49、35、63、4、71、19、40、41、62或29相对应的位置处的任意氨基酸是被替换的或经修饰的。
36.一种药物组合物,其包含如权利要求1和11至35中任一项所定义的c末端cdnf片段以及以下至少一种:生理上可接受的载体、缓冲剂、赋形剂、防腐剂和稳定剂。
37.根据权利要求36所述的药物组合物,其用于静脉内给药、腹膜内、皮下、鞘内、脑室内、鼻内、透皮、脑内、肌内、眼内或动脉内给药,所述静脉内给药优选外周给药,或者所述组合物经由病毒表达载体给药。
38.根据权利要求36或37所述的药物组合物,其用作药物。
39.根据权利要求38所述的药物组合物,其用于治疗退行性疾病或病症。
40.根据权利要求39所述的药物组合物,其中,所述退行性疾病或病症是选自以下的中枢神经系统(cns)疾病:阿尔茨海默氏病,帕金森氏病,多系统萎缩症,肌萎缩侧索硬化症,额颞叶变性,路易体痴呆,轻度认知障碍,亨廷顿氏病,创伤性脑损伤,药物成瘾性和中风。
41.根据权利要求40所述的药物组合物,其中,所述cns疾病是帕金森氏病。
42.根据权利要求40的所述的药物组合物,其中,所述cns疾病是肌萎缩侧索硬化症。
43.根据权利要求40所述的药物组合物,其用于治疗i型或ii型糖尿病。
44.根据权利要求40所述的药物组合物,其用于治疗视网膜病症,例如色素性视网膜炎。
45.一种c末端cdnf片段,其至少包括在seqidno:1:
mpamkiceklkkldsqicelkyektldlasvdlrkmrvaelkqilhswgeecracaektdyvnliqelapkyaathpktel
所示的序列中的位置38-70或25-57处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置38-70或25-57处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,其中,所述片段是细胞膜穿透肽并对神经元细胞有保护作用。
46.根据权利要求45所述的片段,其具有长达57、53、51、50、49、43、37或33个氨基酸的长度,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置31-70或25-57处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置31-70或25-57处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,并且,在所述连续氨基酸残基侧翼的序列与seqidno:1中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。
47.根据权利要求46所述的片段,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置37-70、36-70、35-70、34-70、33-70、32-70或31-70处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置37-70、36-70、35-70、34-70、33-70、32-70或31-70处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成。
48.根据权利要求46所述的片段,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置25-57、25-58、25-59、25-60、25-61、25-62、25-63、25-64、25-65、25-66、25-67、25-68、25-69或25-70处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置25-57、25-58、25-59、25-60、25-61、25-62、25-63、25-64、25-65、25-66、25-67、25-68、25-69或25-70处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,如果存在,则在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:1中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。
49.根据权利要求47或48所述的片段,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置31-73(肽6)、位置25-73(肽4)、位置21-73(肽3)、位置21-70(肽7)、位置31-81(肽5)、位置25-81(肽2)、位置25-57(肽15)或位置37-73(肽8)处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置31-73、25-73、21-73、21-70、31-81、25-81、25-57或37-73处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成。
50.根据权利要求49所述的片段,其中,所述片段至少包括在seqidno:1所示的序列中的位置31-73处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置31-73处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成。
51.根据权利要求45至50中任一项所述的片段,其具有长达57、53、51、50、49、43、37或33个氨基酸的长度。
52.一种c末端manf片段,其优选具有36-78个氨基酸的长度,其至少包括在seqidno:2:
iceklkkkdsqicelkydkqidlstvdlkklrvkelkkilddwgetckgcaeksdyirkinelmpkyapkaasartdl
所示的序列中的位置33-68或19-52处的连续氨基酸残基或者与seqidno:2中的位置33-68或19-52处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:2中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性,其中,所述片段是细胞膜穿透肽并且对神经元细胞有保护作用。
53.根据权利要求52所述的片段,其长度为36-59个氨基酸。
54.根据权利要求52或53所述的片段,其用作药物。
55.根据权利要求54所述的片段,所述片段用于治疗退行性疾病或病症,其中,所述片段优选通过静脉内给药、腹膜内、皮下、鼻内、透皮、肌内、眼内或动脉内给药施用,所述静脉内给药更优选外周给药。
56.根据权利要求55所述的c末端manf片段,其中,所述片段由seqidno:2:
iceklkkkdsqicelkydkqidlstvdlkklrvkelkkilddwgetckgcaeksdyirkinelmpkyapkaasartdl
所示的序列或者与序列seqidno:2具有至少90%的同源性或序列同一性的序列中的至少50个连续的氨基酸残基组成。
57.根据权利要求56所述的片段,其中,所述片段具有序列seqidno:5:
kydkqidlstvdlkklrvkelkkilddwgetckgcaeksdyirkinelmpkyapkaasartdl
或者与序列seqidno:5具有至少90%的同源性或序列同一性的序列。
58.根据权利要求56或57所述的片段,其中,所述片段包括seqidno:2的位置78中的c末端氨基酸l。
59.根据权利要求56或57所述的片段,其中,所述片段缺少与seqidno:2的位置75-78相对应的er滞留信号rtdl。
60.根据权利要求52至59中任一项所述的片段,其中,所述片段包括保护所述片段免于酶促降解的进一步的修饰,所述修饰优选地选自c末端的酰胺化和n末端的乙酰化。
61.根据权利要求52至60中任一项所述的片段,其中,所述片段对蛋白酶切割具有抗性。
62.根据权利要求61所述的片段,其中,所述片段包含延伸、缺失、插入、替代或修饰,使得所述延伸、缺失、插入、替代或修饰消除了至少一个蛋白酶切割位点。
63.根据权利要求61或62所述的片段,其中,所述蛋白酶选自金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶。
64.根据权利要求63所述的片段,其中,所述金属蛋白酶是mmp-9或mmp-2。
65.根据权利要求63的所述的片段,其中,所述丝氨酸蛋白酶是糜蛋白酶a或弹性蛋白酶-2。
66.根据权利要求52至65中任一项所述的片段,其中,与seqidno:2中的残基11-18、18-25、21-28、24-31、33-40、52-59、54-61、59-66或63-70相对应的区域内的任意一个氨基酸是被替换的、缺失的或经修饰的。
67.根据权利要求52至66中任一项所述的片段,其中,与seqidno:2中的62、27、14、66、36、21、55、57或24相对应的位置处的氨基酸是被替换的或经修饰的。
68.根据权利要求52至67中任一项的所述的片段,其还与可检测的化学或生物化学的部分缀合。
69.根据权利要求52至68中任一项所述的片段,其中,所述片段是细胞穿透肽,并且能够穿透人血脑屏障。
70.根据权利要求52至69中任一项所述的片段,其中,所述退行性疾病是选自以下的中枢神经系统(cns)疾病:阿兹海默氏病,帕金森氏病,多系统萎缩症,肌萎缩侧索硬化症,额颞叶变性,路易体痴呆,轻度认知障碍,亨廷顿氏病,创伤性脑损伤,药物成瘾性和中风。
71.一种药物组合物,其包含根据权利要求52至69中任一项所述的c-末端manf片段和以下至少一种:生理上可接受的载体、缓冲剂、赋形剂、防腐剂和稳定剂;所述药物组合物用于治疗中枢神经系统(cns)疾病,其中,所述片段通过静脉内给药、腹膜内、皮下、鼻内、透皮、肌内、眼内或动脉内给药,所述静脉内给药优选外周给药。
72.一种c末端manf片段,其优选具有36-78个氨基酸的长度,其至少包括在seqidno:2:
iceklkkkdsqicelkydkqidlstvdlkklrvkelkkilddwgetckgcaeksdyirkinelmpkyapkaasartdl
所示的序列中的位置33-68或19-52处的连续氨基酸残基或者与seqidno:2中的位置33-68或19-52处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:2中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性,其中,所述片段是细胞膜穿透肽,用于治疗1型或2型糖尿病或视网膜疾病。
73.根据权利要求72所述的片段,其具有36-59个氨基酸的长度。
74.根据权利要求73所述的片段,其由seqidno:2:
iceklkkkdsqicelkydkqidlstvdlkklrvkelkkilddwgetckgcaeksdyirkinelmpkyapkaasartdl
所示的序列或者与序列seqidno:2具有至少90%的同源性或序列同一性的序列中的至少50个连续的氨基酸残基组成。
75.根据权利要求74所述的片段,其中,所述片段具有序列seqidno:5:
kydkqidlstvdlkklrvkelkkilddwgetckgcaeksdyirkinelmpkyapkaasartdl
或者与序列seqidno:5具有至少90%的同源性或序列同一性的序列。
76.根据权利要求72至75中任一项所述的片段,其中,所述片段包括保护所述片段免于酶促降解的进一步的修饰,所述修饰优选地选自c末端的酰胺化和n末端的乙酰化。
77.根据权利要求76所述的片段,其中,所述片段对蛋白酶切割具有抗性。
78.根据权利要求77所述的片段,其中,所述片段包含延伸、缺失、插入、替代或修饰,使得所述延伸、缺失、插入、替代或修饰消除了至少一个蛋白酶切割位点。
79.根据权利要求77或78所述的片段,其中,所述蛋白酶选自金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶。
80.根据权利要求79所述的片段,其中,所述金属蛋白酶是mmp-9或mmp-2。
81.根据权利要求79所述的片段,其中,所述丝氨酸蛋白酶是糜蛋白酶a或弹性蛋白酶-2。
82.根据权利要求72至81中任一项所述的片段,其中,与seqidno:2中的残基11-18、18-25、21-28、24-31、33-40、52-59、54-61、59-66或63-70相对应的区域内的任意一个氨基酸是被替换的、缺失的或经修饰的。
83.根据权利要求72至82中任一项所述的片段,其中,与seqidno:2中的62、27、14、66、36、21、55、57或24相对应的位置处的氨基酸是被替换的或经修饰的。
84.根据权利要求72至83中任一项所述的片段,其中,所述片段是细胞穿透肽,并且能够穿透人血脑屏障。
85.一种药物组合物,其包含根据权利要求72至84中任一项所述的c-末端manf片段和以下至少一种:生理上可接受的载体、缓冲剂、赋形剂、防腐剂和稳定剂,所述药物组合物用于治疗1型或2型糖尿病或视网膜疾病。
86.根据权利要求85所述的药物组合物,其用于外周给药。
87.根据权利要求86所述的药物组合物,其中,所述组合物通过静脉内、腹膜内、皮下、鞘内、脑室内、鼻内、透皮、脑内、肌内、眼内或动脉内给药来施用,或者经由病毒表达载体来施用所述片段。
88.一种分离的多核苷酸,其包括编码c末端cdnf片段的核苷酸序列,所述c末端cdnf片段由在seqidno:1所示的序列中的位置31-73(肽6)、位置25-73(肽4)、位置21-73(肽3)、位置21-70(肽7)、位置31-81(肽5)、或位置25-81(肽2)、位置25-57(肽15)、或位置37-73(肽8)处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置31-73、25-73、21-73、21-70、31-81、25-81、25-57或37-73处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列组成。
89.一种表达载体,其编码根据权利要求88所述的分离的多核苷酸。
90.用根据权利要求89所述的载体转化的宿主细胞。
91.一种治疗退行性疾病或病症的方法,包括施用有效量的c末端cdnf片段,所述片段至少包括在seqidno:1:
mpamkiceklkkldsqicelkyektldlasvdlrkmrvaelkqilhswgeecracaektdyvnliqelapkyaathpktel
所示的序列中的位置38-70或25-57处的连续氨基酸残基或者与seqidno:1中的位置38-70或25-57处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成。
92.一种治疗退行性疾病、1型或2型糖尿病或视网膜疾病的方法,所述方法包括施用有效量的c末端manf片段,所述片段优选具有36-78个氨基酸的长度,其至少包括在seqidno:2:
iceklkkkdsqicelkydkqidlstvdlkklrvkelkkilddwgetckgcaeksdyirkinelmpkyapkaasartdl
所示的序列中的位置33-68或19-52处的连续氨基酸残基或者与seqidno:2中的位置38-70或19-52处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性的序列,或者至少由这二者中之一组成,并且,如果存在,则在所述连续氨基酸残基侧翼的序列优选与seqidno:2中相应位置处的序列具有至少80%的同源性或序列同一性。