一种灭活型病毒样本RNA保存液及其制备方法与流程

文档序号:20602642发布日期:2020-05-01 21:47阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,包括以下组分:柠檬酸钠、蛋白酶k、浓硫酸、乙二胺四乙酸和硫酸铵,其中柠檬酸钠的终浓度为10mm~35mm,蛋白酶k的终浓度为50~800μg/ml,浓硫酸的终浓度为0.5%~5%(v/v),乙二胺四乙酸的终浓度为5mm~50mm,硫酸铵的终浓度为45%~80%(w/v)。

2.根据权利要求1所述的灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,所述柠檬酸钠的终浓度为15mm~30mm,所述蛋白酶k的终浓度为100~600μg/ml,所述浓硫酸的终浓度为1%~3%(v/v),所述乙二胺四乙酸的终浓度为7mm~30mm,所述硫酸铵的终浓度为50%~70%(w/v)。

3.根据利要求1或2所述的灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,还包括溶剂,所述溶剂为灭菌水。

4.根据权利要求1或2所述的灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,所述保存液的ph值为4.2~6.5。

5.根据权利要求4所述的灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,所述保存液的ph值为4.5~5.8。

6.根据权利要求1或2所述的灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,所述保存液的适用样本包括上呼吸道标本、下呼吸道标本、眼结膜拭子、肛拭子、人组织的离体样本、动植物组织的离体样本、人工培养的细胞、血液、体液。

7.根据权利要求6所述的灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,所述上呼吸道样本包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物;所述下呼吸道标本包括深咳痰液、呼吸道抽取物、肺泡组织活检标本。

8.根据权利要求7所述的灭活型病毒样本rna保存液,其特征在于,所述适用样本为病毒样本。

9.制备权利要求1所述的灭活型病毒样本rna保存液的方法,其特征在于,包括以下步骤:

配置乙二胺四乙酸水溶液,调ph至7.0~8.5;

配置柠檬酸钠水溶液;

配置蛋白酶k溶液;

配制硫酸铵溶液,在溶剂中加入硫酸铵搅拌使其溶解;

将上述各配置溶液按比例混合并搅拌均匀后用浓硫酸调ph至4.5~5.8,再用溶剂定容,使各组分达到权利要求1所述浓度;

用滤膜过滤除菌,分装保存,得到所述灭活型病毒样本rna保存液。

10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述溶剂为灭菌水;所述滤膜的孔径为0.15μm~0.35μm。


技术总结
本发明公开一种灭活型病毒样本RNA保存液及其制备方法,其中保存液包括以下组分:柠檬酸钠、蛋白酶K、浓硫酸、乙二胺四乙酸和硫酸铵,其中柠檬酸钠的终浓度为10mM~35mM,蛋白酶K的终浓度为50~800μg/ml,浓硫酸的终浓度为0.5%~5%(V/V),乙二胺四乙酸的终浓度为5mM~50mM,硫酸铵的终浓度为45%~80%(W/V)。本发明保存液安全无毒、配制简单、使用方便;病毒进入保存液即可使病毒灭活,无须冷藏运输及灭活处理;能在室温下避免RNA降解,可多次冻融而不影响RNA提取的质量;提取过程中也能防止RNA降解,提取的RNA完整性更好,特别适用于有强感染性的流行病毒样本的采集。

技术研发人员:张小英
受保护的技术使用者:深圳市上为生物科技有限公司
技术研发日:2020.03.25
技术公布日:2020.05.01
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