技术特征：
1.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含在seq id no.11717的第122位氨基酸(h122)中的h122y突变。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述dd还包含：(i)在seq id no.11717的第27位氨基酸(r27)中的r27l突变；(ii)在seq id no.11717的第87位氨基酸(t87)中的t87i突变；(iii)在seq id no.11717的第252位氨基酸(n252)中的n252d突变；或(iv)(i)、(ii)和/或(iii)的组合。3.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含在seq id no.11717的第106位氨基酸(e106)中的e106d突变。4.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含在seq id no.11717的第208位氨基酸(w208)中的w208s突变。5.如权利要求3或4所述的组合物，其中所述dd还包含seq id no.11717的第205位氨基酸(c205)中的c205s突变。6.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含在seq id no.11717的第59位氨基酸(i59)中的i59n突变。7.如权利要求6所述的组合物，其中所述dd还包含seq id no.11717的第102位氨基酸(g102)中的g102r突变。8.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含在seq id no.11717的第156位氨基酸(l156)中的l156h突变。9.如权利要求8所述的组合物，其中所述dd还包含：(i)在seq id no.11717的第4位氨基酸(w4)中的w4y突变；(ii)在seq id no.11717的第225位氨基酸(f225)中的f225l突变；(iii)seq id no.11717的第257-260位氨基酸的缺失；(iv)seq id no.11717的第1-5位氨基酸的缺失；或(v)seq id no.11717的氨基酸g234、e235和236的缺失。10.如权利要求8所述的组合物，其中所述dd包含相对于seq id no.11717的四个突变，所述突变对应于：(i)l156h、s172c、f178y和186d；或(ii)d70n、d74n、d100n和l156h。
11.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含相对于seq id no.11717的第一突变和第二突变，其中：(i)所述第一突变是seq id no.11717的第73位氨基酸(s73)中的s73n突变；并且(ii)所述第二突变是在seq id no.11717的第89位氨基酸(r89)的f或y的取代。12.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含在seq id no.11717的第56位氨基酸(s56)的n或f的取代。13.如权利要求12所述的组合物，其中所述dd包含相对于seq id no.11717的对应于s56f和d71s的两个取代。14.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含相对于seq id no.11717的一个或多个取代，其中所述至少一个取代是在seq id no.11717的第63位氨基酸(g63)的d或n的取代，并且其中所述一个或多个取代对应于：g63d；g63d和m240l；g63d、e69v和n231i；或t55k、g63n和q248n。15.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含相对于seq id no.11717的两个或更多个取代，其中所述两个或更多个取代中的一个是在seq id no.11717的第71位氨基酸(d71)的l或k的取代，并且其中所述两个或更多个取代对应于：d71l和t87n；d71l和l250r；d71l、t87n和l250r；或d71k和t192f。16.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含相对于seq id no.11717的两个或更多个取代，其中所述两个或更多个取代中的至少一个是：(i)在seq id no.11717的第241位氨基酸(v241)的f的取代；或(ii)在seq id no.11717的第249位氨基酸(p249)的f或l的取代；并且其中所述两个或更多个取代对应于：d72f和v241f；d72f和p249l；
d72f和p249f；d72f、v241f和p249l；a77i和p249f；或v241f和p249l。17.一种包含效应子模块的组合物，所述效应子模块包含刺激响应元件(sre)和至少一个与所述sre可操作连接的有效负载，其中所述sre包含去稳定结构域(dd)，所述dd包含人碳酸酐酶2(ca2；seq id no.11717)的区域或全部，并且还包含相对于seq id no.11717的一个或多个取代，所述取代选自y51t、l183s、y193i、l197p以及v134f和l228f的组合。18.如权利要求1-17中任一项所述的组合物，其中所述dd来源于ca2的区域，所述区域包含ca2的氨基酸2至260(seq id no.210492)。19.如权利要求1-18中任一项的组合物，其中所述sre对一种或多种刺激有响应。20.如权利要求19所述的组合物，其中所述刺激是小分子，其中所述小分子选自乙酰唑胺、塞来昔布、伐地昔布、罗非昔布、醋甲唑胺、多佐胺、布林佐胺、双氯非那胺、依索唑胺、唑尼沙胺、丹磺酰胺或二氯苯磺胺。21.如权利要求1-20中任一项所述的组合物，其中在所述dd中的至少一个突变或取代在不存在刺激的情况下使dd和至少一个有效负载去稳定，并且其中在存在刺激的情况下使所述dd和有效负载稳定。22.如权利要求1-21中任一项所述的组合物，其中所述至少一个有效负载是治疗剂、天然蛋白质、融合多肽、抗体或其变体或片段。23.如权利要求1-22中任一项所述的组合物，其中所述组合物是一种或多种多肽。24.如权利要求22所述的组合物，其中所述治疗剂是cd19car。25.一种生物回路系统，其包含权利要求1-24中任一项所述的组合物。26.一种药物组合物，其包含权利要求1-24中任一项所述的组合物和药学上可接受的赋形剂。27.一种多核苷酸，其编码权利要求1-24中任一项所述的组合物。28.一种药物组合物，其包含权利要求27所述的多核苷酸和药学上可接受的赋形剂。29.一种载体，其包含权利要求27所述的多核苷酸。30.一种细胞，其包含权利要求27所述的多核苷酸。31.如权利要求30所述的细胞，其中所述细胞是用于过继细胞转移(act)的免疫细胞。32.一种药物组合物，其包含权利要求30或31所述的细胞和药学上可接受的赋形剂。33.一种产生修饰的细胞的方法，所述方法包括将包含权利要求27所述的多核苷酸的核酸分子引入细胞中。34.一种调节如权利要求30所述的细胞中的有效负载的表达、功能和/或水平的方法，所述方法包括对所述细胞施用刺激，其中所述sre对所述刺激有响应，并且其中所述有效负载的表达、功能和/或水平响应于所述刺激而受到调节。35.一种治疗有需要的受试者中的疾病的方法，所述方法包括：(a)对所述受试者施用治疗有效量的权利要求30所述的细胞，其中所述细胞包含治疗所述疾病的有效负载；和(b)对所述受试者施用治疗有效量的刺激，
其中所述sre对所述刺激有响应，并且其中所述有效负载的表达响应于所述刺激而受到调节，从而治疗所述疾病。36.根据权利要求34或35中任一项所述的方法，其中所述刺激选自乙酰唑胺、塞来昔布、伐地昔布、罗非昔布、醋甲唑胺、多佐胺、布林佐胺、双氯非那胺、依索唑胺、唑尼沙胺、丹磺酰胺或二氯苯磺胺。
技术总结
本公开提供了可调节生物回路系统。这样的系统提供了模块化和可调的蛋白质表达系统，所述蛋白质表达系统支持治疗模式的发现和开发。具体而言，本申请涉及包含人人碳酸酐酶2片段和嵌合抗原受体(CAR)的融合蛋白。可以通过外部施用的剂来调节去稳定结构域的活性。部施用的剂来调节去稳定结构域的活性。部施用的剂来调节去稳定结构域的活性。
技术研发人员：苏瑞 C
受保护的技术使用者：黑曜石疗法公司
技术研发日：2020.03.06
技术公布日：2022/1/21