微生物的检查方法及其装置的制造方法_3

文档序号:8303060阅读:来源:国知局
增管(PMT) 14与试样容器5之间的狭缝17,将观察面缩窄为狭缝状。即,相对于如图9A地不具备狭缝的状态中,监视以圆形成光接收面F的背景,而如图9B地具有狭缝的状态中,监视以除去斜线以外的纵长狭缝形成光接收面F的背景。因此,光接收面F的光接收面积如同图9B地缩窄,结果使成为噪声的背景的荧光发光的面积也缩窄,因此提升对于背景的荧光发光的微生物的荧光发光的信号的比,提高微生物的荧光发光的检测精度。
[0083]另外,光接收部19虽显示使用光电倍增管(PMT) 14作为光接收传感器的例子,但并不限于此,可采用硅二极管(Siro)、雪崩光电二极管(APD)等,能够与光电倍增管(PMT)同样地检测微生物所含有的荧光物质的发光的各种光检测器。
[0084]进一步,参考图3,说明本实施方式的检查装置I的电性控制构成。在形成主体部2的筐体20内的中央配置CPU基板23,其从AC电源21与二次电池22接收电源的供给,解析利用该光电倍增管(PMT) 14从光转换为电的输出信号、判定是否为任意的亮度范围以上、对任意亮度的信号脉波计数、进行上述LED光源10的开启?关闭控制等。在该AC电源21与该CPU基板23之间,夹设AC/DC转换器24。
[0085]在上述CPU基板23上,分别电性连接上述光电倍增管(PMT) 14、上述LED光源10、作为读取写入用存储部的RAM25及作为读取专用存储部的RO M26。此外,电性连接图1所示的操作部3的电源键3a、测定开始键3b、外部输出键3c及设定键3d。并且,成为可通过以下按键进行如下动作的构成:通过该电源键3a的按压进行开启.关闭的开关;通过该测定开始键3b的按压开始测定;通过外部输出键3c的按压对外部的打印机或个人计算机进行数据的传送;通过设定键3d的按压,进行测定的种类的切换(切换为L尺寸微生物的测定或S尺寸微生物的测定)、判定基准的设定的变更、阈值的设定的变更、测定时间的设定的变更。
[0086]除此之外,在上述CPU基板23上,连接使该转子7通过磁力旋转的磁力搅拌器27、以液晶面板等形成的显示部4、CPU基板23等控制机器的冷却用风扇28、及RS-232C等外部输出端子29。
[0087]图4为表示测定流程的流程图,参考图1至图4说明上述构成中的作用。
[0088]首先,操作者使用移液器等,从温度20°C左右的压舱水采取10ml (毫升)作为试样,投入试样容器5 (图4的步骤I)。其次,在试样容器5内添加荧光染色试剂(图4的步骤2)。该荧光染色试剂可使用一般所知的钙黄绿素AM(Calcein-AM、德国Promocell GMBH社制)、FDA等。钙黄绿素AM具有容易对浮游植物染色的倾向;FDA具有容易对动物性浮游生物染色的倾向;因此,若将染色试剂产生的染色,通过混合钙黄绿素AM与FDA的试剂进行染色,则减短试剂的染色时间,可使染色所需的时间为过去的一半。之后,操作者在试样容器5投入转子7后,收纳至检查装置I的测定部6,覆盖测定部6的盖部30从而使测定准备结束。此处,若按压电源键3a,则转子7通过该测定部6内所内置的磁力搅拌器27的驱动而旋转,搅拌试样溶液S (图4的步骤3)。
[0089]接着,操作者通过操作部的测定开始键3b的按压,在规定时间后将LED光源10点灯,使透过激发光用带通滤波器12的光线照射试样容器5。此时,例如以波长特性450nm?490nm的波长的光线照射,使试样容器5内的检测体(微生物)荧光发光(图4的步骤4)。之后,该荧光透射荧光用带通滤波器15而被光电倍增管(PMT) 14检测(图4的步骤5)。
[0090]光电倍增管(PMT) 14通过光电效果的利用将光能转换为电能,并附加电流放大功能,可高感度地检测荧光发光。将检测到的电气信号送往CPU基板23,计数一定阈值以上的光接收波形(图4的步骤6)。
[0091]进一步,CPU基板23中,从光接收波形计数值推定存在于该试样容器5内的水10ml (毫升)中的微生物数,在显示部4显示是否满足排水基准(图4的步骤7)。
[0092](第2实施方式)
[0093]本实施方式中,在光接收部19与CPU基板23之间设置滤波机构34的点与第I实施方式相异。其他构成与第I实施方式相同因此省略说明。以下,依据附图进行说明。
[0094]测定部6如图1、图2及图5所示,具备:试样容器收纳部9,收纳试样容器5并进行保持;光源部13,朝向上述试样容器5照射激发光;以及光接收部19,用于通过从该光源部13照射的激发光观察在试样容器5内漂浮发光的微生物。并且,自光接收部19起,借助于滤波机构34与CPU基板23电性连接。CPU基板23中,可通过来自光接收部19的电气信号计算试样溶液S中的微生物数,进行测定结果等信息处理作业或统计处理作业等。
[0095]图6为表示作为本发明的要部的滤波机构的电路的一例的图。如图6所示,在光电倍增管(PMT) 14与CPU基板23之间,电性连接运算放大器35、高通滤波电路36及低通滤波电路37。上述运算放大器35将根据由该光电倍增管(PMT) 14接收的光接收量而产生的输出电流转换为电压,即便为微小的电流仍可检测。此外,高通滤波电路36为,可使输入信号中,比规定频率更高的频率的成分不衰减,而比规定频率更低的频率的成分递减的滤波机构。另一方面,低通滤波电路37为,可使输入信号中,比规定频率更低的频率的成分不衰减,而比规定频率更高的频率的成分递减的滤波机构。而若将该高通滤波电路36与低通滤波电路37连结,则成为仅使必要范围的频率通过的带通滤波电路38。
[0096]上述运算放大器35具有运算放大器OP与电阻R。并且上述高通滤波电路36及低通滤波电路37分别具有互相电性连接的电阻R1、R2与电容器C1、C2。由此,由运算放大器35将来自光电倍增管(PMT) 14的输出电流转换为电压,其次,自带通滤波电路38的输入侧输入信号Vin (t),则输出侧中成为扰动的电气信号被过滤而输出信号Vout (t) ο若将该经过滤的信号Vout (t)输入CPU基板23,则因和微生物的荧光发光的光接收量相对应的电气信号与扰动已被明确地区别,因此可不产生微生物量的测定误差,也不产生测定值差异的问题地稳定测定。
[0097]图7为表示测定流程的流程图,参考图1、图2、图5至图7说明上述构成中的作用。
[0098]首先,操作者使用移液器等,从温度20°C左右的压舱水采取10ml (毫升)作为试样,投入试样容器5 (图7的步骤I)。其次,在试样容器5内添加荧光染色试剂(图7的步骤2)。该荧光染色试剂可使用一般所知的钙黄绿素AM(Calcein-AM、德国Promocell GMBH社制)、FDA等。钙黄绿素AM,具有容易对浮游植物染色的倾向;FDA,具有容易对动物性浮游生物染色的倾向;因此,若将染色试剂产生的染色,通过混合钙黄绿素AM与FDA的试剂进行染色,则减短试剂的染色时间,可使染色所需的时间为过去的一半。之后,操作者在试样容器5投入转子7后,收纳至检查装置I的测定部6,覆盖测定部6的盖部30从而使测定准备结束。此处,若按压电源键3a,则转子7通过该测定部6内所内置的磁力搅拌器27的驱动而旋转,搅拌试样溶液S (图7的步骤3)。
[0099]接着,操作者通过操作部的测定开始键3b的按压,在规定时间后将LED光源10点灯,使透射激发光用带通滤波器12的光线照射试样容器5。此时,例如以波长特性450nm?490nm的波长的光线照射,使试样容器5内的试样(微生物)荧光发光(图7的步骤4)。并且,该荧光透射荧光用带通滤波器15而被光电倍增管(PMT) 14检测(图7的步骤5)。
[0100]光电倍增管(PMT) 14通过光电效果的利用将光能转换为电能,并附加电流放大功能,可高感度地检测荧光发光。将检测出的电气信号,以运算放大器35放大而输入至带通滤波电路36,输出已将成为扰动的电气信号过滤的信号(图7的步骤6)。接着,将已过滤成为扰动的电气信号的信号传送至CPU基板23,计数一定阈值以上的光接收波形(图7的步骤7) ο
[0101]进一步,CPU基板23从荧光波形计数值推定存在于该试样容器5内的水10ml (毫升)中的微生物数,在显示部4显示是否满足排水基准(图7的步骤8)。
[0102]以下,对本发明的实施例加以说明。首先,进行上述实施方式的微生物的检查装置的检查精度的确认试验。
[0103][实施例1]
[0104]调查微生物的个体数与光电倍增管
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