(PMT)的光接收计数的相关关系。将S型海水壶形轮虫(最小尺寸约100 μ m = L尺寸生物)在多个试样容器5 (10mL容量)分别个体别地收纳5个体、10个体、50个体、100个体、1000个体，分别以荧光染色试剂FDA (浓度0.01[毫莫耳/公升])染色。其结果，根据收纳的微生物的个体数，波形的计数数量渐增加，对5个体、10个体、50个体及100个体的5样本直线地响应(参考图10A、图10B)。因此，可从获得的波形的计数数量推定存在于压舱水10mL中的微生物的个体数。
[0105][实施例2]
[0106]进行可否根据存活死亡检测微生物的试验(参考图1lA?图11D)。将通过热进行杀灭处理(60°C，30分的加热)的S型海水壶形轮虫(最小尺寸约100 μ m = L尺寸生物)，用荧光染色试剂FDA(浓度0.01 [毫莫耳/公升)染色。制作杀灭处理I小时后、杀灭处理20小时后、杀灭处理5天后的3样本分别测定。其结果，经杀灭处理的样本均未发现一定阈值以上的波形，可判别未经杀灭处理而存在微生物的样本与经杀灭处理而不存在微生物的样本。
[0107][实施例3]
[0108]比较在该光电倍增管(PMT) 14与CPU基板23之间，安装滤波机构前与安装后其获得电压的波形。
[0109]图12为安装滤波机构前的获得电压的波形。图12A所示的获得电压的波形混杂有:扰动(背景成分约0.9V波形)、可确认为超过阈值的活的微生物的明确的峰、以及未超过阈值的不明的峰3种。此外，图12B所示的获得电压的波形混杂有:扰动(背景成分约1.4V波形)、以及可确认为超过阈值的活的微生物的明确的峰2种。进一步，图12C所示的获得电压的波形混杂有:扰动(背景成分约0.4V波形)、以及未超过阈值的不明的峰2种。
[0110]图13为安装滤波机构后的获得电压的波形。图13A所示的获得电压的波形为，为了去除成为扰动的背景成分，仅安装高通滤波电路36时的波形。与图12B所示的波形比较，则了解将约1.4V的背景成分收敛至0V，去除扰动。
[0111]图13B的波形为，将图13A所示的以虚线的圆包围的峰的波形放大时的上升波形。图13B的波形中，包夹阈值而重复上下浮动，为测定误差增大的要因。因而期望以去除这种高频波形的目的安装低通滤波电路37。
[0112]图13C所示的获得电压的波形为，为了进行扰动的去除与高频波形的去除，而安装将高通滤波电路36与低通滤波电路37结合的带通滤波器38时的波形。与图13A的波形比较，则去除高频噪声而波形变得平滑。
[0113]图13D的波形为，将图13C所示的以虚线的圆包围的峰的波形放大时的上升波形。图13D的波形中，消除如图13B的锯齿状波形而变得平滑，也没有包夹阈值而重复上下浮动的情形。由此，使测定误差极小，从而可精度良好地测定。
[0114]如同以上地根据本实施方式，则在试样容器5添加试样与荧光染色试剂后，以搅拌混合机构7进行试样溶液的搅拌?混合，其次，搅拌上述试样溶液并使激发光入射至该试样容器的被照射面，进一步，以光接收机构接收微生物的荧光发光，因此若与未加搅拌而静置量测的方法比较，则在极短时间微生物明亮地发光，可简便并短时间地量测压舱水中的微生物的量。可使装置小型化，制造成本变得低价。
[0115]此外，电气信号被导入控制机构前，因以滤波机构将扰动过滤，因此可明确地区别和微生物的荧光发光的光接收量相对应的电气信号与扰动，可不产生微生物量的测定误差，也不产生测定值差异的问题地稳定测定。
[0116]产业上的可利用性
[0117]本发明能够适用于用于在排出压舱水时确认是否满足排出基准的微生物的检查
目-O
[0118]符号说明
[0119]I一检查装置，2—主体部，3—操作部，4一显示部，5—试样容器，6—测定部，7—转子，8—保持板，9一试样容器收纳部，10—LED光源，11一平行光转换机构，12—激发光用带通滤波器，13—光源部，14一光电倍增管(PMT)，15—荧光用带通滤波器，16—聚光用透镜，17—狭缝，18—继光镜，19一光接收部，20—筐体，21—AC电源，22—二次电池，23 — CPU基板，24—AC/DC转换器，25 — RAM，26 — ROM，27—磁力搅拌器，28—风扇，29—外部输出端子，30一盖邰，31一平板，32一螺纹孔，33一凸透镜，34一滤波机构，35一运算放大器，36一1?通滤波电路，37—低通滤波电路，38—带通滤波电路。
【主权项】
1.一种微生物的检查装置，用于测定试样溶液中的微生物量，该微生物的检查装置的特征在于， 具备: 搅拌混合机构，其具有由透光材质形成的试样容器，并在该试样容器内进行试样溶液的搅拌、混合； 激发光源，其对上述试样容器照射激发光； 光接收机构，其检测光线并转换为电气信号；以及 控制机构，其计算上述试样容器中的试样所含的微生物量， 上述试样溶液通过在试样添加对微生物染色的荧光染色试剂而构成， 上述光接收机构检测由来自上述激发光源的上述激发光的照射所产生的、来自上述试样溶液的焚光发光， 上述控制机构基于来自上述光接收机构的电气信号检测发光数，并计算出上述试样容器中的试样所含的微生物量。
2.根据权利要求1所述的微生物的检查装置，其特征在于， 在上述光接收机构与上述控制机构之间具备滤波机构， 上述滤波机构对来自上述光接收机构的电气信号中的、低频成分的干扰及高频成分的干扰进行过滤。
3.根据权利要求2所述的微生物的检查装置，其特征在于， 上述滤波机构为连结高通滤波器与低通滤波器的带通滤波器。
4.根据权利要求1?3任一项所述的微生物的检查装置，其特征在于， 上述激发光源配置为以与上述试样容器正交的方式照射激发光， 上述光接收机构配置为以与上述激发光源的激发光正交的角度接收上述荧光发光。
5.根据权利要求1?4任一项所述的微生物的检查装置，其特征在于， 在上述光接收机构与上述试样容器之间设置狭缝构件。
6.根据权利要求1?5任一项所述的微生物的检查装置，其特征在于， 在上述激发光源与上述试样容器之间，设置将来自上述激发光源的光线转换为平行光的平行光转换机构。
7.根据权利要求6所述的微生物的检查装置，其特征在于， 上述平行光转换机构通过在平板穿设螺纹孔而形成。
8.根据权利要求6所述的微生物的检查装置，其特征在于， 上述平行光转换机构由凸透镜形成。
9.一种微生物的检查方法，用于测定试样溶液中的微生物量，该微生物的检查方法的特征在于， 包含如下步骤: 搅拌混合步骤，在试样容器内进行在试样中添加对微生物染色的荧光染色试剂的试样溶液的搅拌、混合； 激发步骤，对上述试样容器照射激发光； 光接收步骤，检测上述激发光的照射所产生的、来自上述试样容器的荧光发光，并转换为电气信号；以及 微生物数推定步骤，根据通过上述光接收步骤转换来的电气信号检测发光数，并计算出上述试样容器中的试样所含的微生物量。
10.根据权利要求9所述的微生物的检查方法，其特征在于， 在上述光接收步骤与上述微生物数推定步骤之间具备滤波步骤，该滤波步骤对通过上述光接收步骤转换来的电气信号中的、低频成分的干扰及高频成分的干扰进行过滤。
【专利摘要】本发明提供一种用于测定试样溶液中的微生物量的微生物的检查装置(1)，具备：搅拌混合机构(7)，在以透光材质形成的试样容器(5)进行添加有试样与荧光染色试剂的试样溶液的搅拌、混合；激发光源(10)，通过搅拌混合机构(7)搅拌试样溶液(5)并具备对试样容器(5)的被照射面照射激发光的光源；光接收机构(14)，检测通过来自激发光源(10)的激发光而荧光发光的光线，并转换为电气信息；以及控制机构(23)，通过来自光接收机构(14)的电气信息检测发光数，根据该发光数计算出试样容器(5)中的试样所含的微生物量。
【IPC分类】C12M1-34, C12Q1-06
【公开号】CN104619828
【申请号】CN201380043829
【发明人】中田明子, 伏田真矢, 江藤聪, 松田真典, 保坂幸男
【申请人】株式会社佐竹
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2013年8月23日
【公告号】EP2889365A1, US20150219548, WO2014030729A1