而进行扩增。
[0073] 如本文所用，术语"载体"是指可以携带插入的DNA并且可以为维持在宿主细胞中 的DNA分子。载体也可以为克隆载体，克隆媒介物等。术语"载体"包括主要功能为将核酸 分子插入到细胞中的载体，主要功能在于复制核酸的复制载体，和用于转录和/或翻译DNA 或RNA的表达载体，还包括提供多余一种上述功能的载体。
[0074] 如本文所用，术语"宿主细胞"是指单个细胞或细胞培养物，其可以是或已经是载 体或核酸分子和/或蛋白质整合的接受体。宿主细胞包括单一宿主细胞的子代，并且由于 天然的、随机的或有意突变，所述子代可能未必与亲代完全相同（在形态上或在总DNA互补 序列上）。宿主细胞包括用本发明的多核苷酸转染的细胞。"分离的宿主细胞"是指已经与 它来源的生物在物理上分离的宿主细胞。
[0075] 宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高 等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属的细菌细胞；真菌细胞 如酵母；植物细胞；昆虫细胞；动物细胞等。
[0076] 用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原 核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用0 &(：12法处理， 所用的步骤在本领域众所周知。另一种方法是使用MgCl2。如果需要，转化也可用电穿孔的 方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方 法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。
[0077] 抗精神病药物
[0078] 常用的抗精神病药物可分为经典抗精神病药和非经典抗精神病药，而经典抗精神 病药又可按照其化学结构分为吩噻嗪类（phenothiazines)，硫杂蒽类（thioxanthenes) 和丁酰苯类（buty-rophenones)。目前临床常用的非经典抗精神病药物主要是通过阻断 5-HT (5-羟色胺）受体而发挥抗精神病作用。这些药物多数对5-HT受体阻断作用强于其 阻断DA (多巴胺）受体的作用，协调5-HT与DA系统的相互作用和平衡，即使长期应用也几 无锥体外系反应发生。随着非典型抗精神病药的应用，其对代谢综合征的影响引起人们越 来越多的重视，明显的代谢紊乱不良反应严重影响治疗依从性及疗效。多种抗精神病药，特 别是奥氮平、氯氮平等更易引起代谢综合征。有关非典型抗精神病药诱发代谢综合征的机 制还不清楚，当前主要还是在中枢层面存在着不同路径的假说。抗精神病药物引起的代谢 综合征可能与药物所作用的神经递质受体有关，例如多巴胺、5-HT、组胺等。通常人们认为， 下丘脑释放的内源性胺类物质（如儿茶酚胺、5-HT、组胺）可以减少食欲，降低食物摄取，控 制体重。很多抗精神病药通过对5-HT受体的阻滞（如1B、2A、2C受体），增进食欲，加强摄 食，从而引起肥胖和体重增加。非典型抗精神病药还会引起糖耐量受损，这可能是因为药物 影响多巴胺调节中枢血糖水平，或者由于药物刺激在PRL的分泌导致糖代谢紊乱。
[0079] 试剂盒及其用途
[0080] 本发明还包括可用于检测抗精神病药物相关代谢综合征易感性的试剂盒，所述的 试剂盒中可包括特异性扩增含SNP位点的扩增产物的引物。更优选的，它还含有选自下组 的试剂：（a)与SNP部位结合的探针；(b)识别SNP位点的限制性内切酶。
[0081] 应理解，在本发明首次揭示了本发明SNP与抗精神病药物相关代谢综合征的相关 性之后，本领域技术人员可以方便地设计出可特异性扩增出含所述SNP位置的扩增产物， 然后通过测序等方法确定是否存在这些SNP。
[0082] 通常，引物的长度为15_50bp，较佳地为20_30bp。虽然引物与模板序列完全互补 是优选的，但是本领域技术人员知道，在引物与模板存在一定的不互补（尤其是引物的5' 端）的情况下，也能够特异性地扩增（即仅扩增出所需的片段）。含有这些引物的试剂盒和 使用这些引物的方法都在本发明范围之内，只要该引物扩增出的扩增产物含有本发明SNP 的对应位置。
[0083] 虽然扩增产物的长度没有特别限制，但是通常扩增产物的长度为100_3000bp，较 佳地为 150-2000bp，更佳地为 200-1000bp。
[0084] 本发明的主要优点在于：
[0085] (1)首次发现1个SNP与抗精神病药物相关代谢综合征易感性存在相关性，从而为 抗精神病药物相关代谢综合征的诊断与治疗提供了新的途径。
[0086] (2)基于本发明人的新发现，可用于选择治疗抗精神病药物相关代谢综合征药物 的标志、筛选治疗抗精神病药物相关代谢综合征的药物、评估抗精神病药物相关代谢综合 征疾病的转归、预后的分子标志，为抗精神病药物相关代谢综合征药物的进一步开发提供 了一种良好的靶点。
[0087] (3)本发明不仅可用于早期较准确地诊断抗精神病药物相关代谢综合征，而且可 以未雨绸缪地使携带者在未发病前就采取合理的预防措施，从而提高携带者的生存期和生 存质量，因此具有极其重大的应用价值和社会效益。
[0088] (4)本发明SNP能够作为合适的抗精神病药物的生物学指标，从而实现对精神病 患者个体化用药。
[0089] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本 发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照 常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册（New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否 则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
[0090] 通用方法
[0091] -、DNA样品准备
[0092] 基因组DNA样品应电泳检测完整性，并测浓度。用去离子水或Tris-Cl稀释为浓 度10-20ng/ul。由于样品量大，必须做好样品标记。
[0093] 二、PCR 反应
[0094] 1.在384孔板上一定要做好标记：横6,纵4的24个孔为一组。以一组为将来点 样时候的一针。
[0095] 2.按多出来10-15%的量来配制Mix，如需检测40个样，则配50-55个样的量
[0096] 反应体系：均按ul计算
[0097]
[0098] *如果做27个Plex以上的PCR，应用0· 2ul
[0099] 3.在384孔板中每孔加入4ul Mix，最后在加入Iul模板DNA。
[0100] 4.用ABI的PCR封口膜封紧，防止样品蒸发。本实验的每一步反应揭开PCR封口 膜后都应该换一张新膜。
[0101] 5.板子vertex后甩离。
[0102] 6.在ABI9700PCR仪上进行如下反应：
[0103]
[0104] 反应结束时，取出384PCR反应板。
[0105] 三、SAP消化反应
[0106] L前述PCR后的板子2000rpm离心lmin。
[0107] 2.配制SAP酶Mix，按多出10-15%的量。
[0108] 反应体系：
[0109]
[0110] 3.取2ul的Mix加入到每个孔中，来回吸打，保证混勾，将封口膜盖紧
[0111] 4.在PCR仪中进行SAP酶消化：
[0112] 37 度 40min
[0113] 85 度 5min
[0114] 4 度 hold
[0115] 消化完毕，取出384孔反应板，目测液体挥发情况。
[0116] 四、单碱基延伸
[0117] I. SAP反应板放入离心机中2000rpm离心lmin。
[0118] 2.配制延伸Mix
[0121] 3.取2ul的Mix加入到每个孔中，并来回吸打，保证混匀，将封口膜盖紧
[0122] 4.甩离后，上ABI9700仪进行下列反应：
[0123]
[0124] 5.反应完毕，取出384反应板，目测液体挥发情况。
[0125] 五、树脂纯化
[0126] L 384板2000rpm离心2min，每孔加16ul水。如有必要可再离心一次。
[0127] 2.取一张干净的A4纸，将6MG 384板置于其上，用小勺取适量resin。用塑料盖 板反复左右推平resin，压实，使每孔树脂含量均匀。