一株抑制黄曲霉毒素的深海嗜气芽孢杆菌的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及深海微生物技术与真菌毒素生物防控技术领域，具体的说是一株抑制黄曲霉毒素的深海嗜气芽孢杆菌。
【背景技术】
[0002]海洋约占地球表面积的71%，蕴藏着巨大的资源与财富，是解决21世纪人类资源匮乏和环境污染的重要途径。以往由于过多使用化学合成农药，不仅使植物病原真菌产生抗药性，防治的效果也越来越差，而且，植物上残留的药物对人体和环境都产生较大的危害，利用生物防治不仅可减轻作物病害，还可减少上述副作用的发生，并保护环境。筛选高效抑制植物病原真菌的海洋微生物，是植物真菌病害防治的有效途径和未来发展方向。
[0003]利用海洋微生物防治植物病原真菌的研究报道越来越多，但多数研究都是利用海岸带、近海等来源的海洋微生物，利用深海微生物的研究尚不多见，利用大洋深海微生物的研究就更少，大洋深海微生物生活在高盐、高压、低温、低光照、寡营养等特殊的环境中，这些特殊的地理与环境特征，造就了大洋深海微生物的新颖性和多样性，也造就了深海微生物独特的代谢途径，能够产生结构和功能新颖的天然活性产物，使其在科学研究、应用开发等方面具有重要的价值，并成为研究热点。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术的不足，本发明解决上述技术问题采用的技术方案是:一株抑制黄曲霉毒素的深海嗜气芽孢杆菌，其特征包括如下步骤:
(1)本发明所说的深海嗜气芽孢杆菌为嗜气芽孢杆菌FE2菌株aerophilusFE2)，并已于2015年3月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为 CGMCC N0.10662 ；
(2)本发明所说的FE2菌株分离自南大西洋3125米水深的含钙质有孔虫粘土沉积物，通过以下方法分离获得:新鲜的含钙质有孔虫粘土 10倍系列稀释液经55°C水浴6min后，涂布于高氏一号培养基，28度下恒温培养，及时挑取单菌落，并经进一步划线纯化，获得纯菌种FE2菌株；
(3)本发明所说的FE2菌株经16SrRNA基因分子鉴定为嗜气芽孢杆菌的一个新菌株，菌体呈杆状，可产生芽孢，革兰氏染色阳性；
(4)将本发明的深海嗜气芽孢杆菌FE2菌株接种于多种培养基中，在20-36°C温度下，振荡培养4-10天，即可得到含有高效活性物质的发酵液，该发酵液可100%抑制黄曲霉毒素的合成。
[0005](5)本发明的深海嗜气芽孢杆菌FE2菌株的发酵液中的活性物质具有良好的生物安全性，对大肠杆菌、产气杆菌等肠道菌群无抑制作用，对单细胞真菌酿酒酵母也没有抑制作用；(6)本发明的深海嗜气芽孢杆菌FE2菌株及其发酵液可应用于饲料、粮食、大田作物等
的黄曲霉毒素污染的有效防控。
【具体实施方式】
[0006]下面结合实施例对本发明做进一步说明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
[0007]实施例1:深海嗜气芽孢杆菌FE2菌株在淀粉酪蛋白培养基中的液体发酵及其抑制黄曲霉毒素的活性
将过夜培养的FE2菌株的液体种子，按1-5%接种量接种到含有0.5-2%可溶性淀粉、0.1-1.0%酪蛋白、0.2-2.0%酵母膏的液体培养基中，在20-36度、120转/分钟下培养6天，结束发酵，对发酵液进行离心，获得的无细胞上清液即是含有高效抑制黄曲霉毒素的活性物质的发酵液，该发酵液可100%抑制黄曲霉毒素的合成，可直接用于防控黄曲霉毒素的污染，或者加工成干粉用于防控黄曲霉毒素的污染。
[0008]实施例2:深海嗜气芽孢杆菌FE2菌株在F培养基中的液体发酵及其抑制黄曲霉毒素的活性
将新鲜的FE2菌株的液体种子，按1-5%接种量接种到含有0.4%牛肉膏、0.4%蛋白胨、0.1%酵母膏和0.1%葡萄糖的液体培养基中，在20-36度、120转/分钟下培养4_8天，结束发酵，对发酵液进行离心，获得的无细胞上清液即是含有高效抑制黄曲霉毒素的活性物质的发酵液，该发酵液可100%抑制黄曲霉毒素的合成，可直接用于防控黄曲霉毒素的污染，或者加工成干粉用于防控黄曲霉毒素的污染。
【主权项】
1.一株分离自南大西洋3125米水深的含钙质有孔虫粘土沉积物的深海菌株，为嗜气芽孢杆菌FE2菌株aerophilus FE2)，已于2015年3月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC N0.10662。
【专利摘要】本发明提供一株可抑制黄曲霉毒素产生的深海菌株，为嗜气芽孢杆菌FE2菌株（<i>Bacillus？aerophilus？</i>FE2），分离自南大西洋3125米水深的含钙质有孔虫粘土沉积物，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC？No.10662。将菌株在多种培养基中发酵，获得的发酵上清液可完全抑制黄曲霉毒素的产生，但对肠道菌群和单细胞真菌酿酒酵母则无抑制作用，具有更高的使用安全性。本发明的FE2菌株及其发酵产物可用于饲料、粮食、大田作物等的黄曲霉毒素污染的有效防控。CGMCC No.1066220150324
【IPC分类】C12R1/07, C12N1/20
【公开号】CN105039200
【申请号】CN201510314671
【发明人】闫培生, 王文威, 王凯, 邵宗泽, 孙晓磊, 高秀君, 王琪
【申请人】哈尔滨工业大学（威海）, 中国大洋矿产资源研究开发协会
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年6月10日