一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法_2

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方案进行清楚、完整地描述, 显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的 实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都 属于本发明保护的范围。
[0034] 实施例1 (最佳实施例)
[0035] 本发明实施例中,一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法,包括以下步骤:
[0036] (1)鱼鳞预处理,包括以下步骤:
[0037] 11)清洗:清洗鱼鳞,剔除杂物,沥干水分;
[0038] 12)酸处理:往鱼鳞中加入质量百分比浓度为5. 6%的柠檬酸钠溶液,使鱼鳞与柠 檬酸钠溶液的质量体积浓度为400kg/m3,在22°C温度下,利用功率为200W的超声波处理 2. 5h,滤去柠檬酸钠溶液,用纯水清洗鱼鳞至中性;其中,柠檬酸溶液的配制方法如下:先 按照乙二胺四乙酸二钠:柠檬酸的质量比为7 :100的比例,称取乙二胺四乙酸二钠和柠檬 酸混合后,再加入纯水,配制成质量百分比浓度为5. 6%的柠檬酸钠溶液;
[0039] 13)碱处理:往鱼鳞中加入质量百分比浓度为3%的石灰水溶液,使鱼鳞与石灰水 溶液的质量体积浓度为400kg/m 3,在22°C温度下,静置浸泡12h,滤去石灰水溶液,用纯水清 洗鱼鳞至中性,沥干水分;
[0040] 14)研磨:取步骤13)沥干后的鱼鳞,加入纯水,使鱼鳞与纯水的质量体积浓度为 400kg/m 3,用胶体磨磨成鱼鳞衆液;
[0041] 15)蒸煮:将鱼鳞浆液升温至100°C,保温35min ;
[0042] 16)冷却:待蒸煮后的鱼鳞浆液自然冷却至58°C后,将鱼鳞浆液移至酶解罐中;
[0043] (2)辐照处理,将鱼鳞浆液装入密封袋封口,平铺在水平面,采用电子束进行辐照 处理,辐照剂量为lOOkGy,辐照时间90s ;其中,电子束的运行参数为:电子束能量9MeV,功 率 10kW,频率 320Hz ;
[0044] (3)酶解,包括一次酶解和二次酶解;
[0045] 31) -次酶解:调整酶解罐内的鱼鳞浆液的pH值至6. 3,加入鱼鳞浆液质量的 0.65%的木瓜蛋白酶,木瓜蛋白酶的酶活力为25〇11/^,调整酶解罐内温度至59°(:,酶解211 ;
[0046] 32)二次酶解:调整酶解罐内液体pH值至7. 8,加入鱼鳞浆液质量的0. 5%的胰蛋 白酶,胰蛋白酶的酶活力为3000u/g,调整酶解罐内温度至57°C,酶解2h ;
[0047] (4)活性炭吸附:在酶解罐中加入鱼鳞浆液质量的1 %的活性炭粉末,调整酶解罐 内温度至57°C,保温48min ;
[0048] (5)过滤:将酶解罐内鱼鳞浆液用压滤机过滤后,然后袋式过滤;压滤机采用孔径 为380目的隔膜;袋式过滤采用孔径为2 y m微孔滤膜;
[0049] (6)浓缩:滤液先经过孔径为0. 4ym的微滤膜过滤成微滤液,接着经过孔径为 0. 015 y m的超滤膜过滤成超滤液,然后经过孔径为1. 5nm的纳滤膜浓缩,得纳滤液;将超滤 膜过滤后所得到的未通过超滤膜的超滤截留液转移到酶解罐中,重复步骤(3)-步骤(6), 得纳滤液。
[0050] (7)灭菌:纳滤液在温度125°C下灭菌9s,然后待温度冷却至50°C时出料;
[0051] (8)喷雾干燥:将灭菌后的纳滤液在喷雾干燥装置中通过喷雾使其提炼成粉末, 得成品;喷雾干燥装置的莫诺栗进料速度为lkg/min,进风温度为170°C,出风温度为82°C。
[0052] 实施例2
[0053] 本发明实施例中,一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法,包括以下步骤:
[0054] (1)鱼鳞预处理,包括以下步骤:
[0055] 11)清洗:清洗鱼鳞,剔除杂物,沥干水分;
[0056] 12)酸处理:往鱼鳞中加入质量百分比浓度为5%的梓檬酸钠溶液,使鱼鳞与梓檬 酸钠溶液的质量体积浓度为420kg/m 3,在20°C温度下,利用功率为240W的超声波处理2h, 滤去柠檬酸钠溶液,用纯水清洗鱼鳞至中性;其中,柠檬酸溶液的配制方法如下:先按照乙 二胺四乙酸二钠:柠檬酸的质量比为6 :100的比例,称取乙二胺四乙酸二钠和柠檬酸混合 后,再加入纯水,配制成质量百分比浓度为5%的柠檬酸钠溶液;
[0057] 13)碱处理:往鱼鳞中加入质量百分比浓度为2. 5%的石灰水溶液,使鱼鳞与石灰 水溶液的质量体积浓度为420kg/m3,在20°C温度下,静置浸泡14h,滤去石灰水溶液,用纯水 清洗鱼鳞至中性,沥干水分;
[0058] 14)研磨:取步骤13)沥干后的鱼鳞,加入纯水,使鱼鳞与纯水的质量体积浓度为 420kg/m 3,用胶体磨磨成鱼鳞楽;液;
[0059] 15)蒸煮:将鱼鳞浆液升温至100°C,保温30min ;
[0060] 16)冷却:待蒸煮后的鱼鳞浆液自然冷却至55°C后,将鱼鳞浆液移至酶解罐中;
[0061] (2)辐照处理,将鱼鳞浆液装入密封袋封口,平铺在水平面,采用电子束进行辐照 处理,辐照剂量为50kGy,辐照时间150s ;其中,电子束的运行参数为:电子束能量8MeV,功 率 12kW,频率 300Hz ;
[0062] (3)酶解,包括一次酶解和二次酶解;
[0063] 31) -次酶解:调整酶解罐内的鱼鳞浆液的pH值至6.0,加入鱼鳞浆液质量的 0. 6%的木瓜蛋白酶,木瓜蛋白酶的酶活力为220u/g,调整酶解罐内温度至58 °C,酶解 1. 5h ;
[0064] 32)二次酶解:调整酶解罐内液体pH值至7. 5,加入鱼鳞浆液质量的0. 4%的胰蛋 白酶,胰蛋白酶的酶活力为2800u/g,调整酶解罐内温度至56°C,酶解1. 5h ;
[0065] (4)活性炭吸附:在酶解罐中加入鱼鳞浆液质量的0. 8%的活性炭粉末,调整酶解 罐内温度至56 °C,保温45min;
[0066] (5)过滤:将酶解罐内鱼鳞浆液用压滤机过滤后,然后袋式过滤;压滤机采用孔径 为350目的隔膜;袋式过滤采用孔径为1 y m微孔滤膜;
[0067] (6)浓缩:滤液先经过孔径为0. 3 ym的微滤膜过滤成微滤液,接着经过孔径为 0. 01 y m的超滤膜过滤成超滤液,然后经过孔径为lnm的纳滤膜浓缩,得纳滤液;将超滤膜 过滤后所得到的未通过超滤膜的超滤截留液转移到酶解罐中,重复步骤(3)-步骤(6),得 纳滤液。
[0068] (7)灭菌:纳滤液在温度121°C下灭菌10s,然后待温度冷却至45°C时出料;
[0069] (8)喷雾干燥:将灭菌后的纳滤液在喷雾干燥装置中通过喷雾使其提炼成粉末, 得成品;喷雾干燥装置的莫诺栗进料速度为〇.8kg/min,进风温度为160°C,出风温度为 8(TC〇
[0070] 实施例3
[0071] 本发明实施例中,一种从鱼鳞中提取胶原蛋白的方法,包括以下步骤:
[0072] (1)鱼鳞预处理,包括以下步骤:
[0073] 11)清洗:清洗鱼鳞,剔除杂物,沥干水分;
[0074] 12)酸处理:往鱼鳞中加入质量百分比浓度为6%的柠檬酸钠溶液,使鱼鳞与柠檬 酸钠溶液的质量体积浓度为350kg/m 3,在25°C温度下,利用功率为120W的超声波处理3h, 滤去柠檬酸钠溶液,用纯水清洗鱼鳞至中性;其中,柠檬酸溶液的配制方法如下:先按照乙 二胺四乙酸二钠:柠檬酸的质量比为8 :100的比例,称取乙二胺四乙酸二钠和柠檬酸混合 后,再加入纯水,配制成质量百分比浓度为6%的柠檬酸钠溶液;
[0075] 13)碱处理:往鱼鳞中加入质量百分比浓度为3. 5%的石灰水溶液,使鱼鳞与石灰 水溶液的质量体积浓度为350kg/m3,在25°C温度下,静置浸泡10h,滤去石灰水溶液,用纯水 清洗鱼鳞至中性,沥干水分;
[0076] 14)研磨:取步骤13)沥干后的鱼鳞,加入纯水,使鱼鳞与纯水的质量体积浓度为 350kg/m 3,用胶体磨磨成鱼鳞衆液;
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