剂"指的是帮助将混合物 变成凝胶或呈现凝胶形式的化合物。在本发明的多个方面，合适胶凝剂的实例包括但不限 于，琼脂、明胶、藻酸及其盐、卡拉胶、角豆胶（槐树豆胶）、径丙基瓜儿胶及其衍生物、加工 的牒麟菜属海藻等等。琼脂是优选的胶凝剂。在一个实施方式中，试验生物和指示剂和任 选地其它额外成分（例如氨基糖巧类抗生素）被引入到琼脂溶液中。允许琼脂溶液凝固形 成试验介质，W使试验生物保持存活但由于例如低溫而不能繁殖。一般而言，胶凝剂将构成 试验介质的大部分。试验物中胶凝剂的量一般在l-200g/l试验介质之间，优选地在2-50g/ 1试验介质之间，更优选地在5-20g^试验介质之间，最优选地在7-15g^试验介质之间。 [00巧]当试验介质的形式为固态基质时，它可包含载体材料，例如陶瓷、棉花、玻璃、金属 颗粒、任何形状或形式的聚合物、娃酸盐、海绵状物、毛线等等。或者，试验物的形式可W是 包含试验生物、指示剂和任选地营养物的块状物（t油let)、盘（disc)或滤纸。立种成分可 存在于单一块状物中，但也可W在两个或更多个块状物中。当然，可W使用结合固态、液态 和/或凝胶状形式的试验介质的试验物体系。
[00%] 任选地，微生物生长抑制试验物还可包含营养物、稳定剂、盐、缓冲剂和/或增粘 剂。当在本文中使用时，术语"营养物"指的是促进试验生物生长和/或试验生物生长所需 的营养物质或成分。合适的营养物取决于试验物体系中使用的微生物。试验介质可包含 两种或更多种不同的营养物。它们包括但不限于，可同化的碳源，例如碳水化合物例如葡 萄糖、果糖、薦糖、乳糖和右旋糖；可同化的氮源，例如氨基酸诸如蛋白腺或膜蛋白腺；维生 素和生长因子的来源，例如牛肉或酵母提取物；矿物的来源，例如碱±金属盐诸如领盐或巧 盐。本领域技术人员已知可存在于根据本发明的试验物中的合适的额外成分，其包括但不 限于，能够提高或降低抗生素试验物灵敏度的其它试剂（不同于氨基糖巧类抗生素）。
[0027] 在本发明的一个实施方式中，试验生物选自由Bacillus物种、Escherichia物 种和Streptococ州S物种组成的组。当在本文中使用时，术语"试验生物"还包括抱子， 例如任何运些物种的抱子。在本发明的一个优选实施方式中，试验生物是嗜热性的。实 例是BacillusSte曰rothermophiIus或Streptococcusthermophilus，其中Bacillus stearothermo地ilus是优选的。运些物种可被引入到试验物中作为能够产生菌落的单 位，或菌落形成单位（CFU)。当在本文中使用时，术语"CRJ"指的是能够产生生物菌落 的试验生物、试验生物的抱子、试验生物的部分萌发抱子、营养细胞或它们的任何混合物 的数目。所述CFU的浓度被表示为每ml试验介质的菌落形成单位（CFU/ml)，其通常在 1X1〇5-1X10?即/ml、优选地 1X1〇6-1Xl〇i°C即/ml、更优选地 2X1〇6-1Xl〇9c即/ml、最优 选地5X1〇6-1X10?即/ml、或仍然更优选地5X1〇6-2XIO^C即/ml的范围内。
[0028] 在本发明的一个实施方式中，样品可来源于体液、器官、肉或蛋。抗生素还可存在 于食品中，其中运些动物产品作为成分被加入到食品中。食品的实例是奶、加工的奶制品 (例如，奶油、酸奶）；奶牛、猪、家禽和鱼的肉；海鲜例如邮；肝脏；加工的肉制品例如香肠； 即食型膳食和婴儿食品。抗生素还可存在于体液或动物组织中，该体液或动物组织适合由 例如食品检验机构检验。实例是血液、肾脏组织或从肾脏和尿获得的前-尿（pre-urine)。 尿和血液适合在屠宰动物之前检验。抗生素还可存在于污水、来自任何类型工业的水等中。 在一个优选的实施方式中，样品是尿、血液、蛋、蜜化oney)、肾脏、肉、肝脏、鱼、邮、饲料和/ 或奶，其中奶是最优选的。奶可来源于奶牛，但也可来源于绵羊、山羊、巧牛、水牛、马、驯鹿 和骆驼。在一个优选的实施方式中，样品是流体样品。在一个实施方式中，样品可W不是流 体且需要从样品中提取包含抗生素的流体。
[0029] 优选地，在加入流体样品之前，试验生物最低限度地萌发和外生长（outgrowth) 或者不萌发和外生长（outgrowth)。运是通过将试验物胆存和保持在包含不适宜的溫度和 /或不适宜的抑-值和/或缺乏试验生物萌发和外生长必需的营养物的条件下来实现的。 当然，条件不应该对微生物生长抑制试验物中存在的所有CRJ造成不可逆损伤。
[0030] 在使样品与试验生物接触之后，在不存在抗生素的情况下，允许试验生物的生长 发生对于试验生物生长足够长的时期。可通过如下确定时期：包括对照样品（即不含抗生 素的样品），并在用于测量对照样品的试验物已变色时终止所有检测样品的解育。它还可W 被决定W解育所有样品持续固定的时期。通过加入营养物（任选地在接触所述样品之前） 和/或升高溫度，和/或提供试验生物能够生长的抑值，来诱导生长。或者，可W在使流体 样品与试验生物接触之前建立运些条件。例如，当在有益于试验生物生长的溫度下解育试 验生物时，可发生试验生物的生长。
[0031] 通过观察指示剂的变化来检测试验生物的生长量。生长不足/缺乏生长反映了样 品中存在抗生素，而生长反映了样品中不存在抗生素。如上所述，通过所使用指示剂的变化 来测定抗生素的存在。通常，当抗生素存在于样品中时，指示剂不变化。当样品中不存在抗 生素时，微生物生长将发生，从而导致指示剂变化。当例如运种变化是颜色变化时，可在视 觉上观察所述颜色变化。然而，还可W使用如下装置来测定所述颜色变化，该装置产生数字 图像数据或者该装置产生模拟图像数据并将所述模拟图像数据转化为数字图像数据，之后 通过计算机处理器解释所述数字图像数据。WO03/033728中描述了运种装置的一个实例， 良P，样品读取设备例如连接个人计算机的扫描仪。WO2007/090683中描述了运种装置的另 一个实例，即，连接个人计算机的组合的样品解育和样品读取设备（例如与解化器组合的 扫描仪）。运两个文件通过引用被并入本文。
[0032] 任选地，对某些试验物成分进行灭菌且通常将试验物的抑调节至所需值。任选 地，可在加入到试验生物中之前，混合（例如，与其它样品，而且与盐、缓冲化合物、营养物、 稳定剂、酶等等）、浓缩和/或稀释（例如，用稀释液，例如水、溶剂等等）样品。
[0033] 在本发明的一个实施方式中，通过解育试验生物持续预定的时期来使其生长，所 述时期优选地在约0. 5-6小时的时间跨度内，更优选地在0. 75-5小时之间，最优选地在 1. 0-4小时之间且特别地在2-3. 5小时之间。优选地，在预定的溫度、优选地试验生物的最 适生长溫度下解育试验生物。当例如，使用嗜热性试验生物时，所述溫度优选地在40-70°C 之间，更优选地在50-65°C之间，最优选地在60-64°C之间。任选地，可借助于恒溫设备来进 行所述反应。或者，试验生物生长所需的时间等于含有已知量抗生素的校准样品诱导指示 剂变化所需的时间或者不含抗生素的对照样品诱导指示剂变化所需的时间。
[0034] 在本发明的一个实施方式中，包装中存在至少一个微生物生长抑制试验物。试验 物至少包含试验生物、指示剂和氨基糖巧类抗生素。在一个优选的实施方式中，包装是封闭 的。当在本文中使用时，"封闭的"表示：存在于包装内的试验物尚未与样品接触。包装可 W是盒子和任何其它合适的包装单元。它可W由适合制造包装单元的任何材料制成。优选 地，包装包含多于一个微生物生长抑制试验物。微生物生长抑制试验物可存在于容器中。容 器可具有任何形状和尺寸并可来自任何可获得的材料，条件是可W观察到指示剂变化。容 器可W是管（例如安飯），但也可W是孔例如作为板（例如微孔板，即具有多个孔的平板） 的一部分的孔。封闭的包装可例如包含5个板、10个板或20个板和/或25