；反应时间短，虾青素提取率高，避免了以往传统酸法破壁对产品质量和用途造成的不良影响。
[0040](4)本发明通过食用酒精提取虾青素，更加安全，更有利于将虾青素应用于食品、药品中。同时通过酒精浸提后，能进一步促进酵母自溶，加速酵母抽提物的制备，减少促溶剂的用量。
[0041](5)本发明既适用于酵母干粉，也适用于湿酵母的虾青素提取。
[0042](6)通过前两步的处理使得葡聚糖的制备工艺更简单，产品的纯度更高。
【具体实施方式】
[0043]下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0044]实施例1虾青素提取条件的摸索
[0045]一、设计三个试验组，酵母菌体含量不同
[0046](1)反应体系体积为100mL，红法夫酵母(ATCC66270)湿菌体分别为10g、15g和20g(其中红法夫酵母干菌体为其湿菌体质量的12.25% )，纤维素酶(Celluclast 1.5L，诺维信，丹麦)溶液4mL，加入去离子水，用3M盐酸调节pH值为4.5左右，再用去离子水定容至100mL ;在150rpm的搅拌速度下于50°C反应6h，煮沸3min灭酶活。
[0047](2)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集沉淀，用去离子水将沉淀洗涤干净。
[0048](3)往酶解后的酵母中添加100mL食用乙醇，在转速为150rpm的摇床上振荡避光提取60min，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清，重复提取多次，每次提取60min，直至提取液为无色，将含虾青素的提取液合并，得到虾青素液。
[0049]通过分光光度计法测定4下青素含量，以酸-热处理法(Ling-YanZhou, Internat1nal Journal of Modern B1logy and Medicine，2015，6(2):136-145)提取的虾青素量为对照，即默认酸-热处理法提取的虾青素为全部虾青素量，提取率为本方法提取的虾青素量占全部虾青素的百分比，结果如下:红法夫酵母菌体含量为10%的虾青素提取率70.46% ;红法夫酵母菌体含量为15%的虾青素提取率60.3% ;红法夫酵母菌体含量为20 %的虾青素提取率49.9 %。
[0050]二、设计三个试验组，纤维素酶溶液含量不同
[0051](1)反应体系体积为100mL，红法夫酵母(ATCC66270)湿菌体为10g，分别添加4、6和10mL纤维素酶溶液，加入去离子水，用3M盐酸调节pH值为4.5左右，再用去离子水定容至100mL ;在150rpm的搅拌速度下于50°C反应6h，煮沸3min灭酶活。
[0052](2)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集沉淀，用去离子水将沉淀洗涤干净。
[0053](3)往酶解后酵母中添加100mL食用乙醇，在转速为150rpm的摇床上振荡避光提取60min，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清，重复提取多次，每次提取60min，直至提取液为无色，将含虾青素的提取液合并，得到虾青素液。
[0054]结果如下:酶添加量4mL的虾青素提取率70.46%;酶添加量6mL的提取率91.4%;酶添加量10mL的虾青素提取率99.48%。
[0055]三、设计三个试验组，纤维素酶作用时间不同
[0056](1)反应体系体积为100mL，红法夫酵母(ATCC66270)湿菌体为10g，纤维素酶溶液为6mL，加入去离子水，用3M盐酸调节pH值为4.5左右，再用去离子水定容至lOOmL ;在150rpm的搅拌速度下于50°C分别反应4h、6h和12h，煮沸3min灭酶活。
[0057](2)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集沉淀，用去离子水将沉淀洗涤干净。
[0058](3)往酶解后酵母中添加lOOmL乙醇，在转速为150rpm的摇床上振荡避光提取60min，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清，重复提取多次，每次提取60min，直至提取液为无色，将含虾青素的提取液合并，得到虾青素液。
[0059]结果如下:反应4h的虾青素提取率60.5% ;反应6h的提取率90.24% ;反应12h的4下青素提取率95.6%。
[0060]四、设计三个试验组，提取所用的乙醇的量不同
[0061](1)反应体系体积为lOOmL，红法夫酵母(ATCC66270)湿菌体为10g，纤维素酶溶液为6mL，加入去离子水，用3M盐酸调节pH值为4.5左右，再用去离子水定容至lOOmL ;在150rpm的搅拌速度下于50°C分别反应4h、6h和12h，煮沸3min灭酶活。
[0062](2)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集沉淀，用去离子水将沉淀洗涤干净。
[0063](3)往酶解后酵母中分别添加食用乙醇为40、60和80mL/g干菌体(每克干菌体添加食用乙醇的量)，在转速为150rpm的摇床上振荡避光提取60min，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清，得到虾青素液。
[0064]结果如下:乙醇添加量为40mL/g干菌体的虾青素提取率84.83% ;乙醇添加量为60mL/g干菌体的虾青素提取率91.93% ;乙醇添加量为80mL/g干菌体的虾青素提取率91.06%。
[0065]五、设计三个试验组，提取时间不同
[0066](1)反应体系体积为lOOmL，红法夫酵母(ATCC66270)湿菌体为10g，纤维素酶溶液为6mL，加入去离子水，用3M盐酸调节pH值为4.5左右，再用去离子水定容至lOOmL ;在150rpm的搅拌速度下于50°C分别反应4h、6h和12h，煮沸3min灭酶活。
[0067](2)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集沉淀，用去离子水将沉淀洗涤干净。
[0068](3)往酶解后酵母中添加乙醇60mL/g干菌体，在转速为150rpm的摇床上振荡避光分别提取20、60和90min，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清，得到4下青素液。提取20min的4下青素提取率75.56% ;提取60min的4下青素提取率91.93% ;提取90min的4下青素提取率为88.02%。
[0069]实施例2酵母抽提物制备条件的摸索
[0070]一、设计三个试验组，酵母抽提酶的用量不同
[0071](1)反应体系体积为1L，含红法夫酵母(ATCC66270)湿菌体100g和60mL纤维素酶，用3M盐酸调节pH值为约4.5，去离子水定容；在150rpm的搅拌速度下于50°C反应6h，煮沸3min灭酶活。
[0072](2)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集沉淀，用去离子水将沉淀洗涤干净。
[0073](3)往酶解后酵母中添加乙醇60mL/g干菌体，在转速为150rpm的摇床上振荡避光提取60min，lOOOOrpm离心lOmin，分别收集上清和沉淀；测定上清中的4下青素，得到4下青素提取率91.93%。
[0074](4)按照固液比(g:mL) 10%添加去离子水到提取虾青素后的菌体沉淀中，分别添加1%、2%和3%酵母抽提酶(w/w，分母为酵母干菌体质量)(购于广西庞博生物工程有限公司)和3% (w/w，分母为酵母干菌体质量)氯化钾，在150rpm的搅拌速度下于55°C反应24h，煮沸3min灭酶活。
[0075](5)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清液并干燥，得到红法夫酵母抽提物。
[0076]通过甲醛滴定法测定氨基氮得率，结果如下:1%酵母抽提酶添加量的氨基氮得率为2.8% (即每克干酵母得到氨基氮的量)，2%酵母抽提酶添加量的氨基氮得率为3.3%,3%酵母抽提酶添加量的氨基氮得率为3.9%。
[0077]二、设计三个试验组，氯化钾的用量不同
[0078](1)虾青素的提取同步骤一⑴?(3)。
[0079](2)按照固液比10% (v/w)添加去离子水到提取虾青素后的菌体沉淀中，添加3%酵母抽提酶，再分别添加1%、2%和3%氯化钾，在150rpm的搅拌速度下于55°C反应24h，煮沸3min灭酶活。
[0080](3)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清液并干燥，得到红法夫酵母抽提物。
[0081]结果如下:1%氯化钾的氨基氮得率为2.9%，2%氯化钾的氨基氮得率为3.1%,3 %氯化钾的氨基氮得率为3.8%。
[0082]实施例3葡聚糖制备条件的摸索
[0083]一、设计三个试验组，碱液的浓度不同
[0084](1)反应体系体积为1L，含红法夫酵母(ATCC66270)菌体100g和60mL纤维素酶，用3M盐酸调节pH值为约4.5，去离子水定容；在150rpm的搅拌速度下于50°C反应6h，煮沸3min灭酶活。
[0085](2)反应结束后，lOOOOrpm离心lOmin，将沉淀洗涤干净。
[0086](3)往酶解后酵母中添加食用乙醇60mL/g干菌体，在转速为150rpm的摇床上振荡避光提取60min，lOOOOrpm离心lOmin，收集上清，得到4下青素提取率91.93%。
[0087](4)按照固液比10%添加去离子水到提取色素后的菌体沉淀中，添加3%氯化钾和3%酵母抽提酶，在150rpm的搅拌速度下于55°C反应24h，煮沸3min灭酶活。
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