nostat)、peretinoin、plitidepsin、泊马度 胺（Pomalidomide)、procodazol、ridaforolimus、塔喹莫德（tasquinimod)、telotristat、 胸腺法新（thymalfasin)、替拉扎明、tosedostat、trabedersen、乌苯美司、伐司朴达 (valspodar)、今又生（Gendicine) 4、溶链菌制剂（picibanil)4、reolysin4、盐酸瑞他霉素 (retaspimycin) 1'3、trebananib2'3、维鲁利秦（virulizin) 4、carfilzomib1'3、血管内皮抑素 4、immucothel4、belinostat3、MGN-1703 4; 1 Prop. INN (Proposed International Nonproprietary Name) 2Rec. INN(Recommended International Nonproprietary Names) 3USAN(United States Adopted Name) 4 no INN。
[0125] 下列缩写分别指的是下面的定义： aq (水溶液），h (小时），g (克），L (升），mg (毫克），MHz (兆赫），min.(分钟），mm (毫 米毫摩尔），mM(毫摩尔浓度），m.p.(熔点），eq(当量），mL(毫升），L(微升）， ACN (乙腈），AcOH (乙酸），CDCl3 (氘化氯仿），CD3OD (氘化甲醇），CH3CN (乙腈），c-hex (环己 烷），DCC(二环己基碳二亚胺），DCM(二氯甲烷），DIC(二异丙基碳二亚胺），DIEA(二异丙基 乙基-胺），DMF(二甲基甲酰胺），DMS0(二甲亚砜），DMS0-d 6(氘化二甲亚砜），EDC(l-(3-二 甲基-氨基-丙基）-3-乙基碳二亚胺），ESI (电喷涂电离），EtOAc (乙酸乙酯），Et2O (二 乙醚），EtOH(乙醇），HATU(二甲基氨基-([1，2, 3]三唑并[4, 5-b]吡啶-3-基氧基）-亚 甲基]-二甲基-铵六氟磷酸盐），HPLC(高效液相色谱），i-Pr0H(2-丙醇），K 2CO3(碳酸 钾），LC(液相色谱），MeOH(甲醇），MgS04(硫酸镁），MS(质谱），MTBE(甲基叔丁基醚）， NaHCO3 (碳酸氢钠），NaBH4_氢化钠 ），NMM (N-甲基吗啉），NMR (核磁共振），PyBOP (苯并三 唑-卜基-氧基-三-吡咯烷子基-鱗六氟磷酸盐），RT (室温），Rt (保留时间），SPE (固相 提取），TBTU (2-(1-H-苯并三唑-1-基）-1，1，3, 3-四甲基脲四氟硼酸盐），TEA (三乙胺）， TFA(三氟乙酸），THF(四氢呋喃），TLC(薄层色谱），UV(紫外）。
[0126] 体外试验的说明 缩写： GST=谷胱甘肽-S-转移酶 FRET=荧光共振能量转移 HTRF?=(均匀时间分辨荧光） HEPES= 4- (2-羟乙基）-1-哌嗪乙磺酸缓冲剂 DTT=二硫苏糖醇 BSA=牛血清白蛋白 CHAPS=洗涤剂； CHAPS=3-[(3-胆酰胺丙基）二甲基铵]-1-丙磺酸盐。
[0127] 链亲和素-XLent?是高级链亲和素-XL665共辄物，对于一些试验来说，它的偶合 条件已经最佳化，能够得到性能提高的共辄物，尤其是需要高灵敏度的那些试验。
[0128] 测定端锚聚合酶（tankyrase)的细胞抑制 由于已经描述了端锚聚合酶（Tankyrases)调节Axin2的细胞水平（Huang等人， 2009 !Nature)，所以，在基于Luminex的试验中，Axin2水平的提高用作测定端锚聚合酶 (Tankyrases)的细胞抑制的读数。
[0129] 将结肠癌细胞系DLDl的细胞涂覆在96孔板中，每个孔I. 5xl04个细胞。第二 天，用在七个步骤中连续稀释的试验化合物处理细胞，一式三份，DMSO的最终浓度为0. 3%。 24小时之后，将细胞溶解在溶解缓冲液（20mM Tris/HCl，pH8. 0，150 mM NaCl，l% NP40， 10%甘油）中，离心通过96孔过滤板（0. 65Mm)，使溶胞产物清澈。利用与荧光羧基微粒 (carboxybeads)结合的单克隆抗Axin2抗体（R & D Systems #MAB6078)培养，从细胞溶 胞产物中分离出Axin2蛋白。然后，用多克隆的抗Axin2抗体（Cell Signaling #2151)和 合适的PE-荧光二抗，特异性地检测结合的Axin2。按照制造商的说明，在Luminex 2wH^g (Luminex Corporation)中，通过统计每个孔的100个状况，测定分离出的Axin2蛋白的 量。试验化合物抑制端锚聚合酶（Tankyrase)，导致Axin2的水平更高，这直接与可检测的 荧光的提高有关。作为对照物，用单独的溶剂处理细胞（中性对照物），并且用端锚聚合酶 (Tankyrase)参考抑制剂IWR-2(3E-06 M)处理细胞，作为Axin2的最大提高的对照物。为 了分析，使用Assay Explorer软件（Accelrys)，将获得的数据相对于未经处理的溶剂对照 物进行归一化，并与EC50值的测定数据拟合。
[0130] PARP1试验的说明 PARP-I的生化活性试验：自动PAR化（Autoparsylation)试验 自动PAR化试验分为两个步骤进行：酶反应，其中，His标记的Parp-I将生物素化的 ADP-核糖/ADP-核糖从生物素化的NAD/NAD (作为共同底物）转移至它本身；检测反应，其 中，对于酶的His标记物结合的穴状化合物标记的抗His抗体和Hent?标记的链亲和素结 合的生物素-PAR化残基之间的时间分辨的FRET进行分析。直接通过HTRF信号的提高，检 测自动PAR化活性。
[0131] 在 Greiner 低容量 nb 384 孔微孔板中，以 384 孔 HTRF?(Cisbio，Codolet，France) 试验格式，进行自动PAR化试验。在不存在或存在试验化合物（10个稀释浓度）的条件下， 在 23°C，将 35 nM His 标记的 Parp-I (人，重组体，Enzo Life Sciences GmbH，L5rrach， Germany)和 125 nM bi〇-NAD(Biolog, Life science Inst. , Bremen，Germany)与 800 nM NAD(作为共同底物）的混合物培养150分钟，总体积为6μ1(100 mM Tris/HCl，4 mM氯化镁， 0·01%IGEPAL?CA630，lmMDTT，0·5%DMS0，pH8，13ng/μl活化的DNA(BPSBioscience，San Diego，US))。加入 4μ1 终止 / 检测溶液（70 nM SA_Xlent?(Cisbio，Codolet，France)、2.5 nM 抗 His_K?(Eu_ 标记的抗 His，Cisbio，Codolet，France)(在 50 mM HEPES 中）、400 mM KF、0. 1% BSA、20 mM EDTA，pH7. 0)，使反应终止。在室温下培养1小时之后，使用Envision 多模式读数器（Perkin Elmer LAS Germany GmbH)，测定HTRF，激发波长340 nm(激光方 式），发射波长615 nm和665 nm。测定发射信号的比例。使用的满值是不含抑制剂的反 应。使用的药理学零值是Olaparib (LClabs，Woburn，US)，最终浓度为?μΜ。使用程序Symyx Assay Explorer? 或 Condosseo? (得自于 GeneData)，测定抑制值（IC50 值）。
[0132] TNKSl 和 TNKS2 ELISA 试验的说明 TNKS 1和2的生化活性试验：活性ELISA(自动PAR化试验） 为了分析TNKS 1和2的自动PAR化活性，进行活性ELISA :在第一步中，在谷胱甘肽 涂覆的板上收集GST标记的TNKS。然后，在不存在/存在化合物的条件下，用生物素化的 NAD进行活性试验。在酶反应期间，GST标记的TNKS将生物素化的ADP-核糖从生物素化的 NAD(作为共同底物）转移至它本身。为了检测，加入链亲和素-HRP共辄物，使它与生物素 化的TNKS结合，并由此收集到板中。用HRP的荧光底物来检测生物素化的resp.自动PAR 化的TNKS的量。荧光信号的水平直接与自动PAR化的TNKS的量相关，并因此与TNKS的活 性相关。
[0133] 在384孔谷胱甘肽涂覆的微孔板(^Express capture谷胱甘肽涂覆的板，Biocat， Heidelberg，Germany)中，进行活性ELISA。将板用PBS预平衡。然后，在4°C，将板用50 μ 1 的 20 ng/ 孔 GST 标记的 Tnks-I (1023-1327 aa，内部制备）、GST 标记的 Tnks-2 (873-1166 aa，内部制备）（在试验缓冲液（50 mM HEPES，4 mM 氯化镁，0.05% Pluronic F-68,2 mM DTT，pH7. 7)中）培养过夜。将板用PBS-Tween-20洗涤3次。通过在室温下用5〇μ1封闭缓 冲液（PBS，0. 05% Tween-20,0. 5% BSA)培养20分钟，将孔封闭。然后，将板用PBS-Tween-20 洗涤3次。在30°C，在不存在或存在试验化合物（10个稀释浓度）的条件下，在含有1〇μΜ bio_NAD(Biolog，Life science Inst·, Bremen，Germany)(作为共同底物）的5〇μ1 反应溶 液（50 mM HEPES，4 mM氯化镁，0.05% Pluronic F-68，1.4 mM DTT，0.5% DMS0，pH7.7)中，使 酶反应进行1小时。用PBS-Tween-20洗涤3次，使反应终止。为了检测5〇μ1的20ng/^l链 亲和素，加入HRP共辄物（MoBiTec，G5ttingen，Germany)-PBS/0.05% Tween-20/0.01% BSA， 并将板在室温下培养30分钟。用PBS-Tween-20洗涤三次之后，加入5〇μ1的SuperSignal ELISA Femto 最高灵敏度底物溶液（ThermoFisherScientific (Pierce)，Bonn，Germany)。在 室温下培养1分钟之后，使用Envision多模式读数器（Perkin Elmer LAS Germany GmbH)， 在700 nm下，测定荧光信号。使用的满值是不含抑制剂的反应。使用的药理学零值是 XAV-939 (Tocris)，最终浓度为 5μΜ。使用程序 Symyx Assay Explorer? 或 Condosseo? (得 自于GeneData)，测定抑制值（IC50值）。
[0134] 在上文和下文中，所有的温度用°(：表示。在下列实施例中，"常规处理"是指：如 果需要的话，加入水，如果需要的话，将PH值调节至2和10之间，这取决于最终产品的组 成，用乙酸乙酯或二氯甲烷提取混合物，分离各相，用硫酸钠干燥有机相，蒸发，用硅胶色谱 和/或通过结晶来纯化残余物。在硅胶上的Rf值；洗脱液：9:1的乙酸乙酯/甲醇。
[0135] 在Bruker DPX-300, DRX-400或AVII-400光谱仪上记录1H NMR，使用氘化溶剂 的残留信号作为内标。相对于残余溶剂信号，用ppm报道化学位移（δ)(对于1H NMR，在 DMSO-Cl6中，δ=2· 49 ppm)。1H NMR数据报道如下：化学位移（多重性、偶合常数和氢数）。 多重性缩写如下：s(单峰），d(双峰），t(三重峰），q(四重峰），m(多重峰），br(宽峰）。
[0136] 在CEM微波反应器上进行微波化学。
[0137] HPLC/MS 条件 A 柱：Chromolith PerformanceROD RP_18e, 100 x 3 mm2 梯度：八:8=9:1至0:100，1.8分钟 流速：2· 0 ml ,/mi η 洗脱液A :水+0.05%甲酸 洗脱液B :乙腈+0.04%甲酸 波长：220 nm 质谱：正离子模式 HPLC/MS 条件 B 柱：XBridge C8, 3. 5 Mm, 4. 6 x 50 mm 梯度：〇分钟：5% B，8分钟：100% B，8. 1分钟：100% B，8. 5分钟：5% B，10分钟 5% B 流速：2. 0 ml ,/mi η 洗脱液A :水+0· 1% TFA 洗脱液B :乙腈+0. 1% TFA HPLC/MS 条件 C : 梯度：厶:13=96:4至0:100,3.4分钟；流速：2.4〇1111/111；[11 A :水+甲酸（0. 05%) ;B :乙腈+甲酸（0. 04%) 柱：Chromolith SpeedROD RP_18e, 50 X 4. 6 mm2 波长：220 nm。
[0138] 药理学数据 表1 :一些代表性的式I化合物抑制端锚聚合酶（tankyrases)
[0139] 表1所示的化合物是尤其优选的按照本发明的化合物。
[0140] 表2 :-些代表性的式I化合物抑制端锚聚合酶（tankyrases)
[0141] 表2所示的化合物是尤其优选的按照本发明的化合物。
[0142] 中间体的合成 合成4- (6, 8-二氟-4-氧代-3, 4-二氢-喹唑啉-2-基）-丁酸
将 2-氨基-3, 5-二氟-苯甲酰胺（L 72 g，KXO mmol)和戊二酐（L 48 g，13.0 mmol) 在甲苯（37 ml)中的混合物回流2天。真空除去溶剂，并加入2N Na0H(25 ml)。将得到 的悬浮液加热至80°C，并在此温度下搅拌1天。将该混合物冷却至室温，并用乙酸酸化至 PH5。过滤收集固体，用水洗涤，真空干燥，提供4-(6, 8-二氟-4-氧代-3, 4-二氢-喹唑 啉-2-基）-丁酸的浅棕色晶体；HPLC/MS 1. 48 min (A)，[M+H] 269。
[0143] 类似地制备4-(4-氧代-3, 4-二氢-喹唑啉-2-基）-丁酸，米色固体；HPLC/MS 1. 37 min (A)，[M+H]233〇
[0144] 合成4- (6-氟-8-甲基-4-氧代-3, 4-二氢-喹唑啉-2-基）-丁酸
将2-氨基-5-氣-3-甲基-苯甲酰胺（1. 56 g，9. 3 mmol)和戊二酐（1. 38 g，12. 1 mmol)在甲苯（32 ml)中的混合物回流3小时。将该混合物冷却至室温，并搅拌9天。过 滤收集固体，用甲苯洗涤，真空干燥，提供4-(6-氟-8-甲基-4-氧代-3, 4-二氢-喹唑 啉-2-基）-丁酸的白色晶体；HPLC/MS L 63 min (A)，[M+H] 265; 1H NMR (400 MHz, DMS0-d6)S 12.25 (bs，1H)，7.80 - 7.38 (m，2H)，2.65 (t， ^7.4Hz，2H)，2.53(s，3H)，2.34(t，^7.3Hz，2H)，L98(p，^7.4Hz，2H)。
[0145] 类似地制备4-(6-氟-4-氧代-3, 4-二氢-喹唑啉-2-基）-丁酸，白色固体； LC/MS(B): 251.3(M+H), Rt 1.91 min, 1H NMR (400 MHz, DMS〇-d6) δ 11.82(brs, 1H), 7. 73(dd, ^1.8, 8. 6 Hz, 1H), 7. 66-7. 64 (m, 2H), 2. 62 (t, J=-IΛ 2H), 2. 27 (t, ^7.4Hz，2H)，1.95-1.91(m，2H)。
[0146] 类似地制备4-(8-氟-4-氧代-3, 4-二氢-喹唑啉-2-基）_ 丁酸，无色固体； LC/MS (B): 251.3 (M+H), Rt 2.05 min, 1H NMR (400 MHz, DMS0-d6)S 12.36 (bs, 1H), 11.90(bs, 1H), 7. 88-7. 87 (d, ^7. 8 Hz, 1H), 7. 66-7. 61 (dd, ^8.2, 6. 9 Hz, 1H), 7· 45-7. 40 (m, 1H), 2· 67-2. 63 (m, 2H), 2· 33-2. 30 (m, 2H), I. 99-1. 96 (m, 2H)。
[0147] 合成（4-甲氧基-3-甲基-苯基）-哌啶-4-基-甲酮盐酸盐
向哌啶-1,4-二甲酸单叔丁基酯（25. 00 g，107. 72 mmol)的DMF(250 ml)溶液中加 入N，N-二异丙基乙胺（57.01 ml，323.16 mmol)、l-羟基苯并三唑水合物（1.67 g，10.77 mmol)、（3-二甲基氨基-丙基）-乙基-碳二亚胺盐酸盐（25. 03 g，129. 27 mmol)，而后，在 〇°C，在氮气氛中，以小份额形式加入0, N-二甲基-盐酸羟胺（11.68 g，118. 49 mmol)。将 该反应混合物在室温下搅拌18小时。反应完毕后，减压蒸发溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯 (300 ml)中，用 10% 碳酸氢钠（2 X 200 ml)、0.5N HCl (2 X 100 ml)、水（200 ml)和盐水 (200 ml)洗涤。用无水Na2SO4干燥有机层，真空蒸发，提供4-(甲氧基-甲基-氨基甲酰 基）-哌啶-1-甲酸叔丁基酯的无色液体； 1H NMR(400 MHz, CDCl3): δ 4.15-4.09(m, 2H), 3.70(s, 3H), 3.17(s, 3H)， 2. 79-2. 72 (m, 3H), I. 72-1. 60 (m, 4H), 1.44(s, 9H); LC/MS(方法 B): 173. 2(M+H; BOC-cleaved mass), Rt. 3.54 min〇
[0148] 在氮气氛中，将溶于THF(40 ml)中的碘（0. 93 mg)和5 ml的4-溴-2-甲基苯甲 醚（5.96 g，29.06 mmol)加入到镁肩（0.72 g，29.06 mmol)的无水 THF(40 ml)悬浮液中。 将该混合物在室温下搅拌15分钟，而后升温至50°C。将该混合物冷却至室温，并在20分钟 期间内，逐滴加入剩余的4-溴-2-甲基苯甲醚的THF溶液。将该混合物在室温下再搅拌2 小时，使镁完全溶解。在_78°C，将该格氏试剂溶液逐滴加入到4-(甲氧基-甲基-氨基甲 酰基）_哌啶-1-甲酸叔丁基酯（4.00 g，14. 53 mmol)的THF(40.0 O ml)溶液中。将该反 应混合物在室温下搅拌15小时。然后，冷却至0°C，用饱和氯化铵溶液（100 ml)淬灭，并 用乙酸乙酯（2 X 100 ml)提取。将有机层用10%碳酸氢钠（100 ml)、水（100 ml)和盐水 (100 ml)洗涤，用无水Na2SO4干燥，并真空蒸发。使用硅胶快速色谱（230-400)纯化粗品， 石油醚/乙酸乙酯（0-30%)作为梯度洗脱液，提供4-(4-甲氧基-3-甲基-苯甲酰基）-哌 啶-1-甲酸叔丁基酯的无色固体； 1HnmrGOOMHz, CDCl3): δ 7.82 (dd，方2. 2，8.6 Hz，1H), 7.76 (d,方 1.6 Hz, 1H), 6. 86(d, ^8. 6 Hz, 1H), 4. 17(d, ^13. 0 Hz, 2H), 3. 90 (s, 3H), 3. 41-3. 34 (m, 1H), 2. 93-2. 86 (m, 2H), 2. 26(s, 3H), I. 83-1. 80 (m, 2H), I. 76-1. 65 (m, 2H), 1.45(s, 9H): LC/MS (方法 B): 234.3(M+H; BOC-裂解的质量），Rt. 5.31min。
[0149] 将4-(4-甲氧基-3-甲基-苯甲酰基）-哌啶-I-甲酸叔丁基酯（I. 50 g，4. 36 mmol)的二噁烷/HCl (3M，14. 53 ml，43. 60 mmol)溶液在室温下、在氮气氛中搅拌6小时。将 溶剂减压蒸干，提供（4-甲氧基-3-甲基-苯基）-哌啶-4-基-甲酮盐酸盐的无色固体； 1H MlR (400 MHz, DMS0-d6): δ 9.25 (brs, 1H), 8.92 (brs, 1H), 7.90 (dd， J=2.2, 8.6 Hz, 1H), 7.81(d, ^1.6 Hz, 1H), 7.05 (d, ^8.6 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3. 75-3. 67 (m, 1H), 3. 29-3. 25 (m, 2H), 3.06-2. 97 (m, 2H), 2. 19(s, 3H), I. 89-1. 86 (m, 2H), I. 81-1. 78 (m, 2H); LC/MS (方法 B) : 234.3(M+H), Rt. 2.65min。
[0150] 类似地制备下列化合物： 哌啶-4-基-间-甲苯基-甲酮盐酸盐
无色的无定形固体； 1H 匪R (400 MHz, DMS0-d6): δ 9.27 (brs, 1H), 8.98 (brs, 1H), 7.80 (d, ^8.4 Hz, 2H), 7. 48-7. 40 (m, 2H), 3. 79-3. 71 (m, 1H), 3. 27 (d, ^12.6 Hz, 2H), 3.06-2.97(m, 2H), 2.38(s, 3H), 1.92-1.89(m，2H), 1.81-1.74(m，2H)。
[0151] LC/MS (方法 B) : 204. 3 (M+H), Rt. 2. 48 min ; (3-甲氧基-苯基）-哌啶-4-基-甲酮盐酸盐
无色固体； 1H NMR (400 MHz, DMSO-(I6) : δ 9. 15(brs, 1H), 8. 83 (brs, 1H), 7. 60 (d, ^7.9 Hz, 1H), 7.47(t, /=7.9 Hz, 2H), 7. 24(dd, ^2.6, 8.2 Hz, 1H), 7. 22(s, 3H), 3. 79-3. 73 (m, 1H), 3. 30-3. 27 (m, 2H), 3. 10-2. 95 (m, 2H), I. 94-1. 91 (m, 2H), I. 81-1. 71 (m, 2H)； LC/MS (方法 B) : 220.3 (M+H), Rt. 2.19 min; (3-氟-4-甲氧基-苯基）-哌啶-4-基-甲酮盐酸盐
无色的无定形固体； 1H NMR (400 MHz, DMSO-(I6) : δ 9. 17(brs, 1H), 8. 86 (brs, 1H), 7. 89-7. 81 (m, 2H), 7.31 (t,方8.5 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.29-3. 26 (m, 2H), 3.05-2.96(m, 2H), 1.91-L88(m, 2H), L 80-1.73(m，2H)。
[0152] LC/MS (方法 B) : 238(M+H), Rt. 2. 32 min。
[0153] 合成（4-溴-苯基）-哌啶-4-基-甲酮
在室温下，在氮气氛中，将1-乙酰基-哌啶-4-甲酸（10.00 g，57. 24 mmol)和亚硫酰 氯（20.85 g，171. 73 mmol)的混合物搅拌6小时。减压除去亚硫酰氯，并将残余物与二氯甲 烷（2 X 200 ml)共同蒸馏。然后，在0°C，在氮气氛中，将酰氯逐滴加入到溴苯（27.24 g， 171. 73 mmol)和无水氯化铝（9. 25 g，68. 69 mmol)的1，2-二氯乙烷（200 ml)悬浮液中。 将得到的混合物在室温下搅拌16小时，在冰中淬灭，并用二氯甲烷（2 X 200 ml)提取。将 有机层用水（2 X 200 ml)、盐水（200 ml)洗涤，用无水Na2SO4干燥，并真空蒸发。将得到 的黑色残余物吸收在6M HCl水溶液（200 ml)中，回流12小时，并浓缩至它的原始体积的 一半体积。将水溶液部分用10%碳酸氢钠碱化，用二氯甲烷（2 X 200 ml)提取，用水（2 X 200 ml)、盐水（200 ml)洗涤，用无水Na2SO4干燥，并真空蒸发。使用硅胶（60-120)柱色谱 纯化粗品，二氯甲烷/甲醇作为梯度洗脱液，提供（4-溴-苯基）-哌啶-4-基-甲酮的黄 色胶质； 1H NMR (400 MHz, DMS0-d6): δ 7. 95-7. 92 (m, 2H), 7. 78-7. 74 (m, 2H), 3. 71-3. 68 (m, 1H), 3. 25-3. 22 (m, 2H), 2. 98-2. 92 (m, 2H), 1.90-1. 87 (m, 2H), 1.76-1. 70 (m, 2H); LC/MS (方法 B) : 268/270 (M+H), Rt. 2. 73 min。
[0154] 合成（6-甲氧基-吡啶-3-基）-哌啶-4-基-甲酮盐酸盐
I. I : 4-(6-甲氧基-吡啶-3-羰基）-哌啶-1-甲酸叔丁基酯 在-78°C，在氮气氛中，向5-溴-2-甲氧基-吡啶（6. 60 g;34. 40 mmol)的THF(132 ml)溶液中逐滴加入正丁基锂（I. 6M，在己烷中）（25. 80 ml ;41. 28 mmol)，并在相同温度下 搅拌1小时。在-78°C，逐滴加入4-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基）-哌啶-1-甲酸叔丁基 酯（10. 52 g;37.84 mmol)的THF(25 ml)溶液，并在-78°C下搅拌4小时。然后，使该反应 混合物慢慢地达到室温，并搅拌12小时。用饱和NH4Cl (250 mL)淬灭该反应混合物，并用 乙酸乙酯（2 X 300 ml)提取。将合并的有机层用水（200 ml)、盐水溶液（200 ml)洗涤，用 无水硫酸钠干燥，浓缩。使用硅胶（60-120)柱色谱纯化粗品，石油醚/乙酸乙酯作为梯度 洗脱液，提供4-(6-甲氧基-吡啶-3-羰基）-哌啶-1-甲酸叔丁基酯（5.00 g;44. 5%)的 浅黄色油； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.80 (d，方2.3 Hz, 1H)，8.14 (dd，方2.4，8.7 Hz, 1H), 6. 82(d, ^8. 8 Hz, 1H), 4. 20-4. 17 (m, 2H), 4. 02 (s, 3H), 3. 35-3. 27 (m, 1H), 2. 92-2. 86 (m, 2H), I. 85-1. 82 (m, 2H), I. 76-1. 66 (m, 2H), 1.47(s,