一种神经酸的提取分离方法_2

0089] (5.1.2)将经步骤(4.2)处理所得的溶解样栗入常压柱；
[0090] (5.1.3)栗入1800ml的正己烷除去极性小的杂质；
[0091] (5.2)洗脱
[0092] (5.2.1)对经步骤(5.1.3)处理所得的进行洗脱;洗脱体系为正己烷和氯仿混合溶 剂；
[0093] (5.2.2)GC跟踪洗脱部分，分段收集洗脱液中有效成分；当洗脱体系中正己烷和氯 仿比例为9:1，收集到芥酸；正己烷和氯仿比例为5:1，收集到山嵛酸；正己烷和氯仿比例为 3:1，收集到神经酸；
[0094] (5.3)常压柱再生、平衡
[0095] 对经步骤(5.2.1)处理完的常压柱用碱性甲醇进行再生，用正己烷平衡；
[0096] (5.4)浓缩
[0097]将经步骤(5.2.2)处理所得含有神经酸的洗脱液浓缩至其原体积的1/10,放置12 °C的环境中结晶17h;将结晶液通过离心机过滤，得到1次粗结晶；
[0098] (5.5)重结晶
[0099]向经步骤(5.4)处理所得粗结晶加入丙酮溶液进行热溶，丙酮溶液的重量为粗结 晶重量的0.9倍;待溶解完后，放置在12°C的环境中结晶13h;依次离心、过滤、干燥，即可得 到1.7kg含量为95.56 %的神经酸，收率为1.70 %。所得结果如图2和表2所示。
[0100]表2实施例2所得神经酸检测参数
[0102] 实施例3: -种神经酸提取分离方法，包括下述步骤：
[0103] (1)提取
[0104] (1.1)取神经酸含量为5%的蒜头果原料1001^进行粉碎；
[0105] (1.2)将经步骤（1.1)处理所得的原料过10目筛，再用0.1倍原料质量的生石灰拌 匀；
[0106] (1.3)将经步骤（1.2)处理所得的原料用10倍原料重量的正己烷的提取，提取温度 为45°C，提取3次，每次提取2小时，得到提取液；
[0107] (2)浓缩
[0108] 将提取液合并，减压浓缩至无正己烷，得到浓缩液；
[0109] (3)调酸
[0110] 向浓缩液中加入冰醋酸，使浓缩液的pH=8;
[0111] ⑷萃取
[0112] (4.1)将经步骤(3)处理所得的浓缩液用氯仿萃取，得到萃取液;萃取次数为3次， 萃取溶剂的体积为步骤(3)处理所得浓缩液体积的3倍；
[0113] (4.2)将萃取液浓缩至比重为1.09,该比重是在60°C，常压下测定，加萃取浓缩液 〇. 2倍体积量的丙酮溶解，得到溶解样；
[0114] (5)常压柱层析
[0115] (5.1)装柱及上样
[0116] (5.1.1)采用湿法填充常压柱，常压柱层析所用填料为200~300目粗孔硅胶，填料 填满后密封，不留死体积；
[0117] (5.1.2)将经步骤(4.2)处理所得的溶解样栗入常压柱；
[0118] (5.1.3)栗入2500ml的正己烷除去极性小的杂质；
[0119] (5.2)洗脱
[0120] (5.2.1)对经步骤(5.1.3)处理所得的进行洗脱;洗脱体系为正己烷和氯仿混合溶 剂；
[0121] (5.2.2)GC跟踪洗脱部分，分段收集洗脱液中有效成分；当洗脱体系中正己烷和氯 仿比例为9:1，收集到芥酸；正己烷和氯仿比例为5:1，收集到山嵛酸；正己烷和氯仿比例为 3:1，收集到神经酸；
[0122] (5.3)常压柱再生、平衡
[0123] 对经步骤(5.2.1)处理完的常压柱用碱性甲醇进行再生，用正己烷平衡；
[0124] (5.4)浓缩
[0125] 将经步骤(5.2.2)处理所得含有神经酸的洗脱液浓缩至其原体积的1/10,放置15 °C的环境中结晶20h;将结晶液通过离心机过滤，得到1次粗结晶；
[0126] (5.5)重结晶
[0127] 向经步骤(5.4)处理所得粗结晶加入丙酮溶液进行热溶，丙酮溶液的重量为粗结 晶重量的0.8倍;待溶解完后，放置在15°C的环境中结晶12h;依次离心、过滤、干燥，即可得 至Ij4kg含量为95.80 %的神经酸，收率为4.0 %。所得结果如图3和表3所示。
[0128] 表3实施例3所得神经酸检测参数
【主权项】
1. 一种神经酸提取分离方法，其特征在于:包括下述步骤： (1) 提取 (1.1) 取神经酸含量大于0.5 %的神经酸原料，进行粉碎； (1.2) 将经步骤（1.1)处理所得的原料过筛，筛的目数为5-20目，将过筛后的原料用生 石灰拌匀，所述生石灰的质量是原料质量的0.05-0.1倍； (1.3) 将经步骤(1.2)处理所得的原料用5-10倍原料重量的有机溶剂进行提取； (2) 浓缩 合并步骤(1.3)的提取液，减压浓缩至除去有机溶剂，得到浓缩液； (3) 调酸 向浓缩液中加入酸液进行调节，使浓缩液的pH=8-9; (4) 萃取 (4.1) 将经步骤(3)处理所得的浓缩液用有机溶剂萃取，得到萃取液；萃取次数为1-3 次，萃取溶剂的体积为步骤(3)处理所得的浓缩液体积的1-8倍； (4.2) 将萃取液浓缩至比重为1.00-1.20,该比重是在60°C，常压下测得，得到萃取浓缩 液，加萃取浓缩液0.2-0.3倍体积量的丙酮进行溶解，得到溶解样； (5) 常压柱层析 (5.1) 装柱及上样 (5.1.1) 采用湿法填充常压柱，填料填满柱体后不留死体积； (5.1.2) 将经步骤(4.2)处理所得的溶解样栗入常压柱； (5.1.3) 将有机溶剂栗入柱除去极性小的杂质；所述有机溶剂是正己烷、乙酸乙酯、氯 仿、丙酮或乙醇任一或者任意两种以任意比例混合； (5.2)洗脱 (5.2.1) 对经步骤(5.1.3)处理所得的常压柱进行洗脱； (5.2.2) 采用高效气相色谱仪跟踪洗脱部分，分段收集含有神经酸的洗脱液和其他有 效成分的洗脱液； (5.3) 常压柱重复使用的再生、平衡 对经步骤(5.2.1)处理所得的常压柱进行再生、平衡；用碱性甲醇进行再生，平衡是用 步骤(5.1.3)中所用的有机溶剂进行平衡； (5.4) 浓缩 将经步骤(5.2.2)处理所得含有神经酸的洗脱液浓缩至其原体积的1/10-1/100,5-20 °C的环境中放置结晶10_30h，将结晶液通过离心机过滤，得到1次粗结晶； (5.5) 重结晶 向经步骤(5.4)处理所得粗结晶中加入有机溶剂进行溶解，所用有机溶剂重量为粗结 晶重量的〇. 1-10倍;溶解完成后，放置至5-20°C的环境中，结晶10_20h;依次离心，过滤，干 燥，即可得到含量为95 %以上的神经酸。2. 如权利要求1所述的一种神经酸提取分离方法，其特征在于： 所述步骤(1.1)，原料可以是中国元宝楓籽、荆条籽、盾叶木种子或蒜头果种子； 所述步骤（1.3)是用正己烷提取，提取温度为40-50°C，提取3次，每次提取2小时； 所述步骤(3)调酸，加入的酸液可以是稀盐酸、稀硫酸、饱和柠檬酸或冰醋酸； 所述步骤(4.1)中有机溶剂是氯仿、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯或醋酸甲酯任一或者 两种以任意比例混合，其中萃取溶剂以二氯甲烷为佳； 所述步骤(5.1.1)填充的填料是200-300目的粗孔硅胶或中性氧化铝，其中填料以粗孔 硅胶为佳，所述硅胶的质量为步骤(4.2)收集的萃取浓缩液质量的1-2倍； 所述步骤(5.1.3)所述有机溶剂的质量为步骤(4.2)收集的萃取浓缩液质量的3-5倍； 所述步骤(5.2.1)中洗脱体系是正己烷、乙酸乙酯、氯仿、丙酮、甲醇或乙醇任意两种混 合，混合比例为1:1-100:1;通过该洗脱体系的洗脱，能有效分离芥酸，山嵛酸等其他杂质成 分，其中洗脱体系以乙酸乙酯和丙酮混合为佳； 所述步骤(5.4)浓缩，将洗脱液浓缩至原体积的1/30，放置结晶24小时为佳； 所述步骤（5.5)重结晶中有机溶剂是氯仿、乙酸乙酯、丙酮或乙醇等，最佳重结晶溶剂 为乙酸乙酯。3.如权利要求1所述的一种神经酸提取分离方法，其特征在于:包括下述步骤： (1) 提取 (1.1) 取神经酸含量为5 %的蒜头果原料100kg进行粉碎； (1.2) 将经步骤(1.1)处理所得的原料过10目筛，再用0.1倍原料质量的生石灰拌匀； (1.3) 将经步骤（1.2)处理所得的原料用10倍原料重量的正己烷的提取，提取温度为45 °C，提取3次，每次提取2小时，得到提取液； (2) 浓缩 将提取液合并，减压浓缩至无正己烷，得到浓缩液； (3) 调酸 向浓缩液中加入冰醋酸，使浓缩液的pH=8; (4) 萃取 (4.1) 将经步骤(3)处理所得的浓缩液用氯仿萃取，得到萃取液;萃取次数为3次，萃取 溶剂的体积为步骤(3)处理所得浓缩液体积的3倍； (4.2) 将萃取液浓缩至比重为1.09,该比重是在60°C，常压下测定，加萃取浓缩液0.2倍 体积量的丙酮溶解，得到溶解样； (5) 常压柱层析 (5.1) 装柱及上样 (5.1.1) 采用湿法填充常压柱，常压柱层析所用填料为200~300目粗孔硅胶，填料填满 后密封，不留死体积； (5.1.2) 将经步骤(4.2)处理所得的溶解样栗入常压柱； (5.1.3) 栗入2500ml的正己烷除去极性小的杂质； (5.2)洗脱 (5.2.1) 对经步骤(5.1.3)处理所得的进行洗脱;洗脱体系为正己烷和氯仿混合溶剂； (5.2.2) GC跟踪洗脱部分，分段收集洗脱液中有效成分；当洗脱体系中正己烷和氯仿比 例为9:1，收集到芥酸;正己烷和氯仿比例为5:1，收集到山嵛酸;正己烷和氯仿比例为3:1， 收集到神经酸； (5.3)常压柱再生、平衡 对经步骤(5.2.1)处理完的常压柱用碱性甲醇进行再生，用正己烷平衡； (5.4) 浓缩 将经步骤(5.2.2)处理所得含有神经酸的洗脱液浓缩至其原体积的1/10,放置15°C的 环境中结晶20h;将结晶液通过离心机过滤，得到1次粗结晶； (5.5) 重结晶 向经步骤(5.4)处理所得粗结晶加入丙酮溶液进行热溶，丙酮溶液的重量为粗结晶重 量的0.8倍;待溶解完后，放置在15°C的环境中结晶12h;依次离心、过滤、干燥，即可得到4kg 含量为95.80 %的神经酸，收率为4.0 %。
【专利摘要】本发明提供一种神经酸的提取分离方法，主要解决现有方法提取分离神经酸纯度低、流程复杂不易工业化生产、周期长的问题。该神经酸的提取分离方法包括以下步骤：(1)提取；(2)浓缩；(3)调酸；(4)萃取；(5)常压柱层析。该方法目标明确，通过简单可行的方法，可稳定得到含量为95％以上的神经酸，同时可用多种含有神经酸的原料进行提取，将原料充分利用，合理开发。
【IPC分类】C07C57/03, C07C51/42
【公开号】CN105503580
【申请号】CN201510900625
【发明人】周建兴, 黄样华, 宋细忠, 徐长毫, 晏小春, 解德桂
【申请人】江西青春康源制药有限公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月9日