1中油酸单甘酯与单乙醇胺酰胺化产物油酸单乙醇酰胺的核磁图；图中内容如下:50.88(七，3!1，-013)，1.27(扒20!1，10\-012-)，1.63(扒2!1，-CH2CH2CONH-)，2.00 (m，4H，-CH2CH = CHCH2-)，2.20 (t，2H，-CH2CH2CONH-)，3.42 (p，2H，HOCH2CH2NH-)，3.71 (t，2H，HOCH2CH2NH)，5.34 (t，2H，-CH2CH = CHCH2-)，6.05(s，lH，_CH2CH2CONH-)，质谱图中没有发现-COOCH2CH2NH2(54.2-4.4,2H)或者-COOCH2CH2NH2(δI.1-1.5，2Η)的峰，可以确定这是油酸单乙醇酰胺的核磁图。
[0029]图2为实施例1的油酸单甘酯与单乙醇胺酰胺化产物油酸单乙醇酰胺的正相液相色谱图，其中18.773min处的峰为油酸单甘酯，25.467min处为油酸单乙醇酰胺，油酸单乙醇酰胺得率为99.85 %。
[0030]实施例2:
[0031]在反应釜中加入2mmol棕榈酸单甘酯、2.5mmol单乙醇胺和1.5ml氯仿，在搅拌下加入15%脂肪酶Novozym 435，密闭反应釜，搅拌升温至40°C，反应时间为3小时。在反应结束时，通过过滤分离脂肪酶，溶剂减压蒸发去除。经HPLC分析，棕榈酸单乙醇酰胺产率为99.03%。
[0032]参见图3，图3为实施例2的棕榈酸单甘酯与单乙醇胺酰胺化产物棕榈酸单乙醇酰胺的正相液相色谱图，其中18.809min处的峰为棕榈酸单甘酯，25.592min处为棕榈酸单乙醇酰胺，棕榈酸单乙醇酰胺得率为99.03%。
[0033]实施例3:
[0034]在反应釜中加入2mmol花生四烯酸单甘酯、2mmol单乙醇胺和2ml石油醚，在搅拌下加入20%脂肪酶Lipozyme 435，密闭反应釜，搅拌升温至55°C，反应时间为1.5小时。在反应结束时，通过过滤分离脂肪酶，溶剂减压蒸发去除。经HPLC分析，花生四烯酸单乙醇酰胺产率为99.76 %。
[0035]参见图4，图4为实施例3的花生四烯酸单甘酯与单乙醇胺酰胺化产物花生四烯酸单乙醇酰胺的正相液相色谱图，其中18.475min处的峰为花生四烯酸单甘酯，25.274min处为花生四烯酸单乙醇酰胺，花生四烯酸单乙醇酰胺得率为99.76%。
[0036]实施例4:
[0037]在反应爸中加入2mmol 二十碳五稀酸单甘酯、2.5mmol单乙醇胺和2.5ml乙酸乙酯，在搅拌下加入15%脂肪酶Novozym 435，密闭反应釜，搅拌升温至60V，反应时间为2小时。在反应结束时，通过过滤分离脂肪酶，溶剂减压蒸发去除。经HPLC分析，二十碳五烯酸单乙醇酰胺产率为93.5%。
[0038]实施例5:
[0039]在反应釜中加入2mmol油酸单甘酯、3mmol单乙醇胺，在搅拌下加入10%脂肪酶Lipozyme RM頂，密闭反应釜，搅拌升温至40°C，反应时间为2小时。在反应结束时，通过过滤分离脂肪酶，溶剂减压蒸发去除。经HPLC分析，，油酸单乙醇酰胺产率为57.2%。
[0040]实施例6:
[0041 ] 在反应釜中加入2mmol棕榈酸单甘酯、3.5mmol单乙醇胺和1.5ml氯仿和己烷混合溶剂(1:1，v/v)，在搅拌下加入20%脂肪酶Lipozyme RM IM，密闭反应爸，搅拌升温至45°C，反应时间为2.5小时。在反应结束时，通过过滤分离脂肪酶，溶剂减压蒸发去除。经HPLC分析，棕榈酸单乙醇酰胺产率为66.5%。
[0042]实施例7:
[0043]在反应釜中加入2mmol 二十碳五烯酸烯酸单甘酯、4mmol单乙醇胺和Iml石油醚和己烧混合溶剂(1:1，v/v)，在搅拌下加入15%脂肪酶Lipozyme RM IM，密闭反应爸，搅拌升温至55°C，反应时间为3小时。在反应结束时，通过过滤分离脂肪酶，溶剂减压蒸发去除。经HPLC分析，二十碳五烯酸单乙醇酰胺产率为71.5%。
[0044]由此可见，本发明以单甘酯和单乙醇胺为原料，在无溶剂或者有溶剂反应体系下脂肪酶催化作用下进行酰胺化反应，制得脂肪酸单乙醇酰胺。通过上述方法制备脂肪酸单乙醇酰胺，产率最高可达到99.5%以上。本发明采用一步合成脂肪酸单乙醇酰胺，具有产物产率高，工艺简单，环境友好等诸多优点。
[0045]应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
【主权项】
1.一种脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其特征在于:包括， 将脂肪酸单甘酯和单乙醇胺按一定比例在溶剂反应体系下充分混合，并加入一定量的脂肪酶，在适宜的温度下搅拌，进行酰胺化反应，制备脂肪酸单乙醇酰胺;其中， 脂肪酸单甘酯与单乙醇胺混合的摩尔比为1:1?1:2; 酰胺化温度为20?70 °C，反应时间为2?5h; 所述一定量的脂肪酶其质量百分比为10%?20%。2.如权利要求1所述的脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其特征在于:所述脂肪酸单甘酯是饱和脂肪酸单甘酯，且饱和脂肪酸单甘酯为棕榈酸单甘酯、月桂酸单甘酯、肉豆寇酸单甘酯或硬脂酸单甘酯中的一种或几种。3.如权利要求1所述的脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其特征在于:所述脂肪酸单甘酯是不饱和脂肪酸单甘酯，且不饱和脂肪酸是油酸单甘酯、亚油酸单甘酯、亚麻酸单甘酯、花生四烯酸单甘酯、二十碳五烯酸单甘酯或二十二碳六烯酸单甘酯中的一种或几种。4.如权利要求1、2或3任一所述的脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其特征在于:所述有机溶剂为已烷、石油醚、正已烷、乙酸乙酯、丙酮和氯仿中的一种或几种。5.如权利要求1、2或3任一所述的脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其特征在于:所述脂肪酶催化剂为Novozym 435、Lipozyme 435、Lipozyme RM IM或Lipozyme TL IM中的一种或几种。6.如权利要求4所述的脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其特征在于:所述有机溶剂为已烷。7.如权利要求5所述的脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其特征在于:所述脂肪酶催化剂为Novozym 435。
【专利摘要】本发明公开了一种脂肪酸单乙醇酰胺的酶法合成方法，其包括，将脂肪酸单甘酯和单乙醇胺按一定比例在溶剂反应体系下充分混合，并加入一定量的脂肪酶，在适宜的温度下搅拌，进行酰胺化反应，制备脂肪酸单乙醇酰胺；其中，脂肪酸单甘酯与单乙醇胺混合的摩尔比为1∶1～1∶2；酰胺化温度为20～70℃，反应时间为2～5h；所述一定量的脂肪酶其质量百分比为10％～20％。本发明采用一步合成脂肪酸单乙醇酰胺，具有产物产率高，工艺简单，环境友好等诸多优点。
【IPC分类】C12P13/02
【公开号】CN105624221
【申请号】CN201510724453
【发明人】王小三, 陆继源, 陈洋, 金青哲, 王兴国
【申请人】江南大学
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2015年10月28日