withanolides型化合物及其用图
【专利摘要】本发明涉及一种化合物及其用途，尤其是withanolides型化合物及其用途，属于化学技术领域。本发明公开了两个新的睡茄内酯类化合物及其抗肿瘤用途，属于天然药物化学领域。化合物Ⅰ和Ⅱ均为首次报道，均可从苦蘵干燥的地上部分分离纯化得到。体外活性测试证明化合物Ⅰ和Ⅱ可显著的抑制人骨肉瘤细胞、人肝癌细胞的生长，可研究开发成治疗人骨肉瘤、肝癌的药物。
【专利说明】
withanol ides型化合物及其用途
技术领域
[0001]本发明涉及一种化合物及其用途，尤其是withanolides型化合物及其用途，属于 化学技术领域。
【背景技术】
[0002]苦藤(Physalis angulata L.)，属于前科酸衆属一年生草本植物，在我国主要分 布于华东、华中、华南及西南等地。苦藤全株可药用，具有清热，利尿，解毒，消肿功效，民间 用于治疗膀胱炎、疝气等病。根据文献报道，苦藤中的主要化学成分为withanolides(睡茄 内酯)型化合物，其结构特点是具有28个碳原子的麦角留烷骨架，C-22与C-26氧化缩合形成 的S-内酯环侧链。现代药理实验表明此类化合物具有明显的生物活性，特别是在抗菌、抗 炎、抗肿瘤和抗抑郁等方面。
【发明内容】
[0003]本发明在对苦藤化学成分及药理活性进行系统研究的过程中，得到了两个新的睡 茄内酯类化合物，明确了化合物的结构、生物活性和用途。两个新化合物，分别是结构式I和 n的化合物。
[0005] 本发明的两个新化合物自苦藤地上部分提取、分离、纯化得到，化合物I和n分别 命名为physagulide P和physagulide Q。
[0006] 本发明提供了睡茄内酯类化合物制备抗肿瘤药物的应用。药理实验表明， physagulide P和physagulide Q可显著的抑制人骨肉瘤细胞MG-63、肝癌细胞HepG-2的增 殖，physagulide P对MG-63、HepG-2的IC5〇值分别为3 ? 50yM、4 ? 22yM，physagulide Q对MG-63、HepG-2 的 IC5Q 值分别为 3.70處、2.06虚，以0(?〇^11^(^11为阳性对照药（对1^-63、1^口6-2 的IC5Q值分别为0.46yM、3.72yM)，实验数据表明physagulide P和physagulide Q对人骨肉 瘤细胞MG-63、肝癌细胞HepG-2的增殖有较强的抑制作用，可以作为具有抗肿瘤作用的新药 成分或先导化合物。
【附图说明】
[0007]图1新化合物I和n的分子结构式。
[0008] 图2新化合物I的HR-ESI (+) -MS谱。
[0009] 图3新化合物I的1H-NMR谱。
[0010] 图4新化合物I的I3c-NMR谱。
[0011 ]图5新化合物I的HSQC谱。
[0012] 图6新化合物I的HMBC谱。
[0013] 图7新化合物I的R0ESY谱。
[0014]图8新化合物 II 的HR-ESI( + )-MS谱。
[0015 ] 图9新化合物n的1H-NMR谱。
[0016] 图10新化合物n的13C-NMR谱。
[0017] 图11新化合物n的HSQC谱。
[0018] 图12新化合物n的HMBC谱。
[0019] 图13新化合物n的R0ESY谱。
【具体实施方式】
[0020] 结合实施例对本发明做进一步说明。
[0021 ]实施例1化合物1、n的提取分离及结构鉴定
[0022] 取苦藤（1kg)地上部分，用2倍量CH2Cl2_MeOH( 1:1)室温超声提取3次，每次2h，合并 滤液，减压浓缩得粗浸膏（70g)。粗浸膏过D101大孔吸附树脂，分别用20%Et0H-H20、40% Et0H-H20、60 % Et0H-H20、80 % Et0H-H20进行洗脱，95 % EtOH卸柱，共得到五个部位(A-E)。C 部位(7g)进行硅胶柱层析，依次用CH2Cl2-MeOH 40:1、20:1、10:1、0:1进行洗脱，得到4个部 位(C1-C4) X3部位通过中压制备层析用50%Me0H-H20进行洗脱得到8段(C3A-C3H) X3B段 通过高效液相制备色谱以55%Me0H进行洗脱得结构式I化合物8.4mg，C3G段通过高效液相 制备色谱以60%Me0H进行洗脱得结构式II化合物6.4mg。通过ID NMR及2D NMR对化合物I和 化合物II进行结构解析，并命名为physagulide P和physagulide Q。
[0023] physagulide P,白色无定形粉末，分子式C3QH40O9。
[0024] physagulide Q,白色无定形粉末，分子式C3〇H4iCl〇8。
[0025] physagulide P和physagulide Q的1H-NMR及 13C_NMR数据。
[0026] 表 1
[0029] 实施例2药理实验
[0030] 采用MTT方法，取处于对数生长期的人骨肉瘤细胞MG-63和人肝癌细胞HepG-2，PBS 冲洗，0.25%胰酶消化，加入新鲜培养基吹打成单细胞悬液。用血球计数板进行计数，调整 细胞浓度为5000-7000个/mL，接种于96孔板上，190yL/孔，置C0 2培养箱(37°C，5 % C02，饱和 湿度)培养。24h后加药10yL/孔，样品的工作液用培养基稀释至终浓度分别为20，10，5，2.5， 1.25mmol/L，加样组及空白组均设3个复孔。继续培养48h后，加入MTT工作液，20yL/孔。继续 培养4h后，弃去培养基，加入DMSO 150yL/孔，平板摇床上500rpm振摇lOmin。酶标仪测定各 孔的0D值，测定波长570nm，参比波长630nm，计算细胞增殖抑制率。细胞增殖抑制率=(空白 对照0D值-给药组0D值)/空白对照组0D值X 100%，以上实验均重复三次。结果见下表。 [0031]表2
[0033] 由表2可知，hysagulide P和physagulide Q可显著的抑制人骨肉瘤细胞MG-63、肝 癌细胞HepG-2的增殖，活性与阳性药阿霉素相当。与化学药物相比，天然产物一般疗效确 切、不良反应小，具有很好的开发前景。
[0034] 除上述实施外，本发明还可以有其他实施方式。凡采用等同替换或等效变换形成 的技术方案，均落在本发明要求的保护范围。
【主权项】
1. 结构式I或π的化合物或其药学上可接受的盐：2. 如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备肝癌、人骨肉瘤的药物中 的应用。
【文档编号】A61P35/00GK105968162SQ201610513278
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年7月1日
【发明人】孔令义, 罗俊, 高彩云, 罗建光
【申请人】中国药科大学