一种离子液体混合体系预处理木质纤维素提高其酶解效率的方法
【专利摘要】本发明公开了一种离子液体混合体系预处理木质纤维素提高其酶解效率的方法，属于生物质资源化利用和农业废弃物综合利用技术领域。本发明以玉米秸秆原料，经粉碎过筛后利用离子液体混合体系进行预处理，降低离子液体的用量并提高预处理后物料的酶解效率。与传统离子液体预处理木质纤维素相比，本发明筛选的离子液体混合体系相比纯离子液体能更好的脱除半纤维素和木质素，增加纤维素酶与底物的接触位点，从而有效提高木质纤维素转化为单糖的效率；与传统离子液体预处理相比，能在减少离子液体用量的基础上，达到较高的酶解效率，有利于环境保护，降低生产成本，从而产生更高的经济价值。
【专利说明】
一种离子液体混合体系预处理木质纤维素提高其酶解效率的方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种离子液体混合体系预处理木质纤维素提高其酶解效率的方法，属于生物质资源化利用和农业废弃物综合利用技术领域。
【背景技术】
[0002]随着全球化石能源的枯竭，环境污染的严重，以清洁、可再生的生物质代替化石能源意义重大。生物质主要来源于木材及农作物秸杆，是地球上最丰富的可再生资源之一，因此将生物质如农业废弃物为原料生产生物燃料最具应用前景。
[0003]自然界中存在的木质纤维素主要包括纤维素、半纤维素和木质素三大成分，纤维素是由β-D-葡萄糖通过β_1，4糖苷键连接而形成的链状多晶型聚合物，水解产生葡萄糖可发酵生产乙醇;与纤维素不同，半纤维素是由多种糖单元组成的化学结构非均一的多糖;木质素是由苯丙烷单元以C 一 C键和C一 O — C醚键连接而成的无定型复杂的网状杂聚物，木质素是将生物质主要组分连接在一起的“粘胶”，使其不溶于水，也正是由于木质素与半纤维素连结而紧密覆盖着纤维素，使其成为木质纤维素生物质酶解和微生物降解的主要障碍。
[0004]因此，想要对木质纤维素进行高效酶解并以此为基础转化为燃料乙醇和各类化工产品，需要对其进行预处理以打破木质纤维素的致密结构，除去木质素等抑制组分，并降低纤维素的结晶度。传统的预处理方法包括物理法、化学法、物理化学法和生物法，但多数存在环境污染大，生产效率低等缺点。离子液体是由有机阳离子和有机或无机阴离子构成的在室温或接近室温下熔融的盐，作为新型绿色溶剂，离子液体对木质纤维素组分有良好溶解性能，且具有不挥发，环境污染小，可重复使用等优点。
[0005]现有研究认为，离子液体需要对木质纤维素各组分均具有一定的溶解性才能有效除去木质素，打破木质素与半纤维素的连接键，提高纤维素的酶解效率，木质素由于其复杂的结构不溶于水和一般的有机溶剂，但离子液体对其有一定的溶解度。离子液体预处理木质纤维素虽然可以一定程度上提高纤维素的酶解效率，但也存在一系列问题，例如离子液体粘度大，影响预处理过程中的传质、增加操作难度，另外，离子液体价格昂贵也是目前存在的问题。目前已有的解决办法是在离子液体中添加水来降低粘度，强化传质，减少成本。但已有研究报道离子液体中的含水量会降低离子液体对纤维素的溶解能力，如[Amim]Cl易吸潮影响处理效果，使用前需要干燥，虽然有较强耐水性的离子液体出现，如[Emim]Ac，通过水的加入来降低粘度，但离子液体水溶液预处理后物料的酶解效率与纯离子液体比却没有较大优势。现有的报道中，1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([Bmim] [BF4])价格相对便宜，但基本不能溶解木质素，因此，[Bmim]BF4对木质纤维素预处理后酶解效率提高并不明显。
【发明内容】
[0006]为了解决上述问题，本发明利用[Bmim]BF4-水、[Bmim]BF4_尿素混合体系预处理玉米秸杆，不但可以减少离子液体用量，降低处理体系的粘度，还可以选择性地去除半纤维素或木质素，预处理后样品酶解效率明显提高，远高于纯[Bmim]BF4预处理后样品的酶解效率。
[0007]本发明提供了一种混合体系预处理木质纤维素的方法，已有的混合体系预处理为选择预处理效果较好的离子液体，在尽量降低混合体系对预处理后物料酶解效率影响的基础上添加水来降低体系的粘度。不同于已报道的混合体系预处理效果，本发明首次引入了尿素溶液的混合体系，且[Bmim]BF4-水混合体系和[Bmim]BF4-尿素溶液混合体系预处理后物料的酶解效率均远高于[Bmim]BF4纯离子液体预处理后物料的酶解效率，不仅解决预处理过程中离子液体粘度高导致的传质慢及操作难度大等问题，且混合体系预处理有效的打破了纤维素与木质素的链接键，去除率物料中的木质素或半纤维素，使纤维素暴露出来，增加纤维素酶与底物的可及性，明显的提高了木质纤维素的酶解效率，降低了离子液体的用量，节约资源降低成本。
[0008]本发明的第一个目的是提供一种木质纤维素原料的预处理方法，解决了预处理过程中离子液体粘度大带来的一系列问题并降低了离子液体的用量，是在离子液体中添加一定量的水或尿素溶液，通过混合体系处理木质纤维素原料。[00〇9] 所述方法，是以木质纤维素为原料，粉碎过筛后置于[Bmim]BF4_水或[Bmim]BF4_尿素的混合体系中进行处理。
[0010]在本发明的一种实施方式中，所述木质纤维素为玉米猜杆、稻草猜杆、小麦猜杆或者甘蔗渣等组分较为复杂的农作物废弃物。[0011 ]在本发明的一种实施方式中，所述粉碎过筛，是过40-60目的筛。[0〇12]在本发明的一种实施方式中，所述混合体系，是将离子液体[Bmim]BF4与尿素溶液或水混合得到的，其中的[Bmim]BF4与尿素溶液或水比例为1:1-1:2(w/w)。
[0013]在本发明的一种实施方式中，所述尿素溶液的浓度为10-13 % (w/w)。[〇〇14]在本发明的一种实施方式中，所述原料(以干基计)与混合体系的比例为1:5-1:20 (w/w)〇[〇〇15]在本发明的一种实施方式中，所述处理，是在密闭容器中进行，处理温度为130-170°(:，处理时间为1-611。[〇〇16]在本发明的一种实施方式中，所述方法，处理结束后，取出，缓慢加入水，分离、洗涤至上清液无色，烘干备用。
[0017]在本发明的一种实施方式中，所述方法具体是:以木质纤维素为原料，粉粹过筛后置于[Bmim]BF4_水或[Bmim]BF4_尿素的混合体系中，密闭条件下高温处理一段时间，取出后缓慢加入水再生，分离、洗涤至上清液无色，烘干后得到具有较高酶解效率的预处理产品。 离子液体混合体系具有较低的粘度，再生和洗涤的过程易于进行，并可以通过过滤、离心等手段实现处理后固体底物的高效回收。
[0018]在本发明的一种实施方式中，所述缓慢加入水是加入2倍离子液体混合体系体积的水。
[0019]本发明的第二个目的是提供一种木质纤维素原料的酶解方法，所述方法是先用本发明的预处理方法对木质纤维素原料进行预处理，然后再进行后续酶解。
[0020]在本发明的一种实施方式中，所述酶解，是取预处理前后的木质纤维素原料样品， 加入适量的纤维素酶进行酶解糖化反应。
[0021]在本发明的一种实施方式中，所述酶解，是每Ig预处理前后的木质纤维素原料样品，加入45u/ml的纤维素酶和pH值为4.8的0.05moL/L梓檬酸一梓檬酸钠缓冲溶液，50 °C、100r/min条件下进行酶解糖化反应。
[0022]本发明的有益效果:
[0023]目前已报道的混合体系预处理为不降低预处理后物料酶解效率的基础上添加水来降低粘度，强化传质，但处理效率相对纯离子液体体系均有所下降。不同于已报道的混合体系预处理效果，本发明利用离子液体[Bmim]BF4中添加水或尿素水溶液的混合体系对玉米秸杆进行预处理，其处理效果反而有显著提升。[Bmim]BF4-水或[Bmim]BF4-尿素溶液混合体系相比于纯[Bmim]BF4，预处理体系粘度小，易操作，预处理后物料明显的脱除了半纤维素或木质素，使纤维素暴露出来，增加了纤维素酶与底物的接触面积，从而明显提高了纤维素的酶解效率。同时降低了离子液体用量，节约资源、减少成本。
【附图说明】
[0024]图1为预处理前后玉米秸杆成分与不同方法预处理后的酶解效率比较图；
[0025]图2为预处理前后小麦秸杆成分与不同方法预处理后的酶解效率比较图；
[0026]图3为预处理前后玉米秸杆红外光谱图。
【具体实施方式】
[0027]本发明实施例及实验中所采用的木质纤维素的原料为玉米秸杆和小麦秸杆。所用的试剂均为市场购买的试剂纯或分析纯。
[0028]实施例1:
[0029](I)方法1:
[0030]传统的离子液体预处理木质纤维素方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取2.5g粉碎至40-60目颗粒和50g[Bmim]BF4置于250ml耐压瓶中，150°C下放置3h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入10ml去离子水，离心、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。
[0031](2)方法 2:
[0032]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取
2.5g粉碎至40-60目颗粒和50g[Bmim]BF4-水混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体与水的比例为1:1，150°C下放置3h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入10ml去离子水，离心、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。
[0033](3)方法 3:
[0034]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取2.5g粉碎至40-60目颗粒和50g[Bmim]BF4-尿素溶液混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体尿素溶液的比例为1:1，其中，尿素溶液浓度为12 % (w/w)，150°C下放置3h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入10ml去离子水，离心、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。
[0035](4)方法 4:
[0036]传统的离子液体预处理木质纤维素方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取2.5g粉碎至40-60目颗粒和50g[Amim]Cl，130°C下放置1.5h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入l〇〇ml去离子水，离心、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。[〇〇37](5)方法 5:[0〇38] 玉米猜杆粉碎，过筛，取2.5g粉碎至40-60目颗粒和50g[Amim]Cl-水混合体系置于 250ml耐压瓶中，离子液体与水的比例为1:1，130 °C下放置1.5h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入l〇〇ml去离子水，离心、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。
[0039]对原木质纤维素和方法1-5所得固体进行组成成分和物料得率分析，具体结果见图1。从图1中可以看出，[Bmim]BF4离子液体和[Amim]Cl-水混合体系预处理玉米猜杆后木质素和半纤维素去除效果都不明显，[Bmim]BF4-水混合体系预处理玉米秸杆后去除了大部分半纤维素，而[Amim]Cl和[Bmim]BF4-尿素溶液混合体系预处理玉米秸杆后则选择性去除了木质素。
[0040]对预处理前后的样品进行酶降解。其中具体酶解条件为:取lg预处理前后的样品， 加入适量的纤维素酶(45U/ml)和pH值为4.8的0.05moL/L梓檬酸一梓檬酸钠缓冲溶液，50 °C、100r/min条件下进行酶解糖化反应，定时取样，沸水灭活15min，采用三硝基水杨酸法 (DNS法)测定水解液中还原糖含量。酶解得率计算方法为:酶解得率(％) = (产生葡萄糖总量*0.9*100)/底物纤维素含量。不同酶解效果的对比如图1所示。[〇〇411由图1可以看出，[Bmim]BF4离子液体预处理玉米秸杆后样品48h的酶解效率只有 14.46%，[Bmim]BF4混合体系预处理后物料的酶解效率明显上升，结合样品的成分变化可以看出，纯[Bmim]BF4离子液体预处理后半纤维素和木质素的含量为21.68%和26.39， [Bmim]BF4离子液体-水混合体系预处理后半纤维素半纤维素和木质素的含量为4.57%和 21.56%，[Bmim]BF4离子液体-尿素溶液混合体系预处理后半纤维素半纤维素和木质素的含量为18.62%和15.27%，可以看出，离子液体混合体系预处理可以较大程度上去除半纤维素或木质素，从而提高了纤维素酶与底物的接触面积，导致酶解效率由纯离子液体预处理的14 ? 46 %上升至86 ? 84% ([Bmim]BF4_水混合体系)、76 ? 02 % ([Bmim]BF4_尿素混合体系)。但对于[Amim]Cl来说则没有类似效果，[Amim]Cl-水混合体系预处理玉米秸杆后去除木质素的能力相比于纯[Amim]Cl大大降低，预处理后物料的酶解效率也较低。因此，[Bmim] BF4混合体系具有特异的选择性脱除半纤维素或木质素的能力，在减少离子液体用量的基础上获得较高的酶解效率，有效的节约了资源，降低了成本。[〇〇42] 实施例2:[〇〇43] 小麦秸杆粉碎，过筛，取10g粉碎至40-60目颗粒和50g[Bmim]BF4置于250ml耐压瓶中，130 °C下放置3h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入100ml去离子水，离心、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。
[0044]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:小麦秸杆粉碎，过筛，取 10g粉碎至40-60目颗粒和50g[Bmim]BF4_水混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体与水的比例为2:3，130 °C下放置3h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入100ml去离子水，离心、 沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。
[0045]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:小麦秸杆粉碎，过筛，取1g粉碎至40-60目颗粒和50g[Bmim]BF4-尿素溶液混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体尿素溶液的比例为2: 3，其中，尿素溶液浓度为1 % (w/w)，130 °C下放置3h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入10ml去离子水，离心、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干用于后续酶解。
[0046]对原木质纤维素和实施例2所得固体进行组成成分和物料得率分析，具体结果见图2。从图中可以看出，[Bmim]BF4离子液体预处理小麦秸杆后木质素和半纤维素去除效果都不明显，[Bmim]BF4-水混合体系预处理小麦秸杆后去除了大部分半纤维素，而[Bmim]BF4-尿素溶液混合体系预处理小麦秸杆后则选择性去除了木质素。
[0047]对预处理前后的样品进行酶降解。其中具体酶解条件为:取Ig预处理前后的样品，加入适量的纤维素酶(45u/ml)和pH值为4.8的0.05moL/L梓檬酸一梓檬酸钠缓冲溶液，500C、100r/min条件下进行酶解糖化反应，定时取样，沸水灭活15min，采用三硝基水杨酸法(DNS法)测定水解液中还原糖含量。酶解得率计算方法为酶解得率(％) = (产生葡萄糖总量*0.9*100)/底物纤维素含量。不同酶解效果的对比如图2所示。
[0048]与实施例1类似，[Bmim]BF4离子液体预处理小麦秸杆后样品48h的酶解效率较低，[Bmim]BF4混合体系预处理后物料的酶解效率明显上升，结合样品的成分变化可以看出，相比于纯[Bmim]BF4离子液体，离子液体混合体系可以较大程度上去除小麦秸杆中的半纤维素和木质素，从而提高了纤维素酶与底物的接触面积，导致酶解效率由纯离子液体预处理的10.12%分别上升至44.74%( [Bmim]BF4_尿素溶液混合体系)、46.64% ([Bmim] BF4-水混合体系)。
[0049]实施例3:
[°°50] 玉米稻杆粉碎，过筛，取3g粉碎至40-60目颗粒和60g[Bmim]BF4置于250ml耐压瓶中，150°C下放置4h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入10ml去离子水，过滤、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干备用。
[0051]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取3g粉碎至40-60目颗粒和60g[Bmim]BF4_水混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体与水的比例为1:1，150 °C下放置4h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入10ml去离子水，过滤、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干备用。取Ig预处理前后的样品，加入适量的纤维素酶(45u/ml)和pH值为4.8的0.05moL/L柠檬酸一柠檬酸钠缓冲溶液，50°C、100r/min条件下进行酶解糖化反应，酶解48h的酶解效率为85.36 %。
[0052]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取3g粉碎至40-60目颗粒和60g[Bmim]BF4_尿素溶液混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体尿素溶液的比例为1:1，其中，尿素溶液浓度为13 % (w/w)，150 °C下放置4h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入10ml去离子水，过滤、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干备用。取Ig预处理前后的样品，加入适量的纤维素酶(45u/ml)和pH值为4.8的0.05moL/L柠檬酸一柠檬酸钠缓冲溶液，50°C、lOOr/min条件下进行酶解糖化反应，酶解48h的酶解效率为 81.13%。
[0053]预处理前后玉米稻杆的红外光谱图如图3所示，由图可以看出，[Bmim]BF4-尿素溶液和[Bmim]BF4_水混合体系预处理后半纤维素中的羰基C = O伸缩振动1732cm-l及木质素芳环骨架的特征吸收峰1512cm-l基本消失，木质素和半纤维素之间C-O伸缩振动信号峰1249cm-l强度减弱，说明预处理打破了半纤维素和木质素之间的连接酯键，而纯[Bmim]BF4 预处理后半纤维素中的羰基C = 0伸缩振动1732CHT1及木质素和半纤维素之间C-0伸缩振动信号峰1249cm-l并没有明显减弱，说明纯[Bmim]BF4预处理后脱除木质素及对木质素和半纤维素之间的连接键的破坏作用低于混合体系，部分揭示了混合体系预处理后物料酶解效率较高的原因。[〇〇54] 实施例4:
[0055]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取 6g粉碎至40-60目颗粒和60g[Bmim]BF4_水混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体与水的比例为1:2，170 °C下放置5h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入100ml去离子水，过滤、 沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干备用。取lg预处理前后的样品，加入适量的纤维素酶(45U/ml)和pH值为4.8的0.05m〇L/L柠檬酸一柠檬酸钠缓冲溶液，50°C、100r/min条件下进行酶解糖化反应，酶解48h的酶解效率为86.24%。[〇〇56]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取 6g粉碎至40-60目颗粒和60g[Bmim]BF4_尿素溶液混合体系置于250ml耐压瓶中，其中，尿素溶液浓度为10% (w/w)，离子液体与尿素溶液的比例为1:2，170°C下放置5h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入l〇〇ml去离子水，过滤、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干备用。取lg预处理前后的样品，加入适量的纤维素酶(45U/ml)和pH值为4.8的0.05m〇L/L 柠檬酸一柠檬酸钠缓冲溶液，50°C、lOOr/min条件下进行酶解糖化反应，酶解48h的酶解效率为 78.46 %。[〇〇57] 实施例5:[〇〇58]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取 3g粉碎至40-60目颗粒和48g[Bmim]BF4_水混合体系置于250ml耐压瓶中，离子液体与水的比例为1:2，170 °C下放置6h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入100ml去离子水，过滤、 沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干备用。取lg预处理前后的样品，加入适量的纤维素酶(45U/ml)和pH值为4.8的0.05m〇L/L柠檬酸一柠檬酸钠缓冲溶液，50°C、100r/min条件下进行酶解糖化反应，酶解48h的酶解效率为86.45 %。[〇〇59]利用本发明技术的木质纤维素处理方法，包括如下步骤:玉米秸杆粉碎，过筛，取 3g粉碎至40-60目颗粒和50g[Bmim]BF4_尿素溶液混合体系置于250ml耐压瓶中，其中，尿素溶液浓度为13 % (w/w)，离子液体与尿素溶液的比例为1:2，170 °C下放置6h，取出后，冷却至室温，向体系中缓慢加入l〇〇ml去离子水，过滤、沉淀洗涤至上清液无色，置于50°C烘箱中烘干备用。取lg预处理前后的样品，加入适量的纤维素酶(45U/ml)和pH值为4.8的0.05m〇L/L 柠檬酸一柠檬酸钠缓冲溶液，50°C、lOOr/min条件下进行酶解糖化反应，酶解48h的酶解效率为82.32%。
[0060]虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
【主权项】
1.一种木质纤维素原料的预处理方法，其特征在于，所述方法是以木质纤维素为原料， 粉碎过筛后置于[Bmim]BF4_水或[Bmim]BF4_尿素的混合体系中进行预处理。2.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述混合体系是将离子液体[Bmim] BF4与尿素溶液或水混合得到的；其中的[Bmim]BF4与尿素溶液或水的质量比为1:1-1:2。3.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述预处理是在密闭容器中进行， 处理温度为130-170°(:，处理时间为1-611。4.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述木质纤维素为农作物废弃物。5.根据权利要求2所述的预处理方法，其特征在于，所述尿素溶液的质量浓度为10-13%〇6.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述原料与混合体系的质量比例为 1:5-1:20。7.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述处理结束后，取出，缓慢加入 水，分离、洗涤至上清液无色，烘干备用。8.根据权利要求1所述的预处理方法，其特征在于，所述方法具体是:以木质纤维素为 原料，粉粹过筛后置于[Bmim]BF4_水或[Bmim]BF4_尿素的混合体系中，密闭条件下高温处理 一段时间，取出后缓慢加入水再生，分离、洗涤至上清液无色，烘干后得到预处理产品。9.一种木质纤维素原料的酶解方法，其特征在于，所述方法是先用权利要求1-8的预处 理方法对木质纤维素原料进行预处理，然后再进行后续酶解。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述酶解，是取预处理前后的木质纤维素 原料样品，加入适量的纤维素酶进行酶解糖化反应。
【文档编号】C12P19/02GK106086109SQ201610397357
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月7日 公开号201610397357.7, CN 106086109 A, CN 106086109A, CN 201610397357, CN-A-106086109, CN106086109 A, CN106086109A, CN201610397357, CN201610397357.7
【发明人】程力, 顾正彪, 胡晓会, 洪雁, 李兆丰, 李才明
【申请人】江南大学