一巯基烷酸为配体的金纳米簇(AuOMUA):
[0035] 1. 13.1mg 11-MUA和200yL 1M NaOH加入20mL水中，完全溶解·
[0036] 2.加入510yL(l%by mass)HAuC14和445yL THPC(80%水溶液 12yL水加入到lmL水 中溶解），溶液室温下搅拌2h，溶液变成黄色。
[0037] 3.得到的产物加入10mL 500mM NaCl水溶液，在6000g离心力下离心15min，去除上 清液，沉淀用水和乙醇溶液(V水:V乙醇= 2:1)洗涤两次，得到最终提纯产物。
[0038]
[0039] S2.对获得的AuOMUA修饰上壳聚糖分子，得到金纳米簇(AuOMUAOCSa):
[0040] 将上述得到的AuOMUA 2mL溶液加入0.25mL 0.05M EDC和0.25mL 0.05M NHS甲醇 溶液活化4h，将lmg/mL壳聚糖的PBS溶液逐滴加入到上述溶液中，室温下搅拌24h.在 20000rpm下用PBS离心40min除去未接枝的壳聚糖。
[0041]
[0042] S3.对AuOMUAOCSa修饰上对硫氢根具有响应的小分子金纳米簇(AuOMUAOCSaODye)
[0043] 将lmg染料溶于lmL甲醇中溶解，加入12mg EDC和2mg NHS活化4h后，将修饰后的金 纳米簇产物逐滴加入到上述溶液中搅拌24h，在20000rpm下用甲醇/PBS混合溶液离心lh得 到产物。
[0044]
[0045] 实施例2.形貌表征
[0046] 按上述具体步骤分别制备样品，将样品溶液滴在铜网上，待干燥后进行形貌测试， 如图2,可以发现所制备的各种金纳米簇粒径都在1~2nm，且分散性都很好。
[0047] 实施例3.光谱测试
[0048]通过共价键修饰上的金纳米簇材料对硫氢根离子的荧光发射光谱测试:取200ul 分散有金纳米簇的PBS缓冲液于比色皿中，逐渐加入硫氢根离子(NaHS溶于PBS溶液中），如 图3测得荧光发射光谱。
[0049]通过共价键修饰上的金纳米簇材料对不同阴离子的响应测试：取200uL分散有金 纳米簇的PBS缓冲液于比色皿中，分别加入2uL 10-2M的F-、Cl -、Br-、N〇3-、N〇2-、oAC-、SCN-、 HP〇4-、S〇42-、C032-、S2〇3 2-、HCl〇4-、出〇2川0、617和2此10-1]\1!1。7、〇78、6邯、!^-、6邯+批-、〇78+ HS、测得荧光发射光谱如图4。
[0050] 通过共价键修饰上的金纳米簇材料对硫氢根响应光谱图可知，随着硫氢根离子的 加入，在597nm处有机染料的最大发射峰逐渐减弱;与此相反，在534nm处金纳米簇本身的发 射峰强度逐渐增强。由此可知，通过共价键修饰上的金纳米簇材料对硫氢根具有响应;同时 金纳米簇和对硫氢根响应的染料分子构成能量主、客体体系，存在共振能量传递。在365nm 激发下，有机染料吸收金纳米簇所发出的光从而发光，而金纳米簇本身的发射强度减弱，随 着硫氢根离子的加入，由于染料与硫氢根反应，破坏了其共振能量传递，导致金纳米簇本身 的强度增强，而有机染料部分的发射强度减弱。
[0051] 通过共价键修饰上的金纳米簇材料对不同阴离子选择性图可知，本发明所制备的 金纳米簇材料对硫氢根离子具有特异性响应。
【主权项】
1. 一种硫氢根离子纳米探针材料，其特征在于所述纳米探针材料主要包括金纳米簇以 及对硫氢根离子具有响应的焚光小分子，具体结构为：其中：表示11-巯基十一烷酸；表示壳聚糖分子；h表示氯金酸；表示对 硫氢根离子具有响应的焚光小分子。2. 根据权利要求1所述的硫氢根离子纳米探针材料的制备方法，其特征在于该方法包 括以下步骤： Sl.制备以^^一巯基烷酸为配体的金纳米簇(AuOMUA):将Il-MUA和NaOH完全溶解于水 中，再加入HAuCl4和THPC，在室温下搅拌2h后加入NaCl水溶液，再离心处理15min，去除上清 液，沉淀用水和乙醇溶液(V水:V乙醇=2:1)洗涤，得到最终提纯产物AuOMUA; 52 .对获得的Au麵UA修饰上壳聚糖分子，得到金纳米簇(AuOMUAOCSa):将上述得到的 AuOMUA溶液加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺甲醇溶液活 化4h，再加入lmg/mL壳聚糖的PBS溶液，室温下搅拌24h，再离心处理除去未接枝的壳聚糖； 53 .对AuOMUAOCSa修饰上对硫氢根具有响应的小分子金纳米簇(AuOMUAOCSaODye):将 染料溶于甲醇中溶解，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰 亚胺(NHS)活化4h后，将修饰后的金纳米簇产物加入到上述溶液中搅拌24h，再离心处理得 到最终产物。3. 根据权利要求2所述的硫氢根离子纳米探针材料的制备方法，其特征在于步骤Sl中 所述离心处理的离心力为6000g，步骤S2及S3中所述的离心处理，其转速为20000rpm/min， 时长50分钟。4. 根据权利要求2所述的硫氢根离子纳米探针材料的制备方法，其特征在于步骤Sl所 制备出的金纳米簇粒径为1~2nm 〇5. 根据权利要求2所述的硫氢根离子纳米探针材料的制备方法，其特征在于步骤S2中 修饰壳聚糖分子后的金纳米簇材料粒径为1~2nm。6. 根据权利要求2所述的硫氢根离子纳米探针材料的制备方法，其特征在于步骤S3中 修饰对硫氢根离子具有响应的荧光小分子后金纳米簇材料粒径为1~2nm。7. 根据权利要求1所述的硫氢根离子纳米探针材料的应用，其特征在于所述纳米探针 材料可用于生物检测。8. 根据权利要求7所述的硫氢根离子纳米探针材料的应用，其特征在于所述纳米探针 材料可用于生物成像技术。
【专利摘要】本发明公开了一种硫氢根离子纳米探针材料及其制备方法和应用。首先利用还原法制备金纳米簇，其中金纳米簇以11-巯基十一烷酸为配体；然后利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活化金纳米簇，结合壳聚糖分子具有较多的氨基分子，再利用酰胺反应，在金纳米簇外面包裹一层壳聚糖分子；最后利用壳聚糖上未反应完的氨基分子，通过酰胺反应，将对硫氢根离子具有响应的荧光小分子通过共价键方式修饰到金纳米簇表面，最终得到具有较好水溶性的硫氢根离子纳米探针。该硫氢根离子纳米探针材料粒径小且均一，且能实现溶液和细胞内硫氢根值的检测，具有很好的应用前景。
【IPC分类】G01N21/64, B82Y30/00, B82Y20/00, C09K11/06
【公开号】CN105482809
【申请号】CN201510853005
【发明人】赵强, 黄维, 杜静, 余琦, 刘淑娟, 许文娟
【申请人】南京邮电大学
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年11月30日