miRNAs电化学生物芯片的制作方法
专利名称:miRNAs电化学生物芯片的制作方法
【专利摘要】本实用新型公开miRNAs电化学生物芯片，属于医药生物技术领域。该生物芯片是由载体(1)和载体(1)表面附着的腔体膜片(2)组成，所述腔体膜片(2)内具有通道模块腔(3)，通道模块腔(3)之间相互连通,通道模块腔(3)的腔壁内贴合miRNAs探针系统；所述miRNAs探针系统是将DNA与miRNA的杂交直接转化为可测的电化学信号。该芯片采用的载体表面设置有腔体膜片，且载体基底为陶瓷；腔体膜片为无纺布材料，无纺布材料吸附能力强，使得探针密度高，样品和试剂的用量较少；而且膜的机械强度高；腔体膜片内具有通道模块腔，腔体膜片还具有防止反应过程中通道模块腔内水分的流失。本实用新型结构简单，原材料易得，成本低，操作方便。
【专利说明】
mi RNAs电化学生物芯片
技术领域
[0001]本实用新型属于医药生物技术领域，具体地说是miRNAs电化学生物芯片。
【背景技术】
[0002]妊娠高血压综合征(妊高征)是妊娠期严重威胁母婴生命安全的产科常见病，血管内皮细胞损伤是妊高征发病的中心环节。
[0003]基因芯片对遗传物质进行分子检测，用于基因研究、法医鉴定、疾病检测和药物筛选等，其具有无可比拟的高效、快速、多参量、高通量、集约化和低成本等特点，是在传统的生物技术如检测、杂交、分型和DNA测序技术等方面的一次重大创新和飞跃。研究证实，高同型半胱氨酸(HHcy)可通过氧化应激、内质网应激、促进炎症及免疫反应等多种机制损伤血管内皮细胞。微小RNAs(miRNAs)是近年来在真核生物体内发现的一类内生的、长度约20?24个核苷酸的非编码单链小RNA，具有很强的细胞、组织和疾病特异性，是理想的分子诊断标志物。
[0004]因此亟需一种miRNAs电化学生物芯片，能够早期探测孕妇血管内皮细胞损伤及妊高征，达到对妊高征高危孕妇实施早期诊断、早期干预的效果。
【实用新型内容】
[0005]本实用新型的目的在于提供miRNAs电化学生物芯片。
[0006]为实现上述目的，本实用新型所述miRNAs电化学生物芯片，由载体I和载体I表面附着的腔体膜片2组成，所述腔体膜片2内具有通道模块腔3，通道模块腔3之间相互连通，通道模块腔3的腔壁内贴合miRNAs探针系统。
[0007]所述载体I包括过滤层8、膜7、滤纸6、反渗层5、陶瓷板4，所述过滤层8位于载体I的最上部，过滤层8底部从上至下依次设置有膜7、滤纸6、反渗层5和陶瓷板4。
[0008]所述腔体膜片2为无纺布材料。
[0009]所述腔体膜片2的厚度在17-20mm。
[0010]所述miRNAs探针系统为miRNAs捕获探针和miRNAs检测探针以及用于为电化学伏安扫描提供基准参考电压的参考电极;所述miRNAs捕获探针为与目标miRNAs完全互补的氨基修饰的DNA探针序列，通过共价交联固定到羧基化多壁碳纳米管修饰电极表面；所述miRNAs检测探针为miRNAs捕获探针与miRNAs杂交后的探针序列。
[0011]本实用新型所述miRNAs电化学生物芯片，其有益效果在于:采用的载体表面设置有腔体膜片，且载体基底为陶瓷;腔体膜片为无纺布材料，无纺布材料吸附能力强，使得探针密度高，样品和试剂的用量较少，对人员技术水平要求较低;膜下粘有一背衬层，为合成树脂胶粘剂，成本低，抗位移，增强了膜的机械强度;腔体膜片内具有通道模块腔，腔体膜片还具有防止反应过程中通道模块腔内水分的流失。本实用新型结构简单，原材料易得，成本低，操作方便。
【附图说明】
[0012]图1为本实用新型所述iRNAs电化学生物芯片中载体的结构示意图；
[0013]图2为本实用新型所述iRNAs电化学生物芯片的结构示意图。
【具体实施方式】
[0014]实施例1
[0015]如图1和2所示，miRNAs电化学生物芯片，由载体I和载体I表面附着的腔体膜片2组成，所述腔体膜片2内具有通道模块腔3，通道模块腔3之间相互连通，通道模块腔3的腔壁内贴合miRNAs探针系统;载体I包括过滤层8、膜7、滤纸6、反渗层5、陶瓷板4，所述过滤层8位于载体I的最上部，过滤层8底部从上至下依次设置有膜7、滤纸6、反渗层5和陶瓷板4;腔体膜片2为无纺布材料;腔体膜片2的厚度在17mm;miRNAs探针系统为miRNAs捕获探针和miRNAs检测探针以及用于为电化学伏安扫描提供基准参考电压的参考电极;所述miRNAs捕获探针为与目标miRNAs完全互补的氨基修饰的DNA探针序列，通过共价交联固定到羧基化多壁碳纳米管修饰电极表面;所述miRNAs检测探针为miRNAs捕获探针与miRNAs杂交后的探针序列;miRNAs电化学生物芯片在0.1M H2SO4溶液中循环伏安扫描，扫描电位范围:-0.6—1.2V，扫描速度:50mv/S;检测鸟嘌呤的电化学氧化性能参数变化，用电化学差分脉冲伏安法(DPV)检测;DPV检测参数为:电位扫描范围为-0.6-0.4,振幅，50mV，脉冲周期:0.2s。
【主权项】
1.miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:由载体(I)和载体(I)表面附着的腔体膜片(2)组成，所述腔体膜片(2)内具有通道模块腔(3)，通道模块腔(3)之间相互连通，通道模块腔(3)的腔壁内贴合miRNAs探针系统。2.如权利要求1所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述载体(I)包括过滤层(8)、膜(7)、滤纸(6)、反渗层(5)、陶瓷板(4)，所述过滤层(8)位于载体(I)的最上部，过滤层(8)底部从上至下依次设置有膜(7)、滤纸(6)、反渗层(5)和陶瓷板(4)。3.如权利要求1所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述腔体膜片(2)为无纺布材料。4.如权利要求3所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述腔体膜片(2)的厚度在17-20mmo5.如权利要求1所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述miRNAs探针系统为miRNAs捕获探针和miRNAs检测探针;所述miRNAs捕获探针为与目标miRNAs完全互补的氣基修饰的DNA探针序列;所述miRNAs检测探针为miRNAs捕获探针与miRNAs杂交后的探针序列。
【文档编号】G01N27/26GK205720080SQ201620156762
【公开日】2016年11月23日
【申请日】2016年3月2日
【发明人】刘成桂, 林永红, 赵朝辉, 黄成 , 廖志勇, 邓耀, 廖益, 杨炼
【申请人】成都市妇女儿童中心医院, 成都贝斯纳生物科技有限公司
【专利摘要】本实用新型公开miRNAs电化学生物芯片，属于医药生物技术领域。该生物芯片是由载体(1)和载体(1)表面附着的腔体膜片(2)组成，所述腔体膜片(2)内具有通道模块腔(3)，通道模块腔(3)之间相互连通,通道模块腔(3)的腔壁内贴合miRNAs探针系统；所述miRNAs探针系统是将DNA与miRNA的杂交直接转化为可测的电化学信号。该芯片采用的载体表面设置有腔体膜片，且载体基底为陶瓷；腔体膜片为无纺布材料，无纺布材料吸附能力强，使得探针密度高，样品和试剂的用量较少；而且膜的机械强度高；腔体膜片内具有通道模块腔，腔体膜片还具有防止反应过程中通道模块腔内水分的流失。本实用新型结构简单，原材料易得，成本低，操作方便。
【专利说明】
mi RNAs电化学生物芯片
技术领域
[0001]本实用新型属于医药生物技术领域，具体地说是miRNAs电化学生物芯片。
【背景技术】
[0002]妊娠高血压综合征(妊高征)是妊娠期严重威胁母婴生命安全的产科常见病，血管内皮细胞损伤是妊高征发病的中心环节。
[0003]基因芯片对遗传物质进行分子检测，用于基因研究、法医鉴定、疾病检测和药物筛选等，其具有无可比拟的高效、快速、多参量、高通量、集约化和低成本等特点，是在传统的生物技术如检测、杂交、分型和DNA测序技术等方面的一次重大创新和飞跃。研究证实，高同型半胱氨酸(HHcy)可通过氧化应激、内质网应激、促进炎症及免疫反应等多种机制损伤血管内皮细胞。微小RNAs(miRNAs)是近年来在真核生物体内发现的一类内生的、长度约20?24个核苷酸的非编码单链小RNA，具有很强的细胞、组织和疾病特异性，是理想的分子诊断标志物。
[0004]因此亟需一种miRNAs电化学生物芯片，能够早期探测孕妇血管内皮细胞损伤及妊高征，达到对妊高征高危孕妇实施早期诊断、早期干预的效果。
【实用新型内容】
[0005]本实用新型的目的在于提供miRNAs电化学生物芯片。
[0006]为实现上述目的，本实用新型所述miRNAs电化学生物芯片，由载体I和载体I表面附着的腔体膜片2组成，所述腔体膜片2内具有通道模块腔3，通道模块腔3之间相互连通，通道模块腔3的腔壁内贴合miRNAs探针系统。
[0007]所述载体I包括过滤层8、膜7、滤纸6、反渗层5、陶瓷板4，所述过滤层8位于载体I的最上部，过滤层8底部从上至下依次设置有膜7、滤纸6、反渗层5和陶瓷板4。
[0008]所述腔体膜片2为无纺布材料。
[0009]所述腔体膜片2的厚度在17-20mm。
[0010]所述miRNAs探针系统为miRNAs捕获探针和miRNAs检测探针以及用于为电化学伏安扫描提供基准参考电压的参考电极;所述miRNAs捕获探针为与目标miRNAs完全互补的氨基修饰的DNA探针序列，通过共价交联固定到羧基化多壁碳纳米管修饰电极表面；所述miRNAs检测探针为miRNAs捕获探针与miRNAs杂交后的探针序列。
[0011]本实用新型所述miRNAs电化学生物芯片，其有益效果在于:采用的载体表面设置有腔体膜片，且载体基底为陶瓷;腔体膜片为无纺布材料，无纺布材料吸附能力强，使得探针密度高，样品和试剂的用量较少，对人员技术水平要求较低;膜下粘有一背衬层，为合成树脂胶粘剂，成本低，抗位移，增强了膜的机械强度;腔体膜片内具有通道模块腔，腔体膜片还具有防止反应过程中通道模块腔内水分的流失。本实用新型结构简单，原材料易得，成本低，操作方便。
【附图说明】
[0012]图1为本实用新型所述iRNAs电化学生物芯片中载体的结构示意图；
[0013]图2为本实用新型所述iRNAs电化学生物芯片的结构示意图。
【具体实施方式】
[0014]实施例1
[0015]如图1和2所示，miRNAs电化学生物芯片，由载体I和载体I表面附着的腔体膜片2组成，所述腔体膜片2内具有通道模块腔3，通道模块腔3之间相互连通，通道模块腔3的腔壁内贴合miRNAs探针系统;载体I包括过滤层8、膜7、滤纸6、反渗层5、陶瓷板4，所述过滤层8位于载体I的最上部，过滤层8底部从上至下依次设置有膜7、滤纸6、反渗层5和陶瓷板4;腔体膜片2为无纺布材料;腔体膜片2的厚度在17mm;miRNAs探针系统为miRNAs捕获探针和miRNAs检测探针以及用于为电化学伏安扫描提供基准参考电压的参考电极;所述miRNAs捕获探针为与目标miRNAs完全互补的氨基修饰的DNA探针序列，通过共价交联固定到羧基化多壁碳纳米管修饰电极表面;所述miRNAs检测探针为miRNAs捕获探针与miRNAs杂交后的探针序列;miRNAs电化学生物芯片在0.1M H2SO4溶液中循环伏安扫描，扫描电位范围:-0.6—1.2V，扫描速度:50mv/S;检测鸟嘌呤的电化学氧化性能参数变化，用电化学差分脉冲伏安法(DPV)检测;DPV检测参数为:电位扫描范围为-0.6-0.4,振幅，50mV，脉冲周期:0.2s。
【主权项】
1.miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:由载体(I)和载体(I)表面附着的腔体膜片(2)组成，所述腔体膜片(2)内具有通道模块腔(3)，通道模块腔(3)之间相互连通，通道模块腔(3)的腔壁内贴合miRNAs探针系统。2.如权利要求1所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述载体(I)包括过滤层(8)、膜(7)、滤纸(6)、反渗层(5)、陶瓷板(4)，所述过滤层(8)位于载体(I)的最上部，过滤层(8)底部从上至下依次设置有膜(7)、滤纸(6)、反渗层(5)和陶瓷板(4)。3.如权利要求1所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述腔体膜片(2)为无纺布材料。4.如权利要求3所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述腔体膜片(2)的厚度在17-20mmo5.如权利要求1所述miRNAs电化学生物芯片，其特征在于:所述miRNAs探针系统为miRNAs捕获探针和miRNAs检测探针;所述miRNAs捕获探针为与目标miRNAs完全互补的氣基修饰的DNA探针序列;所述miRNAs检测探针为miRNAs捕获探针与miRNAs杂交后的探针序列。
【文档编号】G01N27/26GK205720080SQ201620156762
【公开日】2016年11月23日
【申请日】2016年3月2日
【发明人】刘成桂, 林永红, 赵朝辉, 黄成 , 廖志勇, 邓耀, 廖益, 杨炼
【申请人】成都市妇女儿童中心医院, 成都贝斯纳生物科技有限公司
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