专利名称：盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法
技术领域：
一种盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法，属医药技术领域。
背景技术：
甲砜霉素又称硫霉素，化学名为1-对甲磺酰基-苯基-2-二氯乙酰胺-1，3丙 二醇。其结构相似于氯霉素，其抗菌谱与氯霉素基本相似。同时，它也是一种强大的免 疫抑制剂，这一作用比氯霉素强6倍，主要与抑制蛋白质合成和抑制抗体产生有关。我 国于1971年起开始试用，但由于其水溶性差，剂型受到限制。国内目前生产销售甲砜霉 素制剂的企业有多家，但由于前述原因，目前临床上广泛使用的甲砜霉素制剂均为固体 制剂，如片剂、胶囊剂等。为了拓宽甲砜霉素的临床应用，克服其水溶性差的劣势，日本-一〒 < 株式会 社研制开发了甲砜霉素的衍生物一盐酸甲砜霉素甘氨酸酯，其水溶性好，水溶液的PH 值约3.0，当溶液的PH值增高或受到体内酶的作用后，其迅速释放出甲砜霉素而发挥作用。关于盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测国内也有相关文献报道，现有文献方法 有采用磷酸铵盐与乙腈的组合或是三氟乙酸与乙腈的组合作为流动相，但均存在样品溶 液稳定性差，主峰出峰时间过早，杂质与主峰分离度较差的现象，很难客观的反应产品 真实质量。因此，发明一种科学合理、方法有效的盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法 势在必行。
发明内容
本发明提供了 一种盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法。本发明主要是通过如下技术方案实现的本发明所述流动相采用磷酸二氢钾溶液、甲醇、三乙胺及磷酸的混合溶液。本发明所述磷酸二氢钾溶液-甲醇的比例为10 90 30 70;优选为 15 85 25 75;更优选为 20 80。本发明盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法其有关物物的测定方法优选如 下照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定；色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液-三乙胺(20 80 0.05)，混勻后用磷酸调节pH至 3.0为流动相；检测波长为226nm ；柱温30°C ；测定法称取本品适量，精密称定，用0.01mol/L的盐酸制成每Iml中含l.Omg的
溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，加O.Olmol/L的盐酸稀释成每Iml中 含IOyg的溶液，作为对照溶液。精密量取对照溶液20 μ 1注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液及对照溶液各20 μ 1， 注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的5倍。供试品溶液的色谱图中如显杂质 峰，量取各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0%)。本发明盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法其含量测定方法优选如下色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液-三乙胺(20 80 0.05)，混勻后用磷酸调节pH至 3.0为流动相；检测波长为226nm ；柱温30°C ；测定法称取本品适量，精密称定，力卩0.01mol/L的盐酸制成每Iml中含O.lmg的
溶液，作为供试品溶液，精密量取20 μ 1注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸甲砜霉 素甘氨酸酯对照品适量，精密称定，力卩O.Olmol/L的盐酸制成每Iml中含O.lmg的溶液， 作为对照溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。本发明盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法专属性强、重现性好、精密度 高、操作方便，能够很好的检测盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量，真正确保了临床用药的 安全、有效、可控；本发明适用于盐酸甲砜霉素甘氨酸酯原料及注射制剂，还可以结合 其他方法共同检测其质量。有益的技术效果通过如下试验例和实施例对本发明的技术方法作进一步的描述，但不作为对本 发明的限制。以盐酸甲砜霉素甘氨酸酯为例，进行本发明试验例研究。试验例1检测波长的确定分别取盐酸甲砜霉素甘氨酸酯原料、起始原料甲砜霉素及其中间体甲砜霉素氯 乙酸酯适量，加0.01mol/L的盐酸配制成浓度20μβ/ιη1、22 μ g/mk 45μβ/ιη1的溶液。 分别于200 400nm波长范围内扫描，三种物质均在220_230nm附近有最大吸收，检测 波长可定为226nm。试验例2流动相的筛选试验1)流动相种类的筛选供试品溶液取本品适量，用O.Olmol/L的盐酸制成每Iml中含l.Omg的溶液，作
为供试品溶液。色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以有机 相-0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液-三乙胺(20 80 0.05)，混勻后用磷酸调节pH至 3.0为流动相；检测波长为226nm ；柱温30°C ；流动相的筛选试验
有机相主峰保留时间峰形基线噪音甲醇7min对称噪音小，基线平稳乙腈4min对称噪音大，基线相对不平稳
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由上表可见，选用乙腈作为流动相中的有机相时主峰保留时间过早，甲醇相对 乙腈作为流动相中的有机相，保留时间相对较合理，噪音小，基线平稳，对色谱柱的损 耗相对较小。因此，优选甲醇作为有机相。2)流动相比例的筛选供试品溶液取本品适量，用O.Olmol/L的盐酸制成每Iml中含l.Omg的溶液，作
为供试品溶液。色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液，两者比例如下表所示，加0.05%的三乙胺，混勻后用 磷酸调节pH至3.0为流动相；检测波长为226nm ；柱温30°C ；流动相的筛选
权利要求
1.盐酸甲砜霉素甘氨酸酯质量控制方法，其特征在于高效液相色谱法中流动相采用 磷酸二氢钾溶液、甲醇、三乙胺及磷酸的混合溶液。
2.如权利要求1所述盐酸甲砜霉素甘氨酸酯质量控制方法，其特征在于流动相磷酸二 氢钾溶液-甲醇的比例为10 90 30 70。
3.如权利要求2所述盐酸甲砜霉素甘氨酸酯质量控制方法，其特征在于流动相磷酸二 氢钾溶液-甲醇的比例优选为15 85 25 75。
4.如权利要求3所述盐酸甲砜霉素甘氨酸酯质量控制方法，其特征在于流动相磷酸二 氢钾溶液-甲醇的比例优选为20 80。
5.如权利要求4所述的盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量控制方法，其特征在于有关物质 的测定方法优选如下照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定；色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05mol/L 的磷酸二氢钾溶液-三乙胺(20 80 0.05)，混勻后用磷酸调节pH至3.0为流动相； 检测波长为226nm ；柱温30°C ；测定法称取本品适量，精密称定，用O.Olmol/L的盐酸制成每Iml中含l.Omg的溶 液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液适量，加O.Olmol/L的盐酸稀释成每Iml中含 IOyg的溶液，作为对照溶液；精密量取对照溶液20 μ 1注入液相色谱仪，调节检测灵敏 度，使主成分峰高约为满量程的20%，再精密量取供试品溶液及对照溶液各20 μ 1，注入 液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的5倍；供试品溶液的色谱图中如显杂质峰， 量取各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积(1.0% )。
6.如权利要求4所述的盐酸甲砜霉素甘氨酸酯的质量控制方法，其特征在于含量的测 定方法优选如下照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定；色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.05mol/L 的磷酸二氢钾溶液-三乙胺(20 80 0.05)，混勻后用磷酸调节pH至3.0为流动相； 检测波长为226nm ；柱温30°C ；测定法称取本品适量，精密称定，加O.Olmol/L的盐酸制成每Iml中含O.lmg的溶 液，作为供试品溶液，精密量取20 μ 1注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸甲砜霉素 甘氨酸酯对照品适量，精密称定，力卩O.Olmol/L的盐酸制成每Iml中含O.lmg的溶液，作 为对照溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。
全文摘要
本发明公开了甲砜霉素甘氨酸酯的质量检测方法，属医药技术领域。本发明主要是对甲砜霉素甘氨酸酯有关物质和含量的控制。该方法专属性强、重现性好、精密度高、操作方便，能够很好地控制甲砜霉素甘氨酸酯的质量，真正确保了临床用药的安全、有效、可控。本发明还可以结合其他方法共同控制其质量。
文档编号G01N30/02GK102012406SQ20101029181
公开日2011年4月13日 申请日期2010年9月26日 优先权日2010年9月26日
发明者于文占, 吴国林, 方贤罗, 曹相林, 魏墨玺 申请人:北京四环科宝制药有限公司