专利名称：一种食品中抗氧化剂的检测方法
技术领域：
本发明属于食品检测技术领域，具体涉及一种食品中抗氧化剂的检测方法。
背景技术：
食品中的油脂在长期储存中会逐步变质变坏，并产生令人不愉快的气味和味道， 这种变化即为油脂酸败，防止油脂酸败的关键在于防止其自身氧化。为了达到此目的，常在油脂或含脂肪较高的食品中加入一些抗氧化剂，来防止油脂及富脂食品的氧化酸败，以及由氧化所导致的退色、褐变、维生素破坏等。抗氧化剂种类很多，主要分为天然类抗氧化剂和合成类抗氧化剂，由于天然抗氧化剂的稳定性一般较差，食品生产商都愿意选择如TBHQ、BHA、BHT、PG等的合成酚类抗氧化剂(SPAs)。为了阻止或延缓油脂氧化，在加工生产脂肪、油脂和包含油脂的食品时，这些SPAs是被有意加在生产中已经50多年。然而这些SPAs的使用不是没有问题，BHT和BHA已经在动物试验中被怀疑与肝损伤害和肝癌有关系，这样SPAs 在食品中使用是被政府严格控制的。例如，TBHQ在欧盟是被禁止的。一般国家通常IOOmg/ kg 200mg/kg的SPAs的含量是容许的。现有的国家标准GB/T 5009. 30-2003《食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)与2，6- 二叔丁基对甲酚(BHT)的测定》通过提取样品中的脂肪，再经过层析柱净化后用二硫化碳定容后气相色谱仪测定；GB/T 21512-2008《食用植物油中叔丁基对苯二酚(TBHQ)的测定》第一法(气相色谱法)使用80乙醇作为提取溶剂，二硫化碳作为溶剂定容后通过气相色谱仪测定食用植物油中的叔丁基对苯二酚，第二法(液相色谱法)使用95乙醇作为提取溶剂， 异丙醇一乙腈作为溶剂定容后通过液相色谱仪测定食用植物油中的叔丁基对苯二酚；GB/ T23373-2009《食品中抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)和特丁基对苯二酚(TBHQ)的测定》则是用有机溶剂提取，过GPC (凝胶色谱)净化后用氢火焰离子化检测器检测，该方法检测限值为BHA 2mg/kg,BHT2mg/kg,TBHQ 5mg/kg。综合这些方法可以看出试验中过程比较繁琐，检测目标物一般比较单一，而且涉及的有机有毒溶剂也很多，干扰因素也比较多，对试验条件要求比较严格，再现性不好。而企业在实际生产过程中为了更好地发挥抗氧化剂的效果，一般在油脂中同时加入两种以上的种类，因此急需一种步骤简单、 能同时检测多种抗氧化剂的方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种步骤简单、能同时检测多种抗氧化剂的方法，能满足前处理过程简单快速、检出限低，且同时能检测多种抗氧化剂的需求。为此，本发明公开了一种食品中抗氧化剂的检测方法，包括下列步骤样品前处理将样品置于有机溶剂中提取抗氧化剂，冷冻除脂，分离提取液，重复上述提取操作2-3次，合并提取液，浓缩定容；气相色谱-质谱检测，其具体步骤为将步骤a中定容的提取液采用气相色谱-质谱联用仪检测，气相色谱条件色谱柱DB-5MS(30mX0. 25mm,0. 25 μ m)；柱温70°C保持 2min,以20°C /min升温至180°C，再以30°C /min升温至280°C ；进样口温度250°C ；载气 高纯氦，纯度大于99. 999% ；流速1. 2mL/min ；质谱条件电离方式为电子轰击(EI)；四级杆温度150°C ；离子源温度230°C。 在一些实施例中，所述食品优选为油脂，最优选为植物油。 在一些实施例中，所述抗氧化剂为合成酚类抗氧化剂，合成酚类抗氧化剂为TBHQ
和/或BHA和/或BHT。在一些实施例中，所述有机溶剂为甲醇或乙腈，优选为甲醇。在一实施例中，样品前处理步骤为样品于离心管中，加入IOmL甲醇溶液，超声 30min，漩涡振荡混合均勻，置-18°C冰箱冷冻池；取出后于离心机中5000r/min离心2min， 取上清液于浓缩瓶中，剩余残渣再加入IOmL甲醇，重复上述操作；合并两次提取液，旋转蒸发至小于10mL，甲醇定容至10mL，待气相色谱-质谱联用仪分析。本发明所述方法的灵敏度、回收率高，测定结果的精密度好，与GB/T5009. 30-2003 相比，该方法前处理过程简单快速，检出限低至0. lmg/kg。
图1标准品溶液色谱图。
具体实施例方式以下结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。仪器与试剂气相色谱-质谱联用仪7890A_5975C，安捷伦高速离心机TGL_16M菲恰尔超声波清洗器SB25_12DTD，宁波新芝生物科技股份有限公司BHA :Dr.Ehrens torfer GmbH Augsburg, germanyBHT :Dr.Ehrens torfer GmbH Aug sburg. germanyTBHQ =ACROS New. Jersy USA甲醇，乙腈(色谱纯)仪器分析条件气相色谱条件色谱柱:DB-5MS(30m X 0. 25mm, 0. 25 μ m)；柱温70°C保持2min，以 20°C /min 升温至 180°C，再以 30°C /min 升温至 280°C ；进样口温度250°C;载气高纯氦，纯度大于99. 999% ；流速1.2mL/min ；
质谱条件电离方式为电子轰击(EI)；四级杆温度150°C ；离子源温度230°C。实施例1线性方程及标准品色谱图以甲醇为溶剂，用标准品配制BHA、BHT和TBHQ混合溶液浓度分别为0. 1,0. 5,1. 0、 2. 0,5.0 μ g/mL的系列标准溶液，在上述色谱条件下进样测定峰面积，以外标法定量。标准品溶液色谱图如图1，以峰面积y为纵坐标，浓度χ为横坐标进行线性回归，结果如表1。表1三种抗氧化剂的保留时间，监测离子，线性方程及相关系数
权利要求
1.一种食品中抗氧化剂的检测方法，包括下列步骤a)样品前处理将样品置于有机溶剂中提取抗氧化剂，冷冻除脂，分离提取液，重复上述提取操作2-3次，合并提取液，浓缩定容；b)气相色谱-质谱检测。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述食品为油脂。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于所述油脂为植物油。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述抗氧化剂为合成酚类抗氧化剂。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述合成酚类抗氧化剂为TBHQ和/或 BHA 禾口 / 或 BHT0
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述有机溶剂为甲醇或乙腈。
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述有机溶剂为甲醇。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述样品前处理步骤为样品于离心管中，加入IOmL甲醇溶液，超声30min，漩涡振荡混合均勻，置-18°C冰箱冷冻池；取出后于离心机中5000r/min离心aiiin，取上清液于浓缩瓶中，剩余残渣再加入IOmL甲醇，重复上述操作；合并两次提取液，旋转蒸发至小于10mL，甲醇定容至10mL，待气相色谱-质谱联用仪分析。
9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述气相色谱-质谱检测为将步骤a 中定容的提取液采用气相色谱-质谱联用仪检测，气相色谱条件色谱柱DB-5MS ；柱温 70°C保持2min，以20°C /min升温至180°C，再以30°C /min升温至280°C ；进样口温度 2500C ；载气高纯氦，纯度大于99. 999% ；流速1. 2mL/min ；质谱条件电离方式为电子轰击(EI)；四级杆温度150°C ；离子源温度230°C。
全文摘要
本发明属于食品检测技术领域，具体涉及一种食品中抗氧化剂的检测方法。本发明公开了一种食品中抗氧化剂的检测方法，包括下列步骤样品前处理将样品置于有机溶剂中提取抗氧化剂，冷冻除脂，分离提取液，重复上述提取操作2-3次，合并提取液，浓缩定容；气相色谱-质谱检测。本发明所述方法的灵敏度、回收率高，测定结果的精密度好，与现有技术相比，该方法前处理过程简单快速,检出限低至0.1mg/kg。
文档编号G01N30/72GK102175782SQ201010605580
公开日2011年9月7日 申请日期2010年12月21日 优先权日2010年12月21日
发明者宋薇 申请人:上海谱尼测试技术有限公司