专利名称：一种梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸。
背景技术：
梅毒是由梅毒螺旋体(Treponemapallidum, TP)引起的一种性传播疾病,其主要通过性行为和血液传播，也可通过胎盘母婴垂直传播。近年来我国的梅毒发病率有逐年上升的趋势，2009年在全国法定传染病疫情报告中，梅毒的发病率位居第三位，与2008年同比增长了 18.39%。梅毒患者是梅毒的惟一传播源，对梅毒进行早诊断、早治疗是控制其蔓延至关重要的一个环节。梅毒螺旋体可侵犯全身各脏器，造成多器官病变、功能失常、组织破坏，甚至死亡，对人们的健康构成了严重的威胁。由于梅毒螺旋体具有较强的传染性和病程的复杂性，且梅毒在早、中期临床表现不显著，常常造成病人对病情的忽视，给病人身体健康带来极大的危害，也使梅毒的传播更为加快。血清学检测是诊断梅毒的重要实验室检测方法。目前梅毒的血清学检测方法主要有两种一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验，如快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等，此类试验检测的是心磷脂抗体，为非特异性抗体检测试验，常用作梅毒的筛查试验，亦可用于梅毒的疗效观察、复发及再感染。由于此类实验受多种因素影响，常出现生物学假阴性和假阳性结果，对一、三期梅毒的阳性率不高，因此仅适于二期梅毒的诊断，而不适于诊断一、三期梅毒，包括潜伏梅毒、神经梅毒的诊断。作疗效观察时，常出现血清学固定，使临床医生难以判断治疗终点。另一类是梅毒螺旋体抗原血清实验，如梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)等，这类试验的敏感性高、特异性强，临床常用此类试验作为梅毒的确认试验。但是此类试验检测的是梅毒螺旋 体IgG抗体和IgM抗体，而IgG抗体长期存在,血清反应持续存在阳性,不能用作梅毒治疗的疗效观察。因此迫切需要寻求一种敏感性高、特异性强的梅毒早期检测方法，为临床早期诊断、早期治疗及驱梅治疗后的疗效观察提供确切的实验依据。抗梅毒螺旋体IgM抗体是梅毒感染最早产生的抗体，患者一般感染后两周即可从血清中测出，因此是梅毒早期感染并活动的标志。IgM抗体一般在感染的早期呈阳性，随着疾病的发展而增加，IgG抗体随后才慢慢上升，经有效治疗后IgM抗体消失。晚期潜伏梅毒患者出现IgM抗体阳性，需要考虑是否再感染或体内未清除病灶再燃的情况。尽管TP-IgM阴性不能完全排除传染性，但TP-IgM阳性必是提示该患者具有传染性。此外，TP-IgM抗体对诊断先天性梅毒和神经梅毒具有重要意义。由于IgM抗体的分子量较大，不能透过胎盘屏障和血脑屏障等天然屏障，如若在新生儿血液中或成人脑脊液中检测到TP-IgM抗体，则可诊断先天性梅毒或神经性梅毒。目前认为TP-IgM抗体测定可用于①梅毒的早期诊断；②梅毒治疗后的疗效观察；③梅毒复发或再感染的判断；④新生儿胎传梅毒的诊断；⑤神经梅毒的诊断。
实用新型内容为解决上述技术问题，本实用新型提供一种灵敏度高、特异性强、操作简便快捷的梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸。本实用新型的梅毒螺旋 体IgM抗体的检测试纸，包括粘贴在塑料支撑板上的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的右端连接吸样垫，吸样垫的左端搭接在硝酸纤维素膜上，所述硝酸纤维素膜的左端连接标记有Tl抗体、TP融合抗原或抗人IgMy链单克隆抗体的胶体金垫，胶体金垫的右端搭接在硝酸纤维素膜上，胶体金垫的左端连接上样垫，上样垫的右端搭接在硝酸纤维素膜上，所述硝酸纤维素膜上包被有抗人IgM μ链单克隆抗体或TP重组抗原的检测线和包被有羊抗鼠IgG抗体的质控线。本实用新型的梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸，硝酸纤维素膜上还设有指示线。与现有技术相比本实用新型的有益效果为本实用新型的梅毒螺旋体gM抗体的检测试纸灵敏度高、特异性强、操作简便快捷，可为临床早期诊断、早期治疗及驱梅治疗后的疗效观察提供确切的实验依据。
图I是本实用新型实施例I所述的梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸的结构示意图；图2是本实用新型实施例2所述的梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸的结构示意图。图中I、塑料支撑板；2、硝酸纤维素膜；3、吸样垫；4、胶体金垫；5、上样垫；6、检测线；7、质控线；8、指示线。
具体实施方式
以下结合附图和实施例，对本实用新型的具体实施方式
作进ー步详细描述。以下实施例用于说明本实用新型，但不用来限制本实用新型的范围。实施例I如图I所示，ー种梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸，包括粘贴在塑料支撑板I上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜2的右端连接吸样垫3，吸样垫3的左端搭接在硝酸纤维素膜2上，所述硝酸纤维素膜2的左端连接标记有Tl抗体、TP融合抗原的胶体金垫4，胶体金垫4的右端搭接在硝酸纤维素膜2上，胶体金垫4的左端连接上样垫5，上样垫5的右端搭接在硝酸纤维素膜2上，所述硝酸纤维素膜2上包被有抗人IgMy链单克隆抗体的检测线6和包被有羊抗鼠IgG抗体的质控线7。实施例2如图2所示，与实施例I不同之处在于所述硝酸纤维素膜2的左端连接标记有抗人IgMy链单克隆抗体的胶体金垫4 ;所述硝酸纤维素膜2上包被有TP重组抗原的检测线6 ;硝酸纤维素膜2上还设有指示线8。本实用新型的梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸，所述的胶体金垫4按如下方法制备以氯金酸-柠檬酸三钠还原法制备直径为30 50nm的胶体金溶液，用O. 2M K2CO3调节胶体金溶液的pH为8. 5 9. 5，然后置于磁力搅拌器上缓慢搅拌，按每IOOml溶液含O. 5mg 3mgTl抗体缓慢滴加所述单抗至胶体金溶液中，室温搅拌I小时，加入BSA和PEG20000封闭，12000rpm离心，弃上清，沉淀加入保存液浓缩至原体积的1/10，按每毫升lug、2. 5ug、5ug加入TP融合抗原，室温搅拌I小时左右，用金标稀释液将浓缩胶体金稀释至不同浓度(5%、10%、15%、20% )，按每毫升金标稀释液铺22cm2的比例分别均匀地铺在无纺布上，再置干燥房(温度20 25°C,湿度 在小于30% )干燥2 4小时。切成6mm胶体金条，为胶体金垫。标记抗人IgMy链单克隆抗体时，方法相同。所述的硝酸纤维素膜2按如下方法制备用O. OlM pH7. 2的PBS将抗人IgMy链单克隆抗体稀释成O. 4 O. 6mg/ml进行包被构成检测线6 ;同时包被羊抗鼠IgG抗体作为质控线7，包被完成后干燥硝酸纤维素膜3 4小吋。包被TP重组抗原时方法相同，同时包被标示加样位置的加样指示线8。检测方法先在加样位置加入I IOul被检样品，再向上样垫5上加入适量稀释液，静置20分钟内观察检测結果。只在试剂条质控线7位置有一条紫红色条带出现，则判读为阴性；在检测线6和质控线7均出现一条紫红色条带，则判读为阳性；检测线6和质控线7位置均不出现紫红色条带，则为无效結果。以上所述仅是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，这些改进和变型也应视为本实用新型的保护范围。
权利要求1.一种梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸，包括粘贴在塑料支撑板(I)上的硝酸纤维素膜(2)，其特征在于所述硝酸纤维素膜(2)的右端连接吸样垫(3)，吸样垫(3)的左端搭接在硝酸纤维素膜(2)上，所述硝酸纤维素膜(2)的左端连接标记有Tl抗体、TP融合抗原或抗人IgMy链单克隆抗体的胶体金垫(4)，胶体金垫(4)的右端搭接在硝酸纤维素膜(2)上，胶体金垫(4)的左端连接上样垫(5)，上样垫(5)的右端搭接在硝酸纤维素膜(2)上，所述硝酸纤维素膜(2)上包被有抗人IgMy链单克隆抗体或TP重组抗原的检测线(6)和包被有羊抗鼠IgG抗体的质控线(7)。
2.根据权利要求I所述的梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸，其特征在于所述硝酸纤维素膜(2)上还设有指示线(8)。
专利摘要本实用新型涉及一种梅毒螺旋体IgM抗体的检测试纸，包括粘贴在塑料支撑板上的硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的右端连接吸样垫，吸样垫的左端搭接在硝酸纤维素膜上，所述硝酸纤维素膜的左端连接标记有T1抗体、TP融合抗原或抗人IgMμ链单克隆抗体的胶体金垫，胶体金垫的右端搭接在硝酸纤维素膜上，胶体金垫的左端连接上样垫，上样垫的右端搭接在硝酸纤维素膜上，所述硝酸纤维素膜上包被有抗人IgMμ链单克隆抗体或TP重组抗原的检测线和包被有羊抗鼠IgG抗体的质控线。本实用新型的检测试纸灵敏度高、特异性强、操作简便快捷，可为临床早期诊断、早期治疗及驱梅治疗后的疗效观察提供确切的实验依据。
文档编号G01N33/68GK202372508SQ20112053385
公开日2012年8月8日 申请日期2011年12月19日 优先权日2011年12月19日
发明者李洲, 许俊艳 申请人:天津中新科炬生物制药有限公司