非特异性反应抑制剂、非特异性反应抑制方法及试剂盒的制作方法
【专利摘要】本发明提供非特异性反应抑制剂，该抑制剂用于简便且有效地抑制免疫学测定法中伴随着测定的非特异性反应，实现样本中的微量成分(目标物质)的准确的检测及定量。所述非特异性反应抑制剂包含式I所示的物质：式中，R1和R2一起在它们各自直接键合的碳之间形成双键，或者R1是氢原子，且R2是从含SH基的化合物中除去H而得的基团，B是支承体，L是间隔臂部分。
【专利说明】非特异性反应抑制剂、非特异性反应抑制方法及试剂盒
【技术领域】
[0001]本发明涉及非特异性反应抑制剂、使用该抑制剂的非特异性反应抑制方法以及包含该抑制剂的免疫测定试剂盒，该抑制剂在免疫学测定法中使用，用于抑制非特异性反应，该非特异性反应是对微量的目标物质准确地进行检测、定量的障碍。
【背景技术】
[0002]利用抗原抗体反应的免疫学测定法能特异性地检测或者以良好的精度测定作为测定对象的微量成分，因此被广泛应用于临床检查。人们逐渐认识到，在这些免疫学测定法中，由于作为本来目的的目标物质的特异性的抗原抗体反应以外的非特异性反应，测定值的可靠性受损。该现象是由于样本中所含的目标物质(抗原)以外的成分与测定体系的成分反应而引起的。
[0003]一直以来，为了抑制非特异性反应、得到正确的测定值，进行了各种各样的尝试。例如，通常通过加热或用合适的试剂对欲测定的样本进行预处理，或是在测定体系中添加各种动物血清、免疫球蛋白组分、白蛋白、脱脂牛奶、明胶、表面活性剂等。为了避免通过像类风湿因子那样与抗体的Fe部位结合而引起的非特异性反应，也将？&13、？(&13’)2等抗体片段用于特异性反应。此外，也在测定体系中添加单克隆抗体，该单克隆抗体与测定体系中使用的单克隆抗体的反应特异性不同，并且不阻碍测定体系的反应。
[0004]此外，也已知如专利文献I所述采用使用马来酰亚胺等使链霉亲和素(streptavidin)交联/聚合而得的产物的技术方案、如专利文献2所述采用酰基化蛋白质凝集体的技术方案。此外，也已知在N取代马来酰亚胺化合物的存在下使被能检测的物质标记的一抗、二抗和试样反应，由此抑制能检测的物质与试样中所含的硫醇基(即SH基)的非特异性的结合的技术方案(专利文献3)。此外，公开了如下内容:在阻碍机体相关分子对载体的非特异性吸附的方法中，对表面具有选自N-羟基琥珀酰亚胺酯基、羧基、马来酰亚胺基和氨基的化学修饰基团的载体使用包含聚环氧烷的封闭剂，该聚环氧烷的末端具有能与上述载体上的化学修饰基团反应的、选自N-羟基琥珀酰亚胺酯基、巯基和氨基的官能团(专利文献4)。
[0005]但是，这些方法虽然在非特异性反应的抑制方面有一定程度的效果，但在一部分样本中，其效果还有所不足，在误诊可能会招致严重后果的临床检查的现场尚不能令人满
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[0006]现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本专利第3027770号说明书 专利文献2:日本特表平8-506907号公报 专利文献3:日本专利第4571999号说明书 专利文献4:日本特开2006-308307号公报。
【发明内容】
[0007]发明所要解决的课题
鉴于这样的状况，本发明的目的是提供非特异性反应抑制剂、其使用方法及测定试剂盒，该抑制剂用于在免疫学测定法中简便且有效地抑制伴随着测定的非特异性反应，实现样本中的微量成分(目标物质)的准确的检测及定量。
[0008]用于解决课题的手段
本发明人为了解决上述问题，对非特异性反应进行了认真研究，结果发现，通过在反应液中添加键合有具有马来酰亚胺基的物质(Sulfo-SMCC:磺基琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-甲酸酯或Sulfo-HMCS:N-(8-马来酰亚胺辛氧基)磺基琥珀酰亚胺)的担载体^ 'J 7—)蛋白，能避免样本中的干扰物质(非特异性反应物质)的影响，从而完成了本发明。即，如下述实施例中所详述的，作为非特异性反应物质，已知在样本中存在与键合有马来酰亚胺基的担载体蛋白反应的物质。本发明基于该发现，完成了一种用于准确地测定样本中的目标物质的非特异性反应抑制剂以及使用该非特异性反应抑制剂的测定方法及测定试剂。
[0009]即，本发明涉及:
[I]免疫学测定用的非特异性反应抑制剂，其包含式I所示的物质:
[化I]
【权利要求】
1.免疫学测定用的非特异性反应抑制剂，其包含式I所示的物质: [化1]
2.权利要求1所述的非特异性反应抑制剂，其中，支承体是担载体蛋白或担载体固相载体。
3.权利要求2所述的非特异性反应抑制剂，其中，担载体蛋白是白蛋白。
4.权利要求2所述的非特异性反应抑制剂，其中，担载体固相载体是粒子。
5.免疫学测定方法，其使用权利要求1~4中任一项所述的非特异性反应抑制剂。
6.权利要求5所述的免疫学测定方法，其中，免疫学测定方法是胶乳凝集光学测定法、酶免疫分析法、免疫比浊法、酶免疫测定法、荧光免疫测定法或放射免疫测定法。
7.权利要求5或6所述的免疫学测定方法，其中，在进行与样本中所含的目标物质的特异性的免疫反应工序之前，使该样本与非特异性反应抑制剂反应。
8.权利要求5或6所述的免疫学测定方法，其中，在非特异性反应抑制剂的共存下进行与样本中所含的目标物质的特异性的免疫反应工序。
9.权利要求5或6所述的免疫学测定方法，其中，免疫测定是采用夹心法的测定，在非特异性反应抑制剂的共存下进行与样本中所含的目标物质的特异性的的免疫反应工序中的一道以上的工序。
10.免疫学测定试剂盒，其含有权利要求1~4中任一项所述的非特异性反应抑制剂。
【文档编号】G01N33/543GK103620407SQ201280032103
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2012年6月28日 优先权日:2011年6月29日
【发明者】冈村佳和, 田代茂 申请人:三菱化学美迪恩斯株式会社