给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法
【专利摘要】本发明公开了一种给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法，首先利用氢氧化四丁胺给毛细管内壁动态涂层，使毛细管电泳电渗流转向；在含有8mmol/L的β-CD的pH9.0的30mmol/L硼砂缓冲溶液中，实现同向电渗流条件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分离；进样前先在0.5psi压力下进入引入前导电解质20s，然后-10kV下引入样品100s,然后利用3-（cyclohexylamino）-1-propane?sulphonic?acid作为终结电解质，实现了2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的电动增压在线富集和分离。
【专利说明】给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及毛细管电泳分析领域，具体为一种给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法。
【背景技术】
[0002]毛细管电泳(capillary electrophoresis)是经典电泳技术与现代微柱分离相结合的产物。是离子或荷电粒子以电场为驱动力，在毛细管中按其淌度或/和分配系数不同进行高效、快速分离的一种电泳新技术。在应用广泛的区带毛细管电泳(capillary zoneelectrophoresis, CZE)中，毛细管和电极槽内充有相同组分和相同浓度的背景电解质溶液(缓冲溶液)。样品从毛细管的一端(称为进样端)导入。当毛细管的两端加上一定的电压后，荷电溶质便朝与其电荷极性相反的电极方向移动。由于样品组分间的淌度不同，他们的迁移速度不同，因而经过一定时间后，各组分将按其速度(或淌度)大小顺序，依次到达检测器被检出，得到按时间分布的电泳谱图。用谱峰的迁移时间(tm)或类似于色谱学的术语保留时间(tj做定性分析，按其谱峰的高度(h)或峰面积(A)做定量分析。现有技术缺点是芳香族羧酸在毛细管电泳分析中富集因数低，毛细管内壁电渗流的精密度低，这些对影响分析数据的精确性。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于提供一种给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法，以增加芳香族羧酸的富集因数，提高电渗流精密度，促进分析数据的精确性。
[0004]为实现上述目的，本发明采用以下技术方案:一种给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法，包括如下步骤:
[0005]1、利用氢氧化四丁胺给毛细管内壁动态涂层，使毛细管电泳电渗流转向；
[0006]2、在含有8mmol/L的β -⑶的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂缓冲溶液中，实现同向电渗流条件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分离；
[0007]3、进样前先在0.5psi压力下进入引入前导电解质20s，然后-1OkV下引入样品100s,然后利用 3_ (cyclohexylamino) -1-propane sulphonic acid 作为终结电解质,实现了 2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的电动增压在线富集和分离。
[0008]步骤I中，利用氢氧化四丁胺给毛细管内壁动态涂层具体为，将毛细管在20psi下，lmol/L氢氧化钠冲洗20分钟；20psi下,水冲洗20分钟；20psi下,0.005mol/L氢氧化四丁胺冲洗20分钟；20psi下，水冲洗20分钟，使毛细管电泳电渗流转向。
[0009]本发明具有如下有益效果:和常规进样毛细管电泳相比(背景电解质含有Smmol/L的β -CD的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂缓冲溶液;进样量0.5psi, 4s ;检测波长:214nm)，2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸分别实现了 2826和3106倍的富集因数。并且，该毛细管内壁涂 层在连续30次分离过程中电渗流的精密度不大于3.5%。
【具体实施方式】
[0010]利用氢氧化四丁胺给毛细管内壁动态涂层(20psi下lmol/L氢氧化钠冲洗20分钟，20psi下水冲洗20分钟，20psi下0.005mol/L氢氧化四丁胺冲洗20分钟，20psi下水冲洗20分钟)使毛细管电泳电渗流(electroosmotic flow)转向；在含有8mmol/L的β -⑶的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂缓冲溶液中实现同向电渗流条件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分离；进样前先在0.5psi压力下进入引入前导电解质20s，然后-1OkV下引入样品100s,然后利用 3_ (cyclohexylamino) -1-propane sulphonic acid 作为终结电解质,实现了 2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的电动增压在线富集和分离，分别实现了 2826和3106倍的富集因数，该毛细管内壁涂层在连续30次分离过程中电渗流的精密度不大于3.5%。
【权利要求】
1.一种给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)利用氢氧化四丁胺给毛细管内壁动态涂层，使毛细管电泳电渗流转向； (2)在含有8mmol/L的β-⑶的ρΗ9.0的30mmol/L硼砂缓冲溶液中，实现同向电渗流条件下的2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的分离； (3)进样前先在0.5psi压力下进入引入前导电解质20s，然后-1OkV下引入样品100s，然后利用 3- (cyclohexylamino)-1-propane sulphonic acid 作为终结电解质，实现了2-硝基苯甲酸和3-硝基苯甲酸的电动增压在线富集和分离。
2.如权利要求1所述的一种给毛细管内壁涂层电动增压在线富集毛细管电泳分析芳香族羧酸的方法，其特征在于:所述的步骤I中，利用氢氧化四丁胺给毛细管内壁动态涂层具体为，将毛细管在20psi下，lmol/L氢氧化钠冲洗20分钟；20psi下，水冲洗20分钟；20psi下，0.005mol/L氢氧化四丁胺冲洗20分钟；20psi下，水冲洗20分钟，使毛细管电泳电渗流转向。
【文档编号】G01N1/40GK103472119SQ201310237952
【公开日】2013年12月25日 申请日期:2013年6月16日 优先权日:2013年6月16日
【发明者】吕元琦 申请人:德州学院