吲哚类pH荧光探针及其制备方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种吲哚类pH荧光探针及其制备方法，以及探针的应用。该制备方法是：在惰性气体保护下，将4-喹啉甲醛或其衍生物和1,1-二烷基-2-甲基-1H-苯并[e]吲哚类衍生物溶于乙酸酐，加入乙酸钠，加热反应制得粗品；将其浓缩后，经硅胶柱分离得到纯品。该探针表现出高的荧光量子产率以及对H+高的灵敏度、好的选择性和大的Stocks位移等的优点。该探针可穿透细胞膜，适用于细胞内pH的检测和细胞标记等。
【专利说明】吲哚类pH荧光探针及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及荧光探针，具体属于吲哚类pH荧光探针及其制备方法，以及在生物领域的应用。
【背景技术】
[0002]人体细胞内pH值与细胞、酶和组织的许多重要生理过程如细胞增殖和凋亡、药物耐药性、离子运输、内吞作用和肌肉收缩等活动密切相关。通常细胞中存在两个PH值范围，一种是近中性，如细胞液中的PH值范围为6.8-7.4 ;还有一种是酸性，如溶酶体的pH值范围为4.5-5.5，内涵体的pH值范围为5.4-6.2，称为酸性细胞器。不正常的pH值可能导致心肺和神经系统的疾病，如阿尔茨海默综合症，严重的甚至可能危及生命。
[0003]监测细胞内pH值的动态变化对于理解细胞内许多生理功能的规则机制有着重要的作用。相较于微电极、NMR和吸收光谱等PH测量方法，荧光光谱检测技术对于在时空分布上检测pH变化具有独特的优势。此外，荧光技术具有操作简单、响应快速、高信噪比、高灵敏度以及大多数情况下对细胞无损伤等优点。荧光染料或荧光试剂作为分子探针在生命科学领域备受瞩目。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种具有高的荧光量子产率、大的Stocks位移、对pH高度敏感、选择性高的吲哚类pH荧光探针，并将其用于细胞内pH值的检测。
[0005]本发明提供的吲哚类pH荧光探针，其结构式为:
[0006]
【权利要求】
1.一种吲哚类PH荧光探针，其特征在于结构式:
2.如权利要求1所述的一种吲哚类pH荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)在惰性气体保护下，将4-喹啉甲醛或其衍生物和1，1-二烷基-2-甲基-1H-苯并[e]吲哚类衍生物按照摩尔比6-8:5溶于乙酸酐，加入和4-喹啉甲醛或其衍生物同摩尔量的乙酸钠，70-100°C磁力搅拌，反应过夜，过滤除去乙酸钠，制得产物粗品； (2)将产物粗品浓缩后，经硅胶柱分离得到纯品。
3.如权利要求1所述的一种吲哚类pH荧光探针作为检测细胞内pH的指示剂。
4.如权利 要求1所述的一种吲哚类pH荧光探针在细胞标记中的应用。
【文档编号】G01N21/75GK103756669SQ201410028873
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2014年1月22日 优先权日:2014年1月22日
【发明者】牛卫芬, 樊丽, 钞建宾, 双少敏, 董川 申请人:山西大学