一种MALDI‑TOF‑MS检测小分子化合物的方法及富勒烯标记物作为质荷比位移试剂的应用与流程

技术特征：

1.富勒烯标记物作为质荷比位移试剂在基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱中检测小分子化合物的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于所述富勒烯标记物为富勒烯衍生物，含有能与小分子化合物反应的活性基团；所述小分子化合物的质荷比<500Da的小分子化合物。

3.一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于以富勒烯标记物作为质荷比位移试剂。

4.根据权利要求3所述的一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于所述小分子化合物为氨基小分子化合物、羟基小分子化合物。

5.一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)建立标准曲线：配制一系列不同浓度的小分子化合物标准品溶液，并用富勒烯标记物进行衍生化反应，所得标准品衍生产物中加入内标物后进行MALDI-TOF-MS分析，然后以小分子化合物标准品溶液的浓度为横坐标、标准品衍生产物与内标物峰强度比值为纵坐标建立标准曲线；

2)将富勒烯标记物与小分子化合物待测品进行衍生化反应，所得待测品衍生产物中加入内标物后进行MALDI-TOF-MS分析，得到待测品衍生产物的质谱图，将待测品衍生产物与内标物峰强度比值代入步骤1)所得标准曲线中，进而计算得到小分子化合物待测品的浓度。

6.根据权利要求5所述的一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于所述内标物为含有羧酸基团、结构与衍生产物类似但不相同；所述小分子化合物为氨基小分子化合物、羟基小分子化合物。

7.根据权利要求6所述的一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于所述氨基小分子化合物选自氨基酸、脂肪胺、芳香胺，所述羟基小分子化合物为脂肪醇和酚类化合物。

8.根据权利要求6所述的一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于所述小分子化合物为氨基小分子化合物时，所述富勒烯标记物其结构如式1所示，所述内标物结构如式2所示；所述小分子化合物为羟基小分子化合物时，所述富勒烯标记物其结构如式3所示，所述内标物结构如式4所示；

9.根据权利要求5所述的一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于所述步骤1)中小分子化合物为一种或几种；小分子化合物的浓度范围均为0.7-100μM；所述步骤2)中富勒烯标记物的加入量与步骤1)相同；步骤1)和步骤2)中内标物的加入量以保证内标物的浓度在0.7-100μM之间。

10.根据权利要求5所述的一种MALDI-TOF-MS检测小分子化合物的方法，其特征在于步骤1)中小分子化合物标准品溶液与富勒烯标记物浓度比为1：(2-4)；所述步骤1)和步骤2)中衍生化反应的条件：弱碱性环境，温度在20-70℃，时间为0.5-2h；步骤1)和步骤2)中内标物的加入量以保证内标物的浓度在20-40μM之间。