一种溴芬酸钠滴眼液有关物质的测定方法与流程

文档序号:11131682阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种溴芬酸钠滴眼液有关物质的测定方法,其特征在于,所述测定方法具体步骤为:采用十八烷基硅烷键合硅胶柱或N-氧化石松碱M键合硅胶柱,以磷酸盐缓冲液-乙腈为流动相,进行梯度洗脱,检测波长为250-280nm,柱温为10-30℃,流速为0.8-3ml/min,进样量为20-70μL。

2.根据权利要求1所述的一种溴芬酸钠滴眼液有关物质的测定方法,其特征在于,所述柱温为室温;所述检测波长为266nm。

3.根据权利要求1所述的一种溴芬酸钠滴眼液有关物质的测定方法,其特征在于,所述流速为调节溴芬酸钠的出峰时间为18min;所述进样量为60uL。

4.根据权利要求1所述的一种溴芬酸钠滴眼液有关物质的测定方法,其特征在于,所述洗脱梯度:

时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B 0 100 0 20.1 100 0 60.1 10 90 60.2 100 0 80 100 0

其中所述的流动相A为磷酸盐缓冲液:乙腈=75:25;流动相B为磷酸盐缓冲液-乙腈=30:70;所述磷酸盐缓冲液为取磷酸氢二铵2.64g,加水溶解并稀释至1000ml,用磷酸调节pH值至7.3所得。

5.根据权利要求1所述的一种溴芬酸钠滴眼液有关物质的测定方 法,其特征在于,所述N-氧化石松碱M键合硅胶柱的制备步骤为:1)取20g活化的硅胶于500mL三口瓶中,再量取100mL甲苯和40mL的γ-氨丙基三乙氧基硅烷,120℃下油浴,搅拌回流13h,待冷却后,产物依次用甲苯,乙醇洗涤抽滤至无胶状物存在;在60℃下干燥24h,干燥箱内冷却;2)在500mL的单口瓶中加入步骤1)的产物,然后依次加入120mL 35%的甲醛溶液和2mL的乙酸溶液,室温搅拌反应2h,经无水乙醇抽滤后,置于500mL三口瓶中备用;取N-氧化石松碱M 4g溶于适量水溶液中,调节溶液的pH值至8.0,加入上述三口瓶中,60℃搅拌下反应10h;待产物冷却,依次用大量二次水、无水乙醇洗涤抽滤至滤液清亮;60℃恒温干燥6h,于干燥箱内冷却后装棕色瓶内,得N-氧化石松碱M键合硅胶;3)将N-氧化石松碱M键合硅胶常规装柱,即得。

6.根据权利要求1所述的一种溴芬酸钠滴眼液有关物质的测定方法,其特征在于,所述测定方法具体步骤为:

1)精密量取溴芬酸钠滴眼液5ml,置50ml量瓶中,加流动相A稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;精密量取供试品溶液1ml,置200ml量瓶中,加流动相A稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液;

2)精密称取溴芬酸钠水合物对照品25mg,置25ml量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,制成每1ml中约含无水溴芬酸钠0.93mg的溶液,摇匀,作为对照品溶液贮备液;另精密量取对照品溶液贮备液1ml,置200ml量瓶中,加流动相A稀释至刻度,摇匀,作为对照品溶液;

3)精密称取聚维酮K30对照品200mg,置10ml量瓶中,加水溶解 并稀释至刻度,制成每1ml中含20mg的溶液,摇匀,精密量取5ml,置50ml量瓶中,加流动相A稀释至刻度,摇匀,作为空白溶液;

4)精密量取对照品溶液、对照溶液、空白溶液和供试品溶液各60μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,其他单一杂质峰面积与对照溶液主峰面积相比较;除聚合物外,各杂质峰面积的和与对照溶液主峰面积相比较。

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