胶体金标记的识别胃癌、肝癌、结肠癌三种肿瘤的特异性抗原的抗体共聚物。
[0048]将所述胶体金标记的识别胃癌、肝癌、结肠癌三种肿瘤的特异性抗原的抗体共聚物作为抗体载体参加免疫浊度反应，作为检测胃癌、肝癌、结肠癌的免疫增强体外诊断试剂，大大提高了检测的灵敏度。
[0049]实验数据
[0050]1、实验对象:
[0051]选择某医院自2009年I月至2010年12月收治的胃癌、肝癌、结肠癌患者共900名，其中胃癌患者300名，肝癌患者300名，结肠癌患者300名，所有病例均初次诊断为胃癌、肝癌或结肠癌，并且之前没有接受过放疗和化疗。
[0052]2、检测试剂:
[0053]将本发明实施例1制备的胶体金标记的识别胃癌、肝癌、结肠癌三种肿瘤的特异性抗原的抗体共聚物作为检测试剂I，将本发明实施例2制备的胶体金标记的识别胃癌、肝癌、结肠癌三种肿瘤的特异性抗原的抗体共聚物作为检测试剂II，将本发明实施例3制备的胶体金标记的识别胃癌、肝癌、结肠癌三种肿瘤的特异性抗原的抗体共聚物作为检测试剂III，分别采集上述900名患者的血清，作为待测样品。
[0054]3、实验方法:
[0055]分组:将上述300名胃癌患者、300名肝癌患者、300名结肠癌患者分别平均分成3组，每组各100人，分别记为:胃癌I组、胃癌2组、胃癌3组、肝癌I组、肝癌2组、肝癌3组、结肠癌I组、结肠癌2组、结肠癌3组。胃癌I组、肝癌I组、结肠癌I组使用检测试剂I进行检测，胃癌2组、肝癌2组、结肠癌2组使用检测试剂II进行检测，胃癌3、肝癌3组、结肠癌3组使用检测试剂III进行检测。
[0056]检测方法:分别在胃癌患者血清中提取胃癌抗原，在肝癌患者血清中提取肝癌抗原，在结肠癌患者血清中提取结肠癌抗原，分别稀释得到浓度分别1.0 μ g/L、7.5 μ g/L、15 μ g/L,30 μ g/L,60 μ g/L、120 μ g/L的待测样本。先检测试剂的空白吸光度0D0，采用6点定标方法，在每500ul检测试剂中分别加入相应各组患者血清样本10 μ L，混合混匀，使二者发生抗原抗体反应，置37°C，孵育3小时后，通过分光光度计读取波长为340nm处的对应 6 组吸光度值 0D1、0D2、0D3、0D4、0D5、0D6。
[0057]检测仪器:0LYMPUS AU640全自动生化分析仪。
[0058]4、检测数据统计结果:
[0059]300名胃癌患者中检测出阳性298例、300名肝癌患者检测出阳性296例、300名结肠癌患检测出阳性299例，总检出率为99.2% 0
[0060]5、结论:本发明用于检测多种肿瘤的组合物能够检测多种肿瘤，灵敏度高，检出率尚O
[0061]最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。
【主权项】
1.一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，是由多种识别肿瘤特异性抗原的抗体、聚合物、胶体金溶液组成；其制备方法为:将所述多种识别肿瘤特异性抗原的抗体分别用胶体金标记后，与所述聚合物形成包含多种胶体金标记的用于识别不同肿瘤特异性抗原的抗体的共聚物。2.如权利要求1所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，将所述包含多种胶体金标记的用于识别不同肿瘤特异性抗原的抗体的共聚物作为抗体载体参加免疫浊度反应，可作为检测多种肿瘤的免疫增强体外诊断试剂。3.如权利要求1所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述聚合物为可生物降解的聚合物。4.如权利要求3所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述可生物降解的聚合物选自聚羟基醋酸、聚羟基丁酸酯、乳酸-聚乙二醇共聚物、聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物或聚羟基烷基醇酯中的任意一种。5.如权利要求1所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述肿瘤包括胃癌、肝癌、结肠癌。6.如权利要求5所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述用于识别胃癌特异性抗原的抗体为抗S100P蛋白多克隆抗体；所述用于识别肝癌特异性抗原的抗体为人肝癌组织AFU多克隆抗体；所述用于识别结肠癌特异性抗原的抗体为结肠癌抗原3抗体(SDCCAG3)。7.如权利要求6所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述纳米金标记的识别肿瘤特异性抗原的抗体共聚物制备方法为: (1)制备胶体金溶液:用质量百分比浓度为1%的柠檬酸三钠水溶液与质量百分比浓度为0.01%氯金酸水溶液，按1.5mL: 100mL的体积比，将氯金酸溶液加热至沸腾，把柠檬酸三钠水溶液快速加入其中，搅拌反应至所得的反应液为酒红色，冷至室温，然后调节pH值为6.5?8.0，即得胶体金溶液。 (2)在步骤(1)所得的胶体金溶液中在磁力搅拌下缓慢加入加入浓度为10?50μ g/mL的用于识别胃癌特异性抗原的抗体水溶液，混匀，37°C孵育30min，加封闭液继续37°C孵育22?25min，14000rpm，4°C条件下离心20?22min，去除上清液，稀释液重悬沉淀并洗涤一次，得到胶体金-抗S100P蛋白多克隆抗体标记物I ; 另取步骤(1)所得的胶体金溶液，加入浓度为10?50 μ g/mL的用于识别肝癌特异性抗原的抗体水溶液，按照上述制备胶体金-抗S100P蛋白多克隆抗体标记物I同样的操作方法，得到胶体金-人肝癌组织AFU多克隆抗体标记物II ; 另取步骤(1)所得的胶体金溶液，加入浓度为10?50 μ g/mL的用于识别结肠癌特异性抗原的抗体水溶液，按照上述制备胶体金-抗S100P蛋白多克隆抗体标记物I同样的操作方法，得到胶体金-结肠癌抗原3抗体(SDCCAG3)标记物III。 (3)将所述聚合物溶于二氯甲烷，加入上述步骤(2)制得的标记物1、标记物I1、标记物III，用超声波处理30?60s，得到胶体金标记的识别胃癌、肝癌、结肠癌三种肿瘤的特异性抗原的抗体共聚物。8.如权利要求7所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述的胶体金-抗S100P蛋白多克隆抗体标记物I，按质量比计算，即胶体金:抗S100P蛋白多克隆抗体为5:0.21?0.23 ;所述的胶体金-人肝癌组织AFU多克隆抗体标记物II，按质量比计算，即胶体金:人肝癌组织AFU多克隆抗体为5:0.25?0.28 ;所述的胶体金-结肠癌抗原3抗体(SDCCAG3)标记物III，按质量比计算，即胶体金:结肠癌抗原3抗体(SDCCAG3)为5:0.23 ?0.26。9.如权利要求7所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述超声波处理的频率为35?55KHz。10.如权利要求7所述的一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，所述封闭液为含牛血清蛋白的洗涤液，其质量浓度为0.3?lmg/mL。
【专利摘要】本发明公开的一种可以检测多种肿瘤的组合物，作为抗体载体参加免疫浊度反应，可用于检测多种肿瘤，大大提高了检测的灵敏度。所述可以检测多种肿瘤的组合物，是由多种识别肿瘤特异性抗原的抗体、聚合物、胶体金溶液组成；其制备方法为：将所述多种识别肿瘤特异性抗原的抗体分别用胶体金标记后，与所述聚合物形成包含多种胶体金标记的用于识别不同肿瘤特异性抗原的抗体的共聚物，再作为抗体载体参加免疫浊度反应，用于检测多种肿瘤的免疫增强体外诊断试剂，可检测多种肿瘤，具有普遍适用性，且检测的灵敏度较高。
【IPC分类】G01N33/574
【公开号】CN105353127
【申请号】CN201510789097
【发明人】蒋爱英
【申请人】蒋爱英
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月16日