:分别准确量取体积比为95:5的乙腈和纯化水混合均匀，按照体积 比为0.5%加入磷酸，混合均勾，用0.45μηι的过滤膜抽滤，滤液超声排气10min;
[0147] (2)将药物球囊导管的球囊部分用步骤(1)得到的流动相浸没，用球囊扩充压力栗 充压以展开球囊，加盖超声浸提l〇min后，将所有溶液转移到10mL容量瓶内，用步骤(1)得到 的流动相定容到刻度线，摇匀，密封。
[0148] (3)用1. Ομπι的针筒式过滤器过滤溶液，HPLC进样测试，色谱条件为：
[0149] 柱温：50〇C，
[0150] 流速:0· lmL/min，
[0151] 进样量:5yL，
[0152] 示差折光检测器:RI，检测池温度40°C
[0153] 环境条件:温度：20 ± 5°C，湿度：小于70 % RH;
[0154] (4)按上述条件进样分析，记录色谱图，定性说明聚乙二醇纯物质在该色谱体系的 出峰位置、峰形以及该药物涂层中各物质的分离状况。
[0155] 实施例9
[0156] 待检测样品为带有药物涂层的球囊导管，该药物涂层中含有具有治疗作用的药物 紫杉醇和辅料，辅料中包含一定量的聚乙二醇以及硬脂酸镁，聚乙二醇的分子量为4000。
[0157] 色谱设备：依利特EC2000液相色谱仪和SHODEX RI-201H示差折光检测器，依利特 P230高压恒流栗，ZW色谱柱温箱，EC2000色谱数据工作站；
[0158] 色谱柱:商品名为Zenix SEC的反相硅胶键合色谱柱(美国赛分科技有限公司），规 格为3μι3?〇 A 7 · 8mm X 300mm;
[0159] 流动相：乙腈:色谱纯;纯水:纯度至少达到ISO 3696所规定的一级；甲酸，色谱纯， 纯度 >99.9%。
[0160] (1)流动相制备：分别准确量取体积比为50: 50的乙腈和纯化水混合均匀，按照体 积比为0.02 %加入甲酸，混合均勾，用0.45μηι的过滤膜抽滤，滤液超声排气1 Omin;
[0161] (2)将药物球囊导管的球囊部分用步骤(1)得到的流动相浸没，用球囊扩充压力栗 充压以展开球囊，加盖超声浸提l〇min后，将所有溶液转移到10mL容量瓶内，用步骤(1)得到 的流动相定容到刻度线，摇匀，密封。
[0162] (3)用0.2μπι的针筒式过滤器过滤溶液，HPLC进样测试，色谱条件为：
[0163] 柱温：l〇°C，
[0164] 流速：1 · 5mL/min，
[0165] 进样量:80yL，
[0166] 示差折光检测器:RI，检测池温度40°C
[0167] 环境条件:温度：20 ±5°C，湿度：小于70 % RH;
[0168] (4)按上述条件进样分析，记录色谱图，定性说明聚乙二醇纯物质在该色谱体系的 出峰位置、峰形以及该药物涂层中各物质的分离状况。
[0169] 实施例10
[0170]待检测样品为带有药物涂层的球囊导管，该药物涂层中含有具有治疗作用的药物 紫杉醇和辅料，辅料中包含一定量的聚乙二醇，分子量为6000。
[0171]色谱设备：依利特EC2000液相色谱仪和SHODEX RI-201H示差折光检测器，依利特 P230高压恒流栗，ZW色谱柱温箱，EC2000色谱数据工作站；
[0172]色谱柱:商品名为SRT SEC的反相硅胶键合色谱柱(美国赛分科技有限公司），规格 为5μηι.50〇 A 7 · 8mm X 300mm;
[0173]流动相：乙腈:色谱纯；纯水:纯度至少达到ISO 3696所规定的一级；甲基磺酸，色 谱纯，纯度>99.9%。
[0174] (1)流动相制备:分别准确量取体积比为5:95的乙腈和纯化水混合均匀，按照体积 比为0.05%加入甲基磺酸，混合均勾，用0.45μηι的过滤膜抽滤，滤液超声排气lOmin;
[0175] (2)将药物球囊导管的球囊部分用步骤(1)得到的流动相浸没，用球囊扩充压力栗 充压以展开球囊，加盖超声浸提l〇min后，将所有溶液转移到10mL容量瓶内，用步骤(1)得到 的流动相定容到刻度线，摇匀，密封。
[0176] (3)用1. Ομπι的针筒式过滤器过滤溶液，HPLC进样测试，色谱条件为：
[0177] 柱温:80°C，
[0178] 流速:0.4mL/min，
[0179] 进样量:10yL，
[0180] 示差折光检测器:RI，检测池温度40°C
[0181] 环境条件:温度：20 ± 5°C，湿度：小于70 % RH;
[0182] (4)按上述条件进样分析，记录色谱图，定性说明聚乙二醇纯物质在该色谱体系的 出峰位置、峰形以及该药物涂层中各物质的分离状况。
[0183] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精 神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种聚乙二醇含量的检测方法，其特征在于，主要包括W下步骤： 采用反相键合体积排阻色谱柱，将与样品中的待测聚乙二醇分子量相等、分散度相同 或相似的聚乙二醇标准品，用流动相溶解并稀释，配制成一定浓度梯度的系列标准液； 将所述系列标准液过滤后分别进样，记录检测器的峰信号，按外标法，W不同浓度的聚 乙二醇标准溶液的峰面积与对应的标准溶液的浓度做线性回归，得出校准曲线，聚乙二醇 的标准回归曲线方程为： Y = aX+b, 其中，a为校准曲线的斜率，b为校准曲线的截距，Y为聚乙二醇在检测器输出的信号峰 面积，X为聚乙二醇浓度，单位为yg/mL 将待测样品用流动相溶解，过滤后进样，利用所述标准回归曲线方程W及样品中聚乙 二醇在检测器输出的信号峰面积，计算样品中聚乙二醇的含量。2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反相键合体积排阻色谱柱的载体 为硅胶基质，固定相为硅胶填料。3. 根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述外标法的外标物为聚乙二醇，所 述用于外标法的外标物聚乙二醇的分子量及分散度与样品中待检测的聚乙二醇相同或相 似。4. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述硅胶填料的粒径范围为1~20WI1， 孔径为80藻、化(始、巧OA、3Q0复或訊〇瓜5. 根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述硅胶填料的粒径为3WI1或扣m。6. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相为含离子对溶剂的乙腊水 溶液，所述离子对溶剂为憐酸、Ξ氣乙酸、甲酸、乙酸、高氯酸或甲基横酸。7. 根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述乙腊水溶液中乙腊的体积分数为 5~95%，所述离子对溶剂在流动相中的体积分数为0.02~1 %。8. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述反相键合体积排阻色谱柱的色谱 条件为:流动相流速范围为0.1~2mL/min;柱溫小于或等于80°C;进样量范围为5~10化L。9. 根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述流动相流速范围为0.5~ImL/ min;柱溫范围为10~30°C;进样量范围为20~50化。10. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测器为示差折光检测器。11. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述用流动相溶解时采用超声加速 并确保溶解完全； 所述过滤为采用0.2~Iwii水系过滤膜过滤，优选0.45WI1。12. 权利要求1至11任一项所述的检测方法在检测药品或载药医疗器械、食品、保健品 及其他生物制品中聚乙二醇含量或聚乙二醇残留量中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种聚乙二醇含量的检测方法。该检测方法利用样品中各组分流体力学体积大小的不同，通过优化色谱条件，选择合适的色谱柱填料的粒径和孔径大小的体积排阻色谱柱实现优质的分离，通过实验室常规的通用检测器，鉴别聚乙二醇的色谱峰，并通过外标法回归，进而定量样品中聚乙二醇的绝对含量。本发明的检测方法解决了常规方法中分离度不佳，微量含量测试准确度不高，测试结果只能以百分含量表达等的限制，特别适合于检测药品或载药医疗器械、食品、保健品及其他生物制品中聚乙二醇含量或聚乙二醇残留量。
【IPC分类】G01N30/60, G01N30/74, G01N30/86
【公开号】CN105548422
【申请号】CN201510980013
【发明人】宋精忠
【申请人】先健科技(深圳)有限公司
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月23日