专利名称：双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法。
背景技术：
目前，微生物发酵是获取微生物菌体的重要手段之一，世界上有三种微生物发酵的方法，第一种固体斜面菌种——固体发酵——菌丝体产品；第二种固体斜面菌种——液体菌种——液体发酵——菌丝体产品；第三种固体斜面菌种——液体菌种——固体发酵——菌丝体产品。此三种方法对获取微生物菌体的收益率均只有1～1.5％，且投资大周期长，质量不稳定，很难工业化大生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法，主要经过双态两次发酵法的互补作用，集两者优势为一体从而提高了菌体的质量，解决了目前常规发酵技术中，生产产出率低的难题，可使深层培养物在质量稳定的前提下，使收率翻几倍，无需加设备和生产成本，便可工业化大生产。
本发明是提供一种双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法，其特征的制作步骤是
一、半固体菌种，在常规固体培养基中，减半凝固剂的用量制成半固体培养基，再加入三分之一的玻璃球，然后，按固定常规接种培养方法封口灭菌，菌丝萌发后，用力摇动使培养基成液体状，即形成液体菌种；二、扩大液体菌种，接入常规液体培养基进行培养，培养结束再转入常规固体培养基2～3天；三、固态发酵，再转入常规固体培养基2～3天；四、再液态发酵，将上述固体菌种的2～6％作为增粘剂或添加剂，加入扩大培养的发酵罐内，进行再次液态发酵而成为菌丝体产品。
本发明是提供一种双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法，上述凝固剂是琼脂。
本发明产出量高而获取率为3～8％；生产周期缩短到7～10天，并可工业化生产。
具体实施例方式
本发明的典型实施例的制作步骤如下1、半固体菌种在常规固体培养基中，减半凝固剂(琼脂)的用量制成半固体培养基，再加入三分之一的玻璃球，然后封口灭菌(按固定常规接种培养方法)，菌丝萌发后，用力摇动使培养基成液体状，即形成液体菌种；2、扩大液体菌种接入常规液体培养基进行培养，培养结束再转入常规固体培养基，2～3天后；3、固态发酵，再转入常规固体培养基，2～3天；4、再液态发酵将上述固体菌种的2～6％作为增粘剂或添加剂，加入扩大培养的发酵罐内，进行再次液态发酵既成为菌丝体产品。
综上所述本发明的工艺流程半固体菌种——液体菌种——固态发酵——再液态发酵。
本发明的优点1、有效控制污染问题；由于半固体培养基便于检查污染，而现有技术的液体培养基，在接种时菌种被液体沉没，而无法检查出是否被污染。
2、由于又有固态发酵，常规固体发酵中含有的有益物质，填补液体发酵中有益物质含量低，而液体发酵中的有益物质又填补了固体发酵中物质含量低，两者经过双态两次发酵法的互补作用，集两者优势为一体从而提高了菌体的质量；3、再液态发酵，由于在发酵过程中加入了2～6％的固体菌种作为增粘剂或添加剂，该增粘剂或添加剂也形成了纯的菌丝体，使液体培养基的粘度增高，营养更全面，因此，产出量高而获取率为3～8％；生产周期由常规15～20天，缩短到7～10天，并可工业化生产；另外设备投资是常规的一半；又技术含量低，无需专业技术人员操作。
权利要求
1.一种双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法，其特征的制作步骤是一、半固体菌种，在常规固体培养基中，减半凝固剂的用量制成半固体培养基，再加入三分之一的玻璃球，然后，按固定常规接种培养方法封口灭菌，菌丝萌发后，用力摇动使培养基成液体状，即形成液体菌种；二、扩大液体菌种，接入常规液体培养基进行培养，培养结束再转入常规固体培养基2～3天；三、固态发酵，再转入常规固体培养基2～3天；四、再液态发酵，将上述固体菌种的2～6％作为增粘剂或添加剂，加入扩大培养的发酵罐内，进行再次液态发酵而成为菌丝体产品。
2.根据权利要求1所述的一种双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法，其特征是上述凝固剂是琼脂。
全文摘要
本发明涉及一种双态微生物液体培养菌丝体的两次发酵法。其工艺流程半固体菌种、液体菌种、固态发酵，以及再液态发酵，将上述液体菌种的2～6％作为增粘剂或添加剂，加入扩大培养的发酵罐内，进行再次液态发酵而成为菌丝体产品。从而，产出量高，获取率为3～8％；生产周期缩短到7～10天，并可工业化生产。
文档编号A01G1/04GK1644011SQ20051000746
公开日2005年7月27日 申请日期2005年2月22日 优先权日2005年2月22日
发明者余兆丰, 黄伟, 余蓓蓓, 沈承欢 申请人:余兆丰