专利名称：木霉田间扩繁剂的制作方法
技术领域：
本发明属于微生物应用领域，尤其涉及一种利用木霉属(Trichoderma)真菌预防植物真菌病害的产品。
背景技术：
利用木霉(Trichoderma)真菌拮抗植物病害真菌的研究从20世纪30年代开始至今已有近80年的历史。
研究证实，木霉(Trichoderma )真菌能有效拮抗镰刀菌、白绢病菌、丝核菌、疫霉菌、立枯丝核菌、灰霉菌、灰葡萄孢菌和小麦颖枯病菌等多种植物病害真菌，以此达到预防植物病害之目的。田间施用木霉真菌，无化学农药残留之虞，特别适用于无公害农业领域。
自木霉(Trichoderma)真菌的拮抗机制得到广泛认同后，国内外专家、学者致力于木霉真菌实际应用于农业生产的工作不遗余力，但至今没能在农业上得到广泛的应用。究其原因有五个方面
1、 制剂的形态，现大多产品是孢子粉制剂，在施用方法上主要是拌土撒施、直接拌入耕作层、种植穴和喷施。拌土撒施、直接拌入耕作层、种植穴的施用方法受到土壤中的抑菌因子的影响、喷施受气候与环境的影响，木霉孢子萌发、菌丝生长和定殖都不理想。而由于真菌的孢子成活期较短，在商品制剂的运输和储存中有部分失活，在活孢子量降低的情况下，上述施用方法影响施用后的孢子萌发，菌丝生长和定殖；
2、 概念不明确，目前业界多把木霉真菌说成是防治植物病害的一种生物，其实木霉真菌只能是预防植物病害，真菌木霉不能治愈已发病的植物；
3、 施用方法繁复，农业实际应用有困难；
4、 成本偏高；
5、 效果不明显。
发明内容
本发明要解决的技术问题和提出的技术任务是克服现有技术存在的施用方法繁复、成本偏高、效果不明显等缺点，提供一种木霉田间扩繁剂。为 此，本发明采用以下技术方案
木霉田间扩繁剂，其特征是由木霉真菌孢子剂和营养基均匀混合组成， 所述的木霉真菌孢子剂为对木霉真菌培养所得的含有大量木霉真菌孢子和 少量活菌丝体的固体或液体或者固体与液体的混合物。所述的营养基为能为 木霉真菌快速生长、产孢提供碳、氮及矿物质和微量元素的营养物质。
本发明的有益效果是
本发明产品施用在湿润的田间土壤表面，木霉真菌孢子快速萌发，营养 基为木霉真菌生长供给充足的营养物质，木霉真菌在湿润的土壤表面快速大 量生长、繁殖，起到预防作物根部、茎基部真菌病害的作用；木霉真菌在湿 润的土壤表面生长、繁殖过程中产生大量分生孢子并在田间扩散，这些鲜活 的木霉孢子扩散到没有撒到本产品的土壤部位再萌发生长，达到全面预防作 物根部、茎基部真菌病害的作用。
进一步的，在湿润的土壤表面撒施本发明产品能预防作物茎、叶、花、 果部位的真菌病害。这是本发明产品的一大特点。
木霉真菌在湿润的土壤表面生长、繁殖首先抑制土壤表面可能危害作物 茎、叶、花、果的病害真菌孢子的萌发和菌丝的生长，减少病害真菌的侵染 力度。木霉真菌在土壤表面生长、繁殖过程中产生大量孢子并在田间释放、 飞散，部分孢子会着落于作物茎、叶、花、果可能被病害真菌侵害的部位萌 发、生长，起到保护作用；木霉真菌在湿润的土壤表面生长、繁殖过程中会 释放出大量挥发性抗生素，可抑制土壤表面和作物茎、叶、花、果部位病害 真菌孢子的萌发和菌丝的生长，达到防病的效果。
木霉田间扩繁剂施用后对作物还有一定的增产效果。
具体实施例方式
以下具体说明本发明的木霉田间扩繁剂。
木霉田间扩繁剂，是由木霉真菌孢子剂和营养基均匀混合组成，木霉真 菌孢子剂为对木霉真菌培养所得的含有大量木霉真菌孢子和少量活菌丝体 的固体或液体或者固体与液体的混合物。营养基为能为木霉真菌快速生长、 产孢提供碳、氮及矿物质和微量元素的营养物质。营养基与木霉真菌孢子剂混合前在120 ± 5"C条件下灭菌30 ± 5分钟。
本发明所用木霉真菌(Trichoderma)属于半知菌类的木霉属。其为木霉属真菌(如哈茨木霉、绿色木霉、长枝木霉、康氏木霉、钩状木霉、黄绿木霉和桔绿木霉等)中的一种或两种的组合或者数种的组合。
所述的木霉真菌孢子为分生孢子或者厚垣孢子或者分生孢子与厚垣孢子的组合。其是以下述材料作为培养基对木霉真菌培养所得
A、 粮食(如稻、泰、稷、麦、菽、玉米等)种子或/和其副产品；或者
B、 植物的枝、叶、根、花或果，或者其混合物；或者
C、 动物的皮、毛或肉，或者其混合物；或者A、 B、 C三种中的两种的组合或者数种的组合。根据需要，可以在培养基中添加矿物质。
木霉真菌的培养、扩繁、加工方法可以是常规的固体培养、液体培养或其他培养方法，也可以是对前述常规的固体培养、液体培养方法进行改进的培养方法。
所述的营养基为
A、 粮食(如稻、黍、稷、麦、菽、玉米等)种子或/和其副产品；或者
B、 植物的枝、叶、根、花或果，或者其混合物；或者
C、 动物的皮、毛或肉，或者其混合物；或者A、 B、 C三种中的两种的组合或者数种的组合。根据需要，可以在营养基中添加矿物质。木霉真菌孢子剂和营养基的配比为
A、 当经培养所得的固体木霉真菌孢子剂经干燥粉碎成为孢子粉时，孢子粉的重量百分比为25%~75%，其余为经干燥粉碎的营养基；
B、 当经培养所得的液体木霉真菌孢子剂为孢子液时，孢子液的重量百分比为30%~70%，其余为经干燥粉碎的营养基；
C、 当孢子粉与孢子液混合成木霉真菌孢子剂时，孢子粉与孢子液的重量百分比为25%~75°/。，其余为经干燥粉碎的营养基。
孢子液与营养基配比前可滤去水分也可不滤去水分。经干燥粉碎的营养基的粒度为5ram以下。
6本发明木霉田间扩繁剂的应用
对大田、大棚、温室、盆栽等栽培植物的土壤先行灌水、喷水或洒水， 令土壤湿润，然后向湿润的土壤表面施放木霉田间扩繁剂；
种子或种苗播种前，把木霉田间扩繁剂均匀撒施在湿润的土壤表面； 种子播种后亦与上同，把木霉田间扩繁剂均匀撒施在湿润的土壤表面； 种苗播种后或是作物生长阶段，木霉田间扩繁剂均匀撒施在苗间湿润的 土壤表面，不要撒在叶面，也不要直接撒在根基处。
木霉田间扩繁剂撒在叶面会影响其扩繁效果，大量撒在根基处会灼伤作物。
撒施木霉田间扩繁剂宜在下午进行。
木霉田间扩繁剂每公项用量22. 5千克~ 150千克。
木霉田间扩繁剂施用主要是预防植物病害，木霉真菌不能治愈已发病的 植物。如田间有病抹发现，说明病害真菌已对部分或大多的作物侵染，此时 应当用内吸性的化学农药杀菌，不应当施用木霉，否则不但贻误防治，也会 给使用者造成木霉真菌没有效果的错误概念。
木霉真菌预防植物病害的作用机制属生物间的拮抗作用，主要表现为杀 菌、溶菌、竟争和重寄生。施用木霉真菌还能诱导作物的抗性。
木霉田间扩繁剂的优点
其一、以前的木霉真菌施用方法是以孢子粉拌土数百倍撒施或是以数百 分之一的比例拌入耕作层、种植穴，这样的施用方法用工太大，实际应用有困难。
木霉田间扩繁剂只要向湿润的耕作层表面撒施即可，方法简单易行，容 易让使用者接受。
其二、以前的施用量过大，按耕作层、种植穴拌施法，固体木霉粉剂的 用量每亩在100千克以上，成本偏高。
木霉田间扩繁剂每亩只需用1.5千克~10. 0千克，成本减轻数十倍。 其三是效果方面，木霉真菌以孢子粉拌土撒施、直接拌入耕作层、种植 穴的施用方法受到土壤中的抑菌因子的影响、喷施受气候与环境的影响，木 霉孢子萌发、菌丝生长和定殖都不理想。而由于木霉真菌的孢子成活期较短，
7在商品制剂的运输和储存中有部分失活，在活孢子量降低的情况下，上述施
用方法影响施用后的孢子萌发，菌丝生长和定殖；
木霉田间扩繁剂的优点是自带营养基。自带营养基的优点有二个方面。其一是，供给木霉真菌以丰富的营养使其菌丝快速、大量生长，定殖于土壤中，并产生大量分生孢子，使供给田间的孢子量可扩大数十倍到数百倍。其二是，当木霉田间扩繁剂在运输和储存中有部分孢子失活的情况下，只要有少部分孢子萌发就可依靠自带的营养基快速、大量生长、产孢。当木霉田间扩繁剂撒在潮湿的土壤上，木霉田间扩繁剂很快吸潮，在适宜的温度下，6小时内孢子萌发、菌丝生长，12小时就可生长成白色棉絮状菌落，24小时棉絮状菌落发绿产孢。木霉田间扩繁剂撒施后一周内，每克可产分生孢子10亿个以上。这些鲜活的孢子随作物间流动的空气，扩散到土壤表面的各个角落和作物茎、叶、花、果，在适宜的地方萌发、生长和定殖。
上述过程中，白色棉絮状菌落下部的木霉真菌菌丝因得到营养基的充分营养，会快速向土壤中生长，定殖于土壤。
木霉田间扩繁剂施放在湿润的土壤表面，能得到充分的氧气，并且不受
土壤中抑菌因子的影响，生长速度比在土壤中快数倍，这是本产品的又一大特点。
本产品预防作物根部、茎基部真菌病害的机制是，木霉田间扩繁剂施放在湿润的土壤表面后快速生长、繁殖并定殖于土壤中，抑制土壤中病害真菌孢子的萌发和病害真菌菌丝的生长，抑制病害真菌对作物的侵染，达到预防作物根部、茎基部真菌病害发生的目的。
本产品预防作物茎、叶、花、果真菌病害的机制是，木霉菌在湿润的土壤表面生长、繁殖首先抑制土壤表面可能危害作物茎、叶、花、果的病害真菌孢子的萌发和菌丝的生长，减少病害真菌的侵染力度。木霉菌在湿润的土壤表面生长、繁殖过程中产生大量孢子并在田间释放、飞散，部分孢子会着落于作物茎、叶、花、果可能被病害真菌侵害的部位起到保护作用；木霉菌在生长、繁殖过程中会释放出大量挥发性抗生素，可抑制土壤表面和作物茎、叶、花、果部位病害真菌孢子的萌发和菌丝的生长，达到防病的效果。
施用木霉田间扩繁剂预防作物根、基茎部真菌病害的效果可持续两个月以上；预防作物茎、叶、花、果部位真菌病害效果可持续25天以上。
本产品使用简单、成本低、防病效果明显，且无农药残留，特别适用于
无公害农业领域。
木霉田间扩繁剂防病实例 实例一、蔬菜、草莓灰霉病的预防
本实例使用的菌种是木霉属真菌哈茨木霉二抹菌林(自编号T25和 T96 )。
孢子粉培养基的配方麦麸600克、油菜籽饼380克、肉骨粉20克、 磷酸二氢钾l.O克、硝酸钾l.O克、四硼酸钠1.0克。营养基配方麦麸 600克、油菜籽饼380克、肉骨粉20克、磷酸二氬钾l.O克、硝酸钾1.0 克、四硼酸钠1. 0克，营养基的粒度为5mm以下。
孢子粉与营养基的重量配比为25: 75,在发病季节作物发病前第一次 施用量为每公项120千克，间隔1个月再施一次施用量为每公项45千克， 本实例共施二次，防病效果达91%。
实例二、棉花立枯病(又称棉花苗枯病)的预防 本实例使用的菌种是木霉属真菌哈茨木霉一林菌种(自编号T96)。 孢子粉培养基的配方麦麸500克、油菜籽饼380克、玉米粉100克、 肉骨粉20克、磷酸二氢钾1. 0克、硝酸钾1. 0克、四硼酸钠1. 0克。营养 基配方麦麸500克、油菜籽饼380克、大米粉100克、肉骨粉20克、磷 酸二氢钾1. 0克、硝酸钾1. 0克、四硼酸钠1. 0克，营养基的粒度为2. 5mm 以下。
孢子粉与营养基的重量配比为30: 70,在苗下种前每公项施45千克， 间隔2个月再施每公项30千克，本实例共施二次，防病效果达93%。 实例三、花生立枯病的预防
本实例使用的菌种是木霉属真菌哈茨木霉一抹菌种(自编号T96)和绿 色木霉一抹菌种(自编号T32)的混合菌种。
孢子粉培养基的配方麦麸500克、油菜籽饼400克、玉米秸秆粉IOO 克、磷酸二氢钾l.O克、硝酸钾l.O克、四硼酸钠1.0克。营养基配方 麦麸500克、油菜籽饼400克、玉米秸秆粉100克、磷酸二氬钾l.O克、硝酸钾1. 0克、四硼酸钠1. 0克，营养基的粒度为2. Omm以下。
孢子粉与营养基的重量配比为35: 65，在下种前施用，每公项施45千
克，间隔2个月再施每公项30千克，本实例共施二次，防病效果达95%。 实例四、甜椒及辣椒疫霉病的预防
本实例使用的菌种是木霉属真菌绿色木霉一抹菌种(自编号T32)。
孢子粉培养基的配方麦麸500克、油菜籽饼400克、杂树叶粉100克、 磷酸二氢钾l.O克、硝酸钾l.O克、四硼酸钠1.0克。营养基配方麦麸 500克、油菜籽饼400克、杂树叶粉100克、磷酸二氢钾1. 0克、硝酸钾1. 0 克、四硼酸钠1. 0克，营养基的粒度为2. Omm以下。
孢子粉与营养基的重量配比为40: 60,在下种后施用，每公项施45千 克，间隔2个月再施每公项30千克，本实例共施二次，防病效果达90%。
实例五、茉莉白绢病的预防
本实例使用的菌种是木霉属真菌哈茨木霉二抹菌种(自编号T25、 T96) 和绿色木霉一抹菌种(自编号T32)的混合菌种。
孢子粉培养基的配方麦麸580克、油菜籽饼400克、肉骨粉20克、 磷酸二氬钾l.O克、硝酸钾l.O克、四硼酸钠1.Q克。孢子液培养基的配 方马铃薯200克、蔗糖20克、磷酸二氢钾1.5克、硫酸镁0. 5克，加水 1000毫升。营养基配方麦麸580克、油菜籽饼400克、肉骨粉20克、磷 酸二氢钾1. 0克、硝酸钾1. Q克、四硼酸钠1. 0克，营养基的粒度为2. Omm 以下。
孢子粉、孢子液与营养基的重量配比为25: 20: 55，每公项用量45千 克，在发病季节作物发病前施用，间隔2个月施一次，本实例共施二次，防 病效果达94%。
实例六、兰花枯萎病(又称茎腐病)的预防
本实例使用的菌种是木霉属真菌哈茨木霉二抹菌种(自编号T25、 T96) 和绿色木霉一抹菌种(自编号T32)的混合菌种。
孢子粉培养基的配方麦麸500克、油菜籽饼430克、玉米粉50克、 肉骨粉20克、磷酸二氢钾1. 0克、硝酸钾1. 0克、四硼酸钠1. 0克。孢子 液培养基的配方马铃薯200克、蔗糖20克、磷酸二氬钾1.5克、硫酸镁
100. 5克，加水1000毫升。营养基配方麦麸500克、油菜籽饼430克、玉 米粉50克、肉骨4分20克、磷酸二氢钾l.O克、硝酸钾l.O克、四硼酸钠
1. 0克，营养基的粒度为3. Omm以下。
孢子粉、孢子液与营养基的重量配比为50: 20: 30，每公项用量60千 克，在发病季节作物发病前施用，间隔45天施一次，本实例共施四次，防 病效果达96%。
上述各个实例中，孢子粉、孢子液混合配方，可以达到更佳的防病效果； 而所述的木霉真菌孢子剂的重量百分比为40%-60%时防病效果更佳。 备注
扩繁，即扩大繁殖；田间扩繁，即在田间进行扩大繁殖。 以前木霉真菌的扩繁都是在工厂或是实验室中完成的，人们将扩繁后的
木霉真菌孢子制剂直接施放田间，以达到防治作物病害的目的，其施用方法
主要有二种
其一，是将木霉真菌孢子制剂拌土撒施或是直接拌入土壤、或是拌入种 植穴，令木霉真菌孢子在土壤中萌发、生长并定殖于土壤中。
其二，是将木霉真菌孢子制剂用喷粉或是兌水喷施，将木霉真菌孢子直 接喷在植物的茎、叶、花、果部位，令其在这些部位萌发、生长并定殖。
木霉田间扩繁剂则是以木霉真菌孢子和营养基组成，将扩繁剂施放在田 间，木霉真菌在田间再进行生长、繁殖，扩大孢子量。这些扩大繁殖出来的 孢子会扩散到没有撒到孢子的土壤中生长和定殖，达到全面防护之目的。扩 大繁殖出来的孢子会释放、飞散，部分孢子会着落于作物茎、叶、花、果可 能被病害真菌侵害的部位萌发、生长、定殖，起到保护作用。木霉真菌在田 间生长、繁殖过程中释放出大量挥发性抗生素，可抑制土壤表面和作物茎、 叶、花、果部位病害真菌孢子的萌发和菌丝的生长，达到防病的效果。
权利要求
1、木霉田间扩繁剂，其特征是由木霉真菌孢子剂和营养基均匀混合组成，所述的木霉真菌孢子剂为对木霉真菌培养所得的含有大量木霉真菌孢子和少量活菌丝体的固体或液体或者固体与液体的混合物。
2、 根据权利要求1所述的木霉田间扩繁剂，其特征是所述的木霉真菌 为木霉属真菌中的一种或两种的组合或者数种的组合。
3、 根据权利要求1所述的木霉田间扩繁剂，其特征是所述的木霉真菌 孢子为分生孢子或者厚垣孢子或者分生孢子与厚垣孢子的组合。
4、 根据权利要求1所述的木霉田间扩繁剂，其特征是所述的木霉真菌 孢子是以下述材料作为培养基对木霉真菌培养所得A、 粮食种子或/和其副产品；或者B、 植物的枝、叶、根、花或果，或者其混合物；或者C、 动物的皮、毛或肉，或者其混合物；或者 A、 B、 C三种中的两种的组合或者数种的组合。
5、 根据权利要求4所述的木霉田间扩繁剂，其特征是所述的培养基中 添力口矿物质。
6、 根据权利要求1所述的木霉田间扩繁剂，其特征所述的营养基为A、 粮食种子或/和其副产品；或者B、 植物的枝、叶、根、花或果，或者其混合物；或者C、 动物的皮、毛或肉，或者其混合物；或者 A、 B、 C三种中的两种的组合或者数种的组合。
7、 根据权利要求6所述的木霉田间扩繁剂，其特征所述的营养基中添 加矿物质。
8、 根据权利要求1所述的木霉田间扩繁剂，其特征是所述的木霉真菌 孢子剂和营养基的配比为A、 当经培养所得的固体木霉真菌孢子剂经干燥粉碎成为孢子粉时，孢 子粉的重量百分比为25°/。~75%,其余为经干燥粉碎的营养基；B、 当经培养所得的液体木霉真菌孢子剂为孢子液时，孢子液的重量百 分比为30%~70%，其余为经干燥粉碎的营养基；C、当孢子粉与孢子液混合成木霉真菌孢子剂时，孢子粉与孢子液的重 量百分比为25%~75%，其余为经干燥粉碎的营养基。
9、根据权利要求8所述的木霉田间扩繁剂，其特征是所述的孢子液与营养基混合前滤去水分。
全文摘要
本发明公开了一种木霉田间扩繁剂，属于微生物的应用。现有产品存在施用方法繁复、成本偏高、效果不明显等缺点。本发明是由木霉真菌孢子剂和营养基均匀混合组成，所述的木霉真菌孢子剂为对木霉真菌培养所得的含有大量木霉真菌孢子和少量活菌丝体的固体或液体或者固体与液体的混合物。将本发明的木霉田间扩繁剂施用在湿润的田间土壤表面，由营养基供给木霉真菌营养，使木霉真菌在土壤表面生长、扩繁，不但能预防植物根部和茎基部的真菌病害，同时能预防植物茎、叶、花、果部位的真菌病害。木霉田间扩繁剂施用后对作物还有一定的增产效果。
文档编号A01N63/04GK101485337SQ20091009587
公开日2009年7月22日 申请日期2009年2月16日 优先权日2009年2月16日
发明者何松庆 申请人:何松庆