一种蛹虫草栽培过程中真菌污染的处理方法
【专利摘要】本发明涉及一种蛹虫草栽培过程中真菌污染的处理方法，将栽培过程中出现真菌污染的培养基表面以吸附有杀真菌剂的河沙进行覆盖。本发明提供的处理方法操作简便，原材料来源广泛，成本低廉，能够方便、快速处理蛹虫草栽培过程中出现的真菌污染。处理之后得到的蛹虫草子实体产量高、质量好，因此，本发明提供的处理方法具有广阔的应用前景。
【专利说明】一种蛹虫草栽培过程中真菌污染的处理方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及蛹虫草的栽培领域，具体涉及一种蛹虫草栽培过程中真菌污染的处理方法。
【背景技术】
[0002]蛹虫草(Cordyceps militaris (L.Fr) Link),又名蚕虫草、北冬虫夏草，属子囊菌门(Ascomycota)、核菌纲(Pyrenomycetes)、球壳目(Sphaeriales)、麦角菌科(Clavicipitaceae)、虫草属(Cordyceps (F r.) Link)真菌。蛹虫草是虫草属真菌的模式种，在自然界多寄生在多寄生在多种鳞翅日昆虫的幼虫和蛹上。
[0003]近年来，很多研究都表明，人工栽培的蛹虫草化学成分及药理作用与冬虫夏草相似，但价格却远远低于冬虫夏草，因此，蛹虫草的开发应用具有极大的潜在市场。
[0004]目前的规模化蛹虫草生产中均采用了半人工合成培养基进行规模化栽培，主要的原因是原料(大米、小米、高粱、玉米、奶粉、黄豆等)的来源广泛且容易保存不受季节的限制。但由于在培养基辅料中添加了葡萄糖、奶粉、豆浆等物质所以在培养过程中很容易造成真菌污染。真菌污染不但影响产量，而其会造成产品杂菌超标，从而导致卫生学指标不合格，而且污染容器的处理费时费力。
【发明内容】
[0005]为克服现有蛹虫草栽培过程中易出现真菌污染、从而影响子实体生长的技术缺陷，本发明的目的是提供一种蛹虫草栽培过程中真菌污染的处理方法。
[0006]本发明提供的处理方法为:将栽培过程中出现真菌污染的培养基表面以吸附有杀真菌剂的河沙进行覆盖。
[0007]所述河沙覆盖的厚度可根据真菌污染情况、选取的杀真菌剂种类、浓度等来确定，以能杀灭真菌污染、防止其扩散为准，优选地，河沙覆盖的厚度为I~20mm，更优选5~IOmm0
[0008]所述处理过程在蛹虫草的暗培养阶段结束后开始并贯穿整个光培养阶段。
[0009]所述杀真菌剂选自酒精、碘酒、硫酸、盐酸、高锰酸钾溶液、双氧水中的一种或多种。
[0010]本发明采用的杀真菌剂主要分为两大类:强氧化剂(硫酸、盐酸、高锰酸钾、双氧水等)和蛋白变性剂(酒精、碘酒等)。选取此杀真菌剂的主要原因是成本低廉、无残留，且不会对未污染部分的蛹虫草子实体造成食用安全危害。
[0011]优选地，所述碘酒为常规市售碘酒；所述酒精的质量百分比浓度为70~90%，最优选质量百分比浓度为75%的医用酒精；所述硫酸、盐酸的质量百分比浓度为2~10% ;所述高锰酸钾溶液为质量百分比浓度为0.05~0.5%的水溶液；所述双氧水的质量百分比浓度为I~10% ο
[0012]所述吸附有杀真菌剂的河沙的制备过程如下:选取60~80目的河沙，灭菌后将其浸入所述杀真菌剂中，备用。
[0013]优选地，所述吸附有杀真菌剂的河沙的制备过程如下:选取60~80目的河沙，采用质量百分比浓度为10~20%的稀盐酸浸泡20~30小时，清水洗至中性，然后在120~200°C下干法灭菌90~120min，灭菌后将其浸入所述杀真菌剂中，备用。
[0014]以上技术方案中的处理方法还包括在所述河沙上加盖器皿。由于以上采用的杀真菌剂多为易挥发的物质如酒精、碘酒、双氧水等，为保证杀真菌剂在真菌污染物表面发挥作用，因此采用器皿将河沙进行覆盖，防止挥发。
[0015]优选地，用于覆盖河沙的所述器皿为盖状结构的器皿，扣于所述河沙之上并压紧。
[0016]所述盖状器皿更优选采用耐酸碱、耐腐蚀的塑料瓶盖，如各种饮料瓶、矿泉水瓶或者试剂瓶盖，采用盖状器皿覆盖在河沙上并压紧的目的是为了防止杀真菌剂挥发，同时，还可以将真菌污染物进行隔离，控制在盖状器皿之中，防止真菌污染的扩散。
[0017]所述盖状器皿的高度为I~5cm ;优选I~3cm。
[0018]上述器皿在使用之前浸泡于酒精中备用，以杀灭细菌。优选浸泡于质量百分比为75%的医用酒精中备用。
[0019]本发明提供的处理方法操作简便，原材料来源广泛，成本低廉，能够方便、快速地处理蛹虫草栽培过程中出现的真菌污染。处理之后得到的蛹虫草子实体产量高、质量好，因此，本发明提供的处理方法具有广阔的应用前景。
【具体实施方式】
[0020]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0021]实施例1蛹虫草的栽培
[0022]一、时间:2012 年 4 月:
[0023]二、材料:
[0024](I)菌种:采用菌株编号为HX-64的蛹虫草菌株(购自北京市农林科学院生物中心)。
[0025](2 )菌种固体培养基:PDA斜面。
[0026](3)液体摇瓶用培养基:去皮土豆250克(煮汁)、葡萄糖8克、蛋白胨2.5克、磷酸二氢钾0.6克、硫酸镁1.2克、水1000毫升，pH自然。
[0027](4)子实体生产营养液:黄豆2.2%、葡萄糖1.5%、奶粉4.5%、磷酸二氢钾0.8%、硫酸镁0.06%、维生素BI 15mg/1000ml的比例配成营养液，调整pH在5.6~7.2。
[0028](5)常规栽培培养容器:高12cm，直径8cm，装大米30克，营养液45ml。
[0029]三、吸附杀真菌剂河沙、盖状器皿的制备
[0030](I)将河沙用60目过筛，弃去大颗粒及杂质，再用80目过筛，去掉细沙。用吸铁石吸去铁质，放入容器中用质量百分比浓度为10%的稀盐酸浸泡，24小时后倒去盐酸，用水洗泡数次直至表面为中性，将河沙置于金属容器中于160°C下干热灭菌120min左右，然后装Λ 500ml的容量瓶中，装量为整个容量瓶的2/3左右。
[0031](2)选用质量百分比浓度为75%的医用酒精作为杀真菌剂，然后将杀真菌剂装入上述容量瓶中，使灭菌河沙完全浸没在杀真菌剂中，备用。
[0032](3)盖状器皿选用高度约为1.0cm、直径约为1.5cm的矿泉水瓶塑料盖，使用之前将其清洗干净、烘干，浸泡到质量百分比浓度为75%的医用酒精中备用。
[0033]四、栽培过程:
[0034]( I)培养基的灭菌:
[0035]121°C、20分钟常规灭菌。
[0036](2)接种工艺:
[0037]将接种头做成莲蓬状进行喷淋式接种。
[0038](3)暗培养阶段:
[0039]将接种后的培养容器直接放入暗培养室进行培养即可，保持温度18_22°C进行避光培养，6天后菌丝覆盖整个培养基表面后，暗培养结束。
[0040](4)污染培养容器的处理:
[0041]将暗培养结束后发现有真菌污染的培养容器全部挑选出，随机分成两组。一组不进行任何处理，继续进行光培养；另一组采用本发明所述的方法进行处理，过程如下:将待处理的培养容器集中，在超净工作台内，打开培养容器，用塑料勺从装有河沙的容量瓶中捞取浸满杀真菌剂的无菌河沙，轻轻的覆盖到真菌污染物的表面，形成约5mm的均匀一层，此时不能有游离的杀真菌剂存在，并要防止液体杀真菌剂滴落到未污染的部分，然后把浸泡在酒精中的塑料盖取出，扣在河沙之上，压紧，防止杀真菌剂的挥发，同时也将被真菌污染的部分控制于塑料盖的覆盖下，防止污染物在平面方向的扩散。上述操作完毕之后，处理下一个污染点，直至培养基表面上凡是有真菌污染的部分，全部用河沙和器皿覆盖进行处理，处理完毕的组进行光培养。
[0042](5)光照培养:
[0043]培养室温度应为(20~23) °C。
[0044](6)采收:
[0045]当子实体高度为5-8cm时及时采收。
[0046]实施例2
[0047]采用质量百分比浓度为5%的稀盐酸溶液作为杀真菌剂，其余同
[0048]实施例1。
[0049]实施例3
[0050]采用质量百分比浓度为3%的稀硫酸溶液作为杀真菌剂，其余同实施例1。
[0051]实施例4
[0052]采用质量百分比浓度为0.1%的高锰酸钾水溶液作为杀真菌剂，其余同实施例1。
[0053]实施例5
[0054]采用质量百分比浓度为3%的双氧水作为杀真菌剂，其余同实施例1。
[0055]实施例1-5中未做任何处理的组中，真菌污染在暗培养结束后的基础上继续蔓延，蔓延的部分无子实体形成，且瓶内子实体的正常生长收到很大影响，造成严重减产，采收时污染真菌形成的孢子对蛹虫草子实体产生了严重的污染。
[0056]按照本发明所述处理方法处理后的组中，真菌污染在暗培养结束后的得到了严格控制，没有蔓延到其它部分，且对子实体的正常生长没有影响，子实体生长正常，采收时污染真菌形成的孢子也没有对蛹虫草子实体产生污染。
[0057]综上所述，采用了本发明所述方法处理后收获的蛹虫草子实体，产率明显高于未经污染处理得到的子实体，而且质量也明显优于未经污染处理得到的子实体，符合蛹虫草的各项指标要求。
[0058] 虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
【权利要求】
1.一种蛹虫草栽培过程中真菌污染的处理方法，其特征在于，将栽培过程中出现真菌污染的培养基表面以吸附有杀真菌剂的河沙进行覆盖。
2.根据权利要求1所述的处理方法，其特征在于，所述处理在蛹虫草的暗培养阶段结束后开始并贯穿整个光培养阶段。
3.根据权利要求1或2所述的处理方法，其特征在于，所述杀真菌剂选自酒精、碘酒、硫酸、盐酸、高锰酸钾溶液、双氧水中的一种或多种。
4.根据权利要求3所述的处理方法，其特征在于，所述酒精的质量百分比浓度为70~90% ;所述硫酸、盐酸的质量百分比浓度为2~10% ;所述高锰酸钾溶液为质量百分比浓度0.05~0.5%的水溶液；所述双氧水的质量百分比浓度为I~10%。
5.根据权利要求3或4所述的处理方法，其特征在于，所述吸附有杀真菌剂的河沙的制备过程如下:选取60~80目的河沙，灭菌后将其浸入所述杀真菌剂中，备用。
6.根据权利要求5所述的处理方法，其特征在于，所述吸附有杀真菌剂的河沙的制备过程如下:选取60~80目的河沙，采用质量百分比浓度为10~20%的稀盐酸浸泡20~30小时，清水洗至中性，然后在120~200 V下干法灭菌90~120min，灭菌后将其浸入所述杀真菌剂中，备用。
7.根据权利要求1-6任一项所述的处理方法，其特征在于，所述处理方法还包括在所述河沙上加盖器皿。
8.根据权利要求7所述的处理方法，其特征在于，所述器皿为为盖状器皿，扣于所述河沙之上并压紧。
9.根据权利要求8所述的处理方法，其特征在于，所述盖状器皿的高度为I~5cm。
10.根据权利要求7-9任一项所述的处理方法，其特征在于，所述器皿在使用之前浸泡于酒精中备用。
【文档编号】A01G1/04GK103563647SQ201210279740
【公开日】2014年2月12日 申请日期:2012年8月7日 优先权日:2012年8月7日
【发明者】胡健 申请人:北京中怡远大机电设备有限公司