无抗生物发酵饲料及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：一、制备混合种液的步骤：将发酵乳酸短杆菌的种子培养液与产朊假丝酵母的种子培养液混合后接种于混合种子培养基中，培养得到混合种液；二、制备混合发酵培养基的步骤：将饲料原料灭菌后待用；三、分段发酵步骤：先好氧发酵再厌氧发酵。本发明的有益之处在于：采用发酵乳酸短杆菌与产朊假丝酵母两种微生物混合发酵处理原料，不仅增加了饲料中总的蛋白和氨基酸含量，同时分解了纤维素等非淀粉类物质，大大提高了无抗生物发酵饲料的生物效价；多菌种混合发酵，实现了以菌治菌、以菌治病、促进畜禽生长和抗病的目标，有效解决了饲料中抗生素残留和病原菌株耐药性问题。
【专利说明】无抗生物发酵饲料及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种饲料及其制备方法，具体涉及一种采用乳酸菌和酵母菌混合发酵处理多种蛋白性原料混合物的方法，以及由该方法直接获得的无抗生物发酵饲料。
【背景技术】
[0002]传统饲料的生产，采用麸皮、玉米、小麦、豆柏、棉柏、菜柏等作为原料，由于原料本身不能提供抗生素，为了提高畜禽防病、抗病的能力，往往需要往饲料中添加抗生素；众所同知，抗生素对动物还有促进生长的作用，所以，抗生素在传统饲料的生产中得到了广泛的应用。
[0003]抗生素在饲料中的应用，因其存在残留和病原菌株的耐药性问题，将会给人类健康带来巨大的灾难。因此，无抗生物发酵饲料在国内外的研究一直不断。
[0004]据报道，目前国内主要用于生产菌体蛋白的微生物有曲霉菌、根霉菌、假丝酵母菌、乳酸杆菌、乳酸链球菌、枯草杆菌、赖氨酸产生菌、拟内孢霉、白地霉等。目前选育出的菌种有:
[0005](I)酵母菌:酵母耐酸能力强，个体大，易回收，常用的酵母菌有热带假丝酵母菌、产朊假丝酵母菌、皮状丝孢酵母菌、树状酵母。
[0006](2)放线菌:放线菌具有很强的分解纤维素的能力，可直接利用纤维原料生产单细胞蛋白，常用的放线菌有诺卡氏菌、高温放线菌。
[0007](3)霉菌:霉菌可产生高活性的纤维素酶，降解饲料原料中的纤维素，常用的霉菌有白地霉、黑曲霉、康宁木霉、绿色木霉。
[0008](4)担子真菌等。主要用于生产食用真菌等。
【发明内容】
[0009]为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种无抗生素添加，但具有以菌治菌、以菌治病、促进畜禽生长和抗病作用的无抗生物发酵饲料，以及该无抗生物发酵饲料的制备方法。
[0010]为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案:
[0011]一种无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:
[0012]一、制备混合种液的步骤:
[0013](I)、将发酵乳酸短杆菌(Brevibacterium Iactofermentum-QF-1),保藏编号为CCTCC N0:M2013453，保藏日期为2013年9月28日，保藏单位:中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址:中国.武汉.武汉大学，置于乳酸菌液体培养基中，在37°C条件下进行三级种子培养，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得发酵乳酸短杆菌的三级种子培养液；
[0014](2)、将产朊假丝酵母(Candida utilis QF-2)，保藏编号为 CCTCC N0:M2013454,保藏日期为2013年9月28日，保藏单位:中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址:中国.武汉.武汉大学，置于麦芽汁液体培养基中，在28°C条件下进行三级种子培养，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得产朊假丝酵母的三级种子培养液；
[0015](3)、将发酵乳酸短杆菌的三级种子培养液与产朊假丝酵母的三级种子培养液按照体积比1:0.01~I的比例混合，得混合种子培养液；
[0016](4)、将混合种子培养液按照体积比1:10的比例接种于混合种子培养基中，在28~30°C条件下进行培养，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得到混合种液；
[0017]二、制备混合发酵培养基的步骤:
[0018](I)、将饲料原料烘干或压榨至含水量为25~35%，得到混合发酵培养基；
[0019]前述饲料原料包括:麸皮、玉米、小麦、米糠、豆柏、棉柏、菜柏、豆腐渣等，既可以对单一原料进行发酵，也可以对若干原料的混合物进行发酵，根据具体情况而定；
[0020](2 )、向混合发酵培养基中添加CaCO3 ；
[0021](3)、加水调节混合发酵培养基的湿度至50~60% ；
[0022](4)、自然pH值，灭菌后待用；
[0023]三、分段发酵步骤:
[0024](I)、将混合种液按照体积比1:10的比例接种于混合发酵培养基中；
[0025](2)、先在30~32°C条件下好氧发酵12h，然后在35~37°C条件下厌氧发酵48~72h，当混合物pH下降至3.5~4.0的稳定状态，且菌体数目达到IO7~108CFU/g时，停止发酵；
[0026](3)、发酵物在40~62°C条件下烘干，包装得到成品。
[0027]前述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，前述乳酸菌液体培养基的配制如下:
[0028]
【权利要求】
1.无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: 一、制备混合种液的步骤: (1)、将发酵乳酸短杆菌，保藏编号为CCTCCNO:M 2013453，置于乳酸菌液体培养基中，在37°C条件下进行三级种子培养，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得发酵乳酸短杆菌的三级种子培养液； (2)、将产朊假丝酵母，保藏编号为CCTCCNO:M 2013454，置于麦芽汁液体培养基中，在28°C条件下进行三级种子培养，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得产朊假丝酵母的三级种子培养液； (3)、将发酵乳酸短杆菌的三级种子培养液与产朊假丝酵母的三级种子培养液按照体积比1:0.01~I的比例混合，得混合种子培养液； (4)、将混合种子培养液按照体积比1:10的比例接种于混合种子培养基中，在28~30°C条件下进行培养，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得到混合种液； 二、制备混合发酵培养基的步骤: (1)、将饲料原料烘干或压榨至含水量为25-35%，得到混合发酵培养基； (2)、向混合发酵培养基中添加CaCO3； (3)、加水调节混合发酵培养基的湿度至50~60%； (4)、自然pH值，灭菌后待用；` 三、分段发酵步骤: (1)、将混合种液按照体积比1:10的比例接种于混合发酵培养基中； (2)、先在30~32°C条件下好氧发酵12h，然后在35~37°C条件下厌氧发酵48~72h，当混合物pH下降至3.5~4.0的稳定状态,且菌体数目达到IO7~108CFU/g时,停止发酵； (3)、发酵物在40~62°C条件下烘干，包装得到成品。
2.根据权利要求1所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述乳酸菌液体培养基的配制如下:
3.根据权利要求1所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述麦芽汁液体培养基的配制如下: 将未加酒花的发酵啤酒的原料，稀释至12白利度，于666.4KPa压力下灭菌30min。
4.根据权利要求1所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述混合种子培养基的配制如下: 玉米淀粉5g 尿素IgCaHPO4 0.5g 蒸懼水稀释至IOOmL 自然pH值 666.4KPa压力下灭菌30min。
5.根据权利要求1所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述三级种子培养的步骤为: (I )、将发酵乳酸短杆菌/产朊假丝酵母接种于5mL乳酸菌液体培养基/麦芽汁液体培养基中，培养16h,得一级种子培养液； (2)、将5mL—级种子培养液接种于IOOmL乳酸菌液体培养基/麦芽汁液体培养基中，培养16h，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得二级种子培养液； (3)、将IOOmL二级种子培养液接种于IOL乳酸菌液体培养基/麦芽汁液体培养基中，培养16h，培养至细胞浓度>109CFU/mL，得发酵乳酸短杆菌/产朊假丝酵母的三级种子培养液。
6.根据权利要求1所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述发酵乳酸短杆菌的三级种子培养液与产朊假丝酵母的三级种子培养液按照体积比1:0.1的比例混合 O
7.根据权利要求1所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述混合发酵培养基中还添加有CaHPO4、饲用矿物添加剂和饲用维生素中的任意一种，或任意两种的混合物，或三种同时添加。
8.根据权利要求7所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述饲用矿物添加剂的原料组成及重量配比如下:
9.根据权利要求1所述的无抗生物发酵饲料的制备方法，其特征在于，所述混合发酵培养基的灭菌方法为:105°C蒸汽间歇式灭菌2~3次，每次lh，每次间歇3~4h。
10.一种无抗生物发酵饲料，其特征在于，由权利要求1至9任意一项所述的方法制备而来。
【文档编号】A23K1/00GK103719537SQ201310700069
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年12月18日 优先权日:2013年12月18日
【发明者】黎汉兵 申请人:四川宜宾全福饲料有限公司